Mendelova univerzita v Brně. Zahradnická fakulta v Lednici. Bakalářská práce. Morfologické a chemické hodnocení druhů Glycyrrhiza (lékořice)

Transkript

1 Mendelova univerzita v Brně Zahradnická fakulta v Lednici Bakalářská práce Morfologické a chemické hodnocení druhů Glycyrrhiza (lékořice) Vedoucí bakalářské práce Ing. Jarmila Neugebauerová, Ph.D. Vypracovala Eliška Prokešová Lednice 2014

2

3

4 Čestné prohlášení Prohlašuji, že jsem tuto práci: Morfologické a chemické hodnocení druhů Glycyrrhiza (lékořice) vypracovala samostatně a veškeré použité prameny a informace jsou uvedeny v seznamu použité literatury. Souhlasím, aby moje práce byla zveřejněna v souladu s 47b zákona č. 111/1998 Sb., o vysokých školách a o změně a doplnění dalších zákonů (zákon o vysokých školách), ve znění pozdějších předpisů a v souladu s platnou Směrnicí o zveřejňování vysokoškolských závěrečných prací. Jsem si vědoma, že se na moji práci vztahuje zákon č. 121/2000 Sb., o právu autorském, o právech souvisejících s právem autorským a o změně některých zákonů (autorský zákon), ve znění pozdějších předpisů a že Mendelova univerzita v Brně má právo na uzavření licenční smlouvy a užití této práce jako školního díla podle 60 odst. 1 autorského zákona. Dále se zavazuji, že před sepsáním licenční smlouvy o využití díla jinou osobou (subjektem) si vyžádám písemné stanovisko univerzity o tom, že předmětná licenční smlouva není v rozporu s oprávněnými zájmy univerzity a zavazuji se uhradit případný příspěvek na úhradu nákladů spojených se vznikem díla, a to až do jejich skutečné výše. V Lednici dne:. podpis

5 PODĚKOVÁNÍ Ráda bych poděkovala všem, kteří mi pomohli při zpracování bakalářské práce. Především děkuji vedoucí práce Ing. Jarmile Neugebaurevé, Ph.D., za trpělivost a ochotu při vedení a vypracování bakalářské práce. Dále děkuji paní Anně Paulínové za pomoc při laboratorním zkoumání klíčivosti semen a stanovení obsahu kyseliny glycyrrhizinové. Také děkuji celé své rodině za pomoc při vypracování bakalářské práce a za podporu během celého studia.

6 OBSAH 1. ÚVOD CÍL LITERÁRNÍ PŘEHLED BOTANICKÝ POPIS RODU GLYCYRRHIZA L KLÍČ K URČENÍ DRUHŮ GLYCYRRHIZA L HISTORIE RODU GLYCYRRHIZA L DRUHY RODU GLYCYRRHIZA L MNOŽENÍ LÉKOŘICE DROGY LÉKOŘICE UVEDENÉ V ČESKÉM LÉKOPISE VYUŽITÍ VE FYTOTERAII POTRAVINÁŘSKÉ ZPRACOVÁNÍ MATERIÁL A METODIKA CHARAKTERISTIKA POKUSNÉHO MÍSTA HODNOCENÍ RODU GLYCYRRHIZA L STANOVENÍ KLÍČIVOSTI STANOVENÍ OBSAHU KYSELINY GLYCYRRHIZINOVÉ V DROZE VÝSLEDKY VYHODNOCENÍ RODU GLYCYRRHIZA L CELKOVÉ HODNOCENÍ POLOŽEK GENOFONDU KLÍČIVOST OSIVA OBSAH KYSELINY GLYCYRRHIZINOVÉ V DROZE DISKUZE ZÁVĚR SOUHRN A RESUME, KLÍČOVÁ SLOVA SEZNAM POUŽITÉ LITERATURY PŘÍLOHY

7 1. ÚVOD Lékořice lysá pochází ze Středomoří, u nás se pěstovala od 16. století do druhé poloviny 19. století. Pěstování bylo nahrazeno dovozem. Lékořice je jednou z nejstarších rostlin. Používání této léčivé rostliny si své místo v evropské medicíně zachovalo dodnes. V indické literatuře je dochována více než 4000 let stará zmínka o používání lékořice. V České republice je do dnešní doby zachováno pouze několik míst, kde se vyskytuje pozůstatek dřívější kultury, najdeme ji na jižní Moravě a v Čechách. Lékořice se od středověku pěstuje pro sladké aromatické kořeny. Arabští lékaři ji používali jako projímadlo a k léčbě žaludečních potíží, jako jsou vředy, a onemocnění žlučníku a především k léčbě průdušek, při bolestech hrdla a ke zmírnění horečky. Své zastoupení si našla i v potravinářství, a to jako sladidlo a koření. Jednou z jejích hlavních obsahových látek je glycyrrhizin, který je padesátkrát sladší než cukr, proto je lékořice velice oblíbenou rostlinou i u diabetiků. Používá se i jako močopudný a detoxikační prostředek. Dlouhodobé užívání však může vést ke zvyšování krevního tlaku a snižovaní draslíku nebo jeho zadržování v těle. Lékořice se vyskytuje v potravinářském průmyslu např. u výrobků jako je Kofola, cukrovinek Haribo a různých likérů. Studium a využívání zdrojů biologické diversity umožňuje budoucím generacím pracovat s biologickým materiálem, který by byl jinak nenávratně ztracen. Zdroji biologické diversity jsou především genofondy původně pěstovaných druhů, planých ekotypů, ale i současné nebo starší sortimenty již vyšlechtěných odrůd. Na pozemku Zahradnické fakulty Mendelovy univerzity v Brně (dále jen ZF MENDELU ) existuje od roku 1995 genofond této léčivé rostliny, který je nadále rozšiřován. Nositelem kolekce lékořice je ZF MENDELU se sídlem v Lednici. Tato kolekce je udržována v rámci Národního programu konzervace a využívání genetických zdrojů rostlin a agro-biodiversity na pozemcích ZF MENDELU se sídlem v Lednici. 7

8 2. CÍL Cílem této bakalářské práce je: Zhodnotit význam rodu Glycyrrhiza L. ve fytoterapii a v potravinářství. Popsat morfologickou a fytochemickou charakteristiku druhů. Zjistit nejnovější poznatky o obsahových látkách a možnostech využití Glycyrrhiza. Dále odebrat výhony a stanovit klíčivost semen a dle metodiky hodnotit některé vybrané morfologické znaky. Z genofondu Zahradnické fakulty MENDELU se sídlem v Lednici odebrat kořeny v roce 2012 a laboratorní metodou stanovit obsah kyseliny glacyrrhizinové. 8

9 3. LITERÁRNÍ PŘEHLED 3.1 Botanický popis rodu Glycyrrhiza L. Systematické zařazení: Čeleď: Fabaceae (bobovité), Rod: Glycyrrhiza L. (DO- STÁL, 1989). Rod lékořice (Glycyrrhiza L.) zahrnuje vytrvalé byliny s dlouhými kořeny a oddenky. Má lichozpeřené listy s celokrajnými lístky. Květy jsou s deseti tyčinkami, z nichž devět je srostlých nitkami a jedna horní je volná nebo po jedné straně přirostlá k ostatním. Prašníky jsou nestejné, na vrcholu spojené. Kalich je krátce zvonkovitý, slabě dvoupyský. Koruna je bledě fialová u druhu Glycyrrhiza glabra. Má lysý semeník, vřetenitou, lysou čnělku a kulovitou, šikmou bliznu. Plodem jsou nepukavé lusky, na vrcholu zúžené v zobánek, na bázi gynopodia, obsahují zploštělá semena, hilum je okrouhlé a malé. Zahrnuje asi dvacet druhů rozšířených převážně v jižní Evropě a Asii, méně v Austrálii, v Severní Americe a v jižní části Jižní Ameriky (CHRTKOVÁ, 1995) Klíč k určení druhů Glycyrrhiza L. 1. Trojčetné listy, nepárové, 2 4 řady lístků, lusky krátké oválné nebo vejčité, 1 2 semenné, květ křehký hrozen, bílý nebo fialový Souhrn jiných příznaků: Lusky pokryté hustými, dole silnějšími, štětinkami nebo žlázkami Lusky pokryté pouze žlázkami nebo mají ještě řídké, tenké a křehké štětinky G. bucharica Rgl. 3. Listy párové, 3 4 řady lístků. Lusky s krátkými 1 2 mm dlouhými štětinkami G. gontscharovii T. Mas. 4. Lusky válcovité, obvykle s ostny Lusky jiného charakteru, lysé, občas s ostny

