Cíle: Obecně počty baktérií ve vyšetřovaných vzorcích stanovujeme přímými a nepřímými metodami.

Rozměr: px
Začít zobrazení ze stránky:

Download "Cíle: Obecně počty baktérií ve vyšetřovaných vzorcích stanovujeme přímými a nepřímými metodami."

Transkript

1 Praktikum č. 6: Metody stanovení koncentrace bakterií. Metody určování citlivosti a rezistence bakterií k antibiotikům, chemoterapeutikům a dezinfekčním prostředkům. Průkaz β-laktamáz. Cíle: 1. Seznámit se s principy metod stanovení koncentrace bakterií ve vzorku (tělní tekutiny, tkáně, potraviny a pod). 2. Naučit se principy a zásady provedení metod stanovení citlivosti bakteriální kultury k antibakteriálním látkám. 3. Naučit se odečítat výsledky kvalitativního a kvantitativního stanovení citlivosti bakteriálních kmenů k antibakteriálním látkám a získané výsledky interpretovat.. Seznámit se s metodami screeningu antibakteriální rezistence (průkaz betalaktamáz). Určení počtu bakterií Obecně počty baktérií ve vyšetřovaných vzorcích stanovujeme přímými a nepřímými metodami. 1. Přímé metody: a) přímá mikroskopie nativních preparátů (lze použít speciálních postupů intravitálního barvení např. akridinovou oranží) b) kultivační průkaz - na pevných půdách zjišťujeme počet KTJ (kolonie tvořící jednotky) či CFU (colony forming units) viz. schéma. V tekutých půdách stanovujeme na základě statisticky ověřené pravděpodobnosti tzv. pravděpodobný počet baktérií MPN (most probable number). V tekutých vzorcích (např. voda), kde se předpokládá nízký počet baktérií v 1 ml, použijeme filtraci většího objemu (obvykle 100 ml) vzorku přes membránový filtr, který pak přikládáme na kultivační agarovou půdu. Po inkubaci počítáme kolonie na membránovém filtru a stanovíme počet CFU na přefiltrovaný objem tekutiny. 2. Nepřímé metody: a) měření zákalu na fotometru a koncentraci bakterií odečítáme z kalibrační křivky b) měření metabolické aktivity (vodivost, kolorimetrické metody) V praxi, zejména při očkování komerčně vyráběných mikrotestů pro identifikaci bakteriía při výrobě bakteriálních vakcín, se někdy využívá nefelometr (zákaloměr), kterým se měří intenzita zákalu rozptýlené bakteriální masy. Často se používá i subjektivní metoda porovnávání zákalu bakteriální suspenze se standardem, který obsahuje BaSO (McFarlandova zákalová stupnice). McFarlandova zákalová stupnice Pří smíchání roztoků chloridu barnatého a kyseliny sírové vzniká ve vodě nerozpustná sraženina síranu barnatého. Tato sloučenina se stala základem pro přípravu zákalové stupnice podle které lze přibližně stanovit koncentraci bakterií v neznámé suspenzi (viz. tabulka č. 3). 35

2 Tabulka č. 3: Příprava McFarlandovy zákalové stupnice Stupeň číslo 0, ,175% roztok chloridu barnatého (ml) 0,05 0,1 0,2 0,3 0, 0,5 0,6 0,7 0,8 0,9 1,0 1% roztok kyseliny sírové (ml) 9,95 9,9 9,8 9,7 9,6 9,5 9, 9,3 9,2 9,1 9,0 Přibližná koncentrace bakterií (x 10 8 /ml) 1, Zákalová řada se uchovává v temnu při laboratorní teplotě. Za těchto podmínek je stabilní 6 měsíců. Přibližné koncentrace neplatí pro všechny druhy bakterií, proto u růstově náročnějších druhů se musí ověřit kultivačně. V diagnostické bakteriologii se ptáme zpravidla výhradně na počet živých mikrobů (bakteriurie). Postupujeme tak, že materiál navážíme, homogenizujeme, ředíme ve sterilním pufrovaném fyziologickém roztoku někdy s příměsí peptonu. Pak jednotlivá ředění smísíme s vhodnou pevnou kultivační půdou, která byla sterilizována a následně temperována ve vodní lázni na 5 o C. Důkladně promícháme a necháme inkubovat. Po inkubaci počítáme vyrostlé kolonie (vybíráme misky s tím ředěním zkoumaného materiálu, které umožnilo nárůst počitatelných kolonií, t.j ). Jinou možností je, že připravenou suspenzi kapeme v odměřeném množství na hotovou agarovou půdu v Petriho misce, pak rozetřeme po povrchu a inkubujeme. Nakonec opět počítáme vyrostlé kolonie. Počty kolonií (CFU, KTJ) přepočteme na původní navážku vzorku. Existují ještě další testy, víceméně orientační, kterých se v bakteriologických laboratořích užívá informaci o počtu mikrobů. Je to např. TTC-test, založený na vlastnostech živých mikrobů redukovat TTC na červené formazany. STANOVENÍ CITLIVOSTI BAKTERIÍ K ANTIMIKROBIÁLNÍM LÁTKÁM Antimikrobiální látky jsou léčiva (antibiotika a chemoterapeutika), která potlačují množení, nebo mikroorganismy usmrtí. V tomto textu budeme používat jednotný termín antibiotikum pro obě skupiny látek, t.j. antibiotika (látky biologického původu) i chemoterapeutika (látky synteticky připravené). Základní vlastností antibiotik, která umožňuje jejich léčebné použití, je tzv. selektivní toxicita. Pro medicínskou praxi jsou totiž významná taková antibiotika, která při svém účinku na prokaryotické buňky nejsou toxická pro eukaryotické buňky hostitele. Spektrem účinnosti antibiotika se rozumí účinek na určitou skupinu bakteriálních druhů, rodů a podobně. Termín antibiotika se širokým spektrem účinku nevystihuje v současnosti postavení jednotlivých druhů antibiotik, proto se spíše nedoporučuje jeho užívání. 36

3 Antibiotika s úzkým spektrem účinku jsou velmi účinná na určité druhy/skupiny bakterií. Výstižněji se označují jako antibiotika s cíleným účinkem. Účinek antibiotik lze na základě jeho mechanismu dělit na bakteriostatický a bakteriocidní. Antibiotika s bakteriostatickým účinkem zastavují množení jednotlivých bakteriálních buněk v organismu hostitele, přitom je neničí. Antibiotika s baktericidním účinkem ničí bakteriální buňky in vitro a in vivo. Baktericidní efekt mohou mít i bakteriostatická antibiotika ve větších dávkách. Bakteriální buňky, na které má antibiotikum baktericidní nebo bakteriostatický účinek, se označují jako citlivé, ostatní jako rezistentní. Kvantitativní vyšetření citlivosti na různé dávky antibiotika určí jeho nejmenší účinnou koncentraci, tzv. minimální inhibiční koncentraci (MIC). MIC vyjadřuje množství antibiotika (g x ml -1 nebo mg x litr -1 ), které úplně potlačí růst kultury bakterií (testované inokulum pěstované in vitro). Za citlivou se považuje kultura, jejíž MIC je 2x až x menší než koncentrace dosahovaná terapeuticky v krvi (klinický breakpoint). Za rezistentní se považuje kultura, která se množí při koncentraci antibiotika výrazně vyšší než je průměrná MIC u kultur téhož druhu. V tomto případě se jedná o získanou rezistenci. Primární rezistence vyjadřuje stav, kdy antibiotikum je primárně neúčinné na daný mikrobní druh. VÝZNAM MIKROBIOLOGICKÉHO VYŠETŘENÍ PRO LÉČBU ANTIBIOTIKY Výběr a použití antibiotik se spojuje s určitým mikrobem, a to buď dokázaným v laboratoři, a nebo předpokládaným na základě typických klinických příznaků infekčního onemocnění. Proto je třeba původce onemocnění rychle a spolehlivě izolovat a určit. Materiál pro mikrobiologické vyšetření je nutné odebrat ještě před započetím antibiotické léčby. Podle výsledků vyšetření je možné zvolit antibiotikum pro terapii. Pokud již terapie probíhá a selhává, je možno ji na podkladě výsledků upravit. V laboratořích se určuje citlivost na větší počet antimikrobiálních látek. Tím jsou dány i předpoklady pro volbu správného léčiva. V nutných případech je možno stanovit i koncentraci antibiotika v tělních dutinách. 37

