U - Albumin. Axis - Shield SINGLE TEST. Společnost je zapsána v obchodním rejstříku Městského soudu v Praze, odd. C vložka 1299

Transkript

1 Lékařská technika a speciální zdravotní materiál Společnost je zapsána v obchodním rejstříku Městského soudu v Praze, odd. C vložka 1299 Obchodní 110, Praha Čestlice Tel Fax U - Albumin SINGLE TEST Axis - Shield

2 NycoCard U - Albumin SINGLE TEST pro stanovení mikro albuminu v moči Popis testu Klinické použití NycoCard U- Albumin je rychlý imunochemický test pro stanovení mikro- albuminu v lidské moči. Princip testu NycoCard U-Albumin je založen na principu imunofiltrační metody. Testovací kazety obsahují membránu s monoklonální protilátkou specifickou pro albumin. Vzorky moči jsou aplikovány do jamek na testovacích kazetách. Vzorek prosákne do testovací kazety. Procházející molekuly albuminu se naváží na protilátky, které jsou navázané na membránu. Konjugační roztok obsahuje specifické monoklonální protilátky, konjugované ultra malými částečkami zlata. U-Albumin navázaný na membráně reaguje s protilátkou konjugovanou zlatem na principu sendvičové metody. Přebytečný konjugát je vymyt z membrány promývacím roztokem. Papírová vrstva pod membránou absorbuje přebytečný roztok. Díky navázaným částečkám zlata se membrána zabarví červeně a to v intenzitě zabarvení odpovídající koncentraci U-Albuminu v moči. Vyhodnocení je provedeno reflektometricky přístrojem NycoCard Reader II. Obsah kitu Testovací kazety 1 x 24 Každá s filtrační membránou obsahující monoklonální protilátku R1/ ředící roztok 1 x 24 x 1,0 ml Fosfátový pufr (ph 5,6), Organické rozpouštědlo ( 10 %), žlutý pigment. R2/ Konjugát 1 x 2,0 ml Borátový pufr obsahuje anti U-Albumin monoklonální protilátku konjugovanou ultra malými částečkami zlata. R3/ Promývací roztok 1 x 2,0 ml Fosfátový pufr NaCl ( ph 7,4) Příslušenství Materiál nutný k provedení testu pipeta 50μl a špičky k aplikaci naředěného vzorku a roztoku R2 a R3 NycoCard READER II Upozornění bezpečnostní opatření Použití pouze pro IVD reagencie R1, R2, R3 obsahují azid Na (0,05%), který je toxický organické rozpouštědlo v R/1 ředícím roztoku způsobuje dráždění kůže a sliznic

3 Specifita K provedení testu je použita specifické monoklonální protilátka proti lidskému albuminu. Další komponenty lidské moče nevykazují cross-reaktivitu s protilátkou anti U-Albumin. Standardizace NycoCard U-Albumin je kalibrován s močovou standardou. Tato standarda je zkoušena proti CRM 470 ( IFCC/BCR/CAP referenčnímu materiálu) Měřitelné rozhraní měřitelní rozhraní 5,0 200,0 mg/l při použití NycoCard Reader II měřitelný interval 1,0 mg/l Přesnost Přesnost NycoCard U-Albumin je vyjadřována koeficientem variability (C. V.), který je v rozsahu 5-8 %. Toto se vztahuje k hodnotám naměřeným přístrojem. Upozornění - interference Neinterferuje s následujícími složkami (při koncentracích): glukózou (50 mmol/l), kreatininem (60mmol/L), dusíkem (10 mmol/l), NaCl (500 mmol/l), acetonem (2,4g/l), IgA (0,5 g/l), IgG (0,5g/l), hemoglobinem (0,05 g/l), myoglobinem (0,5g/l), betamikroglibulinem (250 mg/l), bilirubinem (50 mg/l), močovinou (200 g/l) nebo ph. Vzorky obsahující krev mohou dávat falešně pozitivní výsledek při koncentraci hemoglobinu 0,5 mg/l ve vzorku moči. Skladování a stabilita Neotevřený kit Kit skladovat při 2-8 C do konce exspirační doby. Vyvarovat se teplotám vyšším než 25 C. Nemrazit. Otevřený kit Testovací kazety použitelnost do konce exspirační doby při skladování 2-8 C v neotevřeném originálním balení. Při skladování při pokojové teplotě jsou kazety stabilní po 8 týdnů (na konci pracovního dne uložte kazety do chladu). Po otevření originálního balení je nutné testovací kazetu použít. Reagencie R1 reagencie uchovávat při 2-25 C do konce exspirační doby. Před použitím musí být vytemperována na pokojovou teplotu. Reagencie R2 musí být skladována při teplotě 2-8 C a může být použita přímo z chladničky bez nutnosti vytemperování. Konjugát je stabilní 8 týdnů při teplotách C. Reagencie R3 skladujte při teplotě od 2-25 C. Roztok může být použit přímo nebo i vytemperován na pokojovou teplotu. Vzorek moči musí být skladována při teplotách 2-8 C po 14 dní bez signifikantních změn koncentrace albuminu ve vzorku. Vzorek moči lze uchovat zmražený při teplotě 20 C po dobu 12 týdnů. Rozmrazit a použít k vyšetření pouze jednou! Vzorek moči ředěný roztokem R1 může být uchován 14 dní před analýzou, při teplotě od 2-25 C.

