VLIV STEROIDNÍCH LÁTEK NA NIKOTINOVÉ RECEPTORY

Transkript

1 VLIV STEROIDNÍCH LÁTEK NA NIKOTINOVÉ RECEPTORY STEROIDS AND NICOTINIC RECEPTORS JAN KRÙŠEK Fyziologický ústav AVÈR, Praha SOUHRN Øada látek steroidní povahy pùsobí v nervové soustavì negenomovým zpùsobem a moduluje èinnost rùzných receptorù. Specifické podtypy neuronálních nikotinických receptorù jsou modulovány nìkterými steroidními látkami, a to naznaèuje novou možnost v terapii nìkterých neurologických a psychiatrických poruch. Klíèová slova: steroidy, neurosteroidy, acetylcholinové receptory nikotinového typu SUMMARY Some compounds of steroidal origin act in the nervous tissue by nongenomic mechanism and modulate different receptors. Distinct subtypes of neuronal nicotinic receptors are modulated by various steroid compounds. This modulation offers in the future the possibility of therapy of important neurologic and psychiatric diseases. Key words: steroids, neurosteroids, nicotinic acetylcholine receptors Krùšek J. Vliv steroidních látek na nikotinové receptory. Psychiatrie 2008; 12 (Suppl. 3): Steroidní látky Steroidy jsou velká skupina látek strukturnì odvozená z cyklopentanoperhydrofenanthrenu, tetracyklické látky složené ze tøí šestièetných a jednoho pìtièetného cyklu. Jsou to látky lipidové povahy a v organizmu plní øadu fyziologických funkcí. Øada steroidù funguje jako významné hormony kùry nadledvinek a pohlavní hormony. Systematika steroidù je složitá a pøesahuje rámec této publikace (Katzung, 1994). Steroidy jsou tøídìny buï na základì chemické struktury, hormonálního systému, ke kterému náležejí, nebo podle tkánì, kde jsou syntetizovány. Chemické vzorce vìtšiny zmiòovaných látek jsou uvedeny v pøiložených obrázcích. Úèinek steroidních hormonù je spojen s jejich schopností pronikat bunìènými membránami, pak se navazují na intracelulární receptory a pùsobí pøímo v bunìèném jádøe (Lodish et al., 2004). Takové úèinky nastupují pomalu a ovlivòují stav buòky na dlouhou dobu. Na rozdíl od pùsobení v jádøe, existuje øada steroidù, které mají i jiné, takzvané negenomické pùsobení a interagují s receptory na vnìjším povrchu bunìk. Pro neurologické a psychiatrické obory je zajímavá zejména pøímá interakce steroidù s receptory na nervových buòkách. Na nich se podílejí zejména steroidy, které jsou syntetizovány pøímo v nervové soustavì a jsou souhrnnì nazývány neurosteroidy (Biggio et al., 2001). Øada studií ukazuje, že neurosteroidy se podílejí na jevech, jako je nálada, anestezie, úèinky alkoholu, závislost na alkoholu (Biggio, et al., 2007), nikotinu a morfinu (Concas et al., 2006), stres (Biggio et al., 2007), ale i pøežívání a tvorba nových neuronù, diferenciace a myelinizace (Mellon, 2007) (Biggio et al., 2001) a také mohou tyto jevy ovlivòovat. Podrobnìjší analýzy ukázaly, že steroidy interagují s neuroreceptory spojenými s iontovými kanály, jako jsou inhibièní receptory pro kyselinu γ-amino máselnou (GABA A ), nebo excitaèní glutamátové receptory. Interakce steroidù s glutamátovými receptory je intenzivnì studována (Horák et al., 2006; Horák et al., 2004; Petroviè et al., 2005). Mechanizmus negenomového pùsobení neurosteroidù na GABA A receptory byl objasnìn nedávno (Akk et al., 2007). Hromadí se pøímé i nepøímé dùkazy o tom, že i nikotinické receptory jsou modulovány negenomovým mechanizmem prostøednictvím rùzných steroidních látek. Zvlášś zajímavá by byla farmakologicky využitelná pozitivní regulace neuronálních nikotinických receptorù, protože by otevírala možnost terapie významných neurologických poruch spojených s deficitem