ZPRÁVA O VÝVOJI NOVÝCH TECHNOLOGIÍ CHOVU RYB

Rozměr: px
Začít zobrazení ze stránky:

Download "ZPRÁVA O VÝVOJI NOVÝCH TECHNOLOGIÍ CHOVU RYB"

Transkript

1 ZPRÁVA O VÝVOJI NOVÝCH TECHNOLOGIÍ CHOVU RYB Název projektu: Vývoj technologie uchování testikulárního spermtu štiky oecné Registrční číslo projektu: CZ.1.25/3.1.00/

2 Příjemce dotce: Název neo ochodní jméno: Ryářství Nové Hrdy s.r.o. Adres: IČ: Registrční číslo projektu: Štiptoň, č.p. 78, Nové Hrdy CZ.1.25/3.1.00/ Název projektu: Vývoj technologie uchování testikulárního spermtu štiky oecné Jméno příjmení osoy, která je oprávněn příjemce dotce zstupovt: Luomír Zvonř, jedntel Vědecký ústv: Název neo ochodní jméno: Jihočeská univerzit v Českých Budějovicích, Fkult ryářství ochrny vod Adres: IČ: Zátiší 728/II, Vodňny Místo dtum zprcování zprávy: Vodňny, Jméno příjmení osoy, která je oprávněn vědecký ústv zstupovt: prof. RNDr. Lior Gruhoffer, CSc. Zprcovtel zprávy: Název neo ochodní jméno: Jihočeská univerzit v Českých Budějovicích, Fkult ryářství ochrny vod Adres: IČ: Zátiší 728/II, Vodňny Místo dtum zprcování zprávy: Vodňny Jmén příjmení oso, které zprcovly zprávu: prof. Ing. Otomr Linhrt, DrSc. Jméno příjmení osoy, která je oprávněn zprcovtele zprávy zstupovt: prof. RNDr. Lior Gruhoffer, CSc. 2

3 Souhls s pulikcí zprávy: Souhlsím se zveřejněním této zprávy projektu v rámci optření 3.1. Společné činnosti, záměr ) podpor spolupráce mezi vědeckými ústvy, odorným školstvím hospodářskými sujekty v odvětví ryářství z Operčního progrmu Ryářství n internetových stránkách Ministerstv zemědělství s využíváním výsledků této zprávy všemi sujekty z odvětví ryářství. Podpis osoy oprávněné zstupovt: 1. Příjemce dotce: Luomír Zvonř 2. Spoluprcující sujekt projektu (vědecký ústv): prof. RNDr. Lior Gruhoffer, CSc. 3. Zprcovtele zprávy: prof. RNDr. Lior Gruhoffer, CSc. 3

4 Osh 1. CÍL Co je cílem projektu V čem spočívá inovtivnost vyvíjené technologie Proč je nutná vyvíjená inovce ÚVOD MATERIÁL A METODIKA Mlíčáci, zákldní ukztele spermtu testikulárního spermtu Hodnocení motility spermií, rychlosti pohyu spermií fertility Experiment 1: Ověření dvou způsoů extrkce testikulárního spermtu z testes Experiment 2: Ověření vhodného testikulárního roztoku Experiment 3: Testování testikulárního roztoku v kominci s ktivčním roztokem Experiment 4: Ověření výtěžnosti testikulárního spermtu propočet stndrdizce osemenění z hledisk počtu spermií n jednu jikru Experiment 5: Testování oplozenosti s doplněním v poloprovozním pokusu Sttistické hodnocení VÝSLEDKY A DISKUSE Mlíčáci, zákldní ukztele spermtu testikulárního spermtu Závěr Experiment 1: Ověření dvou způsoů extrkce testikulárního spermtu z testes Závěr Experiment 2: Ověření vhodného testikulárního roztoku Závěr Experiment 3: Testování testikulárního roztoku v kominci s ktivčním roztokem Závěr Experiment 4: Ověření výtěžnosti testikulárního spermtu propočet stndrdizce osemenění z hledisk počtu spermií n jednu jikru Závěr Experiment 5: Testování oplozenosti s doplněním v poloprovozním pokusu Závěr ZÁVĚR

5 1. Cíl 1.1. Co je cílem projektu Cílem projektu je odstrnit šptnou kvlitu testikulárního spermtu štiky oecné zvést jeho ěžné užívání do ryích líhní v ČR. Smluvní cíle spočívly v příprvě použití testikulárního ktivčního roztoku pro testikulární sperm se zdůvodněním složení, zjištění vlivu roztoků n motilitu spermií jejich oplozovcí schopnost v závislosti n uchovtelnosti testikulárního spermtu. Posledním cílem ylo njít vhodný postup extrkce testes tk, y ylo získáno testikulární sperm co nejlepší kvlity V čem spočívá inovtivnost vyvíjené technologie Inovtivnost spočívá v ověření zvedení nového technologického postupu pro využití testikulárního spermtu při výtěru štiky se zlepšením jeho fertility s popisem techniky seprce testikulárního spermtu, jeho uchování ve speciálním testikulárním roztoku s následnou ktivcí v ktivčním roztoku. Proztím vyvíjená technologie neyl nikde pulikován tudíž ni dostupná Proč je nutná vyvíjená inovce Technologie je nutná pro zezpečení lepší produkce váčkového plůdku štiky oecné, která je důležitou součástí kvkulturního chovu v České repulice. Celá technologie využití testikulárního spermtu nízí nutný doplněk líhňřům při oecně šptné kvlitě vytírného spermtu související jk s jeho kontmincí močí, tk i s teplotními změnmi. Technologie njde upltnění n všech ryích líhních v ČR. 5

6 2. Úvod Štik se stává v Evropě význmným chovným druhem, který má vysoké ekonomické prktické využití n trhu konzumentů. Dorá znlost reprodukce s různými lterntivními postupy může ýt pro nše chovtele v doě změn klimtu zvýšení rizikovosti neúspěchu při reprodukci význmnou ekonomickou výhodnou oproti okolním zemím. Všechny důležité líhně v ČR štiku vytírjí, to jk pro potřey chovu v rynících, tk pro potřey exportu do okolních evropských zemí. Prolémem při smotném výtěru je nízká úroveň oplozenosti způsoená především nedosttkem spermtu, šptnou kvlitou spermtu kontminovného močí (Alvi kol., 2009; Linhrt kol., 2011; Hulák kol., 2008), či šptným způsoem použití testikulárního spermtu. Sperm štiky je vždy kontminováno močí, což má vliv n jeho kvlitu. Při výtěru ovykle získáváme mlý ojem spermtu nízké kvlity. Ryáři prolému s kvntitou spermtu kontmincí močí předcházejí použitím tzv. testikulárního spermtu, které získjí z vypreprovných testes zitých mlíčáků. Vypreprovné testes se zví krve přes uhelon či nylonovou punčochu vymčkjí přímo n vytřené jikry. Vymčkná suspenze z testes oshuje velmi vriilní ojem spermií n různé úrovni zrlosti s poškozeným ičíkem, to vlivem mechnického "psírování". Rodin kol. (2008) tuto skutečnost zjistili u testikulárního spermtu okoun říčního. Proto úroveň oplozenosti, či úroveň dosžení očních odů je u štik velmi vriilní, pohyující se od 10 do 80 %. Líhňři většinou dávjí tento fenomén do souvislosti s přezráváním jikernček, le my se domníváme, že vedle této skutečnosti je ve velké míře způsoen použitím nedosttečného kvnt spermií, nekvlitního spermtu spermtu o nízké zrlosti (Alvi kol., 2008). Zrlost znmená, že spermie jsou po morfologické či strukturní stránce zcel v pořádku mjí vysokou oplozovcí schopnost, což většinou souvisí s pohylivostí spermií. Rovněž jsme u jiného druhu, to jeseterů (Dzyu kol., 2014) s popisem v metodice (Dzyu kol., 2014) zjistili, že testikulární spermie se vůec ve vodě nepohyují pro jejich udoucí ktivci je nutná velmi krátkodoá přítomnost moči. Domnívli jsme se, že pro dozrání testikulárního spermtu jsou nutné hodiny, le n příkldu jeseter postčují minuty. Rozdíl mezi oěm druhy je orovský z pohledu zrání spermií. U jeseterů odoně si i u osttních chrupvčitých ry je testikulární sperm uchováváno přímo v těle smce společně s močí (moč ředí testikulární sperm) v řádech hodin či dnů má pozitivní vliv n zrlost spermtu. U štiky dochází pouze ke krátkodoé kontminci močí přímo při výtěru v místě močopohlvní ppily, to podoně jko u osttních kostntých ry. Moč v koncentrovné podoě má negtivní vliv n sperm štiky. N zákldě znlostí u jeseterů jsme se snžili u štiky: 1) Optimlizovt metodu získání funkčních testikulárních spermií s ičíky. 2) Njít vhodný testikulární roztok, který zezpečí co nejrychlejší dozrání spermií k co nejlepšímu použití. 3) Proprcovt celou technologii výtěru od získání spermií ž po optimální ktivci gmet. Proztím vyvíjená technologie neyl nikde pulikován tudíž ni dostupná. Seznm použité litertury v technologii: Alvi, S.M.H., Rodin, M., Viveiros, A.T.M., Cosson, J., Gel, D., Boryshpolets, S., Linhrt, O., Effects of osmollity on sperm morphology, motility nd flgellr wve prmeters in Northern pike (Esox lucius L.). Theriogenology 72:

7 Dzyu, B., Cosson, J., Boryshpolets, S., Bondrenko, O., Dzyu, V., Prokopchuk, G., Gzo, I., Rodin, M., Linhrt, O., In vitro sperm mturtion in sterlet, Acipenser ruthenus. Reproductive Biology 14: Dzyu, B., Boryshpolets, S., Cosson, J., Rodin, M., Pšeničk, M., Linhrt, O., Prášková, E., Dzyu, V., Fedorov, P., Použití testikulárního spermtu jeseterovitých ry. Edice Metodik, FROV JU, Vodňny, č. 151, 14 s. Hulk, M., Rodin, M., Alvi, S.M.H., Linhrt, O., Evlution of semen nd urine of pike (Esox lucius L.): Ionic compositions nd osmollity of the seminl plsm nd sperm volume, density nd motility. Cyium 32(2): Linhrt, O., Rodin, M., Boryshpolets, S., Hodnocení čerstvého spermtu ry. Edice Metodik, 2011, FROV JU, Vodňny, č. 114, 19 s. Rodin, M., Policr, T., Linhrt, O., Rouget, C., Sperm motility nd fertilizing ility of frozen-thwed spermtozo of mles (XY) nd neomles (XX) of perch (Perc fluvitilis). Journl of Applied Ichthyology 24:

8 v roce 3. Mteriál metodik Díky velkému úsilí oou zúčstněných prtnerů projektu zejmén díky změstnncům ryí líhně Ryářství Nové Hrdy, s.r.o. (orázek 1) jsme mohli uskutečnit poměrně rozsáhlou experimentální činnost, která se soustředil do jrní sezóny 2014 s vyhodnocováním v průěhu roku 2014 doplněním některých technologických detilů v jrní sezóně K experimentům jsme využili lortorní zázemí Lortoře fyziologie reprodukce Jihočeského výzkumného centr kvkultury iodiverzity hydrocenóz (CENAKVA) FROV JU. Orázek 1: Orgnizce experimentů (foto před ryí líhní Ryářství Nové Hrdy, s.r.o.) 3.1. Mlíčáci, zákldní ukztele spermtu testikulárního spermtu V průěhu oou výtěrových sezón od konce únor ž do konce dun jsme celkem od 28 dozrálých mlíčáků oderli sperm testikulární sperm (průměrná délk 512 cm, průměrná hmotnost 1281 g). Mlíčáci po odlovu z ryníků jk v Nových Hrdech, tk ve Vodňnech yli drženi odděleně od jikrnček v průtočných exteriérových zénech o ojemu 6 m 3 využíváni k experimentům po dou několik týdnů. Teploty vody v zénech se pohyovly od 7 do 15 C, osádk yl extenzivní ez krmných ry s minimem kyslíku n úrovni nd 7 mg.l -1 O2. Spermice neyl stimulován hormonálně. Oděr spermtu: Po pečlivém osušení mlíčák jsme odsávli sperm plstovou injekční stříkčkou o ojemu 5 ml přímo z povrchu urogenitální ppily při součsné lehké msáži 8

