ST AIA-PACK ucpsaii POTŘEBNÉ MATERIÁLY, KTERÉ NEJSOU SOUČÁSTÍ DODÁVKY ÚČEL POUŽITÍ SHRNUTÍ A VYSVĚTLENÍ TESTU PRINCIP STANOVENÍ DODÁVANÝ MATERIÁL

Transkript

1 EU rev. UCPA Upozornění: Tento návod k použití je v souladu se směrnicí IVD 98/79/ES a je určen pro zákazníky z členských států Evropské unie. ÚČEL POUŽITÍ ST AIA-PACK ucpsaii ST AIA-PACK ucpsaii je určený pouze pro diagnostické použití in vitro a smí být používán pouze ke kvantitativnímu měření frakce prostatického specifického antigenu (ucpsa) v séru nebo heparinizované plazmě, která není součástí komplexu, na analyzátorech systému Tosoh AIA. SHRNUTÍ A VYSVĚTLENÍ TESTU Prostatický specifický antigen (PSA) byl identifikován v roce 1977 Wang a kol. (1). PSA je jednořetězcový glykoprotein o molekulární hmotnosti přibližně 34 kilodaltonů, který obsahuje 7 % sacharidů (2). Přítomnost PSA byla prokázána v normální, benigně hyperplastické a maligní prostatické tkáni, u metastatického karcinomu prostaty a také v prostatické tekutině a semenné plazmě (5). Avšak PSA není přítomný v žádné jiné tkáni u mužů a není produkován karcinomy prsu, plic, tlustého střeva, rekta, žaludku, slinivky břišní nebo štítné žlázy (6). Zvýšené hladiny sérového PSA byly hlášeny u pacientů s karcinomem postaty, benigní hypertrofií prostaty nebo zánětlivými stavy ostatních přilehlých močově-pohlavních tkání. (3,7) V séru existuje ve volné formě a ve formě komplexů s řadou inhibitorů proteáz. PSA v séru vytváří stabilní komplexy s ACT a α 2 -makroglobulinem. Komplex ACT-PSA představuje většinovou frakci cirkulujícího PSA, avšak méně u pacientů s benigní hyperplazií prostaty (BHP) než u pacientů s karcinomem prostaty. ACT-PSA komplex a volná frakce PSA jsou imunologicky detekovatelné formy PSA v séru. Frakce PSA, která není součástí komplexu, pomáhá vedle celkové hladiny PSA při rozlišení mezi BPH a karcinomem prostaty. Bylo prokázáno, že stanovení různých forem PSA je užitečné při rozlišení mezi karcinomem prostaty a hyperplazií. Mezi pacienty se zvýšenými koncentracemi PSA mají muži s karcinomem prostaty tendenci přítomnosti relativně vyšší hladiny komplexu ACT-PSA než muži s BHP. PRINCIP STANOVENÍ Komplex ACT-PSA je precipitován a poté je frakce PSA, která není součástí komplexu, stanovena pomocí ST AIA-PACK ucpsaii. ST AIA-PACK ucpsaii je dvoumístná imunoenzymometrická analýza, která je celá prováděná v testovacích kelímcích ST AIA-PACK ucpsaii. PSA, který není vázaný v komplexu, přítomný v testovaném vzorku se váže na monoklonální protilátku imobilizovanou na magnetických zrnech a enzymem označenou monoklonální protilátku v ST AIA-PACK ucpsaii. Magnetická zrna jsou promytím zbavena nenavázaných, enzymem značených monoklonálních protilátek a jsou pak inkubována s fluorogenním substrátem, 4-methylumbeliferylfosfátem (4MUP). Množství enzymem značené monoklonální protilátky, která se váže na zrna, je přímo úměrné koncentraci frakce PSA, která není vázána v komplexu, v testovaném vzorku. Je vynesena standardní křivka a neznámé koncentrace vzorků jsou vypočítány pomocí této křivky. DODÁVANÝ MATERIÁL Katalogové č Plastové testovací kelímky obsahující dvanáct lyofilizovaných magnetických zrn potažených myší monoklonální protilátkou proti PSA a 100 µl myší monoklonální protilátky proti PSA (proti lidskému PSA) konjugovaných s hovězí alkalickou fosfatázou s azidem sodným jako konzervační látkou Roztok pro předúpravu: Roztok obsahující precipitát pro komplex ACT-PSA s 0,09% azidem sodným jako konzervační látkou. POTŘEBNÉ MATERIÁLY, KTERÉ NEJSOU SOUČÁSTÍ DODÁVKY Následující materiály jsou požadovány