Příprava materiálu byla podpořena projektem OPPA č. CZ.2.17/3.1.00/33253

Rozměr: px
Začít zobrazení ze stránky:

Download "Příprava materiálu byla podpořena projektem OPPA č. CZ.2.17/3.1.00/33253"

Transkript

1 Příprava materiálu byla podpořena projektem OPPA č. CZ.2.17/3.1.00/33253 Část 8 Detektory Úvodní informace Detektor musí být schopen zaregistrovat okamžik průchodu analytu vystupujícího z kolony. Musí být tedy schopen nějakým způsobem registrovat změnu ve složení mobilní fáze, transformovat ji do formy elektrického signálu a prezentovat ji jako rozdíl oproti základní linii. Ideální detektor by: (a) neměl být závislý (míněna jeho odezva) na změně teploty nebo složení mobilní fáze; (b) měl být schopen detekovat malá množství látek (stopová analýza); (c) měl buď dávat stejný signál pro všechny eluované látky nebo jen pro látky, které jsou předmětem zájmu, měl by tedy být buď univerzální nebo selektivní; (d) neměl přispívat k rozmývání píků, měl by mít malý objem; (e) měl mít rychlou odezvu na analyt a tedy by měl být schopen registrovat úzké píky; (f) měl být jednoduchý na obsluhu, robustní a levný. Tyto požadavky jsou v plném rozsahu nedosažitelné prakticky a splnění některých z nich vylučuje splnění jiných požadavků. Takže je vhodnější se na detektory dívat spíše pomocí následujících hledisek. 1

2 Koncentrační nebo hmotnostní citlivost detektoru Koncentračně citlivé detektory poskytují signál, S, přímo úměrný koncentraci, c, analytu v mobilní fázi: Hmotnostně citlivé detektory dávají signál úměrný hmotnostnímu toku analtu detektorem, tj. číslu, n, analytu nebo iontů za jednotku času, t: Typ detektoru se dle tohoto kritéria pozná vypnutím průtoku na koloně v okamžiku maxima píku v detektoru; v případě koncentračně citlivého detektoru zůstane hodnota signálu bezezměny a pro hmotnostně citlivý detektor poklesne na základní hladinu. Kromě elektrochemického, rozptylového, vodivostního a fotovodivostního deteltkoru jsou všechny ostatní v Section koncentračně citlivé. Selektivita Neselektivní detektory reagují na kolektivní vlastnosti roztoku procházejícího detektorem. Detektor na bázi měření indexu lomu měří index lomu mobilní fáze. Index lomu mobilní fáze je odlišný od indexu lomu mobilní fáze obsahující analyt. Detektor registruje uvedenou změnu a na jejím základě detekuje prakticky všechny analyty, proto se označuje jako neselektivní. Je to také důvodem toho, že tento detektor, podobně jako vodivostní detektor, se nedá použít v gradientové eluci. Naproti tomu UV detektor měří jen látky absorbující UV záření a patří mezi selektivní detektory. Šum Při zvětšení signálu detektoru je vidět, že základní linie vykazuje nepravidelnsoti, i když se neeluuje analyt. Vysokofrekvenční (krátkodobý) šum (obrázek níže (a)) bývá vyvolán nesprávným uzemněním detektoru nebo celého systému. Ale nízká úroveň šumu zůstane i po dobrém uzemnění. Nízkofrekvenční šum osciluje s pomalejší nízkou frekvencí (dlouhodobý) šum (obrázek níže (b)). 2

3 Obecně platí, že mobilní fáze je nejdůležitejším faktorem způsobujícím šum (nečistoty, bubliny, stacionární fáze, změny průtoku), ale i rychlé změny okolní teploty mohou mít vliv (když je detektor nevhodně umístěn). I poruchy vyvolané zdrojem při přepínání termostatu mohou být příčinou šumu a tehdy je vhodné aplikovat nízkofrekvenční filtr. Někdy je dobrým řešením zkonstruování Faradayovy klece z hliníkové fólie. Limit detekce Nejmenší detekovatelný signál nemůže být menší než dvojnásobek výšky největšího píku signálu šumu. Pokud je nastříknuté množství menší, je signál srovnatelný se šumem a není od něj rozlišitelný. Pro kvalitativní analýzu by poměr signál/šum (S/N) neměl být nižší než 3-5 a pro kvantitativní analýzu 10. Tvrzení typu, že detektor X je schopen detekovat i 1 ng benzenu je třeba přijímat opatrně. Uvedené množství může být ovlivněno mnoha limitními faktory a trvzení, že detekční limit je 1 ng ml -1 je správnější pro případ koncentračně citlivých detektorů. Drift základní linie Drift popisuje odchylku základní linie v času a projevuje se ve formě směrnice chromatogramu (obrázek níže). Drift je běžný při zapnutí detektoru. Ovšem po dosažení pracovní teploty elektroniky a optiky detektoru je základní linie rovnoběžná s osou x, pokud se nedějí následující věci: (a) gradientová eluce (mění se index lomu mobilní fáze a to mohou některé UV detektory registrovat); (b) předchozí mobilní fáze není dostatečně vymyta novou mobilní fází po změně jejího složení; (c) změna složení mobilní fáze (odpaření, příliš intenzivní odplyňování heliem); (d) změna okolní teploty. 3

4 Lineární dynamický rozsah Ideální detektor poskytuje signál přímo úměrný nastřikovanému množství analytu nezávisle na nastříknutém množství. V praxi je tento rozsah vždy omezený, ale čím je větší, tím je to výhodnější. Směrnice přímky v níže uvedeném frafu je známa jako odezva a představuje rozsah, ve kterém reaguje detektor na změnu koncentrace analytu. Lineární dynamický rozsah UV detektoru je větší než detektoru refraktometrického a je kolem 1: , to např. znamená, že horní limit 5 x 10-4 g ml -1 odpovídá dolnímu limitu 5 x 10-8 g ml -1. 4

5 Časová konstanta Časová konstanta, τ, má vztah k rychlosti sběru dat detektorem. Tento parametr je velmi důležitý. Časová konstanta by při velmi rychlé HPLC s úzkými píky neměla být větší než 0.3 s a pro UHPLC (UPLC) než 0.1 s. Příliš malá časová konstanta může zvětšovat šum detektoru, ale naopak příliš dlouhá časová konstanta vede k rozšíření a chvostování píků (obrázek níže). Kvalitní detektory mají časovou konstantu nastavitelnou. Objem cely detektoru Objem cely by měl jen minimálně přispívat k rozšiřování píku a prakticky by měl být menší než 10% elučního objemu nejužšího, tedy nejdříve eluovaného, píku. Objem standardní UV cely bývá kolem 8 µl. Na druhou stranu příliš malý objem cely zhoršuje detekční limit, protože jisté množství analytu je v cele potřebně, aby byla možná detekce. Pro mikrohplc cela musí být výrazně menší než 8 µl. Cela také musí mít vhodný tvar, protože analyt v cele nesmí být nijak zadržován při pruodění mobilní fáze. Tlak generovaný na koloně je za kolonou daleko nižší. Je tedy nebezpečí vytváření bublin v mobilní fázi a je třeba se s tím vypořádat. Proto je dobré za detektor zapojit nerezovou nebo PEEK kapiláru, aby se v detekční cele vytvořil malý tlak (1-2 bar), je ale současně nutné, aby tlak nepřekročil limit instrumentu. Na trhu jsou UV detektory, které snesou tlak až 150 bar. 5

6 Poznámka: pokud je v mobilní fázi přídavek malého množství podstatně polárnějšího aditiva než je mobilní fáze (např. 1% ethanolu v hexanu), pak se v detekčním okénku může vytvořit film polární látky. Eluování polární látky z kolny při separaci vzorku může tento film uvolnit a vyvolat vznik falešného ghost píku v chromatogramu. Optické detektory a) UV detektory Jedná se o nejběžnějším detektor, protože je citlivý, má velký lineární dynamický rozsah, je málo ovlivňován fluktuacemi teploty a je kompatibilní s gradientovou chromatografií. Je schopen měřit látky absorbující ultrafialové a/nebo viditelné záření. Absorpce je pozorována pro záření nad 200 nm pokud molekula má alespoň: (a) dvojnou vazbu sousedící s atomem nesoucím volný elektronový pár, X=Y-ZŶ (např. vinyl ether); (b) brom, jod nebo síru; (c) karbonylovou skupinu, C=O; a nitro skupinu NO 2 ; (d) dvě konjugované dvojné vazby, X=X-X=X; (e) aromatický cyklus; (f) některé anorganické ionty: Br -, I -, NO 3 -, NO 2 -. Tyto skupiny absorbují záření různě a při odlišných vlnových délkách. Absorpce a vlnová délka v maximu absorpce je navíc závislá na sousedních skupinách v molekule. Molární absorpční koeficient, ε, je měřítkem míry absorpce záření látkou a tyto koeficienty mohou být nalezeny v mnoha tabulkách a příručkách. Např. aromáty mají obecně vyšší absorpční koeficienty než ketony. Množství absorbovaného záření je závislé na molárním absorpčním koeficientu, ε, dále na molární koncentraci analytu, c, a na rozměrech, délce, měrné cely, d. Součin poskytuje absorbanci, A: A = εcd A je bezrozměrné číslo a absorbance rovna 1 bývá (dosti nesprávně) vyjadřována jako 1 absorpční jednotka (AU). UV detektor měří absorbanci eluované mobilní fáze. Mobilní fáze by neměla absorbovat záření emitované lampou detektoru, nebo by je měla absorbovat jen co nejméně, aby bylo 6