9 řišní krjiny mlíčák. Stříkčky po oznčení jsme uložili do oxu n led (0 2 C) snžili jsme se vyvrovt oděru spermtu s močí či fekáliemi. Vyjmutí testes: Mlíčák jsme usmrtili úderem do hlvy následným přetnutím žerních olouků, čímž jsme dosáhli částečného vykrvení. Ryu jsme znovu osušili, nůžkmi otevřeli tělní dutinu uvolnili vyjmuli testes, tk ychom je pokud možno nepoškodili (orázek 2). Orázek 2: Oděr testes u mlíčák štiky. Vlevo v provozních podmínkách vprvo v lortoři. Vypreprovné testes jsme osušili od krve uchovávli v chldu v Petriho misce či v misce (n ledu) podoně jko oderné sperm. Moč: U celkem 5 jedinců se nám podřilo odert i moč z močového měchýře k zjištění osmotické koncentrce v mosmol.kg -1. Hodnocení ojemu koncentrce spermií: Ojem vytřeného spermtu spolu s ojemem testikulárního spermtu koncentrcí spermií, včetně osmotické koncentrce jsme vyhodnotili podle metodiky Linhrt kol. (2011) s tím, že hodnoty u koncentrce spermií jsou uvedeny v 10 9 spermií osmotická koncentrce v mosmol.kg -1. Osmotická koncentrce u spermtu testikulárního spermtu yl měřen v plzmě po jejich odstředění Hodnocení motility spermií, rychlosti pohyu spermií fertility Motilit spermií yl odhdován v procentech podle metodiky Linhrt kol. (2011). Pro vyšší preciznost jsme v některých přípdech zznmenávli pohy spermií n DVD následně nlyzovli v počítči s vyhodnocením pohylivosti spermií v procentech (%) jejich rychlosti v µm.s -1. Pohy spermií jsme pozorovli mikroskopicky v otevřené kpce ez použití krycího skl. N čisté podložní sklo n stolku mikroskopu jsme kápli pomocí mikropipety 50 µl ktivčního medi s 0,1 % BSA k zmezení dheze spermií n podložní sklo. V rozprostřené kpce n podložním skle jsme ktivovli mlé množství spermtu. Preprční špičku jsme nmočili do spermtu/testikulárního spermtu lehkým ťuknutím jehlou přenesli do kpky vzorek spermtu. Jehlu jsme ihned otřeli optrně s ní zmíchli sperm v kpce n podložním sklíčku. Preprát jsme zsunuli pod ojektiv připrveného mikroskopu pozorovli, či přípdně nhrávli n video pohy spermií. Ovykle jsme kždý experiment opkovli 3x pro sttistické vyhodnocení. 9

10 Fertilit spermií Oplozovcí schopnost spermtu jsme ověřovli jednoduchým iologickým testem fertility do stádi 8 16 lstomer, to v Petriho miskách. Do mlých umělohmotných nádoek o ojemu 50 ml jsme dli 5 g jiker, přidli přesně určené množství spermií n úrovni 200 tisíc spermií n jednu jikru či sperm určeného ojemu mikropipetou s vnitřním pístem. Dále jsme směs jiker spermtu ktivovli 5 ml vody či ktivčním roztokem po dou 2 min. ručně míchli rotcí n stole. Následně jsme vše přenesli zhru po 100 jikrách do Petriho misek inkuovli při teplotách lízkých teplotám v líhni Experiment 1: Ověření dvou způsoů extrkce testikulárního spermtu z testes Po oděru spermtu u 6 mlíčáků do injekčních stříkček jsme mlíčáky usmrtili vyjmuli testes. Testes jsme osušili, odstrnili veškerou krev, zvážili rozdělili párový orgán n dv díly do dvou Petriho misek. V prvním přípdě jsme testes vložili do uhelonové síťky o velikosti ok 300 µm vymčkáním jsme získli testikulární sperm, které jsme oderli do zkumvky uložili n led. V druhém přípdě jsme testes v Petriho misce rozstříhli n droné kousky, překryli víčkem Petriho misky uložili n led do polystyrénové krice. Zhru po hodině došlo k utomtickému uvolnění dozrálého testikulárního spermtu ze svodných knálků testes do Petriho misky. Testikulární sperm jsme odsáli z Petriho misky ve zkumvce uložili n led. Evidentně velký ojem testikulárního spermtu vzhledem k dhesi zůstl n kouscích tkáně stěnách v Petriho misce. Následně jsme ověřili mikroskopicky, do jké míry máme v suspenzi testikulárního spermtu spermie s ičíkem ez ičíku. Testikulární sperm jsme nředili 1: zznmenli n DVD pro vyhodnocení. Rovněž tk jsme zznmenli procento pohylivých spermií rychlost pohylivých spermií vyhodnotili nlýzou orzu (viz část 3.2) Experiment 2: Ověření vhodného testikulárního roztoku Vyvíjený testikulární roztok nemá při inkuci testikulárního spermtu způsoovt pohy spermií (lespoň ne dlouhodoě), le v následné fázi po nředění má zlepšit pohylivost fertilitu testikulárních spermií. Víme tké, že spermie štiky jsou regulovány osmoticky (Alvi kol., 2009) není zde efekt regulce velmi nízkou úrovní drslíku jko v přípdě lososovitých jeseterovitých ry. K vývoji roztoků ylo využito roztoků NCl, KCl, MgCl, CCl2, dále cukrózy, glukózy jejich vzájemné komince. Optimální osmotické hodnoty yly dále testovány s pufrem tris- HCl o ph 7 8. K testovným roztokům yl dále přidán PBS (Phosphte uffered sline, fosfátový pufr), ěžně dostupný v peletách firmou Sigm o ph 7,4. Celkem jsme testovli okolo 120 různých komincí testikulárních roztoků. Jednotlivé testikulární roztoky jsme npipetovli v ojemu 990 µl roztoku do mikrozkumvky typu Eppendorf (eppendorfky), přidli 10 µl testikulárního spermtu (ředění 1:100) získného z rozstříhných testes od 5 mlíčáků, jemně protřepli uložili n led. Jko kontrol ylo použito zásoní testikulární sperm npipetovné v ojemu 200 µl do eppendorfky ktivovné vodou, viz část 3.2. Neředěné testikulární sperm po celou dou pokusu vykzovlo velmi dorou úroveň pohylivosti spermií, proto jsme celý první den mohli kontinuálně experimentovt. 10

11 Následně jsme ověřovli mikroskopicky pohylivost, to v několik úrovních: 1) Ověřili jsme, zd testikulární roztok nezpůsoil pohy spermií. N podložní sklo jsme dli 49,9 µl testovného roztoku přidli 0,1µl suspenze testikulárního spermtu s testikulárním roztokem, překryli krycím sklem ověřili, jk se spermie chovjí v roztoku. Pokud se spermie nepohyovly, či se pohyovly jen krátkodoě, ověřovli jsme dále uchovtelnost jejich pohyu. 2) Testovli jsme uchovtelnost pohyu spermií v ktivčním roztoku. N podložní sklo jsme dli 49,9 µl vody přidli 0,1 µl suspenze testikulárního spermtu s testikulárním roztokem odhdli pohylivost spermií ihned po ktivci. Uchovtelnost yl testován v čse 0, dále po 10 minutách, 1, 3, hodinách. V přípdě vysokého stupně pohylivosti jsme pro vyhodnocení opkovli test ovykle 3krát Experiment 3: Testování testikulárního roztoku v kominci s ktivčním roztokem Tdy jsme vycházeli z nšich zkušeností u jiných druhů ry, že nejvhodnějším roztokem pro vlstní ktivci ude vhodné použít 5 10x násoně ředěné roztoky pro testikulární sperm. Použili jsme roztoky: 1) 22 mm NCl+5 mm tris, ph 8; 2) 44 mm NCl+ 5mM tris, ph 8; 3) nemodifikovný PBS ředěný 10x 4) nemodifikovný PBS ředěný 5x (složení PBS: 137 mm NCl; 2,7 mm KCl; 10 mm N2HPO4; 1,8 mm KH2PO4); 5) jko kontrolu jsme použili vodu. Vše jsme testovli se dvěm testikulárními roztoky, to Modifikovný PBS s 257 mm NCl NCl 220 mm + 20 mm trisu, ph 8. Jko kontrolu jsme použili testikulární sperm ez ředění. Jednotlivé testikulární roztoky jsem npipetovli v ojemu 990 µl roztoku do eppendorfek, přidli 10 µl testikulárního spermtu (ředění 1:100) získného z rozstříhných testes od 3 mlíčáků, jemně protřepli uložili n led. Jko kontrol ylo použito zásoní testikulární sperm npipetovné v ojemu 200 µl do eppendorfky ktivovné vodou, viz část 3.2. Testování ktivity spermií jsme prováděli následovně: N podložní sklo jsme dli 49,9 µl ktivčního roztoku přidli 0,1 µl suspenze testikulárního spermtu s testikulárním roztokem odhdli pohylivost spermií ihned po ktivci. Procento pohylivosti ylo testováno v čse 0, dále po 1 5 minutách uchování spermtu. Testování jsme ovykle opkovli 3krát Experiment 4: Ověření výtěžnosti testikulárního spermtu propočet stndrdizce osemenění z hledisk počtu spermií n jednu jikru Po získání více či méně vhodného testikulárního roztoku jsme ověřili, zd výtěžnost testikulárního spermtu metodou rozstříhání testes n droné kousky přinese spoň přiližně podonou výtěžnost testikulárního spermtu jko v přípdě metody vymčkání/psírování přes uhelon. K experimentu jsme použili testes od 4 mlíčáků. Testes jko párový orgán jsme 11

