ČSN EN ISO OPRAVA 1

Transkript

1 ČEKÁ TECHNICKÁ NORMA IC Únor 2015 Mikrobiologie potravin, krmiv a vody Příprava, výroba, uchovávání a zkoušení výkonnosti kultivačních půd ČN EN IO OPRAVA Corrigendum ČN EN IO ( ) Mikrobiologie potravin, krmiv a vody Příprava, výroba, uchovávání a zkoušení výkonnosti kultivačních půd z prosince 2014 se na základě Correction Notice vydaného CEN dne opravuje takto: Na titulní straně se označení shodnosti opravuje takto: idt IO 11133:2014, Corrected version: Titulní strana evropské normy, předmluva a tabulky E.1 a F.1 se nahrazují takto: Úřad pro technickou lizaci, metrologii a státní zkušebnictví, Podle zákona č. 22/1997 b. smějí být české technické normy rozmnožovány a rozšiřovány jen se souhlasem Úřadu pro technickou lizaci, metrologii a státní zkušebnictví.

2 2

3 EVROPKÁ NORMA EN IO EUROPEAN TANDARD NORME EUROPÉENNE EUROPÄICHE NORM Květen 2014 IC Nahrazuje CEN IO/T :2009, CEN IO/T :2003 Mikrobiologie potravin, krmiv a vody Příprava, výroba, uchovávání a zkoušení výkonnosti kultivačních půd (IO 11133:2014, opravené vydání ) Microbiology of food, animal feed and water Preparation, production, storage and performance testing of culture media (IO 11133:2014, Corrected version ) Microbiologie des aliments des aliments pour animaux et de l'eau Préparation, production, stockage et essais de performance des milieux de culture (IO 11133:2014, Version corrigée ) Mikrobiologie von Lebensmitteln, Futtermitteln und Wasser Vorbereitung, Herstellung, Lagerung und Leistungsprüfung von Nährmedien (IO 11133:2014, korrigierte Fassung )) Tato evropská byla schválena CEN dne Členové CEN jsou povinni splnit vnitřní předpisy CEN/CENELEC, v nichž jsou stanoveny podmínky, za kterých se této evropské normě bez jakýchkoliv modifikací uděluje status národní normy. Aktualizované seznamy a bibliografické citace týkající se těchto národních norem lze obdržet na vyžádání v Řídicím centru CEN-CENELEC nebo u kteréhokoliv člena CEN. Tato evropská existuje ve třech oficiálních verzích (anglické, francouzské, německé). Verze v každém jiném jazyce přeložená členem CEN do jeho vlastního jazyka, za kterou zodpovídá a kterou notifikuje Řídicímu centru CEN-CENELEC, má stejný status jako oficiální verze. Členy CEN jsou národní lizační orgány Belgie, Bulharska, Bývalé jugoslávské republiky Makedonie, České republiky, Dánska, Estonska, Finska, Francie, Chorvatska, Irska, Islandu, Itálie, Kypru, Litvy, Lotyšska, Lucemburska, Maďarska, Malty, Německa, Nizozemska, Norska, Polska, Portugalska, Rakouska, Rumunska, Řecka, lovenska, lovinska, pojeného království, Španělska, Švédska, Švýcarska a Turecka. Evropský výbor pro lizaci European Committee for tandardization Comité Européen de Normalisation Europäisches Komitee für Normung Řídicí centrum CEN-CENELEC: Avenue Marnix 17, B-1000 Brusel 2014 CEN Veškerá práva pro využití v jakékoli formě a jakýmikoli prostředky Ref. č. EN IO 11133:2014 E jsou celosvětově vyhrazena národním členům CEN. 3

4 Předmluva Tento dokument (EN IO 1133:2014, opravené vydání ) vypracovala technická komise IO/TC 34 Potravinářské výrobky ve spolupráci s technickou komisí CEN/TC 275 Analýza potravin Horizontální metody, jejíž sekretariát zajišťuje DIN. Této evropské normě je nutno nejpozději do listopadu 2014 udělit status národní normy, a to buď vydáním identického textu, nebo schválením k přímému používání, a národní normy, které jsou s ní v rozporu, je nutno zrušit nejpozději do listopadu Upozorňuje se na možnost, že některé prvky tohoto dokumentu mohou být předmětem patentových práv. CEN [a/nebo CENELEC] nelze činit odpovědným za identifikaci jakéhokoliv nebo všech patentových práv. Tento dokument nahrazuje CEN IO/T :2003, CEN IO/T :2009. Podle vnitřních předpisů CEN/CENELEC jsou tuto evropskou normu povinny zavést národní lizační orgány Belgie, Bulharska, Bývalé jugoslávské republiky Makedonie, České republiky, Dánska, Estonska, Finska, Francie, Chorvatska, Irska, Islandu, Itálie, Kypru, Litvy, Lotyšska, Lucemburska, Maďarska, Malty, Německa, Nizozemska, Norska, Polska, Portugalska, Rakouska, Rumunska, Řecka, lovenska, lovinska, pojeného království, Španělska, Švédska, Švýcarska a Turecka. Oznámení o schválení Text IO 11133:2014, opravené vydání byl schválen CEN jako EN IO 11133:2014 bez jakýchkoliv modifikací. 4