4 METODIKY ZJIŠŤOVÁNÍ CITLIVOSTI A KONTROLY ANTIBIOTICKÉ TERAPIE IN VITRO Používané metody spočívají ve zjištění schopnosti růstu za přítomnosti antibiotika. Antibiotikum se přidává do tekuté nebo tuhé půdy a podle uspořádání vyšetření lze hodnotit výsledek kvalitativně nebo kvantitativně. Jedná se o následující metody: 1. Kvalitativní/semikvantitativní disková difusní metoda 2. Kvantitativní a) zřeďování testované antibakteriální látky v bujónu b) zřeďování testované antibakteriální látky v agaru c) Epsilonmetr test (E test) ad 1) Disková difúzní metoda (Kirby-Bauerův test) využívá agarového média v Petriho misce. Jedná se o Mueller-Hinton agar, který ve srovnání jinými agarovými půdami neobsahuje inhibitory sulfonamidů. Pro vyšetření gramnegativních bakterií se používá tento agar bez úpravy, grampozitivní bakterie se testují na stejném médiu s přídavkem ovčí krve. Suspenze vyšetřované kultury musí být v takové kvantitě (přibližně 10 6 bakterií x ml -1 ), aby po nanesení 2 ml a odsátí přebytku s povrchu agaru rostly kolonie v těsném dotyku (polosplývavý růst). Po zaschnutí inokula se na povrch agaru přiloží disky nasycené standardním množstvím antibiotika (množství je určeno střední citlivostí kmenů, vzhledem ke koncentraci antibiotika dosažitelné v krvi a difúzní konstantou antibiotika). Po inkubaci do druhého dne dochází u citlivé kultury kolem disku s účinným antibiotikem ke vzniku inhibiční zóny. V praxi se pro vyjádření citlivosti stanoví určitá šířka minimální inhibiční zóny v milimetrech. Za dodržení přesných podmínek, tzn. kvality agaru, ph, koncentrace iontů, velikosti inokula jsou průměry inhibičních zón srovnatelné s hodnotami MIC (semikvantitativní metoda). Mezi šířkou inhibiční zóny a MIC hypotetického antibiotika existuje nepřímá závislost (viz. tabulka č. ). ad 2a) Do řady zkumavek s kultivačním médiem o různé koncentraci antibiotik dosažené dvojnásobným zřeďováním (např. v rozmezí od 128 mg/litr do 0,125 mg/litr) se očkuje standardizované inokulum testované kultury. Po inkubaci se určí zkumavka ve vzestupné řadě, v níž již nedošlo k pomnožení (růstu) kultury, tzn. nedošlo ke vzniku zákalu. Nejnižší koncentrace antibiotika, při které došlo k inhibici se označuje jako MIC (minimální inhibiční koncentrace) (viz. schéma na obrázku č. 7). 38

5 Technika stanovení MIC antibiotik přechází postupně na mikrometody: na destičce s 12 x 8 jamkami lze v objemu 0,1 ml provést 8 vyšetření. Význam mikrometod spočívá v efektivnosti provedení. Vyočkováním ze zkumavek nebo jamek se zábranou růstu na agar lze získat tzv. minimální baktericidní koncentraci - MBC. Ve zkumavkách se zábranou růstu mohou být i bakterie jen částečně devitalizované, které po vyočkování na kultivační půdu bez antibiotika dále rostou (viz. obrázek č. 9). V případě baktericidních antibiotik se hodnota MIC rovná MBC. ad 2b) Do řady misek se vylije agarová půda s přídavkem antibiotika v různých koncentracích (opět dvojnásobných). Na jednu misku lze naočkovat až 20 kmenů (obrázek č. 8). Tabulka č. : Příklady breakpointů vybraných antibakteriálních látek Antibakteriální látka Breakpoint (mg. L -1 ) Ampicilin 16 Oxacilin 12 Cefaklor 8 Ceftazidin 16 Erytromycin Gentamicin 8 Tetracyklin 8 Vankomycin 16 Hodnoty zjištěné u posuzované kultury Výsledné hodnocení (účinný/neúčinný) Poznámky: 39

6 Obrázek č. 7: Určení hodnoty MIC antibiotika zřeďováním v bujónu Čerstvá kultura Zředění 6 10 CFU/ml 0,125 0,25 0, Koncentrace antibiotika (mg/l) 8 0,06 0,125 0,25 0, Jeden mililitr suspenze testovaného bakteriálního kmene 10 CFU/ ml se přidá do zkumavek obsahujících 1 ml bujónu s vyředěným testovaným antibiotikem (8 až 0,125 mg/ l), tím dojde k dalšímu ředění antibiotika. Hodnota MIC je v našem případě 1 mg/ l (nejnižší koncentrace testovaného antibiotika, která zabránila množení testovaného kmene). 0

7 Obrázek č. 8: Určení hodnoty MIC antibiotika zřeďováním v agaru Suspenze kmene A 6 Z testovaného bakteriálního kmene se připraví suspenze o hustotě 10 CFU/ ml. Jednotlivé testované kmeny (A, B, C...) se nanesou kalibrovanou kličkou na povrch agarů s různou koncentrací testovaného antibiotika. 0 0,25 0, Koncentrace antibiotika (mg/l) A B C A B C A B C A B C A B C D E F D E F D E F D E F D E F A B C D E F 0 0,25 0, Po 18 hodinách inkubace při 37 C se odečtou hodnoty MIC. V našem případě je hodnota MIC testovaného antibiotika 2 mg/l pro kmeny A a C, mg/l pro kmen B, 1 mg/l pro kmen D a 0,5 mg/l pro kmeny E a F. 1

8 Obrázek č. 9: Určení minimální baktericidní koncentrace (MBC) 1 ml 1 ml 6 1 ml testované bakteriální kultury (10 CFU/ ml) se přidá k 1 ml bujónu s vyředěným antibiotikem (6 - mg/ l). Kontrola Kontrola Zkumavky nyní obsahují ve 2 ml 5 Z kontrolní zkumavky je vyředěného antibiotika 5 x 10 provedena subkultivace CFU/ ml testovaného kmene. na agar na ověření počtu bakterií v inokulu 0,5 ml 0,001 ml Inkubace přes noc Jsou zaznamenány zkumavky se zákalem a ze zkumavek bez zákalu je vyočkováno 0,1 ml na živný agar MIC = 16 mg/ l 0,1 ml 0,1 ml 0,1 ml CFU = 5 x 10 na ml živých bakterií v kontrolní zkumavce. 250 CFU Inkubace přes noc 7 CFU Odečtení výsledků po kultivaci ze zkumavek bez zákalu. 7 CFU = 70 CFU/ ml ve zkumavce obsahující 16 mg antibiotika na ml. 70 CFU/ ml > 0,1% z původního 5 inokula (5 x 10 CFU/ ml). MBC = 32 mg/ l 2

9 Tabulka č. 5 : Přehled antibiotik a interpretačních kritérií pro posouzení výsledků diskové difusní metody (upraveno pro výuku) Antibiotikum/ koncentrace v disku v μg zkratka R (rezistence) I (intermediální) S (citlivost) Chloramfenicol/30 C Ampicilin/10 AMP Amoxicilin+ kys. AMC klavulonová/30 Gentamicin/10 CN Neomycin/30 N Tetracyclin/30 TE Streptomycin/10 S Sulphamethoxazol SXT trimethoprim Cephalothin/30 KF Kolistin CT Apramycin APR Nalidixinová kys. NA Sulphonamidy (směs) S Zapište průměry inhibičních zón u posuzovaných bakteriálních kultur a posuďte citlivost. Antibakteriální látka/ bakt. kmen č. Č. kmene Č. kmene Č. kmene Č. kmene zóna hodnocení zóna hodnocení zóna hodnocení zóna hodnocení 3

