BIOLOGIE PARAZITŮ N032

Transkript

1 Univerzita J. E. Purkyně v Ústí nad Labem Přírodovědecká fakulta BIOLOGIE PARAZITŮ N032 Karina Šondová Ústí nad Labem 2013

2 Obor: Biologie jednooborová NMgr. (PS) Klíčová slova: parazit, hostitel, parazitóza protozoologie, helmintologie, arachnoentomologie, veterinární parazité, imunologie, diagnostické metody Projekt Mezioborové vazby a podpora praxe v přírodovědných a technických studijních programech UJEP Registrační číslo projektu: CZ.1.07/2.2.00/ Tento projekt byl podpořen z Evropského sociálního fondu a státního rozpočtu České republiky.

3 PROTOZOOLOGIE současný význam: významní parazité člověka a hospodářských zvířat, mimo jiné původci malárie (500 miliónů infikovaných, 2 miliardy ohrožených lidí, 1-3 miliony úmrtí za rok) klasifikace dosud není jednotná Protozoa jsou považována za podříši, v současné době se rozdělují do 5 kmenů, kdy 6. kmen (Microspora) je ve své klasifikaci v současnosti diskutabilní (prvoci x mnohobuněční) nejvýznamnější protozoární onemocnění: GeneralBiology/Microbiology/ParasiticProtozoa/ParasiticPr otozoa.htm

4 Řád: Kinetoplastida - bičíkovci s 1-2 bičíky - kinetoplast (mimojaderná DNA- až 40%) Podřád: Bodonina: volně žijící, 2 bičíky, rod Bodo, Ichthyobodo necator, Trypanoplasma, Cryptobia Podřád: Trypanosomatina: - pouze 1 bičík, u některých forem srostlý s tělem a vytváří undulující membránu, nejvýznamnější rody: Trypanosoma a Leishmania, morfologické formy

5 kinetoplast

6 encefalitida (zánět mozku) meningitida (zánět obalů)

7 EPIDEMIOLOGICKÝ VÝVOJ SPAVÉ NEMOCI

8 Trypanosoma congolense Trypanosoma vivax Trypanosoma brucei brucei - africká trypanosomiáza zvířat = NAGANA - přenašečem Glossina Trypanosoma equiperdum - hřebčí nákaza = DURINA (koňská příjice, syphilis equorum), - přenos pohlavním stykem 1. Stadium otoků 2. Stadium tolarových skvrn 3. Paralytické stádium

9

10

11 Řád: Diplomonadida: - zdvojený bičíkatý i jaderný aparát, bez mitochondrií a Golgiho aparátu - adhezivní disk - nejvýznamnější rody: Giardia (č. Giardiidae) a Spironucleus, Hexamita (č. Hexamitidae)

12 Čeleď: Hexamitidae Spironucleus 2 tenké a překřížené cytostomy, protáhlá jádra, 2 x 4 bičíky (2 cytostomální) Spironucleus muris: patogenní endoparazit myší S. meleagridis: způsobuje enteritis u krůťat S. elegans: patogenní pro cichlidy Významní příbuzní zástupci: Retortamonas intestinalis: hostitelem člověk (tlusté střevo) Chilomastix mesnili: x 3-5 mm, tlusté a slepé střevo člověka, hruštičkovité cysty 7-10 mm Enteromonas hominis: 4-10 x 3-6 mm, rozšíření kosmopolitně, tlusté střevo člověka - nepatogenní Oxymonády: komenzálové ve střeve obratlovců (obojživelníci, ještěrky, morčata), bezobratlých (švábi, termiti) Oxymonas spp.

13 Spironucleus meleagridis: drůbež Spironucleus columbae: holubi Hexamita pitheci: tlusté střevo opic Hexamita teres: svišti a veverky Octomitus intestinalis: slepé střevo hlodavců Další druhy rodu Giardia: G.agilis - obojživelníci G.muris - hlodavci G.microti - hlodavci G.ardeae vodní ptáci (volavka) G.psittaci - papoušci G.caviae - morčata

14 Řád: Trichomonadida: bičíků, parabazální aparát (GA), hydrogenozomy (mitochondrie) a lysosomy - nejvýznamnější rody: Trichomonas, Histomonas (ptáci), Dientamoeba

15 Významní příbuzní zástupci u člověka: Trichomonas tenax: - jednoramenný parabazální aparát, kulatější jádro, delší UM, hydrogenozomy pod kostou Hostitel: člověk - ústní dutina, bronchy Diagnostika: mikroskopický nález, kultivace Pentatrichomonas hominis: předních bičíku, UM dosahuje ke konci těla, vlečná část zadního bičíku, kulovité jádro, parabazální aparát drobný, diskovitý Hostitel: člověk, různí savci - tlusté střevo, nepatogenní Dientamoeba fragilis: - nemá bičík, laločnaté pseudopodie, má parabazální aparát, hydrogenozomy. Patologie: mírně patogenní - hlenovité průjmy, bolesti břicha, tlusté střevo člověka Přenos: netvoří cysty, pomocí vajíček roupa dětského)

16

17 č. Monocercomonadidae: Histomonas meleagridis: krůty, kur, bažantovití a tetřevovití Dientamoba fragilis Č. Retortamonadidae: Chilomastix mesnili, Ch.cuniculi, Ch.equi Č. Trichomonadidae Tritrichomonas foetus: skot Trichomonas gallinae: holubi, kur, krůty a volně žijící ptáci Tetratrichomonas gallinarum: kur, krůta, bažantovití a vrubozobí Trichomonas felistomae Trichomonas canistomae Pentatrichomonas hominis: opice, psi, kočky a hlodavci

18 Histomonas meleagridis

19 Kmen: Apicomplexa: - vývojový cyklus má tyto hlavní části: 1. excystace 2. merogonie (schizogonie) 3. gametogonie 4. sporogonie - kokcidie (podřád: Eimeriina) - hemosporidie (podřád: Haemosporina)

20 č. Eimeriidae : KOKCIDIÓZA - onemocnění králíků, drůbeže a holubů - akutní kokcidióza: příznaky podle patogenity každého druhu rodu Eimeria, průjmy, nechutenství, zchvácenost, léze na nakažené tkáni, po přečkání akutní kokcidiózy je jedinec odolný vůči nové nákaze stejným druhem - nejvýznamnější u králíků: epitel žlučových kanálků v játrech či ve střevě - Livacox u drůbeže Laboratorní diagnostika: 1) koprologické vyšetření s nálezem oocyst v trusu 2) mikroskopické vyšetření a seškraby sliznice střeva při pitvě 3) diferenciální diagnostika

21 Eimeria: 4 sporocysty, 2 sporozoiti Isospora: 2 4 (Isospora canis, I. felis) Wenyonella: 4-4 Tyzzeria: Caryospora: (Caryospora simplex) č. Sarcocystidae podč. Toxoplasmatinae Toxoplasma gondii Neospora caninum: pes, kočka, přežvýkavci, kůň a hlodavci Sarcocystis cruzi, S. hominis