5 Tabulka E.1 Testovací mikroorganismy a kritéria výkonnosti kultivačních půd běžně používaných v mikrobiologii potravin elektivní pro stanovení počtu mikroorganismů Charakteristická reakce agar pro listerie: Ottaviani a Agosti Listeria monocytogenes IO Listeria monocytogenes 4b Listeria monocytogenes 1/2a b TA kvantitativní P R 0,5 modrozelené kolonie se zónou zákalu nebo NA2) Enterococcus faecalis d Listeria innocua modrozelené kolonie bez zóny zákalu Baird- Parker koagulázopozitivní stafylokoky IO (24 ± 2) h až (48 ± 2) h při taphylococcus aureus b TA kvantitativní P R 0,5 černé nebo šedé kolonie se zónou projasnění (egg-yolk reakce s projasněním) 5 (48 ± 2) h při (24 ± 2) h až (48 ± 2) h při taphylococcus saprophyticus taphylococcus epidermidis b černé nebo šedé kolonie bez egg-yolk reakce s projasněním BGBLB L koliformní bakterie NA2) IO 4831 Viz informativní národní příloha NA. (24 ± 2) h až (48 ± 2) h při (30 ± 1) C b Citrobacter freundii Enterococcus faecalis d zákal f a v Durhamově zkumavce plyn částečná inhibice bez tvorby plynu tvorba plynu a zákal

6 CFC spp. IO Tabulka E.1 (pokračování) elektivní pro stanovení počtu mikroorganismů (25 ± 1) C fluorescens b fragi Charakteristická reakce TA kvantitativní P R 0,5 DG18 kvasinky a plísně IO dní při (25 ± 1) C accharomyces cerevisiae Wallemia sebi b b Aspergillus restrictus Eurotium rubrum DA kvantitativní P R 0,5 v závislosti na druhu: charakteristické kolonie/vegetativní rozmnožovací jednotky 6 g Bacillus subtilis subsp. spizizenii žádný růst DRBC kvasinky a plísně IO dní při (25 ± 1) C accharomyces cerevisiae Aspergillus brasiliensis b b Candida albicans Mucor racemosus DA kvantitativní P R 0,5 v závislosti na druhu: charakteristické kolonie/vegetativní rozmnožovací jednotky g Bacillus subtilis subsp. spizizenii žádný růst EC L IO 7251 (24 ± 2) h až (48 ± 2) h při (44 ± 1) C b zákal f a v Durhamově zkumavce plyn tvorba plynu a zákal žádný růst

7 Tabulka E.1 (pokračování) elektivní pro stanovení počtu mikroorganismů Charakteristická reakce I ( T ) bakterie redukující sulfity IO (24 ± 3) h až (48 ± 2) h při anaerobní atmosféra Clostridium perfringens b TA nebo jiná neselektivní půda pro anaeroby kvantitativní P R 0,5 černé kolonie chybějící černé zbarvení LT L koliformní bakterie IO 4831 (24 ± 2) h až (48 ± 2) h při (30 ± 1) C b Citrobacter freundii Enterococcus faecalis d zákal f a v Durhamově zkumavce plyn tvorba plynu a zákal žádný růst 7 IO 7251 (24 ± 2) h až (48 ± 2) h při b Enterococcus faecalis d zákal f a v Durhamově zkumavce plyn tvorba plynu a zákal žádný růst mccda bakterie rodu Campylobacter IO (41,5 ± 1) C mikroaerobní atmosféra Campylobacter jejuni b Campylobacter coli krevní agar kvantitativní P R 0,5 úplná nebo částečná ihibice (0 až 1) kolonie šedavé, ploché a vlhké, někdy s kovovým leskem taphylococcus aureus MR bakterie mléčného kvašení IO (72 ± 3) h při (30 ± 1) C Lactobacillus sakei Lactococcus lactis Pediococcus pentosaceus b b Bacillus cereus již ověřená šarže MR kvantitativní P R 0,7 kolonie charakteristické pro jednotlivé druhy

8 MYP Bacillus cereus IO 7932 Tabulka E.1 (pokračování) elektivní pro stanovení počtu mikroorganismů (24 ± 3) h až (30 ± 1) C (30 ± 1) C Bacillus cereus TA kvantitativní P R 0,5 Bacillus subtilis subsp. spizizenii Charakteristická reakce růžové kolonie se zónou precipitace žluté kolonie bez zóny precipitace RPFA koagulázopozitivní stafylokoky IO (24 ± 2) h až (48 ± 2) h při taphylococcus aureus b TA kvantitativní P R 0,5 černé nebo šedé kolonie se zónou zákalu (48 ± 2) h při 8 (24 ± 2) h až (48 ± 2) h při taphylococcus saprophyticus taphylococcus epidermidis b černé nebo šedé kolonie bez zóny zákalu PPA spp. IO/T (48 ± 2) h při (25 ± 1) C fluorescens b TA kvantitativní P R 0,5 TBX β-dglukuronidázopozitivní IO a IO (21 ± 3) h při (44 ± 1) C h Enterococcus faecalis d Citrobacter freundii d d TA kvantitativní P R 0,5 modré kolonie b b kvalitativní kvalitativní bílé až zeleno-béžové kolonie

