Sprá Spr vná labor vná labor t a orní pr orní pr x a e v molekulární molek mikr ulární obio mikr logick obio logick diagnostice diagnos Eva Jansová
|
|
- Ondřej Čermák
- před 5 lety
- Počet zobrazení:
Transkript
1 Správná laboratorní praxe v molekulární mikrobiologické diagnostice Eva Jansová
2 Molekulárně biologické metody v mikrobiologické diagnostice Nahrazují či doplňují klasické kultivační metody Metody centrifugační, metody extrakce a purifikace DNA (RNA), elektroforetické, hybridizační a amplifikační metody Detekce nukleové kyseliny mikroorganismů Z pohledu klinické diagnostiky se jedná o tzv. přímou diagnostickou metoda Mikroorganismus nebo jeho části (NK) musí ve vzorku být přítomné
3 Hybridizační metody Přehled metod užívaných v rutinní klinické diagnostice Microarrays - Genotypizace HCV, HPV, detekce širšího panelu patogenů STD, respir. Patogeny in situ hybridizace - patologické laboratoře (HPV) bdna (branched DNA; využívaná například firmou BayerDiagnostics, USA) - namísto amplifikace sekvence NK využívá amplifikace signálu navázaného ligandu, ke kterému dojde pouze v případě pozitivního výsledku detekce hybrid capture assay - hybridizace s RNA sondou ; detekuje se hybrid RNA/DNA - poměrně spolehlivá a levná a méně citlivá detekci virů HBV, HCMV a detekci a typizaci papilomavirů (výrobce Digene). Stripová metoda - kombinace hybridizačních metod se sondami nanesenými na proužcích papíru s chromatografií - výhodou je jednoduchost provedení daná čtením výsledku jako čárového kódu - Nevýhodou je nízká citlivost a opakovatelnost - Omezené orientační použití pro rozlišování typů virů hepatitid; HPV typizace, detekce ADeV, Rotavirů,
4 Amplifikační metody Polymerázová řetězová reakce (PCR) zcela převažující standardizovatelná automatizovatelná dostatek klinických studií Přehled metod užívaných v rutinní klinické diagnostice NASBA (nucleic acid sequence based amplification) Ligázová řetězová reakce (LCR ligase chain reaction) a další.
5 Amplifikační metody detekce NK. Polymerázová řetězová reakce (PCR) PCR - pro průkaz většiny mikroorganizmů, včetně bakterií, kvasinek, plísní, prvoků a DNA-virů reverzně-transkripční PCR (rtpcr) nested PCR / single-tube nested PCR multiplex PCR kvantitativní PCR (qpcr) Způsob analýzy amplifikace Real-time PCR s detekcí amplifikačního produktu v reálném čase End-point PCR s elektroforetickou analýzou amplifikačního
6 Kultivačně nezávislá detekce Molekulární mikrobiologická diagnostika interpretace metody umožňují detekovat, identifikovat a kvantifikovat mikroorganizmy, které nelze standardními mikrobiologickými metodami kultivovat, nebo se kultivují obtížně v porovnání s kultivačními metodami neumožňují tyto metody izolaci kultury životaschopného mikroorganizmu pro další testování včetně fenotypově vyjádřené citlivosti k antibiotikům Příklady: M. tuberculosis - lze sice v rutinních podmínkách kultivovat, ale na mikrobiologických půdách rostou velmi pomalu, a diagnostika se tak protahuje na několik týdnů (až 9 týdnů) Borelie - kultivace je možná, ale pro rutinní diagnostiku není prakticky použitelná Další obtížně kultivovatelná infekční agens - chlamydie, coxielly a původci infekčních endokarditid ze skupiny HACEK (Hemophillus sp., Actinobacillus actinomycetemcomitans, Cardiobacterium hominis, Eikenella corrodens, Kingella kingae). Mykologická dg. - pro průkaz původců dermatomykóz, aspergilů, kvasinek Kultivace virů je z hlediska rutinní diagnostiky omezeně využitelná. Metody molekulární diagnostiky se proto v jejich detekci hojně využívají. Mezi nejčastější detekované viry patří zejména herpesviry, viry hepatitid, HIV, parvoviry či papilomaviry. bakterie rostoucí v biofilmech
7 Komunikace mezi klinickým pracovištěm a laboratoří
8 Rutinní použití mol.dg. metod v klinické praxi KLINICKÉ PRACOVIŠTĚ Indikace k vyšetření Odběr vzorku Transport LABORATOŘ Uchování vzorku Úprava vzorku Izolace NK Analýza NK Interpretace klinická Klinické využití výsledku Následný postup Předání výsledku konzultace Laboratorní a klinická interpretace
9 Rutinní použití mol.dg. metod v klinické praxi KLINICKÉ PRACOVIŠTĚ Indikace k vyšetření
10 Rutinní použití mol.dg. metod v klinické praxi KLINICKÉ PRACOVIŠTĚ Indikace k vyšetření žádanky odběr materiálu
11 Metodika odběru a transportu klinických vzorků do laboratoře Specifika odběrů: Metodami molekulární diagnostiky lze vyšetřit téměř jakékoliv vzorky Zvýšené riziko kontaminace - hrozí zvláště při odběru vzorku Správná volba vzorku pro přímou dg.metodu - je nezbytné odebrat vzorek, ve kterém lze předpokládat v dané fázi onemocnění přítomnost sledovaného mikroorganizmu Není třeba zachovat mikroorganizmy životaschopné - vzorky lze zmrazit
12 Specifika odběrů: Metodika odběru a transportu klinických vzorků do laboratoře Metodami molekulární diagnostiky lze vyšetřit téměř jakékoliv vzorky Nutnost již při odběru rozlišovat vzorky pro detekci DNA a RNA rozdíl v technologii zpracování vzorku a rozdílná stabilita (transport a uchování vzorku) DNA: stabilita DNA do 72 hodin, uchovávat v chladu, transportovat v chladícím boxu. RNA: stabilita RNA je velmi nízká, maximálně přípustná doba transportu pro analýzu RNA se udává 24 hodin. Nutnost přesné specifikace vyšetření již při odběru vzorku - cílené vyšetřování konkrétních mikroorganizmů nebo alespoň skupin mikroorganizmů (Je to dáno nutností použití specifických komplementárních sekvencí ; specifickými technologiemi ; specifickými odběrovými materiály, apod.)
13 Jaký klinický materiál se používá v molekulárně-biologické diagnostice?
14 Přehled nejčastěji zpracovávaných vzorků tělní tekutiny Periferní krev vkládá se do izolace NK přímo Je homogenní, ale obsah buněčných frakcí je variabilní V krvi lze NK inf.agens kvantifikovat Je možné izolovat frakce pro detekci NK bakterií a kvasinek při podezření na generalizovanou infekci nebo bakteriemii (například sepse, borelióza, kvasinky, toxoplazmóza či malárie apod.) při potřebě vyšetření virů, jejichž životní cyklus zahrnuje infekci buněk krve (parvovirus, cytomegalovirus, EBV apod.). Krev není zcela sterilní materiál! Obsahuje specifický inhibitor polymerázy Hem Plazma či sérum vkládá se do izolace NK přímo Je homogenní V plasmě lze NK inf.agens kvantifikovat Plazma je nejdůležitějším vzorkem pro detekci virů, které se uvolňují do krve, především virů hepatitid C a B. Plasma není zcela sterilní ; obsahuje volné NK Plazmu nezahřívat! Moč Vkládá se do izolace NK přímo Je homogenní / snadno homogenizovatelná / obsahuje variabilní koncentrace frakcí Pro detekci STD a močových infekcí : chlamydie, méně často gonokoky ; legionely, borelie, viry Lze koncentrovat centrifugací (C.trachomatis) Běžně odebraná moč je kontaminovaná / katetrizovaná moč Může obsahovat inhibitory PCR (produkty rozpadu krve)
15 Sputum Přehled nejčastěji zpracovávaných vzorků tělní tekutiny Před izolací se ztekucuje a homogenizuje Nehomogenní viskózní materiál Obsahuje variabilní podíl buněčné frakce. Pro vyšetření respiračních patogenů mykobakterie, legionely, chlamydie a mykoplazmata, bordetely, vzácněji virů (cytomegalovirus, ) apod. Punkáty Vkládá se přímo do izolace NK Nehomogenní a variabilní; často obsahují inhibitory PCR punktáty synoviální tekutiny z kloubů - borelie ; punktáty perikardia, Sperma Vkládá se přímo do izolace NK Nehomogenní / variabilní při podezření na pohlavně přenosné choroby nebo pro vyloučení chlamydiové infekce u vzorku určeného pro in vitro fertilizaci. Mozkomíšní mok (CSF, likvor) Vkládá se přímo do izolace NK Homogenní primárně sterilní materiál / pro diagnostiku boreliózy ve stadiu napadení CNS, neurotropních virů (včetně HSV a VZV), méně často pak pro průkaz bakteriálních původců meningitid apod. lze centrifugací zkoncentrovat. Plicní aspiráty, výplach hrdla, BAL Vkládá se přímo do izolace NK Variabilní a nehomogenní Pro diagnostiku respiračních infekcí
16 Výtěry a stěry Přehled nejčastěji zpracovávaných vzorků ostatní materiály Provádějí se pomocí sterilního tamponu nebo kartáčku Stěry ze sliznic respiračního traktu - respirační patogeny Výtěry z pochvy, stěr z cervixu, výtěr s uretry - pro detekci původců STD (chlamydie, gonokoky, mykoplazmata, ureaplazmata, papilomaviry aj.) Předizolační úprava: tampony s výtěrem se vloží do fyziologického roztoku a třepáním se do něj uvolní zachycený klinický materiál / možno centrifugací zkoncentrovat Biopsie, vzorky pevných tkání Nehomogenní před izolací NK homogenizace biopsie jater pro detekci virů hepatitid, kožní biopsie pro detekci borelií nebo dermatomykóz, vzorky chlopní pacientů s infekční endokarditidou, plicní biopsie pro detekci mykobakterií nebo plísní apod Vzorky z katetrů, implantátů apod. Nehomogenní ; komplikovaný odběr mikroorganizmy uchycené v podobě biofilmu na površích Před izolací NK nutno mikroby z povrchu uvolnit do roztoku (seškrabováním či sonifikací) Z povrchů cévních katetrů lze detekovat původce septických stavů, mimo jiné i původce systémových mykóz u pacientů s febrilní neutropenií ; dále kloubní náhrady, umělé chlopně, cévní protézy,.. Stolice Vkládá se přímo do izolace NK vysoká míra inhibice ; speciální metody úpravy a izolace NK Pro detekce halikobaktera, rotaviru, ADeV,..
