Edukační sekce : Klinická cytometrie

Transkript

1 Edukační sekce : Klinická cytometrie Obecně o kontrole kvality, důležité kapitoly normy ISO RNDr. Veronika Kanderová, Ph.D. (CLIP-Cytometrie, 2.LF UK a FNM) Validace a verifikace v cytometrii Mgr. Marcela Vlková, Ph.D. (ÚKIA, FN u sv. Anny, Brno) Titrace protilátek a kitů RNDr. Martina Vášková, Ph.D. (CLIP-Cytometrie, 2.LF UK a FNM) Správné stanovení HLA-B27? MUDr. Olga Kryštůfková (Revmatologický ústav, 1.LF UK) CD8 escapees RNDr. Veronika Kanderová, Ph.D. (CLIP-Cytometrie, 2.LF UK a FNM) Co všechno lze zjistit z leukocytárních subpopulací? Mgr. Marcela Vlková, Ph.D. (ÚKIA, FN u sv. Anny, Brno) Částečný IgD deficit Mgr. Jana Nechvátalová, Ph.D., MUDr. Zita Chovancová, Ph.D. (FN u sv. Anny, Brno)

2 Kontrola kvality v klinické cytometriianeb Jak se vyrovnat s ISO 15189? ISO (International Organization for Standardization) - mezinárodní organizace pro normalizaci - světová federace národních normalizačních organizací se sídlem v Ženevě Příklady: ISO Quality management ISO Risk management ISO Country codes ISO Food safety management ISO Medical laboratories -Requirements for quality and competence

3 Akreditace = postup, jímž autoritativní orgán uděluje formální uznání, že organizace je způsobilá k výkonu určitých činností. ČIA (Český institut pro akreditaci, obecně prospěšná společnost, národní akreditační orgán založený Českou republikou a notifikovaný Evropskou komisí) norma ČSN EN ISO 15189:2013 Zdravotnické laboratoře - Zvláštní požadavky na kvalitu a způsobilost člen ILAC (International Laboratory Accreditation Cooperation, a IAF (International Accreditation Forum, NASKL (Národní akreditační středisko pro klinické laboratoře) norma ČSN EN ISO 15189:2013 Zdravotnické laboratoře - Zvláštní požadavky na kvalitu a způsobilost V případě testování vzorků (léčivých přípravků) pro klinické studie: SÚKL (Státní ústav pro kontrolu léčiv) zákon č. 378/2007 Sb., o léčivech a o změnách některých souvisejících zákonů (zákon o léčivech), SVP

4 Kontrola kvality laboratorních vyšetření!!! Smlouvy se zdravotními pojišťovnami Mezinárodní spolupráce Studie léčivých přípravků

5 ZÁKAZNÍK PROCES DOHLEDATELNOST NEUSTÁLÉ ZLEPŠOVÁNÍ KOMPETENCE MANAGEMENT RIZIK

6 Požadavky na zdravotnickou laboratoř: Nastavit procesy v laboratoři tak, aby se zajistilo, že služby budou poskytovány na určité úrovni kvality, která vyhovuje potřebám zákazníků (lékařů, oddělení). Co očekávají zákazníci od klinické (cytometrické) laboratoře? HNED NAPOPRVÉ správné výsledky VČAS výsledky vydávané vždy včas (1 den? 4 dny? Zeptejte se, ale neušijte na sebe bič.) KONZISTENOST POSKYTOVANÝCH SLUŽEB žádné velké a náhlé změny, žádná překvapení TO, CO SLIBUJEŠ, TAKÉ SPLŇ laboratorní příručka POHODLNOST vím, kam co poslat, je to snadné, informace jsou přístupné, funguje to bez problémů CENA

7 Požadavky na zdravotnickou laboratoř: Nastavit procesy, které v laboratoři budou probíhat. Určit jejich sled a vzájemné působení. Zajistit jejich používání všude v laboratoři. Sledovat je a vyhodnocovat, zda jsou efektivní. Provádět opatření nutná kdosažení plánovaných výsledků a neustálého zlepšování procesů. Proces neznamená průchod vzorku laboratoří!!! Proces = soubor vzájemně souvisejících nebo vzájemně působících činností, které přeměňují vstupy na výstupy Thanks to: Hana Feixová