9 Tabulka E.1 (pokračování) elektivní pro stanovení počtu mikroorganismů Charakteristická reakce TC (C) Clostridium perfringens IO 7937 (20 ± 2) h při anaerobní atmosféra Clostridium perfringens b TA nebo jiná neselektivní půda pro anaeroby kvantitativní P R 0,5 černé kolonie VRBG bakterie čeledi Enterobacteriaceae IO (24 ± 2) h při Typhimurium d,i Enteritidis d,i b TA kvantitativní P R 0,5 růžové až červené kolonie se zónou precipitace nebo bez ní Enterococcus faecalis d VRBL koliformní bakterie IO 4832 (24 ± 2) h při (30 ± 1) C b Enterococcus faecalis d TA kvantitativní P R 0,5 červenofialové (purpurově červené) kolonie se zónou precipitace nebo bez ní kvalitativní bezbarvé až béžové kolonie

10 PCA MPCA aerobní mikroorganismy technika počítání kolonií IO 4833 Tabulka E.1 (pokračování) Neselektivní pro stanovení počtu mikroorganismů (72 ± 3) h při (30 ± 1) C Bacillus subtilis subsp. spizizenii b b Charakteristická reakce TA kvantitativní P R 0,7 taphylococcus aureus elektivní pomnožovací cílového mikroorganismu Bolton L bakterie rodu Campylobacter IO Campylobacter jejuni d nebo (5 ± 1) h při a pak (41,5 ± 1) C mikroaerobní atmosféra d + Proteus mirabilis Campylobacter coli Proteus mirabilis > 10 kolonií na mccda kolonie šedavé, ploché a vlhké, někdy s kovovým leskem Proteus mirabilis na TA

11 Tabulka E.1 (pokračování) elektivní pomnožovací cílového mikroorganismu EE L bakterie čeledi Enterobacteriaceae IO (24 ± 2) h při b + Enterococcus faecalis d Typhimurium d,i Enteritidis d,i nebo > 10 kolonií na VRBG růžové až červené kolonie se zónou precipitace nebo bez ní + Enterococcus faecalis d Enterococcus faecalis d na TA Fraser L Listeria monocytogenes IO Listeria monocytogenes 4b b 11 + (48 ± 2) h při + Enterococcus faecalis d Listeria monocytogenes 1/2a > 10 kolonií na agaru pro listerie: Ottaviani a Agosti modrozelené kolonie se zónou zákalu + Enterococcus faecalis d Enterococcus faecalis d na TA < 100 kolonií na TA

12 Giolitti a Cantoni L koagulázopozitivní stafylokoky IO Tabulka E.1 (pokračování) elektivní pomnožovací (24 ± 2) h až (48 ± 2) h při taphylococcus aureus b + taphylococcus aureus > 10 kolonií na garu podle Baird-Prakera nebo na agaru RPFA cílového mikroorganismu kolonie charakteristické podle použité (viz IO pro agar podle Baird-Parkera a IO pro agar RPFA) (48 ± 2 ± 4) h při na TA Half- Fraser L Listeria monocytogenes IO Listeria monocytogenes 4b b (poloviční Fraser) + 12 (24 ±2) h při (30 ± 1) C + Enterococcus faecalis d Listeria monocytogenes 1/2a > 10 kolonií na agaru pro listerie: Ottaviani a Agosti modrozelené kolonie se zónou zákalu + Enterococcus faecalis d na TA Enterococcus faecalis d < 100 kolonií na TA

13 Tabulka E.1 (pokračování) elektivní pomnožovací cílového mikroorganismu ITC L Yersinia enterocolitica IO Yersinia enterocolitica b + (25 ± 1) C Yersinia enterocolitica > 10 kolonií na CIN nebo DC kolonie charakteristické podle použité (viz IO 10273) + or Proteus mirabilis na TA 13 MKTTn L bakterie rodu IO 6579 Enteritidis d,i Typhimurium d,i > 10 kolonií na XLD nebo na jiné půdě podle volby kolonie charakteristické podle použité (viz IO 6579) (24 ± 3) h při částečná inhibice 100 kolonií na TA Enterococcus faecalis d < 10 kolonií na TA

