ČEKÁ TECHNICKÁ NORMA IC 07.100.30 Únor 2015 Mikrobiologie potravin, krmiv a vody Příprava, výroba, uchovávání a zkoušení výkonnosti kultivačních půd ČN EN IO 11133 OPRAVA 1 56 0099 Corrigendum ČN EN IO 11133 (56 0099) Mikrobiologie potravin, krmiv a vody Příprava, výroba, uchovávání a zkoušení výkonnosti kultivačních půd z prosince 2014 se na základě Correction Notice vydaného CEN dne 2014-11-12 opravuje takto: Na titulní straně se označení shodnosti opravuje takto: idt IO 11133:2014, Corrected version: 2014-11 Titulní strana evropské normy, předmluva a tabulky E.1 a F.1 se nahrazují takto: Úřad pro technickou lizaci, metrologii a státní zkušebnictví, 2015 96725 Podle zákona č. 22/1997 b. smějí být české technické normy rozmnožovány a rozšiřovány jen se souhlasem Úřadu pro technickou lizaci, metrologii a státní zkušebnictví.
2
EVROPKÁ NORMA EN IO 11133 EUROPEAN TANDARD NORME EUROPÉENNE EUROPÄICHE NORM Květen 2014 IC 07.100.30 Nahrazuje CEN IO/T 11133-1:2009, CEN IO/T 11133-2:2003 Mikrobiologie potravin, krmiv a vody Příprava, výroba, uchovávání a zkoušení výkonnosti kultivačních půd (IO 11133:2014, opravené vydání 2014-11-01) Microbiology of food, animal feed and water Preparation, production, storage and performance testing of culture media (IO 11133:2014, Corrected version 2014-11-01) Microbiologie des aliments des aliments pour animaux et de l'eau Préparation, production, stockage et essais de performance des milieux de culture (IO 11133:2014, Version corrigée 2014-11-01) Mikrobiologie von Lebensmitteln, Futtermitteln und Wasser Vorbereitung, Herstellung, Lagerung und Leistungsprüfung von Nährmedien (IO 11133:2014, korrigierte Fassung 2014-11-01)) Tato evropská byla schválena CEN dne 2014-03-20. Členové CEN jsou povinni splnit vnitřní předpisy CEN/CENELEC, v nichž jsou stanoveny podmínky, za kterých se této evropské normě bez jakýchkoliv modifikací uděluje status národní normy. Aktualizované seznamy a bibliografické citace týkající se těchto národních norem lze obdržet na vyžádání v Řídicím centru CEN-CENELEC nebo u kteréhokoliv člena CEN. Tato evropská existuje ve třech oficiálních verzích (anglické, francouzské, německé). Verze v každém jiném jazyce přeložená členem CEN do jeho vlastního jazyka, za kterou zodpovídá a kterou notifikuje Řídicímu centru CEN-CENELEC, má stejný status jako oficiální verze. Členy CEN jsou národní lizační orgány Belgie, Bulharska, Bývalé jugoslávské republiky Makedonie, České republiky, Dánska, Estonska, Finska, Francie, Chorvatska, Irska, Islandu, Itálie, Kypru, Litvy, Lotyšska, Lucemburska, Maďarska, Malty, Německa, Nizozemska, Norska, Polska, Portugalska, Rakouska, Rumunska, Řecka, lovenska, lovinska, pojeného království, Španělska, Švédska, Švýcarska a Turecka. Evropský výbor pro lizaci European Committee for tandardization Comité Européen de Normalisation Europäisches Komitee für Normung Řídicí centrum CEN-CENELEC: Avenue Marnix 17, B-1000 Brusel 2014 CEN Veškerá práva pro využití v jakékoli formě a jakýmikoli prostředky Ref. č. EN IO 11133:2014 E jsou celosvětově vyhrazena národním členům CEN. 3
