Biochemie v medicíně. Vladimíra Kvasnicová

Transkript

1 Biochemie v medicíně Vladimíra Kvasnicová

2 Studijní materiály na internetu Encyklopedie laboratorní medicíny pro klinickou praxi oceněna Českou společností klinické biochemie a Institutem postgraduálního vzdělávání ve zdravotnictví spousta materiálů neustále doplňováno recenzováno přístup volný nutná pouze registrace (zdarma)

3

4

5

6 Osnova semináře: Příprava vyšetřovaného Zásady odběrů biologického materiálu Transport materiálu a jeho uchovávání Vyšetření STATIM Běžně vyšetřované analyty v krvi (viz. seminář Krev) Vyšetření moči Další vyšetřovaný biologický materiál Jednotlivé vyšetřovací soubory Fyziologická rozmezí laboratorních hodnot Interpretace výsledků

7 Laboratorní příručka - Ústav laboratorní diagnostiky - FNKV

8 1. PŘÍPRAVA VYŠETŘOVANÉHO odběr nalačno (mezi 6. a 8. hodinou) = lačnění hodin večer vynechat tučná jídla příp. vynechat i léky (24-72 hod. před) nekouřit, nepít kávu a alkohol ráno neslazený čaj - dostatek tekutin! speciální příprava pro některá vyšetření

9 2. ZÁSADY ODBĚRŮ BIOLOG. MATERIÁLU zvážit indikaci vyšetření soustředit vyšetření do 1 odběru průvodky (žádanky) jednotlivá zdravotnická zařízení mají vlastní žádanky musí být řádně vyplněné, čitelné nesmí být potřísněny krví

10

11

12 převzato z: (duben 2009)

13 Žádanka na biochemické vyšetření: (prosinec 2006)

14

15 Desinfekce před odběrem Jodisol, Ajatin, Decidin tinktura, aj % alkohol nebo alkoholéter (u alergických na běžnou desinfekci) místo vpichu nesmí zůstat po desinfekci vlhké HEMOLÝZA

16 Odběr venózní krve odběr vsedě (30 min. před odběrem sedět - ambulantní pacienti) hodnoty vysokomolekulárních látek jsou v poloze vleže nižší! vstoje se zvyšují v průměru o %! fyzická námaha: změny látek podílejících se na energetickém metabolismu zahuštění makromolekulárních látek zvýšení aktivity CK, AST a kreatininu

17 po vyhledání žíly uvolnit elastické obinadlo neodebírat stojící krev základní odběr = do zkumavek bez protisrážlivého činidla většina BCH vyšetření (sérum) speciálně myté sklo na stanovení Fe a Mg (plast) odběry s protisrážlivou komponentou fibrinogen, laktát, glukóza

18 1. Definujte pojem fyziologická glykemie 2. Co je to ASTRUP? 3. Vysvětlete pojem chylózní sérum 4. Jaké jsou příčiny hyperbilirubinémie? 5. Jaký je princip centrifugace?

19 Odběr kapilární krve glykémie ABR (lépe arteriální krev z a. radialis nebo a. femoralis)

20 1. Co je to acidémie? 2. Jaké jsou příčiny acidózy? 3. Co je to alkalémie? 4. Jaké jsou příčiny alkalózy? 5. Popište jak, kde a z čeho vzniká v těle bikarbonát

21 Nejčastější chyby při odběrech nedodržení předepsané přípravy nemocného špatná technologie odběru špatný transport a uchovávání biologického materiálu administrativní záměna vzorku

22 Analýzu ovlivňují: HEMOLÝZA (K +, LD, AST) CHYLÓZNÍ SÉRUM HYPERBILIRUBINÉMIE (nad 100 µmol/l) rozdíly plazma / sérum při koagulaci se z rozpadlých trombocytů uvolňuje K +, ACP častější hemolýza je u séra