22 č. Cryptosporidiidae: KRYPTOSPORIDIÓZA - původce: Cryptosporidium parvum - zdroj: nemocný člověk, volně žijící i domácí zvířata (hovězí dobytek) - přenos: fekálně-orální znečištěnými prsty, voda, potraviny kontaminované oocystami - inkubační doba: 5 dnů - onemocnění: a) u imunokompetentních- dospělých: *asymptomatická forma - dětí: * manifestní forma - příznaky: 14 dnů trvající vodnaté průjmy, zvracení, teplota, bolesti břicha 1976: první případ nákazy člověka

23 - po ukončení vývojového cyklu prvoka spontánní uzdravení b) u imunodeficientních pacientů (zejména AIDS) představuje jednu z oportunních parazitóz - příznaky: chronické, život ohrožující těžké vodnaté průjmy, horečka, bolesti břicha, hubnutí, někdy průnik do plic» plicní komplikace Laboratorní diagnostika: přímý mikroskopický průkaz oocyst ve stolici

24 OSOBY S IMUNODEFICITEM (z různých příčin) chronický vodnatý průjem, může být příčinou smrti (ČR: 3 osoby zemřely) AIDS CD4 T<180/mm3 (kritická hodnota) celé střevo (po rektum, horní partie GIT vč. jícnu) mimostřevní nákazy: žlučovody, žlučník, dýchací trakt 33% osob s AIDS: nezvladatelný průjem, připomíná choleru dehydratace, minerálový rozklad

25

26 BIOPSIE SLIZNIC, SEKČNÍ MATERIÁL

27 2 větve vývoje: 1) Střevní (kulaté oocysty): C. canis, C. hominis, C. parvum (1910), C. felis, C. wrairi: savci C. baileyi, C. meleagridis: ptáci C. saurophilum: plazi C. nasorum, C. molnari: ryby 2) Žaludeční (oválné oocysty): C. muris (1904): hlodavci C. andersoni: přežvýkavci C. serpentis: plazi C. galli: ptáci

28

29

30 Podřád: Hemosporina č.plasmodidae: Plasmodium: savci Haemoproteus: ptáci Leucocytozoon: ptáci Podřád: Adeleina č. Haemogregarinidae Hepatozoon canis et felis Řád: Piroplasmida Babesia Theileria č. Babesidae č. Theileriidae

31 Toxoplazmóza _tyden2012.pdf

32 Kmen: Ciliophora: - 2 jádra, generativní=micronucleus a vegetativní= macronucleus - pohlavní rozmnožování konjugací BALANTIDIÓZA: - původce: Balantidium coli - výskyt: kosmopolitní výskyt v zemích, kde jsou chována prasata, častější v tropech - zdroj: člověk se nakazí perorálně cystami z prasat pozřením znečištěné potravy obsahující cysty z trusu prasat - onemocnění: nákaza může zůstat bez příznaků či porušení stěny tlustého střeva a vředy podobné jako u úplavice, záněty a vředy tlustého střeva, krevní cestou může pronikat do jater a do plic, těžké nákazy můžou být smrtelné Laboratorní diagnostika: 1) při akutním onemocnění pohyblivá balantidia ve stolici 2) v latentní fázi koprologické vyšetření (cysty)

33

34 Mikrosporidie Říše: Fungi Oddělení: Zygomyceta? Třída: Microsporidia (Balbiani, 1882) Obligátní intracelulární endoparaziti v cytoplazmě hostitelů, 1300 druhů a 150 rodů, bezobratlí, obratlovci včetně člověka Kosmopolitní rozšíření, velikost spor cca. 1,5-2 µm Inmunodeficientní pacienti, nicméně asymptomatický průběh i u imunokompetentních jedinců, zoonotická nákaza, ale přítomnost i u běžné populace Rizikové faktory: kontakt s infikovanými zvířaty, perorální přenos kontaminované vody či potravin

35

36 Mikrosporidie člověka Enterocytozoon bieneusi Encephalitozoon intestinalis, E. cuniculi a E. hellem Ostatní (Vittaforma, Brachiola, Trachipleistophora.)

37 Přehled mikrosporidií nalezených u člověka čeleď rod druh lokalizace Pleistophoridae Trachipleistophora hominis svaly antropophtera mozek, srdce, ledviny, játra Pleistophora svaly Encephalitozoonidae Encephalitozoon cuniculi hellem intestinalis mozek, játra, ledviny, atd. oko, plíce, ledviny střevo, plíce, ledviny Enterocytozoonidae Enterocytozoon bieneusi střevo Nosematidae Nosema ocularum rohovka oka Brachiola vesicularum svaly connori plíce, srdce, játra, střevo... Vittaforma corneae rohovka oka nejisté řazení Microsporidium africanum ceylonensis rohovka oka rohovka oka

38 Životní cyklus Inhalace či perorální nákaza sporami, vzácně přímý kontakt přes poranění U zvířat transplacentární přenos (u lidí nikoliv) Epiteliální buňky gastrointestinálního a respiračního traktu, vývoj v prazitoforní vakuole (Encephalitozoon) či cytoplazmě (Enterocytozoon) -tlak na membránu a prasknutí host. buňky Spory vyloučeny stolicí

39 Cyklus Fáze infekce: germinace spory a invaze hostitelské buňky Proliferační fáze: replikace, merogonie Sporogoniální fáze: diferenciace, sporogonie

40

41 Diagnostika mikrosporidií stolice, tkáňová biopsie, histologie močový sediment či sputum při diseminované infekci Barvení kalkofluorem (fluorescenční mikroskop) Specifická barvení (Trichrom, Gram, Loeffler) Elektronová mikroskopie (TEM) Molekulární metody: PCR

42 Diagnostika mikrosporidiových infekcí a: kalkofluor b: PCR produkt

43 Specifická barvení

44 TEM vyšetření

45 Helmintologie = parazitičtí helminti Helmintologie = studium helmintů, onemocnění helminty = helmintózy Helminti = parazitičtí zástupci hlístů, tedy zástupci kmene Plathelminthes (ploší hlísti), Nemathelminthes (oblí hlísti) a Acanthocephala (vrtejši) Význam helmintů: medicínský i veterinární význam, závažná onemocnění člověka především v tropických zemích rozvojového světa, schistosomóza a filarióza zvlášť významné (pod Světovou zdravotnickou organizací WHO), jaterní, střevní a plicní motolice, střevní tasemnice, parazitické hlístice (škrkavky, měchovci, roupi, svalovci, kapilárce), běžní i v mírném pásmu (roupi a škrkavky), import z tropických zemí s rozvojem turistiky, atd. Vývojové cykly = složité životní cykly, vývoj přímý, nebo nepřímý přes mezihostitele či střídání hostitelů. Podle průběhu vývojového cyklu se dělí helminti na geohelminty a biohelminty

