C-Peptide. Spojovací peptid. Elecsys 2010 MODULAR ANALYTICS E170 cobas e 411 cobas e 602

Transkript

1 Česky Použití Imunostanovení pro in vitro kvantitativní měření C peptidu v lidském séru, plazmě a moči. Stanovení slouží jako pomůcka při diagnostice a léčbě pacientů s abnormálním vylučováním inzulínu. Elektrochemiluminiscenční imunostanovení ECLIA je určeno pro použití na analyzátorech imunostanovení Elecsys a cobas e. Souhrn C peptid je jednoduchý řetězec 31 aminokyselin (AA 33 63) spojovacího (C) polypeptidu s molekulovou hmotností přibližně 3021 Da. 1,2 V procesu biosyntézy inzulínu je C peptid vytvářen jako spoluprodukt s inzulínem, který vzniká po proteolytickém štěpení prekursorové molekuly proinzulínu, která je skladována v sekrečních granulech v Golgiho aparátu β buněk pankreatu. Nejprve však štěpením preproinzulínu vzniká proinzulín. 2,3 C peptid plní důležitou funkci při sestavování dvouřetězcové struktury inzulínu (A a B řetězec) a vzniku 2 disulfidických vazeb v molekule proinzulínu. Inzulín a C peptid jsou vylučovány v ekvimolárním množství a uvolňovány do oběhu portální žílou. 4 Při průchodu játry je zachycena téměř polovina inzulínu, ale skoro žádný C peptid, který při delším biologickém poločasu (okolo 35 min.) zůstává v periferním oběhu v 5 až 10krát větší koncentraci než inzulín a jeho hladiny méně kolísají, než jak je tomu u inzulínu. 2,3,4 C peptid není z oběhu odstraňován játry, nýbrž ledvinami, kde podléhá degradaci, ale část ho uniká a je vylučován v nezměněné podobě močí. Koncentrace v moči je 20 50krát vyšší než v séru. Koncentrace C peptidu se proto zvyšuje při renálním onemocnění. 1,2,3 Dříve byl C peptid považován za biologicky neaktivní. V současnosti bylo na základě výzkumu prokázáno, že C peptid je bioaktivním peptidem a je způsobilý k účinkům na molekulární a fyziologické úrovni. Je známo, že podávání C peptidu společně s inzulínem může preventivně působit nebo zastavovat progresi dlouhodobých komplikací u diabetu 1. typu. 5,6,7,8,9,10 Měření C peptidu, inzulínu a glukózy se používá v diferenciální diagnostice hypoglykemie (navozené hypoglykemie a hypoglykemie způsobené hyperinzulinismem), aby byl zajištěn vhodný léčebný postup pro pacienta. Kvůli zjištění endogenní sekrece inzulínu je stanovována bazální hladina C peptidu, po lačnění a po stimulačním a supresním testu. Vzhledem k vysoké prevalenci endogenních protilátek proti inzulínu odráží koncentrace C peptidu přesvědčivěji sekreci inzulínu slinivkou u diabetiků s podávaným inzulínem, než samotná hladina inzulínu. Měření C peptidu může sloužit k zjištění reziduální funkce β buněk v časném stádiu diabetu 1. typu a k diferenciální diagnostice skrytého autoimunního diabetu dospělých (LADA) a diabetu 2. typu. 2,3,11,12,13,14 Měření C peptidu nalézá uplatnění při hodnocení úspěšnosti transplantace ostrůvků a při monitorování po pankreatektomii. 2,3 C peptid v moči se měří, jestliže je požadováno soustavné sledování funkce β buněk nebo časté odběry krve nejsou vhodné (např. u dětí). 2 Vylučování C peptidu v moči se používá k vyhodnocení funkce pankreatu u gestačního diabetu a u pacientů s nestabilní glykemickou kontrolou u diabetu závislém na inzulínu (IDDM). 