14 MRV k bakterie rodu IO 6579 Tabulka E.1 (pokračování) elektivní pomnožovací 2 (24 ± 3) h při (41,5 ± 1) C Enteritidis d,i Typhimurium d,i šedobílá zakalená zóna šířící se kolem naočkované kapky (kapek); po 24 h až 48 h se zakalená zóna (zóny) rozšíří (téměř) po celé plotně v místě naočkované kapky (kapek) je možný růst bez zakalené zóny cílového mikroorganismu možnost navíc: charakteristické kolonie po subkultivaci na XLD k 14 MMG L β-dglukuronidázopozitivní IO (24 ± 2) h při Enterococcus faecalis d b Enterococcus faecalis d žádný růst tvorba kyseliny změna zbarvení na žluté žádný růst PB L Yersinia enterocolitica IO Yersinia enterocolitica b + 3 až 5 dní při (25 ± 1) C Yersinia enterocolitica > 10 kolonií na CIN nebo DC kolonie charakteristické podle použité (viz IO 10273) b Proteus mirabilis na TA

15 Tabulka E.1 (pokračování) elektivní pomnožovací cílového mikroorganismu RV L bakterie rodu IO 6579 Enteritidis d,i Typhimurium d,i > 10 kolonií na XLD nebo na jiné půdě podle volby kolonie charakteristické podle použité (viz IO 6579) (24 ± 3) h při (41,5 ± 1) C částečná inhibice 100 kolonií na TA Enterococcus faecalis d < 10 kolonií na TA 15 TPB L Bacillus cereus IO (48 ± 4) h při (30 ± 1) C Bacillus cereus >10 kolonií na PEMBA nebo MYP na TA kolonie charakteristické podle použité (viz IO 21871)

16 BHI L koagulázopozitivní stafylokoky bujón pro brucely L bakterie rodu Campylobacter IO IO IO (všechny části) Tabulka E.1 (pokračování) Neselektivní tekuté a ředicí roztoky (24 ± 2) h při taphylococcus aureus až 5 dní při Campylobacter jejuni d (41,5 ± 1) C mikroaerobní atmosféra Campylobacter coli Charakteristická reakce zákal (1 až 2) f zákal (1 až 2) f ředicí roztok pro zvláštní účely, např. BPW s bromkresolovou červení L ředicí roztoky IO 6887 (všechny části) zkouší se vliv kontaktu s ředicím roztokem 45 min až 1 h při 20 C až 25 C taphylococcus aureus b TA kvantitativní ± 30 % počtu kolonií/t 0 (± 30 % výchozího počtu kolonií) 16 Ringerův roztok o čtvrtinové koncentraci L ředicí roztoky IO 6887 (všechny části) zkouší se vliv kontaktu s ředicím roztokem roztok s peptonem fyziologický roztok s peptonem 45 min až 1 h při 20 C až 25 C taphylococcus aureus b TA kvantitativní ± 30 % počtu kolonií/t 0 (± 30 % výchozího počtu kolonií) roztok fosfátového pufru thioglykolát L Clostridium perfringens IO 7937 (21 ± 3) h při Clostridium perfringens zákal (1 až 2) f TYEB L Listeria monocytogenes IO (všechny části) (21 ± 3) h při (25 ± 1) C Listeria monocytogenes 4b Listeria monocytogenes 1/2a b zákal (1 až 2) f

17 Tabulka E.1 (pokračování) elektivní izolační Charakteristická reakce agar pro listerie: Ottaviani j a Agosti Listeria monocytogens IO Listeria monocytogenes 4b Listeria monocytogenes 1/2a b modrozelené kolonie se zónou zákalu (44 ± 4) h při Enterococcus faecalis d Listeria innocua modrozelené kolonie bez zóny zákalu 17 mccda j bakterie rodu Campylobacter IO (všechny části) (41,5 ± 1) C mikroaerobní atmosféra Campylobacter jejuni d Campylobacter coli b d úplná nebo částečná inhibice (0 až 1) kolonie šedavé, ploché a vlhké, někdy s kovovým leskem žádné charakteristické kolonie taphylococcus aureus CT-MAC Escherichia coli O157 IO Escherichia coli O157:H (netoxinogenní kmen) průsvitné kolonie zbarvené světle žlutavě až nahnědle a o průměru asi 1 mm (21 ± 3) h při taphylococcus aureus d nebo d částečná inhibice (1) růst několika růžových kolonií CIN DC Yersinia enterocolitica IO (21 ± 3) h při (30 ± 1) C Yersinia enterocolitica b taphylococcus aureus úplná nebo částečná inhibice (0 až 1) kolonie charakteristické podle použité (viz IO 10273) žádné charakteristické kolonie

18 CPC mcpc bakterie rodu Vibrio druhy jiné než Vibrio parahaemolyticus a Vibrio cholerae IO/T Tabulka E.1 (pokračování) elektivní izolační (24 ± 3) h při Vibrio vulnificus b Vibrio cholerae non-o1/non-o139 nebo b Charakteristická reakce žluté kolonie obklopené žlutým zbarvením purpurově zbarvené kolonie obklopené purpurovým zbarvením MYP j Bacillus cereus IO (21 ± 3) h až 48 h při (30 ± 1) C Bacillus cereus růžové kolonie se zónou precipitace (30 ± 1) C nebo 0 Bacillus subtilis subsp. spizizenii žluté kolonie bez zóny precipitace 18 PEMBA Bacillus cereus IO (21 ± 3) h až Bacillus cereus tyrkysově modré kolonie se zónou precipitace Bacillus subtilis subsp. spizizenii bílé kolonie bez zóny precipitace D bakterie rodu Vibrio druhy jiné než Vibrio parahaemolyticus a Vibrio cholerae IO/T (24 ± 3) h při Vibrio vulnificus b Vibrio cholerae non-o1/non-o139 nebo b kolonie purpurově/zeleně zbarvené obklopené zónou zákalu žluté kolonie obklopené zónou zákalu

