No. 1- určete MW, vysvětlení izotopů

Transkript

1 No. 1- určete MW, vysvětlení izotopů ESI/APCI () 102 (35) 327 (33) 326 (15) 328 (5) ESI/APCI () 97 (51) 325 (32) 324 (13) 326 (6) šum bude v dalších spektrech pro jednoduchost zanedbán - izotopické píky nebudou většinou zakresleny

2 No. 2 - určete MW, popište ionty APCI () 425 (29) = 22 = (5) = 38 Úkol: jaké změny očekáváte po přídavku 5 mm octanu amonného do mobilní fáze APCI ()

3 No. 3 - určete MW, ionizační mód, popište ionty APCI () (56) (4) (2) (1) (26) (1) ESI () (20) (11) (22)

4 No. 4 APCI () 424 (96) 288 (5) 316 (4) 380 (2) 378 (2) 439 (5) 441 (5) APCI () 422 (98) 59 (51) 378 (22) 376 (22) 480 (5) 482 (5) APCI +, MS/MS () 380 (97) 422 (2) 424 (2)

5 No. 5 - určete MW ESI

6 No. 6 - určete MW a další strukturní informace APCI APCI

7 No. 7 - určete MW a popište ionty ESI ESI - 448

8 No. 8 ESI Interpretace spektra? O jaký typ látky jde?

9 No. 9 - určete MW, popište ionty APCI () 149 (32) 427 (29) 167 (4) 279 (1) 391 (2) 443 (5) APCI ()

10 1/ Určete polaritu záznamů. 2/ Určete MW a popište ionty. No. 10 [M+H] + -C 2 H 5 OH -CO [M-H] - -C 2 H 5 OH

11 Určete MW a popište ionty? Existuje alternativní řešení? No Tvorba radikál iontů

12 No určete M R a maximum informací APCI APCI Úkol: nakreslete izotopickou obálku včetně intenzit pro dimerní ion [2M+H]+

13 No určete M R a strukturní informace APCI APCI

14 No. 14 popište ionty a určete M R Intens. 5 x série iontů [M-xH]x- a [M-(x+y)H+yNa]x- maximální pozorovaný náboj x a/nebo maximální počet vyměnitelných protonů y = počet iontových skupin Intens. 5 x

15 No. 15 identifikujte degradační produkty Výchozí informace: barvivo C.I. Direct Red 7 bylo elektrolyticky degradováno za redukčních podmínek, vzniklé produkty byly analyzovány pomocí HPLC/MS Úkol: identifikujte produkty a navrhněte reakční mechanismus degradace ESI- () 355 NH 2 N N H 3 CO OCH 3 N N NH 2 Výchozí barvivo C.I. Direct Red 7 (C 34 H 28 O 8 N 6 S 2 ) SO 3 H (52) 711 (10) 733 SO 3 H ESI- Degradační produkt A () 237 APCI+ Degradační produkt B () 245 (12)

16 No. 15 identifikujte degradační produkty barvivo C.I. Acid Yellow 9 bylo elektrochemicky degradováno v NaCl kvůli čistění odpadních vod, HPLC/ESI-MS záporný mód, v základním skenu převládal ion, ze kterého bylo následně automaticky měřeno MS/MS spektrum HO MS/MS S N N NH 2 HPLC 292 Acid Yellow SO 3 H M R = A B C 12.9 MS/MS 172 Produkt A 108 MS/MS 173 Produkt B

17 No. 15 identifikujte degradační produkty barvivo C.I. Acid Yellow 9 bylo elektrochemicky degradováno v NaCl kvůli čistění odpadních vod, HPLC/ESI-MS záporný mód, v základním skenu převládal ion, ze kterého bylo následně automaticky měřeno MS/MS spektrum HO MS/MS S N N NH 2 HPLC 292 Acid Yellow SO 3 H M R = A B C 12.9 MS/MS 191 Produkt C

18 No. 16 identifikujte neznámou látku Výchozí informace: stopové stanovení polární látky v odpadních vodách se nezdařilo kvůli složité matrici a problémům s nízkou retencí této polární látky. Po derivatizaci s benzoylchloridem, extrakci do pentanu, následném odpaření do sucha, rozpuštěním v mobilní fázi a HPLC/ESI-MS analýze (C18 kolona, mobilní fáze 55 acetonitril - voda izokraticky) bylo dosaženo požadované citlivosti, selektivity i zlepšení retence. Úkoly: 1/ pokuste se zintepretovat pozorované ionty, určit M R a navrhnout strukturu neznámé látky, 2/ zdůvodněte vysokou intenzitu iontu 149 () 149 (4) 271 (21) 293 (1) 309 (16) Reference: Anal. Chem. 71 (1999) 2288

19 No. 17 identifikujte neznámou látku Výchozí informace: platí všechny informace z předchozího příkladu, kromě hlavní složky byly ve vzorku odpadní vody detegovány další látky, spektum jedné z nich je uvedeno zde Úkol: identifikujte na základě analogie () 177 (5) 299 (13) 321(1) 337 (9)

20 No identifikujte! APCI - 50ACN/W APCI - 50ACN/W + 5 mm NH 4 Cl

21 Typické zkouškové otázky - význam izotopů v hmotnostní spektrometrii, vysvětlit na příkladech - dusíkové pravidlo - vysvětlit principy ionizačních technik: EI, CI, ESI, APCI, APPI, MALDI -určení M R proteinů pomocí ESI - jaký je rozdíl mezi EI spektry a spektry měřenými měkkými ionizačními technikami, vysvětlit na modelovém příkladu - vysvětlit fyzikální principy hmotnostních analyzátorů: magnetický analyzátor s dvojí fokusací iontů, Q, iontová past (sférická vs. lineární), TOF (včetně použití reflektronu a QqTOF uspořádání) - co je to tandemová hmotnostní spektrometrie a MS n? k čemu se používá? - vysvětlete, jak byste správně provedli kvantitativní měření s pomocí HPLC/MS - jakými způsoby lze provést kalibraci v hmotnostní spektrometrii? u jakým typů analyzátorů je kalibrace zvlášť důležitá? - vysvětlit princip a praktické využití GC/MS a HPLC/MS - jak budete volit ionizační techniku podle typu analytu? na čem bude volba záviset? - základy interpretace hmotnostních spekter