7 možné elektronicky vykompenzovat základní linii. Podle výše uvedené rovnice je výška píku funkcí molárního absorpčního koeficientu a koncentrace eluovaného analytu procházejícího celou detektoru. Protože signál je funkcí délky cely, d, měla by cela být co nejdelší, bývá to ve skutečnosti kolem 10 mm. Na druhou stranu cela musí být co nejmenší kvůli snížení negativního vlivu na rozšiřování píku mimokolonovým objemem. Níže uvedený obrázek znázorňuje schematicky typické uspořádání UV-VIS detektoru. Požadovaná vlnová délka je vybrána pomocí mřížky. Křemenná destička je umístěna před celou a odráží část záření na referenční fotodiodu. Referenční dioda slouží k odstranění fluktuacích světelného toku, ke které může docházet. Detekční cela také musí mít vhodný tvar, aby signál byl pokud možno co nejméně ovlivněn změnou indexu lomu mobilní fáze při gradientové eluci. Nejčastěji se jako zdroj záření používají dvě lampy. Deuteriová lampa vyzařuje kontinuální spektrum (až do zhruba 340 nm, rozptýlené světlo do 600 nm). Použitá vlnová délka je vybrána tak, aby odpovídala maximální absorbanci detekované látky, vhodná volba vlnové délky může navíc někdy umožnovat poměrně selektivní detekci analytu za současné eliminace signálu interferující látky, pokud tato látka při vybrané vlnové délce neabsorbuje. Obrázek níže srovnává neselektivní (jsou detekovány všechny peptidy, 210 nm) a selektivní detekci (jsou detekovány jen aromatickou strukturu obsahující peptidy, 280 nm). 7

8 Wolframová-halogenová lampa emituje blízké-uv a viditelné záření (přibližně nm) je ideální pro doplnění deutriové lampy pro pokrytí celé oblasti UV-VIS záření. Spektrální šíře bývá širší než u UV-VIS spektrometrů, v praxi kolem 10 nm (to znamená, že záření vstupující do cely detektoru není monochromatické, pokrývá například nm, pokud je zvolena vlnová délka 285 nm). Výhoda spočíva ve větší intenzitě vstupujícího záření do cely a v důsledku vyšší detekční citlivosti. Spektrální šířka ale nesmí být přiliš velká, to by vedlo ke snížení lineárního dynamického rozsahu. Dnes se již téměř nesetkáme s detektory s fixní vlnovou délkou. Používaly rtuťové (254 nm), kadmiové (229 nm) a zinkové lampy (214 nm). b) Refraktometrické detektory Detektory založené na registraci indexu lomu eluentu, tedy refraktometrické detektory (RI), jsou neselektivní a často doplňují UV-VIS detektory. Tyto detektory registrují všechny eluující se zóny mající odlišný index lomu než mobilní fáze. Signál je tím větší, čím je větší odlišnost indexů lomu mobilní fáze a látky eluované. Detekční limit je tak možné zlepšit vhodnou volbou mobilní fáze. RI detektory jsou zhruba 1000x méně citlivé než UV detektory (detekční limit kolem 5 x 10-7 g analytu na mililitr za vhodných podmínek versus zhruba 5 x g ml -1 v případě UV detektoru). Vzhledem k závislosti indexu lomu na teplotě, zněna asi o 5 x 10-4 jednotky na jeden C, je nutno detekční celu termostatovat, zejména při průtoku nad 1 ml min -1. Cela je proto umístěna do kovového bloku s velkou tepelnou kapacitou. Mobilní fáze z kolony nejprve prochází nerezovou kapilárou kde se kapalina temperuje na teplotu detektoru a následně vstupuje do měřící cely (je třeba ovšem současně omezit mimokolovové objemy). 8

9 Velmi podstatná je i referenční cela naplněná čistou mobilní fází. RI detektory nejsou vhodné pro gradientovou eluci, nicméně případně je možné je i v tomto režimu aplikovat, ale za předpokladu, že v referenční cele se mnění složení mobilní fáze přesně tak, jako v měrné cele. Také je nutné se rozhodně vyhnout kolísání průtoku v cele, protože zhoršuje podstatně šum. Cely v komerčních RI detektorech nesnesou vyšší tlaky a při vystavení zvýšenému tlaku dojde k prasknutí cely. Bylo popsáno několik různých typů RI detektorů, dva jsou nejběžnější. Deflekční (výchylkový) refraktometrický detektor Jeho cela (obrázek níže) je rozdělena přepážkou na dvě části. Jedna část obsahuje referenční kapalinu a druhou prochází efluent z kolony. Směr paprsku světla vycházejícího z cely se změní, pokud se změní složení kapalin (a tím index lomu) v celách. Záření prochází přes masku, dvakrát přes čočku (tam a zpět) a dvakrát dvojitou celou. Když je v měrné cele čistá mobilní fáze, je možno nastavit optickou nulu tak, že paprsek dopadá na štěrbinu před fotocelou. Jakákoliv změna složení roztoku v měrné cele způsobí odchýlení paprsku mimo štěrbinu. Fotodioda změní odpor a vhodný elektrický obvod změní napětí a poskytne odpovídající signál. Interferometrický detektor Světlo prochází přes dělič paprsku kde dojde k rozdělení paprsku na dva paprsky stejné intenzity, jeden pak prochází přes referenční celu a druhý přes měrnou celu a potom jsou oba paprsky na sebe superponovány druhým děličem paprsku za celami a dojde tedy k interferenci paprsků. Jestliže se indexy lomu kapalin v měrné a referenční cele liší, 9

10 pohybuje se světlo v celách odlišnou rychlostí a dojde k jeho částečnému potlačení ve druhém děliči. Průchod analytu detektorem se tedy projeví jako zeslabení zářivého toku podobně jako u jiných RI detektorů. Interferometr (obrázek níže) je 10 x citlivější než jiné RI detektory. Vysoká citlivost může být i nevýhodná, protože tento detektor je citlivější na fluktuace průtoku a neúplnou kondicionaci kolony. Je nutno pracovat s velkou pečlivostí, pokud má být citlivost detektoru využita. Nejcitlivější cela má objem asi 15 µl a nejmenší cela, méně citlivá, 1.5 µl. c) Fluorescenční detektory Látky fluoreskující nebo látky derivatizované zavedením fluoreskující funkční skupiny jsou velmi selektivně měřeny fluorescenčním detektorem. Citlivost může být až přibližně 1000 x vyšší než pro detekci UV detektorem. Záření o vybrané vlnové délce vstupuje do měrné cely a fluorescenčí záření o vyšší vlnové délce je snímáno v pravém úhlu vzhledem ke vstupnímu záření. Citlivost je zvýšena použitím větší cely (>20 µl). Jednoduché přístroje, jako na obrázku níže, mají pevnou excitační vlnovou délku a pevný rozsah vlnových délek emitovaného záření sbíraného detektorem. Nejpokročilejší modely jsou vybaveny monochromátory, a lze tak nastavit vlnovou délku jak vstupujícího paprsku, tak emitovaného záření. 10

11 Je třeba se vyhnout přítomnosti nečistot v mobilní fázi, použití nevhodné mobilní fáze nebo přítomnost kyslíku v mobilní fázi, vedou k možnosti zhášení fluorescence. Fluorescenční detektor má lineární dynamický rozsah závislý na konkrétních podmínkách, tzn. složení mobilní fáze, typu vzorku, nečistotách ve vzorku, může být ale obecně poměrně malý. Níže prezentovaný obrázek ukazuje chromatogram, kde je využita fluorescence a UV detekce. d) Rozptylové detektory Odpařovací rozptylový detektor (ELSD) je instrument pro univerzální detekci netěkavých látek. Efluent z kolny je nebulizován proudem inertního plynu za zvýšené teploty. Kapičky jsou sušeny a vznikají pevné částice analytu procházející paprskem laseru (LED) nebo polychromatického světla. Výsledné rozptýlené světlo je detekováno fotodiodou nebo fotonásobičem (obrázek níže). Popis principu ukazuje na to, že mobilní fáze musí být relativně těkavá, včetně pufrů a dalších aditiv, ve srovnání s detekovaným analytem. Těkavé pufry je možno připravit na základě kyseliny octové, mravenčí nebo případně trifluoroctové; musí být ale vysoké čistoty. Gradient grade v tomto případě může být nedostačující. Nebulizační plyn je většinou dusík, případně tlakový vzduch. 11

12 Odezva detektoru je složitou funkcí nadávkovaného množství analytu a téměř nezávisí na jeho chemickém složení a funkčních skupinách. Základní linie není ovlivňována UV vlastnostmi mobilní fáze, jejím indexem lomu, ani změnami složení mobilní fáze, takže detektor je vhodný pro gradientové separace. Lineární dynamický rozsah je výrazně menší než dynamický rozsah, proto jsou často při reálných měřeních používány nelineální kalibrační závislosti. Detekční limit je asi x lepší než u RI detektorů, v závislosti na analytu. 12

13 Elektrochemické (amperometrické) detektory Elektrochemie poskytuje dobré možnosti detekce stopových množství látek snadno oxidovatelných nebo redukovatelných. Detekční limity mohou být až mimořádně nízké a detektory jsou jednoduché a levné. Detekční cela, kde probíhá elektrochemická reakce má tři elektrody (obrázek níže). Mezi pracovní a referenční elektrodou je možno nastavit vhodný rozdíl potenciálů. Proud související s elektrochemickou reakcí je odváděn pomocnou elektrodou, takže neovlivňuje potenciál referenční elektrody. Pracovní elektroda je tvořena skelným uhlíkem, uhlíkovou pastou nebo amalgámovým zlatem. Běžně se jako referenční elektroda používá argent-chloridová elektroda Ag/AgCl. Pomocná elektroda je většinou ocelová. 13