19 Tabulka E.1 (pokračování) elektivní izolační Charakteristická reakce TBX j β-dglukuronidázopozitivní Escherichia col IO (21 ± 3) h při (44 ± 1) C h Enterococcus faecalis d Citrobacter freundii d d b b modré kolonie bílé až zeleno béžově kolonie 19 TCB Vibrio parahaemolyticus a Vibrio cholerae VRBG j bakterie čeledi Enterobacteriaceae IO/T IO (24 ± 3) h při (24 ± 2) h při Vibrio parahaemolyticus b Vibrio furnissii b nebo Typhimuriumm d,i Enteritidis d,i b nebo zelené kolonie (sacharózonegativní) žluté kolonie (sacharózopozitivní) růžové až červené kolonie se zónou precipitace nebo bez ní Enterococcus faecalis d 00009

20 XLD bakterie rodu IO 6579 Tabulka E.1 (pokračování) elektivní izolační (24 ± 3) h při d, i Typhimuriumd Enteritidis d, i d růst nebo částečná inhibice (0 až 1) Charakteristická reakce kolonie s černým středem a obklopené slabě průsvitnou načervenalou zónou v důsledku změny barvy žluté kolonie Enterococcus faecalis d Neselektivní izolační Charakteristická reakce 20 živný agar d bakterie čeledi Enterobacteriaceae IO (všechny části) (24 ± 2) h při b bakterie rodu IO 6579 (24 ± 2) h při Typhimurium d,i Enteritidis d,i Yersinia enterocolitica IO (24 ± 2) h při (30 ± 1) C Yersinia enterocolitica b TYEA Listeria monocytogenes IO (všechny části) (21 ± 3) h při Listeria monocytogenes 4b Listeria monocytogenes 1/2a b 00109

21 Tabulka E.1 (pokračování) Prostředí pro více účelů Charakteristická reakce BPW m L ředicí roztok pro přípravu ředění při stanovení počtu všech mikroorganismů IO 6887 (všechny části) zkouší se vliv kontaktu s ředicím roztokem 45 min až 1 h při 20 C až 25 C b taphylococcus aureus b TA kvantitativní ± 30 % počtu kolonií/t 0 (± 30 % výchozího počtu kolonií) ředicí roztok pro přípravu ředění při stanovení počtu Listeria monocytogenes IO zkouší se vliv kontaktu s ředicím roztokem Listeria monocytogenes 4b (1 h ± 5 min) při (20 ± 2) C Listeria monocytogenes 1/2a b TA kvantitativní ± 30 % počtu kolonií/t 0 (± 30 % výchozího počtu kolonií) 21 půda pro předpomnožení při průkazu bakterií rodu půda pro předpomnožení při průkazu bakterií čeledi Enterobacteriaaceae IO 6579 IO Typhimurium d,i (18 ± 2) h při d,i Enteritidis (18 ± 2) h při Typhimurium d,i Enteritidis d,i b zákal (1 až 2) f zákal (1 až 2) f

22 krevní agar počet kolonií bakterií rodu Campylobacter IO Tabulka E.1 (dokončení) pro stanovení počtu mikroorganismů TA n počet kolonií (41,5 ± 1) C jak je uvedeno v postupu, kde se jako referenční půda používá TA Campylobacter jejuni d Campylobacter coli Bacillus cereus Bacillus subtilis subsp. spizizenii Listeria monocytogenes 4b taphylococcus aureus již ověřená šarže krevního agaru již ověřená šarže TA Charakteristická reakce kvantitativní P R 0,7 kvantitativní P R 0,7 kolonie charakteristické pro jednotlivé druhy 22 DA počet kolonií jak je uvedeno v postupu, kde se jako referenční půda používá DA accharomyces cerevisiae Aspergillus brasiliensis b b již ověřená šarže DA kvantitativní P R 0,7 v závislosti na druhu: charakteristické kolonie/vegetativní rozmnožovací jednotky

23 Tabulka F.1 Testovací mikroorganismy a kritéria výkonnosti kultivačních půd běžně používaných v mikrobiologii vody elektivní pro stanovení počtu mikroorganismů ve srovnání s neselektivní referenční půdou organismy Funkce Inkubace Kontrolní kmeny Čísla b TA kvantitativní P R 0,5 E. coli: žluté zbarvení a fluorescence Colilert-18 L / koliformní bakterie IO (20 ± 2) h při (36 ± 2) C Klebsiella pneumoniae TA kvantitativní P R 0,5 koliformní bakterie: žluté zbarvení stejné nebo intenzivnější než komparátor pro koliformní bakterie d nebo NA5) žluté zbarvení méně intenzivní než komparátor 2 až 5 dní při (36 ± 2) C 5 až 10 dní při (36 ± 2) C Legionella pneumophila Legionella anisa b BCYE kvantitativní P R 0,5 kolonie v odstínech bílé, šedé, modré až fialové s hladkým okrajem a charakteristickým vzhledem mléčného skla GVPC f baterie rodu Legionella IO a IO Enterococcus faecalis d dny při (36 ± 2) C d nebo Escherichia coli d úplná nebo částečná inhibice (0 až 1) NA5) Viz informativní národní příloha NA.