8 Thanks to: Hana Feixová

9 Požadavky na zdravotnickou laboratoř: Řídit dokumentaci (vést ji neustále v aktuálním stavu tak, aby se zabránilo použití neplatných nebo neaktuálních dokumentů) - přístupová práva, archivace, možnost zpětného dohledání Interní dokumentace: Příručka kvality, Cíle kvality, Přezkoumání vedením Laboratorní příručka + žádanky rozsah nabízených služeb požadavky na vzorek SOP metodické, technické Osobní složky Management rizik, neshody Audity Příjem a kontrola reagencií, Externí dokumentace: Kopie příslušných právních předpisů, norem a jiných normativních dokumentů Provozní řád nemocnice či oddělení Skartační, archivační řád Nakládání s odpady Dezinfekční řád, Metrologický řád, Thanks to: Hana Feixová

10 Záznamy!!! o přijetí vzorků do laboratoře NIS, LIS pracovní listy k vyšetřením o reagenciích (např. šarže zboží, příbalové informace) o údržbě přístrojů, kalibracích o verifikacích o interní a externí kontrole kvality o neshodách a preventivních opatřeních o mimořádných událostech stížnosti a přijatá opatření, Datum (a tam, kde to má význam, i čas), kdy byly provedeny změny záznamu, musí být zaznamenány spolu sidentitou pracovníka, který změny učinil. Thanks to: Hana Feixová

11 Cíle kvality dostupnost služeb ve prospěch pacienta - etický kodex rozšíření rozsahu služeb, vzdělávání personálu, Indikátory kvality Proces sledování indikátorů kvality musí být plánovaný, což zahrnuje : stanovení cílů stanovení metodiky sledování interpretace (způsob hodnocení) nastavení mezí (tolerančních limitů) plány opatření doba trvání měření Thanks to: Hana Feixová

12 Indikátory kvality laboratorního vyšetření Preanalytická fáze př. počet vzorků s nedostatečnou identifikací / celkový počet vzorků za rok počet vzorků s nevhodným objemem / celkový počet vzorků za rok počet chybně transportovaných vzorků / celkový počet vzorků za rok Analytická fáze př. výsledky mezilaboratorního porovnání/ekk Postanalytická fáze př. počet pozdě vydaných výsledků (překročení doby odezvy) / celkový počet za rok počet validních interpretačních komentářů /celkový počet výsledků za rok Hodnoty indikátorů kvality mají být uváděny v procentech. Měly by být ustanoveny jejich cílové hodnoty. Thanks to: Hana Feixová

13 Do not improve just to improve or to keep busy but improve when needed, useful or required.

14 Personální zabezpečení laboratoře Nepodkročitelná minima stanovená pro jednotlivé laboratorní odbornosti Kam patří cytometrie? - alergologie a imunologie (813) ČSAKI - laboratorní sekce - hematologie (hematoonkologie) (818) ČHS - víceoborová laboratoř Záleží také na smlouvě se zdravotní pojišťovnou vykazování bodů: např. položka imunofenotypizace(813 i 818, sdílení kódů) Odpovědnosti Odborné způsobilosti Pravidelné školení, vzdělávání Hodnocení zaměstnanců Připomínky zaměstnanců

15 You need to be involved. Vedoucí laboratoře / lékaři apod. by měli být aktivně účastni v systému managementu kvality, tam, kde je jich třeba. rozhodnutí o nabízených službách, metodách, zlepšování, indikátorech kvality,

16 Cílem managementu rizik je definovata vyhodnotit rizika, která by mohla ohrozit výsledky vyšetření a následně pacienta. Zdroje možných rizik v cytometrii VZOREK špatný náběr, špatná žádanka, nesprávné antikoagulans, teplota, PERSONÁL nedodržení SOP, schopnost rozpoznat problém, PŘÍSTROJ nesprávné nastavení, různé přístroje, REAGENCIE různé šarže, změny klonů, fluorochromů, kontaminace, KOMPENZACE, ANALÝZY (nesprávné gejtování) SYNCHRONIZACE DAT, PŘEPIS VÝSLEDKŮ DO LIS