Předmluva Tento dokument (EN IO 1133:2014, opravené vydání 2014-11-01) vypracovala technická komise IO/TC 34 Potravinářské výrobky ve spolupráci s technickou komisí CEN/TC 275 Analýza potravin Horizontální metody, jejíž sekretariát zajišťuje DIN. Této evropské normě je nutno nejpozději do listopadu 2014 udělit status národní normy, a to buď vydáním identického textu, nebo schválením k přímému používání, a národní normy, které jsou s ní v rozporu, je nutno zrušit nejpozději do listopadu 2014. Upozorňuje se na možnost, že některé prvky tohoto dokumentu mohou být předmětem patentových práv. CEN [a/nebo CENELEC] nelze činit odpovědným za identifikaci jakéhokoliv nebo všech patentových práv. Tento dokument nahrazuje CEN IO/T 11133-2:2003, CEN IO/T 11133-1:2009. Podle vnitřních předpisů CEN/CENELEC jsou tuto evropskou normu povinny zavést národní lizační orgány Belgie, Bulharska, Bývalé jugoslávské republiky Makedonie, České republiky, Dánska, Estonska, Finska, Francie, Chorvatska, Irska, Islandu, Itálie, Kypru, Litvy, Lotyšska, Lucemburska, Maďarska, Malty, Německa, Nizozemska, Norska, Polska, Portugalska, Rakouska, Rumunska, Řecka, lovenska, lovinska, pojeného království, Španělska, Švédska, Švýcarska a Turecka. Oznámení o schválení Text IO 11133:2014, opravené vydání 2014-11-01 byl schválen CEN jako EN IO 11133:2014 bez jakýchkoliv modifikací. 4
Tabulka E.1 Testovací mikroorganismy a kritéria výkonnosti kultivačních půd běžně používaných v mikrobiologii potravin elektivní pro stanovení počtu mikroorganismů Charakteristická reakce agar pro listerie: Ottaviani a Agosti Listeria monocytogenes IO 11290-2 Listeria monocytogenes 4b Listeria monocytogenes 1/2a 00021 b 00109 TA kvantitativní P R 0,5 modrozelené kolonie se zónou zákalu nebo NA2) Enterococcus faecalis d 00009 Listeria innocua 00017 modrozelené kolonie bez zóny zákalu Baird- Parker koagulázopozitivní stafylokoky IO 6888-1 (24 ± 2) h až (48 ± 2) h při taphylococcus aureus 00034 b 00032 TA kvantitativní P R 0,5 černé nebo šedé kolonie se zónou projasnění (egg-yolk reakce s projasněním) 5 (48 ± 2) h při (24 ± 2) h až (48 ± 2) h při taphylococcus saprophyticus taphylococcus epidermidis 00159 b 00036 černé nebo šedé kolonie bez egg-yolk reakce s projasněním BGBLB L koliformní bakterie NA2) IO 4831 Viz informativní národní příloha NA. (24 ± 2) h až (48 ± 2) h při (30 ± 1) C 00012 b Citrobacter freundii 00006 Enterococcus faecalis d 00009 00087 zákal f a v Durhamově zkumavce plyn částečná inhibice bez tvorby plynu tvorba plynu a zákal
CFC spp. IO 13720 Tabulka E.1 (pokračování) elektivní pro stanovení počtu mikroorganismů (25 ± 1) C fluorescens 00115 b fragi 00116 Charakteristická reakce TA kvantitativní P R 0,5 DG18 kvasinky a plísně IO 21527-2 5 dní při (25 ± 1) C accharomyces cerevisiae Wallemia sebi 00058 b 00182 b Aspergillus restrictus 00183 Eurotium rubrum 00184 DA kvantitativní P R 0,5 v závislosti na druhu: charakteristické kolonie/vegetativní rozmnožovací jednotky 6 g Bacillus subtilis subsp. spizizenii 00003 žádný růst DRBC kvasinky a plísně IO 21527-1 5 dní při (25 ± 1) C accharomyces cerevisiae Aspergillus brasiliensis 00058 b 00053 b Candida albicans 00054 Mucor racemosus 00181 DA kvantitativní P R 0,5 v závislosti na druhu: charakteristické kolonie/vegetativní rozmnožovací jednotky g Bacillus subtilis subsp. spizizenii 00003 žádný růst EC L IO 7251 (24 ± 2) h až (48 ± 2) h při (44 ± 1) C 00012 b zákal f a v Durhamově zkumavce plyn tvorba plynu a zákal 00025 žádný růst