10 5. Hrozen mm dlouhý, s volně uspořádanými květy G. laxissima Vass. Květenství hrozen krátký, hustý Rostliny mm vysoké, světle zelené, květy mm dlouhé, lístky vejčité, lusky oválné, ostnité G. aspera Pall. Rostliny jsou mm vysoké, zelené, květy mm dlouhé, lístky oválné, lusky skosené z boku G. zaissanica Serg. 7. Květy početné, mm dlouhé, v hustých hroznech, lusky srpovitě ohnuté, natěsnané v hustých klubkách G. uralensis Fisch. Květy nejsou delší než 13 mm ve volných hroznech nebo hustých květenstvích. Lusky nejsou ohnuté, ale srpovité Květy ve volných hroznech, lusky pravidelně rozestavěné na plodonoších Květy nahuštěné v kulovitém květenství, lusky taktéž Lusky lysé nebo hustě pokryté žláznatými štětinkami, přisedlými žlázkami G. glabra L. Lusky příčně zahnuté (na straně švu), hustě pokryté žlázkami, někdy s velmi krátkými žláznatými ostny G. korshinskyi G. Grig. 10. Květy husté, intenzivně fialové, lusky ve svrchní části hustě pokryté ostny, ve spodní části bez ostnů G. echinata L. Květy husté, polodlouhé, světle fialové, lusky pravidelně po celém povrchu (řídce) pokryté ostny Květ 9 10 mm dlouhý. Pochází z dálného východu 12. G. pallidiflora Maxim. Květy 6 7,5 mm dlouhé. Pochází z Kavkazu G. macedonica Boiss. (GRIGORJEV, KOMAROV in LAVICKÁ, 2007) 10

11 3.1.2 Historie rodu Glycyrrhiza L. První zmínka o lékořici se nachází ve velkém čínském atlase léčivých rostlin: Pen-cchao-ťing (Atlas klasických léčivých rostlin), který byl sepsán podle pověsti císařem a mudrcem Šen-nungem kolem roku 3000 př. n. l. Od té doby byla lékořice jednou z nejpoužívanějších léčivých rostlin v Asii. V roce 1923 nalezli archeologové v hrobce faraona Tutanchamóna svazek lékořicových tyčinek. Hippokrates (460 př. n. l. cca 377 př. n. l.) označil lékořici jako sladký kořen v řečtině glukos riza a následně se z tohoto spojení vyvinulo dnešní rodové jméno lékořice Glycyrrhiza. Římané změlnili název Glycyrrhiza na Liquiritia a tento název se v anglicky hovořících zemích používá dodnes. Ve středověku byla tato rostlina pěstována v klášterních zahradách, proto si ji abatyše a bylinářka Hildegarda z Bingenu oblíbila jako součást sirupů a bylinných směsí, které používala na potíže se žaludkem a srdeční nevolnosti. Ve 14. a 15. století se v německých a italských atlasech léčivých rostlin objevovala jako vhodná rostlina k utlumení kašle a dýchacích potíží. Angličan Nicholas Culpeper se v 17. století o lékořici zmiňoval jako o výtečné rostlině pro ty, kteří mají suchý kašel nebo chrapot, černý kašel nebo krátký dech, dále že je vhodná na tuberkulózu, při pálení v průběhu močení a na bolesti na prsou nebo plicích. V Severní Americe kolonisté zjistili, že domorodí obyvatelé pijí čaje z amerického druhu lékořice (Glycyrrhizalepidota) jako léčebný prostředek při kašli, jako laxativum (působí projímavě), při bolestech v uších a k zastření hořké chuti jiných léčivých rostlin. Američtí eklektici, předchůdci dnešních přírodních léčitelů, v 19. století předepisovali lékořici při potížích s močovým ústrojím, při kašli, nachlazení a dalších nemocech spojených s průduškami nebo plícemi. Také považovali lékořici za lék na menstruační potíže. Zároveň je lékořice ve všech kulturách využívána jako účinný prostředek v boji s rakovinou (CASTLEMAN, 2004). 3.2 Druhy rodu Glycyrrhiza L. Rod Glycyrrhiza L. zahrnuje více než dvacet druhů. Glycyrrhiza glabra L. 11

12 Lékořice lysá je vytrvalou bylinou vysokou cm, která vyrůstá z vřetenovitého, podélně rýhovaného, dřevnatého kořene. Pod zemí jsou přezimující orgány, které mají obnovovací pupeny na povrchu půdy. Kořen je málo větvený a má nahnědle šedou až hnědou kůrou. Kořeny jsou válcovité, až 100 cm dlouhé a 2 5 cm široké. U kořene se dřeň nevyskytuje. Oddenky jsou dlouhé, 1 2 cm široké, uvnitř žlutobílé. Na povrchu se mohou vyskytovat malé pupeny. Uprostřed výběžku se nachází dřeň. Lodyhy jsou přímé, větvené, jemně chlupaté nebo lysé. Listy jsou lichozpeřené se 3 8 páry lístků, cm dlouhé. Lístky jsou krátce řapíkaté. Čepele jsou vejčité až široce eliptické, na vrcholu vykrojené nebo zaokrouhlené, s krátkou špičkou, jasně zelené, žláznaté, lepkavé, mm dlouhé, mm široké. Květy jsou složeny v hroznech cm dlouhých, řídké, se květy, kratší než podpůrné listy. Listeny jsou malé, kopinaté, opadavé. Hrozny květů vyrůstají v úžlabí listů na středních a horních větvích. Květy jsou oboupohlavné, souměrné a pětičetné. Květy jsou téměř přisedlé nebo krátce stopkaté. Kalich je 2,5 3,5 mm dlouhý, žláznatě chlupatý. Kališní cípy jsou úzce kopinaté, špičaté, stejně dlouhé jako kališní trubka, dva horní cípy jsou poněkud vyhnuté do stran. Koruna je volnoplátečná, s úzkou stříškou a člunkem bez zobáčku. Koruna je mm dlouhá, bledě fialová, křídla a někdy i spodní části pavézy jsou žlutobílá, pavéza vejčitá, na vrcholu tupě špičatá. Křídla jsou tupá, kratší než pavéza. Člunek je přímý, špičatý, ze dvou volných lístků, kratší než křídla. Semeník je svrchní a po oplození se mění v kožovitý lysý lusk. Lusky jsou v obrysu čárkovité, přímé, mírně zaškrcované, mm dlouhé a 4 6 mm široké, kožovité, lysé, hnědé, se 3 5 semeny. Semena jsou vejcovitě podlouhlá až ledvinitá, 2 2,5 mm dlouhá, 1 2 mm široká, hnědá, hladká, mírně lesklá. Doba kvetení je od června do srpna. Viz Obr. 1 Přílohy. Variety Glycyrrhiza glabra: Glycyrrhiza glabra L. var. typica REG. et HERDER. Nachází se v jižní Evropě v oblasti Kavkazu a severního Iránu. Stonky má lysé, lístky jsou ze spodu žláznatě och- 12