14 Cyklická voltametrie je schopna odhalit, jaká látka může být detekována elektrochemicky a při jakém nejvhodnějším potenciálu. Aromatické hydroxy- látky, aromatické aminy, indoly, fenothiaziny, thioly lze detekovat oxidativně (při kladném potenciálu). Na druhou staranu reduktivní detekce (při záporném potenciálu) se využívá zřídka, a to z toho důvodu, že těžké kovy (například z ocelových kapilár) a rozpuštěný kyslík mohou vést k problémům. Metoda může být užita pro detekci nitrosaminů a řady polutantů. Mobilní fáze musí být vhodně vybrána, aby podporovala elektrochemický proces. Mobilní fáze musí být vodivá, ale ne nutně vodná; nepolární solventy a adsorpční chromatografie není kompatibilní s elektrochemickou detekcí. Mobilní fáze nesmí obsahovat chloridy nebo hydroxykarboxylové kyseliny. Elektrochemický výtěžek není větší než 1-10%, tj. většina látky odchází z cely nezměněna. 100% konverze je dosažena v tzv. coulometrickém detektoru, ale nemusí být citlivější než amperometrický detektor. Speciální technika je pulzní amperometrická detekce, vhodná pro COH látky a zvlášť pro sacharidy. Uvedené analyty mohou být oxidovány na stříbrné nebo zlaté pracovní elektrodě při vysoké hodnotě ph, ale vznikající produkty otravují povrch elektrody. Proto není potenciál neměnný, naopak mění se v přesně definovaných krocích po 0.1 až 1.0 s. Jeden tento krok je aplikován pro detekci analytu (např. 200 ms) a druhý zase pro očištění povrchu. Pracovní a referenční elektrody jsou náchylné ke kontaminaci a jejich životnost je omezená. Referenční elektroda se vyměňuje po 3 až 12 měsících. Pracovní elektroda se musí čas od času čistit suspenzí aluminy, aby se zbavila kontamintů. 14

15 Vodivostní detektory Jedná se o typický detektor v iontové chromatografii (IC) měřící vodivost efluentu, ta je úměrná koncentraci detekovaného iontu. Citlivost detekce klesá s nárůstem vodivosti mobilní fáze. Objem cely je velmi malý, asi 2 µl. Dobré vodivostní detektory jsou vybaveny teplotní kompenzací (protože vodivost je silně závislá na teplotě) a elektronickým potlačením vodivosti. Lineální dynamický rozsah není velký. Infračervené detektory Každá organická molekula absorbuje při určité vlnové délce infračervené záření. Pokud je pro detekci využit princip IČ nesmí mobilní fáze při příslušné vybrané vhodné vlnové délce absorbovat IČ záření. Hexan, dichlormethan a acetonitril jsou vhodné mobilní fáze pro detekci esterů, na druhou stranu, ethyl acetát vhodný není. Citlivost není lepší ve srovnání s RI detektory. Nejběžnější vlnové délky jsou shrnuty v tabulce. Laserem-indukovaná fluorescence, LIF Fluorescenci lze vyvolat také zářením laseru. Poměr signál/šum je velmi příznivý, a proto jsou meze detekce velmi dobré. Nicméně, existuje jen několik použitelných vlnových délek, nejnižší je 325 nm (poměrně vysoká). Proto analyt musí být derivatizován vhodnou funkční skupinou (značka). 15

16 Detektor měřící radioaktivitu 1 Jsou aplikovány především pro β-zářiče 3 H, 14 C, 32 P, 35 S a 131 I. Potřebný scintilátor pro tyto poměrně slabé zářiče je buď v kapalné formě za kolonou a před detektorem míchán do efluentu nebo je aplikován v pevné formě v měrné cele. Spřažené metody a násobná detekce Detektor s diodovým polem může měřit absorbanci efluentu při mnoha vlnových délkách současně. Získává více informací než UV detektor a poskytuje důležitá data pro kvalitativní analýzu neznámých vzorků. Podobně jsou také dostupné elektrochemické detektory pracující při dvou a více různých potenciálech. Dva detektory pracující na různých principech mohou být zapojeny za sebou (obrázek níže), jedním takovým příkladem může být analýza toxických aminů, které se mohou nacházet v potravinách. Ale jen některé aminy vykazují fluorescenci; poměr UV absorpce a fluorescence lze využít pro pozitivní identifikaci píků. 1 A.C. Veltkamp, H.A. Das, R.W. Frei and U.A.T. Brinkman, Eur. Chromatogr. News, 1(2), 16 (1987). For an example see Figure 11.6 with radioactive 14 C. 16

17 Efluent by měl nejprve procházet přes detektor s menší celou a pak s celou větší, to ale neplatí v případě elektrochemických detektorů, kde dojde k reakci, tam by měl být takový detektor zařazen jako poslední v sérii. Ve speciálních případech mohou být detektory řazeny paralelně za využití děliče toku. Paralelní trojitá detekce katecholaminů je dobrým příkladem, elektrochemický proces je doprovázen dvěma odlišnými derivatizačními metodami a následnou fluorescenční detekcí. Nepřímá detekce Nepřímá detekce je možná všude, kde mobilní fáze sama o sobě má vlastnost selektivně měřenou detektorem. Nejjednodušším případem je nepřímá UV detekce. V tomto případě je užita mobilní fáze absorbující UV záření. Neabsorbující látka procházející detektorem je detekována jako negativní pík, protože celková absorpce bude v okamžiku průchodu látky detektorem menší než samotné mobilní fáze. Mobilní fáze by měla mít absorpci 0.4 pro danou vlnovou délku, pokud má být dosažena maximální správnost při kvantitativní analýze. Pokud je absorbance příliš vysoká (nad 0.8, v závislosti na instrumentu), detektor nepracuje 17

18 v lineární oblasti a kvantifikace je vyloučena. Existují návody pro volbu činidel pro dané separační problémy. Nepřímá detekce je možná pro všechny selektivní detekční principy, např. fluorescenční detekci (pokud mobilní fáze poskytuje fluorescenci) nebo elektrochemickou detekci (když se mobilní faze účastní elektochemické reakce). Dokonce byla popsána nepřímá detekce na bázi atomové absorpční spektormetrie, kde mobilní fáze obsahovala lithium nebo měď a spektrometr využíval lithiovou nebo měděnou lampu. Pří technice nepřímé detekce jsou vždy pozorovány tzv. systémové píky a ty vyžadují příslušnou pozornost a komplikují interpretaci chromatogramu. Pro kvantitativní analýzu je dobré uvést, že plocha píku je závislá nejen na hmotnosti analytu, ale také na jeho retenčním faktoru, k, (ve vztahu ke k systémového píku) a koncentraci detekovatelné složky mobilní fáze. Detekce využívající spektroskopické a spektrometrické metody HPLC může být kombinována s mnoha analytickými technikami, ale nejdůležitější je spojení s technikami spektroskopickými. Chromatografie a spektroskopie jsou ortogonální techniky, tj. informace, které poskytují jsou vzájemně velmi odlišné a doplňující se. Chromatografie je separační technika a spektroskopie je technika poskytující fingerprint (otisk prstu) molekuly. Spojení s atomovou spektrometrií je málokdy používané, i když umožňuje detekci kovů ve vzorcích ze životního prostředí nebo metaloproteinů. Čtyři další techniky, HPLC- UV, HPLC-FTIR, HPLC-MS a HPLC-NMR jsou významnější, protože pomocí nich jsou získávána spektra umožňující zjištění struktury analytu. HPLC-UV: Detektor s diodovým polem Ve srovnání s konvenčními UV detektory je detektor s diodovým polem založen na inverzní optice. Obrázek níže znázorňuje princip instrumentu. Plné záření nejprve prochází detekční celou a teprve za celou je spektrálně rozděleno na mřížce na jednotlivé paprsky odlišných vlnových délek. Následně paprsky dopadají na diodové pole, které je na čipu a má velký počet (512, 1024) na záření citlivých diod distribuovaných vedle sebe, takže paprsky jednotlivých vlnových délek dopadají na jednotlivé fotodiody. Elektronicky je zpracována informace z celého čipu a je měřeno celé UV-VIS spektrum efluentu současně. 18

19 Tento detektor poskytuje velké množství informací a možnosti jeho využití jsou různorodé (obrázek níže): (a) Lze získat a uložit spektra jednotlivých píků během chromatografie. Tento proces nezabere více než 0,1 sekundy, takže je možné dostat několik spekter i pro úzké rychle se eluující píky. Spektra mohou být uložena do knihovny a použita při identifikaci analytů. Pro zlepšení porovnání knihovních a měřených spekter se často aplikuje druhá derivace, kde je více maxim a minim než v původním spektru. (b) Znalost spekter měřených látek pomáhá při volbě vhodných vlnových délek pro jejich detekci. Někdy je tak možné eliminovat interferující píky. Volbou vhodných vlnových délek se často dá dosáhnout správné kvantifikace i tehdy, kdy je dělící schopnost systému malá a neumožňuje úplné rozdělení všech složek vzorku. Detekční vlnová délka může být měněna během chromatografie. (c) Současné měření při dvou vlnových délkách se schopno poskytovat poměr absorbancí na těchto dvou vybraných vlnových délkách. Pokud je poměr konstantní přes celý pík, je možno předpokládat, že pík obsahuje jen jednu složku. Pokud poměr konstantní není, je pravděpodobné, že pík obsahuje dvě nebo více složek. (Tento princip rozpoznání případné kontaminace píku nefunguje za předpokladu přesné koeluce nečistoty se složkou a také v případě velmi podobných spekter složky a interferující nečistoty). 19

20 (d) Odečtení dvou vlnových délek umožňuje dosažení snížení driftu a šumu v gradientové separaci. Referenční vlnová délka je zvolena tak, že při ní žádná měřená složka neabsorbuje. HPLC-FTIR Spojení s infračervenou spektroskopií s Fourierovou transformací poskytuje možnost získání spekter. Detekční limity jsou ale poměrně špatné při průtokovém uspořádání. Uspořádání, kdy je odečítán signál mobilní fáze je přínosnější a vede i k možnosti detekce a naměření 20