15,16 Ačkoliv testování C peptidu není součástí rutinního sledování diabetu, je vhodným prostředkem pro individuální terapeutická rozhodnutí, která jsou nezbytná k optimální dlouhodobé metabolické kontrole. 17,18 Zvýšené hladiny C peptidu se objevují v důsledku zvýšení aktivity β buněk u hyperinzulinismu, renální insuficience a obezity. 2 Korelace byla také zjištěna mezi vysokými hladinami C peptidu a nárůstem hyperlipoproteinemie a hypertenze. 19 Elecsys 2010 MODULAR ANALYTICS E170 cobas e 411 cobas e 601 cobas e 602 Snížené hladiny C peptidu lze pozorovat při: hladovění, navozené hypoglykémii, hypoinsulinismu, (NIDDM, IDDM), Addisovově chorobě a po radikální pankreaktomii. Princip testu Sendvičový princip. Celková doba stanovení: 18 minut. 1. inkubace: 20 µl vzorku, biotinylovaná monoklonální protilátka specifická proti C peptidu a monoklonální protilátka proti C peptidu, značená rutheniovým komplexem a), reagují za tvorby sendvičového komplexu. 2. inkubace: Po přidání mikročástic, potažených streptavidinem, se komplex váže na pevnou fázi prostřednictvím interakce mezi biotinem a streptavidinem. Reakční směs je nasáta do měřící cely, kde jsou mikročástice s navázanými komplexy zachyceny prostřednictvím magnetu. Nenavázané složky jsou odstraněny roztokem ProCell/ProCell M. Přivedené napětí na pracovní elektrodě vyvolá chemiluminiscenční emisi fotonů, která je změřena fotonásobičem. Výsledky jsou zjištěny z kalibrační křivky, která je specificky vytvořena pro přístroj dvoubodovou kalibrací, a master křivky, která se do přístroje načte z čárového kódu reagencie. a) Tris(2,2'-bipyridyl)ruthenium(II)-komplex (Ru(bpy) ) Reagencie - pracovní roztoky Reagenční rackpack je označen jako CPEPTID. M R1 R2 Mikročástice potažené streptavidinem (průhledné víčko), 1 nádobka, 6.5 ml: Streptavidinem potažené mikročástice, 0.72 mg/ml; konzervans. Anti-C-peptid-Ab~biotin (šedé víčko), 1 nádobka, 9 ml: Biotinylovaná monoklonální protilátka proti C peptidu (myší) 1 mg/l; fosfátový pufr 50 mmol/l, ph 6.0; konzervans. Anti-C-peptid-Ab~Ru(bpy) (černé víčko), 1 nádobka, 9 ml: Monoklonální protilátka proti C peptidu (myší) značená rutheniovým komplexem 0.4 mg/l; fosfátový pufr 50 mmol/l, ph 6.0; konzervans. Bezpečnostní opatření a varování Pro diagnostické použití in vitro. Dodržujte běžná bezpečnostní opatření nutná pro nakládání se všemi reagenciemi. Likvidace všech odpadních materiálů musí probíhat v souladu s místními předpisy. Bezpečnostní listy jsou pro odborné uživatele dostupné na vyžádání. U všech reagencií a druhů vzorků (vzorky, kalibrátory a kontroly) zabraňte vytvoření pěny. Zacházení s reagenciemi Reagencie v soupravě jsou sestaveny tak, že tvoří komplet připravený k použití a nemohou být odděleny. Všechny informace, potřebné pro správnou činnost, jsou načteny z příslušného čárového kódu reagencie. Uskladnění a stabilita Skladujte při 2 8 C. Nemrazit. Reagenční soupravu Elecsys skladujte ve vzpřímené poloze, aby byla zajištěna dostupnost všech mikročástic během automatického míchání před použitím. 1 / 5