10 METODY PRŮKAZU BETALAKTAMÁZ Některé bakterie produkují enzymy, které porušují beta-laktamový kruh beta-laktamových antibiotik, která se pak stávají neúčinná. Širokospektré beta-laktamázy vznikají následkem jednobodových mutací v genových Sekvencích kódujících betalaktamázu. Jsou schopné rozkládat širokospektrá betalaktamová antibiotika jako cefalosporiny vyšších generací (cefotaxim, ceftazidim, ceftriaxon, cefepim a cefpirom) a monobaktamy. Zkráceně se označují ESBL (z angl. extended-spectrum betalactamases). Zvýšená aktivita těchto enzymů k širokospektrým cefalosporinum má však za následek i snížení citlivosti k inhibitorům betalaktamáz. Selekční tlak a nadměrné užívání nových betalaktamových antibiotik má za následek vznik nových variant betalaktamáz, kterých dnes rozlišujeme více než 150 druhů. Testy založené na přímém průkazu betalaktamáz Rozlišujeme 3 typy testů pro přímou detekci betalaktamáz, a to chromogenní, jodometrické a acidimetrické. Testy jsou založeny na průkazu hydrolýzy antibiotika, která nastává v případe přítomnosti betalaktamázy. Pozitivní reakce se projeví jako barevná změna. Chromogenní metody Pro průkaz betalaktamáz chromogenními metodami se užívá chromogenních cefalosporinů, mezi které řadíme nitrocefin, PADAC a CENTA. Při hydrolýze jejich betalaktamového kruhu účinkem betalaktamázy produkované testovaným mikrobem prodělávají barevnou změnu. Nejužívanější je nitrocefin, což je světle žlutá látka, jejíž hydrolýza účinkem betalaktamázy způsobí posun elektronu v molekule, který má za následek vznik tmavě červeného produktu obvykle do 30 minut. Nitrocefin je možné použít ve formě roztoku nebo jako komerčně dodávané disky a proužky napuštěné touto látkou, vyšetřovaná bakterie se testují rozetřením přímo na tento disk. Acidimetrické a jodometrické testy K detekci přítomnosti kyseliny penicilinové, která vzniká hydrolýzou penicilinu účinkem betalaktamázy, se používají také kolorimetrické indikátory. Substrátem při acidimetrických reakcích je penicilin s navázaným citrátem a k detekci reakce se užívá červený fenolový indikátor. Vzrůst ph v přítomnosti kyseliny penicilinové způsobí barevnou žmenu z červené na žlutou. Při jodometrické metodě se používá penicilin s navázaným fosfátem a komplex škrobu s jódem. V přítomnosti penicilinové kyseliny dochází k redukci jódu na jodid a k jeho uvolnění z komplexu se škrobem, což má za následek odbarvení. Zkumavková metoda: do 0,1 ml roztoku penicilínu (6mg/ml) ve zkumavce se vmíchá hustá suspenze zkoumané kultury. Po 30 minutách se přidají dvě kapky škrobového roztoku, poté Lugolův roztok. Dojde k modrému zabarvení, které se v pozitivním případě po promíchání obsahu do 5 minut odbarví. Diskový difuzní test s inhibitorem betalaktamázy Jedním z prvních testů pro průkaz širokospektrých betalaktamáz byl test známý pod názvem double-disk synergy test (DDS test). Inokulum testovaného mikroba se nanese na MH agar. Do středu misky se umístí disk obsahující kombinaci kyseliny klavulanové s amoxicilinem a disk s cefalosporinem 3. generace (nejcasteji s ceftazidimem) se umístí 30 mm od prvního disku. Kyselina klavulanová difunduje agarem a inhibuje betalaktamázu v okolí disku s cefalosporinem. V pozitivním případe dochází k typickému rozšíření inhibiční zóny kolem disku s cefalosporinem směrem k disku s kombinací amoxicilinu a kyseliny klavulanové. Citlivost testu vzroste, sníží-li se vzdálenost mezi disky na 20 mm. Kromě ceftazidimu se v těchto testech začal užívat také cefpodoxim a cefotaxim.

CITLIVOST A REZISTENCE MIKROORGANISMŮ K ANTIBIOTIKŮM

CITLIVOST A REZISTENCE MIKROORGANISMŮ K ANTIBIOTIKŮM CITLIVOST A REZISTENCE MIKROORGANISMŮ K ANTIBIOTIKŮM Mgr. Sylva Janovská, Ph.D. Mgr. Eva Slehová Univerzita Pardubice Fakulta chemicko-technologická Katedra biologických a biochemických věd Centralizovaný

Více

CVIČENÍ I. STANOVENÍ FENOTYPU REZISTENCE K VYBRANÝM ANTIBIOTIKŮM

CVIČENÍ I. STANOVENÍ FENOTYPU REZISTENCE K VYBRANÝM ANTIBIOTIKŮM CVIČENÍ I. STANOVENÍ FENOTYPU REZISTENCE K VYBRANÝM ANTIBIOTIKŮM Stanovení citlivosti bakteriálního kmene k antibiotikům umožňuje výběr účinné terapie pro léčbu bakteriálních infekcí, což vede k zrychlení

Více

DIAGNOSTIKA INFEKČNÍCH CHOROB KULTIVACE V LABORATORNÍCH PODMÍNKÁCH

DIAGNOSTIKA INFEKČNÍCH CHOROB KULTIVACE V LABORATORNÍCH PODMÍNKÁCH STŘEDNÍ ZDRAVOTNICKÁ ŠKOLA A VYŠŠÍ ODBORNÁ ŠKOLA ZDRAVOTNICKÁ ŽĎÁR NAD SÁZAVOU DIAGNOSTIKA INFEKČNÍCH CHOROB KULTIVACE V LABORATORNÍCH PODMÍNKÁCH MGR. IVA COUFALOVÁ DIAGNOSTIKA INFEKČNÍCH CHOROB KULTIVACE

Více

ROZDĚLENÍ ANTIMIKROBIÁLNÍCH LÁTEK, VYŠETŘOVÁNÍ CITLIVOSTI. M.Hanslianová Antibiotické středisko OKM FN Brno

ROZDĚLENÍ ANTIMIKROBIÁLNÍCH LÁTEK, VYŠETŘOVÁNÍ CITLIVOSTI. M.Hanslianová Antibiotické středisko OKM FN Brno ROZDĚLENÍ ANTIMIKROBIÁLNÍCH LÁTEK, VYŠETŘOVÁNÍ CITLIVOSTI M.Hanslianová Antibiotické středisko OKM FN Brno Antimikrobiální látky I. Antibiotika= léčiva používaná k profylaxi a terapii infekčních onemocnění

Více

ZLLM0421c Lékařská orální mikrobiologie I, praktická cvičení. Protokol k tématu J05

ZLLM0421c Lékařská orální mikrobiologie I, praktická cvičení. Protokol k tématu J05 Téma J05: Stanovení citlivosti bakterií na antimikrobiální látky, průkaz faktorů rezistence K nastudování: z učebnic a internetu: hesla například Difusní diskový test ; E-test ; diluční mikrometoda ; minimální

Více

European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing

European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing Breakpointy průměrů zón pro rychlé vyšetření antimikrobní citlivosti přímo z hemokultivačních lahviček (RAST) Verze 1.0, platná od 28-11-2018

Více

Stanovení citlivosti bakterií k ATB, stanovení koncentrace ATB

Stanovení citlivosti bakterií k ATB, stanovení koncentrace ATB Stanovení citlivosti bakterií k ATB, stanovení koncentrace ATB Cíl: Stanovit citlivost MO k ATB Porovnat citlivost různých MO k různým ATB Stanovit min. inhibiční koncentraci dilučním testem Mikroorganizmy

Více

Stanovení citlivosti k antibiotikům. Stanovení koncentrace antibiotik.

Stanovení citlivosti k antibiotikům. Stanovení koncentrace antibiotik. Stanovení citlivosti k antibiotikům. Stanovení koncentrace antibiotik. Antimikrobiální látky Látky působící celkově: Antiparazitární látky proti parazitům Antimykotika proti kvasinkám a vláknitým houbám

Více

Kultivační metody stanovení mikroorganismů

Kultivační metody stanovení mikroorganismů Kultivační metody stanovení mikroorganismů Základní rozdělení půd Syntetická, definovaná media, jednoduché sloučeniny, známé sloţení Komplexní media, vycházejí z ţivočišných nebo rostlinných tkání a pletiv,

Více

Funkční vzorek 4595/2018. Set ke stanovení minimálních inhibičních koncentrací antimikrobiálních. látek u Streptococcus suis

Funkční vzorek 4595/2018. Set ke stanovení minimálních inhibičních koncentrací antimikrobiálních. látek u Streptococcus suis Funkční vzorek 4595/2018 Set ke stanovení minimálních inhibičních koncentrací antimikrobiálních látek u Streptococcus suis Autoři: MVDr. Kateřina Nedbalcová, Ph.D., Výzkumný ústav veterinárního lékařství,

Více

Antibiotika a chemoterapeutika. Karel Holada

Antibiotika a chemoterapeutika. Karel Holada Antibiotika a chemoterapeutika Karel Holada khola@lf1.cuni.cz Klíčová slova Antibiotika Selektivní toxicita Baktericidní Bakteriostatický Terapeutický index MIC a MIB Testování citlivosti Mechanizmus účinku

Více

Funkční vzorek 5456/2017. Set ke stanovení minimálních inhibičních koncentrací antimikrobiálních. látek u Enterococcus spp.