21 spekter stopových koncentrací analytů, ale technicky je tento systém náročný. Musí být použity těkavé mobilní fáze, přitom mohou být i vodné. HPLC-MS Hmotnostní spektrometry pro HPLC sestávají z tří odlišných částí: iontového zdroje, kde eluent z kolny vstupuje do hmotnostního spektrometru a je ionizován, hmotnostního analyzátoru a detektoru, elektronového násobiče detekujícího intenzitu svazku iontů. V současnosti se pro spojení HPLC s MS využívají především techniky ionizace za atmosférického tlaku. Z nich dvě nejdůležitější techniky jsou ESI a APCI. ESI: ionizace elektrosprejem: (a) Ionty jsou generovány coulombickou explozí elektricky nabitých kapiček. (b) Poskytuje ionty jednou nebo mnohonásobě nabité; v posledně zmíněném případě jsou výsledkem spektra obsahující mnoho píků, ty nesmí být zaměňovány za fragmenty v klasických spektrech. (c) Vhodná technika pro polární, termolabilní analyty a makromolekuly včetně biopolymerů. (d) Vhodná technika pro vodné mobilní fáze; vhodné pro mikro HPLC. (e) Pro ionizaci v kladném modu je příhodné ph kolem 5, aditiva jsou kyselina mravenčí a octová, případně octan ammoný: Analyt + HA -> AnalytH + + A - (f) Pro ionizaci v záporném modu je vhodné ph kolem 9, aditivem může být amoniak, triethylamin a diethylamin, případně octan ammoný: AnalytH + B -> Analyt - + HB + (g) Koncentračně-citlivý detektor. 21

22 APCI: Chemická ionizace za atmosférického tlaku: (a) Ionty jsou generovány koronovým výbojem (3-6 kv). (b) Vznikají především ionty typu (M+H) + (často žádná fragmenty), vznik negativních iontů je také možný. (c) Technika je vhodná pro nízkomolekulární středně polární látky. (d) Technika není vhodná pro termolabilní látky. (e) Průtok mobilní fáze musí být dostatečně velký, bývá kolem 1 mlmin -1. (f) Pro nevodné mobilní fáze není třeba přidávat aditiva, jsou možné reakce se solventem při ionizaci. (g) Pro vodné mobilní fáze může být nutné dodávat aditiva pro lepší ionizaci. (h) Hmotnostně-závislý signál. Kvadrupóly a iontové pasti jsou nejběžnější analyzátory. Tyto systémy jsou relativně levné robustní, ale mají nízké rozlišení, tzv, jednotkové roylišení, bývá kolem 0,7 Da. Ionty mohou procházet několika analyzátory, kde může dojít k jejich fragmentaci, a tím může být získána další informace o detailní struktuře analytu. Tyto techniky jsou známy jako MS/MS (dva stupně) nebo MS n (n supňů). 22

23 HPLC-NMR Techniku měření jaderné magnetické rezonance je možno spojit s HPLC za předpokladu výběru vhodné mobilní fáze (signál jednoho solventu lze potlačit, další solventy musí být deuterované) a koncentrace analytu nesmí být příliš nízká. Detekční limit závisí na radiofrekvenci, je tedy vhodné užívat instrumenty typu MHz. Když je koncentrace analytu vysoká je možné měřit on-line, pokud je menší, a je to častá situace, je analyt navzorkován do smyčky během separace a měřen následně off-line. LC-UV, LC-MS a LC-NMR lze kombinovat, jak je prezentováno na obrázku níže v případě zjišťování složek v rostlinném extraktu. 23

Příprava materiálu byla podpořena projektem OPPA č. CZ.2.17/3.1.00/33253

Příprava materiálu byla podpořena projektem OPPA č. CZ.2.17/3.1.00/33253 Příprava materiálu byla podpořena projektem OPPA č. CZ.2.17/3.1.00/33253 Část 9 Adsorpční chromatografie: Chromatografie v normálním módu Tento chromatografický mód je vysvětlen na silikagelu jako nejdůležitějším

Více

DETEKTORY pro kapalinovou chromatografii. Izolační a separační metody, 2018

DETEKTORY pro kapalinovou chromatografii. Izolační a separační metody, 2018 DETEKTORY pro kapalinovou chromatografii Izolační a separační metody, 2018 Detektory v kapalinové chromatografii Typ detektoru Zkratka Měřená veličina Refraktometrický detektor RID index lomu Spektrofotometrický

Více

Hmotnostní spektrometrie

Hmotnostní spektrometrie Hmotnostní spektrometrie Podstatou hmotnostní spektrometrie je studium iontů v plynném stavu. Tato metoda v sobě zahrnuje tři hlavní části:! generování iontů sledovaných atomů nebo molekul! separace iontů

Více

HPLC - Detektory A.Braithwaite and F.J.Smith; Chromatographic Methods, Fifth edition, Blackie Academic & Professional 1996 Colin F. Poole and Salwa K.

HPLC - Detektory A.Braithwaite and F.J.Smith; Chromatographic Methods, Fifth edition, Blackie Academic & Professional 1996 Colin F. Poole and Salwa K. Vysokoúčinná kapalinová chromatografie - Detektory - I Příprava předmětu byla podpořena projektem OPPA č. CZ.2.17/3.1.00/33253 HPLC - Detektory A.Braithwaite and F.J.Smith; Chromatographic Methods, Fifth

Více

CRH/NPU I - Systém pro ultraúčinnou kapalinovou chromatografii (UHPLC) ve spojení s tandemovým hmotnostním spektrometrem (MS/MS)

CRH/NPU I - Systém pro ultraúčinnou kapalinovou chromatografii (UHPLC) ve spojení s tandemovým hmotnostním spektrometrem (MS/MS) ODŮVODNĚNÍ VEŘEJNÉ ZAKÁZKY v souladu s 156 zákona č. 137/2006, Sb., o veřejných zakázkách, ve znění pozdějších předpisů Nadlimitní veřejná zakázka na dodávky zadávaná v otevřeném řízení v souladu s ust.

Více

Detekce ve vysokoúčinné kapalinové chromatografii

Detekce ve vysokoúčinné kapalinové chromatografii Detekce ve vysokoúčinné kapalinové chromatografii Josef Cvačka, 24.11.2010 2010 Detekce v HPLC základní pojmy Detektor Detektor je zařízení, které monitoruje změny složení mobilní fáze měřením fyzikálních

Více

VYUŽITÍ TEPELNÉHO ZMLŽOVAČE V AAS

VYUŽITÍ TEPELNÉHO ZMLŽOVAČE V AAS 1 VYUŽITÍ TEPELNÉHO ZMLŽOVAČE V AAS JAN KNÁPEK Katedra analytické chemie, Přírodovědecká fakulta MU, Kotlářská 2, Brno 611 37 Obsah 1. Úvod 2. Tepelný zmlžovač 2.1 Princip 2.2 Konstrukce 2.3 Optimalizace

Více

Příprava materiálu byla podpořena projektem OPPA č. CZ.2.17/3.1.00/33253

Příprava materiálu byla podpořena projektem OPPA č. CZ.2.17/3.1.00/33253 Příprava materiálu byla podpořena projektem OPPA č. CZ.2.17/3.1.00/33253 Část 4 - Nástřik vzorku Dávkovače vzorků/injektory Dávkování vzorků je jednou z klíčových záležitostí v HPLC. Ani nejlepší kolona

Více

Infračervená spektroskopie

Infračervená spektroskopie Infračervená spektroskopie 1 Teoretické základy Podstatou infračervené spektroskopie je interakce infračerveného záření se studovanou hmotou, kdy v případě pohlcení fotonu studovanou hmotou mluvíme o absorpční

Více

Příprava materiálu byla podpořena projektem OPPA č. CZ.2.17/3.1.00/33253

Příprava materiálu byla podpořena projektem OPPA č. CZ.2.17/3.1.00/33253 Příprava materiálu byla podpořena projektem OPPA č. CZ.2.17/3.1.00/33253 Část 6 - Gradientové systémy V případě separace složitých vzorků musí být složení mobilní fáze v průběhu analýzy měněno. Změna složení

Více

Příprava materiálu byla podpořena projektem OPPA č. CZ.2.17/3.1.00/33253

Příprava materiálu byla podpořena projektem OPPA č. CZ.2.17/3.1.00/33253 Příprava materiálu byla podpořena projektem OPPA č. CZ.2.17/3.1.00/33253 Část 7 Vlastnosti solventů (rozpouštědel) Přehled organických rozpouštědel Tabulka níže shrnuje velký počet solventů v pořadí stoupající

Více

Aplikace elektromigračních technik

Aplikace elektromigračních technik Aplikace elektromigračních technik Capillary electrophoresis D.L.Barker High Performance Capillary electrophoresis M.G. Khaledi Analysis and detection by capillary electrophoresis M.L.Marina (ed.) Electrophoresis

Více

HMOTNOSTNÍ SPEKTROMETRIE - kvalitativní i kvantitativní detekce v GC a LC - pyrolýzní hmotnostní spektrometrie - analýza polutantů v životním

HMOTNOSTNÍ SPEKTROMETRIE - kvalitativní i kvantitativní detekce v GC a LC - pyrolýzní hmotnostní spektrometrie - analýza polutantů v životním HMOTNOSTNÍ SPEKTROMETRIE - kvalitativní i kvantitativní detekce v GC a LC - pyrolýzní hmotnostní spektrometrie - analýza polutantů v životním prostředí - farmakokinetické studie - kvantifikace proteinů