4 Provedení testu Důležité upozornění k provedení testu reagencie v kitu nesmí být zaměňovány s reagenciemi odlišné šarže. nedotýkejte se špičkou pipety membrány před každým použitím konjugát důkladně promíchejte vyměňte špičky pipety pro každou pipetovanou reagencii roztok R1 musí mít teplotu od C před použitím Vzorek K vyšetření se používá lidská moč Předpříprava vzorku moči nebo kontroly není nutná. Vzorek který se zakalí po naředění musí být zcentrifugován nebo zfiltrován před aplikací do testovací kazety. Pro vyšetření mikroalbuminurie je možno použít jakýkoli vzorek moči stejně i první ranní moč. Vnitřní kontrola Pozitivní kontrola se provádí pro kontrolu kvality reagencií. Naměřené hladiny musí odpovídat rozmezí uvedenému na etiketě lahvičky kontroly. Postup Vyznačte číslo pacienta na testovací terč Ředění vzorku Napipetujte 50μl vzorku pacienta nebo kontroly do zkumavky s ředícím roztokem R/ 1. Uzavřete zkumavku a promíchejte. Upozornění - roztok R1 musí mít pokojovou teplotu (15-25 C). Aplikace vzorku Aplikujte 50μl naředěného vzorku nebo kontroly do jamky testovacího terče. Ponechte vzorek prosáknout membránou ( přibližně 50 sec.) Upozornění - při aplikaci se nesmíte dotknout membrány. Zabraňte tvorbě vzduchových bublin. Aplikace roztoku R/2 konjugát Aplikujte 50µl konjugačního roztoku R/2 do středu testovací jamky. Počkejte přibližně 50 sec. Upozornění konjugační činidlo kapejte kolmo z výšky asi 1 cm nad testovací jamkou. Konjugační činidlo před použitím promíchat otočením lahvičky. Zabraňte tvorbě bublin. Aplikace promývacího roztoku R/3 Aplikujte 50 µl promývacího roztoku R /3 do středu testovací jamky. Počkejte cca. 50 sec. Upozornění promývací roztok pipetujte z výšky asi 1 cm nad testovací jamkou ve vertikální poloze. Odečítání výsledku Odečtení výsledku proveďte do 5 min. reflektometrem NycoCard Reader II. Při použití přístroje postupujte podle manuálu NycoCard Reader II.

5 Vyhodnocení a interpretace výsledků Normalní hladiny ( 20 mg/l) Albumin se za normálních okolností vylučuje močí rychlostí 5 20 µg/min (do 30 mg/24 hod). Při běžném objemu moči se normální hladiny albuminu pohybují do 20 mg/l. Zvýšené hodnoty V případě mikroalbuminurie jsou denní hodnota koncentrace albumin trvale v koncentracích od mg/24 hod. Koncentrace albuminu jsou při normálním objemu moči udávány v mg/l. Rychlost vylučování albuminu (UAER) je určena vztahem: C albumin x V urin čas trvání sběru v min. = µg/min C = koncentrace albuminu v mg/l V = objem moči v ml Odstranění problémů Problém Závada Řešení Neočekávaně nízké hodnoty Neočekávaně vysoké hodnoty Barva testovací membrány není homogenní Nesprávně napipetované množství vzorku Ředící roztok R1 neměl při použití doporučenou teplotu C Nesprávně napipetované množství vzorku Naředěný vzorek je zakalen, čas vsaknutí vzorku je viditelně prodloužen Reagencie aplikované do testovací kazety se nevsakují kompletně. Během aplikace vzorku se vytvořily bubliny Překontrolujte pipetu (kalibrujte pipetu nebo vyměňte Mini.Pet jednou za rok) Špička musí být na pipetu dobře nasazena. Opakujte test. Vytemperujte ředící roztok R1 na doporučenou teplotu. Opakujte test. Překontrolujte pipetu (vyměňte pipetu jednou za rok) Špička musí být dobře nasazena na pipetu. Opakujte test Vzorek vyčistit opakovanou centrifugací nebo filtrací. Opakujte test. Opakujte test. Nechte vsáknout veškeré množství reagencie do testovací kazety před aplikací další reagencie. Proveďte test opakovaně aniž by se tvořily bubliny.