MASARYKOVA UNIVERZITA

Rozměr: px
Začít zobrazení ze stránky:

Download "MASARYKOVA UNIVERZITA"

Transkript

1 MASARYKOVA UNIVERZITA Přírodovědecká fakulta Ústav chemie Mikropříprava vzorků pro speciaci a biologické aplikace LA ICP MS Diplomová práce Brno 2008 Pavla Foltynová

2 Poděkování Především bych chtěla poděkovat vedoucím mé diplomové práce Mgr. Janu Preislerovi, PhD. a Mgr. Tomáši Vaculovičovi, PhD. za jejich cenné rady a pomoc při získávání experimentálních výsledků. Dále děkuji Mgr. Ondřeji Peši a Bc. Radku Vyhnánkovi za spolupráci a všem pracovníkům a studentům Ústavu chemie Přírodovědecké fakulty Masarykovy Univerzity. 2

3 Prohlášení Prohlašuji, že tato diplomová práce je mým původním dílem, které jsem vypracovala samostatně. Použila jsem pouze uvedenou literaturu a experimentální výsledky dosažené v laboratořích Přírodovědecké fakulty MU v Brně. 3

4 Obsah I. Úvod... 6 II. Cíle práce... 7 III. Teoretická část Stopové prvky Toxické kovy Metalobiomolekuly Některé kovy ovlivňující lidský organismus ICP MS Interference Laserová ablace Speciace stopových prvků v biologických materiálech pomocí ICP MS LC ICP MS PAGE LA ICP MS CE ICP MS Volba modelového systému Chrom...25 IV. Experimentální část Použité chemikálie Přístroje a vybavení Ablační systém ICP MS Nosič vzorku Čistota nosiče Morfologie nanesených vzorků Ablace a reprodukovatelnost Shrnutí výběru nosiče Optimalizace laserové ablace Hustota zářivého výkonu laseru a doba ablace Rychlost scanu Charakteristiky laserové ablace Dynamický rozsah

5 9.2 Limit detekce Modelová CE LA ICP MS Fosfor Limit detekce Modelový vzorek (protein:fosfor) Analýza reálných vzorků stanovenín mědi v buňkách Kalibrace Nárůst koncentrace mědi v buňkách po indukci disulfiramem Stanovení koncentrace mědi Stanovení koncentrace mědi v lyzovaných buňkách Shrnutí analýzy reálných vzorků...69 V. Závěr VI. Seznam zkratek VII. Použitá literatura

6 I. Úvod V poslední době se v oblasti stopové a ultrastopové analýzy stále častěji využívá analytická metoda hmotnostní spektrometrie s indukčně vázaným plazmatem (ICP- MS). Metoda má široké uplatnění například v analýze průmyslových výrobků, odpadních vod, v potravinářském průmyslu, ale také v oblasti medicíny a stanovení stopových prvků ve vodách nebo v biologických materiálech. Tato metoda umožňuje mimořádně citlivou analýzu obsahu asi 90 prvků a také zjištění zastoupení jednotlivých izotopů daného prvku ve vzorku. V oblasti bioanorganické chemie je ICP MS využívána jako detektor v chromatografii a elektroforéze. Tyto separační metody a ICP MS je možno propojit přímo; on-line s vysokoúčinnou kapalinovou chromatografií a kapilární elektroforézou, nebo provádět zvlášť; off-line s gelovou elektroforézou. Pokud jsou analytem metalobiomolekuly, může být spojení separační techniky s ICP MS komplementární metodou k hmotnostní spektrometrii s měkkou ionizací (ionizace elektrosprejem - ESI MS nebo laserová desorpce/ionizace za účasti matrice - MALDI MS). Kovy mohou být pro živé organismy esenciální ( např. Co, Cu, Cr, Fe, Ni) a jejich nedostatek může způsobovat vážné poruchy. Řada z těchto kovů je esenciální v nízkých koncentracích ale toxické ve vyšších. Naopak toxické účinky již v nízkých koncentracích mají těžké kovy. Toxicita a esencialita kovu také závisí na formě jejich výskytu. Kovy a komplexy kovů jsou v organismu obsaženy v relativně malých koncentracích a v komplexní matrici, proto je třeba zvolit analytickou metodu, která zpravidla zahrnuje dostatečně účinnou separaci a citlivou a selektivní detekční metodu pro dané kovy. V své práci jsem se zabývala možnosti speciace kovů, selektivní detekce kovů v proteinech nebo biologických vzorcích a selektivní detekce fosforu ve fosfoproteinech pomocí laserové desorpce (LD) a hmotnostní spektrometrie s indukčně vázaným plazmatem. Naším dlouhodobým záměrem je ověřit přístup vyzkoušený pro off-line spojení CE s MALDI MS 1 i pro off-line spojení CE s LA, respektive LD ICP OES/MS. Tato diplomová práce navazuje na moji bakalářskou práci. Práce je součástí vývoje multidetekční platformy pro mikrokolonovou separaci proteinů a peptidů. 6

7 II. Cíle práce Tato diplomová práce navazuje na moji práci bakalářskou. V bakalářské práci byla zpracována literární rešerše zaměřená na základní charakteristiky MALDI MS, ICP OES a MS a byl podán stručný přehled metod používaných na analýzu metaloproteinů a fosfoproteinů. Z rešerše zaměřené na spojení kolonových separačních technik a ICP OES/MS vyplunulo, že veškerá dosavadní spojení byla on line a že se nejednalo o rutinně používanou instrumentaci. Byly provedeny základní experimenty s roztoky CuSO 4, na kterých byl ověřen koncept MALD-ICP OES. Odhad limitu detekce roztoků CuSO 4 se pohyboval řádově v jednotkách pmol při použití argonu jako ablační atmosféry. Literární rešerše v této diplomové práci se již nezabývá popisem metod MALDI MS, ICP OES/MS, ale jsou pouze vybrány kapitoly, které se vztahují k problematice analýzy pomocí LA ICP MS a také ke spojení separačních technik a ICP MS. Cílem experimentální části je podrobná charakteristika nanesených modelových vzorků pro LD/LA ICP MS. Mezi úkoly patří vybrat vhodný substrát jako nosič vzorku, najít optimální podmínky pro LD/LA a zjistit, zda a jak morfologie vzorku ovlivňuje složení aerosolu a tím i celkové výsledky analýzy. 7

8 III. Teoretická část 1. Stopové prvky Pojem stopové prvky se vztahuje na prvky, které se v organismu nebo v životním prostředí nacházejí ve velmi nízkých koncentracích. Stopové prvky můžeme rozdělit do tří skupin: 1. esenciální jsou nezbytné pro udržení životních funkcí vyšších živočichů. Do této skupiny patří železo, měď, zinek, mangan, kobalt, molybden, chrom a cín. 2. neesenciální tyto prvky se v organismu vyskytují v přímé závislosti na kontaminaci životního prostředí. Do této skupiny jsou zařazovány např. hliník, rtuť, stříbro, zlato a další. 3. toxické prvky, které už při nízkých koncentracích působí škodlivě na člověka a ostatní biotické složky ekosystémů. Patří sem například arsen, kadmium, olovo a rtuť. Ovšem za toxické prvky můžeme označit všechny prvky, pokud jsou přijímány v dostatečně vysoké dávce a dostatečně dlouhou dobu. Toxicita a esencialita prvku také závisí na tom, v jaké formě (specii) se nachází. Stopové prvky v biologických organismech interagují s přítomnými molekulami a mohou se vyskytovat v elementární formě, jako volné nebo hydratované ionty, jako komplexy s anorganickými a organickými ligandy (např. aminokyseliny, peptidy, proteiny, lipidy), málo rozpustné sloučeniny, organokovové sloučeniny atd Toxické kovy Toxické kovy jsou takové kovy, které mají neblahý vliv na organismus už při nízkých koncentracích. Jako toxické kovy jsou často označovány těžké kovy. Do organismu mohou ionty těžkých kovů procházet dýchacím či trávicím ústrojím nebo přes kůži. Ionty jsou do těla vstřebávány a krví transportovány do různých orgánů. Během transportu jsou ionty přítomny přímo v červených krvinkách nebo častěji ve specifických bílkovinách krevní plazmy. Ionty kovů vytvářejí elektrofilní kationty a pro většinu těchto kationtů je typická silná afinita k síře. Proto mohou napadat např. thiolové SH skupiny v enzymech, což vede k potlačení nebo zkreslení enzymatických 8

9 funkcí. Kationty těžkých kovů se také velmi ochotně váží na karboxylovou skupinu a aminoskupinu peptidů nebo proteinů. Afinita k fosfátové skupině způsobuje, že těžké kovy v organismech srážejí fosfátové biosloučeniny nebo katalyzují jejich rozklad. Velmi nebezpečná je schopnost kovů akumulovat se v různých tělních tkáních. Velký rozdíl v toxicitě existuje mezi anorganickými a organickými sloučeninami kovů. Organokovové sloučeniny patří k nejtoxičtějším látkám, procházejí snadno a nezměněny přes buněčné membrány. Toxicita na celulární úrovni je určena mnoha faktory, např. chemickou formou iontu, oxidačním stavem kovu nebo jeho ligandovou vazbou Metalobiomolekuly Proteiny a peptidy jsou velmi efektivní a často specifické ligandy pro celou škálů kovových iontů. Obsahují řadu potenciálních donorových atomů a jejich komplexy existují v mnoha konformacích. Ačkoli základní vazba peptidu a kovu je jednoduchá, jednotlivé aminokyseliny z peptidové sekvence mohou interagovat a vytvořit tak velký počet konformací komplexu. Interakce mezi peptidovými zbytky můžou zvýhodňovat jednotlivé konformace peptidu, které mohou mít základní vliv na koordinační rovnováhu kov - peptid v termodynamickém i v strukturálním významu. Postranní řetězce aminokyselin jsou spojeny s množstvím intramolekulárních interakcí a vytvořený metalopeptidový systém je strukturálně velmi specifický 2. V případě komplexu proteinu a kovu je možnost konformací komplexu ještě větší. Enzymy s vázaným iontem kovů v aktivním centru enzymu se nazývají metaloenzymy. Kovové ionty se účastní katalýzy několika způsoby a to vazbou na substrát tak, aby byl vhodně orientován pro reakci, zprostředkováním redoxní reakce reverzibilními změnami kovového iontu v oxidovaném stavu a dále elektrostaticky stabilizují nebo odstiňují negativní náboj. Důležitými metaloproteiny jsou metalothioneiny. Metalothioneiny jsou nízkomolekulární proteiny, jejichž primární funkce je udržení homeostázy těžkých kovů. Nacházejí se v živočišných, rostlinných i mikrobiálních organismech. Vzrůst syntézy lidského metalothioneinu může být zapříčiněn vzrůstající koncentrací těžkých kovů, hormonů, cytokininů nebo xenobiotik. Výzkumy v poslední době ukazují na významný vztah koncentrace metalothioneinu ke karcinogenezi 3. 9

10 1.3. Některé kovy ovlivňující lidský organismus Většina známých kovů má vliv na živé organismy. V této kapitole jsou stručně popsány ty kovy, které funkci organismů výrazně ovlivňují a v životním prostředí jsou zastoupeny nejhojněji. V tabulce I jsou uvedena průměrná množství těchto vybraných stopových prvků obsažených v lidském těle (70 kg) a jejich biologická funkce nebo způsobené nemoci. Tab. I Vybrané kovy, nacházející se v lidském organismu, a jejich bilogické funkce 4 Prvek Celkové množství na 70 kg váhy (mg) Biologická funkce a nemoci Co 1,5 Součást vitamínu B 12 Ni 10 Kofaktor enzymu ureázy Fe 6000 Přenos kyslíku, oxidoredukční děje Sn 20 Redoxní reakce Cu 80 Kofaktor metaloenzymů, oxidorukční děje, transport Fe, antioxidační účinky Zn 2000 Kofaktor metaloenzymů, součást insulinu, hormonů hypofýzy Cd 50 Karcinogen, nemoc itai-itai Pb 120 Zasahuje do metabolismu krevních bílkovin a do tvorby hemoglobinu Mo 10 Kofaktor enzymů Cr 2 Metabolismus tuků a proteinů Kobalt Kobalt je esenciální stopový prvek, je integrální součástí vitaminu B 12. Navíc má přímou úlohu v tvorbě erytropoetinu a inhibuje enzymy oxidace v kostní dřeni. Kobalt má také úlohu v syntéze hormonů štítné žlázy. 10