12 rozdělili do dvou misek s tím, že v první Petriho misce jsme testes rozstříhli n droné kousky druhou Petriho misku jsme ponechli volně zkryli víčkem uložili n led 0 2 o C po dou 2 hodin. Po dvou hodinách jsme opláchli Petriho misku v 50 ml testikulárního roztoku, to tk, y se do misky dostlo všechno testikulární sperm, včetně tkání. V druhém přípdě jsme při psírování testes přes uhelon omývli uhelon v misce s testikulárním roztokem opět v ojemu 50 ml n závěr jsme v něm opláchli misku rovněž prsty experimentátor. V oou přípdech jsme se snžili dostt sperm do testikulárního roztoku. Následně jsme zjistili koncentrci spermtu při znlosti ojemu jsme vypočítli celkový počet získných spermií Experiment 5: Testování oplozenosti s doplněním v poloprovozním pokusu Celkově yl proprcován technik využití testikulárního spermtu z pohledu ktivity spermií, kterou jsme se snžili potvrdit z hledisk oplozenosti do stádi rýhování, to 8 16 uněk. K experimentu jsme využili směsi jiker od 3 jikernček s následující procedurou. Sperm jsme vytřeli od 3 mlíčáků, smísili uchovávli v ledničce (motilit odhdnut n úrovni 45 %), následně jsme seprovli testikulární sperm z testes, v misce rozstříhli (motilit odhdnut n úrovni %) smísili s testovným testikulárním roztokem vždy 1 minutu před osemeněním jiker. Šlo o testikulární roztok modifikovný PBS s 217, mm NCl. Směs jiker (5g), jsme dli do mlé polyetylenové nádoky přidli vždy odoné množství spermtu či testikulárního spermtu (200 tisíc spermií n jednu jikru), tk ychom testovli vliv roztoků, ne vliv počtu spermií n jednu jikru. N jikry jsme podle výpočtu pipetovli 12 µl vytřeného spermtu, 5 µl testikulárního spermtu 50 µl testikulárního spermtu s testikulárním roztokem (5 µl testikulárního spermtu s 45 µl testikulárního roztoku). Uvedené hodnoty počtu spermií n jednu jikru jsou či y měly ýt ovyklé pro prxi. Aktivční roztok, to 10x ředěný PBS neo vod z líhně yly opět použity v ojemu 5 ml. Následně jsme inkuovli jikry v Petriho miskách do rozrýhování 8 16 lstomer zjistili procentuální oplozenost. Poloprovozní pokus yl změřen n testování nvrženého postupu s tím, že v kždé vrintě jsme použili 2 kg jiker od několik jikernček, promíchli rozdělili n 4 díly po 500 g jiker, vyhodnotili oplozenost podle rozrýhování v 8 16 lstomer odhdovli oplozenost těsně před očními ody. Odoně jko v předchozí vrintě jsme použili zhru odoná kvnt spermií s limitovným počtem spermií (200 tisíc spermií n jednu jikru) k zvýrznění rozdílů ve výsledcích: 1) N 500 g jiker jsme použili 1 ml vytřeného spermtu s ktivcí vodou 0,5 l. 2) N 500 g jiker jsme použili 0,4 ml testikulárního spermtu s ktivcí vodou 0,5 l. 3) N 500 g jiker jsme použili 0,4 ml testikulárního spermtu s ktivcí 0,5 l modifikovným PBS 10x ředěným. 4) N 500 g jiker jsme přidli 3,6 ml testikulárního modifikovného PBS roztoku s 257 mm NCl 0,4 ml testikulárního spermtu. Testikulární roztok jsme nejprve smíchli s testikulárním spermtem zmíchli do jiker po uplynutí 1 minuty ihned přidli 0,5 l ktivčního roztoku (modifikovný PBS 10x ředěný). Z jednotlivých experimentálních vzorků yly odděleny jikry k inkuci v miskách s opkováním 3x. Osttní jikry yly odlepkovány metodou používnou n líhni Ryářství Nové Hrdy, s.r.o., nszeny do inkučních lhví. Po vylíhnutí yl plůdek dále nszen do 12

13 ryníků sloven ve stádiu rychleného plůdku z důvodu porovnání přežití ry z klsického experimentálního výtěru. Orázek 3: Výtěr jikernček štiky n líhni Ryářství Nové Hrdy, s.r.o Sttistické hodnocení Všechny fktory yly vždy měřeny třikrát, to procento pohylivých spermií, rychlost pohyu spermií, oplozovcí schopnost v doě rýhování či v očních odech. Před sttistickým srovnáním yl vždy prověřen test normlity podle Person homogenity (Bretletův test) dt yl přípdně log-trnsformován. Dt yl srovnán dvoufktoriální nlýzou vrince ANOVA se zjištěním rozdílů s prvděpodoností vyšší než 95 %. Všechny údje v tulkách grfech jsou oznčeny lfeticky s tím, že rozdílný lfetický údj vyjdřuje skutečnost, že hodnoty jsou odlišné se spolehlivostí vyšší než 95 %. 13

14 4. Výsledky diskuse Kždou část výsledků jsme popsli tk, jk jsme postupně vytvářeli ověřovli technologii. Část výsledků je vždy zkončen jednoduchým závěrem Mlíčáci, zákldní ukztele spermtu testikulárního spermtu Zákldní ukztele o mlíčácích, ojemu spermtu, hmotnosti testes, ojemu moči, koncentrci spermií spermtu testikulárního spermtu, osmotické koncentrci spermiální testikulární plzmy, včetně odhdovné motility spermtu jsou shrnuty v tulce č. 1. Je ptrné ve srovnání s údji pulikovnými Hulákem kol. (2008), že jsme použili o něco menší mlíčáky, kteří dosáhli ovyklého GSI testes. Všechny testes měly ělvé zrvení s viditelným spermtem, což svědčilo o optimální zrlosti. Ojem moči u několik jedinců yl velmi mlý, což se projevilo v poměrně nízké kontminci vytřeného spermtu. Docel čsto se doshuje minimálních hodnot osmotické koncentrce u vytřeného spermtu n úrovni 200 mosmol.kg - 1, jk uvádějí Hulák kol. (2008). My jsme ovšem nměřili nejnižší hodnotu n úrovni 232 mosmol.kg -1, což dokumentuje velmi nízké znečištění močí, která nopk ovykle vykázl o něco vyšší osmollitu n úrovni 77 mosmol.kg -1. N druhé strně testikulární sperm vykázlo stilní osmollitu s nejnižší úrovní osmollity lízké nejvyšší úrovni osmollity vytřeného spermtu. Hodnot ukzuje n skutečnost, že jsme při disekci testes nekontminovli vše měřili rychle po oděru. Koncentrce testikulárního spermtu yl o něco vyšší, než uvádějí Hulák kol. (2008) neo Alvi kol. (2009), což ylo způsoeno tím, že jsme usmrcovli pouze mlíčáky, kteří spoň částečně spermiovli. Pohylivost spermií u vytřeného spermtu yl nízká, le v relci s literárními údji. Nopk testikulární sperm vykázlo optimální pohylivost. V oou přípdech jsme k ktivci využívli vodu z líhně. Hodnoty jsme někdy nměřili pouze u několik jedinců, což ylo způsoeno změřením experimentů, technickým prolémy při jednotlivých experimentech, tké tím, že v přípdě získání mlého ojemu jsme neyli schopni dále vyhodnotit dlší ukztele. Tulk 1: Souhrnná tulk prmetrů mlíčáků použitých k experimentům Prmetr Počet (n) Průměr Směrodtná odchylk Celková délk (mm) Hmotnost (g) Hmotnost testes (g) GSI 28 2,1 0,6 Ojem spermtu (ml) ,5 Ojem moči (ml) 5 0,2 0,1 Osmollit moči (mosmol.kg -1 ) Osmollit spermtu (mosmol.kg -1 ) Osmollit testikulárního spermtu (mosmol.kg -1 ) Koncentrce spermtu (10 9.ml -1 ) Koncentrce testikulárního spermtu (10 9.ml -1 ) Pohylivost spermií spermtu (%) Pohylivost spermií testikulárního spermtu (%)

15 Závěr Zákldní ukztele o mlíčácích, ojemu spermtu, hmotnosti testes, ojemu moči, koncentrce spermií vytřeného spermtu testikulárního spermtu, osmotické koncentrci spermiální testikulární plzmy, včetně odhdovné motility spermtu nevyočují z průměru, které yly v minulosti pulikovány. Znmená to, že nše výsledky nemohly ýt zkresleny nějkým nevhodnou sezonní změnou, šptným výěrem mlíčáků či nevhodným přechováváním mlíčáků před experimentem Experiment 1: Ověření dvou způsoů extrkce testikulárního spermtu z testes Úroveň je vyjádřen grficky, kdy metod nstříhání zezpečil tkřk 80 % neporušenost spermií (orázek 4), oproti metodě, kdy se testes vymčklo/přepsírovlo přes uhelon (orázek 5 6), s 55 % spermií ez přítomností ičíku. N druhé strně ze záznmů ylo pouhým okem viditelné, že u metody přepsírování měly spermie ičík, le mnohdy výrzně krtší. Nepřítomnost či zkrácení ičíku se projevilo v průkzném snížení procent pohylivých spermií (orázek 7), to velmi výrzně z 62 % n 47 %, přičemž se zkrátil i do pohyu spermií, viz pohy spermií po 45 s (orázek 7), kdy u psírovcí metody již tkřk neyl zznmenán pohy spermií. Tto skutečnost se odrzil i v rychlosti pohyu spermií, to okmžitě po nstrtování pohyu, kdy jsou spermie nejrychlejší, viz orázek 8. Rychlost pohyu spermií vždy odráží pouze rychlost pohylivých spermií. Její snížení mohlo ýt ovlivněno zkrácením či porušením ičíku neo přítomností spermií s nedokončenou stvou ičíku. Rovněž je známo, že krtší ičík může zkrátit dou pohyu spermií. Jde o fenomén spotřey energie smodestrukce ičíku v hypotonickém prostředí. Od zčátku pohyu ustává pohy ičíku od konce ičíku k hlvičce, čili čím je ičík krtší, tím se může zkrcovt do pohyu. Orázek 4: Vlevo stříhání testes v Petriho misce. Vprvo testikulární sperm z rozstříhných testes po dvou hodinách uchování n ledu Závěr Metod rozstříhání testes s postupným uvolněním testikulárního spermtu poskytuje lepší, kvlitnější dozrálé testikulární sperm s neporušeným ičíkem, s vyšším procentem pohylivých spermií spermií s vyšší rychlostí. Nedosttkem je nižší výtěžnost získného spermtu. 15

16 Orázek 5: Vlevo umístění testes n uhelon. Vprvo mčkání/psírování testes přes uhelon s jímáním do eppendorfky. Rozstříhání testes Vymčkání testes přes uhelon Procento spermií s ičíkem Mlíčáci Orázek 6: Vliv rozstříhání či vymčkání testes n procento spermií s ičíkem (průměrná hodnot se směrodtnou odchylkou souoru). Rozdílný lfetický údj v grfu vyjdřuje skutečnost, že hodnoty jsou odlišné se spolehlivostí vyšší než 95 %. 16

17 Procento pohylivých spermií Rozstříhání testes Vymčkání testes přes uhelon Vytřené sperm 15 sec 30 sec 45 sec Čs po ktivci spermií (s) Orázek 7: Vliv rozstříhání či vymčkání testes ve srovnání s vytřeným spermtem n procento pohylivosti spermií (průměrná hodnot se směrodtnou odchylkou souoru). Rozdílný lfetický údj v grfu vyjdřuje skutečnost, že hodnoty jsou odlišné se spolehlivostí vyšší než 95 %. Rychlost pohyu spermi (µm/s) Rozstříhání testes Vymčkání testes přes uhelon Vytřené sperm 15sec 30 sec 45 sec Čs po ktivci spermií (s) Orázek 8: Vliv rozstříhání či vymčkání testes ve srovnání s vytřeným spermtem n rychlost pohylivosti spermií (průměrná hodnot se směrodtnou odchylkou průměru). Rozdílný lfetický údj v grfu vyjdřuje skutečnost, že hodnoty jsou odlišné se spolehlivostí vyšší než 95 %. 17