cholinergního pøenosu. Nikotinické acetylcholinové receptory Receptory pro acetylcholin nikotinového typu jsou ligandem aktivované kationtové kanály tvoøené pentamerem transmembránových podjednotek. Receptory jsou aktivovány pøirozenì acetylcholinem a do rùzné míry nikotinem a jinými cholinergními farmaky. Kromì aktivaèních míst nesou cholinergní receptory i øadu míst pro modulátory (Arias, 1998). Existuje nìkolik podtypù svalových receptorù a kromì nich i zatím neznámý poèet druhù nikotinických receptorù v centrální i periferní nervové soustavì. Neuronální receptory jsou tvoøeny kombinací α podjednotek (α2-α9) a β podjednotek (β2-β4). Pentamerní receptory mohou být homomerní (α7, α8), nebo heteromerní. Pøedpokládá se, že heteromerní receptory jsou složeny nejèastìji ze 2 stejných 26

2 nebo rùzných α podjednotek doplnìných do pìtice β podjednotkami. Receptory rùzného podjednotkového složení a stechiometrie se liší ve fyziologických a farmakologických vlastnostech, a to poskytuje ohromnou funkèní variabilitu cholinergnímu systému (Arias, 2000). Tyto receptory jsou nejen na synapsích cholinergních neuronù, ale také jako modulaèní presynaptické receptory na neuronech jiných signálních soustav. Z centrálních receptorù je významný pro kalciové ionty propustný homomerní receptor α7 a heteromerní receptory α4β2 a α4β4 (Lloyd et al., 2000). V perifeních gangliích se nejèastìji vyskytuje kombinace α3β4. Význam nikotinických receptorù pro psychiatrii byl nedávno shrnut Benešovou (Benešová, 2003). cholesterol 17-estradiol (3, 5, 17 )-3-hydroxyandrostan-17 karbonitril (3,5,17 )-17-hydroxyestran-3-karbonitril 27 Cholesterol a pohlavní hormony 17-estradiol Nejhojnìjším sterolem v lidském tìle je cholesterol, který je i výchozí látkou pro biosyntézu ostatních. Bylo zjištìno, že stabilita a funkènost nikotinických receptorù je závislá na pøítomnosti cholesterolu v membránách (Barrantes, 2007; Borroni et al., 2007; Fernandez Nievas et al., 2008). Tento efekt je ale pravdìpodobnì spojen s rolí cholesterolu ve stavbì membrány a s interakcí hydrofobní èásti iontového kanálu s fosfolipidovým okolím a není jisté, zda jde o specifické vazebné místo. Ženský pohlavní hormon 17β-estradiol potencuje lidské α4β2 a α4β4 neuronální nikotinické receptory, ale inhibuje α3β2, α3β4 a α7 receptory (Curtis et al., 2002). O znaménku efektu, který je považován za alosterický, rozhoduje tedy typ α podjednotky (Buisson et al., 1998). Místo úèinku 17β-estradiolu je pravdìpodobnì lokalizováno na C-terminální èásti lidské α4 podjednotky (Curtis et al., 2002; Paradiso et al., 2001). Rozdíl v úèinku 17α-estradiolu, 17β-estradiolu a 17α-ethinylestradiolu mezi lidskými receptory α4β2 a α3β4 potvrdili i Nakazawa a Ohno (Nakazawa et al., 2001). Také zjistili, že α4β2 receptory jsou zmínìnými estrogeny potencovány, zatímco α3β4 receptory jsou inhibovány. Diethylstilbestrol inhiboval oba typy receptorù. Naproti tomu potkaní receptor α4β2, exprimovaný v HEK buòkách je 17β-estradiolem, 17α-estradiolem i progesteronem inhibován (Paradiso et al., 2000). Tento receptor byl inhibován i celou øadou steroidù odvozených od (3β, 5α, 17β)-17-hydroxyestran-3-karbonitrilu a (3α, 5β, 17β)-3-hydroxyandrostan-17-karbonitrilu (Paradiso et al., 2000). Jiný ze skupiny ženských pohlavních hormonù progesteron úèinkuje jako alosterický inhibitor na α4β2, α3β2 a svalovém receptoru (Bertrand et al., 1991). Progesteron také úèinkuje jako inhibitor cholinergní odpovìdi na synaptozomech z thalamu myši. Výlev znaèeného 85 Rb + ze synaptozomù izolovaných z thalamu byl vyvolán