Verifikace metod návrh STL

Transkript

1 Verifikace metod návrh STL Příloha č.3 Doporučení Společnosti pro transfuzní lékařstvíčls JEP č. STL2011_07 ze dne verze 2 (2012_04) Hana Tereza Bolcková Poznámky / výklad: správnost: s použit itím m vzorků o známé hodnotě se ověř ěřuje, že výsledek je takový, jaký mám být (tj. stejný, jako vyšel dosud používanou metodou apod., lze použít t i "referenční vzorky", ale těch t je obvykle málo) m atelnost (= mezidenní opakovatelnost): ověř ěřuje se, že se při p i měřm ěření v různr znédny dostane stejný výsledek návaznost: ověř ěřuje se, že e výsledek je stejný, jako by dostal někdo n jiný. Provádí se dvěma způsoby vyšet etří se "referenční vzorky laboratoř se zapojí do systému "externího hodnocení kvality" (podle uspořádání testu a volby vzorku / vyšet etřovaného materiálu lze ověř ěřovat parametry "správnost / návaznost n / atelnost" současn asně = týmž vyšet etřením, zejména pokud se využije komerčních vzorků určených pro kontrolu kvality) Poznámky / výklad: referenční vzorek: vzorek určený k vyšet etření (= ke kontrole kvality), u kterého "kontrolní autorita" / výrobce garantují deklarovanou hodnotu / správný výsledek. (Pozor: tyto parametry obvykle nesplňuj ují "diagnostické krvinky" nebo "diagnostická séra") pro následnou / roční pravidelnou verifikaci lze využít t výsledky opakované / pravidelné (např.. denní) ) kontroly kvality v takovém případě se de facto v danou chvíli (= 1x za rok) vyhodnotí denně prováděná kontrolní vyšet etření v případp padě nevyhovujících ch výsledků verifikace je nutné prověř ěřit metodu, analyzovat příčiny p selhání,, odstranit závady... z a pak verifikaci provést znova tam, kde nejsou dostupné komerční vzorky, použij ijí se vnitřní kontrolní vzorky Vyšetření krevní skupiny ABO 33 vzorků se známou krevní skupinou (vyšetřeníjak aglutinogenů, tak aglutininů): 10x A, 10x B, 10x 0, 3x AB (alespoňněkteréby měly být komerční referenční pravidelná verifikace 10 vzorkůse známou krevnískupinou (vyšetřeníjak aglutinogenů, tak aglutininů): 3x A, 3x B, 3x 0, 1x AB komerční referenční 1

2 Vyšetření krevní skupiny ABO Vyšetření krevní skupiny ABO -6 vzorků: 2x A, 2x B, 2x 0 -vyšetřeníopakovat 2x v různých -3 vzorky: 1x A, 1x B 1x 0 -vyšetřeníopakovat 2x v různých 3 referenčnívzorky (obvykle komerční): A, B, 0 3 referenčnívzorky (obvykle komerční): A, B, 0 v Vyšetření krevní skupiny ABO Vyšetření Rh D 20 vzorků se známou krevní skupinou, z toho: min. 5x D negativní doporučujíse 2x D w/v komerční referenční 10 vzorkůse známou krevní skupinou, z toho: min. 3x D negativní doporučuje se 1x D w/v komerční referenční 2

3 Vyšetření Rh D Vyšetření Rh D 6 vzorků: z toho 3x RhDpozitivní 3x RhDnegativní 4 vzorky: 2x RhDpozitivní 2x RhDnegativní opakovat 2x vrůzných 4 referenčnívzorky (obvykle komerční): 2x RhDpozitivní 2x RhDnegativní 4 referenčnívzorky (obvykle komerční): 2x RhDpozitivní 2x RhDnegativní komerční referenční komerční referenční Vyšetření Rh D Rh fenotyp(ccee), Kell(K) v samostatného cyklu Rh/Kell fenotypzahrnujícího D w/v a C w ) samostatného cyklu Rh/Kell fenotyp zahrnujícího D w/v a C w ) 10 vzorkůse známou hodnotou pro každý prověřovaný antigen: 5 negativních 5 pozitivních (heterozygotní) komerční referenční 6 vzorkůse známou hodnotou pro každý prověřovaný antigen: 3 negativních 3 pozitivních (heterozygotní) komerční referenční 3