13 lupené. Kališní lístky má kopinaté, korunní plátky jsou modré. Lusky jsou lysé. Kořeny jsou silné a těžké, které ve vodě klesají. Glycyrrhiza glabra L. var. violacea BOISSIER. Pochází z Malé Asie z oblasti kolem řeky Eufratu. Jedná se o tzv. perské sladké dřevo. Má menší a více eliptické lístky, kališní lístky jsou téměř trojbarevné. Květy jsou fialové. Glycyrrhiza glabra L. var. glandulifera REG. et HERDER. Pochází z jižní Evropy a Asie. Stonky jsou slabě chlupaté nebo žláznaté. Zde mluvíme o tzv. ruském sladkém dřevě. Lusky obsahují více semen a jsou na povrchu ostnité. Má velmi silné boční kořeny, které ve vodě plavou. Kvete fialově. Glycyrrhiza glabra L. var. pallida ZINDL. Pochází z Malé Asie, stonky jsou chlupaté. Květní výhony jsou delší než listy. Kalich je žláznatě chlupatý. Korunní plátky má červenobílé. Glycyrrhiza glabra L. var. pubescens WALDST. Pochází z oblasti Kavkazu a Střední Asie. Glycyrrhiza glabra L. var. linearis MAX. Květenství má až 8 cm dlouhé. Lusky jsou prohnuté. Jako jediná snese vyšší koncentraci solí v půdě (VYMYSLYCKÝ, NE- UGEBAUEROVÁ, 2009). Glycyrrhiza uralensis Fisch. Lékořice uralská má vřetenovitý kořen s četnými válcovitými výběžky. Stonek je přímý, rozvětvený a pokrytý krátkými bělavými, žláznatými chlupy. Listy jsou střídavé, lichozpeřené 4 8 jařmé. Lístky eliptické, krátce hrotité, po obou stranách chloupkaté. Modrofialové květy jsou sestaveny do úžlabních stopkatých klasů. Plod je 3 5 semenný, lusk je asi 25 mm dlouhý, pokroucený, červenohnědý a hustě pokrytý hnědavými, žláznatými chlupy. Semena jsou zploštělá, kulovitá a hnědá. Lékořice uralská je rozšířena v Kazachstánu, jižních oblastech Sibiře, v horských údolích Pamíru a Altaje. Dále se vyskytuje v Číně, Íránu a Mongolsku. Roste na stepích a lesostepních oblastech, ale i na březích řek a jezer. Viz Obr. 2 Přílohy (VALÍČEK, 2003). 13

14 Glycyrrhiza pallidiflora Maxim. Rostlina dorůstá do výšky 1 1,5 m. Stonky jsou pruhované, lysé a šupinatě žláznaté. Listy jsou kopinaté nebo kopinaté vejčité, krátce stopkaté, dlouhé 6 20 cm. Báze listu je klínovitá, okraj jemně pilovitý, vrcholek zašpičatělý. Listeny jsou vejčitě kopinaté. Jsou tvořené 4 6 páry lístků. Květem jsou podlouhlé nebo kulovité, husté hrozny. Koruna je světle fialová až fialová, 6 8 mm velká. Kalich je zvonkovitý, velký 4 5 mm. Kvete od července do září. Lusk je vejčitý, tvoří kulovité nahloučené útvary, většinou obsahuje dvě černá semena. Lusky jsou dlouhé mm a 6 8 mm široké. Povrch je pokryt ostny (viz Obr. 3 Přílohy). Ve své domovině se vyskytuje na otevřených údolích, na svazích a na okrajích silnic (BOJIAN, LARSEN, 2010). Glycyrrhiza echinata L. Tento druh je rozšířený do střední a jihovýchodní Evropy, Turecka, Sýrie, Iránu, Palestiny a do Střední Asie. Je to vytrvalá bylina s rozvětveným, poléhavým až vystoupavým stonkem, jeho délka je cm. Listy jsou střídavé lichozpeřené, 3 6 jařmé, lístky eliptické, mm dlouhé a mm široké. Květenství je kulovité až elipsovité, hlávka v průměru mm velká. Koruna je světle modrofialová až světle fialová, 5 7 mm dlouhá. Kvete od května do srpna. Lusky jsou spojené v kulovitém plodenství, mm dlouhé, ve spodní části jsou hustě ostnité, na vrcholu holé, 1 3 semenné. Viz obr. 4, Obr. 5, Přílohy. Roste v močálech na březích vodních toků a jezer. Vyskytuje se i na člověkem pozměněných biotopech okraje cest, hráze, atd. (ELIÁŠ, 2013). Glycyrrhiza macedonica Boiss. Stonky jsou mm vysoké, větvené, lysé, často žláznaté. Listy má mm dlouhé. Listy mají 3 6 párů eliptických nebo oválně vejčitých lístků, z obou stran žláznatých. Květy světle fialové, husté, mm dlouhé. Lusky jsou spojeny v kulovitém plodenství a jsou pokryty ostny (viz Obr. 4). Kvete v červenu až červenci. 14

15 Rostlina má silný nepříjemný zápach (GRYGORJEV, KOMAROV in LAVICKÁ, 2007). Glycyrrhiza aspera Pall. Tento druh pochází z Kazachstánu. Má štíhlé oddenky a kořeny. Palisty jsou dlouhé 4 6 mm a široké 2 4 mm. Listy má lehce pýřité a chlupaté, šedozelené, vejčité, obvejčité nebo eliptické, dlouhé mm a 3 18 mm široké, zespodu pýřité, shora lysé. Květem je hrozen světle fialový nebo fialový. Koruna je velká dlouhá mm a široká 5-6,5 mm. Kvete od května do června. Lusk je obvykle srpovitého tvaru, má hnědou barvu. Obsahuje 2 10 semen (BOJIAN, LARSEN, 2010). Glycyrrhiza foetida Desf. Je to rostlina vysoká 0,3 0,7 m. Listy jsou lichozpeřené, dlouhé mm, 4 5 jařmé. Jednotlivé lístky jsou dlouhé mm a široké 6 18 mm. Délka květenství mm na mm dlouhé stopce. Délka jednotlivých květů je 7 10,5 mm. Zbarvení květenství je žluté. Plodenstvím je struk mm dlouhý. Rostlina nepříjemně zapáchá (NADEZHINA in PLANKOVÁ, 2010). 3.3 Množení lékořice Vegetativní množení Lékořice se vegetativně množí odnožemi z vodorovně rostoucích oddenků o délce 0,3 0,5 m, které se seřezávají asi 1 cm nad očkem. Odebíráme je při sklizni nebo při rušení kultury časně z jara nebo na podzim (KŘIKAVA, 1993). Generativní množení Semena mají tvrdou slupku a klíčí pomalu ve tmě po dobu čtyř týdnů, klíčivost dosahuje 50,0 %. Některé odrůdy lékořice kvetou málo nebo nekvetou vůbec, jiné nenasazují semena. K vypěstování sazenic k výsadbě na 100 m 2 je třeba 40 g semen. Hmot- 15

16 nost 1000 semen je asi 10 g. Rozmnožování semeny je méně vhodné, rostliny se vyvíjejí pomalu (PÍSAŘÍK, 1959).) 3.4 Drogy lékořice uvedené v Českém lékopise Liquiritiae radix Lékořicový kořen Je to usušený, neoloupaný nebo loupaný, celý nebo řezaný, kořen s výběžky druhu Glycyrrhiza glabra L., Glycyrrhiza inflata BAT. nebo Glycyrrhiza uralensis Fisch. Obsahuje nejméně 4,0 % kyseliny glycyrrzizinové (C 42 H 62 O 16 ), počítáno na vysušenou drogu. Droga se upráškuje. Prášek je světle žlutý až mírně našedlý a pozoruje se pod mikroskopem v chloralhydrátu RS. Kapalinová chromatografie je separační metoda založená na rozdílu v distribuci látek mezi dvě nemísitelné fáze, z nichž mobilní fází je kapalina, která prostupuje stacionární fází naplněnou do kolony. Kapalinová chromatografie je založena zejména na mechanismu adsorpce, rozdělování, výměny iontů, vylučování nebo stereochemických interakcích (ČESKÝ LÉKOPIS, 2009). Makroskopický popis Kořen je málo větvený, kůra je nahnědle šedá až hnědá, s podélnými rýhami a se zbytky postranních kořenů. Válcovité výběžky o průměru 1 2 cm jsou na svrchní straně podobné kořeni, ale příležitostně s malými pupeny. Lom kořene a výběžků je zrnitý a vláknitý. Vrstva korku je tenká, vrstva sekundárního lýka je silná, světle žlutá, s paprsčitou strukturou. Výběžek má uprostřed dřeň, která u kořene chybí. U loupaného kořene chybí zevní část kůry. Mikroskopický popis Droga je charakteristická úlomky žlutých silnostěnných vláken, μm dlouhých, o průměru μm, s tečkovaným luminem, často provázených komůrkovými vlákny s krystaly šťavelanu vápenatého, které jsou μm dlouhé a 2 5μm široké. Stěny velkých cév jsou žluté, 5 10 μm silné, zdřevnatělé, s četnými dvůrkatými ztenčeninami a štěrbinovitými otvory, úlomky korku s tenkostěnnými buňkami 16