46 Třída: Trematoda (Digenea = motolice, flukes) - endoparazité především obratlovců (4000 druhů) - TS a přísavné orgány (ústní přísavka a břišní přísavka = acetabulum) dobře vyvinuty, tegumentální trny či ostny kolem ústní přísavky - někdy Brandesův orgán: pomocný přichycovací orgán, podílející se na fixaci a mimotělním trávení vylučováním enzymů - jejich potravou je střevní obsah, krev či tkáňová tekutina - vajíčko (oválné, silnostěnné, s víčkem = operculem pro opuštění miracidií) miracidium (volně pohyblivé a obrvené larvální stádium, které aktivně vyhledává 1. mezihostitele, měkkýše) sporocysta (v 1. MH, v měkkýši, mateřská a dceřinná generace) redie (asexuálním množením, aktivně konzumuje tkáň hepatopankreatu MH, 1 i více generací) cerkárie (aktivní stádium, které se uvolňuje z měkkýše do prostředí a pohybem ocásku = cercu vyhledává 2.MH či DH) metacerkárie (klidové stádium v 2. mezihostiteli či definitivním hostiteli) dospělec

47 - životní cyklus: a) monoxenní (jednohostitelský) bez mezihostele, u bezobratlých b) dixenní (dvouhostitelský) 1MH (Fasciola, Paraamphistomum, Schistosoma) c) trixenní (tříhostitelský) 2 MH (Clonorchis, Paragonimus, Dicrocoelium) d) tetraxenní (čtyřhostitelský) 3 MH, u strigeoidních motolic

48

49 Biomphalaria Bulinus Radix Succinea Helicella Lymnaea

50 Třída: MONOGENEA (jednorodí, žábrohlísti) převážně ektoparaziti vodních živočichů (ryb, paryb, obojživelníků, ale i želv a hrochů) vysoká hostitelská a tkáňová specifita celkem asi 5000 druhů, v ČR+SR asi 200 druhů slepě zakončená trávicí soustava hermafroditi s vnitřním oplozením jednohostitelský přímý vývoj s volně pohyblivou larvou (ta vyhledává dalšího hostitele) fixace na těle hostitele přichycovacím diskem na konci těla - tzv. opisthaptor (na něm různé háčky, svorky, přísavky) nejzávažnější problémy především u plůdku ryb z čeledi Cyprinidae

51 Dactylogyrus vastator: parazituje na žábrách ryb, patogeny plůdku Gyrodactylus salaris: parazituje na kůži ryb, živorodý, ekonomicky významný, zamořil některé řeky ve Skandinávii Polystoma inegerrimum: dospělci v močovém měchýři žab, larvy na pulcích Diplozoon paradoxum: žaberní parazit kaprovitých ryb, larva se uchytí na hostiteli a čeká na jinou larvu, se kterou sroste

52

53 PŘÍZNAKY Zrychlené dýchání Blednutí kůže

54

55 LÉČIVA Sera Mycopur TeraP FD Sera med Professional Tremazol,

56 Třída: Cestoda (tasemnice, tapewarms) - výhradně parazitická skupina helmintů - endoparazité trávicí soustavy obratlovců (3000 druhů) - bez segmentace, příchytné orgány na předním konci těla (mělké zářezy, rýhy, kruhové svalnaté přísavky, přísavné rýhy či štěrbiny=bothria, rostellum=zasunovatelný chobotek s rostellárními háčky, zasunovatelné tentakule (chapadélka) - tělo členěno na hlavičku (scolex), krček (cervix) a tělo (strobilum), z jednotlivých článků (proglotid), polyzoické = článkované - není vytvořená trávicí trubice, absence střeva, potrava přijímána povrchem těla, vstřebávání látek pomocí tegumentu - složité, nepřímé vývojové cykly - larva s embryonálními háčky v počtu 10 (dekakant, u primitivních tasemnic) či 6 (hexakant, u ostatních typických )

57 - vajíčko s larvou (onkosféra) s embryonálními háčky (kruhovky) či z vajíček se líhne larva ve vodním prostředí = koracidium (štěrbinovky) onkosféra perorální cestou pozřena MH přeměna procerkoid (u štěrbinovek), cysticerkoid (u kruhovek) = larvální stádia v tělní dutině členovců, cysticercus (larvální stádium v obratlovci), coenurus, echinokok, tetrathyridium nebo strobilocercus 3. larvální stádium = plerocerkoid (u tříhostitelských tasemnic) - dospělec

58 1 cysticerkus 2 cysticerkoid 3 cenurus 4 echinokokus

59 Zjednodušený systém tasemnic: Třídy: a) Gyrocotilida (střevo chimér) b) Amphilinida (tělní dutina jeseterů a želv) c) Eucestoda Řády: 1. Caryophyllidea (tělo tvořeno jedním článkem, MH nítěnky) 2. Pseudophyllidea (tělo tvoří více článků, přísavné rýhy = bothrie): difylobotrióza, ligulóza 3. Cyclophyllidea (4 přísavky, rostelum, háčky): teniidózy, hymenolepiózy

60 Echinococcus vogeli rozšíření: Střední a Jižní Amerika definitivní hostitel: psovité šelmy mezihostitel: Agoutis, paka, člověk onemocnění: polycystická hydatidatidóza dospělé tasemnice: 3,9-5 mm, 3 články Echinococcus oligarthrus rozšíření: Střední a Jižní Amerika definitivní hostitel: divoké kočky mezihostitel: Agoutis, paka, člověk onemocnění: polycystická hydatidatidóza dospělé tasemnice: 2,2-2,9 mm, 3 články

61

62 ZDRAVOTNICKY VÝZNAMNÉ TASEMNICE Řád Druh parazita Počet případů PSEUDOPHYLLIDEA Diphyllobothriidae Diphyllobotrium latum 16 miliónů D. pacificum? stovky Spirometra nízký CYCLOPHYLLIDEA Anoplocephalidae Bertiella spp nízký Davaineidae Railliettina spp. nízký Linstowiidae Inermicapsifer spp. nízký Mesocesatoidae Mesocestoides spp. nízký Dilepididae Dipylidium caninum nízký Hymenolepididae Hymenolepis nana 36 miliónů H. diminuta nízký Taeniidae Taenia solium 4,5 miliónů T. saginata 77 miliónů Multiceps multiceps nízký Echinococcus granulosus 2 5 miliónů E. multilocularis stovky E.vogeli desítky E.oligarthrus nízký

63 Kmen: NEMATHELMINTHES (oblí hlísti = roundworms) Třída: Nematoda (hlístice) - volně žijící formy v půdě i ve vodě a cizopasníci bezobratlých, obratlovců a rostlin, významní cizopasníci člověka (např. filárie) druhů - velikost 0,3 mm až 8,5 m -tělo je protáhlé, válcovité, vřetenovité, niťovité, nesegmentované, s odolnou mnohovrstevnou kutikulou, povrchové kutikulární útvary - pod kutikulou a hypodermis podélná svalovina - trávicí soustava dobře vytvořená s ústním i análním otvorem - nervová soustava tvořena 2 páry nervových vláken, spojených příčnými spojkami, jícnový nervový prstenec, množství smyslových orgánů - exkreční systém 2 laterální kanálky s exkrečním pórem, protonefridiální základ - orgány zanořené do pojivové tkáně (parenchymu)