Více

Mobilní fáze. HPLC mobilní fáze 1

Mobilní fáze. HPLC mobilní fáze 1 Mobilní fáze 1 VLIV CHROMATOGRAFICKÝCH PODMÍNEK NA ELUČNÍ CHARAKTERISTIKY SEPAROVANÝCH LÁTEK - SLOŽENÍ MOBILNÍ FÁZE Složení mobilní fáze má vliv na eluční charakteristiky : účinnost kolony; kapacitní poměr;

Více

Sylabus přednášek z analytické chemie I. v letním semestru 2015/2016

Sylabus přednášek z analytické chemie I. v letním semestru 2015/2016 Sylabus přednášek z analytické chemie I. v letním semestru 2015/2016 1. Základní pojmy Úkoly ACH, základní dělení (kvantitativní, kvalitativní, distribuční a strukturní, speciační) Vzorek, analyt, matrice

Více

Problémy u kapalinové chromatografie

Problémy u kapalinové chromatografie Problémy u kapalinové chromatografie Troubleshooting 1 Problémy v HPLC Většinu problémů, které se vyskytují při separaci látek na chromatografické koloně můžeme vyčíst již zpouhého průběhu základní linie,

Více

Sekvenční injekční analýza laboratoř na ventilu (SIA-LOV) (Stanovení obsahu heparinu v injekčním roztoku)

Sekvenční injekční analýza laboratoř na ventilu (SIA-LOV) (Stanovení obsahu heparinu v injekčním roztoku) Sekvenční injekční analýza laboratoř na ventilu (SIA-LOV) (Stanovení obsahu heparinu v injekčním roztoku) Teorie: Sekvenční injekční analýza (SIA) je další technikou průtokové analýzy, která umožňuje snadnou

Více

Identifikace barviv pomocí Ramanovy spektrometrie

Identifikace barviv pomocí Ramanovy spektrometrie Identifikace barviv pomocí Ramanovy spektrometrie V kriminalistických laboratořích se provádí technická expertíza písemností, která se mimo jiné zabývá zkoumáním použitých psacích prostředků: tiskových

Více

KOMBINACE CHROMATOGRAFICKÝCH A SPEKTRÁLNÍCH METOD

KOMBINACE CHROMATOGRAFICKÝCH A SPEKTRÁLNÍCH METOD KOMBINACE CHROMATOGRAFICKÝCH A SPEKTRÁLNÍCH METOD Spojení obou metod - nejúčinnější nástroj pro kvalitativní a kvantitativní analýzu složitých směsí # identifikace látek po předchozí separaci ze složité

Více

Klinická a farmaceutická analýza. Petr Kozlík Katedra analytické chemie

Klinická a farmaceutická analýza. Petr Kozlík Katedra analytické chemie Klinická a farmaceutická analýza Petr Kozlík Katedra analytické chemie e-mail: kozlik@natur.cuni.cz http://web.natur.cuni.cz/~kozlik/ 1 Spojení separačních technik s hmotnostní spektrometrem Separační

Více

P. Martinková, D. Pospíchalová, R. Jobánek, M. Jokešová. Stanovení perfluorovaných organických látek v elektroodpadech

P. Martinková, D. Pospíchalová, R. Jobánek, M. Jokešová. Stanovení perfluorovaných organických látek v elektroodpadech P. Martinková, D. Pospíchalová, R. Jobánek, M. Jokešová Stanovení perfluorovaných organických látek v elektroodpadech Perfluorované a polyfluorované uhlovodíky (PFC,PFAS) Perfluorované - všechny vodíky

Více

STANOVENÍ AMINOKYSELINOVÉHO SLOŽENÍ BÍLKOVIN. Postup stanovení aminokyselinového složení

STANOVENÍ AMINOKYSELINOVÉHO SLOŽENÍ BÍLKOVIN. Postup stanovení aminokyselinového složení STANVENÍ AMINKYSELINVÉH SLŽENÍ BÍLKVIN Důvody pro stanovení AK složení určení nutriční hodnoty potraviny, suroviny (esenciální vs. neesenciální AK) charakterizace určité bílkovinné frakce nebo konkrétní

Více

ANALYTICKÉ METODY STOPOVÉ ANALÝZY

ANALYTICKÉ METODY STOPOVÉ ANALÝZY ANALYTICKÉ METODY STOPOVÉ ANALÝZY Požadavky na analytické metody: - robustnost (spolehlivost) - citlivost - selektivita stanovení - možnost automatizace Klasická chemická roztoková analýza většinou nevyhovuje

Více

Iontové zdroje II. Iontový zdroj. Data. Vzorek. Hmotnostní analyzátor. Zdroj vakua. Iontové zdroje pracující za sníženého tlaku

Iontové zdroje II. Iontový zdroj. Data. Vzorek. Hmotnostní analyzátor. Zdroj vakua. Iontové zdroje pracující za sníženého tlaku MC230P43 Hmotnostní detekce v separačních metodách, 2015 Iontové zdroje II. Iontové zdroje pracující za sníženého tlaku Elektronová/chemická ionizace Iontové zdroje pro spojení s planárními separacemi

Více

Příprava materiálu byla podpořena projektem OPPA č. CZ.2.17/3.1.00/33253

Příprava materiálu byla podpořena projektem OPPA č. CZ.2.17/3.1.00/33253 Příprava materiálu byla podpořena projektem OPPA č. CZ.2.17/3.1.00/33253 Část 16 Iontová chromatografie Iontová chromatografie je speciální technika vyvinutá pro separaci anorganických iontů a organických

Více

Analýza směsí, kvantitativní NMR spektroskopie a využití NMR spektroskopie ve forenzní analýze

Analýza směsí, kvantitativní NMR spektroskopie a využití NMR spektroskopie ve forenzní analýze Analýza směsí, kvantitativní NMR spektroskopie a využití NMR spektroskopie ve forenzní analýze Analýza směsí a kvantitativní NMR NMR spektrum čisté látky je lineární kombinací spekter jejích jednotlivých

Více

HMOTNOSTNÍ SPEKTROMETRIE

HMOTNOSTNÍ SPEKTROMETRIE HMOTNOSTNÍ SPEKTROMETRIE A MOŽNOSTI JEJÍHO SPOJENÍ SE SEPARAČNÍMI METODAMI SEPARACE chromatografie CGC, GC x GC HPLC, UPLC, UHPLC, CHIP-LC elektromigrační m. CZE, CITP INTERFACE SPOJENÍ x ROZHRANÍ GC vyhřívaná

Více

Stanovení cholesterolu ve vaječném žloutku a mléce kapilární elektroforézou

Stanovení cholesterolu ve vaječném žloutku a mléce kapilární elektroforézou Stanovení cholesterolu ve vaječném žloutku a mléce kapilární elektroforézou Úkol Stanovte obsah cholesterolu ve vaječném žloutku a mléce pomocí kapilární elektroforézy. Teoretická část Cholesterol je steroidní

Více

Stanovení sacharidů ve vybraných přírodních matricích pomocí kapalinové chromatografie s odpařovacím detektorem rozptylu světla (UHPLC-ELSD)

Stanovení sacharidů ve vybraných přírodních matricích pomocí kapalinové chromatografie s odpařovacím detektorem rozptylu světla (UHPLC-ELSD) Stanovení sacharidů ve vybraných přírodních matricích pomocí kapalinové chromatografie s odpařovacím detektorem rozptylu světla (UHPLC-ELSD) A) Ultrazvuková extrakce Ultrazvuková extrakce je významnou

Více

Průtokové metody (Kontinuální měření v proudu kapaliny)

Průtokové metody (Kontinuální měření v proudu kapaliny) Průtokové metody (Kontinuální měření v proudu kapaliny) 1. Přímé měření: analyzovaná kapalina většinou odvětvena + vhodný detektor 2. Kapalinová chromatografie (HPLC) Stanovení po předchozí separaci 3.

Více

Úvod do spektrálních metod pro analýzu léčiv

Úvod do spektrálních metod pro analýzu léčiv Evropský sociální fond Praha & EU: Investujeme do vaší budoucnosti Úvod do spektrálních metod pro analýzu léčiv Pavel Matějka, Vadym Prokopec pavel.matejka@vscht.cz pavel.matejka@gmail.com Vadym.Prokopec@vscht.cz

Více

Izolace genomové DNA ze savčích buněk, stanovení koncentrace DNA pomocí absorpční spektrofotometrie

Izolace genomové DNA ze savčích buněk, stanovení koncentrace DNA pomocí absorpční spektrofotometrie Izolace genomové DNA ze savčích buněk, stanovení koncentrace DNA pomocí absorpční spektrofotometrie IZOLACE GENOMOVÉ DNA Deoxyribonukleová kyselina (DNA) představuje základní genetický materiál většiny

Více

215.1.10 SKUPINOVÁ ANALÝZA MOTOROVÝCH NAFT

215.1.10 SKUPINOVÁ ANALÝZA MOTOROVÝCH NAFT 215.1.10 SKUPINOVÁ ANALÝZA MOTOROVÝCH NAFT ÚVOD Snižování emisí výfukových plynů a jejich škodlivosti je hlavní hnací silou legislativního procesu v oblasti motorových paliv. Po úspěšném snížení obsahu

Více

Problémy v kapalinové chromatografii. Troubleshooting

Problémy v kapalinové chromatografii. Troubleshooting Problémy v kapalinové chromatografii Troubleshooting Problémy v HPLC Většinu problémů, které se vyskytují při separaci látek na chromatografické koloně můžeme vyčíst již z pouhého průběhu základní linie,

Více

Stanovení vodní páry v odpadních plynech proudících potrubím

Stanovení vodní páry v odpadních plynech proudících potrubím Vysoká škola chemicko-technologická v Praze Ústav plynárenství, koksochemie a ochrany ovzduší Technická 5, 166 28 Praha 6 Stanovení vodní páry v odpadních plynech proudících potrubím Semestrální projekt