18 4.3. Experiment 2: Ověření vhodného testikulárního roztoku Celkem jsme ověřili zhru n 120 komincí různých roztoků s využitím NCl, KCl, CCl2, MgCl2, N2HPO4, KH2PO4, cukrózy, glukózy, včetně lncování ph n úroveň ph 7 8, z kterých uvádíme ty nejlepší v tulce č. 2, včetně odhdu procent pohylivých spermií. Ty nejúspěšnější testikulární roztoky vykázly v čse nul po 10 minutách stejné či vyšší hodnoty než kontrol čili neředěné testikulární sperm. Mezi ty testikulární roztoky se zvýšenou motilitou spermií ptřily komince 220 mm NCl + 20 mm tris, ph 7 8 dále modifikovný fosfátový pufr (PBS) se zvýšenou úrovní NCl, oshující finálně 217, 237 neo 257 mm NCl + 2,7 mm KCl + 10 mm N2HPO4 + 1,8 mm KH2PO4. Po hodině uchování došlo k rpidnímu snížení pohylivosti po třech hodinách jsme vykázli pouze ojedinělý pohy. Po hodinách jsme zznmenli pohy spermií pouze u kontroly testikulárního spermtu neředěného (Tulk 2). Tulk 2: Nejúspěšnější testikulární roztoky v mm (milimolech) jejich vliv n motilitu spermií po uchování 0 min, 10 min, 1 h, 3 h, 24 h 72 h Složení roztoku v mm Do uchování s odhdem procent pohylivých spermií 0 min 10 min 1 h 3 h 24 h 72 h NCl 275 mm NCl 300 mm NCl 250 mm+10 mm KCl NCl 275 mm+10 mm KCl NCl 300 mm+10 mm KCl NCl 220 mm+20 mm trisu, ph NCl 220 mm+20 mm trisu, ph NCl 240 mm+20 mm trisu, ph NCl 240 mm+20 mm trisu, ph KCl 300 mm Modifikovný PBS s 217 mm NCl Modifikovný PBS s 237 mm NCl Modifikovný PBS s 257 mm NCl Kontrol vytřené sperm Kontrol testikulární sperm v Závěr Některé komince testikulárních roztoků měly pozitivní efekt n zlepšení úrovně motility po 10 minutách uchování. N druhé strně žádný roztok nevykázl možnost dlouhodoého uchování spermtu. Velmi dorou uchovtelnost po dou 72 hodin vykázlo testikulární sperm ez ředění. Nopk velmi šptnou uchovtelnost vykázlo vytřené sperm. 18

19 4.4. Experiment 3: Testování testikulárního roztoku v kominci s ktivčním roztokem Výsledky uvedené v tulce 3 jsně svědčí o vhodnosti modifikovných PBS roztoků, to oou dvou, ve srovnání s roztoky, které oshují NCl tris. Tké v přípdě testikulárních roztoků je viditelné vhodnější použití komince modifikovného PBS jko testikulárního roztoku rovněž PBS jko ktivčního roztoku. U neředěného spermtu testikulárním roztokem je viditelné, že ktivční roztok měl pozitivní vliv n ktivci testikulárního spermtu. Dále jsme zjistili, že 1 5minutové uchování v testikulárním roztoku má sttisticky průkzně pozitivní vliv n motilitu spermií, viz žluté hodnoty, oproti čsu 0 či 10minutovému uchování Závěr V testu se osvědčil komince použití testikulárního roztoku (Modifikovný PBS s 257 mm NCl) s ktivčním roztokem (nemodifikovný PBS ředěný 10x) s tím, že průkzně do krátkého přechování v imoilizčním roztoku po dou 1 5 minut pomohl zlepšit motilitu spermií. Tulk 3: Testování ktivčního roztoku ve vzě n testikulární roztok jejich vliv n motilitu spermií po uchování 0 min, 1 min, 5 min 10 min. Rozdílný lfetický údj v tulce u hodnot čsu s vyznčením modrých žlutých výsledků vyjdřuje skutečnost, že hodnoty jsou odlišné se spolehlivostí vyšší než 95 %. Aktivční roztok v mm 22 mm NCl+5 mm trisu, ph 8 22 mm NCl+5 mm trisu, ph 8 22 mm NCl+5 mm trisu, ph 8 44 mm NCl+ 5mM trisu, ph 8 44 mm NCl+ 5mM trisu, ph 8 44 mm NCl+5 mm trisu, ph 8 nemodifikovný PBS ředěný 10x nemodifikovný PBS ředěný 10x nemodifikovný PBS ředěný 10x vod z líhně vod z líhně Vod z líhně Testikulární roztok v mm Modifikovný PBS s 257 mm NCl NCl 220 mm+20 mm trisu, ph 8 Testikulární sperm neředěné Modifikovný PBS s 257 mm NCl NCl 220 mm+20 mm trisu, ph 8 Testikulární sperm neředěné Modifikovný PBS s 257 mm NCl NCl 220 mm+20 mm trisu, ph 8 Testikulární sperm neředěné Modifikovný PBS s 257 mm NCl NCl 220 mm+20 mm trisu, ph 8 Testikulární sperm neředěné Do uchování s odhdem procent pohylivých spermií 0 min 1 min 5 min 10 min

20 4.5. Experiment 4: Ověření výtěžnosti testikulárního spermtu propočet stndrdizce osemenění z hledisk počtu spermií n jednu jikru Celkem se nám podřilo od 4 mlíčáků při rozdělení testes n polovinu získt v prvním přípdě, tzn. z rozstříhných testes spermií, v druhém přípdě při vymčkání testes přes uhelon spermií. Pochopitelně výtěžnost z rozstřihných testes je nižší. Jde ovšem vesměs o spermie, které po krátkodoém smíchání s testikulárním roztokem vykzují dleko lepší prmetry pohyu. Tké se u nich nchází zhru o % více spermií s ičíkem než u metody vymčkání. Oecně y mělo postčovt při kvlitním spermtu v řádu 0, spermií n 1 jikru (tedy 200 tisíc spermií n 1 jikru). Pokud ychom všechny testes od 4 mlíčáků zprcovli metodou rozstříhání, potom výtěžnost n úrovni dvojnásoku tedy spermií y měl postčovt zhru n 22 kg jiker (pokud počítáme, že v 1 g suchých jiker je 150 jiker). Pokud vezeme v úvhu odoný propočet pro vytřené sperm, potom ychom museli při průměrných hodnotách 1 ml spermtu n mlíčák průměrné koncentrci spermií vytřít n 22 kg jiker 48 spermijujících mlíčáků, což jsme v prxi ž n výjimky nezznmenli Závěr Z jednoduchého propočtu je jsné, že pokud vytřeme větší kvnt jiker, nikdy nám neude stčit sperm od vytřených mlíčáků. Proto doporučujeme i při ěžných výtěrech zít 3 spermijující mlíčáky, to vždy n 20 kg jiker. Následně vyjmout testes, vložit do misky, rozstřiht n velmi droné kousky, misku zkrýt skleněnou či plstovou deskou (ne hdrem) ideálně uložit n šupinkový led s vodou neo dát do ledničky, která má mximálně 4 o C ponecht lespoň po dou 2 hodin při nízké teplotě Experiment 5: Testování oplozenosti s doplněním v poloprovozním pokusu V prvním experimentu jsme sttisticky porovnávli vliv dvou ktivčních médií, to vody neo ktivčního roztoku (10x ředěný roztok PBS; orázek 9). Jednoznčně průkzně se projevil zlepšený vliv ktivčního roztoku n oplozenost, to ve všech přípdech. Tké se průkzně projevil lepší oplozenost při použití testikulárního spermtu ve srovnání se spermtem vytřeným. Jko nejlepší komince se jsně ukázlo použití testikulárního spermtu inkuovného po dou jedné minuty v testikulárním roztoku, to modifikovném PBS s 237 neo 257 mm NCl. Nutno poznment, že jsme při výěru jiker měli šťstnou ruku použili kvlitní jikry, yť se to n první pohled při srovnání výsledků u vytřeného spermtu s vodou k ktivci (30 40 % oplozenosti) nemusí zdát. V poloprovozním experimentu (orázek 10) jsme použili ěžný vzorek jiker z líhně v závěru výtěrové sezóny v Nových Hrdech. Zvýšení oplozenosti v doě rýhování i v očních odech ylo dosženo díky použití testikulárního spermtu. Dleko mrkntnější zvýšení oplozenosti se projevilo použitím 10x ředěného ktivčního roztoku PBS. Testikulární roztok rovněž přinesl efekt, který ovšem sttisticky neyl potvrzen ve stádiu očních odů. U plůdku z experimentálního normálního výtěru neyl zjištěn rozdíl. 20

21 90 80 c c Procento oplozenosti c d d VS TS TS+PBS217 TS+PBS237 TS+PBS257 0 Vod z líhně Aktivční roztok PBS 10x ředěný Orázek 9: Procento oplozenosti jiker ve stádiu 8 16 lstomer (VS vytřené sperm; TS testikulární sperm; TS+PBS217 testikulární sperm s testikulárním roztokem modifikovným PBS s 217 mm NCl; TS+PBS237 testikulární sperm s testikulárním roztokem modifikovným PBS s 237 mm NCl; TS+PBS257 testikulární sperm s testikulárním roztokem modifikovným PBS s 257 mm NCl). Rozdílný lfetický údj v grfu vyjdřuje skutečnost, že hodnoty jsou odlišné se spolehlivostí vyšší než 95 % c d c Procento c VS+vod TS+vod TS+AR TS+TR+AR Oplozenost Oční ody Orázek 10: Poloprovozní pokus s oplozeností jiker ve stádiu 8 16 lstomer v očních odech (VS+vod vytřené sperm ktivovné vodou; TS+vod testikulární sperm 21

22 ktivovné vodou; TS+AR testikulární sperm ktivovné 10x ředěným PBS; TS+TR+AS testikulární sperm s testikulárním roztokem modifikovným PBS s 257 mm NCl s ktivcí 10x ředěným PBS). Rozdílný lfetický údj v grfu vyjdřuje skutečnost, že hodnoty jsou odlišné se spolehlivostí vyšší než 95 % Závěr V prktickém pokusu se jednoznčně průkzně zlepšil výsledek oplozenosti při použití testikulárního spermtu ve srovnání s vytřeným spermtem. Dále 10x ředěný ktivční roztok PBS ve srovnání s vodou jednoznčně zlepšil výsledky oplozenosti jiker předpokládáme i líhnivost, což vyplývá z výsledků získných v očních odech. V přípdě použití testikulárního roztoku došlo k zlepšení jen částečně. 22

23 5. Závěr Splnili jsme vlstní zdání, to vývoj technologie uchování testikulárního spermtu štiky oecné, včetně doprcování technologie použití, která je následující: Při výtěru štiky oecné k zlepšení výsledku v oplozenosti musíme vždy používt testikulární sperm, to i v přípdě, že se nám zdá, že máme k výtěru dosttek spermtu. Oecně je sperm štiky většinou nekvlitní s nízkou pohylivostí. Doporučujeme n 10 kg jiker vytřít sperm mlíčáků k tomu vždy přidt testikulární sperm z vypreprovných testes od 2 3 spermijujících mlíčáků. Preprci provádíme tk, že do mlé plstové či skleněné misky/kádinky přípdně s uzvírtelným víčkem o ojemu okolo 100 ml dáme testes od 2 3 mlíčáků, rozstříháme (rozšmelcujeme) n mlé kousky, přikryjeme či uzvřeme dáme n led či do ledničky (0 2 o C) minimálně n dvě hodiny mximálně n 2 dny. Nyní máme dvě možnosti jk provést osemenění ktivci spermií jiker: ) Bez použití testikulárního roztoku. Sperm z rozstříhných testes dáme do jiker. Z misky dostneme zylou část testikulárního spermtu tk, že částí jiker nplníme misku se spermtem překlopíme do zásoní mísy s jikrmi. Testikulární sperm zmícháme v jikrách přidáme ktivční roztok. Aktivční roztok PBS si uď smi připrvíme (jde o velmi levné chemikálie) neo je možné si jej ojednt npříkld u firmy Thermo Fisher Scientific či jiných firem v tletách, ty si rozpustit podle potřey. Nejlevnější vrint PBS vycházel v relci jedn tlet (24 Kč) pro příprvu 2 litrů ktivčního roztoku. Při rozpouštění tlet nepoužívejte destilovnou vodu, le vodu, kterou ěžně používáte k oplození. Aktivční roztok v poměru 1 l n 2 kg jiker vlijte do jiker zmíchejte. Při vlévání vody ještě promyjte misku s testikulárním spermtem. Jikry stále míchejte, lespoň 2 3 minuty. Následně odlepkujte jikry. ) S použitím testikulárního roztoku. Do spermtu z rozstříhných testes zmícháme 50 ml testikulárního roztoku. Testikulární roztok připrvíme tk, že rozpustíme jednu tletu PBS v 200 ml vody z líhně přidáme 1,4 g NCl. Do jedné minuty nlijeme testikulární sperm s testikulárním roztokem do jiker, velmi krátce ěhem 2 3 s promícháme zlijeme ktivčním roztokem (10x ředěným PBS, tedy 1 tlet do 2 l vody). Jikry stále mícháme po dou 2 3 minut následně odlepkujeme. Ve Vodňnech dne prof. Ing. Otomr Linhrt, DrSc. Řešitel projektu 23

( t) ( t) ( t) Nerovnice pro polorovinu. Předpoklady: 7306

( t) ( t) ( t) Nerovnice pro polorovinu. Předpoklady: 7306 7.3.8 Nerovnice pro polorovinu Předpokldy: 736 Pedgogická poznámk: Příkld 1 není pro dlší průěh hodiny důležitý, má smysl pouze jko opkování zplnění čsu při zpisování do třídnice. Nemá smysl kvůli němu

Více

Ulice Agentura sociální práce, o. s. Účetní závěrka za rok 2012

Ulice Agentura sociální práce, o. s. Účetní závěrka za rok 2012 Ulice Agentur sociální práce, o. s. Účetní závěrk z rok 2012 Osh: I. OBECNÉ INFORMACE... 2 1. POPIS ÚČETNÍ JEDNOTKY... 2 2. ZAMĚSTNANCI A OSOBNÍ NÁKLADY... 2 3. POSKYTNUTÉ PŮJČKY, ZÁRUKY ČI JINÁ PLNĚNÍ...