Funkční vzorek 5456/2017. Set ke stanovení minimálních inhibičních koncentrací antimikrobiálních. látek u Enterococcus spp. Funkční vzorek 5456/2017 Set ke stanovení minimálních inhibičních koncentrací antimikrobiálních látek u Enterococcus spp. Autoři: MVDr. Kateřina Nedbalcová, Ph.D., Výzkumný ústav veterinárního lékařství,

Více

Citlivost a rezistence mikroorganismů na antimikrobiální léčiva

Citlivost a rezistence mikroorganismů na antimikrobiální léčiva Citlivost a rezistence mikroorganismů na antimikrobiální léčiva Sylva Janovská Univerzita Pardubice Fakulta chemicko-technologická Katedra biologických a biochemických věd Centralizovaný rozvojový projekt

Více

Ověřená technologie 4782/2017

Ověřená technologie 4782/2017 Ověřená technologie 4782/2017 Výroba setu ke stanovení minimálních inhibičních koncentrací antimikrobiálních látek u Enterococcus spp. Autoři: MVDr. Kateřina Nedbalcová, Ph.D., Výzkumný ústav veterinárního

Více

Název materiálu: Antimikrobní látky MUDr. Zdeňka Kasková. Datum (období) vytvoření: Autor materiálu: Zařazení materiálu:

Název materiálu: Antimikrobní látky MUDr. Zdeňka Kasková. Datum (období) vytvoření: Autor materiálu: Zařazení materiálu: Projekt: Příjemce: Digitální učební materiály ve škole, registrační číslo projektu CZ.1.07/1.5.00/34.0527 Střední zdravotnická škola a Vyšší odborná škola zdravotnická, Husova 3, 371 60 České Budějovice

Více

INTERPRETACE VÝSLEDKŮ CITLIVOSTI NA ANTIBIOTIKA. Milan Kolář Ústav mikrobiologie Fakultní nemocnice a LF UP v Olomouci

INTERPRETACE VÝSLEDKŮ CITLIVOSTI NA ANTIBIOTIKA. Milan Kolář Ústav mikrobiologie Fakultní nemocnice a LF UP v Olomouci INTERPRETACE VÝSLEDKŮ CITLIVOSTI NA ANTIBIOTIKA Milan Kolář Ústav mikrobiologie Fakultní nemocnice a LF UP v Olomouci Současná medicína je charakteristická svým multidisciplinárním přístupem k řešení mnoha

Více

Diagnostické metody v lékařské mikrobiologii

Diagnostické metody v lékařské mikrobiologii Diagnostické metody v lékařské mikrobiologii Výuková prezentace z: Lékařské mikrobiologie Jan Smíšek ÚLM 3. LF UK 2009 Princip identifikace Soubor znaků s rozdílnou diskriminační hodnotou Základní problémy

Více

Funkční vzorek 5452/2017. Set ke stanovení minimálních inhibičních koncentrací antimikrobiálních. látek u gramnegativních bakterií II.

Funkční vzorek 5452/2017. Set ke stanovení minimálních inhibičních koncentrací antimikrobiálních. látek u gramnegativních bakterií II. Funkční vzorek 5452/2017 Set ke stanovení minimálních inhibičních koncentrací antimikrobiálních látek u gramnegativních bakterií II. řada Autoři: MVDr. Kateřina Nedbalcová, Ph.D., Výzkumný ústav veterinárního

Více

Funkční vzorek 5454/2017. Set ke stanovení minimálních inhibičních koncentrací antimikrobiálních. látek u Pseudomonas spp.

Funkční vzorek 5454/2017. Set ke stanovení minimálních inhibičních koncentrací antimikrobiálních. látek u Pseudomonas spp. Funkční vzorek 5454/2017 Set ke stanovení minimálních inhibičních koncentrací antimikrobiálních látek u Pseudomonas spp. Autoři: MVDr. Kateřina Nedbalcová, Ph.D., Výzkumný ústav veterinárního lékařství,

Více

Rezistence patogenů vůči antimikrobialním látkám. Martin Hruška Jan Dlouhý

Rezistence patogenů vůči antimikrobialním látkám. Martin Hruška Jan Dlouhý Rezistence patogenů vůči antimikrobialním látkám Martin Hruška Jan Dlouhý Pojmy Patogen (patogenní agens, choroboplodný zárodek nebo původce nemoci) je biologický faktor (organismus), který může zapřičinit

Více

Ověřená technologie 4903/2018

Ověřená technologie 4903/2018 Ověřená technologie 4903/2018 Výroba setu ke stanovení minimálních inhibičních koncentrací antimikrobiálních látek u Streptococcus suis Autoři: MVDr. Kateřina Nedbalcová, Ph.D., Výzkumný ústav veterinárního

Více

European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing

European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing Breakpointy průměrů zón pro rychlé vyšetření antimikrobní citlivosti přímo z hemokultivačních lahviček (RAST) Verze 1.1, platná od 2.5.2019 Tento

Více

ANTIBIOTICKÉ DISKY Antibiotické disky pro testování citlivosti

ANTIBIOTICKÉ DISKY Antibiotické disky pro testování citlivosti ANTIBIOTICKÉ DISKY Antibiotické disky pro testování citlivosti POPIS ANTIBIOTICKÉ DISKY jsou papírové disky se speciálními vlastnostmi, které jsou impregnované antibiotiky a používají se pro testy citlivosti

Více

European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing

European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing Rutinní a rozšířená kontrola kvality doporučená EUCAST Verze.0, platná od 9.. 0 Tento dokument se doporučuje citovat takto: "The European Committee

Více

Streptokoky - průkaz fenotypu rezistence k antibiotikům ze skupiny makrolidů, linkosamidů a streptograminub

Streptokoky - průkaz fenotypu rezistence k antibiotikům ze skupiny makrolidů, linkosamidů a streptograminub Streptokoky - průkaz fenotypu rezistence k antibiotikům ze skupiny makrolidů, linkosamidů a streptograminub Revize 27. 1. 2014 A. Klinické vzorky pro vyšetření citlivosti Citlivost k antibiotikům (včetně

Více

Ověřená technologie 4797/2017

Ověřená technologie 4797/2017 Ověřená technologie 4797/2017 Výroba setu ke stanovení minimálních inhibičních koncentrací antimikrobiálních látek u bakteriálních anaerobních patogenů hospodářských zvířat Autoři: MVDr. Kateřina Nedbalcová,

Více

PT#M/5-4/2018 (č.1045v) Bakteriologická diagnostika

PT#M/5-4/2018 (č.1045v) Bakteriologická diagnostika Státní zdravotní ústav Expertní skupina pro zkoušení způsobilosti Poskytovatel zkoušení způsobilosti akreditovaný ČIA podle ČSN EN ISO/IEC 17043, reg. č. 7001 Šrobárova 48, 100 42 Praha 10 Vinohrady Zkoušení

Více

ANTIBIOTIKA. Mgr. Marie Vilánková. Joalis s.r.o. Všechna práva vyhrazena

ANTIBIOTIKA. Mgr. Marie Vilánková. Joalis s.r.o. Všechna práva vyhrazena ANTIBIOTIKA Mgr. Marie Vilánková 1 Antibiotika - látky působící na mikroorganismy Antibiotika = původně získávána biologickou cestou (produkována plísněmi nebo bakteriemi) Chemoterapeutika = chemický původ,

Více

ANTIBIOTICKÁ LÉČBA OFF-LABEL Z POHLEDU MIKROBIOLOGA. Milan Kolář Ústav mikrobiologie FNOL a LF UP v Olomouci

ANTIBIOTICKÁ LÉČBA OFF-LABEL Z POHLEDU MIKROBIOLOGA. Milan Kolář Ústav mikrobiologie FNOL a LF UP v Olomouci ANTIBIOTICKÁ LÉČBA OFF-LABEL Z POHLEDU MIKROBIOLOGA Milan Kolář Ústav mikrobiologie FNOL a LF UP v Olomouci Septický pacient s nozokomiální pneumonií Endosekret: KLPN + ESCO Terapie: PPT + GEN INTERPRETACE?

Více

Využití antibakteriálních testů v textilním průmyslu Mgr. Irena Šlamborová, Ph.D.