pøítomností nikotinu a tento efekt byl zablokován progesteronem (Bullock et al., 1997). Pøedpokládá se, že tento efekt je zprostøedkován nejèastìjším podtypem nikotinického receptoru -17 ethinylestradiol v CNS α4β2. Naproti tomu nikotinem indukovaný výlev dopaminu z myších striatálních synaptozomù byl progesteronem inhibován jen málo, ale deriváty progesteronu 5αpregnane-3,20-dione (5α-dihydroprogesteron) a 5-α-pregnane-3-ol-20-one ho inhibovaly úèinnì. Je pravdìpodobné, že tento rozdíl v úèinnosti souvisí s podjednotkovým složením zúèastnìných nikotinických receptorù. Otázka lokalizace vazebného místa prozatím není rozøešena. Studie s úèinky progesteronu navázaného na sérový albumin ukázala, že místo úèinku je vystaveno do vnìjšího roztoku (Ke et al., 1996; Valera et al., 1992). Neurosteroidy Neurosteroidy nebo neuroaktivní steroidy jsou endogenní steroidy, které fungují negenomickým mechanizmem jako neuromodulátory. Nìkdy se jako neurosteroidy oznaèují jen látky vznikající pøímo v nervové soustavì, ale èastìji se do této skupiny zaøazují obecnì látky pùsobící na neuronální receptory, to znamená napøíklad i syntetické deriváty. Tyto látky jsou syntetizovány buï pøímo v mozkové tkáni nebo 5-pregnan-3,20-dion O CH 3 CH 3 H H H H 5-pregnan-3-ol-20-on Obrázek 1: Pohlavní hormony, jejich prekurzor a deriváty. H 3 C H O

3 hydrokortizon prednizolon dehydroepiandrosteron (DHEA) Obrázek 2: Kortikoidy a jejich deriváty. hydrokortizon 21 hemisukcinát nadledvinách, ovariích a varlatech. Rùzné steroidy vznikají z prekurzorù v rùzných typech mozkových bunìk. Napøíklad progesteron jako gestagen je syntetizován ve vajeènících, varlatech a nadledvinách, pøi tìhotenství i v placentì (Katzung, 1994). Kromì toho vzniká i v astrocytech spolu s dehydroepiandrosteronem (DHEA). Pregnenolon je syntetizován oligodendrocyty a estrogeny jsou produkovány v neuronech (Zwain et al., 1999). Citlivost nikotinických receptorù k neurosteroidùm byla popsána v nìkolika pøípadech, ale pøesné podjednotkové složení ovlivnìných kanálù není známo. Experimentù provedených na preparátech se známým podjednotkovým složením je dosud málo. Pregnenolon sulfát je jedním z neurosteroidù pøítomných v mozku v relativnì vysoké koncentraci (Baulieu et al., 1990; Corpechot et al., 1993). Jeho fyziologická úloha ještì nebyla zcela vyjasnìna. Dosavadní výsledky naznaèují, že interaguje s rùznými receptorovými systémy (Horák et al., 2006; Horák et al., 2004), ale pøímá interakce s nikotinickými receptory dosud prokázána nebyla. Vliv pregnenolon sulfátu na acetylcholinem vyvolaný výlev katecholaminù z chromafinních bunìk v tkáòové kultuøe nepøímo naznaèuje, že pregnenolon sulfát inhibuje nikotinické receptory (Kudo et al., 2002). Podrobnìjší rozbor ukazuje, že pregnenolon sulfát inhibuje acetylcholinem vyvolaný vzestup koncentrace sodíku v chromafinních buòkách, ale neovlivòuje pøímo vazbu znaèeného nikotinu. To naznaèuje, že pregnenolon sulfát nekompetitivnì inhibuje nikotinické receptory a tím mùže mìnit excitabilitu bunìk a uvolòování neurotransmiterù. To by také mohlo být i vysvìtlení antikonvulzivního úèinku pregnenolon sulfátu pøi injekci do hippokampu potkana (Martin-Garcia et al., 2005). Neurosteroid allopregnanolon ve stejném modelu injekce do hippokampu potkana silnì redukoval køeèe vyvolané nikotinem (Martin-Garcia et al., 2005). prednizolon 21 hemisukcinát dexamethazon V praxi je používáno neurosteroidní anestetikum alphaxalon (5α-pregnan-3α-ol-11, 20-dion). Pøedpokládaným mechanizmem jeho hlavního úèinku je posílení inhibièní role GABA A receptorù. Kromì