pro provedení analýzy frakce prostatického specifického antigenu, který není vázán v komplexu, pomocí ST AIA-PACK ucpsaii (kat. č ) na analyzátorech systému Tosoh AIA. Následující materiály společnost Tosoh dodává samostatně. Materiály Kat. č. AIA Nex IA nebo AIA AIA Nex IA nebo AIA-21 LA AIA-1800, AIA-900 ST AIA-1800, AIA-900 LA AIA-2000 ST AIA-2000 LA AIA-600 II AIA-600 II BCR AIA AIA AIA-PACK SUBSTRATE SET II AIA-PACK SUBSTRATE REAGENT II/AIA-PACK SUBSTRATE RECONSTITUENT II ST AIA-PACK PSAII CALIBRATOR SET CALIBRATOR (1) 0 ng/ml CALIBRATOR (2) 0.2 ng/ml (přibližně) CALIBRATOR (3) 2 ng/ml (přibližně) CALIBRATOR (4) 10 ng/ml (přibližně) CALIBRATOR (5) 50 ng/ml (přibližně) CALIBRATOR (6) 110 ng/ml (přibližně) ST AIA-PACK PSAII SAMPLE DILUTING SOLUTION ST AIA-PACK ucpsaii PRETREATMENT AIA-PACK WASH CONCENTRATE AIA-PACK DILUENT CONCENTRATE KELÍMKY NA VZORKY AIA-PACK DETECTOR STANDARDIZATION TEST CUP AIA-PACK SAMPLE TREATMENT CUP Další požadavky pouze pro AIA Nex IA /AIA-21: PIPETOVACÍ ŠPIČKY PŘEDEM VLOŽENÉ PIPETOVACÍ ŠPIČKY Další požadavky pouze pro AIA-600 II, AIA-1800, AIA-900 a AIA-2000: PIPETOVACÍ ŠPIČKY STOJAN PRO PIPETOVACÍ ŠPIČKY PŘEDEM VLOŽENÉ PIPETOVACÍ ŠPIČKY Používejte pouze materiály dodané společností Tosoh. Nepoužívejte náhradní materiály získané z jiných zdrojů, protože výkonnost testu je charakterizována přísně na základě materiálů společnosti Tosoh. VAROVÁNÍ A BEZPEČNOSTNÍ OPATŘENÍ 1. ST AIA-PACK ucpsaii je určen pouze pro diagnostické použití in vitro. 2-12

2 2. Před použitím zkontrolujte obal a vnější povrch hliníkového obalu, zda nejsou poškozeny. Pokud jsou patrná jakákoli poškození, kontaktujte vašeho místního obchodního zástupce společnosti Tosoh. 3. ST AIA-PACK ucpsaii obsahuje azid sodný, který může reagovat s olověným nebo měděným potrubím za vzniku potenciálně výbušných azidů kovu. Při likvidaci těchto činidel do kanalizace je vždy spláchněte velkým množstvím vody, aby nedocházelo k hromadění azidu. 4. Při přípravě tohoto výrobku není používáno lidské sérum. Protože však pro přípravu vzorků budou používány lidské vzorky a další výrobky pro kontrolu kvality v laboratoři mohou být deriváty lidského séra, dodržujte prosím při manipulaci se všemi vzorky a kontrolními vzorky standardní laboratorní bezpečnostní opatření. 5. Nepoužívejte po uplynutí data exspirace. 6. ST AIA-PACK ucpsaii byl navržený tak, aby u převážné většiny vzorků nedocházelo k problémům způsobeným zakřivením kalibrační křivky při vysokých koncentracích, tzv. hook effect. Vzorky s koncentracemi PSA mezi 100 a ng/ml budou odečteny jako >100 ng/ml. K jevu zakřivení kalibrační křivky ( hook effect ) může dojít při koncentracích PSA vyšších než ng/ml. 7. Pro bezpečnou likvidaci odpadu se doporučuje, aby každá laboratoř dodržovala zavedené laboratorní postupy a místní, národní či federální nařízení. SKLADOVÁNÍ A STABILITA Veškeré neotevřené materiály jsou stabilní do data exspirace uvedeného na štítku, jsou-li uchovávány při specifikované teplotě. Materiály Kat. č. 2 8 C: ST AIA-PACK ucpsaii ST AIA-PACK PSA II CALIBRATOR SET ST AIA-PACK PSA II SAMPLE DILUTING SOLUTION ST AIA-PACK ucpsaii PRETREATMENT AIA-PACK SUBSTRATE SET II AIA-PACK WASH CONCENTRATE AIA-PACK DILUENT CONCENTRATE C: AIA-PACK DETECTOR STANDARDIZATION TEST CUP AIA-PACK SAMPLE TREATMENT CUP Po otevření hliníkového sáčku mohou být testovací kelímky ST AIA-PACK ucpsaii ponechány v analyzátorech systému TOSOH AIA (18 25 C) po dobu maximálně 10 dnů (10 x 24 hodin). Pokud jsou skladovány přes noc při teplotě 2 8 ºC, lze testovací kelímky použít po dobu maximálně 30 dnů (30 