24 organismy laktóza TTC / koliformní bakterie IO Tabulka F.1 (pokračování) elektivní pro stanovení počtu mikroorganismů ve srovnání s neselektivní referenční půdou Funkce Inkubace (21 ± 3) h při (36 ± 2) C Kontrolní kmeny Enterobacter aerogenes Citrobacter freundii Čísla b TA kvantitativní P R 0,5 žluté zbarvení pod membránovým filtrem Enterococcus faecalis d d nebo červené kolonie, modře zbarvená půda 24 mcp Clostridium perfringens měrnice 98/83/E (21 ± 3) h při (44 ± 1) C anaerobní atmosféra Clostridium perfringens Clostridium bifermentans b TA nebo jiná neselektivní půda pro anaeroby kvantitativní P R 0, žluté kolonie; fosfatázový test pozitivní modré kolonie; fosfatázový test negativní Escherichia coli d CN IO (36 ± 2) C b Escherichia coli d Enterococcus faecalis d TA kvantitativní P R 0,5 modrozelené kolonie s fluorescencí pod UV světlem (360 ± 20 nm)

25 Tabulka F.1 (pokračování) elektivní pro stanovení počtu mikroorganismů ve srovnání s neselektivní referenční půdou organismy Funkce Inkubace Kontrolní kmeny Čísla lanetz a Bartley intestinální enterokoky IO (36 ± 2) C Enterococcus faecalis b Enterococcus faecium d Escherichia coli d taphylococcus aureus d nebo TA kvantitativní P R 0,5 kolonie v odstínech červené, kaštanově hnědé 25 železnato siřičitanový agar [ulfite Iron (I)] tryptózo siřičitanový agar [Tryptose ulfite (T)] anaerobní bakterie redukující sulfity (klostridie) IO anaerobní atmosféra Clostridium perfringens b Escherichia coli d TA nebo krevní agar, nebo jiná neselektivní půda pro anaeroby kvantitativní P R 0,5 černé kolonie bez černého zbarvení TC Clostridium perfringens IO (21 ± 3) h při (44 ± 1) C anaerobní atmosféra Clostridium perfringens Bacillus subtilis subsp. spizizenii b TA nebo krevní agar, nebo jiná neselektivní půda pro anaeroby kvantitativní P R 0,5 černé kolonie

26 organismy Colilert-18 L / koliformní bakterie Tabulka F.1 (pokračování) elektivní pro stanovení počtu mikroorganismů ve srovnání s dříve akceptovanou šarží (pro použití ve zvláštních případech) IO Funkce Inkubace (20 ± 2) h při (36 ± 2) C Kontrolní kmeny Klebsiella pneumoniae Čísla b již ověřená šarže Colilert již ověřená šarže Colilert kvantitativní P R 0,7 kvantitativní P R 0,7 E. coli: žluté zbarvení a fluorescence koliformní bakterie: žluté zbarvení stejné nebo intenzivnější než komparátor pro koliformní bakterie d nebo žluté zbarvení méně intenzivní než komparátor 26 GVPC f baterie rodu Legionella IO a IO až 5 dní při (36 ± 2) C 5 až 10 dní při (36 ± 2) C 3 dny při (36 ± 2) C Legionella pneumophila Legionella anisa b Enterococcus faecalis d d nebo Escherichia coli d již ověřená šarže GVPC kvantitativní P R 0,7 úplná nebo částečná inhibice (0 až 1) kolonie v odstínech bílé, šedé, modré až fialové s hladkým okrajem a charakteristickým vzhledem mléčného skla

27 Tabulka F.1 (pokračování) elektivní pro stanovení počtu mikroorganismů ve srovnání s dříve akceptovanou šarží (pro použití ve zvláštních případech) organismy Funkce Inkubace Kontrolní kmeny Čísla laktóza TTC / koliformní bakterie IO (21 ± 3) h při (36 ± 2) C Enterobacter aerogenes Citrobacter freundii b již ověřená šarže laktóza TTC kvantitativní P R 0,7 žluté zbarvení pod membránovým filtrem Enterococcus faecalis d d nebo červené kolonie, modře zbarvená půda 27 mcp Clostridium perfringens měrnice 98/83/E (21 ± 3) h při (44 ± 1) C anaerobní atmosféra Clostridium perfringens Clostridium bifermentans b již ověřená šarže mcp kvantitativní P R 0, žluté kolonie; fosfatázový test pozitivní modré kolonie; fosfatázový test negativní Escherichia coli d CN IO (36 ± 2) C b Escherichia coli d Enterococcus faecalis d již ověřená šarže CN kvantitativní P R 0,7 modrozelené kolonie s fluorescencí pod UV světlem (360 ± 20 nm)