4 Rh fenotyp(ccee), Kell(K) Rh fenotyp(ccee), Kell(K) 4 vzorky pro každý prověřovaný antigen: 2x pozitivní(heterozygot) 2x negativní 4 vzorky pro každý prověřovaný antigen: 2x pozitivní(heterozygot) 2x negativní 4 referenčnívzorky pro každý antigen: 2x pozitivní(heterozygot) 2x negativní 4 referenční vzorky pro každý antigen: 2x pozitivní(heterozygot) 2x negativní komerční referenční komerční referenční Rh fenotyp(ccee), Kell(K) Fenotyp Cw v 6 vzorkůse známou hodnotou:z toho 3 negativní 3 pozitivní(heterozygotní) 4 vzorky se známou hodnotou: 2 negativní 2 pozitivní(heterozygotní) 4

5 Fenotyp Cw Fenotyp Cw 4 vzorky: 2 pozitivní(heterozygot) 2x negativní 2 vzorky: 1x pozitivní(heterozygot) 1x negativní - opakovat 2x vrůzných neověřuje se neověřuje se Fenotyp Cw dárce krve pravidelná verifikace v samostatného cyklu Rh/Kell fenotypzahrnujícího D w/v a C w ) samostatného cyklu Rh/Kell fenotyp zahrnujícího D w/v a C w ) 20 vzorkůse známou hodnotou: 15 negativních 5 pozitivních (klinicky významnéprotilátky alespoňdvou různých specifit, z toho alespoň jeden vzorek referenčního / komerčního séra se slabou protilátkou cca 0,05 IU/ml) 10 vzorkůse známou hodnotou: 7 negativní 3 pozitivní(klinicky významnéprotilátky alespoňdvou různých specifit, z toho alespoň jeden vzorek referenčního /komerčního séra se slabou protilátkou cca 0,05 IU/ml) 5

6 dárce krve dárce krve a telnosti 3 vzorky pozitivní, protilátky alespoňdvou různých klinicky významných specifit, ztoho alespoňjeden vzorek referenčního (komerčního) séra se slabou protilátkou (cca 0,05 IU/ml) 3 vzorky negativní 3 vzorky pozitivní, protilátky alespoňdvou různých klinicky významných specifitztoho alespoňjeden vzorek referenčního (komerčního) séra se slabou protilátkou (cca 0,05 IU/ml) 3 vzorky negativní 3 referenčnívzorky negativní 3 referenční vzorky pozitivní (alespoň2 různéklinicky významné specifity protilátek, z toho jeden vzorek se slabou protilátkou cca 0,05 IU/ml) 3 referenčnívzorky negativní 3 referenčnívzorky pozitivní(alespoň 2 různé klinicky významné specifityprotilátek, z toho jeden vzorek se slabou protilátkou cca 0,05 IU/ml) dárce krve pacienta v 10 vzorkůse známou hodnotou: 5 negativních 5 pozitivních (protilátky alespoň2 různých klinicky významných specifit,ztoho jeden vzorek kontrolního / komerčního séra se slabou klinicky významnou protilátkou cca 0,05 IU/ml) 6vzorkůse známou hodnotou: 3 negativní 3 pozitivní(protilátky alespoň2 různých klinicky významných specifit, ztoho jeden vzorek kontrolního / komerčního séra se slabou klinicky významnou protilátkou cca 0,05 IU/ml) 6