Využití antibakteriálních testů v textilním průmyslu Mgr. Irena Šlamborová, Ph.D. Využití antibakteriálních testů v textilním průmyslu Mgr. Irena Šlamborová, Ph.D. Fakulta Přírodovědně-humanitní a pedagogická, katedra chemie OBSAH: 1. Stavba a fyziologie bakterií. 2. Kultivace bakterií,

Více

Laboratorní testování na přítomnost koliformních bakterií, psychrotrofních a termorezistentních mikroorganismů a sporotvorných anaerobních bakterií

Laboratorní testování na přítomnost koliformních bakterií, psychrotrofních a termorezistentních mikroorganismů a sporotvorných anaerobních bakterií Laboratorní testování na přítomnost koliformních bakterií, psychrotrofních a termorezistentních mikroorganismů a sporotvorných anaerobních bakterií Ing. Pavel Kopunecz, ČMSCH a.s. Přehled metod hodnocení

Více

STANOVENÍ REZIDUÍ INHIBIČNÍCH LÁTEK V MLÉCE

STANOVENÍ REZIDUÍ INHIBIČNÍCH LÁTEK V MLÉCE STANOVENÍ REZIDUÍ INHIBIČNÍCH LÁTEK V MLÉCE DAVID ŠILHA IVETA BROŽKOVÁ Univerzita Pardubice Fakulta chemicko technologická Katedra biologických a biochemických věd Centralizovaný rozvojový projekt MŠMT

Více

Příprava půd pro diskovou difuzní metodu EUCAST a pro vyšetření hodnot MIC bujonovou mikrodiluční metodou. Změny proti předchozí verzi (v. 4.

Příprava půd pro diskovou difuzní metodu EUCAST a pro vyšetření hodnot MIC bujonovou mikrodiluční metodou. Změny proti předchozí verzi (v. 4. Version 5.0 January 2017 Příprava půd pro diskovou difuzní metodu EUCAST a pro vyšetření hodnot MIC bujonovou mikrodiluční metodou. Změny proti předchozí verzi (v. 4.0) A. Půdy pro diskovou difuzní metodu

Více

2) Připravte si 3 sady po šesti zkumavkách. Do všech zkumavek pipetujte 0.2 ml roztoku BAPNA o různé koncentraci podle tabulky.

2) Připravte si 3 sady po šesti zkumavkách. Do všech zkumavek pipetujte 0.2 ml roztoku BAPNA o různé koncentraci podle tabulky. CVIČENÍ Z ENZYMOLOGIE 1) Stanovení Michaelisovy konstanty trypsinu pomocí chromogenního substrátu. Aktivita trypsinu se určí změřením rychlosti hydrolýzy chromogenního substrátu BAPNA (Nα-benzoyl-L-arginin-p-nitroanilid)

Více

Implementace laboratorní medicíny do systému vzdělávání na Univerzitě Palackého v Olomouci. reg. č.: CZ.1.07/2.2.00/

Implementace laboratorní medicíny do systému vzdělávání na Univerzitě Palackého v Olomouci. reg. č.: CZ.1.07/2.2.00/ Implementace laboratorní medicíny do systému vzdělávání na Univerzitě Palackého v Olomouci reg. č.: CZ.1.07/2.2.00/28.0088 KLINICKÁ MIKROBIOLOGIE Klinická mikrobiologie je medicínský obor - pojítko mezi

Více

ROZDĚLENÍ ANTIMIKROBIÁLNÍCH LÁTEK, VYŠETŘOVÁNÍ CITLIVOSTI. M.Hanslianová Antibiotické středisko OKM FN Brno

ROZDĚLENÍ ANTIMIKROBIÁLNÍCH LÁTEK, VYŠETŘOVÁNÍ CITLIVOSTI. M.Hanslianová Antibiotické středisko OKM FN Brno ROZDĚLENÍ ANTIMIKROBIÁLNÍCH LÁTEK, VYŠETŘOVÁNÍ CITLIVOSTI M.Hanslianová Antibiotické středisko OKM FN Brno Antimikrobiální látky I. Antibiotika II. III. IV. Antimykotika Antiparazitika Antivirotika Antibiotika

Více

Návod k odečítání Disková difuzní metoda EUCAST pro vyšetřování antibiotické citlivosti

Návod k odečítání Disková difuzní metoda EUCAST pro vyšetřování antibiotické citlivosti Návod k odečítání Disková difuzní metoda EUCAST pro vyšetřování antibiotické citlivosti Verze 5.0 Leden 2017 Změny proti předchozí verzi (v 4.0) Obrázek Změna 3 17 Objasnění týkající se odečítání zón a

Více

OVĚŘENÁ TECHNOLOGIE. Výroba setu ke stanovení MIC antimikrobiálních látek u bakteriálních původců mastitid

OVĚŘENÁ TECHNOLOGIE. Výroba setu ke stanovení MIC antimikrobiálních látek u bakteriálních původců mastitid OVĚŘENÁ TECHNOLOGIE Výroba setu ke stanovení MIC antimikrobiálních látek u bakteriálních původců mastitid MVDr. Kateřina Nedbalcová, Ph.D. MVDr. Monika Zouharová, Ph.D. Mgr. Lucie Pokludová, Ph.D. MVDr.

Více

CERTIFIKOVANÁ METODIKA

CERTIFIKOVANÁ METODIKA VÝZKUMNÝ ÚSTAV VETERINÁRNÍHO LÉKAŘSTVÍ, v.v.i. CERTIFIKOVANÁ METODIKA Vyšetření citlivosti/rezistence bakteriálních patogenů drůbeže k antimikrobiálním látkám stanovením minimálních inhibičních koncentrací

Více

DOTAZY A ODPOVĚDI Veřejná zakázka: Dodávka hotových médií pro růst mikroorganismů Evid. č. přidělené v IS VZ US:

DOTAZY A ODPOVĚDI Veřejná zakázka: Dodávka hotových médií pro růst mikroorganismů Evid. č. přidělené v IS VZ US: DOTAZY A ODPOVĚDI Veřejná zakázka: Dodávka hotových médií pro růst mikroorganismů Evid. č. přidělené v IS VZ US: 60011839 Znění dotazů zájemce TRIOS spol. s r.o. ze dne 14.11. Ad. dotaz č. 1 G-minus I.

Více

Diagnostika streptokoků

Diagnostika streptokoků Lékařská orální mikrobiologie Téma P - Diagnostika streptokoků Tabulka pro souhrn výsledků úkolů až 6 (k postupnému vyplnění) Kmen K L M N P Q R S T Gramovo barvení úkol č. Kataláza úkol a Slanetz-Bartley

Více

SPECTRON 100 mg/ml roztoku k použití v pitné vodě pro kuřata a krůty

SPECTRON 100 mg/ml roztoku k použití v pitné vodě pro kuřata a krůty SPECTRON 100 mg/ml roztoku k použití v pitné vodě pro kuřata a krůty Nejširší možnost ochrany Spectron je velmi účinné baktericidní antibiotikum na drůbežích farmách po celém světě. Zcela široké spektrum

Více

European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing

European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing Rutinní a rozšířená kontrola kvality doporučená EUCAST Verze 7, platná od 0. 0. 07 Tento dokument se doporučuje citovat takto: "The European Committee

Více

MTI Cvičení č. 2 Pasážování buněk / Jana Horáková

MTI Cvičení č. 2 Pasážování buněk / Jana Horáková MTI Cvičení č. 2 Pasážování buněk 15.11./16.11.2016 Jana Horáková Doporučená literatura M. Vejražka: Buněčné kultury http://bioprojekty.lf1.cuni.cz/3381/sylabyprednasek/textova-verze-prednasek/bunecnekultury-vejrazka.pdf

Více

Řasový test ekotoxicity na mikrotitračních destičkách

Řasový test ekotoxicity na mikrotitračních destičkách Řasový test ekotoxicity na mikrotitračních destičkách 1 Účel Řasové testy toxicity slouží k testování možných toxických účinků látek a vzorků na vodní producenty. Zelené řasy patří do skupiny necévnatých

Více

Funkční vzorek 5474/2017

Funkční vzorek 5474/2017 Funkční vzorek 5474/2017 Set ke stanovení minimálních inhibičních koncentrací antimikrobiálních látek u bakteriálních anaerobních patogenů hospodářských zvířat MVDr. Kateřina Nedbalcová, Ph.D. 1 MVDr.