28 28 organismy lanetz a Bartley železnato siřičitanový agar [ulfite Iron (I)] tryptózo siřičitanový agar [Tryptose ulfite (T)] intestinální enterokoky anaerobní bakterie redukující sulfity (klostridie) Tabulka F.1 (pokračování) elektivní pro stanovení počtu mikroorganismů ve srovnání s dříve akceptovanou šarží (pro použití ve zvláštních případech) IO IO Funkce Inkubace (36 ± 2) C anaerobní atmosféra Kontrolní kmeny Enterococcus faecalis Čísla b Enterococcus faecium d Escherichia coli d taphylococcus aureus d nebo Clostridium perfringens b Escherichia coli d již ověřená šarže lanetz a Bartley kvantitativní P R 0,7 již ověřená šarže ulfite Iron (I) nebo Tryptose ulfite (T) kolonie v odstínech červené, kaštanově hnědé kvantitativní P R 0,7 černé kolonie bez černého zbarvení TC Clostridium perfringens IO (21 ± 3) h při (44 ± 1) C anaerobní atmosféra Clostridium perfringens Bacillus subtilis subsp. spizizenii b již ověřená šarže TC kvantitativní P R 0,7 černé kolonie Neselektivní pro stanovení počtu mikroorganismů organismy Funkce Inkubace Kontrolní kmeny Čísla YEA celková mikroflóra IO 6222 (36 ± 2) C Escherichia coli d Bacillus subtilis subsp. spizizenii již ověřená šarže YEA kvantitativní P R 0,7

29 Tabulka F.1 (pokračování) elektivní pomnožovací organismy Funkce Inkubace Kontrolní kmeny Čísla Campylobacter jejuni d 00156b Escherichia coli d Bolton Preston L bakterie rodu Campylobacter IO mikroaerobní atmosféra + Proteus mirabilis Campylobacter coli b + Escherichia coli d > 10 kolonií na mccda malé ploché nebo vypouklé kolonie s lesklým povrchem + Proteus krabilis b 29 Escherichia coli d Proteus krabilis na TA MUG/EC g CM L / koliformní bakterie IO h při (44 ± 0,5) C Podrobnosti k metodám a kritériím kvality pro půdu MUG/EC jsou uvedeny v IO :1998, příloha E. Enterococcus faecalis Enterococcus hirae MUD/F h L intestinální enterokoky IO (44 ± 0,5) C Enterococcus faecium Aerococcus viridans Podrobnosti k metodám a kritériím kvality pro půdu MUD/F jsou uvedeny v IO :1998, příloha E. Lactococcus lactis taphylococcus epidermidis 00132

30 organismy Funkce Inkubace Tabulka F.1 (pokračování) elektivní pomnožovací Kontrolní kmeny Čísla d,i Enteritidis d,i Typhimurium + Escherichia coli d > 10 kolonií na XLD nebo na jiné půdě podle volby kolonie charakteristické podle použité (viz IO 19250) RV L bakterie rodu IO (24 ± 3) h při (41,5 ± 1) C Escherichia coli d částečná inhibice 100 kolonií na TA 30 Enterococcus faecalis d < 10 kolonií na TA Neselektivní tekuté a ředicí roztoky organismy Funkce Inkubace Kontrolní kmeny Čísla DRCM L anaerobní bakterie redukující sulfity (klostridie) IO (36 ± 1) C anaerobní atmosféra Clostridium perfringens b Escherichia coli d zákal (1 až 2) j černé zbarvení zákal (0 až 1) j bez černého zbarvení

31 Tabulka F.1 (pokračování) Neselektivní tekuté a ředicí roztoky organismy Funkce Inkubace Kontrolní kmeny Čísla fyziologický roztok roztok s peptonem fyziologický roztok s peptonem Ringerův roztok o čtvrtinové koncentraci L ředicí roztoky IO 8199 zkouší se vliv kontaktu s ředicím roztokem 45 min až 1 h při 20 C až 25 C Escherichia coli d taphylococcus aureus TA kvantitativní b ± 30 % počtu kolonií/t 0 (± 30 % výchozího počtu kolonií) 31 roztok fosfátového pufru elektivní izolační organismy Funkce Inkubace Kontrolní kmeny Čísla Campylobacter jejuni d Campylobacter coli b nebo malé ploché nebo vypouklé kolonie s lesklým povrchem mccda bakterie rodu Campylobacter IO (41,5 ± 1) C mikroaerobní atmosféra nebo nebo taphylococcus aureus d nebo úplná nebo částečná inhibice (0 až 1) žádné charakteristické kolonie