11 Nikl U niklu dosud nebyla přesně definována biochemická funkce v organismu savců. Předpokládá se, že působí jako kofaktor nebo strukturální komponenta specifických metaloenzymů u vyšších organismů, které byly identifikovány u bakterií, hub, rostlin a bezobratlých živočichů. Železo Železo je nejdůležitější stopový prvek, který zajišťuje přenos kyslíku a oxidoredukční děje ve tkáních. Ve vysoké koncentraci působí Fe toxicky, ukládá se v játrech, ve slinivce, v myokardu, v kůži, což vede k jaterní cirhóze, fibróze pankreatu a kardiomyopatii. Cín Cín je stopový prvek, u něhož není jasná jeho biochemická funkce. Předpokládá se, že hraje roli v terciární struktuře proteinů. Při zvýšeném příjmu Sn dochází k ovlivnění aktivity některých enzymů a lze soudit, že dochází k ovlivnění metabolismu Zn, Cu a Ca. Při příjmu organických sloučenin cínu se objevuje vyšší toxicita a dochází k ataku centrálního nervového systému. Měď Meď patří k esenciálním prvkům. Je součástí některých metaloenzymů, např. tyrosinasy, a její přítomnost je důležitá pro funkcí jiných enzymů. Také je důležitá pro správný metabolismus železa v lidském organismu a její nedostatek může způsobit špatnou syntézu hemoglobinu. Naopak vyšší koncentrace mědi mohou vést ke zdravotním obtížím. Měď se v lidském těle hromadí především v játrech a kostní dřeni. Zinek Rovněž zinek patří k esenciálním prvkům. Je součástí mnoha metaloenzymů a pro správnou funkci dalších enzymů je jeho přítomnost nezbytná. Důležitou roli hraje také v metabolismu bílkovin a nukleových kyselin. Nedostatek zinku může být příčinou neuropsychických abnormalit a dermatitid. Velká expozice zinku naopak vede k 11

12 vážným zdravotním potížím, např. při inhalaci par oxidu zinečnatého se může projevit tzv. horečka z kovů. Tato horečka z kovů může vznikat i při působení dalších kovů jako je Cu, Cd, Hg, Pb, Ni, Sn a Fe. Kadmium Kadmium často doprovází zinek v zinkových rudách, avšak na rozdíl od zinku není esenciálním prvkem a naopak na organismus působí vysoce toxicky. Kadmium a zinek mají podobný atomový poloměr, proto může kadmium nahrazovat zinek v biochemických strukturách organismu a tím měnit jejich funkčnost. Olovo Olovo se běžně se vyskytuje v životním prostředí. Olovo je toxický prvek, jehož toxický účinek se projevuje při biosyntéze hemu a následnou anémií. Poškozuje buňky tím, že se váže na cystein v bílkovinách a mění jejich terciální strukturu. Molybden Molybden je stopový esenciální prvek. Je součástí metaloenzymů (xanthinoxidáza, aldehydoxidáza, sulfátoxidáza aj.). Molybden patří k prostetickým skupinám flavoenzymů. Toxicita molybdenu není jednoznačně prokázána. Nadbytek Mo v stravě snižuje vstřebávání mědi a může tak dojít až k deficitu tohoto prvku. Chrom Chrom je příklad prvku, u kterého je toxicita závislá na speciaci. Zatímco ve formě chromitých iontů je významným esenciálním prvkem, šestimocný chrom je silně toxický. Sloučeniny šestimocného chromu jsou karcinogeny, poškozují orgány a způsobují vnitřní krvácení. Podrobněji je chrom popsán v kapitole

13 2. ICP MS Hmotnostní spektrometrie s indukčně vázaným plazmatem (ICP-MS) je analytická metoda vhodná pro stanovení spécií stopových množství prvků. Hlavní výhodou ICP jako iontového zdroje je jeho schopnost vytvářet monoatomické positivní ionty z většiny prvků, takže prvky mohou být identifikovány na základě spektra atomových hmotností bez množství isotopických píků. Nezávislost intenzity signálu na okolí molekuly dovoluje použití standartních roztoků kovových iontů ke kvantifikaci metaloproteinů nebo jiných biomolekul. Kvantifikace pomocí intenzity signálu prvku je ovšem možná, pouze pokud je známa primární struktura a stechiometrie sledovaného komplexu. Během posledních několika let neustále roste použití ICP MS pro biochemické aplikace, což je nerozlučně spojeno s vývojem v těchto oblastech: nová generace ICP MS s poklesem absolutních detekčních limitů, možnost jejich spojení s kapilárními a planárními elektroforetickými technikami a přístup k stabilním isotopům kovů zahrnující istopově značené biomolekuly Interference Metodu ICP MS lze použít pro analýzu biologických materiálů, avšak výsledky mohou být ovlivněny řadou interferencí, které je třeba eliminovat. Interference v ICP- MS mohou být spektrální a nespektrální. Nespektrální interference Nespektrální interference jsou nejčastěji způsobeny matricí, přítomností kyselin a snadno ionizovatelných prvků. Usazováním solí vznikají blokády na vstupních clonách. Na vznik nespektrálních interferencí má dále vliv zmlžování a transport vzorku, matricí indukované změny v iontovém paprsku, vliv prostorového náboje aj. K eliminaci nespektrálních interferencí jsou nejčastěji používány metody použití vnitřních standardů, přídavku standardu a modelování kalibračních roztoků. 13

14 Spektrální interference Častým problémem ICP MS jsou spektrální interference, protože často používané kvadrupólové analyzátory mají pouze omezené hmotnostní rozlišení. Mezi spektrální interference pozorované v ICP-MS patří výskyt částic o stejné nebo velmi blízké hodnotě m/z. Tyto rušící molekulové částice pochází ze samotného plazmového plynu, případně v kombinaci se vzorkem či rozpouštědlem (např. Ar +, ArH +, ArO + ) nebo přímo ze vzorku či rozpouštědla (hydridové a hydroxidové ionty, oxidické ionty). Řada interferencí může být eliminována tím, že měříme současně signál dalšího izotopu, který není zatížen interferencí a vypočítáme korekční faktor pro interferující izotop. Jeho signál poté odečteme od celkového signálu. Dalším řešením těchto interferencí může být použití reakčních/kolizních cel zařazených před kvadrupól nebo použití přístrojů s vysokým rozlišením. Kolizní/reakční cela může být využita buď jako kolizní cela, kde dochází především k termalizaci iontů a srážkové fokusaci iontového paprsku (např. He, Ne, Xe) nebo jako reakční cela s reaktivním plynem (např. H 2 ), kde dochází i k reakcím mezi interferujícími ionty a reakčním plynem. 5 Dalším řešením spektrálních interferncí je použití vysokorozlišujícího sektorového přístroje, který poskytuje extrémně nízké instrumentální pozadí, zlepšuje citlivost v nízkorozlišujícím módu pro isotopy, které nejsou náchylné k spektrálním interferencím a má velmi nízké absolutní detekční limity (fg). Ovšem zvýšení rozlišovací schopnosti těchto spektrometrů bývá dosaženo na úkor snížení citlivosti. 2.2 Laserová ablace Laserová ablace je jedna z možností zavádění pevných vzorků do ICP. Výhodami zavádění pevných vzorků je zkrácení doby analýzy, eliminace agresivních chemikálií, minimální úprava vzorku a zabránění kontaminace vzorku při jeho rozkladu. Laserová ablace znamená povrchovou destrukci materiálu, což zahrnuje vypařování, sublimaci, erozi, explozi, vymršťování fragmentů molekul, atomů, iontů a elektronů. Interakcí laseru se vzorkem vzniká mikroplazma. Tento děj je doprovázen rázovou vlnou, vznikem kráteru a expanzí laserového mikroplazmatu. Ablatované částice jsou unášeny do ICP. Tyto procesy závisí na vlnové délce laserového záření, energii a délce 14

15 laserového pulsu, velikosti a geometrii ablační cely, typu použitého nosného plynu aj. Ablační cely Důležitou částí instrumentace v LA ICP je ablační cela. Nárůst zájmu o přímou analýzu pevných vzorků v 80. letech přinesl intenzívní studium ablačních cel, především pro ICP OES. Od té doby bylo navrhnuto a studováno několik variant ablačních cel a transportního systému. Navržené ablační cely se liší v geometrii, celkovém objemu, dynamice toku plynu a mohou být rozděleny do dvou skupin. První skupina zahrnuje cely, kde je vzorek přikládán k cele a tím ji utěsní (otevřený typ). Nevýhodou je, že daný vzorek musí určité minimální rozměry. Druhou skupinou jsou cely, do kterých se vzorek vkládá a jsou tak nezávislé na velikosti vzorku (uzavřený typ). Toto vede k zvětšování objemu cely, k horší reprodukovatelnosti pozice vzorku, k nárustu zředění vzorku a k velkému rozptylu signálu. Tento typ ale nevyžaduje vyleštěný povrch vzorku a jiné povrchové úpravy. 6 Objem ablační cely, její geometrie, tok plynu a transportní hadice přenášející aerosol do ICP významně ovlivňují proces transportu a strukturu signálu. Vliv na kolísání signálu má jak stabilita ablačního procesu tak proces transportu, a je nesnadné přesně určit, o který z vlivů se jedná. Byly zveřejněny studie 7,8, zabývající se vlivem objemu ablační cely na plochu píku (celkový přenos aerosolu), výšku píku (hustota aerosolu) a šířku píku (disperze signálu). Ze srovnání několika cel při ablaci vyplývá, že čím menší je objem ablační cely, tím kratší je doba nárustu signálu a vymytí cely, menší plocha a šířka píku a větší poměr signálu a pozadí, pokud jsou tyto ablace prováděny za shodných podmínek. Efektivita trasportu, s ohledem na výsledný signál, není významně odlišná pro různé cely, pokud podmínky jednotlivých ablací specificky optimalizujeme. Například optimální průtok nosného plynu je odlišný pro různé ablační cely. Hustota aerosolu přítékajícího do ICP významně závisí na objemu ablační komory. Pokud je do ICP z velké a malé cely transportováno stejné množství aerosolu, aerosol z velké cely má menší hustotu z důvodu recirkulace aerosolu uvnitř cely. Časový rozptyl signálu lineárně vzrůstá s nárůstem objemu ablační cely. 15

16 Optimalizovaná ablační cela by měla ohraničit pouze prostor, kde dochází k ablaci a zabránit jakémukoliv rozptylu aerosolu. Uvnitř cely by měl být přímý tok plynu, tzn. že linie toku plynu by se měly přímo sbíhat do vývodu plynu. Mělo by být dosaženo odvedení všeho aerosolu a zabránění kondenzaci částic. Ablační cely s velkým objemem negativně ovlivňují strukturu signálu, protože plyn uvnitř cely nesměřuje přímo k vývodu plynu. 9 V prácích byly studovány linie toku plynu uvnitř cely pomocí práškových částic rovnoměrně rozptýlených uvnitř cely. Celu můžeme pomyslně rozdělit na oblast ve tvaru kuželu s vysokou účinnosti transportu (high efficiency area, HEA) a na oblast, kde je nízká účinnost transportu (low efficiency area, LEA), a na oblast turbulencí. Pro tyto oblasti byla typická tvorba dvou protáhlých valů částic, které nebyly odstraněny ani dlouhotrvajícím proudem plynu. Tvar kužele, který vznikne vstřikem plynu, je závislý pouze na vstřikovací trysce a na průtokové rychlosti plynu, rozšiřováním komory se tak snižuje podíl HEA, protože geometrie vstřikovací trysky je řízena objemem cely. Nerovnoměrný tok v ablačních celách způsobuje rozdíly v účinnosti transportu aerosolu pro různé pozice vzorku, což vede k nerovnonoměrné citlivosti v cele. Nerovnoměrnost toku se mění přibližně od 35% v argonu k 10% v heliu, což znamená, že ablace v atmosféře helia poskytuje více stejnoměrné proudění v cele. Ve velkých celách je pozice vzorku kritická a HEA zóna poměrně zmenšená, proto se doporučuje použití více vstřikovacích trysek plynu, aby se vytvořil rovnoměrnější tok plynu uvnitř cely. Rovněž vertikální pozice vzorku vzhledem k vstřiku plynu je velmi důležitá. Velikost toku plynu ovlivňuje čas vzrůstu signálu stejně jako dobu vymytí cely. Nejhustější transport vzorku je pozorován, pokud je pozice vzorku v rovině vstupu plynu. Obr. 1 Dynamika toku plynu v kruhové ablační cele 16