64 - gonochoristi, pohlavní dimorfismus, oviparní (vejcorodí), ovoviviparní (již v děloze samice se líhnou larvy 1. stadia), viviparní (již vyvinuté larvy) - životní cyklus: a) geohelminti (přímý vývoj): vajíčko larva I. stadia 2 svlékání invazní larva III. stadia definitivní hostitel se nakazí perorálně nebo perkutánně (larvy pronikají aktivně povrchem těla) b) biohelminti (nepřímý vývoj přes mezihostitele): vajíčko mezihostitel (v něm vývoj larev až do invazního III. stadia) definitivní hostitel - častá přítomnost paratenických hostitelů

65 Třída: Adenophorea (= Aphasmida): infekčním stádiem L1 larva, fasnidy zcela chybí Trichuris trichiura, Trichinella sp. Třída: Secernentea (= Phasmida): infekčním stádiem L3 larva, párové chemoreceptory=fasmidy na zadním konci těla Ascaris lumbricoides (škrkavka dětská), Enterobius vermicularis (roup dětský), Heterodera schachtii (háďátko řepné), filariózy

66 LARVÁLNÍ TOXOKARÓZA původce: 1. Toxocara canis (škrkavka psí) 2. T. cati (škrkavka kočičí) přirození definitivní hostitelé: 1. pes, liška, vlk, apod.; 2. kočka Prevalence u DH v Evropě 5 50% rozšíření: kosmopolitní přenos na člověka: per os klinické formy infekce člověka: larva migrans visceralis (VLM) larva migrans ocularis (OLM) T. canis samci: 8-10 cm samice: 6-20 cm T. cati samci: 5-6 cm samice: 6-10 cm

67

68 vajíčky per-os konzumací výrobků z paratenických hostitelů (kuřecí či vepřová játra, jehněčí, apod.)

69

70 Významní zástupci hlístů u koní Řád: Ascaridida: Parascaris equorum Řád: Strongylida: Strongylus edentatus, S. equinus, S.vulgaris, Triodontophorus, Trichostrongylus axei, Dictyocaulus arnfieldi, Trichonema, Cylicocyclus, Cylicostephanus. Oesophagodontus Řád: Rhabditida: Strongyloides westeri Řád: Oxyurida: Oxyuris equi Řád: Enoplida: Trichinella spp. Řád: Spirurida: Habronemma muscae, Drachsia, Thelazia lacrimalis, Parafilaria multipapillosa, Setaria equina

71

72 Významní zástupci hlístů u prasat Řád: Ascaridida: Ascaris suum Řád: Strongylida: Hyostrongylus rubidus, Oesophagostomum dentatum, O. quadrispinulatum, O. brevicaudum, Globocephalus, Stephanurus dentatus, Metastrongylus elongatus Řád: Rhabditida: Strongyloides ransomi Řád: Oxyurida: Oxyuris Řád: Enoplida: Trichinella spp., Trichuris suis Řád: Spirurida: Ascarops strongylina, Physocephalus sexalatus, Gnathostoma hispidum

73

74 Významní zástupci hlístů u přežvýkavců Řád: Ascaridida: Neoascaris (Toxocara) vitulorum Řád: Strongylida: Trichostrongylus, Cooperia, Nematodirus, Chabertia, Oesophagostomum, Bunostomum, Dictyocaulus, Protostrongylus, Muellerius, Cystocaulus, Neostrongylus Řád: Rhabditida: Strongyloides papillosus Řád: Oxyurida: Skrjabinema ovis, S. caprae Řád: Enoplida: Trichuris, Capillaria Řád: Spirurida: Setaria, Thelazia

75

76 Biologie a význam plicnivek čeleď Dictyocaulidae Dictyocaulus viviparus skot, buvol, zebra Dictyocaulus filaria ovce, koza, muflon Dictyocaulus noerneri jelen, méně již daněk, srnec Dictyocaulus arnfieldi kůň, osel čeleď Protostrogylidae Muellerius capillaris ovce, koza, muflon, volně žijící přežvýkavci Muellerius tenuispiculatus kamzík Protostrongylus rufescens muflon, kamzík i další spárkatá zvěř Protostrongylus brevispiculum ovce Protostrongylus commutatus králík, zajíc Capreocaulus capreoli srnec Bicaulus sagitatus jelen, daněk Neostrongylus linearis muflon, kamzík Elaphostrongylus cervi jelen, srnec, los

77 čeleď Metastrongylidae Metastrongylus elongatus prase divoké, prase domácí Metastrongylus pudendotectus prase divoké, prase domácí Metastrongylus salmi prase divoké, prase domácí čeleď Angiostrongylidae Angiostrongylus vasorum pes, liška Aelurostrongylus abstrusus kočka čeleď Crenosomatidae Crenosoma vulpis pes, liška, jezevec, vlk, kočka Crenosoma mephidis skunk Crenosoma striatum ježek čeleď Filaroididae Filaroides hirthi pes a volně žijící masožravci Filaroides osleri pes a volně žijící masožravci

78 dospělí jedinci se lokalizují v průdušnicích, průdušinkách, samotných plicních sklípcích nebo plicních cévách vajíčka nebo larvy do průdušnic a s hlenem vykašlávány z plic, polknuty DH, přes TS s trusem do vnějšího prostředí, geohelminté se na povrchu půdy svlékají a larvy na traviny, pozřeny DH (př. Dictyocaulidae). Larvy biohelmintů vyhledávají MH (plži nebo žížaly), několikrát se svlékají. DH pozře MH, skrze střevní stěnu do střevních mízních uzlin, do mízního řečiště a do krevního oběhu. Krví jsou larvy plicnivek zavlečeny do plic, kde pohlavně dospívají a migrují do plicních sklípků, průdušinek nebo průdušnice, kopulují a produkují vajíčka či rovnou larvy.