32 organismy XLD bakterie rodu IO Funkce Inkubace (24 ± 3) h při (36 ± 2) C Tabulka F.1 (pokračování) elektivní izolační Kontrolní kmeny Typhimurium d, i Enteritidis d,i Čísla růst nebo částečná inhibice (0 až 1) kolonie s černým středem a obklopené slabě průsvitnou načervenalou zónou v důsledku změny barvy žluté kolonie Enterococcus faecalis d Prostředí pro více účelů 32 organismy BPW k L ředicí roztok pro přípravu ředění při stanovení počtu všech mikroorganismů IO 6887 Funkce zkouší se vliv kontaktu s ředicím roztokem Inkubace 45 min až 1 h při 20 C až 25 C Kontrolní kmeny d taphylococcus aureus Čísla TA kvantitativní ± 30 % počtu kolonií/t 0 (± 30 % výchozího počtu kolonií) půda pro předpomnožení při průkazu bakterií rodu IO (18 ± 2) h při (36 ± 1) C d,i Typhimurium d,i Enteritidis zákal (1 až 2) j

33 Tabulka F.1 (dokončení) pro stanovení počtu mikroorganismů organismy Funkce Inkubace Kontrolní kmeny Čísla BCYE počet kolonií IO a IO až 5 dní při (36 ± 2) C Legionella pneumophila b již ověřená šarže BCYE kvantitativní P R 0,7 kolonie v odstínech bílé, šedé, modré až fialové s hladkým okrajem a charakteristickým vzhledem mléčného skla TA l počet kolonií jak je uvedeno v postupu, kde se jako referenční půda používá TA Clostridium perfringens již ověřená šarže TA kvantitativní P R 0,7 kolonie charakteristické pro jednotlivé druhy Enterococcus faecalis

34 Do tabulky E1 jsou zapracovány tyto opravy: elektivní pro stanovení počtu mikroorganismů půda mccda: u obou druhů r. Campylobacter bylo vypuštěno d, u čísla WDCM bylo doplněno b ; půda mccda: u kontrolního kmene E. coli bylo upraveno kritérium na úplná nebo částečná inhibice (0 až 1) a u kontrolního kmene. aureus na ; půda TC: byl vypuštěn řádek obsahující a číslo WDCM elektivní pomnožovací půda Bolton, : směsi kontrolních kmenů byly rozděleny do dvou oddělených buněk; půda ITC, : byla přidána nová směs kontrolních kmenů; půda PB : po čísle WDCM bylo přidáno b ; elektivní izolační půda mccda: u obou druhů r. Campylobacter bylo vypuštěno d, u čísla WDCM bylo doplněno b ; půda PEMBA, aspekt : po slovech bylo vypuštěno i ; Neselektivní izolační půda TYEA: bylo opraveno jméno a číslo WDCM na Listeria monocytogenes 4b WDCM b. pro stanovení počtu mikroorganismů půda TA: bylo vypuštěno O157:H7 WDCM (netoxinogenní kmen) ; půda DA: u kontrolního kmene Aspergillus brasiliensis byla doplněna specifikace takto: WDCM b. Do tabulky F1 jsou zapracovány tyto opravy: elektivní pro stanovení počtu mikroorganismů ve srovnání s neselektivní referenční půdou půda Colilert: byl upraven název na Colilert-18 a číslo WDCM kontrolního kmene bylo změněno z na elektivní pro stanovení počtu mikroorganismů ve srovnání s dříve akceptovanou šarží (pro použití ve zvláštních případech) půda Colilert: byl upraven název na Colilert-18 a číslo WDCM kontrolního kmene bylo změněno z na 00024; půda laktóza TTC: mezi kontrolními kmeny Enterococcus faecalis a včetně jejich čísel WDCM byla doplněna dělicí čára. elektivní pomnožovací půda Bolton/Preston, : směsi kontrolních kmenů byly rozděleny do dvou oddělených buněk. Neselektivní tekuté a ředicí roztoky fyziologický roztok: u kontrolního kmene taphylococcus aureus WDCM bylo doplněno b ; elektivní izolační půda mccda: u obou druhů r. Campylobacter bylo vypuštěno d, u čísla WDCM bylo doplněno b. Vypracování opravy normy Zpracovatel: Úřad pro technickou lizaci, metrologii a státní zkušebnictví, IČ , ve spolupráci s RNDr. Ljubou chlemmerovou, Cc. Pracovník Úřadu pro technickou lizaci, metrologii a státní zkušebnictví: Ing. Kateřina Hanzlová 34

35

36 Upozornění : Změny a doplňky, jakož i zprávy o nově vydaných normách jsou uveřejňovány ve Věstníku Úřadu pro technickou lizaci, metrologii a státní zkušebnictví. Vaše názory, podněty a připomínky týkající se technických norem a zájem o možnou účast v procesech technické lizace lze zaslat na ovou adresu info@unmz.cz. ČN EN IO OPRAVA 1 Vydal Úřad pro technickou lizaci, metrologii a státní zkušebnictví, Praha Rok vydání 2015, 36 stran Cenová skupina 998 +!5J0JG3-jghcfh!