17 Důležitým faktorem ablací je také míchání jednotlivých oblaků aerosolu. Tato možnost míchání nezávisí jen na opakovací rychlosti laseru, ale také na charakteristice ablační cely. Aerosol je z malých cel rychleji odstraněn, zatímco ve velkých celách častěji dochází k mísení částic z následujících pulsů laserů. Všechny tyto faktory ovlivňují stabilitu přechodného signálu a tedy přesnost měření. Přesnost měření může být také ovlivněna stabilitou průtoku plynu. Kolísání průtoku plynu může způsobit časově závislé kolísání signálu kvůli nepravidelnému transportu vzorku. Zvyšováním rychlosti průtoku plynu je minimalizováno usazování velkých částic. Komerčně dostupné jsou tzv. supercely. Geometrie a charakteristika průtoku supercel byla navržena tak, aby umožňovala rychlé vymytí aerosolu z cely se zachováním velkého formátu cely. Objem supercel je větší než cca 18,5 cm 2, ale profil vymytí cely je podobný jako celách o objemu 0,25 až 1,48 cm 2 popsané Bleinerem 7. Rychlým vymytím supercely se redukuje disperze aerosolu, omezuje se míchání jednotlivých oblaků aerosolu, zvětšuje se hustota aerosolu a tím se snižují limity detekce. 17

18 3. Speciace stopových prvků v biologických materiálech pomocí ICP MS Speciace stopových prvků v biologických materiálech je obtížná. Toto je dáno zvláště velkou různorodostí vazebných forem stopových prvků, nízkou stabilitou komplexů a ultrastopovým množstvím v organismu. Údaje o celkové koncentraci kovů v jednotlivých složkách prostředí jsou dostupnější než údaje o speciaci, protože zjištění celkové koncentrace je jednodušší a levnější. Pro speciaci kovů a jejich komplexů je často používána kombinace technik, která zahrnuje účinnou separaci spécií a prvkově selektivní detektor. Jak bylo zmíněno dříve, tyto techniky mohou být přímo propojeny, on-line (např. HPLC-ICP MS, CE-ICP MS) nebo prováděny zvlášť, off-line (PAGE- LA ICP MS). 3.1 Spojení kapalinové chromatografie (LC) a ICP MS Pro analýzu stopových prvků se v polovině 80. let otevřela možnost použití spojení LC a ICP MS. Možnost spojení LC-ICP je použití nebulizéru a mlžné komory, kde je ovšem potřeba mezi vývodem z LC kolony a nebulizérem vytvořit transportní dráhu. Toto je obvykle řešeno jednoduše použitím trubičky z inertního plastu jako je PTFE. Rozměry délka a průměr trubičky musí mít praktické minimum, obvykle cm, aby se zamezilo rozšiřování píků. Srovnáním účinnosti transportu vzorku různých mlžných komor se zabývá studie Rivas a kol. 10. Problémem při přímém propojení může být složení mobilní fáze. Přítomnost organických rozpouštědel může ovlivňovat plazmu, přítomnost solí a pufrů v mobilní fázi může ucpávat nebulizér a měnit tak citlivost. Řešením může být použití kapilární HPLC a nano-hplc a snížit tak objem použitých rozpouštědel. První studie použití ICP MS jako on-line multielementálního detektoru pro HPLC byla publikována Houkem a kol. 11 v roce Od té doby stále roste počet publikací na dané téma. Další možností je použití mikronebulizéru bez mlžné komory. Shum 12 speciálně pro spojení LC ICP vyvinul vysokoúčinné přímé vstřikování (DIN). Tento typ nebulizéru má teoreticky 100% transportí účinnost a velmi nízké průtoky ( l/min), takže ovlivnění 18

19 stability plazmy je nevýznamné. Dosud byla publikována spojení RP HPLC, SEC a IEC s ICP MS. Kapalinová chromatografie na reversní fázi (reversed phase - high performance liquid chromatography, RP HPLC) Chromatografie na reversní fázi (RP HPLC) je jedna z nejpoužívanějších módů separace v kapalinové chromatografii. Kolona obsahuje nepolární stacionární fázi (obvykle C 18 nebo C 8 ) a mobilní fáze je polární. Běžně se používá vodná mobilní fáze obsahující různé procento organického rozpouštědla (methanol, ethanol, acetonitril, atd.), avšak použití vysokého obsahu organických sloučenin může rušit stabilitu plazmového výboje. Výhodou použití RPC je jednoduchost metody. C 18 a C 8 jsou stabilní a dobře charakterizované náplně. Při separaci je potřeba dodržovat ph vyšší než 7,5, protože nižší ph může způsobit hydrolýzu siloxanové stacionární fáze. Ke kontrole ph se používají roztoky pufrů, jako je acetát nebo fosfát, nicméně jejich přídavek do mobilní fáze musí být minimální, aby se předešlo ucpávání vstupního otvoru ICP MS. Spojení RP HPLC-ICP MS je široce používané pro analýzu různých vzorků Často používanou variací RP HPLC je ion-pair chromatografie (IPC) a micelární chromatografie (MLC) Vylučovací chromatografie (size - exclusion chromatography, SEC) SEC je používaná k separaci molekul podle jejich efektivní velikosti a také podle tvaru. Jako mobilní fáze se v SEC používá celé řady pufrů. Výhodou metody je vysoká tolerance k biologickým matricím a mechanismus separace je zvláště vhodný pro separaci velkých proteinů a polypeptidů. Hlavní výhodou SEC je vztah mezi retenčním časem a hmotností molekuly, který může být použit k předpovězení typu spojení mezi kovem a molekulou. Ovšem malý počet teoretických pater vede ke relativně nízkému rozlišení, takže každá frakce může obsahovat ještě stovky různých sloučenin a tak je v mnoha případech je proto nutná doplňující separační techika. Spojení SEC-ICP MS bylo použito také pro analýzu kovových komplexů Omezením SEC-ICP MS pro prvkovou speciaci je vysoký obsah solí (např. NaCl) v některých mobilních fázích, které mohou ucpat nebulizér. 19

20 Iontově výměnná chromatografie (ion exchange chromatography, IEC) IEC je založena na interakci nabitého analytu s nabitými funkčními skupinami stacionární fáze. Separace je výrazně ovlivněna hodnotou ph mobilní fáze. Mobilní fáze jsou vodné roztoky solí často s přídavkem organického rozpouštědla jako je methanol nebo acetonitril. Většina separací IEC používá gradientovou eluci a tyto změny ve složení mobilní fáze v průběhu analýzy IEC-ICP MS mohou vést ke změnám pozadí nebo citlivosti. Dalším omezením spojení s ICP MS je koncentrace pufrů používaných v IEC, který bývá obvykle okolo 0,1 M. 3.2 Spojení elektroforézy v polyakrylamidovém gelu (PAGE), laserové ablace (LA) a ICP MS Polyakrylamidová gelová elektroforéza (PAGE) je rutinní vysokoúčinná technika pro separaci proteinů. PAGE je používaná jako jednodimensionální (1D) nebo dvoudimensionální (2D), vzorky jsou nejprve separovány na základě jejich izoelektrického bodu (izoelektrická fokusace) a poté podle jejich molekulové hmotnosti v prostředí dodecylsulfátu sodného (SDS). Ovšem separace nekovalentně vázaných spécií (komplexy kovů a proteinů) vyžadují nedenaturující podmínky a přítomnost SDS nebo vysokého napětí často vede ke ztrátě kovu. Spojení PAGE-LA ICP MS je atraktivní metodou pro vzorkování proteinových skvrn pro přítomnost prvku, který se ionizuje v ICP. Je založena na ablaci analytu laserovým paprskem, který je veden přes povrch gelu. Ablatovaný analyt je unášen stálým proudem argonu do ICP a ionty jsou analyzovány pomocí MS. LA eliminuje potřebu vyříznutí a vyluhování proteinu z gelu, což bývá důležitým zdrojem kontaminace. Nicméně komerčně běžně dodávané gely nejsou určeny pro stopovou a ultrastopovou analýzu a tak mohou být samy kontaminovány. Problémem při ablaci gelů může být ablatování pouze vrchní vrstvy a tím zhoršení detekčních limitů. Souhrná rešerše speciace komlexů proteinů a stopových prvků pomocí PAGE MS je v práci Ma a kol. 21. Přikladem je Neilsen s kol. 22, kteří použili pro stanovení kobaltu 2D IEF a LA s Nd:YAG laseru (1064 nm) ve spojení s kvadrupólovým MS, a dosáhl detekčních limitů 8,2 g/ml. Pomocí PAGE-LA ICP MS Binet s kol. 23 provedli analýzu Zn, Cd a S v E. Coli. 20

21 3.3 Spojení kapilární elektroforézy (CE) a ICP MS Výhodami separace pomocí kapilární elektroforézy je rychlost analýzy, vysoká účinnost, nízká spotřeba chemikálií a dávkovaných vzorků. Ve spojení s ICP MS jako specifického detektoru je dosaženo velmi nízkých limitů. Předpokladem úspěšného spojení dvou technik jako je CE a ICP je vhodně konstruovaný interface. Hlavní požadavky pro spojení obou technik je uzavření elektrického obvodu z CE a přizpůsobení průtokové rychlosti elektroosmotického toku v kapiláře průtokové rychlosti nebulizéru a zajištění, aby sání nebulizéru neindukovalo hydrodynamický tok v kapiláře. Laminární tok je v CE nežádoucí, avšak pneumatické nebulizéry přirozeně produkují sání, což může indukovat laminární proudění a tím znehodnocovat elektroforetické rozlišení. Pro úspěšné spojení CE a ICP MS je tedy nutné zamezit efektu sání. Lu a kol. 24 použili nasávání elektrolytu/pufru z reservoaru, aby zamezili sání produkované nebulizérem. Kinzer a kol. 25 využili variabilní tok, aby vytvořili zpětný tlak v trubičce nebulizéru a tím kontrolovali směr a velikost laminárního toku. Byly testovány standartní i různě modifikované nebulizéry, které nevykazují sací efekt. Uzavření elektrického obvodu bylo většinou řešeno pomocí přídavné kapaliny. Rychlost zavádění vzorku do ICP je typicky ~ 1 ml/min, ovšem méně než 2% vytvořeného aerosolu je transportováno do ICP. Proto aerosol produkovaný z vytékající kapiláry musí být efektivně transportován do ICP, aby se zamezilo poklesům citlivosti. Ideální nebulizér by měl udržovat stabilní rozprašování, vyrovnanou průtokovou rychlost, 100% - ní transportní ůčinnost a tím maximální citlivost. Olesik a kol. 26 vyvinul spojení CE s koncentrickým pneumatickým nebulizérem. Konec kapiláry byl pokryt stříbrným nátěrem, který má dvě funkce. Zaprvé vodivá stříbrná vrstva umožňovala spojení mezi roztokem ve špičce kapiláry a zemí a zadruhé tloušťka vrstvy stříbrného nátěru byla kontrolována, takže konec pokryté kapiláry přesně zapadl do středu koncentrického pneumatického nebulizéru. Nicméně musela být použita široká kapilára, aby se dosáhlo dostatečné citlivosti. Interface CE-ICP MS byl testován a optimalizován na speciaci As, Sr, Sn, Cr, Co a Li. Limity detekce byly 0,001 ppb pro Sr a Co, 0,001-0,01 ppb pro As and Sn a 0,01-0,1 ppb pro Cr a Li. Ve srovnání s použitím standardního nebulizéru a mlžné komory byly tyto limity detekce 21

22 6-200 krát nižší. Obr. 2 Spojení CE-ICP MS vyvinuté Olesikem a kol. 26 Liu a kol. 24 použili jako spojení CE-ICP MS vysokoúčinné přímé vstřikování (DIN), které se vyznačuje 100% - ní transportní účiností a malými průtoky (~ l). Spojení bylo uskutečněno speciálně vyrobeným třícestným kohoutem, přes který byla vložena kapilára, platinová uzemňující elektroda a přídavná kapalina, která měla za úkol ukončovat elektrický obvod. Detekční limity pro různé kovy byly v rozmezí ppt až ppb. Modifikovaný koncentrický nebulizér jako interface pro CE-ICP MS byl použit ve studii Lu a kol. 27. Pro propojení CE systému k ICP MS byla použita přídavná kapalina. Byly testovány různé pozice CE kapiláry, které ovlivňují intenzitu signálu, rozlišení, migrační čas. Pro charakterizaci interface byly použity isoformy metallothioneninu a ferritin, jejichž detekční limity byly v méně než pg. V další práci Olesika a Kinzera 25 je rozebírán vliv laminárního toku na dobu analýzy, šířku a asymetrii píků a elektroforetické rozlišení. Byl použit jak HEN (high efficiency nebulizer) tak koncentrický nebulizér. Jako vhodnější se jeví použití HEN, který má nižší rychlosti průtoku, což zvyšuje efektivitu transportu aerosolu a předchází vzniku laminárního proudění. Ultrazvukový nebulizér (USN) pro spojení CE-ICP MS byl poprvé použit v práci Lu a kol. 28. Interface byl testován na formách metalothioneinů. Dalším použitím USN nebulizérů ve spojení s CE se zabývá Kirlew