Více

2.8.5 Lineární nerovnice s parametrem

2.8.5 Lineární nerovnice s parametrem 2.8.5 Lineární nerovnice s prmetrem Předpokldy: 2208, 2802 Pedgogická poznámk: Pokud v tom necháte studenty vykoupt (což je, zdá se, jediné rozumné řešení) zere tto látk tk jednu půl vyučovcí hodiny (první

Více

SPEKTRÁLNÍ CHARAKTERISTIKY DOPADAJÍCÍ SLUNEČNÍ RADIACE NA LOKALITĚ BÍLÝ KŘÍŽ

SPEKTRÁLNÍ CHARAKTERISTIKY DOPADAJÍCÍ SLUNEČNÍ RADIACE NA LOKALITĚ BÍLÝ KŘÍŽ Rožnovský, J., Litschmnn, T. (ed): Seminář Mikroklim porostů, rno, 26. řezn 2003, SPEKTRÁLNÍ CHRKTERISTIKY DOPDJÍCÍ SLUNEČNÍ RDICE N LOKLITĚ ÍLÝ KŘÍŽ Mrtin Nvrátil 1, Vldimír Špund 2 1 Ktedr fyziky, Ostrvská

Více

Odměrná analýza, volumetrie ODMĚRNÁ ANALÝZA, VOLUMETRIE. Základní kroky při odměrné analýze. 1. Odvážení/odměření vzorku

Odměrná analýza, volumetrie ODMĚRNÁ ANALÝZA, VOLUMETRIE. Základní kroky při odměrné analýze. 1. Odvážení/odměření vzorku Odměrná nlýz, volumetrie metod zložená n měření ojemu metod solutní: stnovení nlytu ze změřeného ojemu roztoku činidl o přesně známé koncentrci, který je zpotřeí k úplné stechiometricky definovné rekci

Více

Konstrukce na základě výpočtu I

Konstrukce na základě výpočtu I ..11 Konstrukce n zákldě výpočtu I Předpokldy: Pedgogická poznámk: Původně yl látk rozepsnou do dvou hodin, v první ylo kromě dělení úseček zřzen i čtvrtá geometrická úměrná. Právě její prorání se nestíhlo,

Více

Technická dokumentace Ing. Lukáš Procházka

Technická dokumentace Ing. Lukáš Procházka Tehniká dokumente ng Lukáš Proházk Tém: hlvní část dokumentu, orázky, tulky grfy 1) Osh hlvní části dokumentu ) Orázky, tulky grfy ) Vzore rovnie Hlvní část dokumentu Hlvní část dokumentu je řzen v následujíím

Více

{ } ( ) ( ) 2.5.8 Vztahy mezi kořeny a koeficienty kvadratické rovnice. Předpoklady: 2301, 2508, 2507

{ } ( ) ( ) 2.5.8 Vztahy mezi kořeny a koeficienty kvadratické rovnice. Předpoklady: 2301, 2508, 2507 58 Vzth mezi kořen koefiient kvdrtiké rovnie Předpokld:, 58, 57 Pedgogiká poznámk: Náplň zřejmě přeshuje možnost jedné vučoví hodin, příkld 8 9 zůstvjí n vičení neo polovinu hodin při píseme + + - zákldní

Více

Zkoušky povlaků řezných nástrojů ze slinutého karbidu při frézování ocelí

Zkoušky povlaků řezných nástrojů ze slinutého karbidu při frézování ocelí Zkoušky povlků řezných nástrojů ze slinutého kridu při frézování ocelí Ing. Pvel Zemn Ph.D. 1), Ing. Ondřej Zindulk 2) 1) VCSVTT, ČVUT v Prze, Horská 3, 12800 Prh 2, tel: 605205923, p.zemn@rcmt.cvut.cz

Více

Teorie jazyků a automatů I

Teorie jazyků a automatů I Šárk Vvrečková Teorie jzyků utomtů I Sírk úloh pro cvičení Ústv informtiky Filozoficko-přírodovědecká fkult v Opvě Slezská univerzit v Opvě Opv, poslední ktulizce 5. květn 205 Anotce: Tto skript jsou určen

Více

Psychologická metodologie. NMgr. obor Psychologie

Psychologická metodologie. NMgr. obor Psychologie Pržská vysoká škol psychosociálních studií, s.r.o. Temtické okruhy ke státní mgisterské zkoušce Psychologická metodologie NMgr. oor Psychologie 1 Vědecká teorie vědecká metod Vědecké vysvětlení, vědecký

Více

Úvod do Teoretické Informatiky (456-511 UTI)

Úvod do Teoretické Informatiky (456-511 UTI) Úvod do Teoretické Informtiky (456-511 UTI) Doc. RNDr. Petr Hliněný, Ph.D. petr.hlineny@vs.cz 25. ledn 2006 Verze 1.02. Copyright c 2004 2006 Petr Hliněný. (S využitím části mteriálů c Petr Jnčr.) Osh

Více

Pájený tepelný výměník XB

Pájený tepelný výměník XB Popis Řd tepelných výměníků XB s mědí pájenou deskou je určen k použití v systémech dálkového vytápění (DH) neo chlzení (DC), npříkld pro výrou užitkové teplé vody, jko pomocné topné stnice k oddělení

Více

Větu o spojitosti a jejich užití

Větu o spojitosti a jejich užití 0..7 Větu o spojitosti jejich užití Předpokldy: 706, 78, 006 Pedgogická poznámk: Při proírání této hodiny je tře mít n pměti, že všechny věty, které studentům sdělujete z jejich pohledu neuvěřitelně složitě

Více

APLIKACE METODY RIPRAN V SOFTWAROVÉM INŽENÝRSTVÍ

APLIKACE METODY RIPRAN V SOFTWAROVÉM INŽENÝRSTVÍ APLIKACE METODY RIPRAN V SOFTWAROVÉM INŽENÝRSTVÍ Brnislv Lcko VUT v Brně, Fkult strojního inženýrství, Ústv utomtizce informtiky, Technická 2, 616 69 Brno, lcko@ui.fme.vutbr.cz Abstrkt Příspěvek podává

Více

Zhoubný novotvar ledviny mimo pánvičku v ČR

Zhoubný novotvar ledviny mimo pánvičku v ČR Aktuální informce Ústvu zdrvotnických informcí sttistiky České repuliky Prh 8.1.2004 1 Zhouný novotvr ledviny mimo pánvičku v ČR Počet hlášených onemocnění zhouným novotvrem ledviny mimo pánvičku (dg.

Více

SYLABUS MODULU UPLATNĚNÍ NA TRHU PRÁCE DÍLČÍ ČÁST II BAKALÁŘSKÝ SEMINÁŘ + PŘÍPRAVA NA PRAXI. František Prášek

SYLABUS MODULU UPLATNĚNÍ NA TRHU PRÁCE DÍLČÍ ČÁST II BAKALÁŘSKÝ SEMINÁŘ + PŘÍPRAVA NA PRAXI. František Prášek SYLABUS MODULU UPLATNĚNÍ NA TRHU PRÁCE DÍLČÍ ČÁST II BAKALÁŘSKÝ SEMINÁŘ + PŘÍPRAVA NA PRAXI Frntišek Prášek Ostrv 011 1 : Sylbus modulu Upltnění n trhu práce, dílčí část II Bklářská práce + příprv n prxi

Více

Výzkumná zpráva pro Lesy České republiky

Výzkumná zpráva pro Lesy České republiky Alrechtová kol: Výzkumná zpráv pro LČR, 2. etp 1 Výzkumná zpráv pro Lesy České repuliky Hodnocení vývoje zdrvotního stvu vyrných stnovišť v Krušnohoří od roku 1998 Etp II: 1) Anlýz mkroskopických mrkerů

Více

potravinárstvo Martina Ošťádalová 1, Vladimír Pažout 1, Ivan Straka 2

potravinárstvo Martina Ošťádalová 1, Vladimír Pažout 1, Ivan Straka 2 potrvinárstvo ZMĚNY OBSAHU CHLOROFYLŮ V PRŮBĚHU TECHNOLOGICKÉ PŘÍPRAVY KOMERČNÍCH ČAJŮ CHANGES IN CHLOROPHYLLS CONTENT DURING THE TECHNOLOGICAL PREPARATION OF COMMERCIAL TEAS Mrtin Ošťádlová 1, Vldimír

Více

Pájený výměník tepla, XB

Pájený výměník tepla, XB Popis / plikce Deskové výměníky tepl pájené mědí řdy XB jsou určené pro použití v soustvách centrálního zásoování teplem (tzn. v klimtizčních soustvách, v soustvách určených pro vytápění neo ohřev teplé

Více

Podobnosti trojúhelníků, goniometrické funkce

Podobnosti trojúhelníků, goniometrické funkce 1116 Podonosti trojúhelníků, goniometriké funke Předpokldy: 010104, úhel Pedgogiká poznámk: Zčátek zryhlit α γ β K α' l M γ' m k β' L Trojúhelníky KLM n nšem orázku mjí stejný tvr (vypdjí stejně), le liší

Více

3. APLIKACE URČITÉHO INTEGRÁLU

3. APLIKACE URČITÉHO INTEGRÁLU APLIKACE URČITÉHO INTEGRÁLU APLIKACE URČITÉHO INTEGRÁLU V mtemtice, le zejmén v přírodních technických vědách, eistuje nepřeerné množství prolémů, při jejichž řešení je nutno tím či oním způsoem použít

Více

Dotace na podporu aktivit v oblasti sportu a tělovýchovy

Dotace na podporu aktivit v oblasti sportu a tělovýchovy Dotční progrm n podporu ktivit v olsti sportu tělovýchovy dětí mládeže ze Sportovního fondu Městského ovodu Lierec Vrtislvice nd Nisou n rok 2016 Dotce n podporu ktivit v olsti sportu tělovýchovy Účel

Více

56. ročník Matematické olympiády. b 1,2 = 27 ± c 2 25

56. ročník Matematické olympiády. b 1,2 = 27 ± c 2 25 56. ročník Mtemtické olympiády Úlohy domácí části I. kol ktegorie 1. Njděte všechny dvojice (, ) celých čísel, jež vyhovují rovnici + 7 + 6 + 5 + 4 + = 0. Řešení. Rovnici řešíme jko kvdrtickou s neznámou

Více

4.4.3 Kosinová věta. Předpoklady:

4.4.3 Kosinová věta. Předpoklady: 443 Kosinová vět Předpokldy 44 Př Rozhodni zd dokážeme spočítt zývjíí strny úhly u všeh trojúhelníků zdnýh pomoí trojie prvků (délek strn velikostí úhlů) V sinové větě vystupují dvě dvojie strn-protější

Více

Vzdělávací materiál. vytvořený v projektu OP VK. Název školy: Gymnázium, Zábřeh, náměstí Osvobození 20. Číslo projektu: CZ.1.07/1.5.00/34.