Více

OVĚŘENÁ TECHNOLOGIE. Výroba setu ke stanovení MIC antimikrobiálních látek u bakteriálních patogenů psů a koček

OVĚŘENÁ TECHNOLOGIE. Výroba setu ke stanovení MIC antimikrobiálních látek u bakteriálních patogenů psů a koček OVĚŘENÁ TECHNOLOGIE Výroba setu ke stanovení MIC antimikrobiálních látek u bakteriálních patogenů psů a koček MVDr. Kateřina Nedbalcová, Ph.D. MVDr. Monika Zouharová, Ph.D. Mgr. Lucie Pokludová, Ph.D.

Více

Protokol z praktik Mikrobiologie 1, letní semestr 2015/2016

Protokol z praktik Mikrobiologie 1, letní semestr 2015/2016 Protokol z praktik Mikrobiologie 1, letní semestr 2015/2016 Markéta Novotná, 2005 14. 18. 3. 2016 marketa.novotnaa@gmail.com Úkol č. 1: Příprava preparátů, barvení dle Grama Barvení dle Grama patří mezi

Více

N Laboratoř hydrobiologie a mikrobiologie

N Laboratoř hydrobiologie a mikrobiologie ÚSTAV TECHNOLOGIE VODY A PROSTŘEDÍ N217019 - Laboratoř hydrobiologie a mikrobiologie Název úlohy: Kultivační stanovení: Stanovení intestinálních enterokoků Vypracováno v rámci projektu: Inovace a restrukturalizace

Více

Bakteriální bioluminiscenční test. Stanovení účinnosti čištění odpadních vod pomocí bakteriálního bioluminiscenčního testu

Bakteriální bioluminiscenční test. Stanovení účinnosti čištění odpadních vod pomocí bakteriálního bioluminiscenčního testu Bakteriální bioluminiscenční test Stanovení účinnosti čištění odpadních vod pomocí bakteriálního bioluminiscenčního testu BBTT Cíl: Stanovit účinek odpadních vod na bakterie Vibrio fischeri. Principem

Více

PREGRADUÁLNÍ VZDĚLÁVÁNÍ V LÉKAŘSKÉ MIKROBIOLOGII

PREGRADUÁLNÍ VZDĚLÁVÁNÍ V LÉKAŘSKÉ MIKROBIOLOGII PREGRADUÁLNÍ VZDĚLÁVÁNÍ V LÉKAŘSKÉ MIKROBIOLOGII Milan Kolář Lékařská fakulta UP v Olomouci ZÁVĚRY Z PŘEDCHÁZEJÍCÍCH SETKÁNÍ Výuka lékařské mikrobiologie patří k nezbytným předpokladům pro výuku klinických

Více

PT#M/5-1/2018 (č.1004v) Bakteriologická diagnostika

PT#M/5-1/2018 (č.1004v) Bakteriologická diagnostika Státní zdravotní ústav Expertní skupina pro zkoušení způsobilosti Poskytovatel zkoušení způsobilosti akreditovaný ČIA podle ČSN EN ISO/IEC 17043, reg. č. 7001 Šrobárova 48, 100 42 Praha 10 Vinohrady Zkoušení

Více

Návod k odečítání. Disková difuzní metoda EUCAST pro vyšetřování antibiotické citlivosti. Verze 3.0 Duben 2013

Návod k odečítání. Disková difuzní metoda EUCAST pro vyšetřování antibiotické citlivosti. Verze 3.0 Duben 2013 Návod k odečítání Disková difuzní metoda EUCAST pro vyšetřování antibiotické citlivosti Verze 3.0 Duben 2013 2 Modifikace obrázkového návodu k odečítání EUCAST Verze Verze 3.0 Duben 2013 Verze 2.0 Květen

Více

MIKROBIOLOGIE. Grampozitivní kokovitá bakterie STAPHYLOCOCCUS AUREUS bakteriální kmen dle ATCC 1260 (CCM 888).

MIKROBIOLOGIE. Grampozitivní kokovitá bakterie STAPHYLOCOCCUS AUREUS bakteriální kmen dle ATCC 1260 (CCM 888). MIKROBIOLOGIE Veškeré testy jsou prováděny s těmito bakteriálními kmeny: Gramnegativní tyčinkovitá bakterie ESCHERICHIA COLI bakteriální kmen dle ATCC 9637 (CCM 2024). Grampozitivní kokovitá bakterie STAPHYLOCOCCUS

Více

PT#M/5-3/2018 (č.1032v) Bakteriologická diagnostika

PT#M/5-3/2018 (č.1032v) Bakteriologická diagnostika Státní zdravotní ústav Expertní skupina pro zkoušení způsobilosti Poskytovatel zkoušení způsobilosti akreditovaný ČIA podle ČSN EN ISO/IEC 17043, reg. č. 7001 Šrobárova 48, 100 42 Praha 10 Vinohrady Zkoušení

Více

Antimikrobiální terapie. MUDr. Lenka Černohorská, PhD.

Antimikrobiální terapie. MUDr. Lenka Černohorská, PhD. Antimikrobiální terapie MUDr. Lenka Černohorská, PhD. Antimikrobiální látky Antibiotika jsou látky, které působí proti bakteriím jiné skupiny: Antivirotika - na viry Antituberkulotika - na mykobacteria

Více

Vybraná vyšetření u pacientů s diabetes mellitus

Vybraná vyšetření u pacientů s diabetes mellitus ÚSTAV LÉKAŘSKÉ BIOCHEMIE A LABORATORNÍ DIAGNOSTIKY 1. LF UK Vybraná vyšetření u pacientů s diabetes mellitus Praktické cvičení z lékařské biochemie Všeobecné lékařství Martin Vejražka 2018/19 Obsah 1.

Více

VÝVOJ REZISTENCE BAKTERIÁLNÍCH PATOGENŮ

VÝVOJ REZISTENCE BAKTERIÁLNÍCH PATOGENŮ LABORATORNÍ LISTY Listopad č.29/2016 2016 Vážené kolegyně a kolegové, v tomto čísle našich Laboratorních listů Vám předkládáme statistiku rezistencí hlavních bakteriálních patogenů. Kmeny jsme testovali

Více

NA ANTIBIOTIKA NA ČOV

NA ANTIBIOTIKA NA ČOV Vodárenská biologie 2018, 6. 2. 2018 DETEKCE GENŮ REZISTENCE NA ANTIBIOTIKA NA ČOV TESTOVÁNÍ METODIKY Dana Vejmelková Kristýna Časarová Eva Proksová Jana Říhová Ambrožová PROBLEMATIKA REZISTENCE NA ANTIBIOTIKA

Více

Neodolatelný SELECTAN ORAL SELECTAN ORAL. 23 mg/ml koncentrát k použití v pitné vodě. Vysoký příjem, nejlepší léčba.

Neodolatelný SELECTAN ORAL SELECTAN ORAL. 23 mg/ml koncentrát k použití v pitné vodě. Vysoký příjem, nejlepší léčba. SELECTAN ORAL 23 mg/ml koncentrát k použití v pitné vodě Neodolatelný Vysoký příjem, nejlepší léčba. SELECTAN ORAL představuje léčivý roztok v pitné vodě řešící opakující se infekce u prasat. : nová molekula

Více

Cvičení ke kurzu Obecná ekotoxikologie. Úloha A - Stanovení ekotoxicity v testu klíčení rostlin

Cvičení ke kurzu Obecná ekotoxikologie. Úloha A - Stanovení ekotoxicity v testu klíčení rostlin Cvičení ke kurzu Obecná ekotoxikologie Nutné potřeby, které studenti přinesou s sebou do cvičení: - Tento návod - Poznámkový sešit, psací potřeby - Nůžky - Pravítko (s milimetrovým rozlišením) - Přezůvky

Více

2) Připravte si 7 sad po pěti zkumavkách. Do všech zkumavek pipetujte 0.2 ml roztoku BAPNA o různé koncentraci podle tabulky.