17 Rutinní použití mol.dg. metod v klinické praxi KLINICKÉ PRACOVIŠTĚ Indikace k vyšetření Odběr vzorku Transport LABORATOŘ Uchování vzorku Úprava vzorku
18 Zpracování vzorku před izolací NK Vzorky před izolací NK převést do stavu vhodného pro zvolenou izolační metodu Převedení do formy roztoku nebo alespoň suspenze Koncentrace materiálu (zvýšení citlivosti detekce) Homogenizace vzorků (tkáně, sputum vyšší výtěžky NK a vyšší pravděpodobnost záchytu hledaného agens) Nutnost minimalizovat rizika pro laboratorní personál. rizikové mikroorganizmy: Mycobacterium tuberculosis, Francisella tullarensis, leptospiry, Coxiella burnetii, viry chřipky, SARS, Ebola, viry hepatitid, případně i viry HIV, HPV, apod. Izolovaná RNA HCV je považována za infekční!
19 Rutinní použití mol.dg. metod v klinické praxi KLINICKÉ PRACOVIŠTĚ Indikace k vyšetření Odběr vzorku Transport LABORATOŘ Uchování vzorku Úprava vzorku Izolace NK
20 Izolace nukleových kyselin pro účely molekulární mikrobiologické diagnostiky Účelem je purifikace NK vhodné pro vložení do PCR - izolovat NK - zkoncetrovat (zvýšení citlivosti detekce) - zbavit příměsí / inhibitorů
21 Izolace nukleových kyselin pro účely molekulární mikrobiologické diagnostiky PRINCIP: vazba NK na amorfní SiO 2 Metoda kolonková 1. Vzorek je lyzován 2. NK se zachytává na kolonkách na SiO 2 3. Navázané NK na fritě kolonky jsou proplachovány v proplachovacích roztocích s využitím separace na kolonce 1. Čistá NK je uvolněna elucí do roztoku o nízké iontové síle PLUS Nízká cena MINUS Vyšší pracnost Nižší standardnost Obtížnější automatizace
22 Izolace nukleových kyselin pro účely molekulární mikrobiologické diagnostiky Metoda magnetická PRINCIP: vazba NK na Ab vázané na magnetickém nosiči 1. Vzorek je lyzován 2. NK se zachytává na magnetické kuličky pokryté specifickými anti-nk protilátkami 3. Navázané NK na kuličkách jsou propláchnuty s využitím separace magnetem v proplachovacích roztocích 4. Čistá NK je eluována specifickými roztoky PLUS Automatizace Jednoduchost práce Standardní výsledky MINUS cena
23
24 Izolace nukleových kyselin pro účely molekulární mikrobiologické diagnostiky vliv na citlivost detekce Citlivost molekulárních biologických metod je v diagnostice významně ovlivněna již ve fázi izolace NK Velkou roli zde hrají vstupní objem zpracovávaného vzorku míra zkoncentrování NK ve vzorku 1000 ul vzorku 100 ul izolátu NK PCR zkumavka (50 ul reakční objem) izolace zakoncentrování 10x 10 ul izolátu = 1/10 do PCR 2000 cp/ml cp/ml 2000 cp/ml 2cp/ul
25 Izolace nukleových kyselin pro účely molekulární mikrobiologické diagnostiky vliv na citlivost detekce Citlivost molekulárních biologických metod je v diagnostice významně ovlivněna již ve fázi izolace NK Velkou roli zde hrají vstupní objem zpracovávaného vzorku míra zkoncentrování NK ve vzorku 500 ul vzorku 100 ul izolátu NK PCR zkumavka (50 ul reakční objem) izolace zakoncentrování 5x 10 ul izolátu = 1/10 do PCR 2000 cp/ml cp/ml 1000 cp/ml 1cp/ul
26 Rutinní použití mol.dg. metod v klinické praxi KLINICKÉ PRACOVIŠTĚ Indikace k vyšetření Odběr vzorku Transport LABORATOŘ Uchování vzorku Úprava vzorku Izolace NK Analýza NK
27 Účelem je analýza izolované NK Analýza NK pro účely molekulární mikrobiologické diagnostiky průkaz, případně i kvantifikace NK patogenních mikroorganismů PCR metoda - příprava Master Mixů a kontrolního materiálu V rutinní praxi - komerční PCR kity - in house metody
28 In house metody a komerční metody detekce NK v klinické mikrobiologii - CE IVD Komerční diagnostika - zdravotnické přípravky pro in vitro diagnostiku NK infekčních agens V současné době se v regionu EU nesmí na trh uvádět zdravotnické přípravky pro in vitro diagnostiku (tzv. in vitro devices, zkr. IVD) bez prohlášení o shodě. Toto prohlášení se rutinně označuje jako CE IVD a je vystavováno či vydáváno oprávněnými institucemi v souladu se směrnicí Rady 98/79/ES ve znění pozdějších předpisů, jejichž požadavky jsou převzaty nařízením vlády ČR č. 453/2004 Sb. Certifikát se vydává pro každý typ diagnostika zvlášť a garantuje, že daný přípravek je vyráběn za podmínek splňujících požadavky citované směrnice. V současné době působí na evropském trhu řada výrobců in vitro diagnostických zdravotnických přípravků v oboru molekulární diagnostiky. Přípravky pro automatizované provozy velkých laboratoří dodávají zejména společnosti Roche, Abbott Laboratories, Siemens. Pro laboratoře zpracovávající menší objemy vzorků jsou určeny například výrobky od firem Digene, Nanogene, GeneProof, Quiagen aj. Výrobci přípravků pro humánní molekulární diagnostiku jsou podle nařízení vlády č. 453/2004 Sb. a 246/2009 Sb. povinni se registrovat a registrovat musí také své jednotlivé produkty. POZOR registrovat se musí i diagnostické laboratoře. Registrace se provádí u národních ministerstev zdravotnictví.
29 In house metody a komerční metody detekce NK v klinické mikrobiologii - CE IVD In house metody V případě, že si laboratoř komerční diagnostika nekupuje, ale připravuje si je sama, hovoříme o tzv. in house nebo home-made diagnostice. Laboratoř, která se pro tento způsob práce rozhodla, musí provádět rozsáhlé validační studie a musí kontrolovat každou šarži připravených mastermixů i všech kontrol. V případě, že tak nečiní, hrozí poměrně vysoké nebezpečí zkreslení výsledků vyšetření či vzniku chyb. To přímo ohrožuje pacienty a nese s sebou riziko eventuálních právních důsledků pro příslušné zdravotnické zařízení či laboratoř. Zkušenosti laboratoří pracujících s vlastními metodami však nejsou jednoznačně špatné a jejich výsledky mohou být i lepší než u laboratoří nakupujících diagnostika. Také náklady na samotnou reakci bývají nižší, než u komerčních diagnostik, ovšem za cenu vysokých nepřímých nákladů.
30 Jaká rizika mohou v molekulárně-biologické diagnostice nastat?
31 Jaká rizika mohou v molekulárně-biologické diagnostice nastat? Falešná pozitivita Falešná negativita
32 Správná laboratorní praxe - Riziko falešné pozitivity Základní problém: Vysoká citlivost (jednotky kopií) X zvýšené riziko kontaminace Křížová kontaminace (cross-contamination) při manipulaci silně pozitivních vzorků v blízkosti vzorků negativních (parvo, ADeV,..) Opatření - optimalizace work-flow ; systém kontrol Kontaminace amplifikačním produktem Při nesprávném work-flow nebo nevyhovujícím prostorovém vybavení výborný specifický templát pro PCR Opatření optimalizace work-flow ; systém kontrol ; enzymatická ochrana PCR Princip metody: dutp v PCR reakci se začlení namísto části dttp ; po přidání enzymu uracil-dna-gylosylázy před započetím PCR reakce rozštěpí kontaminující amplikony (jež obsahují dutp), a poté se při prvním cyklu PCR enzym denaturuje a inaktivuje Nespecifická vazba oligonukleotidů v průběhu PCR Chybný design PCR (v důsledku polymorfizmů v cílové sekvenci templátu ) Selhání parametrů přístroje Opatření testy specifity během návrhu ; validace přístrojů ; účast na EHK ; CE IVD kity
33 Správná laboratorní praxe - Riziko falešné negativity Selhání izolace NK Izolace není zanedbatelná součást detekčního procesu! Příčiny: vada izolačního kitu ; vada izolačního automatu ; lidské selhání Opatření: CE IVD kity a validované přístroje ; systém kontrol Inhibice enzymů amplifikační reakce Klinické vzorky obsahují inhibitory (hem, soli, zbytky z izolace NK, příliš vysoká koncentrace NK,..) Závažný problém u vzorků stolice, moči, tkání, spermatu, biopsií a špatně odebrané krve Opatření: vhodná izolační metoda ; systém kontrol (interní standard) Pozor inhibice může být jen částečná ; přesto ovlivní výsledek kvantitativního stanovení! Polymorfismus cílových nukleotidových sekvencí Chybný design PCR (v důsledku polymorfizmů v cílové sekvenci templátu ) Selhání parametrů přístroje nebo reakce (kitu) Opatření testy specifity během návrhu ; validace přístrojů ; účast na EHK ; CE IVD kity a validované přístroje ; neustálé inovace detekčního procesu Při návrhu - degenerované oligonukleotidy ; neustálé inovace detekční reakce s ohledem na vývoj poznatků Může dojít nejen k falešné negativitě, ale také jen k podhodnocení kvantifikace (jen částečná vazba oligonukleotidů snižuje efektivitu amplifikace) Ztráta cílové sekvence Vlivem selekce, mutace nebo ztrátou plasmidu nesoucího cílovou sekvenci Opatření: CE IVD kity a/nebo neustálá inovace ; účast na EHK ; odbornost personálu.