cyklů každý trvající 8 hodin v analyzátoru a 16 hodin v chladničce) Po otevření hliníkového sáčku se testovací kelímky musí spotřebovat do 30 dnů. - Materiály kalibračních roztoků by měly být spotřebovány do 1 dne od otevření, za předpokladu, že jsou lahvičky těsně uzavřeny a uloženy v chladu při teplotě 2 8 C. - Po otevření bude ST AIA-PACK ucpsaii PRETREATMENT stabilní po dobu až 90 dnů, pokud je zchlazený na teplotu 2 8 C. - Po otevření bude sample dılutıng solutıon Stabilní po dobu až 7 dnů, pokud je skladován zchlazený na teplotu 2-8 C. Po dosažení teploty C by měl být spotřebován do přibližně 30 minut. Roztok pro ředění vzorků může být používán až 90 dnů, za předpokladu, že: 1) je používán POUZE k ručnímu ředění; 2) lahvičky jsou vždy bezprostředně po použití těsně uzavřeny a uloženy v chladničce. - Měly by být použité po dosažení teploty C za přibližně 30 minut Rekonstituovaný roztok substrátu je stabilní 3 dny při teplotě C nebo 7 dnů při teplotě 2 8 C. - Pracovní ředidlo a promývací roztoky budou stabilní po dobu 30 dnů při teplotě C. - Činidla nesmí být užívána, když se jeví zakalená či zabarvená. ODBĚR VZORKŮ A MANIPULACE S NIMI Pro stanovení je nutno použít sérum nebo heparinizovanou plazmu. NESMÍ BÝT POUŽITA EDTA nebo citrátová plazma. Není nutná žádná zvláštní příprava pacienta. Používá-li se sérum, vzorek žilní krve se odebírá asepticky bez konzervačních látek. Uchovávejte při teplotě C než se vytvoří sraženina (obvykle minut), pak odstředěním získejte vzorek séra pro test. Používá-li se heparinizovaná plazma, vzorek žilní krve se odebírá asepticky s určeným aditivem. Co nejdříve odstřeďte a oddělte plazmu od sedimentovaných buněk. Během sériového sledování jednotlivého pacienta nestřídejte druhy vzorků. U určitých pacientů se mohou koncentrace naměřené v různých druzích vzorků poněkud lišit. Protože existuje kontroverzní názor, zda jakákoli manipulace s prostatou ovlivňuje výsledky PSA, musí být vzorky odebírány před provedením jakéhokoli výkonu na prostatě, jako je například digitální vyšetření per rektum, masáž prostaty a transrektální ultrazvuk. Před provedením analýzy mohou být vzorky uloženy při teplotě 2 8 C po dobu maximálně 24 hodin. Nelze-li analýzu provést do 24 hodin, musí být vzorek uchováván zmražený při teplotě -20 C nebo nižší po dobu maximálně 60 dnů. Zabraňte opakovanému zmrazování a rozmrazování vzorků. Zakalené vzorky séra nebo vzorky, které obsahují částice hmoty, musí být před analýzou odstředěny. Před analýzou pomalu ponechte vzorky dosáhnout teploty C a jemně je promíchejte. Všechny vzorky vyžadují předúpravu. Předupravené vzorky musí být analyzovány během 10 až 60 minut po dokončení postupu předúpravy. Objem vzorku potřebný pro analýzu je 100 µl. POSTUP Podrobné pokyny pro AIA Nex IA / AIA-21, AIA-600 II, AIA-1800, AIA-900, AIA-2000 a AIA-360 naleznete v jejich uživatelském manuálu. I. Příprava činidla A. Substrátový roztok Před přípravou roztoku pracovního substrátu ponechte všechna činidla dosáhnout teploty C. Přidejte jednu lahvičku AIA-PACK SUBSTRATE RECONSTITUENT II k lyofilizovanému AIA-PACK SUBSTRATE REAGENT II a důkladně promíchejte, aby se všechny pevné materiály rozpustily. B. Promývací roztok Přidejte celý obsah AIA-PACK WASH CONCENTRATE (100 ml) k přibližně 2,0 l vody reagenční čistoty třídy I CAP nebo typu I NCCLS, dobře promíchejte a upravte konečný objem na 2,5 l. C. Ředicí roztok Přidejte celý obsah AIA-PACK DILUENT CONCENTRATE (100 ml) k přibližně 4,0 l vody reagenční čistoty třídy I CAP nebo typu I NCCLS, dobře promíchejte a upravte konečný objem na 5,0 l. D. Činidlo pro předúpravu ST AIA-PACK ucpsaii PRETREATMENT je dodáván připravený k použití. 4-12