23 Odběry moče jednorázový sběr (čerstvá moč) střádaná moč: na bilanční sledování

24 3. TRANSPORT A UCHOVÁVÁNÍ MATERIÁLU do 1 hod. oddělit sérum ( K +, Cl -, glc) pokojová teplota snižuje aktivitu enzymů světlo snižuje bilirubin Obrázek převzat z (únor 2008)

25 4. Vyšetření STATIM zpracováno ihned laboratoř udává seznam statimově vyšetřovaných analytů

26

27

28 HORMONY diagnostika a léčba endokrinopatií diagnostika maligních nádorů a) nepřímé metody - stanovení běžných analytů, jejichž mtb je regulován hormonálně (glc, Na + /K + v moči) b) stanovení hormonů a jejich metabolitů v moči c) stanovení hormonů a jejich transportních proteinů v krvi (nmol/l - pmol/l drahé vyšetření) d) funkční testy (např. ogtt)

29 kopie žádanky na speciální vyšetření (hormony) prováděné ve FNKV

30 kopie žádanky na speciální vyšetření (hormony) prováděné ve FNKV

31 ESTRADIOL PROGESTERON Převzato z laboratorní příručky na

32 Table 1. Production Rate of Sex Steroids in Women at Different Stages of the Menstrual Cycle SEX STEROIDS* Progesterone (mg) 17α-Hydroxyprogesterone (mg) Dehydroepiandrosterone (mg) Androstenedione (mg) Testosterone (µg) Estrone (µg) Estradiol (µg) Early Follicular From Baird DT. Fraser IS. Blood production and ovarian secretion rates of esuadiol-17β and estrone in women throughout the menstrual cycle. J Clin Endocrinol Metab 38: l The Endocrine Society. *Values are expressed in milligrams or micrograms per 24 hours DAILY PRODUCTION RATE Preovulatory Mid-luteal

33 1. Co jsou to žlučové kyseliny? 2. Co jsou to porfyriny? 3. Vyjmenujte vitaminy rozpustné ve vodě 4. Vyjmenujte vitaminy nerozpustné ve vodě 5. Co je to karbonylhemoglobin?

34 DALŠÍ VYŠETŘENÍ žlučové kyseliny porfyriny vitamíny toxikologická vyšetření (př. COHb)

35 6. VYŠETŘENÍ MOČI fyzikální (specifická hmotnost, objem) chemické (ph, proteiny, glc, ketolátky, bilirubin, urobilinogen, hemoglobin) = semikvantitativní morfologické vyšetření (močový sediment) obrázek sedimentu převzat z: (duben 2009)

36 1. Jaké je ph moči při smíšené dietě? 2. Co je to proteinurie? 3. Co je to glykosurie? 4. Jaká forma bilirubinu se může vyskytovat v moči? 5. Co je to diuréza?

37 kvantitativní stanovení * proteiny (albumin, ELFO) * glukóza * ionty * urea * kreatinin * kyselina močová * α-ams * toxikologická vyšetření (léky,kovy) * hormony a jejich metabolity: kortizol, testosteron, pregnandiol, aldosteron, hcg, estriol 17-ketosteroidy, 17-hydroxysteroidy kys. vanilmandlová, kys. homovanilová, kys. 5-hydroxyindoloctová (5-HIO) mikroalbuminurie = stanovení albuminu v moči v rozmezí mg/l (není prokazatelné diagnostickým proužkem); zachytí počáteční poškození glomerulárního filtru (zvýšená propustnost endoteliálních buněk); vyjadřuje se ve ztrátách albuminu za minutu (fyz. do 20 µg/min.) - nález mikroalbuminurie ukazuje na možné poškození ledvin v budoucnu; bývá u diabetiků a hypertoniků