23 V úvodní studii Michalkeho a Schramela 30 byl použit Mainhardův nebulizér jako interface pro ICP MS. Spojení není dostatečně podrobně popsáno, avšak koaxiálně proudící kapalina zajišťuje elektrické spojení a autoři také uvádějí, že nebyl zpozorován sací efekt nebulizéru. Tato metoda byla použita pro analýzu sloučenin selenu. Srovnání spojení HPLC-ICP MS a CE-ICP MS je v práci Lustiga 31. Analýza specií platiny pomocí HPLC-ICP MS ukázala detekční limit okolo 25 ng Pt/l, což bylo 40krát méně než pomocí CE-ICP MS. Na druhé straně velkou výhodou CE-ICP MS bylo velmi vysoké rozlišení separace. Srovnání dvou interface, využívajících koncentrického nebulizéru a standartního pravoúhlého nebulizéru (cross-flow nebulizer, CFN), je uvedeno v práci Majidi et al. 32. Obě rozhraní byla testována na metalothioneinech. Pro koncentrický nebulizér byl limit detekce pro Cd 2,36 g/ml, zatímco pro CFN byl 0,21 g/ml. Pro koncentrický nebulizér jsou kritickými parametry poloha kapiláry vzhledem k nebulizéru, objem mlžné komory, průtok přídavné kapaliny a povrchové napětí elektrolytu. Tangen a kol. 33 vyvinul nový DIN s průtokem 1 15 l/min. Vhodnost spojení byla ověřována na Cr(III) a instrumentální limit detekce byl 10 g/l. Od roku 2000 bylo publikováno mnoho dalších pracích, kde byly nejčastěji používány komerčně dostupné nebulizéry, které byly různě modifikovány. Nejčastěji je využíván mikrokoncentrický nebulizér (MCN) dále pak vysokoúčinný nebulizér (HEN), DIHEN 37, které byly testovány v několika pracích. Souhrný přehled testovaných nebulizéru je uveden v tabulce II. 23

24 Tab. II Přehled testovaných nebulizérů pro CE-ICP MS Typ nebulizéru Rychlost Účinnost průtoku vzorku nebulizéru (ml/min) Reference Koncentrický/cross flow nebulizér 0, % 26, 27, 31, USN 0,5 2,5 ~ 20% 28, 29 HEN 0, % 25, 41, 42 DIN 0,1 ~ 100% 24, 33, 43 DIHEN 0,085 ~ 100% 40 MCN 100* 0,01 ~ 100% 36, 44, 45 CEI 100* 0,006 ~ 100% 34 *Komerčně dostupné interface CE ICP MS (Perkin Elmer) 24

25 4. Volba modelového systému Pro charakterizaci námi navrženého off-line CE-LD ICP MS byly vybrány sloučeniny trojmocného a šestimocného chromu. Vhodnost tohoto systému pro charakterizaci je zejména v jednoduchosti a dostupnosti sloučenin Cr +III a Cr +VI. 4.1 Chrom Chrom se vyskytuje ve všech oxidačních stavech od 2 do +6, ale běžné stavy jsou pouze 0 (kovový chrom), 2+, 3+ a 6+. Ve sloučeninách je nejstálejší v oxidačním stavu Cr +III, zatímco sloučeniny Cr +VI mají silné oxidační účinky. Cr +III patří mezi esenciální stopové prvky, které se účastní metabolismu savců. Zvyšuje účinnost insulínu a pomáhá tak udržovat metabolizmus glukózy, cholesterolu a tuků. Nedostatek Cr +III může vyvolat únavu, stres a snížení schopnosti těla odstraňovat glukózu z krve. Trojmocný chrom se v roztoku nachází jako volný iont při ph < 5,5, při ph 5,5 až 6 se začíná srážet na hydroxidy. Sloučeniny Cr +VI jsou výrazně toxičtější než Cr +III, nepříznivé účinky má i krátkodobý lokální kontakt, např. při dotyku vznikají vředy na kůži, podráždění nosní sliznice, podráždění trávicího ústrojí. Šestimocný chrom je také klasifikován jako lidský karcinogen, způsobující rakovinu plic. Prakticky se se sloučeninami Cr +VI setkáme jako se solemi kyseliny chromové, chromany (CrO 4 ) 2- nebo kyseliny dichromové, dichromany (Cr 2 O 7 ) 2-. Chromany a dichromany v roztocích mohou navzájem přecházet mezi sebou v závislosti na ph prostředí. Přitom platí, že chromany jsou stálé v alkalickém prostředí a mají obvykle žlutou barvu. Dichromany jsou oranžové a jsou stabilní v kyselém ph. Rozdíl ve vlastnostech mezi chromem v obou oxidačních stavech (+III a +VI) je značný, tudíž je potřeba analytických metod, které jsou schopny Cr +III a Cr VI+ analyzovat v obou jejich oxidačních stavech nezávisle, tj. poskytnout tak informace o obsahu jednotlivých forem chromu v analyzovaném materiálu. Mezi běžně používané metody stanovení forem chromu patří vhodná prekoncentrace a separace a následná detekce pomocí atomové spektrometrie nebo spektrofotometrie. Zřejmě nejvíce postupů bylo vyvinuto pro atomovou spektrometrii, studie zabývající se analýzou forem chromu ve vodách byly založeny na on-line prekoncentraci na pevném nosiči a následné detekce pomocí FAAS, ETAAS nebo emisní spektrometrie Pro 25

26 on-line prekoncentraci byla využívána aktivovaná alumina, IEC, RP HPLC (C18) v kombinaci s komplexními činidly, komplexace následována adsorpcí, polymerický modifikovaný sorbent apod. Rozsah detekčních limitů byl mezi 4,2 pg/ml až 250 ng/ml. Obr. 3 Používané analytické metody pro stanovení Cr (převzato z ref. 51) Obr. 4 Množství publikovaných studií stanovení chromu rozdělených podle jeho specií (převzato z ref. 51) V poslední době se pro stanovení chromu také používá spojení kapalinové chromatografie a hmotnostní spektrometrie s indukčně vázaným plazmatem 52,53. Komplikací detekce chromu hmotnostní spektrometrií jsou spektrální interference. Přirozeně se chrom vyskytuje ve třech stabilních isotopech 52, 53 a 54, které jsou v 26

27 přírodě zastoupeny 83,8%; 9,5% a 2,4%. Další isotopy chromu jsou mají hmotnosti od 42 do 67, jsou však nestabilní s velmi malým poločasem rozpadu. Vyjimkou je isotop o hmotnosti 50, jehož poločas rozpadu je větší než 1,8x10 17 let a v přírodě je zastoupen 4,3%. V MS jsou nejčastěji sledovány isotopy 52 a 53 a jejich možné interference jsou uvedeny v tabulce III. Tyto interference mohou být odstraněny použitím rozpouštědla, které neobsahuje prvek způsobují interference, použitím kolizních/reakčních cel nebo matematickou korekcí 54. Tab. III Možné spektrální interference izotopů chromu 52 a 53 Hmotnost (a.u.m) uhlík 40 Ar 12 C + 40 Ar 13 C + chlor 35 Cl 16 OH + 37 Cl 16 O + síra 36 S 16 O + 36 S 16 OH + 27

28 IV. Experimentální část 5. Použité chemikálie Chrom, Nikl, Cín, Měď, Zinek - definovány jako certifikovaný referenční materiál ve vodném roztoku (99.99 %, Analytika, Česká Republika) Chroman draselný K 2 CrO 4 (Lachema, Česká Republika) Dichroman draselný K 2 Cr 2 O 7 (Lachema, Česká Republika) Dusičnan chromitý Cr(NO 3 ) 3 (Lachema, Česká Republika) Dihydrogenfosforečnan sodný NaH 2 PO 4.2H 2 O (Lachema, Česká Republika) Chymotrypsinogen (Sigma-Aldrich, Německo) Síran měďnatý CuSO 4 (Lachema, Česká Republika) Rhodamin B (Sigma-Aldrich, Německo) Hydroxid sodný NaOH (98 %, Merci, Česká Republika) Kyselina chlorovodíková HCl (37 %, Lachema, Česká Republika) Kyselina trichloroctová TCA (99 %, Sigma-Aldrich, Německo) Tetraethyltiuram disulfid DSF (97%, Sigma-Aldrich, Německo) Dimetyl sulfoxid DMSO (99,9%, Sigma-Aldrich, Německo) Kyselina dusičná HNO 3 (65% Analytika, Česká Republika) Kyselina mravenčí HCOOH (98 %, Riedel-de Haën, Německo) EDTA (99.5 %, Lachema, Česká Republika) Pro přípravu všech roztoků byla použita voda redestilovana v křemenné aparatuře od firmy Haraeus (Německo). 28

29 6. Přístroje a vybavení 6.1 Ablační systém Pro ablaci/desorpci byl použit ablační systém UP-213 (New Wave, USA), zobrazený na obrázku 5, s laserem Nd:YAG emitujícím záření o vlnové délce 213 nm, s opakovací frekvencí 10 Hz a délkou pulsu 4,2 ns. Laserový paprsek byl zaostřen na povrch vzorku pomocí clon a velikost ozářené plochy byla 300 m. Ablační cela (Supercell, objem 10 cm 3 ) umožňuje pohyb vzorku během laserové ablace. V případě pohybu ablační cely byla rychlost pohybu 100 m/s pokud není uvedeno jinak. Aerosol vzorku byl transportován nosným plynem He o průtoku 1 l/min. Obr. 5 Ablační systém UP ICP MS Aerosol vzorku byl zaváděn do hmotnostního spektrometru ICP MS Agilent 7500 (Agilent Technologies, USA), který je zobrazen na obrázku 6. Před každým měřením byly podmínky optimalizovány pomocí standardu skla NIST 612 tak, aby bylo dosaženo maximálních intenzit na sledovaných isotopech a současně aby byla potlačena tvorba dvojnásobně nabitých iontů. V tabulce IV Jsou uvedeny typicky používané podmínky LA ICP MS. Pokud není uvedeno jinak, byla integrační doba signálu 0,1 s. 29

30 Tab. IV Typicky používané podmínky LA ICP MS Výkon generátoru Odražený výkon Hloubka vzorkování Pohyb hlavice horizontálně Pohyb hlavice vertikálně Extrakční čočky 1 Extrakční čočky 2 Omega bias Omega čočky Napětí na vstupu Napětí na výstupu 1390 W 1,78 V 8 mm 0 mm 0 mm 3,4 V -120,5 V - 14 V 1,2 V - 26 V - 44 V Obr. 6 ICP MS Agilent

31 Vyhodnocování výsledků Výsledky byly vyhodnoceny v programu Microsoft Office Excel V každém experimentu byl zároveň sledován signál nosiče bez naneseného analytu nebo slepý vzorek. Plocha píku byla počítána jako suma intenzit všech signálů jednoho píku (dále jen integrovaný signál). Od každého vzorku byl odečten průměrný integrovaný signál slepého vzorku nebo samotného nosiče. Stanovení vzorku probíhalo na minimálně 5 vzorcích, ze kterých byly vyloučeny odlehlé výsledky (Dean-Dixonův test při hladině významnosti α = 0,05), spočítán aritmetický průměr, SD a RSD. V kalibračních přímkách byla vždy testována významnost úseku na ose y a pokud byl úsek nevýznamný, byla přímka proložena nulou. 31

32 7. Nosič vzorku Materiál, povrch a hydrofoboní/hydrofilní vlastnosti nosiče ovlivňuje tvar, velikost a homogenitu nanesených kapek vzorku, proto bylo potřeba najít vhodný substrát. Ideálně by měl materiál nosiče obsahovat co nejmenší počet prvků, především analyzovaných kovů. Nanesené kapky by měly tvořit souvislou vrstvu drobných krystalů analytů, velikost kapek po odpaření rozpouštědla by měla být co nejmenší a tvar i velikost kapek by měly být pro všechny kapky stejné. Rozměry nosiče byly upraveny podle tvaru ablační cely na 5,0 2,7 cm. 7.1 Čistota nosiče Kovy a jejich slitiny V CE MALDI MS jsou jako nosiče vzorků používány ocelové destičky, proto byly jako první testovány kovy a jejich slitiny. S ohledem na co nejmenší zastoupení prvků ve slitině byly testovány AlNi; Al 99,5%; AlMg3; Cu. Abychom zjistili, zda vybrané kovy neobsahují stopy chromu byly kovové destičky bez nanesených vzorků analyzovány pomocí LA ICP MS. Trajektorie pohybu ablační cely je vidět na obr. 7, tento pohyb rychlostí 100 m/s trval 20 s. Hustota zářivého výkonu laseru byla 60 MW/cm 2. cca 500 m Obr. 7 Tvar rastru při analýze kovových destiček pomocí LA ICP MS 32

33 2500 Intenzita ICP MS [counts] Čas [s] Obr. 8 Časový záznam LA ICP MS pro m = 52 a.m.u. povrchu destiček AlNi (----) a Cu ( ); šipkama je označen čas sepnutí a vypnutí laseru V průběhu 35 s byla zaznamenávána intenzita signálu pro hmotnosti 52 a.m.u. a 53 a.m.u.. Na obr. 8 je vidět výrazný vzrůst intenzity signálu odpovídající isotopu 52 Cr pro destičky AlNi a Cu, takže chrom zřejmě obsahují. Šipkami je na obr. 8 a 9 označen čas sepnutí a vypnutí laseru. Na obr. 8 je patrný signál i po vypnutí laseru, toto zpoždění signálu je způsobeno transportem aerosolu z ablační cely do ICP a vymyváním ablační cely. 33

34 Intenzita ICP MS [counts] Čas [s] Obr. 9 Časový záznam LA ICP MS pro m = 52 a.m.u. povrchu destiček Al ( ) a AlMg (----); šipkami je označen čas sepnutí a vypnutí laseru Nepatrný vzrůst intenzity signálu byl pozorován i při analýze destiček Al a AlMg (obr. 9). V těchto slitinách se tedy také nachází stopová množství chromu a nehodí se jako substrát. Povrch všech kovových destiček byl ablatován, na povrchu byla patrná stopa po působení laserového paprsku. Sklo Za stejných podmínek byl proveden experiment na dalším testovaném materiálu, skle. Jako nosič bylo použito podložní sklíčko (Evona-Medica, s.r.o., Česká Republika). Používané energie laseru nebyly dostatečné k ablaci skla a proto nelze zjistit, zda je sklo znečištěno sledovanými prvky. Výhodou skla by tak mohlo být opakovaté použití jednoho nosiče, protože nedochází k destrukci povrchové vrstvy skla. 34

35 Plasty Široké spektrum možných nosičů vzorků nabízí skupina plastů. Pro testování byly vybrány plasty uvedené v tabulce V. Předpoklad pro další využití LD ICP MS je analýza různých kovů, proto je potřeba najít substrát, ve kterém je přítomno co nejméně kovů. Tab. V Souhrn plastů používaných jako nosiče vzorků Materiál Značka Povrch Výrobce Polyester PETG Vivak Lesklý, hladký BayerSheet, Německo Polyester A-PET Axpet Lesklý, hladký BayerSheet, Německo Polypropylen PP -- Matný, zrnitý Rochling, Německo Polypropylen PP-E Evacast Matný, hladký Rochling, Německo Polyvinylchlorid PVC -- Matný, hladký EVC, Velká Británie Polyvinylchlorid PVC-V Vikunyl Lesklý, hladký EVC, Velká Británie Lehčený polyvinylchlorid PVC-L Vikupor Matný, zrnitý Rochling, Německo Následující experiment byl proveden za účelem zjistit, zda jsou ve vybraných plastech obsaženy kovy. Laserový paprsek o průměru 300 m byl zaměřen na plochu vzorku, kde setrval 4 s. Hustota zářivého výkonu laseru byla 70 MW/cm 2 a doba výplachu cely byla 5 s. Barvy v tabulce VI označují intenzitu signálu. Bílá barva znamená, že plast daný kov neobsahuje nebo obsahuje v zanedbatelném množství; všechny odstíny šedé znamenají, že obsahují kovy nebo je přítomen interferent. U všech kovů mimo monoisotopického kobaltu byly monitorovány dva jejich isotopy s nejvyšším přirozeným zastoupením. Pokud by plast daný kov obsahoval, byl by zaznamenán signál u obou isotopů, v opačném případě vzrůst pouze jednoho z monitorovaných m/z pro daný prvek způsobuje interferent. 35

36 Tab. VI Intenzity signálu při LA ICP MS jednotlivých plastů Plast A-PET PP PVC-L PP-E PVC PVC-V PETG P 31 Cr 52 Cr 53 Fe 56 Fe 57 Co 59 Ni 60 Ni 62 Cu 63 Cu 65 Zn 66 Zn 68 Cd 112 Cd 114 Sn 118 Sn 120 Pb 206 Pb 208 Výška píku do 1000 [cps] Výška píku [cps] Výška píku [cps] Výška píku 5000 a více [cps] V ideálním případě by vhodný plastový nosič neměl obsahovat žádné kovy. Plast PP obsahuje většinu sledovaných kovů, proto je jako nosič zcela nevhodný. V plastu PVC- L byl zjištěn vysoký obsah zinku. Stejně tak plast PVC je znečištěn zinkem a navíc i kadmiem a cínem, které by v budoucnu mohly být také stanovovány. A PET obsahuje 36

37 pouze kobalt, stejně tak PETG a proto budou dale testovány jako možné nosiče vzorku. Jako nejvhodnější substrát se jeví PVC-V, který neobsahuje kovy žádné. Pro další testování byl take vybrán PP-E a to z důvodu jen mírného znečištění zinkem. Z tabulky VI je dále patrné, že testované plasty neobsahují chrom, ale zaznamenaná intenzita signálu je způsobena přítomností interferentu 40 Ar 12 C +. Stejně tak intenzita signálu u isotopu 56 Fe je způsobená přitomností 40 Ar 16 O +. Z dalšího testování byly z důvodu znečištění kovy vyloučeny plasty PP, PVC-L a PVC. Na plasty A-PET, PETG, PVC-V a PP-E budou nanášeny vzorky a sledována jejich morfologie. 7.2 Morfologie nanesených vzorků Faktory, podle kterých byl vybírán vhodný material nosiče vzorku, jsou velikost nanesené kapky vzorku po odpaření, morfologie vzorku a reprodukovatelnost nanesených kapek vzorku. Velikost kapky je důležitá, protože podle velikosti naneseného vzorku se volí buď skenování laserovými pulsy přes plochu naneseného vzorku nebo zaměření laserového paprsku do středu naneseného vzorku. V kvantitaviní analýze lze zaměření laseru do středu skvrny zvolit pouze pokud je velikost průměru kapky po odpaření rozpouštědla do cca 300 m, což je maximální velikost rozostření laserového paprsku. V případě kapek o větším průměru je třeba zvolit některý z typů rastrů, což ovšem znamená delší dobu analýzy. Po odpaření rozpouštědla by ideálně měly kapky vytvořit rovnoměrnou homogenní vrstvu krystalů nebo amorfní film. Kovy a jejich slitiny Nanesené vzorky vodného roztoku K 2 CrO 4 (c = 10 M) o objemu 100 nl v subatmosferické komoře na kovové destičky vytvořily po odpaření rozpouštědla kruhové skvrny o průměru cca 900 m. Morfologie vzorku nebyla kvůli povrchu destičky zřetelná, zřetelné byly pouze okraje skvrny. Protože kovové destičky chrom obsahují a vytvořené kapky nemají vhodnou morfologii, byly tyto materiály z dalšího testování vyloučeny jako nevhodné nosiče vzorku pro LA ICP MS. 37

38 Sklo Na skleněnou destičku byly naneseny kapky vodného roztoku Cr(NO 3 ) 3 o objemu 100 nl a koncentraci 200 M v subatmosférické komoře. Vzniklé skvrny měly nepravidelný tvar, jejich průměr se pohyboval od cca 400 m do 600 m a tvořily homogenní vrstvu krystalů. Na obrázku 10 jsou ukázány dva z vzorků nanesených na sklo. Obr. 10 Vzorky Cr(NO 3 ) 3 (V = 100 nl, c = 200 M) nanesené na sklo po odpaření rozpouštědla Plasty Za stejných podmínek jako na skleněnou destičku byly naneseny kapky analytu na na plasty A-PET, PP-E, PVC-V a PETG. Vzorky po odpaření rozpouštědla na plastu PP-E vytvářely velké (průměr cca 1000 m) a kvůli zdrsněnému povrchu nezřetelné skvrny (na obr. 12), proto byl tento plast z dalšího testování vyloučen. Na plastu A-PET se vytvářely kapky o různém průměru; od cca do 250 m do 600 m (obr. 11). Morfologie vzorků na plastu A-PET nebyla kvůli zvrásněnému povrchu plastu zřetelná. Na plastech PVC-V (obr. 13) a PETG (obr. 14) vznikaly kruhové skvrny o průměru cca 350 m se souvislou vrstvou krystalů. V dalších experimentech byly vzorky nanesené na PETG menší, obvykle měly průměr 200 m. PETG je skladován v navinutých rolích a to někdy způsobuje mírné popraskání povrchu plastu, patrné jako svislé rýhy na obr

Klinická a farmaceutická analýza. Petr Kozlík Katedra analytické chemie

Klinická a farmaceutická analýza. Petr Kozlík Katedra analytické chemie Klinická a farmaceutická analýza Petr Kozlík Katedra analytické chemie e-mail: kozlik@natur.cuni.cz http://web.natur.cuni.cz/~kozlik/ 1 Spojení separačních technik s hmotnostní spektrometrem Separační

Více

Hmotnostní spektrometrie

Hmotnostní spektrometrie Hmotnostní spektrometrie Princip: 1. Ze vzorku jsou tvořeny ionty na úrovni molekul, nebo jejich zlomků (fragmentů), nebo až volných atomů dodáváním energie, např. uvolnění atomů ze vzorku nebo přímo rozštěpení

Více

ANORGANICKÁ HMOTNOSTNÍ SPEKTROMETRIE

ANORGANICKÁ HMOTNOSTNÍ SPEKTROMETRIE ANORGANICKÁ HMOTNOSTNÍ SPEKTROMETRIE (c) David MILDE 2003-2010 Metody anorganické MS ICP-MS hmotnostní spektrometrie s indukčně vázaným plazmatem, GD-MS spojení doutnavého výboje s MS, SIMS hmotnostní

Více

Příprava materiálu byla podpořena projektem OPPA č. CZ.2.17/3.1.00/33253

Příprava materiálu byla podpořena projektem OPPA č. CZ.2.17/3.1.00/33253 Příprava materiálu byla podpořena projektem OPPA č. CZ.2.17/3.1.00/33253 Část 16 Iontová chromatografie Iontová chromatografie je speciální technika vyvinutá pro separaci anorganických iontů a organických

Více

VYUŽITÍ TEPELNÉHO ZMLŽOVAČE V AAS

VYUŽITÍ TEPELNÉHO ZMLŽOVAČE V AAS 1 VYUŽITÍ TEPELNÉHO ZMLŽOVAČE V AAS JAN KNÁPEK Katedra analytické chemie, Přírodovědecká fakulta MU, Kotlářská 2, Brno 611 37 Obsah 1. Úvod 2. Tepelný zmlžovač 2.1 Princip 2.2 Konstrukce 2.3 Optimalizace

Více

Evropský sociální fond Praha & EU: Investujeme do vaší budoucnosti ELEKTROMIGRAČNÍ METODY

Evropský sociální fond Praha & EU: Investujeme do vaší budoucnosti ELEKTROMIGRAČNÍ METODY Evropský sociální fond Praha & EU: Investujeme do vaší budoucnosti ELEKTROMIGRAČNÍ METODY ELEKTROFORÉZA K čemu to je? kritérium čistoty preparátu stanovení molekulové hmotnosti makromolekul stanovení izoelektrického

Více

Průtokové metody (Kontinuální měření v proudu kapaliny)

Průtokové metody (Kontinuální měření v proudu kapaliny) Průtokové metody (Kontinuální měření v proudu kapaliny) 1. Přímé měření: analyzovaná kapalina většinou odvětvena + vhodný detektor 2. Kapalinová chromatografie (HPLC) Stanovení po předchozí separaci 3.

Více

HMOTNOSTNÍ SPEKTROMETRIE - kvalitativní i kvantitativní detekce v GC a LC - pyrolýzní hmotnostní spektrometrie - analýza polutantů v životním

HMOTNOSTNÍ SPEKTROMETRIE - kvalitativní i kvantitativní detekce v GC a LC - pyrolýzní hmotnostní spektrometrie - analýza polutantů v životním HMOTNOSTNÍ SPEKTROMETRIE - kvalitativní i kvantitativní detekce v GC a LC - pyrolýzní hmotnostní spektrometrie - analýza polutantů v životním prostředí - farmakokinetické studie - kvantifikace proteinů

Více

Ultrastopová laboratoř České geologické služby

Ultrastopová laboratoř České geologické služby Ultrastopová laboratoř České geologické služby Jitka Míková Česká geologická služba Praha - Barrandov Laboratorní koloběh Zadavatel TIMS Analýza vzorku Vojtěch Erban Jakub Trubač Lukáš Ackerman Jitka Míková

Více

Radiační odstraňování vybraných kontaminantů z podzemních a odpadních vod

Radiační odstraňování vybraných kontaminantů z podzemních a odpadních vod Radiační odstraňování vybraných kontaminantů z podzemních a odpadních vod Václav Čuba, Viliam Múčka, Milan Pospíšil, Rostislav Silber ČVUT v Praze Centrum pro radiochemii a radiační chemii Fakulta jaderná

Více

Porovnání metod atomové spektrometrie

Porovnání metod atomové spektrometrie Porovnání metod atomové spektrometrie ACH/APAS David MILDE, 2017 Úvod Metody našeho zájmu: plamenová atomizace v AAS (FA-AAS) elektrotermická atomizace v AAS (ETA-AAS, GF-AAS) ICP-OES ICP-MS Výhody a nevýhody

Více

V organismu se bílkoviny nedají nahradit žádnými jinými sloučeninami, jen jako zdroj energie je mohou nahradit sacharidy a lipidy.

V organismu se bílkoviny nedají nahradit žádnými jinými sloučeninami, jen jako zdroj energie je mohou nahradit sacharidy a lipidy. BÍLKOVINY Bílkoviny jsou biomakromolekulární látky, které se skládají z velkého počtu aminokyselinových zbytků. Vytvářejí látkový základ života všech organismů. V tkáních vyšších organismů a člověka je

Více

Aplikace AAS ACH/APAS. David MILDE, Úvod

Aplikace AAS ACH/APAS. David MILDE, Úvod Aplikace AAS ACH/APAS David MILDE, 2017 Úvod AAS: v podstatě 4atomizační techniky: plamenová atomizace (FA), elektrotermická atomizace (ETA), generování těkavých hydridů (HG), určené pro stanovení As,

Více

LABORATOŘ OBORU I ÚSTAV ORGANICKÉ TECHNOLOGIE (111) Použití GC-MS spektrometrie

LABORATOŘ OBORU I ÚSTAV ORGANICKÉ TECHNOLOGIE (111) Použití GC-MS spektrometrie LABORATOŘ OBORU I ÚSTAV ORGANICKÉ TECHNOLOGIE (111) C Použití GC-MS spektrometrie Vedoucí práce: Doc. Ing. Petr Kačer, Ph.D., Ing. Kamila Syslová Umístění práce: laboratoř 79 Použití GC-MS spektrometrie

Více

Jednotné pracovní postupy zkoušení krmiv STANOVENÍ OBSAHU SELENU METODOU ICP-OES

Jednotné pracovní postupy zkoušení krmiv STANOVENÍ OBSAHU SELENU METODOU ICP-OES Strana 1 STANOVENÍ OBSAHU SELENU METODOU ICP-OES 1 Rozsah a účel Postup specifikuje podmínky pro stanovení celkového obsahu selenu v minerálních krmivech a premixech metodou optické emisní spektrometrie

Více

Úvod do biochemie. Vypracoval: RNDr. Milan Zimpl, Ph.D.

Úvod do biochemie. Vypracoval: RNDr. Milan Zimpl, Ph.D. Úvod do biochemie Vypracoval: RNDr. Milan Zimpl, Ph.D. TENTO PROJEKT JE SPOLUFINANCOVÁN EVROPSKÝM SOCIÁLNÍM FONDEM A STÁTNÍM ROZPOČTEM ČESKÉ REPUBLIKY Co je to biochemie? Biochemie je chemií živých soustav.

Více

Elektrochemický potenciál Standardní vodíková elektroda Oxidačně-redukční potenciály

Elektrochemický potenciál Standardní vodíková elektroda Oxidačně-redukční potenciály Elektrochemický potenciál Standardní vodíková elektroda Oxidačně-redukční potenciály Elektrochemie rovnováhy a děje v soustavách nesoucích elektrický náboj Krystal kovu ponořený do destilované vody + +

Více

10. Tandemová hmotnostní spektrometrie. Princip tandemové hmotnostní spektrometrie

10. Tandemová hmotnostní spektrometrie. Princip tandemové hmotnostní spektrometrie 10. Tandemová hmotnostní spektrometrie Princip tandemové hmotnostní spektrometrie Informace získávané při tandemové hmotnostní spektrometrii Možné způsoby uspořádání tandemové HS a/ scan fragmentů vzniklých

Více

J. Kubíček FSI Brno 2018

J. Kubíček FSI Brno 2018 J. Kubíček FSI Brno 2018 Fosfátování je povrchová úprava, kdy se na povrch povlakovaného kovu vylučují nerozpustné fosforečnany. Povlak vzniká reakcí iontů z pracovní lázně s ionty rozpuštěnými z povrchu

Více

REGISTR KONTAMINOVANÝCH PLOCH

REGISTR KONTAMINOVANÝCH PLOCH REGISTR KONTAMINOVANÝCH PLOCH Podle zákona č. 156/1998 Sb., o hnojivech, ve znění pozdějších předpisů, provádí ÚKZÚZ v rámci agrochemického zkoušení zemědělských půd (AZZP) také sledování obsahů rizikových

Více

Chromatofokusace. separace proteinů na základě jejich pi vysoké rozlišení. není potřeba připravovat ph gradient zaostřovací efekt jednoduchost

Chromatofokusace. separace proteinů na základě jejich pi vysoké rozlišení. není potřeba připravovat ph gradient zaostřovací efekt jednoduchost Chromatofokusace separace proteinů na základě jejich pi vysoké rozlišení není potřeba připravovat ph gradient zaostřovací efekt jednoduchost Polypufry - amfolyty Stacionární fáze Polybuffer 96 - ph 9-6

Více

Jednotné pracovní postupy zkoušení krmiv STANOVENÍ OBSAHU VÁPNÍKU, DRASLÍKU, HOŘČÍKU, SODÍKU A FOSFORU METODOU ICP-OES

Jednotné pracovní postupy zkoušení krmiv STANOVENÍ OBSAHU VÁPNÍKU, DRASLÍKU, HOŘČÍKU, SODÍKU A FOSFORU METODOU ICP-OES Národní referenční laboratoř Strana 1 STANOVENÍ OBSAHU VÁPNÍKU, DRASLÍKU, HOŘČÍKU, SODÍKU A FOSFORU METODOU ICP-OES 1 Rozsah a účel Metoda je určena pro stanovení makroprvků vápník, fosfor, draslík, hořčík

Více

jako markeru oxidativního

jako markeru oxidativního Monitoring koncentrace 8-isoprostanu jako markeru oxidativního stresu v kondenzátu vydechovaného vzduchu Lukáš Chytil Ústav organické technologie Úvod Cíl: - nalezení vhodného analytické metody pro analýzu

Více

BÍLKOVINY. V organismu se nedají nahradit jinými sloučeninami, jen jako zdroj energie je mohou nahradit sacharidy a lipidy.

BÍLKOVINY. V organismu se nedají nahradit jinými sloučeninami, jen jako zdroj energie je mohou nahradit sacharidy a lipidy. BÍLKOVINY o makromolekulární látky, z velkého počtu AMK zbytků o základ všech organismů o rostliny je vytvářejí z anorganických sloučenin (dusičnanů) o živočichové je musejí přijímat v potravě, v trávicím

Více

ANALÝZA EXTRAKTU PODLE MEHLICHA 3 METODOU ICP-OES

ANALÝZA EXTRAKTU PODLE MEHLICHA 3 METODOU ICP-OES 30074. Analýza extraktu podle Mehlicha 3 Strana ANALÝZA EXTRAKTU PODLE MEHLICHA 3 METODOU ICP-OES Účel a rozsah Postup je určen především pro stanovení obsahu základních živin vápníku, hořčíku, draslíku,

Více

LASEROVÁ ABLACE S HMOTNOSTNÍ SPEKTROMETRIÍ V INDUKČNĚ VÁZANÉM PLAZMATU PRO 2D MAPOVÁNÍ MOČOVÝCH KAMENŮ

LASEROVÁ ABLACE S HMOTNOSTNÍ SPEKTROMETRIÍ V INDUKČNĚ VÁZANÉM PLAZMATU PRO 2D MAPOVÁNÍ MOČOVÝCH KAMENŮ Chem. Listy 13, s193 s197 (29) Cena Merck 29 LASEROVÁ ABLACE S HMOTNOSTNÍ SPEKTROMETRIÍ V INDUKČNĚ VÁZANÉM PLAZMATU PRO 2D MAPOVÁNÍ MOČOVÝCH KAMENŮ MONIKA NOVÁČKOVÁ, MARKÉTA HOLÁ a VIKTOR KANICKÝ Oddělení

Více

Úvod do koroze. (kapitola, která bude společná všem korozním laboratorním pracím a kterou studenti musí znát bez ohledu na to, jakou práci dělají)

Úvod do koroze. (kapitola, která bude společná všem korozním laboratorním pracím a kterou studenti musí znát bez ohledu na to, jakou práci dělají) Úvod do koroze (kapitola, která bude společná všem korozním laboratorním pracím a kterou studenti musí znát bez ohledu na to, jakou práci dělají) Koroze je proces degradace kovu nebo slitiny kovů působením

Více

Hmotnostní spektrometrie. Historie MS. Schéma MS

Hmotnostní spektrometrie. Historie MS. Schéma MS Hmotnostní spektrometrie MS mass spectrometry MS je analytická technika, která se používá k měření poměru hmotnosti ku náboji (m/z) u iontů původně studium izotopového složení dnes dynamicky se vyvíjející

Více

Manganový zeolit MZ 10

Manganový zeolit MZ 10 Manganový zeolit MZ 10 SPECIFIKACE POPIS PRODUKTU PUROLITE MZ 10 je manganový zeolit, oxidační a filtrační prostředek, který je připraven z glaukonitu, přírodního produktu, lépe známého jako greensand.

Více

OPTIMALIZACE METODY ANODICKÉ ROZPOUŠTĚCÍ VOLTAMETRIE PRO ANALÝZU BIOLOGICKÝCH VZORKŮ S OBSAHEM RTUTI

OPTIMALIZACE METODY ANODICKÉ ROZPOUŠTĚCÍ VOLTAMETRIE PRO ANALÝZU BIOLOGICKÝCH VZORKŮ S OBSAHEM RTUTI Středoškolská technika 212 Setkání a prezentace prací středoškolských studentů na ČVUT OPTIMALIZACE METODY ANODICKÉ ROZPOUŠTĚCÍ VOLTAMETRIE PRO ANALÝZU BIOLOGICKÝCH VZORKŮ S OBSAHEM RTUTI Eliška Marková

Více

Přímá analýza reálných vzorků hmotnostní spektrometrií s využitím nanodesorpčního elektrospreje (nano-desi-ms)

Přímá analýza reálných vzorků hmotnostní spektrometrií s využitím nanodesorpčního elektrospreje (nano-desi-ms) Přímá analýza reálných vzorků hmotnostní spektrometrií s využitím nanodesorpčního elektrospreje (nano-desi-ms) Teorie: Desorpční elektrosprej (DESI) byl popsán v roce 2004 Zoltánem Takátsem. Jedná se o

Více

HMOTNOSTNÍ SPEKTROMETRIE

HMOTNOSTNÍ SPEKTROMETRIE HMOTNOSTNÍ SPEKTROMETRIE MASS SPECTROMETRY (MS) Alternativní názvy (spojení s GC, LC, CZE, ITP): Hmotnostně spektrometrický (selektivní) detektor Mass spectrometric (selective) detector (MSD) Spektrometrie

Více

Iontové zdroje II. Iontový zdroj. Data. Vzorek. Hmotnostní analyzátor. Zdroj vakua. Iontové zdroje pracující za sníženého tlaku

Iontové zdroje II. Iontový zdroj. Data. Vzorek. Hmotnostní analyzátor. Zdroj vakua. Iontové zdroje pracující za sníženého tlaku Iontové zdroje II. Iontové zdroje pracující za sníženého tlaku Elektronová/chemická ionizace Iontové zdroje pro spojení s planárními separacemi Ionizace laserem za účasti matrice Ambientní ionizační techniky

Více

Analytické nástroje pro analýzu iontů v prostředí. Analytical tools for environmental metal ions determination

Analytické nástroje pro analýzu iontů v prostředí. Analytical tools for environmental metal ions determination Název: Analytické nástroje pro analýzu iontů v prostředí Analytical tools for environmental metal ions determination Školitel: Datum: Marie Konečná 6.6.2014 Reg.č.projektu: CZ.1.07/2.3.00/20.0148 Název

Více

Chromatografie. Petr Breinek

Chromatografie. Petr Breinek Chromatografie Petr Breinek Chromatografie-I 2012 Společným znakem všech chromatografických metod je kontinuální dělení složek analyzované směsi mezi dvěma fázemi. Pohyblivá fáze (mobilní), eluent Nepohyblivá

Více

1. ročník Počet hodin

1. ročník Počet hodin SOUSTAVY LÁTEK A JEJICH SLOŽENÍ rozdělení přírodních látek a vlastnosti chemických látek soustavy látek a jejich složení STAVBA ATOMU historie pohledu na atom složení a struktura atomu stavba atomu VELIČINY

Více

ZŠ ÚnO, Bratří Čapků 1332

ZŠ ÚnO, Bratří Čapků 1332 Úvodní obrazovka Menu (vlevo nahoře) Návrat na hlavní stránku Obsah Výsledky Poznámky Záložky edunet Konec Chemie 1 (pro 12-16 let) LangMaster Obsah (střední část) výběr tématu - dvojklikem v seznamu témat

Více

Spojení hmotové spektrometrie se separačními metodami

Spojení hmotové spektrometrie se separačními metodami Spojení hmotové spektrometrie se separačními metodami RNDr. Radomír Čabala, Dr. Katedra analytické chemie Přírodovědecká fakulta Univerzita Karlova Praha Spojení hmotové spektrometrie se separačními metodami

Více

Typy molekul, látek a jejich vazeb v organismech

Typy molekul, látek a jejich vazeb v organismech Typy molekul, látek a jejich vazeb v organismech Typy molekul, látek a jejich vazeb v organismech Organismy se skládají z molekul rozličných látek Jednotlivé látky si organismus vytváří sám z jiných látek,

Více

Aplikace ICP-OES (MS)

Aplikace ICP-OES (MS) (MS) ACH/APAS David MILDE, 2017 Úvod ICP-OES je citlivá a dostatečně selektivní analytická metoda pro stanovení většiny prvků. Jedná se především o roztokovou metodu, i když existují modifikace pro přímou

Více

Sekunda (2 hodiny týdně) Chemické látky a jejich vlastnosti Směsi a jejich dělení Voda, vzduch

Sekunda (2 hodiny týdně) Chemické látky a jejich vlastnosti Směsi a jejich dělení Voda, vzduch Sekunda (2 hodiny týdně) Chemické látky a jejich vlastnosti Směsi a jejich dělení Voda, vzduch Atom, složení a struktura Chemické prvky-názvosloví, slučivost Chemické sloučeniny, molekuly Chemická vazba

Více

Hmotnostní detekce v separačních metodách

Hmotnostní detekce v separačních metodách Hmotnostní detekce v separačních metodách MC230P83 2/1 Z+Zk 4 kredity doc. RNDr. Josef Cvačka, Ph.D. Mgr. Martin Hubálek, Ph.D. Ústav organické chemie a biochemie AVČR, v.v.i. Flemingovo nám. 2, 166 10

Více

Dělení a svařování svazkem plazmatu

Dělení a svařování svazkem plazmatu Dělení a svařování svazkem plazmatu RNDr. Libor Mrňa, Ph.D. Osnova: Fyzikální podstat plazmatu Zdroje průmyslového plazmatu Dělení materiálu plazmou Svařování plazmovým svazkem Mikroplazma Co je to plazma?

Více

IDENTIFIKACE METALOPROTEINŮ A STANOVENÍ JIM PŘÍSLUŠNÝCH KOVOVÝCH SPECIÍ. Hana Ovadová, Tomáš Vaculovič, Viktor Kanický, Jan Havliš

IDENTIFIKACE METALOPROTEINŮ A STANOVENÍ JIM PŘÍSLUŠNÝCH KOVOVÝCH SPECIÍ. Hana Ovadová, Tomáš Vaculovič, Viktor Kanický, Jan Havliš IDENTIFIKACE METALOPROTEINŮ A STANOVENÍ JIM PŘÍSLUŠNÝCH KOVOVÝCH SPECIÍ Hana Ovadová, Tomáš Vaculovič, Viktor Kanický, Jan Havliš Katedra analytické chemie, Přírodovědecká fakulta, Masarykova Univerzita

Více

Vysokoúčinná kapalinová chromatografie

Vysokoúčinná kapalinová chromatografie Vysokoúčinná kapalinová chromatografie HPLC High Performance Liquid Chromatography Vysokoúčinná...X... Vysoceúčinná kapalinová chromatografie RRLC Rapid Resolution Liquid Chromatography Rychle rozlišovací

Více

Složky potravy a vitamíny

Složky potravy a vitamíny Složky potravy a vitamíny Potrava musí být pestrá a vyvážená. Měla by obsahovat: základní živiny cukry (60%), tuky (25%) a bílkoviny (15%) vodu, minerální látky, vitaminy. Metabolismus: souhrn chemických

Více

MINIATURIZACE PRŮTOKOVÝCH ELEKTROCHEMICKÝCH CEL PRO GENEROVÁNÍ TĚKAVÝCH SLOUČENIN. Jakub Hraníček

MINIATURIZACE PRŮTOKOVÝCH ELEKTROCHEMICKÝCH CEL PRO GENEROVÁNÍ TĚKAVÝCH SLOUČENIN. Jakub Hraníček MINIATURIZACE PRŮTOKOVÝCH ELEKTROCHEMICKÝCH CEL PRO GENEROVÁNÍ TĚKAVÝCH SLOUČENIN Jakub Hraníček Katedra analytické chemie, Přírodovědecká fakulta, Univerzita Karlova, Albertov 6, 128 43 Praha 2 E-mail:

Více

Separační metody v analytické chemii. Plynová chromatografie (GC) - princip

Separační metody v analytické chemii. Plynová chromatografie (GC) - princip Plynová chromatografie (GC) - princip Plynová chromatografie (Gas chromatography, zkratka GC) je typ separační metody, kdy se od sebe oddělují složky obsažené ve vzorku a které mohou být převedeny do plynné

Více

Jednotné pracovní postupy zkoušení krmiv STANOVENÍ OBSAHU NEPOVOLENÝCH DOPLŇKOVÝCH LÁTEK METODOU LC-MS

Jednotné pracovní postupy zkoušení krmiv STANOVENÍ OBSAHU NEPOVOLENÝCH DOPLŇKOVÝCH LÁTEK METODOU LC-MS Národní referenční laboratoř Strana 1 STANOVENÍ OBSAHU NEPOVOLENÝCH DOPLŇKOVÝCH LÁTEK METODOU LC-MS 1 Účel a rozsah Tato metoda specifikuje podmínky pro stanovení nepovolených doplňkových látek Zn-bacitracinu,

Více

Při reálném chromatografickém ději nikdy nedojde k ustavení rovnováhy mezi oběma fázemi První ucelená teorie respektující uvedenou skutečnost byla

Při reálném chromatografickém ději nikdy nedojde k ustavení rovnováhy mezi oběma fázemi První ucelená teorie respektující uvedenou skutečnost byla Teorie chromatografie - III Příprava předmětu byla podpořena projektem OPPA č. CZ.2.17/3.1.00/33253 4.3.3 Teorie dynamická Při reálném chromatografickém ději nikdy nedojde k ustavení rovnováhy mezi oběma

Více

HMOTNOSTNÍ SPEKTROMETRIE

HMOTNOSTNÍ SPEKTROMETRIE HMOTNOSTNÍ SPEKTROMETRIE A MOŽNOSTI JEJÍHO SPOJENÍ SE SEPARAČNÍMI METODAMI SEPARACE chromatografie CGC, GC x GC HPLC, UPLC, UHPLC, CHIP-LC elektromigrační m. CZE, CITP INTERFACE SPOJENÍ x ROZHRANÍ GC vyhřívaná

Více

Lékařská chemie a biochemie modelový vstupní test ke zkoušce

Lékařská chemie a biochemie modelový vstupní test ke zkoušce Lékařská chemie a biochemie modelový vstupní test ke zkoušce 1. Máte pufr připravený smísením 150 ml CH3COOH o c = 0,2 mol/l a 100 ml CH3COONa o c = 0,25 mol/l. Jaké bude ph pufru, pokud přidáme 10 ml

Více

Opakování

Opakování Slabé vazebné interakce Opakování Co je to atom? Opakování Opakování Co je to atom? Atom je nejmenší částice hmoty, chemicky dále nedělitelná. Skládá se z atomového jádra obsahujícího protony a neutrony

Více

Jednotné pracovní postupy ÚKZÚZ Zkoušení hnojiv 2. vydání Brno 2015

Jednotné pracovní postupy ÚKZÚZ Zkoušení hnojiv 2. vydání Brno 2015 Číslo Název postupu postupu ÚKZÚZ 20001.1 Stanovení obsahu vlhkosti gravimetricky a dopočet sušiny Zdroj 20010.1 Stanovení obsahu popela a spalitelných látek gravimetricky 20020.1 Stanovení obsahu chloridů

Více

Metody gravimetrické

Metody gravimetrické Klíčový požadavek - kvantitativní vyloučení stanovované složky z roztoku - málorozpustná sloučenina - SRÁŽECÍ ROVNOVÁHY VYLUČOVACÍ FORMA se převede na (sušení, žíhání) CHEMICKY DEFINOVANÝ PRODUKT - vážitelný

Více

Renáta Kenšová. Název: Školitel: Datum: 24. 10. 2014

Renáta Kenšová. Název: Školitel: Datum: 24. 10. 2014 Název: Školitel: Sledování distribuce zinečnatých iontů v kuřecím zárodku za využití moderních technik Monitoring the distribution of zinc ions in chicken embryo using modern techniques Renáta Kenšová

Více

ÚSTAV CHEMIE A ANALÝZY POTRAVIN

ÚSTAV CHEMIE A ANALÝZY POTRAVIN VYSOKÁ ŠKOLA CHEMICKO-TECHNOLOGICKÁ V PRAZE ÚSTAV CHEMIE A ANALÝZY POTRAVIN Technická 5, 166 28 Praha 6 tel./fax.: + 420 220 443 185; jana.hajslova@vscht.cz LABORATOŘ Z ANALÝZY POTRAVIN A PŘÍRODNÍCH PRODUKTŮ

Více

Složení látek a chemická vazba Číslo variace: 1

Složení látek a chemická vazba Číslo variace: 1 Složení látek a chemická vazba Číslo variace: 1 Zkoušecí kartičku si PODEPIŠ a zapiš na ni ČÍSLO VARIACE TESTU (číslo v pravém horním rohu). Odpovědi zapiš na zkoušecí kartičku, do testu prosím nepiš.

Více

APLIKOVANÉ ELEKTROMIGRAČNÍ METODY

APLIKOVANÉ ELEKTROMIGRAČNÍ METODY APLIKOVANÉ ELEKTROMIGRAČNÍ METODY Princip: migrace elektricky nabitých částic v elektrickém poli Druhy iontů: +, -, obojaký (zwitterion), vícenásobný Typy migrace: a) přímá migrují ionty analytů b) nepřímá

Více

SPE je metoda vhodná pro rychlou přípravu vzorků, která užívá

SPE je metoda vhodná pro rychlou přípravu vzorků, která užívá Extrakce na pevné fázi (SPE) Příprava předmětu byla podpořena projektem OPPA č. CZ.2.17/3.1.00/33253 Extrakce na pevné fázi (SPE) (Solid Phase Extraction) SPE je metoda vhodná pro rychlou přípravu vzorků,

Více

Analytické metody využívané ke stanovení chemického složení kovů. Ing.Viktorie Weiss, Ph.D.

Analytické metody využívané ke stanovení chemického složení kovů. Ing.Viktorie Weiss, Ph.D. Analytické metody využívané ke stanovení chemického složení kovů. Ing.Viktorie Weiss, Ph.D. Rentgenová fluorescenční spektrometrie ergiově disperzní (ED-XRF) elé spektrum je analyzováno najednou polovodičovým

Více

UNIVERZITA PARDUBICE

UNIVERZITA PARDUBICE UNIVERZITA PARDUBICE Fakulta chemicko technologická Katedra analytické chemie Licenční studium chemometrie na téma Využití tabulkového procesoru jako laboratorního deníku Vedoucí licenčního studia Prof.

Více

DOUTNAVÝ VÝBOJ. Další technologie využívající doutnavý výboj

DOUTNAVÝ VÝBOJ. Další technologie využívající doutnavý výboj DOUTNAVÝ VÝBOJ Další technologie využívající doutnavý výboj Plazma doutnavého výboje je využíváno v technologiích depozice povlaků nebo modifikace povrchů. Jedná se zejména o : - depozici povlaků magnetronovým

Více

Galvanický článek. Li Rb K Na Be Sr Ca Mg Al Be Mn Zn Cr Fe Cd Co Ni Sn Pb H Sb Bi As CU Hg Ag Pt Au

Galvanický článek. Li Rb K Na Be Sr Ca Mg Al Be Mn Zn Cr Fe Cd Co Ni Sn Pb H Sb Bi As CU Hg Ag Pt Au Řada elektrochemických potenciálů (Beketova řada) v níž je napětí mezi dvojicí kovů tím větší, čím větší je jejich vzdálenost v této řadě. Prvek více vlevo vytěsní z roztoku kov nacházející se vpravo od

Více

INTERPRETACE HMOTNOSTNÍCH SPEKTER

INTERPRETACE HMOTNOSTNÍCH SPEKTER INTERPRETACE HMOTNOSTNÍCH SPEKTER Hmotnostní spektrometrie hmotnostní spektrometrie = fyzikálně chemická metoda založená na rozdělení hmotnosti iontů v plynné fázi podle jejich poměru hmotnosti a náboje

Více

Hmotový spektrometr s indukčně vázaným plasmatem (ICPMS) II (opakovaná)

Hmotový spektrometr s indukčně vázaným plasmatem (ICPMS) II (opakovaná) Odůvodnění veřejné zakázky dle 156 zákona č. 137/2006 Sb., o veřejných zakázkách, v platném znění (dále jen ZVZ ) a vyhlášky č. 232/2012 Sb., o podrobnostech rozsahu odůvodnění účelnosti veřejné zakázky

Více

VYUŽITÍ BEZKONTAKTNÍ VODIVOSTNÍ DETEKCE PRO HPLC SEPARACI POLYKARBOXYLÁTOVÝCH DERIVÁTŮ CYKLENU. Anna Hamplová

VYUŽITÍ BEZKONTAKTNÍ VODIVOSTNÍ DETEKCE PRO HPLC SEPARACI POLYKARBOXYLÁTOVÝCH DERIVÁTŮ CYKLENU. Anna Hamplová VYUŽITÍ BEZKOTAKTÍ VODIVOSTÍ DETEKCE PRO HPLC SEPARACI POLYKARBOXYLÁTOVÝCH DERIVÁTŮ CYKLEU Anna Hamplová Univerzita Karlova v Praze, Přírodovědecká fakulta, Katedra analytické chemie Albertov 6, 128 43

Více

Název: Beketovova řada kovů

Název: Beketovova řada kovů Název: Beketovova řada kovů Autor: Mgr. Jiří Vozka, Ph.D. Název školy: Gymnázium Jana Nerudy, škola hl. města Prahy Předmět, mezipředmětové vztahy: chemie, biologie, fyzika Ročník: 3. Tématický celek:

Více

Minerální výživa na extrémních půdách. Půdy silně kyselé, alkalické, zasolené a s vysokou koncentrací těžkých kovů

Minerální výživa na extrémních půdách. Půdy silně kyselé, alkalické, zasolené a s vysokou koncentrací těžkých kovů Minerální výživa na extrémních půdách Půdy silně kyselé, alkalické, zasolené a s vysokou koncentrací těžkých kovů Procesy vedoucí k acidifikaci půd Zvětrávání hornin s následným vymýváním kationtů (draslík,

Více

Hmotnostní spektrometrie - Mass Spectrometry (MS)

Hmotnostní spektrometrie - Mass Spectrometry (MS) Hmotnostní spektrometrie - Mass Spectrometry (MS) Další pojem: Hmotnostně spektrometrický (selektivní) detektor - Mass spectrometric (selective) detector (MSD) Spektrometrie - metoda založená na interakci

Více

Sůl kyseliny mléčné - konečný produkt anaerobního metabolismu

Sůl kyseliny mléčné - konečný produkt anaerobního metabolismu Biochemické vyšetření ve sportu Laktát Sůl kyseliny mléčné - konečný produkt anaerobního metabolismu V klidu 0,8 mmol/l (0,5-1,5 mmol/l) Tvorba laktátu = přetížení aerobního způsobu zisku energie a přestup

Více

Gymnázium Vysoké Mýto nám. Vaňorného 163, 566 01 Vysoké Mýto

Gymnázium Vysoké Mýto nám. Vaňorného 163, 566 01 Vysoké Mýto Gymnázium Vysoké Mýto nám. Vaňorného 163, 566 01 Vysoké Mýto Oxidace a redukce jsou chemické reakce spojené s výměnou elektronů. Při oxidaci látka elektrony uvolňuje a její oxidační číslo se zvyšuje.

Více

Analýza kofeinu v kávě pomocí kapalinové chromatografie

Analýza kofeinu v kávě pomocí kapalinové chromatografie Analýza kofeinu v kávě pomocí kapalinové chromatografie Kofein (obr.1) se jako přírodní alkaloid vyskytuje v mnoha rostlinách (např. fazolích, kakaových bobech, černém čaji apod.) avšak nejvíce je spojován

Více

Struktura proteinů. - testík na procvičení. Vladimíra Kvasnicová

Struktura proteinů. - testík na procvičení. Vladimíra Kvasnicová Struktura proteinů - testík na procvičení Vladimíra Kvasnicová Mezi proteinogenní aminokyseliny patří a) kyselina asparagová b) kyselina glutarová c) kyselina acetoctová d) kyselina glutamová Mezi proteinogenní

Více

Aplikační rozsah chromatografie

Aplikační rozsah chromatografie Chromatografické metody II. Aplikační rozsah chromatografie Chromatografie Kapalinová chromatografie rozdělení Nízkotlaká (atmosferický tlak) LPC Střednětlaká (4 Mpa) FPLC Vysokotlaká (40 Mpa) HPLC Ultravysokotlaká

Více

Ing. Milan Vodehnal, AITEC s.r.o., Ledeč nad Sázavou

Ing. Milan Vodehnal, AITEC s.r.o., Ledeč nad Sázavou Technologie zneškodňování odpadních vod z galvanického vylučování povlaků ZnNi Ing. Milan Vodehnal, AITEC s.r.o., Ledeč nad Sázavou Používání galvanických lázní pro vylučování slitinových povlaků vzhledem

Více

Základní stavební částice

Základní stavební částice Základní stavební částice ATOMY Au O H Elektroneutrální 2 H 2 atomy vodíku 8 Fe Ř atom železa IONTY Na + Cl - H 3 O + P idávat nebo odebírat se mohou jenom elektrony Kationty Kladn nabité Odevzdání elektron

Více

PŘECHODNÉ PRVKY - II

PŘECHODNÉ PRVKY - II PŘECHODNÉ PRVKY - II Měď 11. skupina (I.B), 4. perioda nejstabilnější oxidační číslo II, často I ryzí v přírodě vzácná, sloučeniny kuprit Cu 2 O, chalkopyrit CuFeS 2 měkký, houževnatý, načervenalý kov,

Více

Pracovní listy pro žáky

Pracovní listy pro žáky Pracovní listy pro žáky : Ušlech lý pan Beketov Kovy a potraviny Úkol 1: S pomocí nápovědy odhadněte správný kov, který je v dané potravině obsažen. Nápověda: MANGAN (Mn), ŽELEZO (Fe), CHROM (Cr), VÁPNÍK

Více

Optický emisní spektrometr Agilent 725 ICP-OES

Optický emisní spektrometr Agilent 725 ICP-OES Optický emisní spektrometr Agilent 725 ICP-OES Popis systému: Přístroj, včetně řídicího softwaru a počítače, určený pro plně simultánní stanovení prvků v širokém koncentračním rozmezí (ppm až %), v nejrůznějších

Více

Chemie. Mgr. Petra Drápelová Mgr. Jaroslava Vrbková. Gymnázium, SOŠ a VOŠ Ledeč nad Sázavou

Chemie. Mgr. Petra Drápelová Mgr. Jaroslava Vrbková. Gymnázium, SOŠ a VOŠ Ledeč nad Sázavou Chemie Mgr. Petra Drápelová Mgr. Jaroslava Vrbková Gymnázium, SOŠ a VOŠ Ledeč nad Sázavou JÁDRO ATOMU A RADIOAKTIVITA VY_32_INOVACE_03_3_03_CH Gymnázium, SOŠ a VOŠ Ledeč nad Sázavou Atomové jádro je vnitřní

Více

Agilent 5110 ICP-OES vždy o krok napřed

Agilent 5110 ICP-OES vždy o krok napřed analytická instrumentace, PC, periferie, služby, poradenství, servis Agilent 5110 ICP-OES vždy o krok napřed FACT Jedinečný nástroj pro korekce spektrálních interferencí. V dokonalém světě by ICP-OES spektrometry

Více

Tématické okruhy pro státní závěrečné zkoušky

Tématické okruhy pro státní závěrečné zkoušky Tématické okruhy pro státní závěrečné zkoušky Obor Povinný okruh Volitelný okruh (jeden ze dvou) Forenzní biologická Biochemie, pathobiochemie a Toxikologie a bioterorismus analýza genové inženýrství Kriminalistické

Více

CHROMATOGRAFIE ÚVOD Společný rys působením nemísících fází: jedna fáze je nepohyblivá (stacionární), druhá pohyblivá (mobilní).

CHROMATOGRAFIE ÚVOD Společný rys působením nemísících fází: jedna fáze je nepohyblivá (stacionární), druhá pohyblivá (mobilní). CHROMATOGRAFIE ÚOD Existují různé chromatografické metody, viz rozdělení metod níže. Společný rys chromatografických dělení: vzorek jako směs látek - složek se dělí na jednotlivé složky působením dvou

Více

Náboj a hmotnost elektronu

Náboj a hmotnost elektronu 1911 určení náboje elektronu q pomocí mlžné komory q = 1.602 177 10 19 C Náboj a hmotnost elektronu Elektrický náboj je kvantován Každý náboj je celistvým násobkem elementárního náboje (elektronu) z hodnoty

Více

Seznam otázek pro zkoušku z biofyziky oboru lékařství pro školní rok

Seznam otázek pro zkoušku z biofyziky oboru lékařství pro školní rok Seznam otázek pro zkoušku z biofyziky oboru lékařství pro školní rok 2014-15 Stavba hmoty Elementární částice; Kvantové jevy, vlnové vlastnosti částic; Ionizace, excitace; Struktura el. obalu atomu; Spektrum

Více

Vyberte z těchto částic Cu Cl 2 Fe 2+ Na + CO H 2 SO 4 Ag Cl - NaOH. atomy: Cu Ag molekuly: Cl 2 CO H 2 SO 4 NaOH kationty: Fe 2+ Na +

Vyberte z těchto částic Cu Cl 2 Fe 2+ Na + CO H 2 SO 4 Ag Cl - NaOH. atomy: Cu Ag molekuly: Cl 2 CO H 2 SO 4 NaOH kationty: Fe 2+ Na + OPAKOVÁNÍ Vyberte z těchto částic Cu Cl 2 Fe 2+ Na + CO H 2 SO 4 Ag Cl - NaOH atomy: Cu Ag molekuly: Cl 2 CO H 2 SO 4 NaOH kationty: Fe 2+ Na + Vyberte z těchto částic Cu Cl 2 Fe 2+ Na + CO H 2 SO 4 Ag

Více

GALAVANICKÝ ČLÁNEK. V běžné životě používáme název baterie. Odborné pojmenování pro baterii je galvanický článek.

GALAVANICKÝ ČLÁNEK. V běžné životě používáme název baterie. Odborné pojmenování pro baterii je galvanický článek. GALAVANICKÝ ČLÁNEK V běžné životě používáme název baterie. Odborné pojmenování pro baterii je galvanický článek. Galvanický článek je zařízení, které využívá redoxní reakce jako zdroj energie. Je zdrojem

Více

Iontové zdroje II. Iontový zdroj. Data. Vzorek. Hmotnostní analyzátor. Zdroj vakua. Iontové zdroje pracující za sníženého tlaku

Iontové zdroje II. Iontový zdroj. Data. Vzorek. Hmotnostní analyzátor. Zdroj vakua. Iontové zdroje pracující za sníženého tlaku MC230P43 Hmotnostní detekce v separačních metodách, 2015 Iontové zdroje II. Iontové zdroje pracující za sníženého tlaku Elektronová/chemická ionizace Iontové zdroje pro spojení s planárními separacemi

Více

1H 1s. 8O 1s 2s 2p - - - - - - H O H

1H 1s. 8O 1s 2s 2p - - - - - - H O H OXIDAČNÍ ČÍSLO 1H 1s 8O 1s 2s 2p 1H 1s - - - - + - - + - - + - - H O H +I -II +I H O H - - - - Elektronegativita: Oxidační číslo vodíku: H +I Oxidační číslo kyslíku: O -II Platí téměř ve všech sloučeninách.

Více

Úvod k biochemickému praktiku. Pavel Jirásek

Úvod k biochemickému praktiku. Pavel Jirásek Úvod k biochemickému praktiku Pavel Jirásek Úvodní informace 4 praktika B1 B2 B3 B4 4 týdny 8 pracovních stolů rozdělení kruhu do 8 pracovních skupin (v každé 2-3 studenti) Co s sebou na praktika plášť

Více

Monitorování hladiny metalothioneinu a thiolových sloučenin u biologických organismů vystavených působení kovových prvků a sloučenin

Monitorování hladiny metalothioneinu a thiolových sloučenin u biologických organismů vystavených působení kovových prvků a sloučenin Laboratoř Metalomiky a Nanotechnologií Monitorování hladiny metalothioneinu a thiolových sloučenin u biologických organismů vystavených působení kovových prvků a sloučenin Ing. Kateřina Tmejová, Ph. D.,

Více