17 a jednotlivými krystaly šťavelanu vápenatého. Krystaly se nacházejí i v úlomcích parenchymu. U loupaného kořene úlomky korku chybí (ČESKÝ LÉKOPIS, 2009). Zkoušky na čistotu Ztráta sušením nejvýše 10,0 % g práškované drogy se suší 2 hodiny v sušárně při 105 C. Celkový popel nejvýše 10,0 % (neloupaná droga), nejvýše 6,0 % (loupaná droga). Popel nerozpustný v kyselině chlorovodíkové nejvýše 2,0 % (neloupaná droga), nejvýše 0,5 % (loupaná droga), (ČESKÝ LÉKOPIS, 2009). Obsahové látky Obsahové látky kořene Liquritiae radix jsou tvořeny především dvěma skupinami: Látky saponinového charakteru (tri-terpenoidní saponiny) glycyrrhizin (obsah 2 15 %). Flavonoidy flavonový glykosid liquritin, chalkony (isoliquritin, rhamnoliquritin), flavonoly (isokvercitrin, glabrokumaron B, kanzonol U, vestitol), liquiricigenin, formononetin. Dále obsahuje: aspargin, škrob %, cukr sacharóza 3 10 %, mono a oligosacharidy s uronovými kyselinami, pryskyřice, cyklitoly pinitol, mannit (VY- MYSLYCKÝ, NEUGEBAUEROVÁ, 2009), kanavanin nacházející se v semenech je toxický (CHRTKOVÁ, 1995), saponiny (kyseliny glabrinová a její glykosidy kyseliny 11-desoxyglycyrrhetinové, glykosidy kyseliny liquritové), flavonoidy, kumariny (umbeliferon a herniarin), látky typu steroidních a estrogenních hormonů, hořčiny (glycyramarin) (TŮMOVÁ, 2011). Kyselina glycyrrhizinová je asi 50x sladší než sacharóza a je přítomná ve formě draselné či vápenaté soli. Jedná se o glykosidní sloučeninu kyseliny glycyrrhetinové a disacharidu skládajícího se ze dvou molekul kyseliny β-d-glukuronové. Rozštěpením sladká chuť mizí (TŮMOVÁ, 2011). 17

18 Liquiritae extractum siccum ad saporandum Lékořicový extrakt suchý pro aromata Je to suchý extrakt vyrobený z drogy Liquiritae radix. Jedná se o žlutohnědý nebo hnědý prášek. Má velmi sladkou chuť. Obsah 5,0 7,0 % kyseliny 18β-glycyrrhizinové (C 42 H 62 O 16 ), počítáno na vysušený extrakt. Výroba vyrábí se z řezané rostlinné drogy a vody (ČESKÝ LÉKOPIS, 2009). Liquritiae extraktum fluidum ethanolicum normatum Lékořicový extrakt tekutý ethanolický standardizovaný Je to tekutý standardizovaný extrakt vyrobený z drogy Liquiritae radix. Jedná se o tmavohnědou čirou tekutinu. Má nevýrazný charakteristický pach a sladkou chuť. Obsah 3,0 5,0 % kyseliny glycyrrhizinové (C 42 H 62 O 16 ). Výroba vyrábí se z drogy a 70% ethanolu postupem vhodným pro tekuté extrakty (ČESKÝ LÉKOPIS, 2009). 3.5 Využití ve fytoteraii Z lékořice se v současné době získává více než 100 léků a terapeutických činidel. Mezi nejznámější léky vyrobené z lékořice patří: glitsirram, likvyariton, flakarbin, gliderinin atd. (SAYZKULOVA, 2006). Pro farmaceutické využití je lékořice prioritním druhem. Kořeny a oddenky jsou významnou farmaceutickou surovinou. Uplatnění nachází v oficiální i tradiční alopatické medicíně. Droga a její obsahové látky patří mezi nejvíce studované přírodní suroviny z hlediska biologické aktivity a použitelnosti ve fytoterapii nebo farmaceutické technologii. Experimentální farmakologie potvrdila tyto aktivity: antivirové, antibakteriální a antifungální působení fenolových metabolitů a glycyrrhizinu. Inhibice byla prokázána 18

19 u methicilin-resistentního Staphylococcus aureus. Glycyrrhizin potlačoval chřipkový virus a množení virového antigenu v lidských hepatocytech, které byly infikovány hepatitidou A. Inhiboval rovněž pomnožování a inaktivoval vir HIV (JAHODÁŘ, 2010). Droga a zahuštěná lékořicová šťáva (Succus liquritiae) se používá jako expektorans, diuretikum, mírné laxans, korigens a pomocná látka (dochucení). Glycyrrhizin má také antiflogistický a antibiotický účinek, inhibuje sekreci žaludečních šťáv a působí příznivě při léčbě žaludečních vředů, kde tento účinek souvisí s jeho antislysozymovou aktivitou. Protizánětlivý účinek se uplatňuje v iniciaci zánětlivého procesu, bolesti a horečky. Zejména derivát glycyrrhizinu-karbenoxolon se používal při léčbě žaludečních vředů (TŮMOVÁ, 2010). Lékořice má také protizánětlivé účinky, využívá se i při léčbě artritidy a různých alergiích. Je také používána při mírném stupni Addisonovy choroby. Lékořice má mírný projímavý účinek a může chránit střevní sliznici zvýšením produkce hlenu. Zmírňuje také pálení žáhy a snižuje výskyt vředů (SHARMA, AGRAWAL, 2013). Účinky lékořice na paměťové centrum: Glycyrrhiza glabra byla podávána v určitých dávkách myším a následně vyhodnocena pro své účinky na paměťové centrum v mozku. Byly podávány tři dávky (75, 150 a 300 mg/kg na váhu těla) z vodného extraktu G. glabra po dobu 7 po sobě následujících dní u samostatných skupin myší. Dávka 150 mg/kg vodného extraktu z lékořice výrazně zlepšila učení a paměť myší (PARLE, at al., 2004). Dávkování: Doporučené dávkování pro dospělého člověka je 3 12 g sušeného kořene, odvaru nebo nálevu denně. Vodného extraktu se doporučuje 2 6 ml denně, 1:1; 1,5 4,4 ml vodného extraktu glycyrrhizinu nebo ekvivalent v tabletě či kapsli; dále 1,2 4,8 ml lékořicového extraktu bez obsahu glycyrrhizinu. Vysoké dávkování může být užíváno pouze po dobu 4 6 týdnů. Maximální denní dávka lékořice jako ochucovadla je 100 mg glycyrrhizinu. 19

20 Nežádoucí účinky: Lékořice může ovlivnit působení antihypertenziv. Zvýšení hypokalemie je spojeno s podáváním lékořice a kortikosteroidů. Glycyrrhizin a kyselina glycyrrhetinová zvyšují hladinu hydrokortizonu a prednisolonu a výrazně tak působí na kůži. Glycyrrhizin inhibuje inaktivaci kortikoidů v játrech a ledvinkách, což má za následek zvýšenou hladinu sodíku a vody, což souvisí s hypertenzí a otoky. Lékořice by neměla být užívána současně s laxativy a diuretiky. Glycyrrhizin inhibuje i inaktivaci kortikoidů v játrech a ledvinách, a to pravděpodobně inhibicí 11β-hydroxysteroid-dehydrogenázy. To má za následek zvýšenou hladinu kortizolu spojenou se zvýšenou retencí sodíku a vody, související s hypertenzí a otoky (TŮMOVÁ, 2010). Změny v chemickém složení a biologické aktivitě lékořice: Lékořice byla zkoumána ze sklizených rostlin v průběhu února až listopadu v roce Zkoumání se týkalo změn v chemickém složení, zhášečů volných radikálů, antioxidantivních účinků a gastroprotektivních účinků lékořicového extraktu (dále jen LE ). Sledovány byly i vzájemné vztahy mezi biologickými a chemickými vlastnostmi LE. Výsledky ukázaly, že celkový obsah fenolů, flavonoidů a tříslovin v LE se může měnit v různých obdobích sklizně. Hlavními komponenty LE jsou liquritin a glycyrrhizi, jejich hodnoty se pohybovaly v rozmezí 28,65 62,80 a 41,84 114,33 mg.g -1. Relativní podíly glycyrrhizin derivátu, glabridin, glabrene a liquiritigenin derivát, se pohybovaly v rozmezí od 0,88 % do 11,38 %, 1,86 10,03 %, 1,80 18,40 %, a 5,53 16,31 %. Tyto výkyvy poukázaly na antioxidační účinky a na účinky zhášečů volných radikálů v činnosti lékořice. Obecně platí, že odebrané vzorky v květnu a listopadu ukázaly na nejvyšší zachování volných radikálů a antioxidačních účinků. Vzorky odebrané v květnu měly nejvyšší gastroprotektivní účinky. Dospělo se k závěru, že chemické vlastnosti lékořice se kvantitativně liší v různých dobách sklizně a tyto výkyvy určují změny bioaktivity. Tyto údaje by mohly vést k optimalizaci sklizně lékořice v důsledku koncentrace (CHELL, at al, 2013). Rozdílný obsah glycyrrhizinu v kořenech je také dán rozdílností jednotlivých druhů lékořice. Kořeny byly odebírány v roce 2011 a Pokud byly sklízeny vertikální 20