2 Stabilita neotevřené při 2 8 C po otevření při 2 8 C v analyzátorech do uvedeného data exspirace 12 týdnů 8 týdnů Odběr vzorků a příprava Pouze níže uvedené vzorky byly testovány a jsou přijatelné. Sérum odebrané standardní odběrovou soupravou nebo pomocí zkumavek se separačním gelem. Li heparin a K 3 EDTA plazma. Kritérium: Výtěžnost v rámci % sérových hodnot nebo sklon koeficient korelace > h moč, 1:10 předředěna s Diluent MultiAssay. Stabilita vzorků séra a 24h moče: 4 hodiny při C, 24 hodin při 2 8 C, 30 dní při 20 C. Mrazit jen jednou. 20 Uvedené druhy vzorků byly testované s vybranými typy odběrových zkumavek, které byly komerčně dostupné v té době, tzn., že do testu nebyly zařazené všechny typy zkumavek všech výrobců. Systémy odběru vzorků různých výrobců mohou obsahovat různé materiály, které mohou mít v některých případech zásadní vliv na výsledky. Při zpracování vzorků v primárních zkumavkách (systémy odběru vzorků) dodržujte pokyny jejich výrobce. Vzorky obsahující precipitáty centrifugujte před provedením stanovení. Nepoužívejte teplem inaktivované vzorky. Nepoužívejte vzorky a kontroly stabilizované azidem. Před měřením zajistěte, aby vzorky, kalibrátory a kontroly měly teplotu C. Vzhledem k možnému odparu roztoků by měly být vzorky, kalibrátory a kontroly v analyzátoru analyzovány/stanoveny do 2 hodin. Dodávaný materiál Reagencie jsou uvedeny v části "Reagencie - pracovní roztoky". Potřebný materiál (ale nedodávaný se soupravou) , C Peptide CalSet, pro 4 x 1 ml , PreciControl Multimarker, pro 3 x 2 ml každý z PreciControl Multimarker 1 a , PreciControl Multimarker, pro 3 x 2 ml každý z PreciControl Multimarker 1 a 2 (pro USA) , Diluent MultiAssay, 2 x 16 ml diluentu vzorků Celkové vybavení laboratoře Elecsys 2010, MODULAR ANALYTICS E170 nebo analyzátor cobas e Příslušenství pro analyzátory Elecsys 2010 a analyzátory cobas e 411: , ProCell, 6 x 380 ml systémový pufr , CleanCell, 6 x 380 ml čistící roztok pro měřící celu , Elecsys SysWash, 1 x 500 ml promývací přísada , Adapter for SysClean , Elecsys 2010 AssayCup, 60 x 60 reakčních nádobek , Elecsys 2010 AssayTip, 30 x 120 pipetovacích špiček Příslušenství pro MODULAR ANALYTICS E170, analyzátory cobas e 601 a cobas e 602: , ProCell M, 2 x 2 L systémový pufr , CleanCell M, 2 x 2 L čistící roztok pro měřící celu , PC/CC Cups, 12 kalíšků pro předehřátí ProCell M a CleanCell M před užitím , ProbeWash M, 12 x 70 ml čistícího roztoku pro finalizaci a mytí během změny reagencií , AssayTip/AssayCup Combimagazine M, 48 palet x 84 reak. nádobek nebo pipet. špiček, odpadní vaky , WasteLiner, odpadní vaky , SysClean Adapter M Příslušenství pro všechny analyzátory: , Elecsys SysClean, 5 x 100 ml systémový čistící roztok , Elecsys SysClean, 5 x 100 ml systémový čistící roztok (pro USA) Stanovení Optimálního využití stanovení dosáhnete, budete-li dodržovat pokyny uvedené v dokumentaci pro příslušný analyzátor. Pokyny ke stanovení specifické pro analyzátor vyhledejte v příslušném návodu k použití. Promíchání mikročástic před použitím proběhne automaticky. Načtěte specifické parametry pro test z čárového kódu reagencie. Ve výjimečných případech, kdy čárový kód nemůže být načten, zadejte 15místnou sekvenci čísel. Vytemperujte chlazené reagencie na přibl. 20 C a umístěte je do reagenčního kotouče (20 C) analyzátoru. Zabraňte tvorbě pěny. Systém automaticky reguluje teplotu reagencií a otvírá a zavírá nádobky. Kalibrace Návaznost: Tato metoda byla standardizována podle WHO International Reference Reagent pro C peptid z lidského inzulínu pro imunostanovení, IRR, kód 84/510, ustanovené 1986, z National Institute for Biological Standards and Control (NIBSC). 