7 pacienta pacienta - 3 vzorky negativní -3 vzorky pozitivní, protilátky alespoňdvou různých klinicky významných specifitztoho alespoňjeden vzorek kontrolního (komerčního) séra se slabou protilátkou klinicky významnou (cca 0,05 IU/ml) - 3 vzorky negativní -3 vzorky pozitivní, protilátky alespoňdvou různých klinicky významných specifit ztoho alespoňjeden vzorek kontrolního (komerčního) séra se slabou klinicky významnou protilátkou (cca 0,05 IU/ml) 3 referenčnívzorky negativní 3 referenčnívzorky pozitivní, protilátky alespoňdvou různých klinicky významných specifit z toho alespoň jeden vzorek se slabou klinicky významnou protilátkou (cca 0,05 IU/ml) 3 referenčnívzorky negativní 3 referenčnívzorky pozitivní, protilátky alespoňdvou různých klinicky významných specifit z toho alespoň jeden vzorek se slabou klinicky významnou protilátkou (cca 0,05 IU/ml) pacienta Nepřímý antiglobulinovýtest zkouška kompatibility (zachovává se AB0 shoda mezi sérem / plazmou a konzervou) pravidelná verifikace v 15 sad "erytrocyty + sérum / plazma": - 3x sérum/plazma bez protilátky -3x sérum/plazma s protilátkou (alespoňjednou by mělo jít o referenční/komerčnívzorek se slabou klinicky významnou protilátkou cca 0,05 IU/ml) - u každého vzorku: -2x zkouška kompatibility s konzervami, kteréznak odpovídajícíprotilátce neobsahují -2x zkouška kompatibility s konzervami, kteréznak odpovídající protilátce obsahují 6 sad "erytrocyty + sérum / plazma": - 2x sérum/plazma bez protilátky -2x sérum/plazma s protilátkou (alespoňjednou by mělo jít o referenční/komerčnívzorek se slabou klinicky významnou protilátkou cca 0,05 IU/ml) - u každého vzorku: -zkouška kompatibility s konzervou, která znak odpovídající protilátce neobsahuje -zkouška kompatibility s konzervou, která znak odpovídající protilátce obsahuje 7

8 Nepřímý antiglobulinovýtest zkouška kompatibility (zachovává se AB0 shoda mezi sérem / plazmou a konzervou) Nepřímý antiglobulinovýtest zkouška kompatibility (zachovává se AB0 shoda mezi sérem / plazmou a konzervou 1 vzorek negativní 2 vzorky pozitivní, ztoho jeden referenční/ komerčnívzorek se slabou klinicky významnou protilátkou cca 0,05 IU/ml reakce s konzervami, kteréobsahujíznak odpovídající protilátce opakovat 2x v různých 1 vzorek negativní 2 vzorky pozitivní, ztoho jeden referenční/ komerčnívzorek se slabou klinicky významnou protilátkou cca 0,05 IU/ml reakce s konzervami, kteréobsahujíznak odpovídající protilátce opakovat 2x v různých neověřuje se neověřuje se Nepřímý antiglobulinovýtest zkouška kompatibility (zachovává se AB0 shoda mezi sérem / plazmou a konzervou Přímý antiglobulinový test pravidelná verifikace v 5 vzorkůse známým výsledkem: 3 negativní 2 pozitivní ztoho alespoňjeden vzorek kontrolních (komerčních) erytrocytů PAT+ 3 vzorky se známým výsledkem: 2x negativní 1x pozitivní (optimálněvzorek kontrolních komerčních erytrocytůpat+) 8

9 Přímý antiglobulinový test Přímý antiglobulinový test 3 vzorky pozitivní 3 vzorky negativní opakovat 2x vrůzných 3 vzorky pozitivní 3 vzorky negativní opakovat 2xvrůzných 5 referenčních vzorků: 3 negativní 2 PAT+ pozitivní(ztoho alespoňjeden vzorek referenčních, komerčních erytrocytůpat+, může být použit náplav erytrocytů) 3 referenční vzorky: 2 negativní 1 pozitivní(optimálně vzorek referenčních,komerčních erytrocytůpat+, může být použit náplav erytrocytů) Přímý antiglobulinový test Test na slabéd u dárce krve pravidelná verifikace v 6 vzorkůse známým výsledkem: 3x D w/v pozitivní 3x D negativní 4 vzorky se známým výsledkem: 2x D w/v pozitivní 2x D negativní 9

10 Test na slabéd u dárce krve Test na slabéd u dárce krve 4 vzorky: 2x D w/v pozitivní 2x D negativní opakovat 2x vrůzných 2 vzorky: 1x D w/v pozitivní 1x D negativní opakovat 2x vrůzných 4 referenčnívzorky: 2x D w/v pozitivní 2x D negativní (1x může být použit náplav D w/v pozit. erytrocytů) 2 vzorky: 1x D w/v pozitivní 1x D negativní Test na slabéd u dárce krve Děkuji za pozornost v samostatného cyklu Rh/Kell fenotypzahrnujícího D w/v a C w ) samostatného cyklu Rh/Kell fenotyp zahrnujícího D w/v a C w ) 10