21 kořeny, obsah glycyrrhizinu byl v rozmezí od 8,6 % do 18,5 %. U rok staré rostliny Glycyrrhiza glabra měl obsah kyseliny glycyrrhizinové nejvyšší nárůst od října do listopadu, zatímco obsah isoliquritinu byl nejvyšší v říjnu. U tříletých rostlin byl nejvyšší nárůst isoliquritinu v červnu a červenci. Změna obsahu glycyrrhizinu je dána také stárnutím nadzemních částí lékořice (NEUGEBAUEROVÁ a SAZYKULOVA, 2014). 3.6 Potravinářské zpracování Limonády: Kofola (Kofola Česko Slovensko a.s) Kofola (viz Obr. 6, Přílohy) patří už přes čtyři desetiletí k nejznámějším a současně nejoblíbenějším tuzemským nealkoholickým nápojům. Jejím základem je speciální sirup KOFO vyráběný podle originální receptury. Sirup je složený ze 14 látek přírodního charakteru. Na rozdíl od klasických kolových nápojů má Kofola téměř o třetinu nižší obsah cukru. Složení: voda, sirup KOFO (ovocný sirup, cukr, glukózo-fruktózový sirup, voda, karamel pálený cukr, barvivo E150d, kyselina citrónová, chlorid sodný, esence pro KOFO aroma, bylinný extrakt přírodní aroma, lékořicový extrakt přírodní aroma, kofein, konzervant E211), oxid uhličitý. Další varianty: Kofola višňová Příjemná vůně a bohatá chuť višní se skrývá za jednou z nejoblíbenějších příchutí Kofoly. Kofola Extra Bylinková Původní receptura Kofoly Original je obohacena o tři další byliny: pampelišku, hořec a mátu peprnou. Kofola Citrus Originální Kofola se šťávou z citrusových plodů. Tvoří první inovaci Kofoly nápoj Kofola Citrus. Kofola Bez Cukru Jako náhrada cukru se používá sladidlo z přírodního zdroje, z listů stévie. 21

22 Kofola Vanilková Pro zvýraznění chuti a vůně se využívá vanilkového koření. ( 2014). Cukrovinky: Tyčinky lékořicové bezlepkové Candy tree Lékořicové tyčinky (viz Obr. 7, Přílohy) obsahují výtažky z lékořicového kořene a anýzu. Jsou slazené výhradně kukuřičným sirupem a melasou, neobsahují želatinu a jsou tedy vhodné pro vegetariány. Lékořicové tyčinky Candy Tree jsou v biokvalitě, slazené kukuřičným sirupem, s přírodní jemnou chutí, neobsahují laktózu, jsou bez umělých barviv. Kukuřičný sirup je přírodním sladidlem, které díky svému složení a nižšímu glykemickému indexu nezatěžuje slinivku. Oproti běžnému cukru nepřekyseluje žaludek (má vyšší ph) a nepřispívá k vyplavování některých minerálů z lidského organismu. Složení: melasa, pšeničná mouka, kukuřičný sirup, přírodní aroma (lékořicový extrakt, anýzový olej). Produkt kontrolovaného ekologického zemědělství. Viz Obr. 6, Přílohy. Kalorická hodnota/energie (na 100g): kj/358 kcal. Bílkoviny: 4,1 g. Sacharidy: 83,7 g (z toho cukry 55,6 g). Tuky: 0,7 g. Vláknina: 1,4 g ( 2014). Lékořicové kuličky Viz Obr. 8, Přílohy. Složení: cukr, glukózový sirup, slazené kondenzované mléko, rostlinný olej, máslo, sůl, emulgátor: sojový lecitin, aromata, koncentráty: jablečný, mrkvový, ibiškový, ředkvičkový, z batátů. Bez umělých barviv. Informace pro alergiky: Vyrobeno v továrně, která zpracovává ořechy. Obsah: 155g ( 2014). Tyčinka lékořicová Pepe original 22

23 Sladká lékořicová tyčinka ( pendrek ). Viz Obr. 9, Přílohy. Složení: melasa, pšeničná mouka, glukózový sirup, lékořicový extrakt, barvivo E153 (karamel), aroma anýzu. Původ: Finsko. Hmotnost: 22 g ( 2014). Haribo konfekt V roce 1760 přidal anglický lékárník George Dunhill ke zředěnému extraktu z lékořice cukr a jiné přísady. To byl okamžik zrození lékořicových cukrovinek. Ve firmě HARIBO se lékořicové výrobky vyrábějí od roku Na výrobu lékořicového konfektu (viz Obr. 10, Přílohy) se kombinuje lisovaná lékořice s cukrovou pastou s různými příchutěmi. Vyrábějí se například kostky z různých vrstev, stejně jako kombinace lékořice a kokosu s pravým kokosem. V kuchyni HARIBO se lékořicové bloky nejdříve nakrájejí na malé kousky a ty se rozpustí v horké vodě. Pro typickou příchuť různých druhů lékořicových cukrovinek je nutný obsah alespoň 3 % extraktu z lékořice. Zásadně rozlišujeme litou a lisovanou lékořici (také se nazývá měkká lékořice). U lité lékořice se výchozí surovina svaří na hustý sirup a poté se stejně jako výrobky z gumového ovocného želé, lije pomocí licích zařízení do krabiček. Složení: Lahodná chuť lékořice v kombinaci s kakaem, citronem, kokosem, karamelem a pomerančem. Podle daného výrobku se do surové lékořice přidávají přísady jako cukr, glukózový sirup, pšeničná mouka, modifikovaný škrob nebo želatina, kuchyňská sůl a různá aromata. Konzistenci a tvarovatelnost lékořice určuje podíl škrobu, resp. želírovacího prostředku. Nutriční hodnoty: 100 g výrobku obsahuje průměrně: energetická hodnota 1616 kj/382 kcal, bílkoviny 2,8 g, uhlohydráty 78,4 g, z toho cukry 59,8 g, tuky 6,3 g, z toho nasycené mastné kyseliny 3,9 g, vláknina, 1,2 g. 23

24 Další varianty: Dražovaná lékořice (viz Obr. 11, Přílohy) U dražovaných lékořicových výrobků se lékořicové jádro potáhne cukrovým povlakem. Zvlášť oblíbené jsou STAFET- TEN, SALI-KRITZ nebo VIOLA. Slaná lékořice Slaná lékořice (viz Obr. 21, Přílohy) je specialita s vysokým podílem salmiaku (až 2 %). Zpravidla jsou takové výrobky také kandované, jako např. SALZBREZELN viz Obr. 11, Přílohy ( 2014). Lihoviny: Magister Bohém Svěží chuť a vůně Magistru Bohém (viz Obr, 13, Přílohy) je výsledkem vyváženého spojení čistě přírodních ingrediencí a toho nejjemnějšího lihu. Složení: líh, cukr, směs bylin, směs koření, E150 karamel ( 2014). Mírně nasládlá chuť z výtažků skořice a pomeranče, s lehce nahořklou chutí lékořice. Přidáním dalších exotických bylin vzniká jedinečný nápoj. Obsah alkoholu: 28 %, Objem: 0,5 l ( 2014) Lékořicový likér G. BERTAGNOLLI Složení: z práškové lékořice (získané rozemletím suchého kořene daného keře) a čistého alkoholu se získá přírodní extrakt, který je základem hustého a sytého likéru (viz Obr. 14, Přílohy) plného harmonie, jemné vůně a typické chuti. Obsah alkoholu: 24 %, Objem: 0,7 l ( 2014). Čaje: Zázvor a lékořice, sypaný čaj 24