79

80 Arachnoentomologie = parazitičtí členovci parazitičtí členovci- význam především jako ektoparazité přímé působení: kožní onemocnění (dermatitidy), červené skvrny, pupínky, puchýřky a vřídky, původci alergií (př. astmatických) a sání krve, myiáze nepřímé působení: přenos onemocnění: viry: encefalitida (klíšťata), žlutá zimnice (komáři) rickettsie (evropská skvrnivka přenášená vešmi) bakterie (mor přenášený blechami) spirochety (africká návratná horečka přenášená klíšťaty) protozoa: malárie (komáři), trypanosomózy (tse-tse), leishmannióza (koutule) helminti: filárie (komáři, muchničky, ovádi) Formy přenosu: a) inokulace = přímé vbodnutí při sání b) kontaminace = z exkrementů nebo výměšků po rozmačkání a vetření do kůže

81 Třída: Arachnida Řád: Acarina (roztoči) Podřád: Metastigmata (Ixodida) č. Ixodidae Ixodes ricinus, I.hexagonus, I.gibossus, I.persulcatus, I. rubicundus, I.scapularis, I.holocyclus Amblyomma americanum, A. testudinarum, A. variegatum Boophilus microplus, B. annulatus Dermacentor reticulatus, D. marginatus, D.albipictus Haemaphysalis concinna, H. punctata, H. inermis Hyalomma marginatum, H. asiaticum, H. anatolicum Rhipicephalus sanguineus, R. appendiculatus Margaropus Nosoma č. Argasidae Argas reflexus, A.persicus, A.polonicus, A. vespertilionis Ornithodoros moubata, O.lahorenis, O.tholozani Otobius megnini

82 Podřád: Mesostigmata (Gamasida) Dermanyssus gallinae Ophinyssus natrici Pneumonisoides caninum Pneumonyssus simicola Raillietia auris, R. caprae Sternostoma tracheocolum Varroa jacobsoni Podřád: Prostigmata (Trombidiformes) Demodex canis, D.cati, D.bovis, D.ovis, D.caprae, D.phylloides, D.equi, D. folicullorum, D.cricetti, D.cervi Cheyletiella yasguri, Ch.blakei, Ch.parasitivorax Psorergatis ovis Myobia musculi

83

84 Podřád: Astigmata (Sarcoptiformes, Acaridida) Sarcoptes scabiei (zákožka svrabová) Sarcoptes bovis, S.ovis, S.rupicaprae, S.suis, S.canis Notoedres cati Knemidicoptes mutans, K.pillae, K.laevis gallinae Psoroptes ovis, P.equi, P.cuniculi Chorioptes bovis, Ch.ovis, Ch.caprae, Ch.equi Otodectes cynotis Laminisioptes cysticola Listrophorus gibbus Cytodites nudus

85 Řád: Anoplura (vši) č. Haematopinidae: Haematopinus eurysternus, H.quadripertusus, H.suis, H.asini č.linognathidae: Linognathus vituli, L. ovillus, L.pedalis, L.setosus, L.stenopis Č.Hoplopleuridae: Haaemodipsus ventricosus Polyplax serrata, P.spinulosa

86 Řád: Mallophaga (všenky) Trichodectes canis, Felicola subrostratus Damalinia (Bovicola) bovis, D.caprae, D.ovis, D.equi Gyropus ovalis Columbicola columbae Menacanthus cornutus Menopon gallinae

87 Řád: Heteroptera (ploštice) č. Cimicidae Cimex lectularius č. Reduviidae (zákeřnicovití) Rhodnius prolixus Triatoma infestans, T.megista, T.vitticeps

88 Řád: Diptera (dvoukřídlí) Podřád: Nematocera (dlouhorozí) č. Culicidae (komárovití) Culex pipiens, C.territans Aedes vexans Culiseta morsitans Mansonia richiardii Anopheles maculipennis, Bironella, Chagasia č. Ceratopogonidae (pakomárcovití) Culicoides Lepcotonops

89 č. Simuliidae (muchničkovití) Simulium Odagmia Eusimulium č. Psychodidae (koutulovití) podčeleď: Phlebotominae Phlebotomus Lutzomyia Podřád: Brachycera (krátkorozí) č. Tabanidae (ovádi) Tabanus bromius, T. bovinus, T.autumnalis Haematopota pluvialis, H.subcylindrica Chrysops caecutiens, Ch.relictus, Ch.viduatus

90 č. Muscidae (mouchovití) Musca domestica. M.autumnalis č. Stomoxyidae (bodalkovití) Stomoxys calcitrans (bodalka stájová) Haematobia stimulans, H. irritans č. Calliphoridae (bzučivkovití) Calliphora vicina (bzučivka obecná) Cochliomyia, Chrysomia, Lucilia č. Sarcophagidae (masařkovité) Sarcophaga carnaria (masařka obecná) Wohlfahrtia magnifica, W. meigeni

91 č. Calliphoridae (bzučivkovití) - druhy působící myiáze = onemocnění způsobená napadením živých zvířat nebo lidí larvami much, larva se vyvíjí v rozkládajícím mase, dospělé moucha na fekáliích - význam jako vektoři onemocnění a myiáze Calliphora vicina (bzučivka obecná) -především u ovcí č. Sarcophagidae (masařkovité) - většina druhů živorodá, živí se šťávami z masa, původci myiáz Sarcophaga carnaria (masařka obecná) - mechanický přenos patogenních agens, larvy v rozkládajících zbytcích, myiáze

92

93 č. Glossinidae Glossina palpalis, G. tachynoides: říční, západní a střední Afrika (T. brucei gambiense) Glossina morsitans, G.pallidipes: glosina savan (T. brucei rhodesiense)

94 č. Hypodermidae (podkožní střečci) Hypoderma bovis, H.lineatum, H.diana, H.acteon Oestromyia leporinus, O.leporina č. Oestridae (nosní střečci) Oestrus ovis Cephenemyia stimulator, C.auribarbis Pharyngomyia picta Rhinoestrus purpureus č. Gasterophilidae (žaludeční střečci) Gasterophilus intestinalis, G. hemorhoidalis, G. Inermis, G.pecorum

95 Řád: Siphonaptera (blechy) Ctenocephalides canis (blecha psí) C.felis (blecha kočičí) Xenopsylla cheopis (blecha morová) Tunga penetrans (blecha písečná) Spilopsyllus cuniculi Ceratophyllus gallinae, C.hirundinis, C.columbae, C.rusticus Echidnophaga gallinacea

96 Evoluce parazitického druhu: Působení parazitů na hostitelské druhy je velmi intenzivní (šíření genu pro rezistenci a toleranci). Rezistence je schopnost hostitele zabránit úspěšné infekci provázené množením a vývojem parazita. Tolerance je schopnost hostitele snížit až úplně eliminovat negativní důsledky infekce parazita. Virulence je míra jakou příslušný druh nebo kmen parazita snižuje biologickou zdatnost hostitele. Redukce parazita (sakulinizace) ztráta některých orgánů a znaků,ale získání jiných. Manipulační hypotéza modifikace chování hostitele takovým způsobem, který zvyšuje přenos hostitele (motolice Dicrocoelium dendriticum mravenec, Toxoplasma gondii člověk, hlodavci)

97 Parazitóza jako nemoc: Incidence frekvence nových případů onemocnění v populaci dané velikostí v čase, statistický ukazatel v epidemiologii a epizootologii, podíl počtu nově hlášených nemocných jedinců za dané časové období (nových případů) a počtu všech jedinců ve sledované populaci. Oproti prevalenci, která popisuje daný stav v určitý čas, incidence poukazuje na dynamiku onemocnění v populaci. Prevalence frekvence nositelů onemocnění v dané populaci Morbidita (nemocnost) charakterizuje závažnost jakéhokoli onemocnění v dané populaci, poměr počtu nemocných jedinců vůči počtu všech (zdravých i nemocných) jedinců. Mortalita (úmrtnost) počet jedinců, kteří podlehnou nemoci v dané populaci zahrnuje i snížení biologické zdatnosti napadených jedinců (v % snížení růstu populace nebo snížená délka života důsledkem nemoci)

98 Oportunní parazité = běžně člověka nenapadají, ale mohou se stát parazity za určitých okolností např. stav imunní nedostatečnosti při HIV infekcích nebo u osob po transplantaci a závažných operací ROZŠÍŘENÍ PARAZITŮ: KOSMOPOLITNÍ (škrkavky) PODLE KLIMATU (původci tropických parazitóz, např. schistosomy), podmínky přenašečů PODLE SOCIÁLNÍHO PROSTŘEDÍ, CHOVÁNÍ, APOD. (úroveň hygieny, charakter potravy, chov domácích zvířat, apod.)