Tabulka E.1 (pokračování) elektivní pro stanovení počtu mikroorganismů Charakteristická reakce I ( T ) bakterie redukující sulfity IO 15213 (24 ± 3) h až (48 ± 2) h při anaerobní atmosféra Clostridium perfringens 00007 b 00080 TA nebo jiná neselektivní půda pro anaeroby kvantitativní P R 0,5 černé kolonie chybějící černé zbarvení LT L koliformní bakterie IO 4831 (24 ± 2) h až (48 ± 2) h při (30 ± 1) C 00012 b Citrobacter freundii 00006 Enterococcus faecalis d 00009 00087 zákal f a v Durhamově zkumavce plyn tvorba plynu a zákal žádný růst 7 IO 7251 (24 ± 2) h až (48 ± 2) h při 00012 b Enterococcus faecalis d 00009 00087 zákal f a v Durhamově zkumavce plyn tvorba plynu a zákal žádný růst mccda bakterie rodu Campylobacter IO 10272-2 (41,5 ± 1) C mikroaerobní atmosféra Campylobacter jejuni 00156 b 00005 Campylobacter coli 00004 krevní agar kvantitativní P R 0,5 úplná nebo částečná ihibice (0 až 1) kolonie šedavé, ploché a vlhké, někdy s kovovým leskem taphylococcus aureus 00034 MR bakterie mléčného kvašení IO 15214 (72 ± 3) h při (30 ± 1) C Lactobacillus sakei Lactococcus lactis Pediococcus pentosaceus 00015 b 00016 b 00158 Bacillus cereus 00001 již ověřená šarže MR kvantitativní P R 0,7 kolonie charakteristické pro jednotlivé druhy
MYP Bacillus cereus IO 7932 Tabulka E.1 (pokračování) elektivní pro stanovení počtu mikroorganismů (24 ± 3) h až (30 ± 1) C (30 ± 1) C Bacillus cereus 00001 TA kvantitativní P R 0,5 Bacillus subtilis subsp. spizizenii 00003 Charakteristická reakce růžové kolonie se zónou precipitace žluté kolonie bez zóny precipitace RPFA koagulázopozitivní stafylokoky IO 6888-2 (24 ± 2) h až (48 ± 2) h při taphylococcus aureus 00034 b 00032 TA kvantitativní P R 0,5 černé nebo šedé kolonie se zónou zákalu (48 ± 2) h při 8 (24 ± 2) h až (48 ± 2) h při taphylococcus saprophyticus taphylococcus epidermidis 00159 b 00036 černé nebo šedé kolonie bez zóny zákalu PPA spp. IO/T 11059 (48 ± 2) h při (25 ± 1) C fluorescens 00115 b 00025 TA kvantitativní P R 0,5 TBX β-dglukuronidázopozitivní IO 16649-1 a IO 16649-2 (21 ± 3) h při (44 ± 1) C h Enterococcus faecalis d 00009 00087 Citrobacter freundii 00012 d d TA kvantitativní P R 0,5 modré kolonie 00202 b 00006 b 00025 kvalitativní kvalitativní bílé až zeleno-béžové kolonie
Tabulka E.1 (pokračování) elektivní pro stanovení počtu mikroorganismů Charakteristická reakce TC (C) Clostridium perfringens IO 7937 (20 ± 2) h při anaerobní atmosféra Clostridium perfringens 00007 b 00080 TA nebo jiná neselektivní půda pro anaeroby kvantitativní P R 0,5 černé kolonie VRBG bakterie čeledi Enterobacteriaceae IO 21528-2 (24 ± 2) h při Typhimurium d,i Enteritidis d,i 00012 b 00031 00030 TA kvantitativní P R 0,5 růžové až červené kolonie se zónou precipitace nebo bez ní Enterococcus faecalis d 00009 00087 9 VRBL koliformní bakterie IO 4832 (24 ± 2) h při (30 ± 1) C 00012 b Enterococcus faecalis d 00009 00087 TA kvantitativní P R 0,5 červenofialové (purpurově červené) kolonie se zónou precipitace nebo bez ní 00025 kvalitativní bezbarvé až béžové kolonie