25 Viz Obr. 15, Přílohy. Složení: směs tvoří kořen zázvoru a lékořice, barva je tmavě žluto zelená, aroma. Tato kořeněná směs voní výrazně po zázvoru a lékořici, neobsahuje kofein. Doba louhování 5 minut, teplota vody 100 C. Balení: sypaný čaj 113 g, plechovka ( 2014). Průduškový čaj Viz Obr. 16, Přílohy. Vhodný při průduškovém kašli a při zánětu dýchacích cest. Zvyšuje produkci průduškového sekretu a usnadňuje odkašlávání. Působí dezinfekčně a hojivě na sliznice dýchacích cest. Doporučujeme sladit medem. Složení: mateřídouška nať, truskavec nať, fenykl plod, máta peprná nať, sléz květ, jitrocel list, divizna květ, prvosenka květ, lékořice kořen. Balení: sypaný 50 g, porcovaný 20x 1,3 g naporcovaných sáčků ( 2014). 25

26 4. MATERIÁL A METODIKA 4.1 Charakteristika pokusného místa Genofond (viz Obr. 17, Přílohy) byl založen roku 1995 na pozemku ZF MENDE- LU se sídlem v Lednici, který leží při řece Dyji v Dolnomoravském úvalu. Rozloha genofondu je mm x mm. Nositelem kolekce lékořice je ZF MENDELU se sídlem v Lednici. Tato kolekce je udržována v rámci Národního programu konzervace a využívání genetických zdrojů rostlin a agro-biodiversity na pozemcích ZP MENDE- LU v Lednici. Základní údaje o genofondu (viz Tab. 1, Přílohy). Podle Alisonovy klasifikace jde o oblast mírného klimatického pásu, skupina atlanticko-kontinentální. Až na občasné výjimky, kdy pronikne od jihu tropický vzduch anebo od severu arktický, převládá vzduchová hmota mírného pásu (ROŽNOVSKÝ, LITSCHMANN, 2009). Meteorologické údaje pro Lednici jsou zpracovávány pro každý den v měsíci. Viz Tab. 2, Přílohy a viz Tab. 3, Přílohy uvádí souhrnná meteorologická data pro rok 2012 a V tabulkách jsou uvedeny teploty minimální, maximální, průměrné; relativní vlhkost; srážkový úhrn a sluneční svit. Naměřené údaje pochází z meteorologické stanice v Lednici. 4.2 Hodnocení rodu Glycyrrhiza L. Pro hodnocení rodu se využívá Metodika hodnocení rodu lékořice (Glycyrrhiza L.). Metodika je zaměřena na popis a hodnocení kolekce genetických zdrojů. Klasifikátor obsahuje 54 popisovaných znaků. Hodnoceny jsou znaky morfologické, biologické a biochemické. (VYMYSLUCKÝ, NEUGEBAUEROVÁ, 2012). Jednou z hlavních úloh bylo hodnocení genofondu lékořice podle metodiky 13/11. Hodnocení probíhalo v roce 2012 a Pro tuto bakalářskou práci byly vybrány pouze některé údaje z metodiky, a to znaky a znak 53 týkající se popisu plodenství, plodu, semene a obsahu glycyrrhizinu. Celkem bylo hodnoceno od každé položky 10 výhonů. Výsledky byly zprůměrované. 26

27 A) Morfologické znaky Plodenství: plodenství počet na stonku, plodenství typ, plodenství tvar, plodenství délka se stopkou, plodenství délka bez stopky, plodenství šířka. Plod: plod tvar, plod délka, plod šířka, plod povrch. Semeno: semeno počet v lusku, semeno tvar, semeno barva (použití RHS Mini colour charts). B) Biochemické znaky Obsahové látky: obsah glycyrrhizinu v sušině kořene. 4.3 Stanovení klíčivosti Klíčivost byla stanovena v březnu 2014 podle Československé státní normy Zkoušení osiva (ČSN ) u rostlin Glycyrrhiza glabra (42A ), Glycyrrhiza pallidiflora (42A ), Glycyrrhiza pallidiflora (42A ), Glycyrrhiza echinata (42A ), Glycyrrhiza pallidiflora (42A ), Glycyrrhza glabra (42A ), Glycyrrhiza echinata (42A ), Glycyrrhiza macedonica (42A ) a Glycyrrhiza foetida (42A ). Z každé rostliny byl odebrán zkušební vzorek, a to 4 x 50 semen. Klíčivost byla sledována po dobu jednoho měsíce v laboratoři na Ústavu zelinářství a květinářství ZF MENDELU od do První hodnocení proběhlo po 7 dnech, poslední po 28 dnech. Denní teplota byla nastavena na 26,3 C a noční byla nastavena na 20,3 C. Při každé kontrole se odstranily vyvinuté naklíčené rostlinky. Počet vyklíčených semen se vyhodnotil procentuálně. 1. Na filtrační papír v petriho misce navlhčený destilovanou vodou se nanesla semena každého druhu lékořice. 2. Mezi dva filtrační papíry v petriho misce navlhčené destilovanou vodu byla vložena semena. 27

28 3. V písku se semena vložila na vrstvu vlhkého písku a druhou, tenkou, vrstvou byla semena zasypána. Písek byl v průhledných plastových krabičkách. 4.4 Stanovení obsahu kyseliny glycyrrhizinové v droze Obsah glycyrrhizinu v droze Liquiritae radix se stanovil metodou kapalinové chromatografie. Podle Českého lékopisu (2009) má droga obsahovat minimálně 4,0 % kyseliny glycyrrhizové, počítáno na vysušenou drogu. V termínech do byl v laboratoři na Ústavu zelinářství a květinářství ZF MENDELU stanoven obsah kyseliny glycyrrhizinové, jedná se o biochemický znak. Odebíraly se kořeny různého stáří a různé velikosti, délka mm, šířka mm. Vzorky byly odebrány u 6 druhů, celkem bylo hodnoceno 15 rostlin genofondu lékořice: Glycyrrhiza foetida (42A ) 2 rostliny, Glycyrrhiza glabra (42A ) 2 rostliny, Glycyrrhiza glabra (42A440001) 1 rostlina, Glycyrrhiza macedonica (42A ) 2 rostliny, Glycyrrhiza pallidiflora (42A ) (viz Obr. 18, Přílohy), 2 rostliny, Glycyrrhiza pallidiflora (42A ) 2 rostliny, Glycyrrhiza echinata (42A ) 2 rostliny, Glycyrrhiza uralensis (42A ) 2 rostliny. Kapalinová chromatografie: Zkoušený roztok: 1000 g práškované drogy se ve 150ml kuželové baňce smíchá se 100,0 ml roztoku amoniaku 17,5 % a vloží se na 30 min. do ultrazvukové lázně. Část supernatantní tekutiny se odstředí a 1,0 ml se zředí roztokem amoniaku 17,5 % na 5,0 ml. Roztok se zfiltruje přes filtr 0,45 µm a filtrát se použije jako zkoušený roztok. Roztok A. 0,130 g amonium-glycyrrhizátu pro HPLC CRL se rozpustí v roztoku amoniaku 17,5 % a zředí se jím na 100,0 ml. Porovnávací roztok (a): 5,0 ml roztoku A se zředí roztokem amoniaku 17,5 % na 100,0 ml. Porovnávací roztok (b): 10,0 ml roztoku A se zředí roztokem amoniaku 17,5 % na 100,0 ml. 28