Vzdělávací materiál. vytvořený v projektu OP VK. Název školy: Gymnázium, Zábřeh, náměstí Osvobození 20. Číslo projektu: CZ.1.07/1.5.00/34. Vzdělávcí mteriál vytvořený v projektu OP VK Název školy: Gymnázium, Zářeh, náměstí Osvoození 20 Číslo projektu: Název projektu: Číslo název klíčové ktivity: CZ.1.07/1.5.00/34.0211 Zlepšení podmínek pro

Více

Staveništní malty a suché maltové směsi při obnově památek

Staveništní malty a suché maltové směsi při obnově památek Společnost pro technologie ochrny pmátek Národní technické muzeum Stveništní mlty suché mltové směsi při onově pmátek odorný seminář 18. dun 2013 Národní technické muzeum Kostelní 42, Prh 7 1 Stveništní

Více

ROZVAHA. ke dni... Roset s.r.o. 31. 12. 2011. Raisova 1004 Strakonice 386 01

ROZVAHA. ke dni... Roset s.r.o. 31. 12. 2011. Raisova 1004 Strakonice 386 01 Minimální závzný výčet informcí podle vyhlášky č. 500/2002 S. ROZVAHA ke dni... 31. 12. 2011 jednotky: 1000 Kč Rok Měsíc IČ 2011 1 2 28065280 Ochodní firm neo jiný název účetní jednotky Roset s.r.o. Sídlo

Více

ORTODONTICKÝ PRŮVODCE PRAKTICKÉHO ZUBNÍHO LÉKAŘE

ORTODONTICKÝ PRŮVODCE PRAKTICKÉHO ZUBNÍHO LÉKAŘE MUDr. Mgdlen Koťová, Ph.D. ORTODONTICKÝ PRŮVODCE PRAKTICKÉHO ZUBNÍHO LÉKAŘE Recenzent: Prof. MUDr. Jiří Mzánek, DrSc. Grd Pulishing,.s., 2006 Fotogrfie z rchivu utorky. Perokresy podle návrhů utorky nkreslil

Více

JAN VÁLEK, PETR SLÁDEK Katedra fyziky, chemie a odborného vzdělávání, Pedagogická fakulta, Masarykova univerzita, Poříčí 7, Brno

JAN VÁLEK, PETR SLÁDEK Katedra fyziky, chemie a odborného vzdělávání, Pedagogická fakulta, Masarykova univerzita, Poříčí 7, Brno Veletrh nápdů učitelů fyziky 18 Fyzik cyklist JAN VÁLEK, PETR SLÁDEK Ktedr fyziky, chemie odorného vzdělávání, Pedgogická fkult, Msrykov univerzit, Poříčí 7, 603 00 Brno Astrkt Jízdní kolo spojuje mnoho

Více

4.4.1 Sinová věta. Předpoklady: Trigonometrie: řešení úloh o trojúhelnících.

4.4.1 Sinová věta. Předpoklady: Trigonometrie: řešení úloh o trojúhelnících. 4.4. Sinová vět Předpokldy Trigonometrie řešení úloh o trojúhelnííh. Prktiké využití změřování měření vzdáleností, tringulční síť Tringulční síť je prolém měřit vzdálenosti dvou odů v krjině změříme velmi

Více

( ) ( ) Sinová věta II. β je úhel z intervalu ( 0;π ). Jak je vidět z jednotkové kružnice, úhly, pro které platí. Předpoklady:

( ) ( ) Sinová věta II. β je úhel z intervalu ( 0;π ). Jak je vidět z jednotkové kružnice, úhly, pro které platí. Předpoklady: 4.4. Sinová vět II Předpokldy 44 Kde se stl hy? Námi nlezené řešení je správné, le nenšli jsme druhé hy ve hvíli, kdy jsme z hodnoty sin β určovli úhel β. β je úhel z intervlu ( ;π ). Jk je vidět z jednotkové

Více

2.7.7 Obsah rovnoběžníku

2.7.7 Obsah rovnoběžníku 77 Osh rovnoěžníku Předpokldy: 00707 Osh (znčk S): kolik míst útvr zujímá, počet čtverečků 1 x 1, které se do něj vejdou, kolik koerce udeme muset koupit, ychom pokryli podlhu, Př 1: Urči osh čtverce o

Více

Seznámíte se s další aplikací určitého integrálu výpočtem objemu rotačního tělesa.

Seznámíte se s další aplikací určitého integrálu výpočtem objemu rotačního tělesa. .. Ojem rotčního těles Cíle Seznámíte se s dlší plikcí určitého integrálu výpočtem ojemu rotčního těles. Předpokládné znlosti Předpokládáme, že jste si prostudovli zvedení pojmu určitý integrál (kpitol.).

Více

2.2.9 Grafické řešení rovnic a nerovnic

2.2.9 Grafické řešení rovnic a nerovnic ..9 Grfické řešení rovnic nerovnic Předpokldy: 0, 06 Př. : Řeš početně i grficky rovnici x + = x. Početně: Už umíme. x + = x x = x = K = { } Grficky: Kždá ze strn rovnice je výrzem pro lineární funkci

Více

( a) Okolí bodu

( a) Okolí bodu 0..5 Okolí bodu Předpokldy: 40 Pedgogická poznámk: Hodin zjevně překrčuje možnosti většiny studentů v 45 minutách. Myslím, že nemá cenu přethovt do dlší hodiny, příkldy s redukovnými okolími nejsou nutné,

Více

Rozdělení spojitých veličin

Rozdělení spojitých veličin Rozdělení spojitých veličin Frekvenční distriuční funkce spojité náhodné veličiny (NV) Rovnoměrné spojité rozdělení Normální rozdělení (Gussovo, Guss-Lplceovo) Normální normovné rozdělení Logritmicko -

Více

Měření objektů pozorovaných v průběhu endoskopického vyšetření systémem FOTOM 2008

Měření objektů pozorovaných v průběhu endoskopického vyšetření systémem FOTOM 2008 Technické novinky 79 Měření ojektů pozorovných v průěhu endoskopického vyšetření systémem FOTOM 2008 doc. Ing. Lčezr Ličev, CSc. 1 2, 3, 4, MUDr. Ondřej Urn, Ph.D. 1 Ktedr informtiky FEI, VŠB TU Ostrv

Více

3.2.1 Shodnost trojúhelníků I

3.2.1 Shodnost trojúhelníků I 3.2.1 hodnost trojúhelníků I Předpokldy: 3108 v útvry jsou shodné, pokud je možné je přemístěním ztotožnit. v prxi těžko proveditelné hledáme jinou možnost ověření shodnosti v útvry jsou shodné, pokud

Více

TECHNICKÁ UNIVERZITA V LIBERCI

TECHNICKÁ UNIVERZITA V LIBERCI TECHNICKÁ UNIVERZITA V LIBERCI FAKULTA PEDAGOGICKÁ Ktedr sociálních studií speciální pedgogiky Studijní progrm: Studijní oor: Kód ooru: Sociální práce Sociální prcovník 7502R022 Název klářské práce: NÁHRADNÍ

Více

Petr Šašek, Pavel Schmidt, Jiří Mann S 7 DLOUHODOBÝ MONITORING STAVEBNĚ REKULTIVAČNÍCH SMĚSÍ

Petr Šašek, Pavel Schmidt, Jiří Mann S 7 DLOUHODOBÝ MONITORING STAVEBNĚ REKULTIVAČNÍCH SMĚSÍ Petr Ššek, Pvel Schmidt, Jiří Mnn S 7 Výzkumný ústv pro hnědé uhlí.s., Budovtelů 2830, Most,ssek@vuhu.cz DLOUHODOBÝ MONITORING STAVEBNĚ REKULTIVAČNÍCH SMĚSÍ Abstrkt Cílem dlouhodobého monitoringu stvebně

Více

pro čajovou ligu družstev Č l á n e k I. - O r g a n i z a c e soutěže

pro čajovou ligu družstev Č l á n e k I. - O r g a n i z a c e soutěže H r í ř á d pro čjovou ligu družstev Č l á n e k I. - O r g n i z e soutěže I-1. Vymezení soutěže Soutěž je pořádán pro družstv složená z hráčů, kteří hrjí go pro zpestření svého volného čsu htějí změřit

Více

Lineární nerovnice a jejich soustavy

Lineární nerovnice a jejich soustavy teorie řešené úlohy cvičení tipy k mturitě výsledky Lineární nerovnice jejich soustvy Víš, že pojem nerovnice není opkem pojmu rovnice? lineární rovnice má většinou jediné řešení, kdežto lineární nerovnice

Více

Systémy suché výstavby 08/2011. Bezpečné bydlení Akustický komfort

Systémy suché výstavby 08/2011. Bezpečné bydlení Akustický komfort Systémy suché výstvy 08/2011 Bezpečné ydlení Akustický komfort BEZPEČNÉ BYDLENÍ AKUSTIKA ptří mezi nový koncept firmy Knuf. V rámci produktů systémů Knuf existují řešení splňující zákldní předepsné normové

Více

Tangens a kotangens

Tangens a kotangens 4.3.12 Tngens kotngens Předpokldy: 040311 Př. 1: Úhel, pod kterým je možné ze pozorovt vrhol věže ze vzdálenosti 19 m od její pty, yl změřen n 53 od vodorovné roviny. Jk je věž vysoká? h 53 19 m Z orázku

Více

Montazni navod. Mythos 6'x8' - TwinWall Glazing 248x185x209cm / 96¾"x72¾"x82¼" Pomoc zákazníkûm a linka podpory Mobile: 00420-739-661-428

Montazni navod. Mythos 6'x8' - TwinWall Glazing 248x185x209cm / 96¾x72¾x82¼ Pomoc zákazníkûm a linka podpory Mobile: 00420-739-661-428 Montzni nvod Mythos 6'x8' - TwinWll Glzing 2488509cm / 96¾"x72¾"x82¼" Czech_71190 Pomoc zákzníkûm link podpory Moile: 00420-739-661-428 www.plrmpplictions.com CZ DŮLEŽITÉ Předtím, než zčnete sestvovt tento

Více

Digitální učební materiál

Digitální učební materiál Digitální učení mteriál Číslo projektu CZ.1.07/1.5.00/34.080 Název projektu Zkvlitnění výuky prostřednictvím ICT Číslo název šlony klíčové ktivity III/ Inovce zkvlitnění výuky prostřednictvím ICT Příjemce

Více

Hyperbola, jejíž střed S je totožný s počátkem soustavy souřadnic a jejíž hlavní osa je totožná

Hyperbola, jejíž střed S je totožný s počátkem soustavy souřadnic a jejíž hlavní osa je totožná Hyperol Hyperol je množin odů, které mjí tu vlstnost, že solutní hodnot rozdílu jejich vzdáleností od dvou dných různých odů E, F je rovn kldné konstntě. Zkráceně: Hyperol = {X ; EX FX = }; kde symolem

Více

Ing. Mgr. Denisa Nechanská

Ing. Mgr. Denisa Nechanská Ing. Mgr. Denisa Nechanská nechanska@af.czu.cz mimotělní oplození velké množství gamet (řádově tisíce) vývoj embryí ve vodě přirozená synchronizace (podmínka úspěchu) období, místo a způsob druhově rozdílné

Více

visual identity guidelines Česká verze

visual identity guidelines Česká verze visul identity guidelines Česká verze Osh 01 Filosofie stylu 02 Logo 03 Firemní rvy 04 Firemní písmo 05 Vrice log 06 Komince rev Filosofie stylu Filozofie společnosti Sun Mrketing vychází ze síly Slunce,

Více

Souhrn základních výpočetních postupů v Excelu probíraných v AVT 04-05 listopad 2004. r r. . b = A

Souhrn základních výpočetních postupů v Excelu probíraných v AVT 04-05 listopad 2004. r r. . b = A Souhrn zákldních výpočetních postupů v Ecelu probírných v AVT 04-05 listopd 2004. Řešení soustv lineárních rovnic Soustv lineárních rovnic ve tvru r r A. = b tj. npř. pro 3 rovnice o 3 neznámých 2 3 Hodnoty

Více

Jaký vliv na tvar elipsy má rozdíl mezi délkou provázku mezi body přichycení a vzdáleností těchto bodů.