34 Systém reakčních kontrol Pozitivní kontrola (PK) Testuje selhání amplifikace Provádí se min.1 na celou vyšetřovanou sadu vzorků Musí generovat pozitivní signál o určité očekávané intenzitě Jako pozitivní kontrola slouží uměle připravený vzorek (plasmid,..) Pozitivní izolační kontrola (PIK) Testuje celý detekční proces (přidává se do vzorku před izolací a projde celým procesem) Provádí se min.1 na celou vyšetřovanou sadu vzorků Musí generovat pozitivní signál o určité očekávané intenzitě Jako pozitivní kontrola slouží uměle připravený vzorek (plasmid, izolát kmene,..) Bývá nahrazována IS přidaným do vzorku před izolací Kvantitativní standard / sada kalibrátoru Několik ředění PK slouží ke generování kalibrační křivky Umožnuje kvantitativní stanovení NK ve vzorku Jeho kvalita určuje přesnost kvantifikace
35 Systém reakčních kontrol NAT Interní standard Kontroluje rizika falešné negativity v důsledku inhibice reakce Je součástí KAŽDÉ jednotlivé reakce / detekce je zpravidla uměle připraven (plasmid / MIMICs) přidán přímo do amplifikační reakce - kontroluje inhibice PCR přidán do vzorku před izolací NK kontroluje izolaci a inhibici PCR zároveň (metodicky správnější ; u některých patogenů povinný postup) MIMICs metoda Interní standardy se připravují nejčastěji jako úseky NK ohraničené sekvencemi primerů používaných pro amplifikaci specifické sekvence NK hledaného patogenu. Při detekci mikroorganizmů s genomem tvořeným DNA se používají interní standardy připravené tzv. MIMICS metodu, kdy je uměle připravený úsek NK ohraničený sekvencemi specifických primerů začleněn do plazmidu a ten je pak používán jako interní standard. House-keeping kontrola V případě detekce RNA virů, zejména hepatitidy C a HIV, je výhodné používat namísto takto uměle připraveného klonovaného interního standardu koamplifikaci tzv. house-keeping genů či transkriptů (gen v eukaryotické buňce, který je exprimován ve všech typech buněk a ve všech vývojových stadiích; produkty kódované provozními geny jsou nezbytné pro základní funkce buňky).
36 Princip kvantitativně - kompetitivní PCR detekce Pathogen DNA Primer 1 Primer 2 DNA of internal standard
37 Positive sample Negative sample Inhibition Specific signal Signal for internal standard
38 Fluorescency Fluorescency Fluorescency Fluorescency Fluorescency Fluorescency Kontrola falešně negativního výsledku - z důvodu inhibice nebo neúčinné izolace vzorku Pozitivní vzorek Negativní vzorek Inhibice, neúčinná izolace 4 3,5 3 2,5 2 1,5 1 0, ,8 0,6 0,4 0, ,8 0,6 0,4 0, Specifický signál Cycle number Cycle number Cycle number 4 3,5 3 2,5 2 1,5 1 0, ,5 3 2,5 2 1,5 1 0, ,8 0,6 0,4 0, Signál pro interní standard Cycle number Cycle number Cycle number
39 Systém reakčních kontrol Negativní kontrola (NK) Kontroluje rizika falešné pozitivity v důsledku kontaminace PCR, master mixu, při přidávání vzorků Provádí se min.1x na vyšetřovanou sadu vzorků přidání sterilní vody (zaručeně bez přítomnosti NK) do amplifikační reakce namísto vzorku Musí být negativní Izolační negativní kontrola (INK) Kontroluje rizika falešné pozitivity v důsledku kontaminace procesu izolace NK do procesu izolace NK je namísto vzorku vložena sterilní voda Musí být negativní Na rozdíl od negativní kontroly indikuje nejen přítomnost kontaminace v samotné amplifikační reakci, ale také případnou kontaminaci při izolaci NK.
40 Kontrola kvality Rostoucí nároky klinických pracovníků a institucí na strandardizaci a spolehlivost mikrobiologických vyšetření, včetně molekulárněbiologických metod, vedou k nutnosti kontroly práce v laboratořích. Laboratoře by měly kvalitu své práce prokazovat a kliničtí pracovníci by se o kvalitu laboratoře měli zajímat. Pro účely standardizace slouží akreditace laboratoří podle norem ES ISO 15189, ES ISO Tyto normy popisují správný způsob práce mimo jiné i pro mikrobiologické laboratoře a vyžadují zavedený systém kontroly kvality
41 Interní kontrola kvality Účelem je snížení pravděpodobnosti nesprávných výsledků Rizika nesprávných výsledků důsledkem v klinice může být nesprávná diagnóza, neodhalení příčiny onemocnění, chybný postup v průběhu léčby Nesprávné výsledky: Postupy QC Kontrola: Falešná pozitivita Falešná negativita Chybná specifita výsledku Chybná kvantifikace systém laboratorních kontrol systém laboratorních kontrol systém lab.kontrol ; EHK systém lab.kontrol ; EHK Vnitřní technologická kontrola kvality systém laboratorních kontrol všech kroků detekce Externí (mezilaboratorní) technologická kontrola kvality srovnání výsledků laboratoře s mezinárodními standardy (EHK) Vnitřní procesní kontrola kvality a externí kontrola kvality řízení procesů systém řízení jakosti (ISO); dokumentace; externí kontrola notifikovanou osobou; specifické legislativní předpisy na úrovni zemí a na úrovni EU Certifikace použitých materiálů a přístrojů výrobce odpovídá za správnost výsledků při správném použití ; nutná je Kontrola kvality vývoje, výroby Certifikace / akreditace prostředí laboratoře Normy ISO a ISO ; ISO ; ISO 9001
42 Mezilaboratorní kontrola kvality Systém externích kontrol v mikrobiologické diagnostice (EHK) Klíčovou roli v systému kontroly kvality práce hraje externí kontrola kvality. Za přípravu externích kontrol je zodpovědná specializovaná externí instituce státní zdravotní ústavy / instituce privátní a státní Mezinárodní instituce (Instadt, Německo; QCMD Skotsko aj.), Metodika: Umělé kontrolní vzorky jsou rozeslány účastnícím se laboratořím Laboratoře provedou příslušná kvalitativní či kvantitativní stanovení a výsledky pošlou zpět Instituce pak srovnáním výsledků zjistí rozptyl v naměřených hodnotách, stanoví přijatelnou míru odchylky a posoudí, které laboratoře se do této odchylky vešly. Těm pak vystaví certifikát, kterým laboratoř prokazuje kvalitu své práce.
43 Mezilaboratorní kontrola kvality Systém externích kontrol v mikrobiologické diagnostice (EHK)
44 Jak by měla být uspořádaná laboratoř a co by měla obsahovat?
45 Work flow : Zamezení kontaminace PCR izolovanou NK Zamezení kontaminace amplifikačním produktem Efektivita práce (ergonomie) Vybavení: Uspořádání laboratoří a jejich vybavení pro detekci NK pomocí PCR. Zázemí personální a materiálové propusti ; sklady ; úklid ; likvidace odpadu PROSTOR 1 Úprava vzorku a izolace - provádí se v Biohazard boxu PROSTOR 2 Příprava amplifikační reakce provádí se v laminárním nebo v tzv. PCR boxu PROSTOR 3 vybavení pro gelovou elektroforézu NK Další specifické vybavení Prostory (samostatný prostor; dobře oddělený od 1 a 2 a na konci work-flow) Drobné lab.vybavení (pipety, centrifuga, termoblok,..) Termocykler (certifikovaný CE IVD, verifikovaný, validovaný) automatické izolátory / liquid handling systems / detekční automaty - specifické požadavky podle ISO (BSL3 /UTZ3) a legislativa pro zajištění bezpečností zdraví při práci - Biologické zbraně / GMO
46
47
48 Rutinní použití mol.dg. metod v klinické praxi KLINICKÉ PRACOVIŠTĚ Indikace k vyšetření Odběr vzorku Transport LABORATOŘ Uchování vzorku Úprava vzorku Izolace NK Analýza NK Interpretace klinická Klinické využití výsledku Následný postup Předání výsledku konzultace Laboratorní a klinická interpretace
49 Molekulární mikrobiologická diagnostika interpretace Interpretace je určena pro klinické pracovníky Laboratorní technologická interpretace vychází ze znalosti metod je nutné znát pozitiva a limity metod Klinická interpretace vyžaduje znalost klinické mikrobiologie prezentuje výsledky klinice ve využitelné podobě
50 Obecné zásady interpretace laboratorní diagnostiky Diagnózu nestanovují pracovníci laboratoře, ale ošetřující lékař! Využívá k tomu vedle poznatků o stavu pacienta i výsledky různých laboratorních vyšetření, a to včetně výsledků získaných molekulárněbiologickými metodami. Pro správnou interpretaci je tedy potřeba kombinovat výsledky molekulární diagnostiky s výsledky jiných laboratorních metod. Zejména jde o stanovení specifických protilátek (virové infekce, borelióza aj.) a nespecifických markerů infekce (například prokalcitonin, CRP). POZOR! Konečná interpretace výsledků a stanovení diagnózy musí být vždy prováděny v souvislosti s klinickým stavem pacienta. Neléčí se laboratorní výsledek, ale pacient!!!