Více

ANORGANICKÁ HMOTNOSTNÍ SPEKTROMETRIE

ANORGANICKÁ HMOTNOSTNÍ SPEKTROMETRIE ANORGANICKÁ HMOTNOSTNÍ SPEKTROMETRIE (c) David MILDE 2003-2010 Metody anorganické MS ICP-MS hmotnostní spektrometrie s indukčně vázaným plazmatem, GD-MS spojení doutnavého výboje s MS, SIMS hmotnostní

Více

KAPALINOVÁ CHROMATOGRAFIE A ABSORPČNÍ UV SPEKTROFOTOMETRIE

KAPALINOVÁ CHROMATOGRAFIE A ABSORPČNÍ UV SPEKTROFOTOMETRIE KAPALINOVÁ CHROMATOGRAFIE A ABSORPČNÍ UV SPEKTROFOTOMETRIE D. SÝKORA, J. FÄHNRICH Obecné základy kapalinové eluční kolonové chromatografie Kapalinová chromatografie je jednou z chromatografických separačních

Více

L 54/116 CS Úřední věstník Evropské unie

L 54/116 CS Úřední věstník Evropské unie L 54/116 CS Úřední věstník Evropské unie 26.2.2009 8. Výsledky kruhových testů V rámci ES byly provedeny kruhové testy, při nichž až 13 laboratoří zkoušelo čtyři vzorky krmiva pro selata, včetně jednoho

Více

Příloha 2. Návod pro laboratorní úlohu

Příloha 2. Návod pro laboratorní úlohu Příloha 2. Návod pro laboratorní úlohu VYSOKÁ ŠKOLA CHEMICKO-TECHNOLOGICKÁ V PRAZE ÚSTAV CHEMIE A ANALÝZY POTRAVIN Technická 5, 166 28 Praha 6 tel./fax.: + 42 224 353 185; jana.hajslova@vscht.cz Analýza

Více

Návod pro laboratorní úlohu: Komerční senzory plynů a jejich testování

Návod pro laboratorní úlohu: Komerční senzory plynů a jejich testování Návod pro laboratorní úlohu: Komerční senzory plynů a jejich testování Úkol měření: 1) Proměřte závislost citlivosti senzoru TGS na koncentraci vodíku 2) Porovnejte vaši citlivostní charakteristiku s charakteristikou

Více

Obr. 1. Struktura glukosaminu.

Obr. 1. Struktura glukosaminu. 3. Stanovení glukosaminu ve výživových doplňcích pomocí kapilární elektroforézy Glukosamin (2-amino-2-deoxyglukózamonosacharid je široce distribuován ve tkáních lidského organismu jako složka je klíčovou

Více

Autonomní hlásiče kouře

Autonomní hlásiče kouře Autonomní hlásiče kouře Povinnost obstarat, instalovat a udržovat v provozuschopném stavu požárně bezpečnostní zařízení vyplývá právnickým a podnikajícím fyzickým osobám zejména z ustanovení 5 odst. 1

Více

Inovace bakalářského studijního oboru Aplikovaná chemie CZ.1.07/2.2.00/15.0247

Inovace bakalářského studijního oboru Aplikovaná chemie CZ.1.07/2.2.00/15.0247 Papírová a tenkovrstvá chromatografie Jednou z nejrozšířenějších analytických metod je bezesporu chromatografie, umožňující účinnou separaci látek nutnou pro spolehlivou identifikaci a kvantifikaci složek

Více

Evropský sociální fond Praha & EU: Investujeme do vaší budoucnosti LC-NMR 1. Jan Sýkora

Evropský sociální fond Praha & EU: Investujeme do vaší budoucnosti LC-NMR 1. Jan Sýkora Evropský sociální fond Praha & EU: Investujeme do vaší budoucnosti LC-NMR 1 Jan Sýkora LC/NMR Jan Sýkora (ÚCHP AV ČR) LC - NMR 1 H NMR (500 MHz) mez detekce ~ 1 mg/ml (5 µmol látky) NMR parametry doba

Více

HMOTNOSTNÍ SPEKTROMETRIE

HMOTNOSTNÍ SPEKTROMETRIE HMOTNOSTNÍ SPEKTROMETRIE MASS SPECTROMETRY (MS) Alternativní názvy (spojení s GC, LC, CZE, ITP): Hmotnostně spektrometrický (selektivní) detektor Mass spectrometric (selective) detector (MSD) Spektrometrie

Více

Jednotné pracovní postupy zkoušení krmiv STANOVENÍ OBSAHU MELAMINU A KYSELINY KYANUROVÉ METODOU LC-MS

Jednotné pracovní postupy zkoušení krmiv STANOVENÍ OBSAHU MELAMINU A KYSELINY KYANUROVÉ METODOU LC-MS Národní referenční laboratoř Strana 1 STANOVENÍ OBSAHU MELAMINU A KYSELINY KYANUROVÉ METODOU LC-MS 1 Rozsah a účel Postup je určen pro stanovení obsahu melaminu a kyseliny kyanurové v krmivech. 2 Princip

Více

Vizualizace DNA ETHIDIUM BROMID. fluorescenční barva interkalační činidlo. do gelu do pufru barvení po elfu SYBR GREEN

Vizualizace DNA ETHIDIUM BROMID. fluorescenční barva interkalační činidlo. do gelu do pufru barvení po elfu SYBR GREEN ETHIDIUM BROMID fluorescenční barva interkalační činidlo do gelu do pufru barvení po elfu Vizualizace DNA SYBR GREEN Barvení proteinů Coommassie Brilliant Blue Coomassie Blue x barvení stříbrem Porovnání

Více

Hmotnostní spektrometrie - Mass Spectrometry (MS)

Hmotnostní spektrometrie - Mass Spectrometry (MS) Hmotnostní spektrometrie - Mass Spectrometry (MS) Další pojem: Hmotnostně spektrometrický (selektivní) detektor - Mass spectrometric (selective) detector (MSD) Spektrometrie - metoda založená na interakci

Více

EXTRAKČNÍ METODY. Studijní materiál. 1. Obecná charakteristika extrakce. 2. Extrakce kapalina/kapalina LLE. 3. Alkalická hydrolýza

EXTRAKČNÍ METODY. Studijní materiál. 1. Obecná charakteristika extrakce. 2. Extrakce kapalina/kapalina LLE. 3. Alkalická hydrolýza Studijní materiál EXTRAKČNÍ METODY 1. Obecná charakteristika extrakce 2. Extrakce kapalina/kapalina LLE 3. Alkalická hydrolýza 4. Soxhletova extrakce 5. Extrakce za zvýšené teploty a tlaku PLE, ASE, PSE

Více

Analyzátory OPTI firmy ROCHE

Analyzátory OPTI firmy ROCHE Analyzátory OPTI firmy ROCHE - øešení kritických situací Prof. MUDr. Jaroslav Racek, DrSc., MUDr. Vlasta Petøíková, Zuzana Pešková Ústav klinické biochemie a laboratorní diagnostiky Lékaøské fakulty UK

Více

Návod pro laboratorní úlohu: Závislost citlivosti plynových vodivostních senzorů na teplotě

Návod pro laboratorní úlohu: Závislost citlivosti plynových vodivostních senzorů na teplotě Návod pro laboratorní úlohu: Závislost citlivosti plynových vodivostních senzorů na teplotě Náplní laboratorní úlohy je proměření základních parametrů plynových vodivostních senzorů: i) el. odpor a ii)

Více

Hmotnostní detekce v separačních metodách

Hmotnostní detekce v separačních metodách Hmotnostní detekce v separačních metodách MC230P83 2/1 Z+Zk 4 kredity doc. RNDr. Josef Cvačka, Ph.D. Mgr. Martin Hubálek, Ph.D. Ústav organické chemie a biochemie AVČR, v.v.i. Flemingovo nám. 2, 166 10

Více

ZÁKLADNÍ ČÁSTI SPEKTRÁLNÍCH PŘÍSTROJŮ

ZÁKLADNÍ ČÁSTI SPEKTRÁLNÍCH PŘÍSTROJŮ ZÁKLADNÍ ČÁSTI SPEKTRÁLNÍCH PŘÍSTROJŮ (c) -2008, ACH/IM BLOKOVÉ SCHÉMA: (a) emisní metody (b) absorpční metody (c) luminiscenční metody U (b) monochromátor často umístěn před kyvetou se vzorkem. Části

Více

Referát z Fyziky. Detektory ionizujícího záření. Vypracoval: Valenčík Dušan. MVT-bak.