Jaký vliv na tvar elipsy má rozdíl mezi délkou provázku mezi body přichycení a vzdáleností těchto bodů. 7.5.7 lips Přdpokldy: 7501 lips = rozšlápnutá kružnic. Jk ji sstrojit? Zhrdnická konstrukc lipsy (tkto s vytyčují záhony): Vzmm provázk n koncích ho přidělám tk, y nyl npnutý. Klcíkm provázk npnm tk, y

Více

5.1.5 Základní vztahy mezi body, přímkami a rovinami

5.1.5 Základní vztahy mezi body, přímkami a rovinami 5.1.5 Zákldní vzthy mezi body, přímkmi rovinmi Předpokldy: 510 Prostor má tři rozměry, skládá se z bodů přímk - jednorozměrná podmnožin prostoru (množin bodů), rovin - dvojrozměrná podmnožin prostoru (množin

Více

Výfučtení: Geometrické útvary a zobrazení

Výfučtení: Geometrické útvary a zobrazení Výfučtení: Geometrické útvry zorzení V geometrii očs nrzíme n to, že některé geometrické orzce vykzují jistou symetrii. Popřípdě můžeme slyšet, že nějké dv útvry jsou si podoné. V tomto Výfučtení udeme

Více

( ) 1.5.2 Mechanická práce II. Předpoklady: 1501

( ) 1.5.2 Mechanická práce II. Předpoklady: 1501 1.5. Mechnická práce II Předpokldy: 1501 Př. 1: Těleso o hmotnosti 10 kg bylo vytženo pomocí provzu do výšky m ; poprvé rovnoměrným přímočrým pohybem, podruhé pohybem rovnoměrně zrychleným se zrychlením

Více

2.5.9 Vztahy mezi kořeny a koeficienty kvadratické rovnice

2.5.9 Vztahy mezi kořeny a koeficienty kvadratické rovnice 59 Vzth mezi kořen koefiient kvdrtiké rovnie Předpokld:, 57, 58 Pedgogiká poznámk: Náplň zřejmě přeshuje možnost jedné vučoví hodin Příkld 8 9 zůstávjí n vičení nebo polovinu hodin při píseme + b + - zákldní

Více

MINISTERSTVO PRO MÍSTNÍ ROZVOJ Národní orgán pro koordinaci POKYN PRO TVORBU A OBSAH ZPRÁVY O REALIZACI OPERAČNÍHO PROGRAMU PRO MONITOROVACÍ VÝBOR

MINISTERSTVO PRO MÍSTNÍ ROZVOJ Národní orgán pro koordinaci POKYN PRO TVORBU A OBSAH ZPRÁVY O REALIZACI OPERAČNÍHO PROGRAMU PRO MONITOROVACÍ VÝBOR MINISTERSTVO PRO MÍSTNÍ ROZVOJ Národní orgán pro koordinci POKYN PRO TVORBU A OBSAH ZPRÁVY O REALIZACI OPERAČNÍHO PROGRAMU PRO MONITOROVACÍ VÝBOR ŘÍJEN 2014 MINISTERSTVO PRO MÍSTNÍ ROZVOJ Odbor řízení

Více

2.5.9 Vztahy mezi kořeny a koeficienty kvadratické rovnice

2.5.9 Vztahy mezi kořeny a koeficienty kvadratické rovnice 59 Vzth mezi kořen koefiient kvdrtiké rovnie Předpokld:, 57, 58 Pedgogiká poznámk: Náplň zřejmě přeshuje možnost jedné vučoví hodin Příkld 8 9 zůstávjí n vičení nebo polovinu hodin při píseme + b + - zákldní

Více

kritérium Návaznost na další dokumenty Dokument naplňující standard

kritérium Návaznost na další dokumenty Dokument naplňující standard 1. CÍLE A ZPŮSOBY ČINNOSTI POVĚŘENÉ OSOBY Dokument obshuje zákldní prohlášení středisk Služby pro pěstouny, do kterého se řdí: poslání, cílová skupin, cíle zásdy, v souldu s kterými je služb poskytován.

Více

Dílčí kvalifikace Strážný Soubor otázek pro písemnou část zkoušky

Dílčí kvalifikace Strážný Soubor otázek pro písemnou část zkoušky Dílčí kvlifike Strážný Souor otázek pro písemnou část zkoušky J.2.1.99 Právní zákldy ezpečnostní činnosti Ústvní právo zákon č. 1/1993 S., Ústv České repuliky, č. 2/1999 S., Listin zákldníh práv svood

Více

ROZVAHA. ke dni... BAB mont s.r.o. Klíčovská 805/11 Praha 9 190 00 +0 +0 +0 +0 +0 +0 +0 +0 +0 +0 +0 +0 +0 +0 +0 +0 +0 +0 +0 +0 +0 +0 +0 +0 +0 +0 +0

ROZVAHA. ke dni... BAB mont s.r.o. Klíčovská 805/11 Praha 9 190 00 +0 +0 +0 +0 +0 +0 +0 +0 +0 +0 +0 +0 +0 +0 +0 +0 +0 +0 +0 +0 +0 +0 +0 +0 +0 +0 +0 Minimální závzný výčet informcí podle vyhlášky č. 500/2002 S. Písemnost yl podán elektronicky dne: 20.6.2012 Podcí : 2172526 Heslo zjištění stvu: c3d895fe Stv podání: vyřízeno ROZVAHA ke dni... 3 1. 1

Více

HODNOCENÍ BYTOVÉ NOUZE ZÁZNAM

HODNOCENÍ BYTOVÉ NOUZE ZÁZNAM HODNOCENÍ BYTOVÉ NOUZE ZÁZNAM 1. INFORMACE TÝKAJÍCÍ SE POSUZOVANÉ DOMÁCNOSTI 1.1. ZÁKLADNÍ INFORMACE Ždtel/ždtelk 1 (jméno, příjmení, dtum nrození) 1 Ždtel/ždtelk 2 (jméno, příjmení, dtum nrození) Osttní

Více

9 Kladiva, průbojníky, sekáče

9 Kladiva, průbojníky, sekáče Kldiv, průojníky, sekáče Speciální postup při výroě kldiv KAIVO 1. Řezání: n stroji, plochá ocel se nřeže do poždovných tvrů:přesností řezu je zjištěn minimální spotře kvlitního mteriálu. 2. Kování: díly

Více

Nosné stavební konstrukce Výpočet reakcí

Nosné stavební konstrukce Výpočet reakcí Stvení sttik 1.ročník klářského studi Nosné stvení konstrukce Výpočet rekcí Reálné ztížení nosných stveních konstrukcí Prut geometrický popis vnější vzy nehynost silové ztížení složky rekcí Ktedr stvení

Více

2.9.11 Logaritmus. Předpoklady: 2909

2.9.11 Logaritmus. Předpoklady: 2909 .9. Logritmus Předpokld: 909 Pedgogická poznámk: Následující příkld vždují tk jeden půl vučovcí hodin. V přípdě potřeb všk stčí dojít k příkldu 6 zbtek jen ukázt, což se dá z jednu hodinu stihnout (nedoporučuji).

Více

( t) ( t) ( ( )) ( ) ( ) ( ) Vzdálenost bodu od přímky I. Předpoklady: 7308

( t) ( t) ( ( )) ( ) ( ) ( ) Vzdálenost bodu od přímky I. Předpoklady: 7308 731 Vzdálenost odu od římky I Předokldy: 7308 Pedgogiká oznámk: Pokud máte málo čsu, můžete odvodit vzore ez smosttné ráe studentů oužít některý z říkldů z dlší hodiny Tím jednu ze dvou hodin ro vzdálenost

Více

UC485S. PŘEVODNÍK LINKY RS232 na RS485 nebo RS422 S GALVANICKÝM ODDĚLENÍM. Převodník UC485S RS232 RS485 RS422 K1. přepínače +8-12V GND GND TXD RXD DIR

UC485S. PŘEVODNÍK LINKY RS232 na RS485 nebo RS422 S GALVANICKÝM ODDĚLENÍM. Převodník UC485S RS232 RS485 RS422 K1. přepínače +8-12V GND GND TXD RXD DIR PŘEVODNÍK LINKY RS232 n RS485 neo RS422 S GALVANICKÝM ODDĚLENÍM 15 kv ESD Protected IEC-1000-4-2 Převodník přepínče RS232 RS485 RS422 K1 ' K2 +8-12V GND GND TXD RXD DIR PAPOUCH 1 + gnd Ppouch s.r.o. POPIS

Více

3.2.5 Pythagorova věta, Euklidovy věty I. α = = Předpoklady: 1107, 3204

3.2.5 Pythagorova věta, Euklidovy věty I. α = = Předpoklady: 1107, 3204 3..5 ythgoro ět, Euklidoy ěty I ředpokldy: 1107, 304 roúhlý trojúhelník = trojúhelník s nitřním úhlem 90 (s prým nitřním úhlem) prý úhel je z nitřníh úhlů nejětší (zýjíí d musí dát dohromdy tké 90 ) strn

Více

Montazni navod. 6'x8' - TwinWall Glazing. Approx. Dim. 248x185x209cm / 97¾"x72¾"x82¼" 13.01_Czech_74085

Montazni navod. 6'x8' - TwinWall Glazing. Approx. Dim. 248x185x209cm / 97¾x72¾x82¼ 13.01_Czech_74085 Montzni nvod 6'x8' - TwinWll Glzing Approx. Dim. 2488509cm / 97¾"x72¾"x82¼" 13.01_Czech_74085 CZ DŮLEŽITÉ Předtím, než zčnete sestvovt tento skleník, si pečlivě přečtěte tyto pokyny. Uchovávejte tyto pokyny

Více

Úlohy školní klauzurní části I. kola kategorie C

Úlohy školní klauzurní části I. kola kategorie C 52. ročník mtemtické olympiády Úlohy školní kluzurní části I. kol ktegorie 1. Odtrhneme-li od libovolného lespoň dvojmístného přirozeného čísl číslici n místě jednotek, dostneme číslo o jednu číslici krtší.

Více

3.2.7 Příklady řešené pomocí vět pro trojúhelníky

3.2.7 Příklady řešené pomocí vět pro trojúhelníky ..7 Příkldy řešené pomocí ět pro trojúhelníky Předpokldy:, 6 Pedgogická poznámk: U následujících příkldů ( u mnoh dlších příkldů z geometrie) pltí, že nedílnou součástí řešení je nápd (který se tké nemusí

Více

Konstrukce na základě výpočtu I

Konstrukce na základě výpočtu I .4.11 Konstruke n zákldě výpočtu I Předpokldy: Pedgogiká poznámk: Je důležité si uvědomit, že následujíí sled příkldů neslouží k tomu, y si žái upevnili mehniký postup n dělení úseček. Jediné, o y si měli

Více

Integrály definované za těchto předpokladů nazýváme vlastní integrály.