51 negativní nález (-) Laboratorní interpretace mol.dg.. metod VÝSLEDKY LABORATORNÍHO VYŠETŘENÍ přítomnost nukleové kyseliny mikroorganizmu ve vyšetřeném vzorku nebyla prokázána kvalitativní pozitivní nález (+) přítomnosti nukleové kyseliny mikroorganizmu ve vzorku byla prokázána kvantitativní pozitivní nález přítomnost nukleové kyseliny mikroorganizmu ve vzorku byla prokázána a byla změřena kvantitativně (k/ml ; IU/ml ; IU/počet buněk ; k/g ; apod) inhibice reakce klinický vzorek nebylo možné vyšetřit z důvodu příliš vysokého obsahu inhibitorů PCR nevhodný odběr klinický vzorek nevyhovuje svou povahou nebo způsobem transportu požadovanému vyšetření (pro PCR není vhodná sražená krev; sérum transportované při vysoké teplotě nebo déle než 4 hodiny při +4 C nelze spolehlivě vyšetřit na virus hepatitidy C, apod.). Kontroly V případě, že kontroly nevycházejí, jak mají, by výsledky všech souběžně kontrolovaných reakcí měly být považovány za nevalidní a podle výsledků konkrétních kontrol by se měla opakovat buď PCR reakce, nebo i celá detekce.
52 Molekulární mikrobiologická diagnostika interpretace Vysoká senzitivita stanovení Výhodné při detekci obligátních patogenů, které se v zevním prostředí běžně nevyskytují (M. tuberculosis, borelie, viry hepatitid aj.), při testování krevních produktů (HCV, HBV, HIV) apod. Komplikace při interpretaci výsledků průkazu mikroorganizmů způsobujících latentní či inaparentní infekce bez klinického významu (EBV, cytomegalovirus, HHV6 aj.) nebo při detekci fakultativních patogenů a mikrobů vyskytujících se běžně v prostředí či jako součást mikroflóry (například stafylokoky, streptokoky, mykoplazmata, kvasinky a vláknité mikromycety), kde přílišná citlivost při nesprávné interpreataci může být zavádějící
53 Molekulární mikrobiologická diagnostika interpretace Teorie a praxe při dosažení maximální citlivosti stanovení Citlivost detekce konkrétní metody je zásadní parametr, jehož znalost je nezbytná pro správnou indikaci vyšetření i interpretaci výsledků. Laboratoř musí znát citlivost svých metod!!! Metody molekulární diagnostiky mohou teoreticky zachytit i jedinou kopii DNA ve vzorku vkládaném do detekce, čímž převyšují citlivost většiny ostatních diagnostických metod používaných v rutinní mikrobiologické diagnostice, v reálu tomu tak ale být nemusí Hlavním limitem amplifikačních metod je maximální možný ekvivalent vzorku, který lze do reakce vložit. Čím vyšší je koncentrace patogenu ve výchozím vzorku, tím vyšší je pravděpodobnost jeho záchytu. Citlivost metody pak můžeme zvýšit zkoncentrováním patogenu v klinickém materiálu. To do jisté míry lze u bezbuněčných materiálů (likvor, moč, sérum, plazma), velmi obtížné je to však u vzorků obsahujících buňky, například při vyšetření plné krve
54 Kvantitativní detekce Molekulární mikrobiologická diagnostika interpretace Možnost exaktně kvantifikovat infekční agens Rozlišení latentní a aktivní infekce Popis průběhu infekce Hodnocení reakce na léčbu Kvantifikace je zásadním přínosem zejména pro diagnostiku infekcí HCV a HBV, HIV, dále pak herpesvirů, CMV a EBV u imunodeficientních pacientů. Zjištění množství viru v krvi, tzv. virové dávky, umožní sledovat účinnost terapie v reálném čase, což jiné virologické metody prakticky neumožňují
55 Molekulární mikrobiologická diagnostika interpretace Příklad využití kvantitativního stanovení Pro správnou interpretaci výsledků kvantitativní PCR je potřeba znát symptomaticky kritické kvantitativní koncentrace (hladiny) infekčních agens, které jsou specifické pro určité klinické situace a jsou spojené s určitými klinickými projevy tzv. cut off Příkladem použití může být sledování viremie, tzv. virové dávky (virus load), u infekce CMV, kdy bylo experimentálně zjištěno, že kopií DNA viru CMV na 2 x 10 5 leu periferní krve je spojeno v 92 % případů se syptomatickým onemocněním u pacientů po transplantaci jater. Průkaz takové viremie pak umožňuje včas nasadit léčbu a zabránit dalšímu rozvoji této potenciálně velmi nebezpečné infekce. Bohužel, tyto hodnoty však nebyly dosud jednoznačně určeny či nejsou u řady mikroorganizmů k dispozici.
56 Molekulární mikrobiologická diagnostika interpretace Efekt přesnosti kvantifikace pro klinické použití Aby bylo možno efektivně odlišit různé naměřené hodnoty, musí laboratoř znát rozptyl měření každé své metody Laboratoř musí variabilitu svého diagnostiky testovat a musí být připravena o ní informovat klinika.
57 Molekulární mikrobiologická diagnostika - interpretace Příklad: Postupně každý den byla měřena virová dávka CMV v plazmě pacienta. Výsledky uvádí tabulka. Došlo skutečně k poklesu virové dávky, a tedy k účinku léčby? Pokud ano, kdy? Vyšetření Výsledek (kopií/ml) 1. den den den Experimentálně zjištěný rozptyl konkrétní metodiky kvantitativního stanovení virové nálože CMV byl: Vložená koncentrace (kopií/µl) Rozptyl měření (kopií/µl) Výsledky se porovnají se zjištěnými rozptyly použité metody qpcr. Analýza ukazuje, že mezi hodnotou z 1. a 2. dne vyšetření není rozlišitelný rozdíl, zatímco 3. den již došlo k významnému snížení virové nálože.
58 Molekulární mikrobiologická diagnostika interpretace Poznámky ke kvantifikaci metodou PCR Infekci nelze objektivně kvantifikovat když není možné získanou hodnotu standardizovat například vztáhnout na určitý objem, počet buněk, množství izolované NK apod. nebo nehomogenním rozložením agens (například biopsie, sputum,..)
59 Rychlost detekce Molekulární mikrobiologická diagnostika Výhoda může mít zásadní význam pro volbu efektivní terapie Příklady využití rychlosti stanovení: Septické stavy Invazivní infekce meningokoky, hemofily či streptokoky Virové infekce imunokompromitovaných pacientů Akutní infekce centrálního nervového sysytému Rychlost kompletní detekce: 3-4h ALE - vyšetření je nákladnější U méně závažných infekcí je zpravidla ekonomicky výhodnější vyšetřovat vzorky ve větších objemech najednou, a čeká se tedy na dostatek vzorků
60 Molekulární mikrobiologická diagnostika - cena Cena - náklady laboratorního vyšetření Metody molekulární diagnostiky se tradičně považují za drahé Důvody: Vysoké náklady na vývoj Vysoká cena vstupů Vysoká cena přístrojů Vysoké úhrady z pojistného Pokud je použití indikováno správně, vyplatí se Cena každého vyšetření je při nesprávné indikaci příliš vysoká
61 Nutnost neustálé inovace Správná laboratorní praxe Výrobce CE IVD diagnostika nebo v případě in-house metody odborný personál laboratoře odpovídají za sledování nejnovějších poznatků a za adekvátní inovace kitů nebo akreditované metody Jak na to? Studium, odborné články, konference Účast na EHK Zpětná vazba z kliniky Příklad ztráty plasmidu: při detekci C. trachomatis je mnoho rutinních metod cíleno do sekvence kryptického plazmidu, který je v buňce chlamydie obsažen v mnoha kopiích. To je sice výhodné kvůli zvýšení citlivosti detekce, na druhou stranu existuje významné procento kmenů chlamydií, které tento plazmid ztratily. Aby bylo možno detekovat takové kmeny, bylo potřeba metodu obohatit o současnou amplifikaci úseku genomové chromozomální DNA. Ta je v buňce přítomna vždy, ale jen v jedné kopii. Takto je možno detekovat s vysokou citlivostí kmeny s plazmidem a současně též kmeny bez plazmidu, i když někdy méně citlivě. Evoluční poznámka diagnostika samotná může představovat selekční tlak diagnostika samotná může představovat selekční tlak V poslední době se ukazuje, že systematická diagnostika zaměřená na určité konkrétní sekvence NK ve spojení s účinnou léčbou, eradikací nebo prevencí může představovat reálný selekční tlak. Díky němu pak může dojít k selekci populací mikroorganismů, které diagnostice unikají. Takové mikroorganismy pak mohou dlouhodobě unikat pozornosti. Řešením tohoto nebezpečí je zejména neustálé sledování epidemiologických údajů a nejnovějších poznatků klinické mikrobiologie a neustálé zlepšování diagnostických metod. Příkladem je tlak ATB na detekovatelné gonokoky, kdy výsledkem bylo zvýhodnění a následné dramatické rozšíření nedekovatelné mutanty.