2) Připravte si 7 sad po pěti zkumavkách. Do všech zkumavek pipetujte 0.2 ml roztoku BAPNA o různé koncentraci podle tabulky. CVIČENÍ Z ENZYMOLOGIE 1) Stanovení Michaelisovy konstanty trypsinu pomocí chromogenního substrátu. Aktivita trypsinu se určí změřením rychlosti hydrolýzy chromogenního substrátu BAPNA (Nα-benzoyl-L-arginin-p-nitroanilid)

Více

Použití v laboratorních podmínkách

Použití v laboratorních podmínkách Použití v laboratorních podmínkách Obsah Velcorin použití v laboratorních podmínkách Strana 3 5 Úvod Strana 3 Bezpečnostní opatření Strana 3 Pracovní postup (senzoricky) Strana 4 Pracovní postup (mikrobiologicky)

Více

Cíle: Obecné zásady při odběru vzorků pro bakteriologické vyšetření

Cíle: Obecné zásady při odběru vzorků pro bakteriologické vyšetření Praktikum č. 8: Diagnostika ve veterinární mikrobiologii (odběr, zasílání a zpracování vzorků určených k bakteriologickému vyšetření. Metody kultivačního stanovení koncentrace bakterií. Cíle: 1. Seznámit

Více

RESPIRAČNÍ INFEKCE. Milan Kolář

RESPIRAČNÍ INFEKCE. Milan Kolář RESPIRAČNÍ INFEKCE Milan Kolář Ústav mikrobiologie FNOL a LF UP v Olomouci Nejčastějšími bakteriálními původci infekcí horních a dolních cest dýchacích v komunitním prostředí jsou kmeny: Streptococcus

Více

Eva Krejčí. Antibiotické středisko, Zdravotní ústav se sídlem v Ostravě Lékařská fakulta Ostravské univerzity

Eva Krejčí. Antibiotické středisko, Zdravotní ústav se sídlem v Ostravě Lékařská fakulta Ostravské univerzity Eva Krejčí Antibiotické středisko, Zdravotní ústav se sídlem v Ostravě Lékařská fakulta Ostravské univerzity Jeden z problémů v pediatrické péči, jenž budou řešit naši nástupci, bude narůstající rezistence

Více

Přímé stanovení celkového počtu buněk kvasinek pomocí Bürkerovy komůrky Provedení vitálního testu

Přímé stanovení celkového počtu buněk kvasinek pomocí Bürkerovy komůrky Provedení vitálního testu Přímé stanovení celkového počtu buněk kvasinek pomocí Bürkerovy komůrky Provedení vitálního testu Otázky k zamyšlení: Bude se jednat o přímé nebo nepřímé stanovení počtu buněk? Stanovujeme počet živých

Více

Návody pokusů k 2. laboratornímu cvičení Určeno pro žáky ZŠ

Návody pokusů k 2. laboratornímu cvičení Určeno pro žáky ZŠ Návody pokusů k 2. laboratornímu cvičení Určeno pro žáky ZŠ Obsah: 3. stanoviště analýza potravin...1 3.1 Škrob v potravinách...1 3.2 Stanovení ph vybraných potravin...2 3.3 Stanovení cukernatosti potravin...3

Více

European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing

European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing Rutinní a rozšířená kontrola kvality doporučená EUCAST Verze 6., platná od 0. 03. 06 Tento dokument se doporučuje citovat takto: "The European

Více

Jednotné pracovní postupy zkoušení krmiv STANOVENÍ OBSAHU PROBIOTICKÝCH BAKTERIÍ RODU ENTEROCOCCUS

Jednotné pracovní postupy zkoušení krmiv STANOVENÍ OBSAHU PROBIOTICKÝCH BAKTERIÍ RODU ENTEROCOCCUS Národní referenční laboratoř Strana 1 STANOVENÍ OBSAHU PROBIOTICKÝCH BAKTERIÍ RODU ENTEROCOCCUS 1 Rozsah a účel Postup slouží ke stanovení počtu probiotických bakterií v doplňkových látkách, premixech

Více

Hodnocení pekařského droždí

Hodnocení pekařského droždí Hodnocení pekařského droždí Čistá mikrobiální kultura kvasinek Saccharomyces Cerevisiae Hanzen Vyrábí se aerobní fermentací melasové zápary Díky kvasným schopnostem zajišťují kvasinky nakynutí těsta ovlivňují

Více

Co musí intenzivista vědět o antibiotické rezistenci?

Co musí intenzivista vědět o antibiotické rezistenci? Co musí intenzivista vědět o antibiotické rezistenci? V. Adámková Klinická mikrobiologie a ATB centrum Ústav lékařské biochemie a laboratorní diagnostiky 1. LF a VFN Praha Rezistenci máme v rukou Klasifikace

Více

Protokol č. 7 Pozorování živých a mrtvých buněk kvasinek Vitální test

Protokol č. 7 Pozorování živých a mrtvých buněk kvasinek Vitální test Protokol č. 7 Pozorování živých a mrtvých buněk kvasinek Vitální test Cíl cvičení: Bude se jednat o přímé nebo nepřímé stanovení počtu buněk? Stanovujeme počet živých nebo mrtvých buněk? Jak odlišíme živé

Více

Dana Baudišová. Novinky v mikrobiologii vody 2016

Dana Baudišová. Novinky v mikrobiologii vody 2016 Dana Baudišová Novinky v mikrobiologii vody 2016 Nová Směrnice EU o pitné vodě Vyšla na podzim 2015, do 2 let nutná implementace v České republice (tzn. bude nová vyhláška ) Hlavní změny (pro mikrobiology):

Více

Vyšetřování vody před 100 lety a dnes. RNDr. Jaroslav Šašek Státní zdravotní ústav

Vyšetřování vody před 100 lety a dnes. RNDr. Jaroslav Šašek Státní zdravotní ústav Vyšetřování vody před 100 lety a dnes RNDr. Jaroslav Šašek Státní zdravotní ústav Milníky mikrobiologie vody dávno před objevem mikroskopu je předpokládán výskyt mikrobů v prostředí podezření na vznik

Více

CERTIFIKOVANÁ METODIKA

CERTIFIKOVANÁ METODIKA CERTIFIKOVANÁ METODIKA Vyšetření citlivosti/rezistence bakteriálních původců mastitid k antimikrobiálním látkám stanovením minimálních inhibičních koncentrací MVDr. Kateřina Nedbalcová, Ph.D. MVDr. Monika

Více

CERTIFIKOVANÁ METODIKA

CERTIFIKOVANÁ METODIKA VÝZKUMNÝ ÚSTAV VETERINÁRNÍHO LÉKAŘSTVÍ, V.V.I. CERTIFIKOVANÁ METODIKA Vyšetření citlivosti/rezistence bakteriálních patogenů prasat k antimikrobiálním látkám stanovením minimálních inhibičních koncentrací

Více

Výskyt a typizace mléčných bakterií v baleném mase

Výskyt a typizace mléčných bakterií v baleném mase Výskyt a typizace mléčných bakterií v baleném mase 1 Štegnerová, H., 2 Nápravníková, E., 2 Steinhauserová, I., 1 Švec, P. 1 MU PřF, Česká sbírka mikroorganismů (CCM) 2 VFU, FVHE, Ústav hygieny a technologie

Více

Kultivační výkony změny v SZV Pavel Čermák

Kultivační výkony změny v SZV Pavel Čermák Kultivační výkony změny v SZV 2017 Pavel Čermák Kultivační půdy A008119 Půda agarová anaerobní 19,16 A008120 Půda agarová chromogenní 28,58 A008121 Půda agarová krevní základní 12,66 A008122 Půda agarová

Více

Suchá krevní skvrna (Suchá krevní kapka, Dried Blood Spot)

Suchá krevní skvrna (Suchá krevní kapka, Dried Blood Spot) Suchá krevní skvrna (Suchá krevní kapka, Dried Blood Spot) Kapka kapilární krve nanesena na testovací kartičku filtračního papíru a vysušena odběr z prstu ušního lalůčku z patičky (u novorozenců) odběrová

Více

EHK 544 Bakteriologická diagnostika-vyhodnocení

EHK 544 Bakteriologická diagnostika-vyhodnocení Zprávy CEM (SZÚ, Praha) 2007; 16(12): 555 557. EHK 544 Bakteriologická diagnostika-vyhodnocení Helena Žemličková, Marina Maixnerová, Jana Zavadilová, Petr Petráš, Pavla Urbášková CELKOVÉ HODNOCENÍ IDENTIFIKACÍ

Více

Jednotné pracovní postupy zkoušení krmiv STANOVENÍ OBSAHU KVASINEK RODU SACCHAROMYCES

Jednotné pracovní postupy zkoušení krmiv STANOVENÍ OBSAHU KVASINEK RODU SACCHAROMYCES Národní referenční laboratoř Strana 1 STANOVENÍ OBSAHU KVASINEK RODU SACCHAROMYCES 1 Rozsah a účel Metodika slouží ke stanovení počtu probiotických kvasinek v doplňkových látkách, premixech a krmivech.