3 II. Postup předošetření Všechny vzorky (lidské sérum, kontrolní vzorky a kalibrační roztoky) musí před analýzou v analyzátorech systému Tosoh AIA předpřipraveny. Na AIA Nex IA / AIA-21, AIA-600 II, AIA-1800, AIA-900 a AIA-2000 se předúprava provádí automaticky pomocí parametrů definovaných v testovém souboru. Na AIA-360 proveďte následující manuální postup předúpravy. Pokud je vyžadována manuální předúprava AIA Nex IA / AIA-21, AIA-600 II, AIA-1800, AIA-900 a AIA-2000, dodržujte pokyny pro postup manuální předúpravy. Předupravené vzorky musí být analyzovány během 10 až 60 minut po dokončení postupu předúpravy Postup automatické předúpravy 1. Pretreatment a vzorky nechte vytemperovat na teplotu 18 až 25 C. 2. Umístěte pretreatment na určenou pozici v kazetě s činidly, jak je definováno v REGISTRACI ČINIDLA. Poznámka: ST AIA-PACK ucpsaii vyžaduje pouze jednu předúpravu. Je třeba pak umístit druhou lahvičku na pozici pretreatment 2 naplněnou naředěným AIA-PACK DILUENT CONCENTRATE (kat. číslo ). 3. Do přístroje umístěte příslušný počet kelímků na vzorky / primárních zkumavek AIA-PACK SAMPLE TREATMENT CUP a ST AIA-PACK ucpsaii TEST CUP. Postup manuální předúpravy Poznámka pro AIA-600 II, AIA-21, AIA-1800, AIA-900 a AIA-2000: Nastavte všechny parametry předúpravy v testové souboru pro manuální předúpravu (pro AIA-600 II a AIA-900 nastavte všechny parametry SMPL, VOL1, VOL2 a CODE na nulu. Pro AIA Nex IA / AIA-21, AIA-1800 a AIA-2000 nastavte předúpravu na nulu). 1. Pretreatment a vzorky nechte vytemperovat na teplotu 18 až 25 C. 2. Pipetou přeneste 100 µl vzorku (sérum, kontrolní vzorek, kalibrační roztok) do kelímku na vzorek a přidejte 100 µl ST AIA-PACK ucpsaii PRETREATMENT. Alternativně můžete přidat 300 µl vzorku k 300 µl ST AIA-PACK ucpsaii PRETREATMENT ve zkumavce na vzorky. 3. Inkubujte po dobu 10 minut při teplotě C. 4. Vzorky musí být analyzovány během 10 až 60 minut po přidání ST AIA-PACK ucpsaii PRETREATMENT. III. Postup kalibrace A. Kalibrační křivka Kalibrační roztoky pro použití s ST AIA-PACK ucpsaii jsou připraveny gravimetricky a jsou standardizovány podle WHO IS PSA (90:10), NIBSC kód 96/670. Kalibrační křivka pro ST AIA-PACK ucpsaii bude stabilní až 90 dnů. Stabilita kalibrace je sledována prováděním kontroly kvality a závisí na správné manipulaci s činidlem a na řádné údržbě systému Tosoh AIA podle pokynů výrobce. Opětovná kalibrace může být nutná častěji, když jsou kontroly mimo stanovené rozmezí pro tento test nebo když jsou prováděny určité servisní postupy (např. nastavení teploty, změny mechanismu odběru vzorků, údržba promývací sondy nebo nastavení či výměna žárovky detektoru). Kalibrační křivka vzorku z AIA-1800 sleduje a znázorňuje algoritmus použitý při výpočtu výsledků. B. Postup kalibrace 1. Pokyny k postupu viz příslušný uživatelský manuál systému Tosoh AIA. 2. Ověřte, že kalibrační šarže a čísla koncentrací byly správně zadány do softwaru. 3. Kalibrační roztoky pro ST AI-PACK ucpsaii jsou dodávány připraveny k použití. Společnost Tosoh doporučuje, aby všechny kalibrační roztoky byly spuštěny dvojmo. 4. Ověřte, že PRETREATMENT-1 (a ještě jedna lahvička navíc) byl umístěn do kazety na činidla tak, jak bylo definováno v REGISTRACI ČINIDLA. Další pokyny o postupu REGISTRACE ČINIDLA naleznete v uživatelském manuálu systému Tosoh AIA. C. Kritéria přijatelnosti kalibrace 1. Průměrná rychlost pro CALIBRATOR (1) má být < 1 nmol/(l s). 2. Vzhledem k tomu, že existuje přímý vztah mezi koncentrací a rychlostí, musí rychlost vzrůstat s narůstající koncentrací. 