Integrály definované za těchto předpokladů nazýváme vlastní integrály. Mtemtik II.5. Nevlstní integrály.5. Nevlstní integrály Cíle V této kpitole poněkud rozšíříme definii Riemnnov určitého integrálu i n přípdy, kdy je integrční oor neohrničený (tj. (, >,

Více

5.1.5 Základní vztahy mezi body přímkami a rovinami

5.1.5 Základní vztahy mezi body přímkami a rovinami 5.1.5 Zákldní vzthy mezi body přímkmi rovinmi Předpokldy: 510 Prostor má tři rozměry, skládá se z bodů. Přímk - jednorozměrná podmnožin prostoru (množin bodů) Rovin - dvojrozměrná podmnožin prostoru (množin

Více

Prostorové nároky... 35. Zatížení... 37 Velikost zatížení... 37 Směr zatížení... 37. Nesouosost... 40. Přesnost... 40. Otáčky... 42. Tichý chod...

Prostorové nároky... 35. Zatížení... 37 Velikost zatížení... 37 Směr zatížení... 37. Nesouosost... 40. Přesnost... 40. Otáčky... 42. Tichý chod... Vol typu ložisk Prostorové nároky... 35 Ztížení... 37 Velikost ztížení... 37 Směr ztížení... 37 Nesouosost... 40 Přesnost... 40 Otáčky... 42 Tichý chod... 42 Tuhost... 42 Axiální posuvnost... 43 Montáž

Více

Výfučtení: Goniometrické funkce

Výfučtení: Goniometrické funkce Výfučtení: Goniometriké funke Tentokrát se seriál ude zývt spíše mtemtikým než fyzikálním témtem. Pokud počítáte nějkou úlohu, ve které vystupují síly, tk je potřeujete dost čsto rozložit n součet dopočítt

Více

4.2.1 Goniometrické funkce ostrého úhlu

4.2.1 Goniometrické funkce ostrého úhlu .. Goniometriké funke ostrého úhlu Předpokldy: 7 Dnešní látku opkujeme už potřetí (poprvé n zčátku mtemtiky, podruhé ve fyzie) je to oprvdu důležité. C C C C C C Všehny prvoúhlé trojúhelníky s úhlem α

Více

Odlepkování jiker. Rumunská modifikace Woynarovichovy metody (s taninem)

Odlepkování jiker. Rumunská modifikace Woynarovichovy metody (s taninem) Lepivost jiker fytofilních druhů ryb je dána mucoproteiny, až po styku s vodou Pro umělý výtěr ve velkovýrobních technologiích inkubace jiker nutnost zamezit jejich lepivosti Metody odlepkování jiker:

Více

Stanovení disociační konstanty acidobazického indikátoru

Stanovení disociační konstanty acidobazického indikátoru Stnovení disociční konstnty cidobzického indikátoru Teorie: cidobzické indikátory se chovjí buď jko slbé kyseliny nebo slbé báze disociují ve vodných roztocích omezeně. Kvntittivní mírou disocice je hodnot

Více

Příloha k roční účetní závěrce za rok 2015

Příloha k roční účetní závěrce za rok 2015 Příloh k roční účetní závěrce z rok 2015 Čl. 1 Oecné údje Sujekt: U2Brno s.r.o. sídlo: Brno, Příkop 843/4 právní form: společnost s ručením omezeným IČO: 607 16 380 předmět činnosti: - specilizovný mloochod

Více

Nařízení Evropského parlamentu a Rady (ES) č. 1935/2004

Nařízení Evropského parlamentu a Rady (ES) č. 1935/2004 ze dne 27. říjn 2004 Nřízení Evropského prlmentu Rdy (ES) č. 1935/2004 o mteriálech předmětech určených pro styk s potrvinmi o zrušení směrnic 80/590/EHS 89/109/EHS EVROPSKÝ PARLAMENT A RADA EVROPSKÉ UNIE,

Více

E V R O P S K Á Ú M L U V A O K R A J I NĚ

E V R O P S K Á Ú M L U V A O K R A J I NĚ E V R O P S K Á Ú M L U V A O K R A J I NĚ Sdělení Ministerstv zhrničníh věí č. 13/2005 S.m.s. Ministerstvo zhrničníh věí sděluje, že dne 20. říjn 2000 yl ve Florenii přijt Evropská úmluv o krjině. Jménem

Více

9 - Zpětná vazba. Michael Šebek Automatické řízení 2015 16-3-15

9 - Zpětná vazba. Michael Šebek Automatické řízení 2015 16-3-15 9 - Zpětná vz Michel Šeek Atomtické řízení 2015 16-3-15 Atomtické řízení - Kernetik rootik Proč řídit? Řídicí sstém msí zjistit stilit chování Klsické poždvk n chování přípstná stálená reglční odchlk při

Více

D 12 Knauf akustické podhledy

D 12 Knauf akustické podhledy D 12 09/2007 D 12 Knuf kustické podhledy NOVINKA! Stndrdně v provedení Cleneo se smočistící schopností vzduchu D 127 - Strop z děrovných desek D 128 - Strop z desek ze štěrinmi D 127 Konstrukce desek Děrování

Více

2.7.9 Obsah lichoběžníku

2.7.9 Obsah lichoběžníku 79 Osh lihoěžníku Předpokldy: 00708 Př : Trojúhelník A má osh jednotek Urči oshy trojúhelníků A n ) A ) A ) A Vzore pro osh trojúhelníku: S = osh trojúhelníku se změní, pokud se změní uď strn neo k ní

Více

SECUNORM 590 NÁVOD ČESKY

SECUNORM 590 NÁVOD ČESKY SECUNORM 590 NÁVOD ČESKY CZ SRDEČNĚ VÁM BLAHOPŘEJEME KE KOUPI ŘEZACÍHO NOŽE SECUNORM 590. Rozhodl/ jste se pro koupi vysoce hodnotného řezcího nástroje od společnosti MARTOR KG - výroce z německého Solingenu.

Více

10. Suffixové stromy 1 2014-01-23

10. Suffixové stromy 1 2014-01-23 10. Suffixové stromy V této kpitole popíšeme jednu pozoruhodnou dtovou strukturu, pomocí níž dokážeme prolémy týkjící se řetězců převádět n grfové prolémy řešit je tk v lineárním čse. Řetězce, trie suffixové

Více

2.9.16 Přirozená exponenciální funkce, přirozený logaritmus

2.9.16 Přirozená exponenciální funkce, přirozený logaritmus .9.6 Přirozná ponnciální funkc, přirozný ritmus Přdpokldy: 95 Pdgogická poznámk: V klsické gymnziální sdě j přirozná ponnciální funkc 0; j funkc y = +. Asi dvkrát vyrán jko funkc, jjíž tčnou v odě [ ]

Více

ÚČETNÍ ZÁVĚRKA V ZJEDNODUŠENÉM ROZSAHU

ÚČETNÍ ZÁVĚRKA V ZJEDNODUŠENÉM ROZSAHU ÚČETNÍ ZÁVĚRKA V ZJEDNODUŠENÉM ROZSAHU ke dni 31. prosince 215 ( údje jsou vyčísleny v celých tisících Kč ) sestvená v souldu se zákonem č. 563/1991 S. o účetnictví, ve znění pozdějších předpisů, s vyhláškou

Více

D 12 Knauf Cleaneo akustické podhledy

D 12 Knauf Cleaneo akustické podhledy D 12 07/2009 D 12 Knuf Cleneo kustické podhledy NOVINKA! Stndrdně v provedení Cleneo se smočistící schopností vzduchu D 127 - Strop z děrovných desek D 128 - Strop z desek ze štěrinmi D 127 Konstrukce

Více

TECHNICKÁ ZPRÁVA PILOTNÍHO PROJEKTU

TECHNICKÁ ZPRÁVA PILOTNÍHO PROJEKTU TECHNICKÁ ZPRÁVA PILOTNÍHO PROJEKTU Název pilotního projektu: Prktické ověření technologie "finishing feeding" v produkci siven merického v podmínkách ČR Registrční číslo pilotního projektu: CZ.1.25/3.4.00/11.00395

Více

ÚZEMNÍ STUDIE - LOKALITA ROUDNIČSKÁ HRADEC KRÁLOVÉ k.ú. TŘEBEŠ

ÚZEMNÍ STUDIE - LOKALITA ROUDNIČSKÁ HRADEC KRÁLOVÉ k.ú. TŘEBEŠ ÚZEMNÍ TUDIE - LOKLIT ROUDNIČKÁ HRDEC KRÁLOVÉ k.ú. TŘEBEŠ HLVNÍ PROJEKTNT: ing.rch Krel CHMIED ml. UTOR TVBY : ing.rch Krel chmied ml. ODPOVĚDNÝ PROJEKTNT: ing.rch Krel chmied ml. INVETOR : Mgistrát měst

Více

Strategické obecné body reprodukce (zápočet)

Strategické obecné body reprodukce (zápočet) Strategické obecné body reprodukce (zápočet) Pro dosažení kvalitní reprodukce a tím dostatečného množství životaschopného plůdku je nutné zvládnutí základních částí strategie reprodukce. Otázky ke zkoušce

Více

Datamining a AA (Above Average) kvantifikátor

Datamining a AA (Above Average) kvantifikátor Dtmining AA (Above Averge) kvntifikátor Jn Burin Lbortory of Intelligent Systems, Fculty of Informtics nd Sttistics, University of Economics, W. Churchill Sq. 4, 13067 Prgue, Czech Republic, burinj@vse.cz

Více

Riemannův určitý integrál.

Riemannův určitý integrál. Riemnnův určitý integrál. Definice 1. Budiž

Více

Metodická příručka pro žadatele o příspěvky na vybrané myslivecké činnosti

Metodická příručka pro žadatele o příspěvky na vybrané myslivecké činnosti Metodická příručk pro ždtele o příspěvky n vyrné myslivecké činnosti Prvidl poskytování finnčních příspěvků n vyrné činnosti mysliveckého hospodření v roce 04 způsou kontroly jejich využití dle Nřízení

Více

PRINCIP ZÁPISU AKORDU POMOCÍ AKORDOVÝCH ZNAČEK

PRINCIP ZÁPISU AKORDU POMOCÍ AKORDOVÝCH ZNAČEK Střed 15 Prosinec 2004 04:00 PRINIP ZÁPISU KORU POMOÍ KOROVÝH ZNČK Určitě už se vám stlo že jste nkoukli do zpěvníku chtěli zhrát nějkou olíenou píseň hned ve druhém tktu vás odrdil zápis typu 5 + /mj7/9

Více

Rovinná napjatost tenzometrická růžice Obsah:

Rovinná napjatost tenzometrická růžice Obsah: 5. leke Rovinná npjtost tenzometriká růžie Osh: 5. Úvod 5. Rovinná npjtost 5. Tenzometriká růžie 4 5.4 Posouzení přípustnosti nměřenýh hodnot deforme resp. vyhodnoenýh npět 7 strn z 8 5. Úvod Při měření

Více

Komuniké. předsedy Nejvyššího kontrolního úřadu Slovenské republiky. prezidenta Účetního dvora Slovinské republiky

Komuniké. předsedy Nejvyššího kontrolního úřadu Slovenské republiky. prezidenta Účetního dvora Slovinské republiky Komuniké předsedy Nejvyššího kontrolního úřdu Slovenské republiky prezident Účetního dvor Slovinské republiky prezident Nejvyššího kontrolního úřdu, Česká republik prezident rkouského Účetního dvor o výsledcích

Více