toho byla zjištìna i pøímá inhibice nikotinických receptorù v tkáòové kultuøe (Shiraishi et al., 2002). Bylo zjištìno, že alphaxalon v terapeutických koncentracích inhibuje elektrické proudy a vzestup vnitrobunìèné koncentrace vápníku vyvolané aplikací nikotinu v chromafinních buòkách. Zatím není jasné, do jaké míry se tento efekt podílí na anestetických úèincích alphaxalonu. Fytoestrogeny a syntetické steroidy Fytoestrogeny jsou látky rostlinného pùvodu, které mají podobné úèinky jako estrogeny. Nìkteré z nich mohou úèinkovat na nikotinických receptorech. Fytoestrogeny daidzein a genistin jsou obsaženy v nìkterých luskovinách vèetnì sóji a nìkterých druhù fazolí. Jejich úèinky na hormonální systém byly již studovány (Bolego et al., 2003; Kris-Etherton et al., 2002). Na rekombinantních lidských receptorech α4β2 byl nalezen èásteèný inhibièní úèinek fytoestrogenu daidzeinu, ale tento úèinek nebyl inhibován antiestrogenem tamoxifenem (Nakazawa et al., 2003). In vitro bylo prokázáno, že steroidní metabolity saponinù z ženšenu modulují výlev katecholaminù z bunìk nadledvin. Tento výlev byl vyvolán acetylcholinem a rùzné metabolity ho inhibovaly rùznou mìrou. Nejúèinnìjší z nich inhibovaly i proud vyvolaný acetylcholinem na receptorech α3β4 exprimovaných v oocytech žáby drápatky (Xenopus laevis) (Tachikawa et al., 2003). Kortikoidy pøirozené i umìlé Myší svalový nikotinický receptor byl blokován vysokými koncentracemi glukokortikoidu hydrokotizonu ( μm). Efekt pøetrval, i když byl hydrokortizon navázán na sérový albumin, což dokazuje, že místo úèinku je extracelulární (Nurowska et al., 1996; Nurowska et al., 2002). Hydrokortizon také inhibuje odpovìdi na nikotin v buòkách potkaního cervikálního ganglia (Uki et al., 1999). Syntetický glukokortikoid dexamethason se terapeuticky používá jako protizánìtlivá látka. Bylo zjištìno, že nekompetitivním zpùsobem inhibuje proud vyvolaný acetylcholinem na chromafinních buòkách nadledvin. Látka neovlivòovala ani membránový potenciál, ani napìtím aktivované kanály sodíkové, vápníkové nebo draslíkové. Preaplikace 10μM dexamethasonu snižovala vratnì odpovìï na acetylcholin o 41%, nezávisle na koncentraci ACh. Aplikace jiných steroidù hydrokortizonu 21 hemisukcinátu a prednisolonu 21 hemisukcinátu inhibovala odpovìdi ménì než stejná koncentrace dexamethasonu (Inoue et al., 1989). 28

4 allopregnanolon pregnenolon sulfát tamoxifen bisfenol A daidzein p-nonyfenol alphaxalon diethylstilbestrol genistin p-oktyfenol látky se nazývají xenoestrogeny. Bylo zjištìno, že nìkteré z tìchto látek jako bisfenol A, p-nonyfenol a p-octylfenol inhibují i extracelulární nikotinický receptor α3β4 podobnì jako pøirozené steroidy 17β-estradiol, 17α-estradiol, 17α-ethinylestradiol a diethylstilbestrol. Na receptoru α4β2 ale úèinkuje jen bisfenol A, p-nonyfenol, p-oktylfenol a diethylstilbestrol, zatímco 17β-estradiol a 17α-estradiol jsou neúèinné. Také tamoxifen, který úèinkuje jako antagonista estrogenù na vnitrobunìèných receptorech, inhibuje acetylcholinem vyvolané proudy, ale nemá úèinky na modulaci nikotinových receptorù estrogeny (Nakazawa et al., 2001). Dosud byla nalezena øada pøímých i nepøímých dùkazù interakce neurosteroidù s cholinergním systémem, ale použité koncentrace steroidù jsou èasto podstatnì vyšší než fyziologicky zjištìné koncentrace (Backstrom et al., 1976; Bixo et al., 1997; Corpechot et al., 1993), lokální koncentrace v synaptické štìrbinì ale mohou být podstatnì vyšší (Baulieu et al., 1990). Vìtšímu využití steroidù v terapii cholinergních poruch brání kromì nespecifických