3. Opakující se hodnoty musí být v rozmezí 10%. D. Kontrola kalibrace a přijetí 1. Pečlivě zkontrolujte křivku kalibrace a použijte výše uvedená kritéria. 2. Je-li to nutné, editujte kalibraci a potom kalibraci akceptujte. Podrobné informace o kalibraci naleznete v uživatelském manuálu systému Tosoh AIA. IV. Postup kontroly kvality A. Komerčně dostupné kontroly Komerčně dostupné kontroly by měly být spuštěny nejméně jednou denně. Doporučuje se, aby byly použity nejméně dva stupně kontrol, normální a abnormální. Metoda laboratoře pro tento určitý test specifikuje následující: Kontrolní materiál: Frekvenci: Číslo šarže kontrolního materiálu, přijatelné limity a nápravná opatření v případě, že kontroly nesplní laboratorní kritéria, můžete nalézt ve zvláštním dokumentu o kontrole kvality, který je v laboratoři

4 B. Postup kontroly kvality 1. Proveďte analýzu vzorků kontroly kvality dle pokynů specifického uživatelského manuálu pro váš analyzátor. Podrobné pokyny o definici a editaci souborů naleznete v uživatelském manuálu systému Tosoh AIA. 2. Materiál kontroly kvality, který má projít tímto testem, je specifikovaný individuální metodou laboratoře. V. Zpracování vzorků A. Příprava Podle specifických pokynů v uživatelském manuálu analyzátoru příslušným způsobem umístěte vzorky do přístroje. Primární zkumavky a také kelímky na vzorky jsou kódovány čárovým kódem a mohou být použité v AIA Nex IA / AIA-21, AIA-600 II, AIA-1800, AIA-900, AIA-2000 a AIA-360. B. Postup analýzy 1. Poskytněte dostatečné množství testovacích kelímků ST AIA-PACK ucpsaii pro počet vzorků, které mají být analyzovány. 2. Vložte vzorky pacienta podle pokynů v uživatelském manuálu a pokračujte v analýze. Poznámka: AIA-PACK SAMPLE TREATMENT CUP bude vyžadován AIA Nex IA/AIA-21, AIA-600 II, AIA-1800, AIA-900 a AIA Ověřte, že PRETREATMENT-1 a ještě jedna lahvička navíc byly umístěny do kazety na činidla tak, jak bylo definováno v REGISTRACI ČINIDLA. Další pokyny o postupu REGISTRACE ČINIDLA naleznete v uživatelském manuálu systému Tosoh AIA. POZNÁMKY K POSTUPU 1. Lyofilizovaný substrát musí být zcela rozpuštěn. 2. Ligandové analýzy prováděné analyzátory systému Tosoh AIA vyžadují, aby laboratoř používala vodu označenou Společností amerických patologů třídou I nebo podle NCCLS typem I. Voda musí být testována nejméně jednou měsíčně a neměla by osahovat částicovou hmotu včetně bakterií. ph vody by mělo být také pravidelně testováno. Další informace naleznete v dokumentu NCCLS Příprava a testování reagenční vody v klinické laboratoři, dokument NCCLS C3-A3, svazek 11, č. 13, původně odsouhlaseném jako směrnice NCCLS v říjnu Vyskytne-li se vzorek obsahující koncentraci PSA, který není vázaný na komplex, vyšší, než je horní hranice rozsahu testu, tedy 100 ng/ml, musíte tento vzorek naředit ST AIA-PACK PSA II SAMPLE DILUTING SOLUTION a opět provést analýzu podle postupu analýzy. Doporučené ředění pro vzorky obsahující koncentraci větší než 100 ng/ml je 1:10 nebo 1:100. Je žádoucí takové ředění vzorků, aby byl odečet naředěného vzorku mezi 2 a 100 ng/ml. Ředění může být provedeno ručně nebo naprogramováno do analyzátoru. Pokud jsou užívány ruční ředění, faktor ředění musí být zadán do softwaru. Další informace o automatických ředěních vzorků naleznete v uživatelském manuálu systému TOSOH AIA. 4. V analyzátorech systémů Tosoh AIA mohou být současně uloženy dvě různé kalibrační křivky pro každý analyt. Tak mohou být v rámci téhož cyklu použity dvě různé šarže testovacích kelímků ST AIA-PACK ucpsaii. 