PCA MPCA aerobní mikroorganismy technika počítání kolonií IO 4833 Tabulka E.1 (pokračování) Neselektivní pro stanovení počtu mikroorganismů (72 ± 3) h při (30 ± 1) C Bacillus subtilis subsp. spizizenii 00003 b 00012 b Charakteristická reakce TA kvantitativní P R 0,7 taphylococcus aureus 00034 elektivní pomnožovací cílového mikroorganismu Bolton L bakterie rodu Campylobacter IO 10272-1 Campylobacter jejuni d 00156 nebo 00005 10 (5 ± 1) h při a pak (41,5 ± 1) C mikroaerobní atmosféra 00012 + d + Proteus mirabilis 00023 Campylobacter coli 00004 + + Proteus mirabilis 00023 > 10 kolonií na mccda kolonie šedavé, ploché a vlhké, někdy s kovovým leskem Proteus mirabilis 00023 na TA
Tabulka E.1 (pokračování) elektivní pomnožovací cílového mikroorganismu EE L bakterie čeledi Enterobacteriaceae IO 21528-1 (24 ± 2) h při 00012 b + Enterococcus faecalis d 00009 Typhimurium d,i Enteritidis d,i 00031 nebo 00030 > 10 kolonií na VRBG růžové až červené kolonie se zónou precipitace nebo bez ní + Enterococcus faecalis d 00009 Enterococcus faecalis d 00009 na TA Fraser L Listeria monocytogenes IO 11290-1 Listeria monocytogenes 4b 00021 b 11 + (48 ± 2) h při + Enterococcus faecalis d 00009 Listeria monocytogenes 1/2a 00109 + > 10 kolonií na agaru pro listerie: Ottaviani a Agosti modrozelené kolonie se zónou zákalu + Enterococcus faecalis d 00009 Enterococcus faecalis d 00009 na TA < 100 kolonií na TA
Giolitti a Cantoni L koagulázopozitivní stafylokoky IO 6888-3 Tabulka E.1 (pokračování) elektivní pomnožovací (24 ± 2) h až (48 ± 2) h při taphylococcus aureus 00034 b + taphylococcus aureus 00032 + > 10 kolonií na garu podle Baird-Prakera nebo na agaru RPFA cílového mikroorganismu kolonie charakteristické podle použité (viz IO 6888-1 pro agar podle Baird-Parkera a IO 6888-2 pro agar RPFA) (48 ± 2 ± 4) h při na TA Half- Fraser L Listeria monocytogenes IO 11290-1 Listeria monocytogenes 4b 00021 b (poloviční Fraser) + 12 (24 ±2) h při (30 ± 1) C + Enterococcus faecalis d 00009 Listeria monocytogenes 1/2a 00109 + > 10 kolonií na agaru pro listerie: Ottaviani a Agosti modrozelené kolonie se zónou zákalu + Enterococcus faecalis d 00009 na TA Enterococcus faecalis d 00009 < 100 kolonií na TA
Tabulka E.1 (pokračování) elektivní pomnožovací cílového mikroorganismu ITC L Yersinia enterocolitica IO 10273 Yersinia enterocolitica 00038 b + (25 ± 1) C + 00025 Yersinia enterocolitica 00160 > 10 kolonií na CIN nebo DC kolonie charakteristické podle použité (viz IO 10273) + or + 00025 00025 Proteus mirabilis 00023 na TA 13 MKTTn L bakterie rodu IO 6579 Enteritidis d,i Typhimurium d,i 00031 00030 + > 10 kolonií na XLD nebo na jiné půdě podle volby kolonie charakteristické podle použité (viz IO 6579) (24 ± 3) h při + 00025 částečná inhibice 100 kolonií na TA Enterococcus faecalis d 00009 < 10 kolonií na TA
