Biochemie v medicíně. Studijní materiály na internetu. Encyklopedie laboratorní medicíny pro klinickou praxi

Transkript

1 Studijní materiály na internetu Biochemie v medicíně Vladimíra Kvasnicová Encyklopedie laboratorní medicíny pro klinickou praxi oceněna Českou společností klinické biochemie a Institutem postgraduálního vzdělávání ve zdravotnictví spousta materiálů neustále doplňováno recenzováno přístup volný nutná pouze registrace (zdarma)

2 Osnova semináře: Příprava vyšetřovaného Zásady odběrů biologického materiálu Transport materiálu a jeho uchovávání Vyšetření STATIM Běžně vyšetřované analyty v krvi Vyšetření moči Další vyšetřovaný biologický materiál Jednotlivé vyšetřovací soubory Fyziologická rozmezí laboratorních hodnot Interpretace výsledků 1. PŘÍPRAVA VYŠETŘOVANÉHO 1. Popište metabolismus nalačno 2. Jak ovlivní hemolýza složení krevní plazmy? 3. Jak ovlivní koncentraci proteinů v plazmě fyzická námaha? 4. Jak získáme z krve sérum? 5. Jak získáme z krve plazmu? odběr nalačno (mezi 6. a 8. hodinou) = lačnění hodin večer vynechat tučná jídla příp. vynechat i léky (24-72 hod. před) nekouřit, nepít kávu a alkohol ráno neslazený čaj - dostatek tekutin! speciální příprava pro některá vyšetření

3 2. ZÁSADY ODBĚRŮ BIOLOG. MATERIÁLU zvážit indikaci vyšetření soustředit vyšetření do 1 odběru průvodky (žádanky) jednotlivá zdravotnická zařízení mají vlastní žádanky musí být řádně vyplněné, čitelné nesmí být potřísněny krví převzato z: (duben 2009)

4 Desinfekce před odběrem Jodisol, Ajatin, Decidin tinktura 70-80% alkohol nebo alkoholéter (u alergických na běžnou desinfekci) místo vpichu nesmí zůstat po desinfekci vlhké HEMOLÝZA Žádanka na biochemické vyšetření: (prosinec 2006) Odběr venózní krve odběr vsedě (30 min. před odběrem sedět - ambulantní pacienti) hodnoty vysokomolekulárních látek jsou v poloze vleže nižší! vstoje se zvyšují v průměru o %! fyzická námaha: změny látek podílejících se na energetickém metabolismu zahuštění makromolekulárních látek zvýšení aktivity CK, AST a kreatininu po vyhledání žíly uvolnit elastické obinadlo neodebírat stojící krev základní odběr = do zkumavek bez protisrážlivého činidla většina BCH vyšetření (sérum) speciálně myté sklo na stanovení Fe a Mg (plast) odběry s protisrážlivou komponentou fibrinogen, laktát, glukóza

5 Odběr kapilární krve 1. Definujte pojem fyziologická glykemie 2. Co je to ASTRUP? 3. Vysvětlete pojem chylózní sérum 4. Jaké jsou příčiny hyperbilirubinémie? 5. Jaký je princip centrifugace? glykémie ABR (lépe arteriální krev z a. radialis nebo a. femoralis) Nejčastější chyby při odběrech nedodržení předepsané přípravy nemocného špatná technologie odběru špatný transport a uchovávání biologického materiálu administrativní záměna vzorku Analýzu ovlivňují: HEMOLÝZA (K +, LD, AST) CHYLÓZNÍ SÉRUM HYPERBILIRUBINÉMIE (nad 100 µmol/l) rozdíly plazma / sérum při koagulaci se z rozpadlých trombocytů uvolňuje K +, ACP častější hemolýza je u séra

6 jednorázový sběr (čerstvá moč) střádaná moč: na bilanční sledování Odběry moče 3. TRANSPORT A UCHOVÁVÁNÍ MATERIÁLU do 1 hod. oddělit sérum ( K +, Cl -, glc) pokojová teplota snižuje aktivitu enzymů světlo snižuje bilirubin Obrázek převzat z (únor 2008) 4. Vyšetření STATIM zpracováno ihned laboratoř udává seznam statimově vyšetřovaných analytů 1. Jaká je celková koncentrace proteinů krevního séra? 2. Kterého proteinu je nejvíc? 3. Nakreslete křivku ELFO proteinů krevního séra 4. Čím se liší složení séra a plazmy? 5. Vyjmenujte funkce proteinů krevní plazmy