Referát z Fyziky. Detektory ionizujícího záření. Vypracoval: Valenčík Dušan. MVT-bak. Referát z Fyziky Detektory ionizujícího záření Vypracoval: Valenčík Dušan MVT-bak. 2 hlavní skupiny detektorů používaných v jaderné a subjaderné fyzice 1) počítače interakce nabitých částic je převedena

Více

Jednotné pracovní postupy zkoušení krmiv STANOVENÍ OBSAHU VITAMÍNU D METODOU LC/MS

Jednotné pracovní postupy zkoušení krmiv STANOVENÍ OBSAHU VITAMÍNU D METODOU LC/MS Národní referenční laboratoř Strana 1 STANOVENÍ OBSAHU VITAMÍNU D METODOU LC/MS 1 Účel a rozsah Tento postup specifikuje podmínky pro stanovení vitamínu D3 v krmivech metodou LC/MS. 2 Princip Zkušební

Více

Chromatografie. Petr Breinek

Chromatografie. Petr Breinek Chromatografie Petr Breinek Chromatografie-I 2012 Společným znakem všech chromatografických metod je kontinuální dělení složek analyzované směsi mezi dvěma fázemi. Pohyblivá fáze (mobilní), eluent Nepohyblivá

Více

Základy interpretace hmotnostních spekter

Základy interpretace hmotnostních spekter Základy interpretace hmotnostních spekter Zpracováno podle: http://www.chem.arizona.edu/massspec/ - doporučený zdroj pro samostudium 1. Měříme četnost iontů pro dané hodnoty m/z 2. Vytvoříme grafickou

Více

CHEMICKY ČISTÁ LÁTKA A SMĚS

CHEMICKY ČISTÁ LÁTKA A SMĚS CHEMICKY ČISTÁ LÁTKA A SMĚS Látka = forma hmoty, která se skládá z velkého množství základních stavebních částic: atomů, iontů a... Látky se liší podle druhu částic, ze kterých se skládají. Druh částic

Více

ELEKTRICKÝ PROUD V KAPALINÁCH, PLYNECH A POLOVODIČÍCH

ELEKTRICKÝ PROUD V KAPALINÁCH, PLYNECH A POLOVODIČÍCH Škola: Autor: DUM: Vzdělávací obor: Tematický okruh: Téma: Masarykovo gymnázium Vsetín Mgr. Jitka Novosadová MGV_F_SS_3S3_D14_Z_OPAK_E_Elektricky_proud_v_kapalinach _plynech_a_polovodicich_t Člověk a příroda

Více

Chromatografické metody základní rozdělení a instrumentace

Chromatografické metody základní rozdělení a instrumentace Chromatografické metody základní rozdělení a instrumentace Plynová chromatografie separace organických látek s bodem varu do 400 C není vhodná k separaci biomakromolekul detekce produktů enzymových reakcí

Více

Spektroskopické é techniky a mikroskopie. Spektroskopie. Typy spektroskopických metod. Cirkulární dichroismus. Fluorescence UV-VIS

Spektroskopické é techniky a mikroskopie. Spektroskopie. Typy spektroskopických metod. Cirkulární dichroismus. Fluorescence UV-VIS Spektroskopické é techniky a mikroskopie Spektroskopie metody zahrnující interakce mezi světlem (fotony) a hmotou (elektrony a protony v atomech a molekulách Typy spektroskopických metod IR NMR Elektron-spinová

Více

INFRAČERVENÁ SPEKTROMETRIE A BIOSLOŽKY PALIV

INFRAČERVENÁ SPEKTROMETRIE A BIOSLOŽKY PALIV VYSOKÁ ŠKOLA CHEMICKO-TECHNOLOGICKÁ V PRAZE Fakulta technologie ochrany prostředí Ústav technologie ropy a alternativních paliv INFRAČERVENÁ SPEKTROMETRIE A BIOSLOŽKY PALIV Laboratorní cvičení ÚVOD V několika

Více

Úloha č. 8 Vlastnosti optických vláken a optické senzory

Úloha č. 8 Vlastnosti optických vláken a optické senzory Úloha č. 8 Vlastnosti optických vláken a optické senzory Optické vlákna patří k nejmodernějším přenosovým médiím. Jejich vysoká přenosová kapacita a nízký útlum jsou hlavní výhody, které je staví před

Více

2. kapitola: Přenosová cesta optická (rozšířená osnova)

2. kapitola: Přenosová cesta optická (rozšířená osnova) Punčochář, J: AEO; 2. kapitola 1 2. kapitola: Přenosová cesta optická (rozšířená osnova) Čas ke studiu: 4 hodiny Cíl: Po prostudování této kapitoly budete umět identifikovat prvky optického přenosového

Více

Konfirmace HPLC systému

Konfirmace HPLC systému Mgr. Michal Douša, Ph.D. Obsah 1. Měření modulové... 2 1.1 Těsnost pístů tlakový test... 2 1.2 Teplota autosampleru (správnost a přesnost)... 2 1.3 Teplota kolonového termostatu... 2 1.3.1 Absolutní hodnota...

Více

Aplikovaná optika. Optika. Vlnová optika. Geometrická optika. Kvantová optika. - pracuje s čistě geometrickými představami

Aplikovaná optika. Optika. Vlnová optika. Geometrická optika. Kvantová optika. - pracuje s čistě geometrickými představami Aplikovaná optika Optika Geometrická optika Vlnová optika Kvantová optika - pracuje s čistě geometrickými představami - zanedbává vlnovou a kvantovou povahu světla - elektromagnetická teorie světla -světlo

Více

Příloha 1: Série chromatogramů vybraných standardů polyfenolických látek zaznamenány pomocí metody HPLC s detekcí UV-DAD.

Příloha 1: Série chromatogramů vybraných standardů polyfenolických látek zaznamenány pomocí metody HPLC s detekcí UV-DAD. PŘÍLOHY 1-3 Seznam příloh Příloha 1: Série chromatogramů vybraných standardů polyfenolických látek zaznamenány pomocí metody HPLC s detekcí UV-DAD. Obr. 1.1: Série chromatogramů standardů polyfenolických

Více

Hmotnostní spektrometrie ve spojení se separačními metodami

Hmotnostní spektrometrie ve spojení se separačními metodami Pražské analytické centrum inovací Projekt CZ.04.3.07/4.2.01.1/0002 spolufinancovaný ESF a Státním rozpočtem ČR Hmotnostní spektrometrie ve spojení se separačními metodami Ivan Jelínek PřF UK Praha Definice:

Více

Analytické metody využívané ke stanovení chemického složení kovů. Ing.Viktorie Weiss, Ph.D.

Analytické metody využívané ke stanovení chemického složení kovů. Ing.Viktorie Weiss, Ph.D. Analytické metody využívané ke stanovení chemického složení kovů. Ing.Viktorie Weiss, Ph.D. Rentgenová fluorescenční spektrometrie ergiově disperzní (ED-XRF) elé spektrum je analyzováno najednou polovodičovým

Více

Kontinuální měření emisí Ing. Petr Braun

Kontinuální měření emisí Ing. Petr Braun ODBORNÉ VZDĚLÁVÁNÍ ÚŘEDNÍKŮ PRO VÝKON STÁTNÍ SPRÁVY OCHRANY OVZDUŠÍ V ČESKÉ REPUBLICE Kontinuální měření emisí Ing. Petr Braun Způsob provádění Emise jako předmět měření Pro účely zákona o ovzduší č. 201/2012

Více

LABORATOŘ OBORU I ÚSTAV ORGANICKÉ TECHNOLOGIE (111) Použití GC-MS spektrometrie

LABORATOŘ OBORU I ÚSTAV ORGANICKÉ TECHNOLOGIE (111) Použití GC-MS spektrometrie LABORATOŘ OBORU I ÚSTAV ORGANICKÉ TECHNOLOGIE (111) C Použití GC-MS spektrometrie Vedoucí práce: Doc. Ing. Petr Kačer, Ph.D., Ing. Kamila Syslová Umístění práce: laboratoř 79 Použití GC-MS spektrometrie

Více

Vítězslav Bártl. květen 2013

Vítězslav Bártl. květen 2013 VY_32_INOVACE_VB16_K Jméno autora výukového materiálu Datum (období), ve kterém byl VM vytvořen Ročník, pro který je VM určen Vzdělávací oblast, vzdělávací obor, tematický okruh, téma Anotace Vítězslav

Více

Repetitorium chemie IX (2016) (teorie a praxe chromatografie)

Repetitorium chemie IX (2016) (teorie a praxe chromatografie) Repetitorium chemie IX (2016) (teorie a praxe chromatografie) Chromatografie Podstatou je rozdělování složek směsi dávkovaného vzorku mezi dvěma fázemi Stacionární fáze je nepohyblivá (silikagel, celulóza,

Více

Kapalinová chromatografie - LC

Kapalinová chromatografie - LC Kapalinová chromatografie - LC Fyzikálně-chemická metoda dělení kapalin (roztoků) využívající rozdělování složky mezi dvě nestejnorodé fáze, nepohyblivou (stacionární) a pohyblivou (mobilní), přičemž pohyblivou

Více

UNIVERZITA KARLOVA V PRAZE FARMACEUTICKÁ FAKULTA V HRADCI KRÁLOVÉ RIGORÓZNÍ PRÁCE

UNIVERZITA KARLOVA V PRAZE FARMACEUTICKÁ FAKULTA V HRADCI KRÁLOVÉ RIGORÓZNÍ PRÁCE UNIVERZITA KARLOVA V PRAZE FARMACEUTICKÁ FAKULTA V HRADCI KRÁLOVÉ KATEDRA FARMACEUTICKÉ CHEMIE A KONTROLY LÉČIV RIGORÓZNÍ PRÁCE HPLC stanovení obsahu amlodipinu a perindoprilu v kombinovaném léčivém přípravku

Více

Ústav molekulární a translační medicíny LF UP - HPLC

Ústav molekulární a translační medicíny LF UP - HPLC VÝZVA PRO PODÁNÍ NABÍDEK VEŘEJNÁ ZAKÁZKA S NÁZVEM: Ústav molekulární a translační medicíny LF UP - HPLC 1. Identifikační údaje zadavatele: Název zadavatele: Univerzita Palackého v Olomouci sídlo zadavatele:

Více

Analytická technika HPLC-MS/MS a možnosti jejího využití v hygieně

Analytická technika HPLC-MS/MS a možnosti jejího využití v hygieně Analytická technika HPLC-MS/MS a možnosti jejího využití v hygieně Šárka Dušková 24. září 2015-61. konzultační den Hodnocení expozice chemickým látkám na pracovištích 1 HPLC-MS/MS HPLC high-performance

Více

Molekulová absorpční spektrometrie (Spektrometrie ve viditelné a UV oblasti)

Molekulová absorpční spektrometrie (Spektrometrie ve viditelné a UV oblasti) Molekulová absorpční spektrometrie (Spektrometrie ve viditelné a UV oblasti) Využívá se (především) absorpce elektromagnetického záření roztoky stanovovaných látek. Látky jsou přítomny ve formě molekul

Více

Repetitorium chemie VIII. (2014)