Více

Průkaz beta-laktamáz širokého spektra (ESBL) a typu AmpC u enterobakterií

Průkaz beta-laktamáz širokého spektra (ESBL) a typu AmpC u enterobakterií Průkaz beta-laktamáz širokého spektra (ESBL) a typu AmpC u enterobakterií A. Definice - Širokospektré b-laktamázy - ESBL (extended-spectrum b-lactamases) jsou enzymy produkované některými mikroby, které

Více

OBOROVÁ SPECIFIKACE Březen 2010

OBOROVÁ SPECIFIKACE Březen 2010 OBOROVÁ SPECIFIKACE Březen 2010 Praní Hygienicko-epidemiologické kontroly v prádelně OS 80-05 Předmluva Vydávání oborových specifikací Textilním zkušebním ústavem (Centrum technické normalizace) bylo odsouhlaseno

Více

Kultivace bakterií na

Kultivace bakterií na Kultivace bakterií na pevných půdáchp Prezentace pro obor: Všeobecná sestra Jan Smíšek ÚLM 3. LF UK 2008 Základy kultivace Bakterie v mikrobiologii kultivujeme (pěstujeme) na tekutých a pevných živných

Více

kontaminovaných operačních výkonů, ale i u čistých operací, při kterých dochází k aplikaci

kontaminovaných operačních výkonů, ale i u čistých operací, při kterých dochází k aplikaci ANTIMIKROBNÍ PROFYLAXE Antibiotická profylaxe je aplikace vybraných antibakteriálních léčiv s cílem snížit výskyt infekcí v místě operačního výkonu. Použití profylaxe je indikováno nejen u kontaminovaných

Více

Hlavní mechanismy rezistence. In vitro testování citlivosti a rezistence. Základy antimikrobiální terapie VSAT081 Týden 4 Ondřej Zahradníček

Hlavní mechanismy rezistence. In vitro testování citlivosti a rezistence. Základy antimikrobiální terapie VSAT081 Týden 4 Ondřej Zahradníček Hlavní mechanismy rezistence. In vitro testování citlivosti a rezistence. Základy antimikrobiální terapie VSAT081 Týden 4 Ondřej Zahradníček Rezistence mikrobů na antimikrobiální látky Primární rezistence:

Více

Stav rezistence bakteriálních patogenů v Karlovarském kraji.

Stav rezistence bakteriálních patogenů v Karlovarském kraji. Stav rezistence bakteriálních patogenů v Karlovarském kraji. Vážení kolegové, předkládáme vám k prostudování statistiku rezistencí hlavních bakteriálních patogenů. Kmeny jsme otestovali standardní diskovou

Více

tvoří tvoř biofilm biofilm tvoří biof tvoř ilm tvoří biof tvoř ilm tvoří biofilm tvoř

tvoří tvoř biofilm biofilm tvoří biof tvoř ilm tvoří biof tvoř ilm tvoří biofilm tvoř Tvorba biofilmu u mikrobů izolovaných z klinického materiálu MUDr. Černohorská Lenka, Ph.D. Kdo tvoří biofilm (bakterie, viry, kvasinky, 1druh, více druhů, multibakteriální komunity) Kde se tvoří biofilm

Více

Zkouška inhibice růstu řas

Zkouška inhibice růstu řas Zkouška inhibice růstu řas VYPRACOVALI: TEREZA DVOŘÁKOVÁ JINDŘICH ŠMÍD Porovnáváme : Zkouška inhibice růstu sladkovodních řas Scenedesmus subspicatus a Senastrum capricornutum : sekce C.3. Zkouška inhibice

Více

ÚSTAV LÉKAŘSKÉ BIOCHEMIE A LABORATORNÍ DIAGNOSTIKY 1. LF UK. Vyšetření moči

ÚSTAV LÉKAŘSKÉ BIOCHEMIE A LABORATORNÍ DIAGNOSTIKY 1. LF UK. Vyšetření moči ÚSTAV LÉKAŘSKÉ BIOCHEMIE A LABORATORNÍ DIAGNOSTIKY 1. LF UK Vyšetření moči močový sediment, stanovení sodíku, opakování Praktické cvičení z lékařské biochemie Všeobecné lékařství Martin Vejražka, Lenka

Více

Disková difuzní metoda EUCAST pro vyšetřování citlivosti k antibiotikům. Verze 5.0 Leden 2015

Disková difuzní metoda EUCAST pro vyšetřování citlivosti k antibiotikům. Verze 5.0 Leden 2015 Disková difuzní metoda EUCAST pro vyšetřování citlivosti k antibiotikům Verze 5.0 Leden 2015 Obsah Půdy Příprava inokula Očkování ploten Disky Inkubace Odečítání zón Interpretace Kontrola kvality Analýza

Více

Státní veterinární ústav Praha. Odd. bakteriologie. Černý Tomáš

Státní veterinární ústav Praha. Odd. bakteriologie. Černý Tomáš Trendy vývoje antimikrobiální rezistence vybraných zoonotických bakterií v České republice v letech 2008-2015 a jejich srovnání s daty publikovanými EFSA Státní veterinární ústav Praha Odd. bakteriologie

Více

LABORATOŘE EUROMEDIC s.r.o. Oddělení klinické mikrobiologie a autovakcín

LABORATOŘE EUROMEDIC s.r.o. Oddělení klinické mikrobiologie a autovakcín Přehledy nejčastějších původců komunitních infekcí a jejich rezistence k antimikrobiálním látkám dle materiálů vyšetřených v mikrobiologické laboratoři v roce 2012. MUDr. Alžbeta Ouertani Říjen 2013 Respirační

Více

5. Bioreaktory. Schematicky jsou jednotlivé typy bioreaktorů znázorněny na obr. 5.1. Nejpoužívanějšími bioreaktory jsou míchací tanky.

5. Bioreaktory. Schematicky jsou jednotlivé typy bioreaktorů znázorněny na obr. 5.1. Nejpoužívanějšími bioreaktory jsou míchací tanky. 5. Bioreaktory Bioreaktor (fermentor) je nejdůležitější částí výrobní linky biotechnologického procesu. Jde o nádobu různého objemu, ve které probíhá biologický proces. Dochází zde k růstu buněk a tvorbě

Více

BAKTERIÁLNÍ REZISTENCE

BAKTERIÁLNÍ REZISTENCE BAKTERIÁLNÍ REZISTENCE Petr Zouhar, Fyziologický ústav AV ČR, v. v. i.; UK v Praze, PřF, Katedra fyziologie V této úloze se v hrubých rysech seznámíte s některými metodami používanými v běžné molekulárně

Více

European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing

European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing Rutinní a rozšířená kontrola kvality doporučená EUCAST Verze 8, platná od 0. 0. 08 Tento dokument se doporučuje citovat takto: "The European Committee

Více

BODIT TACHOV. Omezení zdravotních problémů u králíků pomocí aditiv - SURIANCE antibakteriální prostředek

BODIT TACHOV. Omezení zdravotních problémů u králíků pomocí aditiv - SURIANCE antibakteriální prostředek BODIT TACHOV Omezení zdravotních problémů u králíků pomocí aditiv - SURIANCE antibakteriální prostředek Použité aktivní principy Okyselovadla Definice HA H + + A - ph pka Klasifikace Organické kyseliny

Více

Jednotné pracovní postupy zkoušení krmiv STANOVENÍ OBSAHU DEKOCHINÁTU METODOU HPLC

Jednotné pracovní postupy zkoušení krmiv STANOVENÍ OBSAHU DEKOCHINÁTU METODOU HPLC Národní referenční laboratoř Strana 1 STANOVENÍ OBSAHU DEKOCHINÁTU METODOU HPLC 1 Rozsah a účel Tato metoda specifikuje podmínky pro stanovení dekochinátu metodou vysokoúčinné kapalinové chromatografie

Více

NOVINKY V NABÍDCE KONTROLNÍCH KMENŮ ČESKÉ SBÍRKY MIKROORGANISMŮ

NOVINKY V NABÍDCE KONTROLNÍCH KMENŮ ČESKÉ SBÍRKY MIKROORGANISMŮ M. Laichmanová a S. Karpíšková Česká sbírka mikroorganismů, Ústav experimentální biologie, Přírodovědecká fakulta, Masarykova univerzita, Tvrdého 14, 602 00 Brno NOVINKY V NABÍDCE KONTROLNÍCH KMENŮ ČESKÉ

Více