7 5. Běžně vyšetřované analyty v krvi PROTEINY celkový protein (64-83 g/l) albumin (32-45 g/l) ~ 60% ELFO C-reaktivní protein (CRP) fibrinogen prealbumin 1. Které enzymy se stanovují v krvi v rámci jaterních testů? 2. Jakou funkci má pankreatická amyláza? 3. Jakou funkci má pankreatická lipáza? 4. Jakou funkci má kreatinkináza? 5. Jakou funkci má laktátdehydrogenáza? ENZYMY ALT, AST, GMT, ALP AMS, LPS CHS, CK, LD, ACP ALT AST GMT ALP ACP AMS LPS CK CHE LD alanin aminotransferáza aspartát aminotransferáza gamma-glutamyl transpeptidáza alkalická fosfatáza kyselá fosfatáza α-amyláza lipáza kreatin kináza cholinesteráza laktát dehydrogenáza 1. Který kation převažuje v séru? 2. Který anion převažuje v séru? 3. Jakou funkci má vápník? 4. Jak je v krvi transportováno železo? 5. Jak je v krvi transportována měď?

8 IONTY Na +, K +, Cl -, Ca 2+, Mg 2+, fosfáty stopové prvky: Fe (+ vazebná kapacita), Cu, Zn, Mn, Co, F, Ni 1. Vysvětlete pojem hyperglykémie 2. Vysvětlete pojem ogtt 3. Kdy a odkud se do krve dostává inzulin? 4. Co je to C-peptid? 5. Co je to glykovaný hemoglobin? metabolismus SACHARIDŮ glukóza ogtt inzulin C-peptid glykovaný hemoglobin 1. Popište strukturu lipoproteinu 2. V jaké formě se v krvi vyskytují triacylglyceroly? 3. V jaké formě se v krvi vyskytuje cholesterol? 4. Jak jsou v krvi transportovány volné mastné kyseliny? 5. V kterých frakcích ELFO najdeme lipoproteiny?

9 metabolismus LIPIDŮ celkový cholesterol (volný + estery) HDL-cholesterol LDL-cholesterol triacylglyceroly (triglyceridy) apolipoproteiny (apoa-i, A-II, B) 1. Vyjmenujte nízkomolekulární dusíkaté látky krevní plazmy 2. Z čeho v těle vznikají? 3. Které z nich je nejvíc? 4. Co je příčinou jejich akumulace v krvi? 5. Co může být příčinou hyperamonémie? DUSÍKATÉ NEBÍLKOVINNÉ LÁTKY urea, kreatinin, kys. močová, bilirubin amoniak, aminokyseliny 1. Co je to acidémie? 2. Jaké jsou příčiny acidózy? 3. Co je to alkalémie? 4. Jaké jsou příčiny alkalózy? 5. Popište jak, kde a z čeho vzniká v těle bikarbonát

10 ACIDOBAZICKÁ ROVNOVÁHA ph, pco 2, po 2, HCO 3-, BE HORMONY diagnostika a léčba endokrinopatií diagnostika maligních nádorů a) nepřímé metody - stanovení běžných analytů, jejichž mtb je regulován hormonálně (glc, Na + /K + v moči) b) stanovení hormonů a jejich metabolitů v moči c) stanovení hormonů a jejich transportních proteinů v krvi (nmol/l - pmol/l drahé vyšetření) d) funkční testy (např. ogtt) DALŠÍ VYŠETŘENÍ 1. Co jsou to žlučové kyseliny? 2. Co jsou to porfyriny? 3. Vyjmenujte vitaminy rozpustné ve vodě 4. Vyjmenujte vitaminy nerozpustné ve vodě 5. Co je to karbonylhemoglobin? žlučové kyseliny porfyriny vitamíny toxikologická vyšetření (př. COHb)

