Diagnostická účinnost měření mědi v biologických materiálech u Wilsonovy choroby

Rozměr: px

Začít zobrazení ze stránky:

Download "Diagnostická účinnost měření mědi v biologických materiálech u Wilsonovy choroby"

Sabina Bednářová
před 8 lety
Počet zobrazení:

1 Diagnostická účinnost měření mědi v biologických materiálech u Wilsonovy choroby M.Holečková 1, M.Michajlíková 1, B.Friedecký 1, P.Dědek 2 ÚKBD 1, Dětská klinika 2, Fakultní nemocnice, Hradec Králové Sympozium FONS, Pardubice,

2 Metabolismus mědi Absorpce Cu v tenkém střevě ve formě vazby na metalothionein, kompetice se zinkem Cu vazaná na albumin a transkuprein je transportována krví, vychytávána hepatocyty V játrech se měď zabuduje do metalothioneinu a ceruloplasminu CPL (90%), Cu vázaná na CPL je transportována krví do cílových tkání Exkrece Cu stolicí, močí, žlučí

vychytávána hepatocyty V játrech se měď zabuduje do metalothioneinu a ceruloplasminu

3 Význam mědi v organismu součástí řady enzymů (aminooxidázy, cytochrom-c-oxidázy, Cu,Zn-SOD) antioxidační působení spolu s Fe nezbytná pro syntézu hemoglobinu, kolagenu součást faktoru V při srážení krve

4 Wilsonova choroba (WD) genetické autozomálně recesivní onemocnění způsobené poruchou metabolismu mědi (mutace genu ATP 7B) kumulace Cu nejprve v játrech, později v rohovce a nakonec v bazálních gangliích CNS bez terapie je fatální v časných fázích vývoje je účinně léčitelná prevalence 1 :

nejprve v játrech, později v rohovce a nakonec v bazálních gangliích CNS

5 Klinický obraz Wilsonovy choroby Asymptomatická forma <10 let zvýšené hodnoty jaterních enzymů Hepatální forma > 10 let obraz akutní nebo chronické hepatitidy až jaterní cirhózy, fulminantní průběh Neurologická forma > 18 let anatomické změny v CNS postiženy somatosenzorické funkce - tremor, dyskoordinace - písmo, oblékání Oftalmologie - Kayser-Fleischerův prstenec

fulminantní průběh Neurologická forma > 18 let anatomické změny v CNS postiženy

6 Terapie Wilsonovy choroby Dieta, léky cílem je odstranění nahromaděné Cu v organismu, snížení její toxicity Penicilamin chelační látka, tvorba komplex s Cu v postižených orgánech, vylučován močí, rychlý nástup účinku indukuce tvorby metalothioneinu v játrech, váže Cu do netoxické formy Zn - indukce tvorby metalothioneinu v buňkách sliznice GIT, blokuje resorpci Cu střevní sliznicí a zvyšuje tak vyloučení Cu stolicí - indukce tvorby metalothioneinu v játrech Transplantace jater u fulminantních stádií

metalothioneinu v játrech, váže Cu do netoxické formy Zn - indukce tvorby metalothioneinu v buňkách sliznice GIT, blokuje

7 Diagnostika Wilsonovy choroby jaterní enzymy Cu a ceruloplasminu v séru Cu v moči test s použitím penicilaminu, kdy po jeho p.o. podání dojde k výraznému zvýšení vylučování Cu močí Cu v jaterní tkáni (z jaterní biopsie) histologické a elektromikroskopické vyšetření jaterní tkáně genetické vyšetření (potvrzení mutace genu ATP 7B)

8 Metodika CPL imunoturbidimetrické stanovení, Modular, Roche Cu AAS DUO 280Z+240FS, Varian - plamenová technika (sérum) - elektrotermická technika Zeemanova korekce pozadí (moč, jaterní biopsie) Statistické hodnocení MedCalc, Belgie