99 Bariéry přenosu Obranné mechanismy hostitele Nespecifické Specifické Nespecifické: fyzikálně chemické bariéry (kůže, nebuněčné složky tkání) fagocytóza a zánět Specifické obranné mechanismy: imunitní odpověď Obranné reakce hostitele: 1) buněčná imunita (fagocyty = bílé krvinky = T lymfocyty) 2) humorální (látková) imunita (produkce protilátek) Přítomnost antigenu = parazita vyvolá rychlou reakci imunitního systému a produkci specifických protilátek. Bezobratlí a rostliny mají rovněž schopnost obranných reakcí, ale mnohem méně komplikovaných.

100 IMUNITA A OBRANA ORGANISMU IMUNITA = schopnost organismu chránit se před patogeny (bakterie, viry, houby, prvoci onemocnění) mechanické bariéry: nepropustnost kůže a sliznic chemické látky: HCl v žaludku, MK na povrchu kůže horečka: vnitřní obrana proti infekci vlastní imunita: rozpoznání vlastních, cizích či pozměněných buněk Imunita: 1) nespecifická 2) specifická

101 1. Nespecifická : Fagocytóza neutrofilních granulocytů, monocytů a makrofágů baktericidní účinky kůže HCl ničí patogeny v žaludku přirozená odolnost (rezistence) proti původcům infekcí, cizorodým a nádorovým buňkám podmíněná geneticky a nezávislá na předchozím kontaktu s patogenem fagocytóza = schopnost buněk pohlcovat cizorodý materiál, mikrofágy a mikrofágy zánět = reakce organismu na poškození tkáně či vniknutí infekce,

102 fagocytující buňky likvidují bakterie místo zčervená, je bolestivé, teplé hnisavý zánět: hnis se tvoří ze zaniklých leukocytů, tkáňových buněk a bakterií záněty orgánů: bronchitis, appendicitis, pneumonie, angína rozsáhlejší zánět: zmnožení bílých krvinek, zvýšení sedimentace, zvětšení mízních uzlin, horečka vyvolána působením pyrogenů (uvolňují je leukocyty), působí na termoregulační centrum v hypotalamu, zvyšuje účinnost imunitního systému lysozym = enzym ničící bakterie na povrchu kůže interferon = potlačení virové infekce a omezení růstu nádorových buněk

103 2. Specifická 1. humorální (látková) zajišťují B lymfocyty funguje na principu antigen protilátka antigen = cizorodá látka, která se dostane do těla a lymfocyty proti ní vyrobí protilátku 2. buněčná zajišťují T - lymfocyty B lymfocyty studovány v lymfatickém orgánu ptáků = Fabriciova burza, látková = humorální imunita Protilátky se váží na antigen

104 T - lymfocyty Netvoří protilátky,nefagocytují Přímým kontaktem zničí cizí buňku = buněčná imunita (poruší povrch cizí buňky, čímž se zničí) Omezují nádorové bujení

105 Parazitární nákazy člověka, jejich laboratorní diagnostika, zásady odběru a zasílání klinického materiálu do laboratoře

106 parazitologická diagnostika nabývá v poslední době na významu s rozvojem cestovního ruchu v našich podmínkách poměrně vysokého hygienického standardu stojí parazitologická diagnostika ve stínu bakteriologie a virologie v tropických zemích je na předním místě a je třeba myslet na možnost parazitárních onemocnění po návratu z těchto zemí u parazitárních nákaz: nebývá charakteristický obraz onemocnění klinickým vyšetřením jej nelze odlišit od neparazitárních infekcí klinický nález nutno potvrdit laboratorním vyšetřením: - metodami přímého průkazu vývojových stadií parazitů - metodami nepřímého průkazu protilátek nebo antigenů

107 Materiál k parazitologickému vyšetření: 1. stolice 2. perianální stěr (otisk) a anální výtěr 3. moč 4. sputum 5. vaginální a urethrální sekret 6. duodenální šťáva 7. mozkomíšní mok 8. bioptický materiál 9. helminti nebo jejich části 10.ektoparaziti 11.srážlivá krev

108 1) Stolice: čerstvá, velikosti vlašského ořechu sterilní plastiková nádobka, transport do laboratoře zcela nevyhovující odběr rektální rourkou speciální požadavek giardióza, amébóza - co nejrychleji po defekaci (30 minut) doručit do laboratoře - negativní nález, přetrvávající příznaky opakovat odběr 2x po 4-7 dnech, resp. 10x po 2 dnech Odběry obden 3 vzorky: 1 vzorek čerstvý (do 2 hodin! NE DO LEDNICE!) 2 vzorky možno skladovat v lednici (max. 2 dny, nesmí zmrznout) onemocnění: askarióza, taenióza, trichurióza, schistosomóza, ankylostomóza, strongyloidóza

109 2) Perianální stěr (otisk) a anální výtěr: provedení ráno před defekací a umytím průkaz vajíček roupů a taenia (5-8 týdnů) průhledná páska přilepená z jedné strany podložního skla na okraji jméno pacienta možnost uchování několik dní při pokojové teplotě onemocnění: enterobióza, téniarynchóza, ténióza 3) Moč: ranní, příp. mezi hod.- poslední porce moče sterilní plastiková odběrová nádobka onemocnění: schistozomóza, ojediněle trofozoiti Trichomonas vaginalis

110

111 4) Sputum: důležitý správný odběr (sliny bezcenné) transport v širokohrdlé nádobce dobře uzavřené onemocnění: askarióza, echinokokóza, paragonimóza, strongyloidóza 5) Duodenální šťáva: podání 30 ml 40% MgSO4 před odběrem odběr 2-5 ml do sterilních krevních zkumavek uzavřených gumovými zátkami dodání do laboratoře do 2 hodin při susp. giardióze, trvajícím podezření a opakovaně negativním koprologickém nálezu onemocnění: giardióza, ankylostomóza, fasciolóza, strongyloidóza

112 6) Vaginální a urethrální výtěr, příp. prostatický exprimát: Mikroskopická diagnostika - vaginární sekret, ze zadní klenby poševní na podložní sklo - urethrální sekret u mužů, platinovou kličkou ze stěny urethry- nátěr na podložní sklo Kultivace - naočkování materiálu do transportního média - urychlený transport do laboratoře onemocnění: trichomonóza