11 6. VYŠETŘENÍ MOČI fyzikální (specifická hmotnost, objem) chemické (ph, proteiny, glc, ketolátky, bilirubin, urobilinogen, hemoglobin) = semikvantitativní morfologické vyšetření (močový sediment) 1. Jaké je ph moči při smíšené dietě? 2. Co je to proteinurie? 3. Co je to glykosurie? 4. Jaká forma bilirubinu se může vyskytovat v moči? 5. Co je to diuréza? obrázek sedimentu převzat z: (duben 2009) kvantitativní stanovení * proteiny (albumin, ELFO) * glukóza * ionty * urea * kreatinin * kyselina močová * α-ams * toxikologická vyšetření (léky,kovy) * hormony a jejich metabolity: kortizol, testosteron, pregnandiol, aldosteron, hcg, estriol 17-ketosteroidy, 17-hydroxysteroidy kys. vanilmandlová, kys. homovanilová, kys. 5-hydroxyindoloctová (5-HIO) 7. DALŠÍ VYŠETŘOVANÝ BIOLOG. MAT. stolice (tzv. okultní krvácení) likvor (proteiny, glc, laktát, Cl -, bilirubin, HbO 2, mikroskopické vyšetření) výpotek: exsudát (tekutina zánětlivého původu) transsudát (ultrafiltrát krevní plazmy málo proteinů) peritoneální (ascites), pleurální tekutina synoviální tekutina (cytologie, krystaly) plodová voda

12 8. Jednotlivé vyšetřovací soubory ZÁKLADNÍ SADA ( SCREENING ) Na +, K +, Cl - urea, kreatinin bilirubin, ALT, ALP, GMT SOUHRN kyselina močová, AST (glukóza, cholesterol, TAG, celkový protein) JATERNÍ SOUBOR bilirubin (sérum, moč + UBG) ALT, AST, GMT, ALP ELFO proteinů, IgG, IgA, IgM, prealbumin, CHS,... KARDIOLOGICKÝ SOUBOR myoglobin (0,5-2 hod.) troponiny T a I (3-4 hod.; specif. izofor.) CK-MBmass (µg/l), LD (izo LD1), AST LEDVINNÝ SOUBOR sérum: urea, kreatinin moč: chemicky + sediment SVALOVÝ METABOLISMUS CK, AST LD, myoglobin ionty, osmolalita, ELFO, kys. močová, clearance...

13 SOUBOR PRO KOSTNÍ MTB enzymy specif. pro osteoblasty (ALP) a osteoklasty (ACP) bílkoviny kostní hmoty ukazatelé novotvorby kostní tkáně: b-alp (kostní alkalická fosfatáza) osteokalcin (vedle kolagenu je hlavní bílkovinou kostní tkáně - vazba hydroxyapatitu) C-terminální propeptid prokolagenu typu I ukazatelé kostní resorpce: kostní ACP (kyselá fosfatáza) odpad hydroxyprolinu, glykosidů hydroxylyzinu nebo deoxypyridinolinu (tvoří příčné vazby mezi vlákny kolagenu) močí denní ztráty Ca 2+ močí VYŠETŘENÍ PANKREATU AMS (+ moč), LPS, Ca 2+ ( ) DIABETICKÝ SOUBOR glykémie, ogtt moč: glukóza, ketolátky glykovaný Hb, TAG, inzulín, glukagon,... LIPIDOVÝ SOUBOR cholesterol, TAG HDL-cholesterol, apob, apoai, ELFO lipoproteinů AKTIVITA ZÁNĚTLIVÉHO PROCESU ELFO proteinů, CRP orosomukoid, α-1-antitrypsin, haptoglobin, ceruloplazmin, C3 a C4 komplement, IgG, IgA, IgM, STAV VÝŽIVY celkový protein, albumin, urea, glukóza prealbumin, transferin,. ONKOLOGICKÝ SOUBOR ELFO proteinů tumormarkery