21 Každá reagenční souprava Elecsys je opatřena štítkem s čárovým kódem obsahujícím specifické informace pro kalibraci dané šarže reagencií. Předdefinovaná master křivka je uzpůsobena pro analyzátor pomocí příslušného CalSet. Frekvence kalibrace: Kalibrace musí být provedena jednou pro celou šarži reagencií novými reagenciemi (tj. ne více než 24 hodin od registrace reagenční soupravy v analyzátoru). Obnovení kalibrace je doporučeno: po 1 měsíci (28 dní) při používání stejné šarže reagencií po 7 dnech (při používání stejné reagenční soupravy v analyzátoru) dle potřeby: např. výsledky kontroly kvality jsou mimo definované rozmezí Kontrola kvality Pro kontrolu kvality používejte PreciControl Multimarker. Navíc lze použít i jiný vhodný kontrolní materiál. Kontroly pro rozdílné koncentrační rozmezí by měly být jednotlivě stanoveny nejméně jednou za 24 hodin při používání testu, alespoň 1x na soupravu reagencií a po každé kalibraci. Kontrolní intervaly a meze by měly být uzpůsobeny pro každou laboratoř dle individuálních požadavků. Naměřené hodnoty by se měly pohybovat v definovaných mezích. Každá laboratoř by měla mít vypracovaná nápravná opatření pro případ, že hodnoty překročí definované meze. Sledujte příslušná vládní nařízení a lokální směrnice kontroly kvality. Výpočet Analyzátor automaticky vypočítá koncentraci analytu pro každý vzorek buď v nmol/l, ng/ml nebo pmol/l (volitelné). Převodní faktory: ng/ml (µg/l) x = nmol/l ng/ml x = pmol/l nmol/l x 3.0 = ng/ml pmol/l x = ng/ml Omezení - interference Stanovení není ovlivněno ikteritou (bilirubin < 855 µmol/l nebo < 50 mg/dl), hemolýzou (Hb < mmol/l nebo < 0.3 g/dl), lipémií (Intralipid < 2000 mg/dl) a biotinem (< 246 nmol/l nebo < 60 ng/ml). Kritérium: Výtěžnost v rámci ± 10 % počáteční hodnoty. Vzorky by neměly být odebrány pacientům podstupujícím léčbu s vysokými dávkami biotinu (tj. > 5 mg/den) po dobu nejméně 8 hodin od podání poslední dávky biotinu. U revmatoidních faktorů nebyla interference pozorována do koncentrace 1200 IU/mL. Efekt nadbytku antigenu (hook efekt) nebyl zaznamenán pro C peptid do koncentrace 60 nmol/l (180 ng/ml). 2 / 5

3 In vitro bylo testováno 17 běžně užívaných léčiv v séru a 13 běžně užívaných léčiv v moči. Nebyla zjištěna žádná interference. Ve vzácných případech je možné pozorovat interferenci způsobenou velmi vysokým titrem protilátek proti test specifickým protilátkám, streptavidinu nebo rutheniu. Tyto účinky jsou minimalizovány vhodným navržením testu. Pro diagnostické účely je vždy nezbytné používat výsledky ve spojení s anamnestickými údaji pacienta, klinickým vyšetřením a jinými nálezy. Limity a rozmezí Rozsah měření Sérum a plazma: nmol/l nebo ng/ml (definováno spodním detekčním limitem a maximem master křivky). Hodnoty pod spodním detekčním limitem jsou vykazovány jako < nmol/l (< ng/ml). Hodnoty nad rozsahem měření jsou vykazovány jako > 13.3 nmol/l (> 40.0 ng/ml) (nebo až 133 nmol/l nebo 400 ng/ml při 10násobném ředění vzorku). Moč: nmol/l nebo ng/ml (definováno spodním detekčním limitem a maximem master křivky pro moč předředěnou 1:10 s Diluent MultiAssay). Hodnoty pod spodním detekčním limitem jsou vykazovány jako < nmol/l (< ng/ml). Hodnoty