62 Design diagnostických metod pro rutinní klinickou praxi Zadání - specifikace metody (cílový patogen a parametry detekce) Rešerše stavu poznání ; rešerše sekvencí a návrh PCR a izolace NK, včetně přípravy vzorku Optimalizace metody Návrh parametrů pro kontrolu kvality Návrh SOP pro přípravu reakčních složek a pro labor.detekci Příprava reakčních složek a provedení testů Verifikace a validace metody ; testování každé šarže vstupního materiálu (testy základních parametrů citlivost, specificita, přesnost stanovení ; stabilitní testy,..) Zpracování dokumentace pro akreditaci metody / akreditace Průběžné testy kvality a průběžné vyhodnocování Zpětná vazba / sledování stavu poznání / inovace
63 Z pohledu poptávky a nabídky po DNA diagnostice dochází k neustálému růstu trhu a v následujících letech se očekává jeho stálé zrychlování v této oblasti Podle mezinárodních analýz dosáhne trh s DNA diagnostikou v průběhu roku 2015 obratu přibližně až 5,6 miliardy USD Nucleic Acid Testing: A Global Market Report, San Jose, California (Vocus) June 3, 2010
64
v molekulárn rní mikrobiologické diagnostice R. Horváth
Správn vná laboratorní praxe v molekulárn rní mikrobiologické diagnostice R. Horváth Global Nucleic Acid Testing Market to Reach US$5.6 Billion by 2015, According to New Report by Global Industry Analysts,
VíceMolekulárně biologické metody v mikrobiologii. Mgr. Martina Sittová Jaro 2014
Molekulárně biologické metody v mikrobiologii Mgr. Martina Sittová Jaro 2014 Harmonogram 1. den Izolace DNA 2. den Měření koncentrace DNA spektrofotometricky, real-time PCR 3. den Elektroforéza Molekulární
Více10.2. Molekulární mikrobiologická diagnostika v klinické praxi Radek Horváth, Filip Růžička
10.2. Molekulární mikrobiologická diagnostika v klinické praxi Radek Horváth, Filip Růžička V současné době se v klinické mikrobiologické diagnostice stále více prosazují molekulární biologické metody.
VícePříloha č.5 Seznam PCR vyšetření
Příloha č.5 Seznam PCR vyšetření Obsah Virus hepatitidy B - kvalitativní průkaz... 2 Virus hepatitidy B - kvantita... 2 Virus hepatitidy C kvalitativní průkaz... 3 Virus hepatitidy C - kvantita... 3 Virus
VíceKonečná zpráva hodnocení různých způsobů přípravy vzorků pro AMPLICOR HPV test firmy Roche
Konečná zpráva hodnocení různých způsobů přípravy vzorků pro AMPLICOR HPV test firmy Roche Charakteristika testu: Set AMPLICOR HPV vyráběný firmou Roche je určený pro detekci vysoko-rizikových typů lidských
VíceDY D NE N X Hana Vlastníková
DYNEX Hana Vlastníková Molekulární biologie: Vybavení laboratoře na klíč Přístrojová technika Kompatibilní diagnostické soupravy Profesionální přístup SOP Technická podpora Servis Přístrojové vybavení:
VíceAplikace molekulárně biologických postupů v časné detekci sepse
Aplikace molekulárně biologických postupů v časné detekci sepse Mgr. Jana Ždychová, Ph.D. IKEM PLM - LLG Sepse je častou příčinou úmrtí během hospitalizace. Včasné nasazení odpovídající ATB terapie je
VíceDiagnostika infekce Chlamydia trachomatis pomocí molekulárně genetické metody real time PCR nejen u pacientek z gynekologických zařízení
Diagnostika infekce Chlamydia trachomatis pomocí molekulárně genetické metody real time PCR nejen u pacientek z gynekologických zařízení Mgr. Klára Vilimovská Dědečková, Ph.D. Synlab genetics s.r.o. Molekulární
VíceVÝZNAM NĚKTERÝCH FAKTORŮ PREANALYTICKÉ FÁZE V MOLEKULÁRNÍ BIOLOGII
VÝZNAM NĚKTERÝCH FAKTORŮ PREANALYTICKÉ FÁZE V MOLEKULÁRNÍ BIOLOGII Plíšková L., Hrochová K., Kutová R. Ústav klinické biochemie a diagnostiky FN Hradec Králové PREANALYTICKÁ FÁZE V MOLEKULÁRNÍ BIOLOGII
VíceExterní kontrola kvality sekvenačních analýz
Externí kontrola kvality sekvenačních analýz Radka Bolehovská 1, Lenka Plíšková 2, Kateřina Hrochová 2 Úsek molekulární biologie, 1 Ústav klinické mikrobiologie 2 Ústav klinické biochemie a diagnostiky
VíceMagPurix Viral Nucleic Acid Extraction Kit
MagPurix Viral Nucleic Acid Extraction Kit Kat. č. ZP02003 Doba zpracování: 40-55 minut pro MagPurix 12S 40-60 minut pro MagPurix 24 Použití Souprava MagPurix Viral Nucleic Acid Extraction Kit je určena
VíceAkreditovaný subjekt podle ČSN EN ISO 15189:2013 Zdravotní ústav se sídlem v Ústí nad Labem Oddělení virologie Praha Budínova 67/2, Praha 8
Vyšetření: Pořadové 802 - Lékařská mikrobiologie 1 Průkaz antigenu virů imunochromatografickou metodou [Průkaz SOP 026 ROTAVIRU, ADENOVIRU a NOROVIRU genoskupiny 1 a genoskupiny 2] 2 Stanovení nespecifických
VícePříloha je nedílnou součástí osvědčení o akreditaci č.: 443/2017 ze dne:
Vyšetření: 802 - Lékařská mikrobiologie 1 Průkaz antigenu virů imunochromatografickou metodou [Průkaz SOP 026 ROTAVIRU, ADENOVIRU a NOROVIRU genoskupiny 1 a genoskupiny 2] 2 Stanovení nespecifických protilátek
VíceZměny sazebníku výkonů pro mikrobiologické obory
Změny sazebníku výkonů pro mikrobiologické obory Ing. Hana Hrbáčková LTK CEM SZÚ 2011 - Původní návrh MZ Grant Evropského fondu pro regionální rozvoj Vítěznou nabídku na řešení Kultivace Seznamu zdravotních
VícePolymerázová řetězová reakce. Základní technika molekulární diagnostiky.
Polymerázová řetězová reakce Základní technika molekulární diagnostiky. Kdo za to může? Kary Mullis 1983 Nobelova cena 1993 Princip PCR Polymerázová řetězová reakce (polymerase chain reaction PCR) umožňuje
VíceDIAGNOSTICKÝ KIT PRO DETEKCI MINIMÁLNÍ REZIDUÁLNÍ CHOROBY U KOLOREKTÁLNÍHO KARCINOMU
Úvod IntellMed, s.r.o., Václavské náměstí 820/41, 110 00 Praha 1 DIAGNOSTICKÝ KIT PRO DETEKCI MINIMÁLNÍ REZIDUÁLNÍ CHOROBY U KOLOREKTÁLNÍHO KARCINOMU Jednou z nejvhodnějších metod pro detekci minimální
Více1. Definice a historie oboru molekulární medicína. 3. Základní laboratorní techniky v molekulární medicíně
Obsah Předmluvy 1. Definice a historie oboru molekulární medicína 1.1. Historie molekulární medicíny 2. Základní principy molekulární biologie 2.1. Historie molekulární biologie 2.2. DNA a chromozomy 2.3.