29 Porovnávací roztok (c): 15,0 ml roztoku A se zředí roztokem amoniaku 17,5 % na 100,0 ml. Kolona: délka 0,10 m, vnitřní průměr 4 mm. Stacionární fáze: silikagel pro chromatografii, oktadecyl stylovaný. Mobilní fáze: Směs objemových dílů roztoku kyseliny octové ledové R, acetonitrilu R a vody R ( ). Průtoková rychlost: 1,5 ml/min. Detekce: Spektrofotomrtrický detektor, 254 nm. Nástřik: 10 µl. Sestrojí se kalibrační křivka za použití koncentrací porovnávacích roztoků (g/100 ml) na ose x a odpovídajících ploch a píků na ose y. Za použití retenčních časů a ploch píků na chromatogramech porovnávacích roztoků se identifikuje na chromatografu zkoušeného roztoku (ČESKÝ LÉKOPIS, 2009). Droga má obsahovat minimálně 4,0 % kyseliny glycyrrhinové vztažené na vysušenou drogu, viz kapitola 3.4 (ČESKÝ LÉKOPIS, 2009). Kořeny byly po vyrytí ze země očištěny pod tekoucí vodou. Omyté kořeny se nechaly oschnout a zvážily se na váhách (stolní váha Kern DE), stanovila se tak hmotnost vzorku před vysušením. Pak se vzorky uložily do sušárny, kde se sušily při teplotě 40 C po dobu 84 hodin. Po vysušení se vzorky kořenů opět zvážily na váhách (stanovení hmotnosti vzorků po vysušení). Mletím na kávovém mlýnku se upravily na jemný prášek, který se použil ke stanovení obsahu kyseliny glycyrrhizinové. Stanovení obsahu glycyrrhizinu metodou kapalinové chromatografie proběhlo v roce Laboratorní stanovení bylo provedeno v laboratoři Ústavu zelinářství a květinářství na ZF MENDE- LU v Lednici. Stanovení prováděla paní Paulínová. 29

30 5. VÝSLEDKY 5.1 Vyhodnocení rodu Glycyrrhiza L. Glycyrrhiza glabra (42A ) První rostlina na 1. řádku Glycyrrhiza glabra, pracovní číslo (0001/1/1), byla hodnocena dne Výsledky hodnocení jsou uvedeny v Tab. 4. Byly hodnoceny znaky 31 43, znak 53 u této položky nebyl hodnocen. Tab. 4 Vyhodnocení položky Glycyrrhiza glabra (0001/1/1) Číslo znaku Název Stupnice Projev znaku Barva počet na stonku 32 1 řídký hrozen typ 33 1 válcovitý tvar ,1 20cm délka se stopkou ,1 10 cm délka bez stopky cm šířka 37 Plod tvar 2 podlouhlý 38 Plod délka mm 39 Plod šířka mm 40 Plod povrch 1 lysý 41 Semeno 3 2 počet v lusku 42 Semeno tvar 2 ledvinovitý 43 Semeno barva 4 tmavě hnědá 56 RHS 200B 30

31 Glycyrrhiza glabra (42A ) První rostlina na 2. řádku Glycyrrhiza glabra, pracovní číslo (0011/2/317), byla hodnocena dne a Výsledky hodnocení jsou uvedeny v Tab. 5. Byly hodnoceny znaky a znak 53. Tab. 5 Vyhodnocení položky Glycyrrhiza glabra (0011/2/317) Číslo znaku Název Stupnice Projev znaku Barva počet na stonku 32 typ 2 hustý hrozen 33 2 válcovitý tvar cm délka se stopkou cm délka bez stopky cm šířka 37 Plod tvar 1 kapkovitý 38 Plod délka 1 < 3 mm 39 Plod šířka 1 < 2 mm 40 Plod povrch 3 silně pokryt ostny 41 Semeno 3 2 počet v lusku 42 Semeno tvar 1 ledvinitý 43 Semeno barva 3 hnědozelená 46 RHS 152B 53 Obsah glycyrrhizinu v sušině kořene 7 >2,5 % Glycyrrhiza glabra (42A ) První rostlina na 4. řádku Glycyrrhiza glabra, pracovní číslo (0001/4/1), byla hodnocena dne Výsledky hodnocení jsou uvedeny v Tab. 6. Byly hodnoceny znaky 31 43, znak 53 u této položky nebyl hodnocen. 31

32 Tab. 6 Vyhodnocení položky Glycyrrhiza glabra (0001/4/1) Číslo znaku Název Stupnice Projev znaku Barva 31 počet na stonku typ 1 řídký hrozen 33 tvar 1 válcovitý 34 délka se stopkou 5 10,1 20cm 35 délka bez stopky 5 4,1 10 cm 36 šířka cm 37 Plod tvar 2 podlouhlý 38 Plod délka mm 39 Plod šířka mm 40 Plod povrch 1 lysý 41 Semeno počet v lusku Semeno tvar 2 ledvinovitý 43 Semeno barva 4 tmavě hnědá 56 RHS 200B Glycyrrhiza glabra (42A ) První rostlina na 5. řádku Glycyrrhiza glabra, pracovní číslo (0001/5/1), byla hodnocena dne Výsledky hodnocení jsou uvedeny v Tab. 7. Byly hodnoceny znaky 31 43, znak 53 u této položky nebyl hodnocen. Tab. 7 Vyhodnocení položky Glycyrrhiza glabra (0001/5/1) Číslo znaku Název Stupnice Projev znaku Barva 31 počet na stonku typ 2 hustý hrozen 33 tvar 1 válcovitý 34 délka se stopkou 5 10,1 20 cm 35 délka bez stopky 5 4,1 10 cm 36 šířka cm 32

33 37 Plod tvar 1 podlouhlý 38 Plod délka mm 39 Plod šířka mm 40 Plod povrch 2 lysý 41 Semeno počet v lusku Semeno tvar 2 ledvinitý 43 Semeno barva 4 tmavě hnědá 56 RHS 200B Glycyrrhiza macedonica (42A ) První rostlina na 5. řádku Glycyrrhiza macedonica, pracovní číslo (0013/5/420), byla hodnocena dne a Výsledky hodnocení jsou uvedeny v Tab. 8. Byly hodnoceny znaky a znak 53. Tab. 8 Vyhodnocení položky Glycyrrhiza macedonica (0013/5/420) Číslo znaku Název Stupnice Projev znaku Barva 31 počet na stonku 1 < 3 32 typ 2 hustý hrozen 33 tvar 2 válcovitý 34 délka se stopkou cm 35 délka bez stopky 5 4,1 10cm 36 šířka 5 3,1 5 cm 37 Plod tvar 1 kapkovitý 38 Plod délka 1 < 3 mm 39 Plod šířka 1 < 2 mm 40 Plod povrch 3 silně pokryt ostny 41 Semeno počet v lusku Semeno tvar 1 ledvinitý 43 Semeno barva 3 hnědá 53 Obsah glycyrrhizinu v sušině kořene 5 0,5 2,5 % 47 RHS N199C 33

34 Glycyrrhiza glabra (42A ) První rostlina na 6. řádku Glycyrrhiza glabra, pracovní číslo (0001/6/1), byla hodnocena a Výsledky hodnocení jsou uvedeny v Tab. 9. Byly hodnoceny znaky a znak 53. Tab. 9 Vyhodnocení položky Glycyrrhiza glabra (0001/6/1) Číslo znaku Název Stupnice Projev znaku Barva 31 počet na stonku typ 1 řídký hrozen 33 tvar 1 válcovitý 34 délka se stopkou 5 10,1 20 cm 35 délka bez stopky 5 4,1 10 cm 36 šířka cm 37 Plod tvar 1 podlouhlý 38 Plod délka mm 39 Plod šířka mm 40 Plod - povrch 2 lysý 41 Semeno počet v lusku Semeno tvar 2 ledvinitý 43 Semeno barva 4 tmavě hnědá 56 RHS 200B 53 Obsah glycyrrhizinu v sušině kořene 7 >2,5 % Glycyrrhiza pallidiflora (42A ) Druhá rostlina na 13. řádku Glycyrrhiza pallidiflora, pracovní číslo (0005/13/2), byla hodnocena dne a Výsledky hodnocení jsou uvedeny v Tab. 10. Byly hodnoceny znaky a znak