nad rozsahem měření jsou vykazovány jako > 133 nmol/l > 400 ng/ml) nebo jsou znovu testovány s vyšším naředěním vzorku. Spodní limity měření Spodní detekční limit testu Spodní detekční limit: nmol/l (0.010 ng/ml) Mez detekce představuje nejnižší měřitelnou hladinu analytu, kterou lze odlišit od nuly. Počítá se jako hodnota ležící 2 standardní odchylky nad nejnižším standardem (master kalibrátor, standard SD, studie opakovatelnosti, n = 21). Ředění Sérum a plazma: Ačkoliv je vzhledem k širokému rozsahu měření nepravděpodobná nutnost ředění, koncentrace C peptidu nad rozsahem měření lze naředit použitím Diluent MultiAssay. Doporučený poměr ředění je 1:10 (buď automaticky na analyzátorech MODULAR ANALYTICS E170, Elecsys 2010 nebo cobas e nebo ručně). Koncentrace ředěného vzorku musí být > 1.3 nmol/l (> 4 ng/ml). Po ručním naředění výsledek vynásobte faktorem ředění. Po naředění analyzátorem software MODULAR ANALYTICS E170, Elecsys 2010 a cobas e automaticky počítá s ředěním při výpočtu koncentrace vzorku. Moč: Všechny vzorky močí musí být před měřením předředěny v poměru 1:10 použitím Diluent MultiAssay Po naředění analyzátorem software MODULAR ANALYTICS E170, Elecsys 2010 a cobas e automaticky počítá s ředěním při výpočtu koncentrace vzorku. Vzorky moči s koncentrací C peptidu nad rozsahem měření lze otestovat znovu po ředění 1:20 nebo vyšším, použitím Diluent MultiAssay buď automaticky na analyzátorech MODULAR ANALYTICS E170, Elecsys 2010 nebo cobas e nebo ručně. Koncentrace ředěného vzorku musí být > 1.3 nmol/l (> 4 ng/ml). Po ručním naředění výsledek vynásobte faktorem ředění. Po naředění analyzátorem software MODULAR ANALYTICS E170, Elecsys 2010 a cobas e automaticky počítá s ředěním při výpočtu koncentrace vzorku. Očekávané hodnoty Studie se stanovením Elecsys C Peptide byly prováděny se vzorky sér zdravých lačnících mužů a žen, a se vzorky močí ze sběru za 24 hodin od zdravých jedinců. Byly získány následující výsledky: C peptid v séru/plazmě C peptid v moči za 24 h N Medián percentil Jednotka ng/ml nmol/l µg/24 h nmol/24 h Každá laboratoř by si měla prověřit převoditelnost očekávaných hodnot na svou populaci pacientů, a je-li to nutné, stanovit si vlastní referenční rozmezí. Specifické údaje o využití Údaje o využití, typické pro analyzátory, jsou uvedeny níže. Výsledky získané v různých laboratořích se mohou lišit. Preciznost Sérum a plazma: Preciznost byla stanovena použitím reagencií Elecsys a poolovaného lidského séra v upraveném protokolu (EP5 A) CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute): 6krát denně po dobu 10 dní (n = 60); lidské sérum 3 v jednom dni 5krát (n = 59); opakovatelnost v analyzátoru MODULAR ANALYTICS E170 (n = 21). Byly získány následující výsledky: Master kalibrátor Lidské sérum Lidské sérum Lidské sérum Lidské sérum Master kalibrátor Lidské sérum Lidské sérum Lidské sérum Lidské sérum Master kalibrátor Lidské sérum Lidské sérum Lidské sérum Lidské sérum Master kalibrátor Lidské sérum Lidské sérum Preciznost byla měřena použitím reagencií Elecsys a kontrol podle protokolu (EP5 A2) CLSI (Clinical and Laboratory Standards Institute): 2 série denně v duplikátech každý pro 21 dní (n = 84). Byly získány následující výsledky: 3 / 5