(sérum) - elektrotermická technika Zeemanova korekce

9 Spolehlivost měření Cu Externí hodnocení kvality SEKK RfB (Referenzinstitut für Bioanalytik, Bonn) Vnitřní kontrola kvality kontrolní materiály: Bio-Rad Serum (FAAS) Bio-Rad Urine (ETAAS) CRM 185 Bovine Liver (ETAAS) Období 1 rok: 40 stanovení CV 7-11% BIAS do 8%

kontrolní materiály: Bio-Rad Serum (FAAS) Bio-Rad Urine (ETAAS)

10 Soubor pacientů 100 pacientů s diagnózou Wilsonovy choroby získaných z 5 krajů ČR Brno, Olomouc, Ostrava, Plzeň, HK (průměrný věk 13,3 let ± 5,1) 131 pacientů s hepatopatiemi jiné etiologie (průměrný věk 13,8 let ± 3,8 ) porovnali jsme výsledky obou souborů a diagnostickou účinnost laboratorních testů jsme ověřili ROC analýzou

hepatopatiemi jiné etiologie (průměrný věk 13,8 let ± 3,8 ) porovnali jsme

11 Výsledky Analyt Počet měření Hepatopatie S CPL 100 0,26 ± 0,08 g/l S Cu 99 17,6 ± 5,43 umol/l U Cu baz 92 0,5 ± 0,55 umol/24 U Cu baz bez fulminantních U Cu PNCA 88 0,5 ± 0,55 umol/ ,2 ± 2,93 umol/24 Cu liver 74 54,7 ± 45,9 ug/g s.t. Průměr ± SD Wilson 0,15 ± 0,09 g/l 11,2 ± 6,07 umol/l 11,4 ± 53,47 umol/24 2,3 ± 1,4 umol/24 16,3 ± 11,18 umol/24 860,5 ± 463,5 ug/g s.t. P < 0,0001 < 0,0001 0,0523 < 0,0001 < 0,0001 < 0,0001

12 Výsledky ROC analýza Analyte Cut-off optim. Cu liver 261,25 ug/g s.t. U Cu baz 0,75 umol/24 S CPL 0,2 g/l S Cu 13,8 umol/l U Cu PNCA 9,25 umol/24 Senzitivity % Specificity % Plocha pod ROC +PV -PV 98,6 99,1 0,998 98,6 99,1 95,7 85,2 0,956 83,8 96,1 83,0 77,6 0,863 76,1 84,1 82,8 77,0 0,839 78,1 81,9 70,6 93,2 0,837 94,1 67,2

13,8 umol/l U Cu PNCA 9,25 umol/24 Senzitivity % Specificity % Plocha pod ROC +PV

13 Výsledky - ROC analýza Sensitivity Bio Cu U_Cu_bazal S CPL S Cu U_Cu_PNCA Specificity

14 Diagnostický postup při podezření na Wilsonovu chorobu ve FN HK 1.krok bazální odpad Cu v moči /24 hod 2.krok stanovení obsahu Cu v jaterní biopsii histologie, elektronová mikroskopie penicilaminový test nepřináší další výhody genetické vyšetření potvrzení diagnózy, rodinný screening (negativní vyšetření nevylučuje diagnózu WN)

krok stanovení obsahu Cu v jaterní biopsii histologie, elektronová mikroskopie

15 Závěr plocha pod křivkou ROC, která kvantifikuje klinickou efektivitu testu, byla největší u stanovení Cu v jaterní tkáni stanovení Cu v jaterní tkáni lze považovat společně s genetickými metodami za diagnostický zlatý standard biochemická laboratoř tak přístrojově, metodicky i personálně významně přispívá ke správné diagnostice Wilsonovy choroby a její úspěšné léčbě

genetickými metodami za diagnostický zlatý standard biochemická laboratoř tak přístrojově,

16 Děkuji za pozornost

Podobné dokumenty

Sledování olova v krvi u exponovaných osob

Sledování olova v krvi u exponovaných osob M.Holečková, M.Michajlíková, L.Pavlíková Ústav klinické biochemie a diagnostiky Fakultní nemocnice, Hradec Králové Sympozium FONS, Pardubice, 21.-23.9.2014 Úvod