113 7) Mozkomíšní mok: množství 1-2 ml asepticky přenést do sterilní zkumavky, uzavřené netoxickou gumovou zátkou doručit ihned k vyšetření, nejdéle však do 12 hod. po odběru onemocnění: naeglerióza, toxoplasmóza, africké trypanosomy 8) Bioptický materiál: punktát z jaterního abscesu, lymfatických uzlin, sternální, ze sleziny či tkáňového moku excise kůže, svaloviny, lymfatických uzlin seškraby střevní či děložní sliznice různý pitevní materiál

114 9) Parazitičtí helminti: nebo jejich části- články tasemnice, větší larvy apod.- ve vodě nebo fyziologickém roztoku (nikdy ne nasucho!) ihned dopravit do laboratoře (poškození bakteriemi nebo teplem) 10) Ektoparaziti: vhodné menší nádobky, necháme zaschnout odeslat s pilinami prosycenými amylacetátem

115 11) Krev: pro sérologickou diagnostiku pro zhotovení mikroskopických preparátů - nativní preparát- kapku krve zředit na podložním skle fyziologickým roztokem, přikrýt krycím sklem, ihned se prohlíží (trypanosomy, mikrofilárie) - metoda krevního roztěru a tlusté kapky- po zaschnutí odesílat do laboratoře jednotlivě balená do buničité vaty (vývojová stádia krevních parazitů např.plasmodia)

116 ENTEROBIÓZA Enterobius vermicularis ( roup dětský) výskyt: kosmopolitní velikost dospělců: 1cm přenos: per os průkaz vajíček cca 5-8 týdnů po infekci člověk jediný hostitel terapie: pyrvinium mebendazol albendazol

117 ENTEROBIÓZA samice při rektoskopii roupů

118

119 ASKARIÓZA Ascaris lumbricoides (škrkavka dětská) defin.host.: člověk rozšíření: kosmopolitní (výskyt-hygiena) přenos: alimentární cestou (kontaminovaná potrava nebo voda) klin.formy infekce: gastrointestinální, extraintestinální délka přežív.vaj.ve vněj.prostředí: 5-12 let patentní perioda: cca 1 rok průkaz vajíček: dní p.i terapie: albendazol, mebendazol, levamisol, tiabendazol

120 ASKARIÓZA samice: cm (40), žijí rok (20 měs)

121 Vajíčka škrkavek

122 TRICHURIÓZA Trichuris trichuria (tenkohlavec lidský) výskyt: kosmopolitní přenos: perorální symptomatika a patogeneze: - nízký počet parazitů ( bez symptomů) - vysoký počet ( poruchy výživy, krvavé a hlenovité průjmy, anémie, bolesti břicha, kolitida, prolaps rekta) průkaz vajíček: cca 2-3 měsíce p.i. terapie: mebendazol, albendazol, tiabendazol

123 TRICHURIÓZA dospělci, samec 2-4 cm, samička 3-5 cm

124 TRICHURIÓZA - vajíčka

125 TAENIARHYNCHÓZA Taeniarhynchus saginatus (tasemnice bezbranná ) výskyt: geopolitní zdroj nákazy: hovězí dobytek definit.hostitel: člověk dospělec: délka 4-10 m, šířka mm scolex: 4 přísavky, bez háčků lokalizace: tenké střevo inkubační doba: týdnů

126 TAENIÓZA Taenia solium (tasemnice dlouhočlenná) mezihostitel: prase domácí i divoké, člověk definit, hostitel: člověk onemocnění: tenióza, cysticerkóza morfoligie: článkované tělo, skolex s háčky, 4 přísavky, délka 2-3 m(až10) terapie: taenióza- niklosamid, praziquantel cysticerkóza- praziquantel + steroidy

127 rozdíly mezi T.solium a T.saginatum

128 rozdíly mezi T.solium a T saginatum

129

130 SCHISTOSOMÓZA nejvýznamnější helmintóza infikováno: 200 miliónů lidí život v oblasti rizika nákazy: 600 miliónů lidí 85% infekcí- Afrika- z toho 20% gravidních žen ze subsaharské oblasti původce: urogenitální forma Schistosoma hematobium střevní forma - S.mansoni a S.japonicum

131 SCHISTOSOMÓZA Schistosoma haematobium

132 MALÁRIE Plasmodium falciparum(tropická), P.vivax (třídenní-terciána), P.malariae (čtyřdenníkvartánna), P.ovale přenašeč: komáři rodu Anopheles infekce: mil. klinic. případů/rok úmrtí /rok: 1-3 milióny (děti a těhotné ženy v subsaharské Africe) endemický výskyt: 103 zemí tropů a subtropů ČR: od roku 1963 pouze import patogeneze: destrukce erytrocytů a uvolnění nové generace merozoitů

133

134

135 ANAMNESTICKÉ ÚDAJE: podrobná cestovní anamnéza profylaxe léky potrava potíže povolání rodinná anamnéza

136 Laboratorní diagnostické metody a) Flotace Používá se flotační roztok, který má větší specifickou hmotnost než vajíčka a cysty parazitů. Tím dojde k oddělení vajíčka a cysty se vznášejí nad hladinou flotačního roztoku Druh vzorku: Stolice - škrkavky, tasemnice a různí prvoci, většinou nelze flotací vyšetřit motolice b) Larvoskopie Metoda je založena na tom, že larvy parazitů putují za vodou a teplem. Pomocí teplé vody je lze tedy ze vzorku získat Druh vzorku: Stolice - hlísti, což jsou například škrkavky

137 c) Sedimentace Sedimentační metody fungují na principu gravitace, kdy se těžká vajíčka oddělí centrifugací tak, že jsou na dně zkumavky Druh vzorku: Stolice - široké spektrum střevních parazitů, ideální k vyšetření motolic a tasemnic d) Nativní preparát Pomocí mikroskopu se hledají v nátěru živí parazité, jejich vajíčka a cysty Druh vzorku: Stolice - široké spektrum střevních parazitů

138 e) Krevní nátěr Z krve se vytvoří tenký nátěr, nebo se použije tzv. metoda tlusté kapky. V mikroskopu se nátěr hodnotí a hledají se parazité Druh vzorku: Krev -vyšetření krevních parazitů, jako je Babesia nebo Plasmodium f) Trávicí metoda Vzorek svaloviny zvířat se nechá v laboratorních podmínkách trávit - podobně jako je to v žaludku. Používá se HCl a pepsin Druh vzorku: Svalovina - lze vyšetřit svalovce (Trichinella) g) ELISA Jedná se o imunologickou metodu, kterou lze stanovit protilátky proti parazitům. Dá se zjistit, jestli se člověk už s parazitem setkal, nebo jestli momentálně parazitární infekce probíhá Druh vzorku: Krev - pro diagnostiku Toxoplasma gondii, lze vyšetřit i jiné parazity