5. Nejsou-li pro tento test specifikace analýzy připraveny v softwaru systému, musí být specifikace zadány pod kódem testu 019. VÝPOČET VÝSLEDKŮ Analyzátory systémů Tosoh AIA provádějí všechny operace manipulací se vzorky a činidly automaticky. Analyzátory systémů Tosoh AIA odečítají míru fluorescence generované reakcí a automaticky ji převádějí na míru koncentrace ucpsa v ng/ml. U vzorků vyžadujících ředění provedou systémy AIA Nex IA/AIA-21, AIA-600 II, AIA-1800, AIA-900 a AIA-2000 automaticky ředění a vypočtou výsledky, pokud byly faktory ředění zadány do softwaru. Pro AIA-360 musí být konečné výsledky vypočteny ručně vynásobením výsledků hlášených přístrojem faktorem ředění. Podrobné informace o programování ředění naleznete v příslušném uživatelském manuálu. VYHODNOCENÍ VÝSLEDKŮ Kontrola kvality Za účelem sledování a vyhodnocení přesnosti analytické výkonnosti se doporučuje v souladu s místními nařízeními analyzovat komerčně dostupné kontrolní vzorky. Minimální doporučená frekvence zpracování interního kontrolního materiálu je: Po kalibraci je spuštěna třístupňová analýza interních kontrolních vzorků, aby byla akceptována kalibrační křivka. Tři stupně kontrol jsou opakovány, když jsou provedeny určité servisní postupy (např. nastavení teploty, změna mechanismu pro odběr vzorků, údržba promývací sondy nebo nastavení či výměna žárovky detektoru). K ověření celkového výkonu analyzátorů systému Tosoh AIA by měl být po denní údržbě provedený nejméně dva stupně kontroly. Je-li jedna nebo více hodnot kontrolního vzorku(ů) mimo přípustné rozmezí, bude před ohlášením výsledků pacientů nutné prošetřit validitu kalibrační křivky. Je nutno dodržovat standardní laboratorní postupy podle přísného zákonného orgánu, který na provoz laboratoře dohlíží. OMEZENÍ Pro diagnostické účely je nutné využívat výsledky tohoto testu společně s dalšími údaji (např. symptomy, výsledky dalších testů, klinickými dojmy, léčbou atd.). Při používání soupravy ST AIA-PACK ucpsaii je nejvyšší měřitelná koncentrace PSA, který není vázaný v komplexu, bez ředění 100 ng/ml a nejnižší měřitelná koncentrace je 0,01 ng/ml (citlivost testu). Přestože přibližná hodnota koncentrace nejvyššího kalibračního roztoku je 110 ng/ml, přesná koncentrace se může poněkud lišit. Specifikaci testu ASSAY RANGE HIGH (VYSOKÝ ROZSAH TESTU) je nutno definovat jako horní hranici rozsahu testu, 100 ng/ml. Přestože hemolýza nemá významný vliv na test, mohou hemolyzované vzorky poukazovat na špatné zacházení se vzorkem před analýzou a výsledky je nutno interpretovat opatrně. Lipémie má na test nevýznamný vliv, kromě případu silné lipémie, kdy může dojít k prostorové interferenci. Vzorky pacientů, kteří užívají léky a/nebo u kterých probíhá léčba, mohou vykazovat chybné výsledky. Vzorky od pacientů, kterým byly podány přípravky myších monoklonálních protilátek k diagnostice nebo terapii, mohou obsahovat lidské protilátky proti myším (HAMA). Takové vzorky mohou vykazovat falešně zvýšené hodnoty PSA. Pro úplnější pochopení omezení tohoto postupu, si laskavě přečtěte oddíly ODBĚR A MANIPULACE SE VZORKY, VAROVÁNÍ A BEZPEČNOSTNÍ OPATŘENÍ, SKLADOVÁNÍ A STABILITA a POZNÁMKY K POSTUPU této příbalové informace