VíceKATALOG PRODUKTŮ 2015
KATALOG PRODUKTŮ 2015 www.geneproof.com Váš specialista na PCR diagnostiku! KATALOG PRODUKTŮ 2015 GeneProof a.s. je biotechnologická společnost zabývající se molekulární in vitro diagnostikou závažných
VíceValidace sérologických testů výrobcem. Vidia spol. s r.o. Ing. František Konečný IV/2012
Validace sérologických testů výrobcem Vidia spol. s r.o. Ing. František Konečný IV/2012 Legislativa Zákon č. 123/2000 Sb. o zdravotnických prostředcích ve znění pozdějších předpisů Nařízení vlády č. 453/2004
VícePREGRADUÁLNÍ VZDĚLÁVÁNÍ V LÉKAŘSKÉ MIKROBIOLOGII
PREGRADUÁLNÍ VZDĚLÁVÁNÍ V LÉKAŘSKÉ MIKROBIOLOGII Milan Kolář Lékařská fakulta UP v Olomouci ZÁVĚRY Z PŘEDCHÁZEJÍCÍCH SETKÁNÍ Výuka lékařské mikrobiologie patří k nezbytným předpokladům pro výuku klinických
VíceFakultní nemocnice Brno Laboratoře Oddělení klinické mikrobiologie Jihlavská 20, Brno
Vyšetření: 802 - Lékařská mikrobiologie, 804 Lékařská parazitologie, 805 Lékařská virologie, 822 Lékařská mykologie 1. Vyšetření mikroorganismů z klinického materiálu a z kultur mikroskopicky - barvený
VíceDIAGNOSTICKÝ KIT PRO DETEKCI MINIMÁLNÍ REZIDUÁLNÍ CHOROBY U KARCINOMU PANKREATU
Úvod IntellMed, s.r.o., Václavské náměstí 820/41, 110 00 Praha 1 DIAGNOSTICKÝ KIT PRO DETEKCI MINIMÁLNÍ REZIDUÁLNÍ CHOROBY U KARCINOMU PANKREATU Jednou z nejvhodnějších metod pro detekci minimální reziduální
VíceNAT testování dárců krve v ÚVN Praha
Oddělení hematologie a krevní transfuze NAT testování dárců krve v ÚVN Praha Ludmila Landová Organizace laboratorního vyšetření dárců krve - OHKT ÚVN Praha Konsolidované řešení ZVÝŠENÍ bezpečnosti pro
VíceLékařská mikrobiologie II
Publikováno z 2. lékařská fakulta Univerzity Karlovy (https://www.lf2.cuni.cz) LF2 > Lékařská mikrobiologie II Lékařská mikrobiologie II Napsal uživatel Marie Havlová dne 8. Březen 2013-0:00. Sylabus praktických
VíceOdběr, zpracování a uchování klinických vzorků
Obecně Výsledky laboratorních testů, zejména RT-PCR závisí na druhu klinického materiálu, odběru, uchování a transportu. Nejpodrobnější informace o přítomnosti infekčního agens poskytne analýza klinického
VíceSérologická diagnostika chřipky možnosti a diagnostická úskalí
Sérologická diagnostika chřipky možnosti a diagnostická úskalí Martina Havlíčková, Radka Limberková, Pavla Růžičková, Helena Jiřincová NRL pro chřipku, Státní zdravotní ústav K historii vyšetřování sér
VíceDIAGNOSTICKÝ KIT PRO DETEKCI MINIMÁLNÍ REZIUDÁLNÍ CHOROBY MRD EGFR
Úvod IntellMed, s.r.o., Václavské náměstí 820/41, 110 00 Praha 1 DIAGNOSTICKÝ KIT PRO DETEKCI MINIMÁLNÍ REZIUDÁLNÍ CHOROBY MRD EGFR Jednou z nejvhodnějších metod pro detekci minimální reziduální choroby
VíceOdběr a transport biologického materiálu do mikrobiologické laboratoře. Jana Juránková OKM FN Brno
Odběr a transport biologického materiálu do mikrobiologické laboratoře Jana Juránková OKM FN Brno Správný výsledek mikrobiologického vyšetření začíná správným odběrem biologického materiálu a jeho správným
VíceSekvenace aplikace ve virologické diagnostice. Plíšková Lenka FN Hradec Králové
Sekvenace aplikace ve virologické diagnostice Plíšková Lenka FN Hradec Králové Vývoj sekvenačních technik 2.generace sekvenování až tisíců molekul najednou 1.generace detekce DNA bazí za sebou Stratton
VíceKonsolidovaná laboratoř, organizace práce na laboratoři, kontrola kvality, laboratorní informační systém. Miroslav Průcha
Konsolidovaná laboratoř, organizace práce na laboratoři, kontrola kvality, laboratorní informační systém Miroslav Průcha Centralizace a konsolidace Nekonsolidovaná laboratoř - samostatné laboratoře OKB,
VíceMikrobiologické vyšetření jako podklad pro racionální cílenou antibiotickou terapii. Význam správné indikace vyšetření a dodržování
Mikrobiologické vyšetření jako podklad pro racionální cílenou antibiotickou terapii. Význam správné indikace vyšetření a dodržování preanalytické fáze Tamara Bergerová Ústav mikrobiologie FN Plzeň Mikrobiologické
VíceImplementace laboratorní medicíny do systému vzdělávání na Univerzitě Palackého v Olomouci. reg. č.: CZ.1.07/2.2.00/
Implementace laboratorní medicíny do systému vzdělávání na Univerzitě Palackého v Olomouci reg. č.: CZ.1.07/2.2.00/28.0088 KLINICKÁ MIKROBIOLOGIE Klinická mikrobiologie je medicínský obor - pojítko mezi
VíceZdravotní ústav se sídlem v Ústí nad Labem Oddělení virologie Praha Budínova 67/2, 180 81 Praha 8
Vyšetření: 802 - Lékařská mikrobiologie 1 Průkaz antigenu virů imunochromatografickou metodou [Průkaz SOP 026 ROTAVIRU, ADENOVIRU a NOROVIRU genoskupiny 1 a genoskupiny 2] 2 Stanovení nespecifických SOP
VíceLÉČBA VENTILÁTOROVÉ PNEUMONIE SPOLUPRÁCE INTENZIVISTY A MIKROBIOLOGA
LÉČBA VENTILÁTOROVÉ PNEUMONIE SPOLUPRÁCE INTENZIVISTY A MIKROBIOLOGA Chytra I 1., Bergerová T 2. ARK FN v Plzeň 1 Ústav mikrobiologie, FN Plzeň 2 VAP definice, rozdělení spolupráce intenzivisty a mikrobiologa
VíceDYNEX nabízí komplexní řešení v oblasti zpracování a analýzy biologických materiálů pomocí molekulárně biologických metod.
DYNEX nabízí komplexní řešení v oblasti zpracování a analýzy biologických materiálů pomocí molekulárně biologických metod. Od 1.1.2014 DYNEX jediným OFICIÁLNÍM (autorizovaným) distributorem společnosti
VícePracovní skupina pro molekulární mikrobiologii TIDE
16.9.2009 Pracovní skupina pro molekulární mikrobiologii TIDE Josef Scharfen NRL pro patogenní aktinomycety Oddělení lékařské mikrobiologie a imunologie Oblastní nemocnice Trutnov, a.s. SEMINÁŘ SLM PSMM
VíceLaboratorní di agnostik HBV HCV a Vratislav Němeček Státní zdravotní stav ústav
Laboratorní diagnostika HBV a HCV Vratislav Němeček Státní zdravotní ústav Rozdílná role sexuálního 30 přenosu HBV a HCV 25 Rozdíly v četnosti virové nálože 20 15 10 HCV RNA HBV DNA HBV 5 hlavní způsoby
VíceMagPurix Blood DNA Extraction Kit 200
MagPurix Blood DNA Extraction Kit 200 Kat. č. ZP02001-48 Doba zpracování: 50-60 minut pro MagPurix 12S 50-70 minut pro MagPurix 24 Použití Souprava MagPurix Blood DNA Extraction Kit 200 je určena pro izolátor
VíceVyužití molekulárně-biologických postupů a multimarkerových strategií v intenzívní péči. Marek Protuš
Využití molekulárně-biologických postupů a multimarkerových strategií v intenzívní péči Marek Protuš Sepsis - 3 Sepse je definovaná jako život ohrožující orgánová dysfunkce způsobená dysregulovanou odpovědí
VíceVyužití molekulárně-biologických postupů a multimarkerových strategií v intenzívní péči. Marek Protuš
Využití molekulárně-biologických postupů a multimarkerových strategií v intenzívní péči Marek Protuš Sepsis - 3 Sepse je definovaná jako život ohrožující orgánová dysfunkce způsobená dysregulovanou odpovědí
VíceZákladní pokyny pro odběry biologických vzorků na mikrobiologické vyšetření
ODBĚRY VZORKŮ Základní pokyny pro odběry biologických vzorků na mikrobiologické vyšetření Uchovávání a transport odebraných vzorků Odběry krve na průkaz protilátek (obecně) Stanovení protilátek komplementfixační
VíceSerologické vyšetřovací metody
Serologické vyšetřovací metody Serologické reakce Přímý průkaz Nepřímý průkaz průkaz antigenu průkaz nukleové kyseliny průkaz protilátek Nepřímý průkaz = průkaz specifických protilátek neboli průkaz serologický
VíceDiagnostické metody v lékařské mikrobiologii
Diagnostické metody v lékařské mikrobiologii Výuková prezentace z: Lékařské mikrobiologie Jan Smíšek ÚLM 3. LF UK 2009 Princip identifikace Soubor znaků s rozdílnou diskriminační hodnotou Základní problémy
VíceOdběry vzorků u pacientů s podezřením na infekci krevního řečiště
Odběry vzorků u pacientů s podezřením na infekci krevního řečiště Eva Krejčí Centrum klinických laboratoří, Zdravotní ústav se sídlem v Ostravě Lékařská fakulta Ostravské univerzity Infekce krevního řečiště
VíceSeptiFast. rychlá detekce sepse. Olga Bálková Roche s.r.o., Diagnostics Division
SeptiFast rychlá detekce sepse Olga Bálková Roche s.r.o., Diagnostics Division Požadavky kliniků Rychlá detekce a identifikace patogenů způsobujících sepsi Rychlé výsledky Výsledky do několika hodin Jednoznačné
VíceZávěrečná zpráva. Zkoušení způsobilosti v lékařské mikrobiologii (Externí hodnocení kvality) PT#M/32/2010 (č. 677) Identifikace herpetických virů
Státní zdravotní ústav Expertní skupina pro zkoušení způsobilosti Organizátor programů zkoušení způsobilosti akreditovaný ČIA, reg. č. 7001 Šrobárova 48, 100 42 Praha 10 Vinohrady Závěrečná zpráva Zkoušení