úèinkù zejména to, že steroidní molekuly jsou v organizmu modifikovány øadou enzymù na molekuly, které mohou mít výraznì odlišné úèinky. Tato práce vznikla za podpory projektu è. 1M0517 MŠMT ÈR a grantù IAA , LC 554 a AV0Z Obrázek 3: Neurosteroidy, xenoestrogeny a fytoestrogeny. Xenoestrogeny a inhibitory Øada látek nesteroidní povahy, které jsou pøítomny jako zneèištìní v životním prostøedí, je podezøívána z interakce s intracelulárními receptory pro steroidní hormony. Tyto RNDr. Jan Krùšek, CSc. Fyziologický ústav AVÈR, Praha Vídeòská Praha 4 krusek@biomed.cas.cz LITERATURA Akk G, Covey DF, Evers AS, Steinbach JH, Zorumski CF, Mennerick S. Mechanisms of neurosteroid interactions with GABA(A) receptors. Pharmacol Ther 2007; 116: Arias HR. Binding sites for exogenous and endogenous non-competitive inhibitors of the nicotinic acetylcholine receptor. Biochim Biophys Acta 1998; 1376: Arias HR. Localization of agonist and competitive antagonist binding sites on nicotinic acetylcholine receptors. Neurochem Int 2000; 36: Backstrom T, Carstensen H, Sodergard R. Concentration of estradiol, testosterone and progesterone in cerebrospinal fluid compared to plasma unbound and total concentrations. J Steroid Biochem 1976; 7:

5 Barrantes FJ. Cholesterol effects on nicotinic acetylcholine receptor. J Neurochem 2007; 103 Suppl 1: Baulieu EE, Robel P. Neurosteroids: a new brain function? J Steroid Biochem Mol Biol 1990; 37: Benešová O. Nikotinové receptory acetylcholinu: struktura, funkce a význam pro terapii v psychiatrii. Psychiatrie 2003; 7: Bertrand D, Valera S, Bertrand S, Ballivet M, Rungger D. Steroids inhibit nicotinic acetylcholine receptors. Neuroreport 1991; 2: Biggio G, Concas A, Follesa P, Sanna E, Serra M. Stress, ethanol, and neuroactive steroids. Pharmacol Ther 2007; 116: Biggio G, Purdy RH. Neurosteroids and Brain Function: Academic Press; Bixo M, Andersson A, Winblad B, Purdy RH, Backstrom T. Progesterone, 5alpha-pregnane-3,20-dione and 3alpha-hydroxy-5alpha-pregnane-20- one in specific regions of the human female brain in different endocrine states. Brain Res 1997; 764: Bolego C, Poli A, Cignarella A, Paoletti R. Phytoestrogens: pharmacological and therapeutic perspectives. Curr Drug Targets 2003; 4: Borroni V, Baier CJ, Lang T, Bonini I, White MM, Garbus I, Barrantes FJ. Cholesterol depletion activates rapid internalization of submicronsized acetylcholine receptor domains at the cell membrane. Mol Membr Biol 2007; 24:1-15. Buisson B, Bertrand D. Allosteric modulation of neuronal nicotinic acetylcholine receptors. J Physiol Paris 1998; 92: Bullock AE, Clark AL, Grady SR, Robinson SF, Slobe BS, Marks MJ, Collins AC. Neurosteroids modulate nicotinic receptor function in mouse striatal and thalamic synaptosomes. J Neurochem 1997; 68: Concas A, Sogliano C, Porcu P, Marra C, Brundu A, Biggio G. Neurosteroids in nicotine and morphine dependence. Psychopharmacology (Berl) 2006; 186: Corpechot C, Young J, Calvel M, Wehrey C, Veltz JN, Touyer G, Mouren M, Prasad VV, Banner C, Sjovall J, et al. Neurosteroids: 3 alpha-hydroxy- 5 alpha-pregnan-20-one and its precursors in the brain, plasma, and steroidogenic glands of male and female rats. Endocrinology 1993; 133: Curtis L, Buisson B, Bertrand S, Bertrand D. Potentiation of human alpha4beta2 neuronal nicotinic acetylcholine receptor by estradiol. Mol Pharmacol 2002; 61: Fernandez Nievas GA, Barrantes FJ, Antollini SS. Modulation of nicotinic acetylcholine receptor conformational state by free fatty acids and steroids. J Biol Chem Horák M, Vlèek K, Chodounská