38 7. DALŠÍ VYŠETŘOVANÝ BIOLOG. MAT. stolice (tzv. okultní krvácení) likvor (proteiny, glc, laktát, Cl -, bilirubin, HbO 2, mikroskopické vyšetření) výpotek: exsudát (tekutina zánětlivého původu) transsudát (ultrafiltrát krevní plazmy málo proteinů) peritoneální (ascites), pleurální tekutina synoviální tekutina (cytologie, krystaly) plodová voda

39 SOUHRN

40 8. Jednotlivé vyšetřovací soubory ZÁKLADNÍ SADA ( SCREENING ) Na +, K +, Cl - urea, kreatinin bilirubin, ALT, ALP, GMT kyselina močová, AST (glukóza, cholesterol, TAG, celkový protein) (látky stanovované v krvi - stručný přehled)

41 JATERNÍ SOUBOR bilirubin (sérum, moč + UBG) ALT, AST, GMT, ALP ELFO proteinů, IgG, IgA, IgM, prealbumin, CHS,... LEDVINNÝ SOUBOR sérum: urea, kreatinin moč: chemicky + sediment ionty, osmolalita, ELFO, kys. močová, clearance...

42 KARDIOLOGICKÝ SOUBOR myoglobin (0,5-2 hod.) troponiny T a I (3-4 hod.; specif. izofor.) CK-MBmass (µg/l), LD (izo LD1), AST SVALOVÝ METABOLISMUS CK, AST LD, myoglobin

43 SOUBOR PRO KOSTNÍ MTB enzymy specif. pro osteoblasty (ALP) a osteoklasty (ACP) bílkoviny kostní hmoty ukazatelé novotvorby kostní tkáně: b-alp (kostní alkalická fosfatáza) osteokalcin (vedle kolagenu je hlavní bílkovinou kostní tkáně - vazba hydroxyapatitu) C-terminální propeptid prokolagenu typu I ukazatelé kostní resorpce: kostní ACP (kyselá fosfatáza) odpad hydroxyprolinu, glykosidů hydroxylyzinu nebo deoxypyridinolinu (tvoří příčné vazby mezi vlákny kolagenu) močí denní ztráty Ca 2+ močí

44 VYŠETŘENÍ PANKREATU AMS (+ moč), LPS, Ca 2+ ( ) DIABETICKÝ SOUBOR glykémie, ogtt moč: glukóza, ketolátky glykovaný Hb, TAG, inzulín, glukagon,...

45 LIPIDOVÝ SOUBOR cholesterol, TAG HDL-cholesterol, apob, apoai, ELFO lipoproteinů STAV VÝŽIVY celkový protein, albumin, urea, glukóza prealbumin, transferin,.

46 AKTIVITA ZÁNĚTLIVÉHO PROCESU ELFO proteinů, CRP orosomukoid, α-1-antitrypsin, haptoglobin, ceruloplazmin, C3 a C4 komplement, IgG, IgA, IgM, ONKOLOGICKÝ SOUBOR ELFO proteinů tumormarkery

47 Biochemická laboratoř: automatický analyzátor Obrázek převzat z (říjen 2007)

48 9. FYZIOLOG. ROZMEZÍ LAB. HODNOT každá laboratoř uvádí své hodnoty různé metodiky, odlišné firemní sety snahy o sjednocení: Národní číselník laboratorních položek (MZ) (viz. NČLP - seznam položek podle názvů - základní pracovní seznam S_Glukóza * znamená fyziologické hodnoty bez ohledu na metodu analýzy Glukóza (S; látková konc. [mmol/l] *) Glukóza (S; látková konc. [mmol/l] abs. spektrofotometrie) Glukóza (S; látková konc. [mmol/l] abs. spektrofot. kin.) Glukóza (S; látková konc. [mmol/l] spektrofotom. reflexní) Glukóza (S; látková konc. [mmol/l] enzym. elektrody)