VíceIzolace nukleových kyselin
Izolace nukleových kyselin Požadavky na izolaci nukleových kyselin V nativním stavu z přirozeného materiálu v dostatečném množství požadované čistotě. Nukleové kyseliny je třeba zbavit všech látek, které
VíceBiochemická laboratoř
Biochemická laboratoř školní rok 2013/14 Ing. Jarmila Krotká 3. LF UK, Klinická biochemie, bakalářské studium Hlavní úkol biochemické laboratoře Na základě požadavku lékaře vydat co nejdříve správný výsledek
Více2012 STÁTNÍ ÚSTAV PRO KONTROLU LÉČIV
2 Novinky a změny v mikrobiologických textech, moderní mikrobiologické metody a trochu matematiky Ing. Ivana Kohoutová 3 Nové a revidované texty v ČL 2017 Doplněk 2018 5.1.1 Metody přípravy sterilních
VíceDiagnostická laboratoř Praha. Laboratorní příručka Příloha č.1. Přehled vyšetření prováděných v Laboratoři klinické mikrobiologie
Strana č: 1 Kultivační vyšetření výtěrů z horních cest dýchacích Kultivační vyšetření materiálu z dolních cest dýchacích (mimo TBC) B01/LKM B06/LKM B02/LKM Kultivační semikvantitativní vyšetření moče Typ
Více18.11.2011. 23.11.2011 prezentace OKMP 1
18.11.2011 23.11.2011 prezentace OKMP 1 Zasílání vzorků na mikrobiologické vyšetření Zásady,chyby a využití MVDr.Petr Ježek Organizační členění OKMP. OKMP MVDr.Petr Ježek ATB středisko MUDr.Romana Filová
VíceNové technologie v mikrobiologické laboratoři, aneb jak ovlivnit čas k získání klinicky relevantního výsledku
B I O M E D I C AL Nové technologie v mikrobiologické laboratoři, aneb jak ovlivnit čas k získání klinicky relevantního výsledku Jaroslav Hrabák CHARLES UNIVERSITY Obsah prezentace Historie, vývoj a trendy
VícePCR diagnostika lymeské borreliózy. Mgr. D. Berenová, J. Hořejší, Ing. A. Lukavská, RNDr. P. Kodym, CSc. Národní referenční laboratoř pro lymeskou borreliózu Centrum epidemiologie a mikrobiologie Státní
VíceSuchá krevní skvrna (Suchá krevní kapka, Dried Blood Spot)
Suchá krevní skvrna (Suchá krevní kapka, Dried Blood Spot) Kapka kapilární krve nanesena na testovací kartičku filtračního papíru a vysušena odběr z prstu ušního lalůčku z patičky (u novorozenců) odběrová
VíceMIKROBIOLOGICKÁ LABORATOŘ NEMOCNICE ŠUMPERK
Objednávající lékař (oddělení): Objednal: Pracoviště: Datum objednání: Objed. číslo Odběrová souprava Kusů Urogenitální mykoplazmata transportní médium Doporučujeme v kombinaci s 1672 nebo 1656 (stěr před
VíceMolekulární diagnostika
Molekulární diagnostika Odry 11. 11. 2010 Michal Pohludka, Ph.D. Buňka základní jednotka živé hmoty Všechny v současnosti známé buňky se vyvinuly ze společného předka, tedy buňky, která žila asi před 3,5-3,8
VíceDIAGNOSTIKA A MONITOROVÁNÍ INFEKCÍ ZPŮSOBENÉ LIDSKÝMI PAPILLOMAVIRY VYSOCE RIZIKOVÉHO TYPU POMOCÍ REAL TIME PCR
DIAGNOSTIKA A MONITOROVÁNÍ INFEKCÍ ZPŮSOBENÉ LIDSKÝMI PAPILLOMAVIRY VYSOCE RIZIKOVÉHO TYPU POMOCÍ REAL TIME PCR Michaela Kavanová, DiS. tel.: +420 221 985 476 mobil: +420 725 004 523 e-mail: michaela.kavanova@synlab.cz
VíceFilozofie validace. Je validace potřebná? Mezinárodní doporučení pro provádění validací ve forenzně genetických laboratořích
INVESTICE DO ROZVOJE VZDĚLÁVÁNÍ Vzdělávání v oblasti forenzní genetiky reg. č. CZ.1.07/2.3.00/09.0080 Mezinárodní doporučení pro provádění validací ve forenzně genetických laboratořích INVESTICE DO ROZVOJE
VíceAKTUÁLNÍ DOPORUČENÍ MIKROBIOLOGICKÉ DIAGNOSTIKY A ANTIBIOTICKÉ LÉČBY INFEKČNÍ ENDOKARDITIDY 21ST COLOURS OF SEPSIS, OSTRAVA
AKTUÁLNÍ DOPORUČENÍ MIKROBIOLOGICKÉ DIAGNOSTIKY A ANTIBIOTICKÉ LÉČBY INFEKČNÍ ENDOKARDITIDY 21ST COLOURS OF SEPSIS, OSTRAVA Jiří Sagan Klinika infekčního lékařství FN Ostrava a LF OU Aktuální doporučení
VíceOdběr a transport biologického materiálu do mikrobiologické laboratoře. Jana Juránková OKM FN Brno
Odběr a transport biologického materiálu do mikrobiologické laboratoře Jana Juránková OKM FN Brno Specifika odběrů pro bakteriologická vyšetření Správný výsledek mikrobiologického vyšetření začíná správným
VícePlíšková L. Ústav klinické biochemie a diagnostiky LF a FN Hradec Králové
PCR v diagnostice Lymeské boreliózy Plíšková L. Ústav klinické biochemie a diagnostiky LF a FN Hradec Králové obtížná Diagnostika lymeské boreliózy klinický obraz velmi rozmanitý anamnestické údaje (přisátí
VíceIMUNOENZYMATICKÉ SOUPRAVY K DIAGNOSTICE CYTOMEGALOVIROVÉ INFEKCE
INFEKČNÍ SÉROLOGIE Virologie IMUNOENZYMATICKÉ SOUPRAVY K DIAGNOSTICE CYTOMEGALOVIROVÉ INFEKCE Cytomegalovirus ELISA soupravy jsou určeny ke stanovení specifických protilátek třídy IgA, IgG a IgM v lidském
VíceMetody testování humorální imunity
Metody testování humorální imunity Co je to humorální imunita? Humorální = látková Buněčné produkty Nespecifická imunita příklady:» Lysozym v slinách, slzách» Sérové proteiny (proteiny akutní fáze)» Komplementový
VíceKATALOG. Chlamydia trachomatis,neisseria gonorrhoeae, Treponema pallidum, Mycoplasma genitalium,
CHARAKTERISTIKA SPOLEČNOSTI Institute of Applied Biotechnologies a.s. (IAB) je biotechnologická společnost působící v oblasti výzkumu a vývoje technologií, metodik a postupů molekulární biologie s cílem
VíceEUC Laboratoře s.r.o. EUC Laboratoře Praha Palackého 720/5, Praha 1
Pracoviště zdravotnické laboratoře:. Laboratoř biochemická a hematologická Palackého 70/5, 0 00 Praha. Laboratoř biochemická a hematologická Sokolovská /55,80 00 Praha 8. Laboratoř imunologická a alergologická
VíceInterpretace výsledků bakteriologických vyšetření
Interpretace výsledků bakteriologických vyšetření Veškeré nálezy vyšetření je nutno hodnotit vzhledem k diagnóze, věku, zánětlivým parametrům, klinickému stavu pacienta, ev. k dalším důležitým anamnestickým
VíceMetody testování humorální imunity
Metody testování humorální imunity Co je to humorální imunita? Humorální = látková Buněčné produkty Nespecifická imunita příklady:» Lysozym v slinách, slzách» Sérové proteiny (proteiny akutní fáze)» Komplementový
VícePříloha č.3. název specifikace druh odebrané odběrové podmínky skladování poznámky frekvence zpracování
Příloha č.3 Metodiky pro odběr biologického materiálu na bakteriologické kultivační vyšetření na oddělení klinické mikrobiologie - OKM Nemocnice Hranice a.s. vyšetření vyšetření zpracováním stand. statim
VíceValidace a verifikace v oboru lékařské mikrobiologie Dokument VV v.1
2010VALIDACE A VERIFIKACE DOKUMENT SLMČLSJEP v.2.doc1 Strana 1 (celkem 5) a verifikace v oboru lékařské mikrobiologie Dokument VV20100504v.1 Vypracovala: prim. MUDr.Eliška Bébrová, MUDr. Eva Žampachová,
VíceMagPurix Viral/Pathogen Nucleic Acids Extraction Kit B
MagPurix Viral/Pathogen Nucleic Acids Extraction Kit B Kat. č. ZP02012 Doba zpracování: 45-60 minut pro MagPurix 12S 45-65 minut pro MagPurix 24 Použití Souprava MagPurix Viral/Pathogen Nucleic Acids Extraction
VíceCENÍK PRO SAMOPLÁTCE - INFEKČNÍ SÉROLOGIE
Název Výkony základní vyšetření Výkony doplňující vyšetření Cena základní vyšetření Cena doplňující vyšetření Cena základní Cena doplňující vyšetření s 15% DPH vyšetření s 15% DPH ODBĚRY Odběry krve dospělý
VíceProblematika molekulárněmikrobiologické diagnostiky
Problematika molekulárněmikrobiologické diagnostiky Jaroslav Hrabák Téma jednání 1. Nepodkročitelná minima vybavení molekulárněmikrobiologické laboratoře Schválení dokumentu 1. Vzdělávání v molekulární
VíceAnalytické znaky laboratorní metody Interní kontrola kvality Externí kontrola kvality
Analytické znaky laboratorní metody Interní kontrola kvality Externí kontrola kvality RNDr. Alena Mikušková FN Brno Pracoviště dětské medicíny, OKB amikuskova@fnbrno.cz Analytické znaky laboratorní metody
VícePřínos metody ELISPOT v diagnostice lymeské boreliózy
Přínos metody ELISPOT v diagnostice lymeské boreliózy A. Ondrejková, I. Špačková, H. Švandová Laboratoř klinické imunologie a alergologie, Laboratoře AGEL a.s., Nový Jičín Lymeská borelióza - LB Epidemiologie:
VíceSeznam vyšetření Pracoviště virologie
Obsah: Seznam vyšetření Pracoviště virologie A/ Diagnostika hepatitid a HIV 2 Protilátky proti viru hepatitidy A, IgM a celkové (total) 2 HBsAg, povrchový antigen viru hepatitidy B.. 2 Anti-HBs, protilátky
VíceANTIBIOTICKÁ LÉČBA OFF-LABEL Z POHLEDU MIKROBIOLOGA. Milan Kolář Ústav mikrobiologie FNOL a LF UP v Olomouci
ANTIBIOTICKÁ LÉČBA OFF-LABEL Z POHLEDU MIKROBIOLOGA Milan Kolář Ústav mikrobiologie FNOL a LF UP v Olomouci Septický pacient s nozokomiální pneumonií Endosekret: KLPN + ESCO Terapie: PPT + GEN INTERPRETACE?