35 Tab. 10 Vyhodnocení položky Glycyrrhiza pallidiflora (0005/13/2) Číslo znaku Název Stupnice Projev znaku Barva 31 počet na stonku typ 2 hustý hrozen 33 tvar 1 válcovitý 34 délka se stopkou cm 35 délka bez stopky cm 36 šířka cm 37 Plod tvar 1 kapkovitý 38 Plod délka mm 39 Plod šířka mm 40 Plod povrch 2 pokryt ostny 41 Semeno počet v lusku Semeno tvar 2 ledvinitý 43 Semeno barva 4 tmavě hnědá 56 RHS 200B 53 Obsah glycyrrhizinu v sušině kořene 5 0,5 2,5 % Glycyrrhiza pallidiflora (42A ) Třetí rostlina na 13. řádku Glycyrrhiza pallidiflora, pracovní číslo (0005/13/3), byla hodnocena dne a Výsledky hodnocení jsou uvedeny v Tab. 11. Byly hodnoceny znaky a znak 53. Tab. 11 Vyhodnocení položky Glycyrrhiza pallidiflora (0005/13/3) Číslo znaku 31 Název Stupnice Projev znaku počet na stonku Barva 32 typ 2 hustý hrozen 33 tvar 1 válcovitý 34 délka se stopkou 5 10,1 20 cm 35

36 35 délka bez stopky 5 4,1 10 cm 36 šířka 5 3,1 5 cm 37 Plod tvar 1 kapkovitý 38 Plod délka mm 39 Plod šířka mm 40 Plod povrch 2 pokryt ostny 41 Semeno počet v lusku Semeno tvar 2 ledvinitý 43 Semeno barva 4 tmavě hnědá 53 Obsah glycyrrhizinu v sušině kořene 7 >2,5 % 56 RHS 200B Glycyrrhiza pallidiflora (42A ) První rostlina na 14. řádku Glycyrrhiza pallidiflora, pracovní číslo (0009/14/1), byla hodnocena dne a Výsledky hodnocení jsou uvedeny v Tab. 12. Byly hodnoceny znaky a znak 53. Tab. 12 Vyhodnocení položky Glycyrrhiza pallidiflora (0009/14/1) Číslo znaku Název Stupnice Projev znaku Barva 31 počet na stonku typ 2 hustý hrozen 33 tvar 1 válcovitý 34 délka se stopkou cm 35 délka bez stopky 5 4,1 10 cm 36 šířka cm 37 Plod tvar 1 kapkovitý 38 Plod délka mm 39 Plod šířka mm 40 Plod povrch 2 pokryt ostny 41 Semeno počet v lusku Semeno tvar 2 ledvinitý 43 Semeno barva 4 tmavě hnědá 56 RHS 200B 36

37 53 Obsah glycyrrhizinu v sušině kořene 7 >2,5 % Glycyrrhiza pallidiflora (42A ) První rostlina na 17. řádku Glycyrrhiza pallidiflora, pracovní číslo (0007/17/3), byla hodnocena dne Výsledky hodnocení jsou uvedeny v Tab. 13. Byly hodnoceny znaky 31 43, znak 53 u této položky nebyl hodnocen. Tab. 13 Vyhodnocení položky Glycyrrhiza pallidiflora (0007/17/3) Číslo znaku Název Stupnice Projev znaku Barva 31 počet na stonku typ 2 hustý hrozen 33 tvar 1 válcovitý 34 délka se stopkou 5 10,1 20 cm 35 délka bez stopky 5 4,1 10 cm 36 šířka 5 3,1 5 cm 37 Plod tvar 1 kapkovitý 38 Plod délka mm 39 Plod šířka mm 40 Plod povrch 2 pokryt ostny 41 Semeno počet v lusku Semeno tvar 2 ledvinitý 43 Semeno barva 4 tmavě hnědá 56 RHS 200B Glycyrrhiza echinata (42A ) První rostlina na 20. řádku Glycyrrhiza echinata, pracovní číslo (0008/20/1), byla hodnocena dne U této rostliny bylo hodnoceno 10 výhonů. Výsledky hodnocení jsou uvedeny v Tab. 14. Byly hodnoceny znaky 31 43, znak 53 u této položky nebyl hodnocen. 37

38 Tab. 14 Vyhodnocení položky Glycyrrhiza echinata (0008/20/1) Číslo znaku Název Stupnice Projev znaku Barva 31 počet na stonku typ 2 hustý hrozen 33 tvar 2 kulovitý 34 délka se stopkou cm 35 délka bez stopky cm 36 šířka cm 37 Plod tvar 1 kapkovitý 38 Plod délka mm 39 Plod šířka mm 40 Plod povrch 3 silně pokryt ostny 41 Semeno počet v lusku Semeno tvar 1 široce ledvinitý 43 Semeno barva 3 hnědá 47 RHS N199C Glycyrrhiza pallidiflora (42A ) Druhá rostlina na 20. řádku Glycyrrhiza pallidiflora, pracovní číslo (0007/20/2), byla hodnocena dne Výsledky hodnocení jsou uvedeny v Tab. 15. Byly hodnoceny znaky 31 43, znak 53 u této položky nebyl hodnocen. Tab. 15 Vyhodnocení položky Glycyrrhiza pallidiflora (0007/20/2) Číslo znaku Název Stupnice Projev znaku Barva 31 počet na stonku typ 2 hustý hrozen 33 tvar 2 kulovitý 34 délka se stopkou cm cm 38

39 délka bez stopky 36 šířka cm 37 Plod tvar 1 kapkovitý 38 Plod délka mm 39 Plod šířka mm 40 Plod povrch 3 silně pokryt ostny 41 Semeno počet v lusku Semeno tvar 1 široce ledvinitý 43 Semeno barva 3 hnědá 47 RHS N199C Glycyrrhiza echinata (42A ) První rostlina na 23. řádku Glycyrrhiza echinata, pracovní číslo (0008/23/1), byla hodnocena dne a Výsledky hodnocení jsou uvedeny v Tab. 16. Byly hodnoceny znaky a znak 53. Tab. 16 Vyhodnocení položky Glycyrrhiza echinta (0008/23/1) Číslo znaku 31 Název Stupnice Projev znaku Barva počet na stonku typ 2 hustý hrozen 33 tvar 2 kulovitý 34 délka se stopkou cm 35 délka bez stopky cm 36 šířka 5 3,1 5 cm 37 Plod tvar 1 kapkovitý 38 Plod délka mm 39 Plod šířka mm 40 Plod povrch 3 silně pokryt ostny 41 Semeno počet v lusku Semeno tvar 1 široce ledvinitý 43 Semeno barva 3 hnědá 53 Obsah glycyrrhizinu v sušině kořene 7 >2,5 % 47 RHS N199C 39

40 Glycyrrhiza echinata (42A ) První rostlina na 28. řádku Glycyrrhiza echinata, pracovní číslo (0008/28/1), byla hodnocena dne a Výsledky hodnocení jsou uvedeny v Tab. 17. Byly hodnoceny znaky a znak 53. Tab. 17 Vyhodnocení položky Glycyrrhiza echinata (0008/28/1) Číslo znaku Název Stupnice Projev znaku Barva 31 počet na stonku typ 2 hustý hrozen 33 tvar 2 kulovitý 34 délka se stopkou cm 35 délka bez stopky cm 36 šířka 5 3,1 5 cm 37 Plod tvar 1 kapkovitý 38 Plod délka mm 39 Plod šířka mm 40 Plod povrch 3 silně pokryt ostny 41 Semeno počet v lusku Semeno tvar 1 široce ledvinitý 43 Semeno barva 3 hnědá 53 Obsah glycyrrhizinu v sušině kořene 7 >2,5 % 47 RHS N199C 5.2 Celkové hodnocení položek genofondu Plodenství, plod, semeno a obsah kyseliny glycyrrhizinové byly pozorovány v roce 2012 a 2013 (viz. Tab. 18, Přílohy). Celkem bylo hodnoceno 15 položek z genofondu. Glycyrrhiza glabra 6 položek, Glycyrrhiza echinata 3 položky, Glycyrrhiza macedonica 1 položka, Glycyrrhiza pallidiflora 5 položek. Při hodnocení 40