139 Diagnostika trichinelózy: The Official Journal of the European Union (L 338/60) from 22.December 2005 contains Commission Regulations (EC) No 2075/2005 of 5.December 2005 Metody diagnostiky Trichinella sp.: 1) přímé metody detekce parazita ve vzorcích tkáně: trichineloskopie nebo kompresní metoda, trávicí metoda, histologie, PCR 2) nepřímá detekce parazita průkazem specifických protilátek pomocí sérodiagnostických metod: ELISA, IFAT, WBA, CFT, HAT

140 Metody přímé diagnostiky post-mortální vyšetření, epidemiologické studie u divoce žijících zvířat 1) trichineloskopie nebo kompresní metoda: - od r.1863, kompresorium - nejméně 28 vzorků velikosti hrášku, bránice (jazyk, masseter, abdominální svalovina) 2) trávicí metoda g vzorky bránice, jazyk, masseter, citlivost 3 larvy na 100 g svaloviny (1% pepsin a 1% HCl) 3) histologie - larvy v různém stadiu vývoje 4) PCR - diferenciace druhů a genotypů, sekvence DNA

141 Metody nepřímé diagnostiky detekce specifických protilátek v krevním séru či tkáňové tekutině ELISA (enzyme-linked immunosorbent assay): sérodiagnostická metoda na vyšetření vzorků krve a krevního séra, případně postmortálně tkáňové tekutiny meat juice detekce specifických protilátek (IgG, IgM, ) a sledování jejich dynamiky 1974: Ruitenberg ELISA u prasat Výhody: vyšší citlivost než metody přímé detekce (méně než 1 larva na 100 g svaloviny), finanční nenáročnost

142 sledování imunitních odpovědí při dlouhodobých infekcích včasná a rychlá diagnostika trichinelózy Nevýhody: křížové reakce s antigeny jiných nematod (Ascaris, Trichuris, atd.) v současnosti prozatím využíván pouze v experimentální parazitologii a humánní medicín zachycení počátku tvorby protilátek (zamezení tzv. diagnostickému oknu) antigeny: a) somatické (CLE) b) E/S - předpoklad nejvyšší specifity c) syntetický tyvelosní antigen

143 Jaké parazity lze určit z krve - Babesia, Plasmodium, Dirofilaria - vyšetření protilátek proti různým parazitům, nemusí se jednat pouze o krevní parazity. Běžně se vyšetřují z krve protilátky proti Toxoplasma gondii. Jaké parazity lze určit ze stolice - prvoci, škrkavky, tasemnice, motolice. - je vhodné stolici vyšetřovat opakované, protože někteří parazité se nevylučují stolicí kontinuálně, ale přerušovaně. Proto je dobré vzorek sbírat například 3 dny. Navíc se doporučuje po cca 14 dnech provést kontrolní parazitologické vyšetření.

144 Faustova koncentrační flotační metoda - základní parazitologická vyšetřovací metoda stolice. Prvoci nacházející se ve stolici v roztoku síranu zinečnatého vzlínají, tj. flotují na povrch tekutiny a uchytí se na krycí sklo. Při mikroskopickém hodnocení vytvořeného preparátu sledujeme typickou morfologii a velikost parazitického prvoka, buď jeho aktivní vegetativní formy, trofozoity (pouze ve stolici vyšetřené do 2-3 hodin po odběru), nebo klidové, vysoce rezistentní formy, cysty. Postup: Vzorek stolice o objemu asi 2 cm3 pomocí špejle přeneseme do krevní zkumavky s asi 5 ml destilované vody a necháme v ledničce do druhého dne. Druhý den pomocí dvou špejlí důkladně rozmícháme obsah zkumavky, doplníme zkumavku destilovanou vodou a centrifugujeme 3 min. při 2500 ot./min. Supernatant odsajeme přes vakuovou láhev. Promytí sedimentu dle potřeby lze opakovat stejným způsobem 1 2krát.

145 Promytý sediment rozmícháme v roztoku síranu zinečnatého, zkumavku doplníme roztokem 33% síranu zinečnatého asi 1 cm pod okraj a centrifugujeme 3 min. při 2500 ot./min. Po centrifugaci doplníme zkumavku roztokem síranu až k okraji a na hladinu položíme krycí sklíčko 15x15 mm. Po 20 minutách stání přeneseme opatrně krycí sklíčko s přichycenou povrchovou blankou na kapku Lugolova roztoku na podložním skle a prohlížíme v mikroskopu při zvětšení krát. Příprava 33% roztoku síranu zinečnatého: ZnSO 4.7 H 2 O 331,0 g H 2 O destil.doplnit do 1000,0 ml Hustota roztoku 1,180 (zkontrolovat hustoměrem)

146 Video koncentrační flotační metoda dle Fausta ni-flotacni-metoda-dle-fausta.aspx Animace koncentrační flotační metoda dle Fausta

147 Doporučená literatura: Ash L.R., Orihel T.C. (1990): Atlas of human Parasitology. III. vydání, ASCP Chicago. Begon M,, Harper J.L., Townsend C.R. (1997): EKOLOGIE jedinci, populace a společenstva. Vydavatelství univerzity Palackého Olomouc. Bogitsh, Burton J. - Carter, Clint E. - Oeltmann, Thomas N. (2005) Human parasitology. 3rd ed. Elsevier : Amsterdam. Garcia L.S., Bruckner D.A. (1993): Diagnostic Medical Parasitology. II. vydání, ASM Washington, Hausmann K., Hülsmann N. (2003): Protozoologie. Academia Praha. Horák P., Scholz T. (1998): Biologie helmintů. Karolinum Praha. Chroust K., Lukešová D., Modrý D., Svobodová V. (1997): Veterinární protozoologie. Ústav parazitologie FVL VFU Brno. Chroust K., Svobodová V., Modrý D., Volf J. (2000): Veterinární arachnoentomologie. Ústav parazitologie FVL

148 Jeffrey H.C. and Leach R.M. (1991): Atlas of Medical Helminthology and Protozoology.New York, Third Edition. Jíra J. (1998): Lékařská helmintologie. Galén Praha. Jurášek V., Dublinský P. (1993): Veterinárna parasitológia. Príroda Bratislava. Kaufmann J. (1996): Parasitic Infections of Domestic Animals. Birkhäuser Verlag, Basel, Schweiz. Kořínková K. (2006): Obecná parazitologie: význam a biologie parazitů. Skripta PřF UJEP Ústí nad Labem. Mehlhorn H. (ed.) (2001): Encyclopedic Reference of Parasitology, Springer, Berlin-Heidelberg-New York. Volf P., Horák P. a kol. (2007): Paraziti a jejich biologie. Triton Praha. Warren K.S. (1993): Immunology and molecular biology of parasitic infection, Blackwell Scientific Publications, Oxford.

149 Tento výukový materiál vznikl v rámci projektu CZ.1.07/2.2.00/ Mezioborové vazby a podpora praxe v přírodovědných a technických studijních programech UJEP, spolufinancovaného Evropským sociálním fondem a státním rozpočtem České republiky.