5 PŘEDPOKLÁDANÉ HODNOTY Výsledky ST AIA-PACK ucpsaii musí být interpretovány v kombinaci s celkovým PSA (ST AIA-PACK PSAII kat. číslo ). Každá laboratoř by měla stanovit referenční interval, který odpovídá charakteristikám testované populace. Podobně jako u všech diagnostických postupů musí být klinické výsledky interpretovány s ohledem na léky, které jsou současně podávány pacientovi. Výsledky testu ST AIA-PACK ucpsaii nesmí být interpretovány jako definitivní výsledky na přítomnost nebo nepřítomnost karcinomu prostaty. Pacienti s hladinami PSA v referenčním rozmezí se mohou objevovat i u zjevně zdravých subjektů, které mohou mít karcinom prostaty; pacienti s hladinami přesahujícími referenční interval nemusí trpět karcinomem prostaty. Výsledky ST AIA-PACK ucpsaii musí být interpretovány ve světle ostatních klinických nálezů a diagnostických postupů, jako například vyšetření per rectum. Biopsie prostaty je v současnosti lékařsky uznávanou normou používanou k potvrzení přítomnosti / nepřítomnosti karcinomu prostaty. Níže uvedené výsledky byly stanoveny ve vzorcích séra od 166 evropských mužů, z nichž u 53 byl potvrzený karcinom prostaty a u 113 byla potvrzena BHP. Tyto výsledky lze použít jako návod k rozlišení mezi BHP a karcinomem prostaty. Diagnostická hodnota PSA frakce, která není vázaná v komplexu, musí být zhodnocena ve funkci s celkovou koncentrací PSA. Pokud se koncentrace celkového PSA nachází v rozmezí uvedeném v prvních dvou sloupcích a koncentrace ucpsa je nižší než hodnota ve třetím sloupci, je pravděpodobnost karcinomu 85 %; pokud je hodnota ucpsa vyšší než hodnota ve čtvrtém sloupci, je pravděpodobnost BHP 85 %. Pro celkový PSA: PSA nevázaný v komplexu Od Do Nižší než Vyšší než Konverzní faktory Koncentrace PSA v této aplikaci jsou vyjádřeny v jednotkách ng/ml. Konverze na jednotky SI soustavy µg/l může být provedena s použitím následující rovnice: µg PSA/l = ng PSA/ml x 1, VÝKONNOSTNÍ CHARAKTERISTIKY Následující výkonnostní charakteristiky byly stanoveny pomocí TOSOH AIA-1800 Automated Immunoassay Analyser. ŔEDĚNÍ a. Tři vzorky séra obsahující vysoké koncentrace ucpsa byly sériově naředěny pomocí ST AIA-PACK PSAII SAMPLE DILUTING SOLUTION a analyzovány. Vzorek Faktor ředění Předpokládaná hodnota (ng/ml) Naměřená hodnota (ng/ml) Procento výtěžnosti (%) Vzorek A žádný / / / Vzorek B žádný / / / Vzorek C žádný / / / PŘESNOST a. Variační koeficient v rámci analýzy byl hodnocen ve třech kontrolních vzorcích 20 opakovanými měřeními. Vzorek Průměr SO Variační (ng/ml) (ng/ml) koeficient (%) Sérum A Sérum B Sérum C b. Variační koeficient mezi analýzami byl hodnocen ve třech kontrolních vzorcích 20 opakovanými měřeními. Vzorek Průměr SO Variační (ng/ml) (ng/ml) koeficient (%) Sérum A Sérum B Sérum C KORELACE Korelace mezi sérem (x) a heparinizovanou plazmou (y) v ST AIA-PACK ucpsaii byla provedena s použitím 21 pacientských vzorků. Směrnice Průsečík s osou y Korelační koeficient Rozmezí vzorků Počet vzorků

6 SPECIFICITA Zkřížená reaktivita byla testována u následujících látek. Zkřížená reaktivita (%) je procento látky, které bude identifikováno jako PSA. Jsou-li ve vzorku přítomny tyto látky ve stejné koncentraci jako ucpsa, bude konečný výsledek zvýšen o tato procenta. Látka Zkřížená reaktivita (%) PAP < 0.01 SENZITIVITA Minimální detekovatelná koncentrace (MDC) ucpsa byla stanovena jako 0,01 ng/ml. Minimální detekovatelná koncentrace (MDC) je definována jako taková koncentrace ucpsa, která odpovídá míře fluorescence, jež je dvě směrodatné odchylky od průměrné míry fluorescence dvaceti opakovaných stanovení pomocí CALIBRATOR (1). INTERFERENCE Interference je pro účely této studie definovaná jako výtěžnost přesahující 10 % známé průměrné hodnoty koncentrace vzorku po přidání následujících látek ke vzorkům pacienta. Hemoglobin (až do 445 mg/dl), bilirubin (až do 16 mg/dl) neinterferují s testem. Lipémie indikovaná koncentrací triglyceridů (do mg/dl) neinterferuje s testem. Kyselina askorbová (do 20 