49

50 S Věk od Věk do MHD Nízké Snížené DRM HRM Zvýšené Vysoké MHH Jedn. Další údaje 0D 1D 1,3 1,5 1,7 2,22 3, mmol/l 1D 4T 1 2,0 2,5 2,78 4, mmol/l 4T 15R 1 2,0 2,8 3,33 5, mmol/l 15R 60R 1 2,0 2,8 3,88 5, mmol/l 60R 70R 1 2,0 3,0 4,44 5, mmol/l 70R 99R 1 2,0 3,0 4,61 5, mmol/l DRM = dolní referenční mez, HRM = horní referenční mez

51 Důležité fyziologické hodnoty (NČLP): ph 7,36-7,44 po 2 8,9-14,7 kpa pco 2 4,80-5,90 kpa HCO ± 2 mm BE 0 ± 2,5 mm Na mm K + 3,8-5,4 mm Cl mm glukóza 3,9-5,6 mm cholesterol 2,9-5,0 mm bilirubin 3,4-17,1 µm ALT 0,0-0,73 µkat/l ABR (Astrup)

52 10. INTERPRETACE VÝSLEDKŮ výsledek je nutno vztahovat: k fyziologickému rozmezí k dalším vyšetřením ke stejným vyšetřením v časovém sledu nutno posuzovat v kontextu s klinickým stavem a léčbou

53 faktory ovlivňující výsledek: 1) BIORYTMY cyklické změny koncentrace hormony (diurnální rytmus: např. kortizol; měsíční rytmus: např. ženské pohlavní hormony) některé další analyty: např. kreatinin, Fe, K +, celkový protein, hemoglobin,...

54 Cirkadiánní rytmus s maximem odpoledne a večer ACP Gastrin TSH Osteokalcin PTH Prolaktin Leukocyty Cirkadiánní rytmus s maximem ráno ACTH Katecholaminy Kortizol (a ostatní adrenální steroidy) Železo Renin Aldosteron Glukózová tolerance Testosteron Tkáňový aktivátor plazminogenu (tpa), inhibitor tkáňového plazminogenu (PAI) Cirkadiánní rytmus s maximem v noci Melatonin Interleukin-1α Somatropin LH (jen v pubertě) Převzato z CD-ROM: Encyklopedie laboratorní medicíny pro klinickou praxi 7

55 2) POHLAVÍ a VĚK u některých analytů se liší fyziologické rozmezí mezi mužem a ženou děti mívají nižší hodnoty, některé analyty jsou však ve vyšší koncentraci

56 3) GRAVIDITA v krvi matky jsou látky produkované fetoplacentární jdnotkou: hcg, α1-fetoprotein, ALP-placentární izoenzym, estrogeny a jejich metabolity hemodiluce: Hb glomerulární filtrace: kreatininu a urey v séru poslední trimestr: cholesterol

57 4) RASA, ETNICKÁ / SOC. SKUPINA odlišné fyziologické rozmezí některých analytů (AMS, CK) různé stravovací návyky 5) SOUČASNÉ JINÉ ONEMOCNĚNÍ např. chronická aktivní hepatopatie: poměr aminotransferáz jako u infarktu myokardu

58 6) BIOLOGICKÝ POLOČAS malnutrice dlouhotrvající: lze použít albumin krátkodobá: transferin nebo prealbumin diagnostika infarktu myokardu: enzymy

59 7) FYZICKÁ AKTIVITA a STRES přesun tekutiny do intersticia (hemokoncentrace: proteiny v séru) uvolnění sval. proteinů do krve ( CK, AST, LD, myoglobin) anaerobní zátěž: ph, laktátu energetické substráty ( TAG, glc) hormonální změny

60 8) POTRAVA, ALKOHOL, TEKUTINY např. glc, TAG, ph moči hemokoncentrace 9) LÉKY vliv na metabolismus, transport, analýzu

61 10) ZPŮSOB STANOVENÍ REF. HODNOT založen na principech pravděpodobnosti (distribuce výsledků v populaci) dané množství zdravých jedinců (obvykle 5 %) má hodnoty ležící mimo referenční rozmezí

62