4 PreciControl MM b) PreciControl MM b) MM = Multimarker PreciControl MM PreciControl MM PreciControl MM PreciControl MM PreciControl MM PreciControl MM Moč: Preciznost byla měřena pomocí reagencií Elecsys v nativní a obohacené lidské moči; opakovatelnost (n = 21); mezilehlá preciznost: 1krát měřeno v 10 sériích (n = 10); předředěno analyzátorem. Byly získány následující výsledky: Moč Moč Moč Moč Moč Moč Moč Moč Moč Moč Moč Moč Moč Moč Moč Moč Moč Moč Moč Moč Porovnání metod Sérum Porovnání stanovení Elecsys C Peptide (y) s komerčně dostupným stanovením C peptid (x) použitím klinických vzorků séra poskytlo následující korelace: Počet naměřených vzorků: 266 Passing/Bablok 22 Lineární regrese y = 1.07x y = 1.11x τ = r = Koncentrace vzorků byly v rozmezí přibl až 7.26 nmol/l nebo přibl až 21.8 ng/ml. Moč Porovnání stanovení Elecsys C Peptide (y) s komerčně dostupným stanovením C peptid (x) použitím klinických vzorků moči poskytlo následující korelace: Počet naměřených vzorků: 72 Passing/Bablok 22 Lineární regrese y = 0.95x y = 1.02x τ = r = Koncentrace vzorků byly v rozmezí přibl až 173 nmol/l nebo přibl až 518 ng/ml. Analytická specifičnost Pro použité monoklonální protilátky byla zjištěna následující křížová reaktivita: Látka Koncentrace testovaná (µg/ml) Křížová reaktivita % Proinzulín, lidský c) Inzulín, lidský d) Inzulín, prasečí e) 7.50 n.d. f) Inzulín, hovězí g) 7.69 n.d. Somatomedin (růstový faktor podobný inzulínu 1 - IGF I) 1.0 n.d. 4 / 5

5 Látka Koncentrace testovaná (µg/ml) Křížová reaktivita % Lidský růstový hornon 10.0 n.d. Glukagon 10.0 n.d. c) WHO přípravek 84/611 d) WHO přípravek 66/304 e) WHO přípravek 86/690 f) n.d. = nedetekovatelné g) WHO přípravek 83/511 Stanovení Elecsys C Peptide využívá 2 specifické monoklonální protilátky směřované specificky proti lidskému C peptidu. Protilátky vykazují křížovou reaktivitu s C řetězcem proinzulínu a pravděpodobně s částečně zpracovaným proinzulínem (rozštěpený produkt). Koncentrace proinzulínu a štěpných produktů zdravých jedinců nalačno jsou 100krát nižší než koncentrace C peptidu, a proto nemá křížová reaktivita klinický význam. U pacientů s inzulinomem jsou zaznamenány koncentrace proinzulínu až 60krát vyšší než u zdravých jedinců nalačno. 23,24 Odkazy 1 Clark PM. Assays for insulin, proinsulin(s) and C-peptide. Ann Clin Biochem 1999;36(5): Sacks DB. Chapter 24: Carbohydrates. In: Burtis CA, Ashwood ER (eds). Tietz Textbook of Clinical Chemistry, WB Saunders, Philadelphia, 3rd edition;1999: Thomas L. Chapter 3.7: Insulin, C-peptide, proinsulin. In: Thomas L (ed.) Clinical Laboratory Diagnostics, TH-Books, Frankfurt, 1st English edition 1998: , deutsche Auflage 1998: Fiedler H. Fundamentals in Laboratory Medicine: Diabetes mellitus and Metabolic Syndrom. Brochure Roche Diagnostics 2001; English Cat. No , German Best.-Nr Johansson J, Ekberg K, Shafqat J, et al. Molecular effects of proinsulin C-peptide. Biochem Biophys Res Commun 2002;295: Kobayashi T, Maruyama T, Shimada A, et al. Insulin Intervention to Preserve β Cells in Slowly Progressive Insulin-Dependent (Type 1) Diabetes Mellitus. Ann N Y Acad Sci 2002;958(4): Forst T, Rave K, Pfuetzner A, et al. Effect of on Glucose Metabolism in Patients With Type 1 Diabetes. Diabetes Care 2002;25(6): Shapiro AMJ. Islet Transplants and Impact on Secondary Diabetic