mg/dl) neinterferuje s testem. Bílkoviny, jak ukazuje koncentrace lidského albuminu (až do 50 mg/ml), neinterferují s tímto testem. Heparin (do 100 U/ml) neinterferuje s testem. REFERENCE 1. Wang, M.C., et al., Fed. Proc. 36:1254, Wang, M.C., Valenzuela, L.A., Murphy, G.P., and Chu, T.M., Purification of a Human Prostate Specific Antigen. Invest. Urol. 17:159, Papsidero, L.D., Wang, M.C., Valenzueal, L.A., Murphy, G.P., and Chu, T.M., A Prostate Antigen in Sera of Prostatic Cancer Patients. Cancer Res. 40:2428, Nadji, M, Tabei, SZ, Castro, A, Chu, TM, Murphy, GP, Wang, MC, and Morales, AR, Prostatic-Specific Antigen: An Immunohistologic Marker for Prostatic Neoplasms. Cancer 48:1229, Wang, M.C., Papsidero, L.D., Kuriyama, M., Valenzuela, L.A., Murphy, G.P., and Chu, T.M., Prostatic Antigen: A New Potential Marker for Prostatic Cancer. Prostate 2:89, Frankel, AG, Rouse, RV, Wang, MC, Chu, TM, and Herzenberg, LA, Monoclonal Antibodies to a Human Prostate Antigen. Cancer Res. 42:3714, Kuriyama, M., Wang, M.C., Papsidero, L.D., Killian, C.S., Shimano, T., Valenzuela, L.A., Nishimura, T., Murphy, G.P., and Chu, T.M., Quantization of Prostatic-Specific Antigen in Serum by a Sensitive Enzyme Immunoassay. Cancer Res. 40:4658, Killian, CS, Yang, N, Emrich, LJ, Vargas, FP, Kuriyama, M, Wang, MC, Slack, NH, Papsidero, LD, Murphy, GP, and Chu, TM, Prognostic Importance of Prostatic-Specific Antigen for Monitoring Patients with Stage B2 to D1 Prostate Cancer, Cancer Res 45:886, Kuriyama, M, Wang, MC, Lee, CL, Killian, CS, Papsidero, LD, Inaji, H, Loor, RM, Lin, MF, Nishimura, T, Slack, NH, Murphy, GP, and Chu, TM, Multiple Marker Evaluation in Human Prostate Cancer with the Use of Tissue-Specific Antigens. J. Nat. Canc. 68:99, Thiel, Robert P, Oesterling, Joseph E, Luderer, Albert A, Multicenter comparison of the diagnostic performance of free Prostate Specific Antigen. Urology (48) 45-50, Marley, Garry M, Miller, M Craig, Veltri, Robert W, Free and complexed Prostate Specific Antigen serum ratios to predict probability of primary prostate cancer and benign prostatic hyperplasia. Urology (48) 16-22, Van Cangh, Paul J, De Nayer, Philippe, Opsomer, Reinier, Free to total Prostate Specific Antigen (PSA) ratio improves the discrimination between prostate cancer and benign prostatic hyperplasia (BPH) in the diagnostic gray zone of 1,8 to 10 ng/ml total PSA. Urology (48) 67-70, Partin, Alan W, Catalona, William J, Chan, Daniel W, Analysis of percent free Prostate Specific Antigen (PSA) for prostate cancer detection: influence of total PSA, prostate volume, and age. Urology (48) 55-61, Reissigl, Andreas, Klocker, Helmut, Bartsch, Georg, Usefulness of the ratio free/total Prostate Specific Antigen in addition to total PSA levels in Prostate Cancer screening. Urology (48) 62-66, G. Alivizatos, C. Deliveliotis, D. Mitropoulos, G. Raptides, G. Louras, A. Karayiannis, T. Becopoulos, A. Dimopoulos, Does free to total ratio of prostate-specific antigen alter decision-making on prostatic biopsy?. Urology (48) 71-75, Vashi, Apoorva R, Wojno, Kirk J, Oesterling, Joseph E, Determination of the reflex range & appropriate cut points for percent free Prostate Specific Antigen in 413 men referred for prostatic evaluation using the AxSym system. Urology (49) 19-27, Pearson, Jay D et al. Longitudinal analysis of serial measurements of free and total PSA among men with and without prostatic cancer. Urology (48) 4-9, TOSOH EUROPE N.V. Transportstraat 4 B-3980 TESSENDERLO BELGIE Tel.: +32 (0) Fax: +32 (0) Objem netto (po rekonstituci pro lyofilizovaný materiál) 12-12