14 Biochemická laboratoř: automatický analyzátor 9. FYZIOLOG. ROZMEZÍ LAB. HODNOT každá laboratoř uvádí své hodnoty různé metodiky, odlišné firemní sety snahy o sjednocení: Národní číselník laboratorních položek (MZ) (viz. NČLP - seznam položek podle názvů - základní pracovní seznam Obrázek převzat z (říjen 2007) S_Glukóza * znamená fyziologické hodnoty bez ohledu na metodu analýzy Glukóza (S; látková konc. [mmol/l] *) Glukóza (S; látková konc. [mmol/l] abs. spektrofotometrie) Glukóza (S; látková konc. [mmol/l] abs. spektrofot. kin.) Glukóza (S; látková konc. [mmol/l] spektrofotom. reflexní) Glukóza (S; látková konc. [mmol/l] enzym. elektrody) S Věk od Věk do MHD Nízké Snížené DRM HRM Zvýšené Vysoké MHH Jedn. Další údaje 0D 1D 1,3 1,5 1,7 2,22 3, mmol/l 1D 4T 1 2,0 2,5 2,78 4, mmol/l 4T 15R 1 2,0 2,8 3,33 5, mmol/l 15R 60R 1 2,0 2,8 3,88 5, mmol/l 60R 70R 1 2,0 3,0 4,44 5, mmol/l 70R 99R 1 2,0 3,0 4,61 5, mmol/l DRM = dolní referenční mez, HRM = horní referenční mez

15 Důležité fyziologické hodnoty (NČLP): 10. INTERPRETACE VÝSLEDKŮ ph 7,36-7,44 po 2 8,9-14,7 kpa pco 2 4,80-5,90 kpa HCO ± 2 mm BE 0 ± 2,5 mm Na mm K + 3,8-5,4 mm Cl mm glukóza 3,9-5,6 mm cholesterol 2,9-5,0 mm bilirubin 3,4-17,1 µm ALT 0,0-0,73 µkat/l ABR (Astrup) výsledek je nutno vztahovat: k fyziologickému rozmezí k dalším vyšetřením ke stejným vyšetřením v časovém sledu nutno posuzovat v kontextu s klinickým stavem a léčbou faktory ovlivňující výsledek: 1) BIORYTMY cyklické změny koncentrace hormony (diurnální rytmus: např. kortizol; měsíční rytmus: např. ženské pohlavní hormony) některé další analyty: např. kreatinin, Fe, K +, celkový protein, hemoglobin,... Cirkadiánní rytmus s maximem odpoledne a večer ACP Gastrin TSH Osteokalcin PTH Prolaktin Leukocyty Cirkadiánní rytmus s maximem ráno ACTH Katecholaminy Kortizol (a ostatní adrenální steroidy) Železo Renin Aldosteron Glukózová tolerance Testosteron Tkáňový aktivátor plazminogenu (tpa), inhibitor tkáňového plazminogenu (PAI) Cirkadiánní rytmus s maximem v noci Melatonin Interleukin-1α Somatropin LH (jen v pubertě) Převzato z CD-ROM: Encyklopedie laboratorní medicíny pro klinickou praxi 7

16 2) POHLAVÍ a VĚK u některých analytů se liší fyziologické rozmezí mezi mužem a ženou děti mívají nižší hodnoty, některé analyty jsou však ve vyšší koncentraci 3) GRAVIDITA v krvi matky jsou látky produkované fetoplacentární jdnotkou: hcg, α1-fetoprotein, ALP-placentární izoenzym, estrogeny a jejich metabolity hemodiluce: Hb glomerulární filtrace: kreatininu a urey v séru poslední trimestr: cholesterol 4) RASA, ETNICKÁ / SOC. SKUPINA odlišné fyziologické rozmezí některých analytů (AMS, CK) různé stravovací návyky 5) SOUČASNÉ JINÉ ONEMOCNĚNÍ např. chronická aktivní hepatopatie: poměr aminotransferáz jako u infarktu myokardu 6) BIOLOGICKÝ POLOČAS malnutrice dlouhotrvající: lze použít albumin krátkodobá: transferin nebo prealbumin diagnostika infarktu myokardu: enzymy

17 7) FYZICKÁ AKTIVITA a STRES přesun tekutiny do intersticia (hemokoncentrace: proteiny v séru) uvolnění sval. proteinů do krve ( CK, AST, LD, myoglobin) anaerobní zátěž: ph, laktátu energetické substráty ( TAG, glc) hormonální změny 8) POTRAVA, ALKOHOL, TEKUTINY např. glc, TAG, ph moči hemokoncentrace 9) LÉKY vliv na metabolismus, transport, analýzu 10) ZPŮSOB STANOVENÍ REF. HODNOT založen na principech pravděpodobnosti (distribuce výsledků v populaci) dané množství zdravých jedinců (obvykle 5 %) má hodnoty ležící mimo referenční rozmezí