H, Vyklický L, Jr. Subtype-dependence of N-methyl-D-aspartate receptor modulation by pregnenolone sulfate. Neuroscience 2006; 137: Horák M, Vlèek K, Petroviè M, Chodounská H, Vyklický L, Jr. Molecular mechanism of pregnenolone sulfate action at NR1/NR2B receptors. J Neurosci 2004; 24: Inoue M, Kuriyama H. Glucocorticoids inhibit acetylcholine-induced current in chromaffin cells. Am J Physiol 1989; 257:C Katzung BG. Základní a klinická farmakologie: a Lange medical book, H&H; Ke L, Lukas RJ. Effects of steroid exposure on ligand binding and functional activities of diverse nicotinic acetylcholine receptor subtypes. J Neurochem 1996; 67: Kris-Etherton PM, Hecker KD, Bonanome A, Coval SM, Binkoski AE, Hilpert KF, Griel AE, Etherton TD. Bioactive compounds in foods: their role in the prevention of cardiovascular disease and cancer. Am J Med 2002; 113 Suppl 9B:71S-88S. Kudo K, Tachikawa E, Kashimoto T. Inhibition by pregnenolone sulfate of nicotinic acetylcholine response in adrenal chromaffin cells. Eur J Pharmacol 2002; 456: Lloyd GK, Williams M. Neuronal nicotinic acetylcholine receptors as novel drug targets. J Pharmacol Exp Ther 2000; 292: Lodish H, Berk A, Matsudaira P, Kaiser CA, Krieger M, Zipursky SL, Darnell J. Molecular Cell Biology. 5.vydání ed: W.H Freeman and Company; Martin-Garcia E, Pallares M. The intrahippocampal administration of the neurosteroid allopregnanolone blocks the audiogenic seizures induced by nicotine. Brain Res 2005; 1062: Mellon SH. Neurosteroid regulation of central nervous system development. Pharmacol Ther 2007; 116: Nakazawa K, Ohno Y. Block by phytoestrogens of recombinant human neuronal nicotinic receptors. J Pharmacol Sci 2003; 93: Nakazawa K, Ohno Y. Modulation by estrogens and xenoestrogens of recombinant human neuronal nicotinic receptors. Eur J Pharmacol 2001; 430: Nurowska E, Ruzzier F. Corticosterone modifies the murine muscle acetylcholine receptor channel kinetics. Neuroreport 1996; 8: Nurowska E, Ruzzier F. Modulation of acetylcholine receptor channel kinetics by hydrocortisone. Biochim Biophys Acta 2002; 1564: Paradiso K, Sabey K, Evers AS, Zorumski CF, Covey DF, Steinbach JH. Steroid inhibition of rat neuronal nicotinic alpha4beta2 receptors expressed in HEK 293 cells. Mol Pharmacol 2000; 58: Paradiso K, Zhang J, Steinbach JH. The C terminus of the human nicotinic alpha4beta2 receptor forms a binding site required for potentiation by an estrogenic steroid. J Neurosci 2001; 21: Petroviè M, Sedláèek M, Horák M, Chodounská H, Vyklický L, Jr. 20- oxo-5beta-pregnan-3alpha-yl sulfate is a use-dependent NMDA receptor inhibitor. J Neurosci 2005; 25: Shiraishi M, Shibuya I, Minami K, Uezono Y, Okamoto T, Yanagihara N, Ueno S, Ueta Y, Shigematsu A. A neurosteroid anesthetic, alphaxalone, inhibits nicotinic acetylcholine receptors in cultured bovine adrenal chromaffin cells. Anesth Analg 2002; 95: , table of contents. Tachikawa E, Kudo K, Hasegawa H, Kashimoto T, Sasaki K, Miyazaki M, Taira H, Lindstrom JM. In vitro inhibition of adrenal catecholamine secretion by steroidal metabolites of ginseng saponins. Biochem Pharmacol 2003; 66: Uki M, Nabekura J, Akaike N. Suppression of the nicotinic acetylcholine response in rat superior cervical ganglionic neurons by steroids. J Neurochem 1999; 72: Valera S, Ballivet M, Bertrand D. Progesterone modulates a neuronal nicotinic acetylcholine receptor. Proc Natl Acad Sci U S A 1992; 89: Zwain IH, Yen SS. Neurosteroidogenesis in astrocytes, oligodendrocytes, and neurons of cerebral cortex of rat brain. Endocrinology 1999; 140: