LDL cholesterol, přímý (DLDL)

Transkript

1 Siemens Healthcare Diagnostics Inc. LDL cholesterol, přímý (DLDL) Návod k použití Systém ADVIA 1200 Nové informace Aktualizace: Komponenty a koncentrace Aktualizace: Komponenty a koncentrace Aktualizace: Komponenty a koncentrace Přehled metody Položka Popis Princip metody Eliminace/kataláza Typ vzorku Lidské sérum a plazma (s heparinem lithným) Stabilita v přístroji (stabilita on board ) Teplota uchovávání činidel 2 8 C Četnost kalibrace Četnost kontroly Reagent Blank Při kalibraci metody (RBL) Typ reakce Koncový bod (EPA) Vlnová délka měření 596/694 nm Standardizace Referenční metoda CDC Analytický rozsah Sérum/Plazma : mg/dl (0 25,9 mmol/l) Očekávané hodnoty Optimální : < 100 mg/dl (< 2,6 mmol/l) Blízko-optimální/ nadoptimální : Hraniční vysoké : Vysoké : mg/dl (2,6 3,3 mmol/l) mg/dl (3,4 4,1 mmol/l) mg/dl (4,1 4,9 mmol/l) Velice vysoké : 190 mg/dl ( 4,9 mmol/l) Kód činidla Kalibrátor ADVIA Chemistry HDL/LDL Cholesterol Calibrator : REF (B ) 2010 Siemens Healthcare Diagnostics. Všechna práva vyhrazena. Siemens Healthcare Diagnostics Inc., Tarrytown, NY USA 1 - Česky

2 Určené použití Určeno pro použití v in vitro diagnostice pro kvantitativní stanovení LDL cholesterolu v lidském séru a plazmě na systémech ADVIA Chemistry. Tato stanovení se používají při hodnocení rizika onemocnění koronárních tepen. Přehled a vysvětlení 1 Metoda ADVIA Chemistry LDL Cholesterol Direct (DLDL) stanoví LDL cholesterol v séru a plazmě. V prvním kroku reakce je odstraněn cholesterol, který není vázán na LDL lipoproteiny (Low Density Lipoprotein). Selektivní detergent přednostně uvolňuje cholesterol z non-ldl částic. Peroxid vodíku produkovaný cholesterol esterázou a cholesterol oxidázou je v prvním kroku odstraněn katalázou. Další detergent v činidle R2 uvolňuje cholesterol z LDL. Azid v činidle R2 inhibuje katalázu. Peroxid vodíku produkovaný cholesterol esterázou a cholesterol oxidázou je kvantitativně stanoven koncovou reakcí (EPA) dle Trindera. Hlavní zásady postupu Tato metoda se skládá ze 2 samostatných reakčních kroků : 1. Cholesterol esteráza a cholesterol oxidáza odstraňuje cholesterol, který nepochází z LDL lipoproteinů (Low Density Lipoprotein). Funkcí katalázy je odstranění peroxidu, který je produkován oxidázou. ester cholesterolu cholesterol + mastná kyselina cholesterol + O 2 cholestenon + H 2 O 2 2. Specifické stanovení LDL cholesterolu probíhá po jeho uvolnění detergentem v Činidle 2. Kataláza z kroku 1 je inhibována azidem sodným v R2. Intenzita zabarvení chinon-iminem produkovaným při Trinderově reakci je při stanovení při vlnové délce 596 nm přímo úměrná koncentraci cholesterolu. ester cholesterolu cholesterol + mastná kyselina cholesterol + O 2 cholestenon + H 2 O 2 H 2 O aminoantipyrin + TOOS chinon-imin + 4H 2 O TOOS = N-etyl-N-(2-hydroxy-3-sulfopropyl)-3-metylanilin 2 - Česky

3 Činidla Činidla jsou dodávána v níže popsaných baleních. Komponenty balení jsou dostupné pouze v kitu. REF (PN) Objem lahvičky Symbol Obsah Množství (B ) Direct LDL Cholesterol Reagents 20 ml Činidlo ,2 ml Počet vyšetření ml Činidlo 2 4 8,2 ml Bezpečnostní listy (MSDS/SDS) jsou k dispozici na Komponenty a koncentrace Činidlo Komponenta Koncentrace Činidlo 1 Pufr PIPES, ph 7,0 N-etyl-N-(2-hydroxy-3-sulfopropyl)-3-metylanilin [TOOS] Cholesterol esteráza [E.C Pseudomonas, 37 C] Cholesterol oxidáza [E.C Nocardia, 37 C] Kataláza [E.C mikrobiální zdroj, 25 C] Činidlo 2 Goodův pufr, ph 7,0 4-Aminoantipyrin Peroxidáza [E.C , křen, 25 C] Azid sodný UPOZORNĚNÍ: Tento prostředek obsahuje materiál živočišného původu a je nutné s ním zacházet jako s potenciálním nositelem a přenašečem onemocnění. POZNÁMKA : Azid sodný může reagovat s olověným a měděným potrubím a vytvářet výbušné kovové azidy. Pokud je likvidace činidel vylitím do odpadu v souladu s národními a místními předpisy, spláchněte je velkým množstvím vody, abyste zabránili nahromadění azidů. Pro účely diagnostických postupů in vitro. Příprava a použití činidel 50 mmol/l 2,0 mmol/l 600 U/l 500 U/l 600 ku/l 50 mmol/l 4mmol/l 4kU/l 0,09 % Činidla jsou připravena k okamžitému použití. Před použitím činidlem jemně zakružte, abyste odstranili bubliny a zajistili homogenitu činidla. Pokud jsou stále přítomny bubliny nebo pěna, odsajte je z lahvičky před použitím pomocí čisté pipety. 3 - Česky

4 Stabilita činidla v přístroji (stabilita on board, OBS) Systém ADVIA 1200 Stabilita Manipulace se vzorky Pro všechny systémy platí, že všechna neotevřená činidla jsou při skladování při teplotě 2až8 C a při ochraně před světlem stabilní až do data použitelnosti vytištěného na štítku produktu. Nezmrazujte činidla. Společnost Siemens Healthcare Diagnostics doporučuje používat pro tuto metodu sérum nebo plazmu (s heparinem lithným). Potřebné materiály, které nejsou součástí dodávky Následující seznam obsahuje výčet materiálů, které jsou potřebné k provedení této metody, avšak nejsou součástí dodávky : nádobky na vzorky, systémové roztoky, kalibrátor (REF čísla produktů jsou uvedena v části Přehled metody), kontrolní materiály, adaptéry lahviček na činidla : adaptér pro lahvičku o objemu 20 ml (REF ; ) do otvoru pro objem 40 ml (ADVIA 1200/1800), adaptér pro lahvičku o objemu 20 ml (REF ; ) do otvoru pro objem 70 ml (ADVIA 1200), adaptér pro lahvičku o objemu 20 ml (REF ; ) do otvoru pro objem 70 ml (ADVIA 1650/2400). Informace o uchovávání a stabilitě jsou uvedeny v příbalovém letáku. Kalibrace Pokyny k manipulaci a hodnoty uvádí příbalový leták dodávaný s kalibrátorem ADVIA Chemistry HDL/LDL Cholesterol Calibrator (REF ; B ). Pokyny k nastavení a používání uvádí část Přehled kalibrace v uživatelské příručce příslušného systému. 4 - Česky

5 Četnost kalibrace Při zavádění metody do systému proveďte kalibraci. V následujících situacích je nutno provést rekalibraci : při změně čísla šarže činidla, po výměně důležité optické nebo hydraulické součásti, pokud to vyžadují postupy řízení kvality. Společnost Siemens ověřila stabilitu kalibrace pro tuto metodu s výsledky, které uvádí následující tabulka : Systém ADVIA 1200 Minimální četnost kalibrace* * nebo vždy, když je to třeba podle údajů získaných v rámci řízení kvality Společnost Siemens doporučuje provádět kalibraci nových balení činidel, pokud bylo předchozí balení činidel kalibrováno v průběhu období stability v přístroji, a nikoli jako čerstvé balení. Programy a postupy řízení kvality v jednotlivých laboratořích mohou vyžadovat častější kalibraci. Četnost kontroly Reagent Blank (RBL) Měření RBL se provádí při kalibraci metody. Řízení kvality Dodržujte vládní nařízení či akreditační požadavky týkající se četnosti kontrol jakosti. Společnost Siemens doporučuje používat komerčně dostupné kontrolní materiály nejméně se 3 hladinami analytu (nízká, střední a vysoká). Uspokojivých funkčních charakteristik je dosaženo v případě, že se stanovené hodnoty analytu nalézají vpřijatelném kontrolním rozsahu systému nebo v rozsahu stanoveném podle schématu interní kontroly kvality platného pro vaši laboratoř. Skutečná četnost laboratorních kontrol závisí na mnoha faktorech, jako jsou například průběh práce, zkušenosti se systémem a úřední nařízení. Každá laboratoř by měla analyzovat kontroly s četností stanovenou interními laboratorními pokyny. Při provádění tohoto postupu analyzujte nejméně 3 hladiny kontrol denně. Analýzu kontrolních materiálů rovněž proveďte za následujících okolností : vždy, když používáte novou šarži činidel, po jakémkoli postupu údržby systému, čištění nebo odstraňování problémů, po provedení nové kalibrace. Další informace uvádí část Přehled kontroly kvality v uživatelské příručce příslušného systému. 5 - Česky

6 Omezení postupu 2 Některé látky způsobují fyziologické změny koncentrace analytu v séru nebo v plazmě. Rozsáhlý výklad o možných interferujících látkách, jejich koncentracích v séru nebo plazmě a možných fyziologických důsledcích přesahuje rámec tohoto dokumentu. Konkrétní podrobnosti o známých potenciálních interferujících látkách jsou uvedeny v citované literatuře. 2 Stejně jako u kterékoli jiné chemické reakce si musíte být vědomi možných vlivů neznámých interferencí s léky nebo endogenními látkami na výsledky. Laboratoř i lékař musejí vyhodnotit všechny výsledky vyšetření pacienta v kontextu jeho celkového klinického stavu. Interference Společnost Siemens testovala následující potenciální interferující látky s níže uvedenými výsledky : ADVIA 1200 Interferující látka Koncentrace interferující látky Koncentrace DLDL ve vzorku Interference* Bilirubin (konjugovaný a nekonjugovaný) 25 mg/dl (428 µmol/l) 142 mg/dl (3,7 mmol/l) Hemolýza (hemoglobin) 500 mg/dl (5,0 g/l) 140 mg/dl (3,6 mmol/l) Lipémie (po podání přípravku Intralipid) 500 mg/dl (5,65 mmol/l)** 136 mg/dl (3,5 mmol/l) * = nesignifikantní interference. Za signifikantní interferenci je považováno procentuální ovlivnění 10 %. ** jako triolein Interferující látka Koncentrace interferující látky Koncentrace DLDL ve vzorku Interference* Bilirubin (konjugovaný) Bilirubin (nekonjugovaný) Hemolýza (hemoglobin) Lipémie (po podání přípravku Intralipid) Lipémie (po podání koncentrátu triglyceridů) 20 mg/dl (342 µmol/l) 32 mg/dl (547 µmol/l) 810 mg/dl (8,1 g/l) 436 mg/dl (4,9 mmol/l)** 1009 mg/dl (11,4 mmol/l)** 91 mg/dl (2,4 mmol/l) 98 mg/dl (2,6 mmol/l) 98 mg/dl (2,5 mmol/l) 91 mg/dl (2,4 mmol/l) 101 mg/dl (2,6 mmol/l) Askorbát 50 mg/dl 94 mg/dl (2,4 mmol/l) +11,4 % * = nesignifikantní interference. Za signifikantní interferenci je považováno procentuální ovlivnění 10 %. ** jako triolein 6 - Česky

7 Interferující látka Koncentrace interferující látky Koncentrace DLDL ve vzorku Interference* Bilirubin (konjugovaný a nekonjugovaný) 30 mg/dl (513 µmol/l) 111 mg/dl (2,9 mmol/l) Hemolýza (hemoglobin) 525 mg/dl (5,25 g/l) 114 mg/dl (3,0 mmol/l) Lipémie (po podání přípravku Intralipid) 650 mg/dl (7,35 mmol/l)** 112 mg/dl (2,9 mmol/l) * = nesignifikantní interference. Za signifikantní interferenci je považováno procentuální ovlivnění 10 %. ** jako triolein Funkční charakteristika Přesnost 3 Každý vzorek byl testován 2krát (4krát na systémech Chemistry) v každém cyklu, při 2 cyklech za den, nejméně po dobu 12 dní (20 dní na systému ADVIA Chemistry 1200). Odhady přesnosti byly vypočteny podle dokumentu CLSI EP5-A2, Evaluation of Precision Performance of Quantitative Measurement Methods; Approved Guideline. 3 Údaje obsažené v této část představují typické funkční charakteristiky systémů ADVIA Chemistry. Údaje získané vaší laboratoří mohou být odlišné. Převodní koeficient : mg/dl 0,0259 = mmol/l ADVIA 1200 V rámci jednoho cyklu Celkem Typ vzorku Koncentrace SD CV (%) SD CV (%) Obvyklé jednotky (mg/dl) Sérum 109 1,8 1,7 3,8 3,5 Sérum 155 1,8 1,2 4,8 3,1 Sérum 212 3,7 1,8 6,9 3,3 SI jednotky (mmol/l) Sérum 2,8 0,05 1,7 0,10 3,5 Sérum 4,0 0,05 1,2 0,12 3,1 Sérum 5,5 0,10 1,8 0,18 3,3 7 - Česky

8 V rámci jednoho cyklu Celkem Typ vzorku Koncentrace SD CV (%) SD CV (%) Obvyklé jednotky (mg/dl) Sérum 106 0,8 0,8 3,0 2,8 Sérum 154 1,0 0,6 4,4 2,8 Sérum 187 1,3 0,7 5,5 2,9 SI jednotky (mmol/l) Sérum 2,7 0,02 0,8 0,08 2,8 Sérum 4,0 0,03 0,6 0,11 2,8 Sérum 4,8 0,03 0,7 0,14 2,9 V rámci jednoho cyklu Celkem Typ vzorku Koncentrace SD CV (%) SD CV (%) Obvyklé jednotky (mg/dl) Sérum 104 0,6 0,6 3,2 3,1 Sérum 154 0,8 0,5 4,6 3,0 Sérum 181 0,9 0,5 5,8 3,2 SI jednotky (mmol/l) Sérum 2,7 0,02 0,6 0,08 3,1 Sérum 4,0 0,02 0,5 0,12 3,0 Sérum 4,7 0,02 0,5 0,15 3,2 Analytický rozsah Tato metoda je lineární pro sérum nebo plazmu v rozsahu koncentrací 0 až 1000 mg/dl (0 až 25,9 mmol/l). Očekávané hodnoty 4 Následující tabulka uvádí referenční rozsahy pro tuto metodu v séru a plazmě : Typ vzorku Referenční rozsah Optimální : < 100 mg/dl (< 2,6 mmol/l) Blízko-optimální/nadoptimální mg/dl (2,6 3,3 mmol/l) Hraniční vysoká mg/dl (3,4 4,1 mmol/l) Vysoká mg/dl (4,1 4,9 mmol/l) Velice vysoká 190 mg/dl ( 4,9 mmol/l) Společnost Siemens uvádí tyto informace pro referenční účely. Každá laboratoř by si měla stanovit vlastní rozsah normálních hodnot. Rozsah normálních a abnormálních hodnot lze zadat v okně Analytical Parameters (Chemistry). 8 - Česky

9 Korelace mezi systémy ADVIA 1200 Funkční charakteristiky uvedeného postupu (y) byly porovnány s funkčními charakteristikami stejného postupu na porovnávacím systému (x). Typ vzorku Porovnávací systém (x) N Regresní rovnice Sy.x r Rozsah vzorku Sérum ADVIA y = 1,01x + 0,8 y = 1,01x + 0,02 Plazma* ADVIA 1200 (sérum) 30 y = 0,99x - 0,7 y = 0,99x - 0,02 * heparin lithný 3,7 0,10 1,1 0,03 0,998 0,998 1,000 0, mg/dl 0,2 12,1 mmol/l mg/dl 1,7 5,2 mmol/l Typ vzorku Porovnávací systém (x) N Regresní rovnice Sy.x r Rozsah vzorku Sérum Hitachi 717 (Randox LDL) 120 y = 1,00x - 0,8 y = 1,00x - 0,02 Plazma* ADVIA 1650 (sérum) 25 y = 1,02x - 0,8 y = 1,02x - 0,02 * heparin lithný 5,6 0,15 3,5 0,09 0,995 0,995 0,987 0, mg/dl 0,5 8,7 mmol/l mg/dl 1,9 3,8 mmol/l Typ vzorku Porovnávací systém (x) N Regresní rovnice Sy.x r Rozsah vzorku Sérum ADVIA y = 1,00x - 0,2 y = 1,00x - 0,01 Plazma* (sérum) 43 y = 0,98x - 0,3 y = 0,98x - 0,01 * heparin lithný 2,9 0,08 4,4 0,11 0,998 0,998 0,989 0, mg/dl 0,4 9,0 mmol/l mg/dl 1,8 5,7 mmol/l Standardizace Metoda ADVIA Chemistry DLDL je vysledovatelná prostřednictvím korelace pacientských vzorků k referenční metodě CDC. Hodnoty přiřazené kalibrátoru ADVIA Chemistry HDL/LDL Cholesterol Calibrator jsou vztaženy k této standardizaci. Literatura 1. Okada M, Matsui H, Ito Y, et al. Low density lipoprotein cholesterol can be chemically measured: A new superior method. J Lab Clin Med. 1998;132: Young DS. Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests. 3rd ed. Washington: AACC Press; Česky

10 3. Clinical and Laboratory Standards Institute (formerly NCCLS). Evaluation of Precision Performance of Quantitative Measurement Methods; Approved Guideline - Second Edition. Wayne, PA: Clinical and Laboratory Standards Institute; NCCLS Document EP5-A2. 4. Third Report of the Expert Panel on Detection, Evaluation and Treatment of High Blood Cholesterol in Adults (Adult Treatment Panel III), NIH Publication No , May Technická podpora Potřebujete-li zákaznickou podporu, kontaktujte svého místního poskytovatele technické podpory nebo distributora. Ochranné známky ADVIA je ochranná známka společnosti Siemens Healthcare Diagnostics. Hitachi je ochranná známka společnosti Hitachi Medical Systems America, Inc. Intralipid je ochranná známka společnosti Fresenius Kabi AB. Randox je ochranná známka společnosti Randox Laboratories Ltd. Made in: UK 10 - Česky

11 Definice Symbolů V označení a na obalu se mohou vyskytnout následující symboly : Symbol Definice Symbol Definice Lékařské zařízení pro diagnostiku in vitro Oprávněný výrobce Značka CE Pročtěte si návod k použití 0088 Katalogové číslo Autorizovaný zástupce pro Evropskou unii Označení CE s identifikačním číslem notifikačního orgánu Biologické riziko Chraňte před slunečním zářením a teplem Teplotní rozmezí Dolní teplotní hranice Horní teplotní hranice Nezmrazujte (> 0 C) Spotřebujte do Recyklujte Nahoru Obsahuje dostatek materiálu pro (n) testů Vytištěno sojovým inkoustem Rev. Revize YYYY-MM-DD Formát data (rok-měsíc-den) Kód šarže 11 - Česky