VíceK čemu slouží záznam provedených výkonů logbook?
K čemu slouží záznam provedených výkonů logbook? Předkládaný Záznam provedených výkonů ve specializačním vzdělávání neboli logbook je součástí vzdělávacího programu a slouží k evidenci průběhu odborné
VíceEUC Laboratoře s.r.o. EUC Laboratoře Praha Palackého 720/5, Nové Město, Praha 1
Pracoviště zdravotnické laboratoře:. Laboratoř biochemická a hematologická Palackého 70/5, 0 00 Praha. Laboratoř biochemická a hematologická Sokolovská 3/55,80 00 Praha 8 3. Laboratoř imunologická a alergologická
VíceObsah LABORATOŘ MOLEKULÁRNÍ DIAGNOSTIKY
Strana č.:/celkem stran: 1/10 Obsah LABORATOŘ MOLEKULÁRNÍ DIAGNOSTIKY 401 ApoB 100 detekce mutací R3500Q a R3531C... 2 402 ApoE... 2 403 Farmakogenetika thiopurinových léčiv (TPMT)... 3 404 BAR2 Gln27Glu/Arg16Gly...
Vícenázev počet, specifikace druh odebrané odběrové podmínky skladování poznámky venózní krev srážlivá krev 5 ml sterilní zkumavka
vyšetření vyšetření zpracováním stand. statim stand. vč.citlivosti prův. listu listu materiálu množství pomůcky po odběru krk, nos 24 hod. 3 dny mikrobiologické vyš. krk - nos ráno, na lačno pokojová teplota
VíceVýznam sekvenační analýzy v mikrobiologické diagnostice
Význam sekvenační analýzy v mikrobiologické diagnostice Plíšková L., Kutová R., Bolehovská R., Ryšková L. ÚKBD, ÚKM FN Hradec Králové FONS 2012 Široké použití v mikrobiologii Identifikace mikroorganizmů
VíceImplementace laboratorní medicíny do systému vzdělávání na Univerzitě Palackého v Olomouci. reg. č.: CZ.1.07/2.2.00/
Implementace laboratorní medicíny do systému vzdělávání na Univerzitě Palackého v Olomouci reg. č.: CZ.1.07/2.2.00/28.0088 Hybridizační metody v diagnostice Mgr. Gabriela Kořínková, Ph.D. Laboratoř molekulární
VíceSeznam vyšetření Pracoviště virologie
Obsah: Seznam vyšetření Pracoviště virologie A/ Diagnostika hepatitid a HIV 2 Protilátky proti viru hepatitidy A, IgM a celkové (total) 2 HBsAg, povrchový antigen viru hepatitidy B.. 2 Anti-HBs, protilátky
VíceVÝSKYT PROTILÁTEK TŘÍDY IgM PO VAKCINACI PROTI VIROVÉ HEPATITIDĚ A
VÝSKYT PROTILÁTEK TŘÍDY IgM PO VAKCINACI PROTI VIROVÉ HEPATITIDĚ A Ing. František Štumr, Ph.D., RNDr. Stanislava Fabiánová, Ing. Barbara Štumrová, MUDr. Zuzana Kala Grofová PharmDr. Jiří Skalický, Ph.D.
VíceKontakt Telefon: 485 313 020 Služba : 485 313 033 ATB : 485 313 029
Klinický materiál odeslaný do laboratoře je zpracován dle standardních postupů (SOP) a vyšetření je kódováno dle sazebníku zdravotnických. O dalším vyšetřovacím postupu rozhoduje lékař se specializovanou
VíceSuchá krevní skvrna (Suchá krevní kapka, Dried Blood Spot)
Suchá krevní skvrna (Suchá krevní kapka, Dried Blood Spot) Kapka kapilární krve (z prstu, ušního lalůčku nebo v případě novorozenců z patičky), je nanesena na testovací kartičku filtračního papíru a vysušena
VíceZávěrečná zpráva. PT#M/10-1/2017 (č. 964) Sérologie HBV, HCV, HIV. Zkoušení způsobilosti v lékařské mikrobiologii (Externí hodnocení kvality)
Státní zdravotní ústav Expertní skupina pro zkoušení způsobilosti Poskytovatel zkoušení způsobilosti akreditovaný ČIA podle ČSN EN ISO/IEC 17043, reg. č. 7001 Šrobárova 48, 100 42 Praha 10 Vinohrady Závěrečná
VíceÚloha protein-nekódujících transkriptů ve virulenci patogenních bakterií
Téma bakalářské práce: Úloha protein-nekódujících transkriptů ve virulenci patogenních bakterií Nové odvětví molekulární biologie se zabývá RNA molekulami, které se nepřekládají do proteinů, ale slouží
VíceSkrytá tvář laboratorních metod? J. Havlasová, Interimun s.r.o.
Skrytá tvář laboratorních metod? J. Havlasová, Interimun s.r.o. Vlastnosti charakterizující laboratorní metodu: 1. z hlediska analytického přesnost/ správnost ( nejistota měření ) analytická citlivost
VíceJ09 Průkaz nukleové kyseliny
J09 Průkaz nukleové kyseliny VLLM0421c (jaro 2016) Osnova využití a metody průkazu NK PCR a její modifikace proces prokazování specifické sekvence NK 2/55 Přímé vs. nepřímé metody přímé hledáme mikroba,
VíceCENÍK PRO SAMOPLÁTCE - INFEKČNÍ SÉROLOGIE
ODBĚRY Výkony Výkony Odběry krve dospělý 09119 41,00 Kč 48,00 Kč Odběr krve do 10 let 09117 74,00 Kč 85,00 Kč Odběr kapilární krve 09111 34,00 Kč 39,00 Kč Separace séra 97111 19,00 Kč 22,00 Kč Odběr jiného
VíceZávěrečná zpráva. PT#M/11/2017 (č. 965) Identifikace respiračních virů. Zkoušení způsobilosti v lékařské mikrobiologii (Externí hodnocení kvality)
Státní zdravotní ústav Expertní skupina pro zkoušení způsobilosti Poskytovatel programů zkoušení způsobilosti akreditovaný ČIA podle ČSN EN ISO/IEC 17043 reg. č. 7001 Šrobárova 48, 100 42 Praha 10 Vinohrady
VíceMykologická analýza potravin
Mykologická analýza potravin a. Souhrn V roce 2010 byl zahájen druhý dvouletý cyklus nově uspořádaného Monitoringu dietární expozice člověka a tím i pozměněného projektu "MYKOMON". Vzhledem k detailnějšímu
VíceZávěrečná zpráva. PT#M/13-14/2017 (č ) Detekce HBV-DNA a HCV-RNA. Zkoušení způsobilosti v lékařské mikrobiologii (Externí hodnocení kvality)
Státní zdravotní ústav Expertní skupina pro zkoušení způsobilosti Poskytovatel zkoušení způsobilosti akreditovaný ČIA podle ČSN EN ISO/IEC 17043, reg. č. 7001 Šrobárova 48, 100 42 Praha 10 Vinohrady Závěrečná
VíceSada artus HBV QS-RGQ
Sada artus HBV QS-RGQ Výkonnostní charakteristiky Sada artus HBV QS-RGQ, verze 1, 4506363, 4506366 Před samotným testem si ověřte dostupnost nových revizí elektronického značení na adrese www.qiagen.com/products/artushbvrgpcrkitce.aspx.
VíceKATALOG PRODUKTŮ.
KATALOG PRODUKTŮ 2017 www.geneproof.com ana etection Your specialist for PCR diagnostics! simplicity accuracy ation user-frie accuracy bility se i tics stability satisfa ndly ction e gene expr microbiology
VíceLABORATOŘE EUROMEDIC s.r.o. Oddělení klinické mikrobiologie a autovakcín
Přehledy nejčastějších původců komunitních infekcí a jejich rezistence k antimikrobiálním látkám dle materiálů vyšetřených v mikrobiologické laboratoři v roce 2012. MUDr. Alžbeta Ouertani Říjen 2013 Respirační
VíceAutomatizace v imunohematologii - včera, dnes a zítra? Ondřej Zedníček LAB-MED Systems s.r.o. Ostrava
Automatizace v imunohematologii - včera, dnes a zítra? Ondřej Zedníček LAB-MED Systems s.r.o. Ostrava Automatizace Rozvoj automatizace v imunohematologii umožněn až rozvojem výpočetní techniky - umělá
Vícesynlab czech s.r.o. Laboratoř České Budějovice, Vrbenská 197/23 sekce mikrobiologie Vrbenská 197/23, České Budějovice SOP A.
Vyšetření: 1 Kultivační vyšetření výtěrů z horních cest dýchacích včetně izolace a identifikace Bordetella pertussis a parapertussis 2 Kultivační vyšetření výtěrů z rekta 3 Kultivační vyšetření moče ke
VíceOdběry biologického materiálu. Markéta Vojtová VOŠZ a SZŠ Hradec Králové
Odběry biologického materiálu Markéta Vojtová VOŠZ a SZŠ Hradec Králové Vyšetření biologického materiálu 1 Určení správné diagnozy a následné terapie Informace, které doplňují anamnestické údaje, fyzikální
Více