17 Cílem managementu rizik je definovat a vyhodnotitrizika, která by mohla ohrozit výsledky vyšetření a následně pacienta. FMEA = Failure Mode and Effects Analysis analýza možného výskytu a vlivu chyb - Stanovit možná rizika v laboratorních procesech - Stanovit jejich význam ( = nejvýznamější) výskyt ( = nejčastější) odhalitelnost ( = nejhůře odhalitelný) - Určit jejich rizikovost Rizikové číslo = význam x výskyt x odhalitelnost

18 Potenciální chyba Možné následky Význam Možné příčiny Výskyt Stávající opatření Odhalitelnost Míra rizika záměna vzorků nebo ztráta označení vzorku znehodnocená či poškozená reagencie /spotřební materiál přenos dat / výsledků možnost záměny výsledku vyšetření / pacienta snížená vypovídací hodnota výsledku 10 7 záměna výsledků 10 nedodržení stanoveného postupu, špatné označení vzorku nedodržení skladovacích a přepravních podmínek manuální přepis, chyba synchronizačního softwaru 3 kontrola při příjmu, hodnocení historie výsledků pacienta a souladu s klinickým obrazem pacienta monitoring teplot kontrola výsledků odpovědným pracovníkem, kontrola přenosu dat Thanks to: Hana Feixová, Jana Březinová, Leona Řezníčková-Rezková

19 Interní kontrola kvality Validované a pravidelně kontrolované přístroje Validované kity Verifikace reagencií a postupů Monitoring prostředí Externí kontroly kvality: Mezilaboratorní porovnání

20 Česká doporučení Mezinárodní doporučení Cytometry Part B: Clinical Cytometry Special Issue: Validation of Cell-Based Fluorescence Assays: Practice Guidelines from the International Council for Standardization of Haematology and the International Clinical Cytometry Society

21 Kvalitativní testy imunofenotypizace leukemií, lymfomů, myelodysplázií, myelomů = multiparametrická analýza atypických buněk na pozadí zdravých buněk Doporučení: interpretace kvalifikovaným pracovníkem porovnání s morfologií vyšetřované znaky a panely protilátek doporučené v European/ Bethesda guidelines výsledkem % zastoupení atypické populace dim/ bright pozitivita consistentand reproducibleperformance ofthereagents, testování reagencií na vhodném materiálu

22 Kvantitativní testy lymfocytární subpopulace, B a T-lymfocytární subpopulace CD34+ progenitory exprese CD64 na neutrofilech při infekcích a sepsích, Doporučení: kvantifikace pomocí cytometrickýchkuliček nebo přepočet podle hodnoty WBC a AbsLymfo získané z hem. analyzátoru referenční kuličky a kalibrační křivka pro expresi CD64 referenční rozmezí (věková kritéria) poznámka, zda je získaná hodnota normální / vyšší / nižší výsledkem absolutní hodnota stanovované populace (bb*10e9 / L) intra-assay and inter-assay imprecision preciznost (výsledky opakovaných měření nesmí být výrazně rozdílné) míru preciznosti vyjadřuje SD a CV opakovatelnost a reprodukovatenost měření accuracy cannot be established for cell-based assays!!!

23 Semikvantitativní testy minimální reziduální nemoc PNH % zastoupení hledané populace v gejtované oblasti která dosahuje či nedosahuje hodnoty cut off, treshold Např. CD19+CD45dim leukemické blasty na hladině 0,1 / 10 % ze všech jaderných buněk 15 dní od začátku léčby. Doporučení: intra-assay and inter-assay imprecision accuracy cannot be established for cell-based assays!!!

24 Ing. Jana Březinová (manažer kvality CLIP) RNDr. Leona Řezníčková-Rezková Hana Feixová(Úsek pro akreditace a kvalitu ÚHKT) kurzy ISO : březen-duben 2016 Bc. Pavla Luknárová Daniel Thürner Pavel Semerák Mgr. Martina Šmídková Ing. Markéta Kovárníková 2.LF UK a FN Motol