Complications: Does Protect the Kidney? J Am Nephrol 2003;14: Sima AAF. C-peptide and diabetic neuropathy. Expert Opin Investig Drugs 2003;12(9) Wahren J, Jörnvall H. C-peptide makes a comeback. Diabetes Metab Res Rev 2003;19: Pourmotabbed G, Kitabchi AE. Hypoglycemia. Obst Gynecol Clin North Am 2001;28(2): Batstra MR, Aanstoot H-J, Herbrink P. Prediction and Diagnosis of Type 1 Diabetes Using β-cell Autoantibodies. Clin Lab 2001;47; Törn C. C-peptide and Autoimmune Markers in Diabetes. Clin Lab 2003;49: Meier CH, Ladewig A, Keller U, et al. Clinical Value of the Measurement. Schweiz Rundsch Med Prax 1997;86(34): Lunell NO, Persson B, Devarajan LV, et al. Urinary C-peptide in the neonate correlates both to maternal glucose tolerance and to fetal size at birth. Am J. Perinatol 1988;5(2): Cha T, Tahara Y, Ikegami H, et al. Urinary C-peptide as an index of unstable glycemic control in insulin-dependent diabetes mellitus (IDDM). Diabetes Res Clin Pract 1991;13: Haupt E, Benecke A, Haupt A, et al. The KID Study VI: Diabetic complications and associated diseases in younger type 2 diabetics still performing a profession. Prevalence and correlation with duration of diabetic state, BMI and C-peptide. Exp Clin Endocrinol Diabetes 1999;107: Sacks DB, Bruns DE, Goldstein DE, et al. Guidelines and Recommendations for Laboratory Analysis in the Diagnosis and Management of Diabetes Mellitus. Clin Chem 2002;48(3): Haupt E, Haupt A, Herrmann R, et al. The KID Study V: the natural history of type 2 diabetes in younger patients still practicing a profession. Heterogeneity of basal and reactive C-peptide levels in relation to BMI, duration of disease, age and HbA1. Exp Clin Endocrinol Diabetes 1999;107: Wu AHB. Tietz Clinical Guide To Laboratory Tests, 4th Edition, WB Saunders Co, 2006: 186 pp. 21 Bristow AF, Gaines-Das RE. WHO international reference reagents for human proinsulin and human insulin C-peptide. J Biol Stand 1988;16: Bablok W, Passing H, Bender R, et al. A general regression procedure for method transformation. Application of linear regression procedures for method comparison studies in clinical chemistry, Part III. J Clin Chem Clin Biochem 1988 Nov;26(11): Houssa P, Dinesen B, Deberg M, et al. First direct assay for intact human proinsulin. Clin Chem 1998;44(7): Zilkens TM, Eberle AM, Schmidt-Gayk H. Immunoluminometric assay (ILMA) for intact human proinsulin and its conversion intermediates. Clin Chem Acta 1996;247: Pro více informací čtěte prosím příslušný návod k použití daného analyzátoru, jednotlivé aplikační listy, informace o produktu a metodické listy všech potřebných komponent (jsou-li dostupné ve Vaší zemi). Tečka se v tomto metodickém listu vždy používá jako desetinný oddělovač k označení hranice mezi celými a desetinnými místy desetinného čísla. Oddělení tisíců se nepoužívá. Symboly Roche Diagnostics používá následující symboly a znaky, včetně uvedených v normě ISO Obsah soupravy Analyzátory/přístroje, na kterých lze reagencie použít Reagencie Kalibrátor Objem po rekonstituci nebo smíchání Významné doplňky nebo změny jsou označeny pruhem podél textu. 2013, Roche Diagnostics Roche Diagnostics GmbH, Sandhofer Strasse 116, D Mannheim Distribuce v USA: Roche Diagnostics, Indianpolis, IN Zákaznická podpora v / 5