MRV k bakterie rodu IO 6579 Tabulka E.1 (pokračování) elektivní pomnožovací 2 (24 ± 3) h při (41,5 ± 1) C Enteritidis d,i 00030 Typhimurium d,i 00031 šedobílá zakalená zóna šířící se kolem naočkované kapky (kapek); po 24 h až 48 h se zakalená zóna (zóny) rozšíří (téměř) po celé plotně v místě naočkované kapky (kapek) je možný růst bez zakalené zóny cílového mikroorganismu možnost navíc: charakteristické kolonie po subkultivaci na XLD k 14 MMG L β-dglukuronidázopozitivní IO 16649-3 (24 ± 2) h při Enterococcus faecalis d 00009 00012 b Enterococcus faecalis d 00009 žádný růst tvorba kyseliny změna zbarvení na žluté žádný růst PB L Yersinia enterocolitica IO 10273 Yersinia enterocolitica 00038 b + 3 až 5 dní při (25 ± 1) C + 00025 Yersinia enterocolitica 00160 + > 10 kolonií na CIN nebo DC kolonie charakteristické podle použité (viz IO 10273) + 00025 00025 b Proteus mirabilis 00023 na TA
Tabulka E.1 (pokračování) elektivní pomnožovací cílového mikroorganismu RV L bakterie rodu IO 6579 Enteritidis d,i Typhimurium d,i 00030 00031 + > 10 kolonií na XLD nebo na jiné půdě podle volby kolonie charakteristické podle použité (viz IO 6579) (24 ± 3) h při (41,5 ± 1) C + 00025 částečná inhibice 100 kolonií na TA Enterococcus faecalis d 00009 < 10 kolonií na TA 15 TPB L Bacillus cereus IO 21871 (48 ± 4) h při (30 ± 1) C Bacillus cereus 00001 >10 kolonií na PEMBA nebo MYP na TA kolonie charakteristické podle použité (viz IO 21871)
BHI L koagulázopozitivní stafylokoky bujón pro brucely L bakterie rodu Campylobacter IO 6888-1 IO 6888-3 IO 10272 (všechny části) Tabulka E.1 (pokračování) Neselektivní tekuté a ředicí roztoky (24 ± 2) h při taphylococcus aureus 00034 2 až 5 dní při Campylobacter jejuni d 00156 (41,5 ± 1) C 00005 mikroaerobní atmosféra Campylobacter coli 00004 Charakteristická reakce zákal (1 až 2) f zákal (1 až 2) f ředicí roztok pro zvláštní účely, např. BPW s bromkresolovou červení L ředicí roztoky IO 6887 (všechny části) zkouší se vliv kontaktu s ředicím roztokem 45 min až 1 h při 20 C až 25 C taphylococcus aureus 00034 b TA kvantitativní ± 30 % počtu kolonií/t 0 (± 30 % výchozího počtu kolonií) 16 Ringerův roztok o čtvrtinové koncentraci L ředicí roztoky IO 6887 (všechny části) zkouší se vliv kontaktu s ředicím roztokem roztok s peptonem fyziologický roztok s peptonem 45 min až 1 h při 20 C až 25 C taphylococcus aureus 00034 b TA kvantitativní ± 30 % počtu kolonií/t 0 (± 30 % výchozího počtu kolonií) roztok fosfátového pufru thioglykolát L Clostridium perfringens IO 7937 (21 ± 3) h při Clostridium perfringens 00007 zákal (1 až 2) f TYEB L Listeria monocytogenes IO 11290 (všechny části) (21 ± 3) h při (25 ± 1) C Listeria monocytogenes 4b Listeria monocytogenes 1/2a 00021 b 00109 zákal (1 až 2) f
Tabulka E.1 (pokračování) elektivní izolační Charakteristická reakce agar pro listerie: Ottaviani j a Agosti Listeria monocytogens IO 11290-1 Listeria monocytogenes 4b Listeria monocytogenes 1/2a 00021 b 00109 modrozelené kolonie se zónou zákalu (44 ± 4) h při Enterococcus faecalis d 00009 Listeria innocua 00017 modrozelené kolonie bez zóny zákalu 17 mccda j bakterie rodu Campylobacter IO 10272 (všechny části) (41,5 ± 1) C mikroaerobní atmosféra Campylobacter jejuni d Campylobacter coli 00156 b 00005 00004 d 000012 úplná nebo částečná