Repetitorium chemie VIII. (2014) Repetitorium chemie VIII. (2014) Moderní metody analýzy organických látek se zastávkou u Lambert-Beerova zákona a odhalení tajemství Bradforda/Bradfordové Odhalení tajemství: Protein Concentration Determination

Více

13. Spektroskopie základní pojmy

13. Spektroskopie základní pojmy základní pojmy Spektroskopicky významné OPTICKÉ JEVY absorpce absorpční spektrometrie emise emisní spektrometrie rozptyl rozptylové metody Evropský sociální fond Praha & EU: Investujeme do vaší budoucnosti

Více

VYSOKÁ ŠKOLA CHEMICKO-TECHNOLOGICKÁ V PRAZE Ústav chemie a analýzy potravin Technická 5, 166 28 Praha 6 tel./fax: 220443185, tel. 220443184, 224314096

VYSOKÁ ŠKOLA CHEMICKO-TECHNOLOGICKÁ V PRAZE Ústav chemie a analýzy potravin Technická 5, 166 28 Praha 6 tel./fax: 220443185, tel. 220443184, 224314096 strana 1/15 VYSOKÁ ŠKOLA CHEMICKO-TECHNOLOGICKÁ V PRAZE Ústav chemie a analýzy potravin Technická 5, 166 28 Praha 6 tel./fax: 220443185, tel. 220443184, 224314096 PROTOKOL O ZKOUŠCE č. LN 8212 LN 8217

Více

IDENTIFIKACE LÉČIVA V TABLETÁCH POMOCÍ RAMANOVY SPEKTROMETRIE

IDENTIFIKACE LÉČIVA V TABLETÁCH POMOCÍ RAMANOVY SPEKTROMETRIE IDENTIFIKACE LÉČIVA V TABLETÁCH POMOCÍ RAMANOVY SPEKTROMETRIE Úvod Ramanova spektrometrie je metodou vibrační molekulové spektrometrie. Za zakladatele této metody je považován indický fyzik Čandrašékhara

Více

Hmotnostní spektrometrie

Hmotnostní spektrometrie Hmotnostní spektrometrie Princip: 1. Ze vzorku jsou tvořeny ionty na úrovni molekul, nebo jejich zlomků (fragmentů), nebo až volných atomů dodáváním energie, např. uvolnění atomů ze vzorku nebo přímo rozštěpení

Více

SPE je metoda vhodná pro rychlou přípravu vzorků, která užívá

SPE je metoda vhodná pro rychlou přípravu vzorků, která užívá Extrakce na pevné fázi (SPE) Příprava předmětu byla podpořena projektem OPPA č. CZ.2.17/3.1.00/33253 Extrakce na pevné fázi (SPE) (Solid Phase Extraction) SPE je metoda vhodná pro rychlou přípravu vzorků,

Více

Specifikace předmětu

Specifikace předmětu Specifikace předmětu 1. Přenosný disperzní Ramanův spektrometr: - spektrální rozsah měření Ramanova posunu: minimálně 250 až 2800 cm 1, - spektrální rozlišení minimálně nebo lepší než 11 cm 1v celém spektrálním

Více

Jednotné pracovní postupy zkoušení krmiv STANOVENÍ OBSAHU MYKOTOXINŮ METODOU HPLC - ZEARALENON

Jednotné pracovní postupy zkoušení krmiv STANOVENÍ OBSAHU MYKOTOXINŮ METODOU HPLC - ZEARALENON Národní referenční laboratoř Strana 1 STANOVENÍ OBSAHU MYKOTOXINŮ METODOU HPLC - ZEARALENON 1 Rozsah a účel Metoda specifikuje podmínky pro stanovení zearalenonu v krmivech. 1 Zearalenon (ZON) je charakterizován

Více

Využití metod atomové spektrometrie v analýzách in situ

Využití metod atomové spektrometrie v analýzách in situ Využití metod atomové spektrometrie v analýzách in situ Oto Mestek Úvod Termínem in situ označujeme výzkum prováděný na místě původního výskytu analyzovaného vzorku nebo jevu (opakem je analýza ex situ,

Více

Indentifikace molekul a kvantitativní analýza pomocí MS

Indentifikace molekul a kvantitativní analýza pomocí MS Indentifikace molekul a kvantitativní analýza pomocí MS Identifikace molekul snaha určit molekulovou hmotnost, sumární složení, strukturní části molekuly (funkční skupiny, aromatická jádra, alifatické

Více

Optimalizace metody stanovení volných mastných kyselin v reálných systémech. Bc. Lenka Hasoňová

Optimalizace metody stanovení volných mastných kyselin v reálných systémech. Bc. Lenka Hasoňová Optimalizace metody stanovení volných mastných kyselin v reálných systémech Bc. Lenka Hasoňová Diplomová práce 2015 ABSTRAKT Předkládaná diplomová práce se zabývá optimalizací metody stanovení volných

Více

Oborový workshop pro SŠ CHEMIE

Oborový workshop pro SŠ CHEMIE PRAKTICKÁ VÝUKA PŘÍRODOVĚDNÝCH PŘEDMĚTŮ NA ZŠ A SŠ CZ.1.07/1.1.30/02.0024 Tento projekt je spolufinancován Evropským sociálním fondem a státním rozpočtem České republiky. Oborový workshop pro SŠ CHEMIE

Více

10. Tandemová hmotnostní spektrometrie. Princip tandemové hmotnostní spektrometrie

10. Tandemová hmotnostní spektrometrie. Princip tandemové hmotnostní spektrometrie 10. Tandemová hmotnostní spektrometrie Princip tandemové hmotnostní spektrometrie Informace získávané při tandemové hmotnostní spektrometrii Možné způsoby uspořádání tandemové HS a/ scan fragmentů vzniklých

Více

DNA TECHNIKY IDENTIFIKACE ŽIVOČIŠNÝCH DRUHŮ V KRMIVU A POTRAVINÁCH. Michaela Nesvadbová

DNA TECHNIKY IDENTIFIKACE ŽIVOČIŠNÝCH DRUHŮ V KRMIVU A POTRAVINÁCH. Michaela Nesvadbová DNA TECHNIKY IDENTIFIKACE ŽIVOČIŠNÝCH DRUHŮ V KRMIVU A POTRAVINÁCH Michaela Nesvadbová Význam identifikace živočišných druhů v krmivu a potravinách povinností každého výrobce je řádně a pravdivě označit

Více

I N V E S T I C E D O R O Z V O J E V Z D Ě L Á V Á N Í

I N V E S T I C E D O R O Z V O J E V Z D Ě L Á V Á N Í CHEMICKY ČISTÉ LÁTKY A SMĚSI Látka = forma hmoty, která se skládá z velkého množství základních částic: atomů, iontů a... 1. Přiřaďte látky: glukóza, sůl, vodík a helium k níže zobrazeným typům částic.

Více

Hydrofobní chromatografie

Hydrofobní chromatografie Hydrofobní chromatografie Hydrofobicita proteinu insulin malwmrllpl lallalwgpd paaafvnqhl cgshlvealy lvcgergffy tpktrreaed lqvgqvelgg gpgagslqpl alegslqkrg iveqcctsic slyqlenycn vliv soli na protein Stacionární

Více

Spektroskopie v UV-VIS oblasti. UV-VIS spektroskopie. Roztok KMnO 4. pracuje nejčastěji v oblasti 200-800 nm

Spektroskopie v UV-VIS oblasti. UV-VIS spektroskopie. Roztok KMnO 4. pracuje nejčastěji v oblasti 200-800 nm Spektroskopie v UV-VIS oblasti UV-VIS spektroskopie pracuje nejčastěji v oblasti 2-8 nm lze měřit i < 2 nm či > 8 nm UV VIS IR Ultra Violet VISible Infra Red Roztok KMnO 4 roztok KMnO 4 je červenofialový

Více

EXTRAKCE, CHROMATOGRAFICKÉ DĚLENÍ (C18, TLC) A STANOVENÍ LISTOVÝCH BARVIV

EXTRAKCE, CHROMATOGRAFICKÉ DĚLENÍ (C18, TLC) A STANOVENÍ LISTOVÝCH BARVIV Úloha č. 7 Extrakce a chromatografické dělení (C18 a TLC) a stanovení listových barviv -1 - EXTRAKCE, CHROMATOGRAFICKÉ DĚLENÍ (C18, TLC) A STANOVENÍ LISTOVÝCH BARVIV LISTOVÁ BARVIVA A JEJICH FYZIOLOGICKÝ

Více

ÚSTAV CHEMIE A ANALÝZY POTRAVIN

ÚSTAV CHEMIE A ANALÝZY POTRAVIN VYSOKÁ ŠKOLA CHEMICKO-TECHNOLOGICKÁ V PRAZE ÚSTAV CHEMIE A ANALÝZY POTRAVIN Technická 5, 166 28 Praha 6 tel./fax.: + 420 220 443 185; jana.hajslova@vscht.cz LABORATOŘ Z ANALÝZY POTRAVIN A PŘÍRODNÍCH PRODUKTŮ

Více

1 DATA: CHYBY, VARIABILITA A NEJISTOTY INSTRUMENTÁLNÍCH MĚŘENÍ. 1.5 Úlohy. 1.5.1 Analýza farmakologických a biochemických dat

1 DATA: CHYBY, VARIABILITA A NEJISTOTY INSTRUMENTÁLNÍCH MĚŘENÍ. 1.5 Úlohy. 1.5.1 Analýza farmakologických a biochemických dat 1 DATA: CHYBY, VARIABILITA A NEJISTOTY INSTRUMENTÁLNÍCH MĚŘENÍ 1.5 Úlohy Úlohy jsou rozděleny do čtyř kapitol: B1 (farmakologická a biochemická data), C1 (chemická a fyzikální data), E1 (environmentální,

Více