inhibice (0 až 1) kolonie šedavé, ploché a vlhké, někdy s kovovým leskem žádné charakteristické kolonie taphylococcus aureus 00034 CT-MAC Escherichia coli O157 IO 16654 Escherichia coli O157:H7 00014 (netoxinogenní kmen) průsvitné kolonie zbarvené světle žlutavě až nahnědle a o průměru asi 1 mm (21 ± 3) h při taphylococcus aureus d 00032 nebo 00034 00012 d částečná inhibice (1) růst několika růžových kolonií CIN DC Yersinia enterocolitica IO 10273 (21 ± 3) h při (30 ± 1) C Yersinia enterocolitica 00038 b 00160 taphylococcus aureus 00034 úplná nebo částečná inhibice (0 až 1) kolonie charakteristické podle použité (viz IO 10273) žádné charakteristické kolonie
CPC mcpc bakterie rodu Vibrio druhy jiné než Vibrio parahaemolyticus a Vibrio cholerae IO/T 21872-2 Tabulka E.1 (pokračování) elektivní izolační (24 ± 3) h při Vibrio vulnificus 00187 b Vibrio cholerae non-o1/non-o139 nebo 00090 00203 b Charakteristická reakce žluté kolonie obklopené žlutým zbarvením purpurově zbarvené kolonie obklopené purpurovým zbarvením MYP j Bacillus cereus IO 21871 (21 ± 3) h až 48 h při (30 ± 1) C Bacillus cereus 00001 růžové kolonie se zónou precipitace (30 ± 1) C nebo 0 Bacillus subtilis subsp. spizizenii 00003 žluté kolonie bez zóny precipitace 18 PEMBA Bacillus cereus IO 21871 (21 ± 3) h až Bacillus cereus 00001 tyrkysově modré kolonie se zónou precipitace Bacillus subtilis subsp. spizizenii 00003 bílé kolonie bez zóny precipitace D bakterie rodu Vibrio druhy jiné než Vibrio parahaemolyticus a Vibrio cholerae IO/T 21872-2 (24 ± 3) h při Vibrio vulnificus 00187 b Vibrio cholerae non-o1/non-o139 nebo 00090 00203 b kolonie purpurově/zeleně zbarvené obklopené zónou zákalu žluté kolonie obklopené zónou zákalu
Tabulka E.1 (pokračování) elektivní izolační Charakteristická reakce TBX j β-dglukuronidázopozitivní Escherichia col IO 16649-3 (21 ± 3) h při (44 ± 1) C h Enterococcus faecalis d 00009 Citrobacter freundii 00012 d d 00202 b 00006 b 00025 modré kolonie bílé až zeleno béžově kolonie 19 TCB Vibrio parahaemolyticus a Vibrio cholerae VRBG j bakterie čeledi Enterobacteriaceae IO/T 21872-1 IO 21528-1 (24 ± 3) h při (24 ± 2) h při Vibrio parahaemolyticus 00185 b Vibrio furnissii 00186 b nebo 00090 Typhimuriumm d,i Enteritidis d,i 00012 b 00031 nebo 00030 zelené kolonie (sacharózonegativní) žluté kolonie (sacharózopozitivní) růžové až červené kolonie se zónou precipitace nebo bez ní Enterococcus faecalis d 00009
XLD bakterie rodu IO 6579 Tabulka E.1 (pokračování) elektivní izolační (24 ± 3) h při d, i 00031 Typhimuriumd Enteritidis d, i 00030 00012 d růst nebo částečná inhibice (0 až 1) Charakteristická reakce kolonie s černým středem a obklopené slabě průsvitnou načervenalou zónou v důsledku změny barvy žluté kolonie Enterococcus faecalis d 00009 Neselektivní izolační Charakteristická reakce 20 živný agar d bakterie čeledi Enterobacteriaceae IO 21528 (všechny části) (24 ± 2) h při 00012 b bakterie rodu IO 6579 (24 ± 2) h při Typhimurium d,i Enteritidis d,i 00031 00030 Yersinia enterocolitica IO 10273 (24 ± 2) h při (30 ± 1) C Yersinia enterocolitica 00038 b 00160 TYEA Listeria monocytogenes IO 11290 (všechny části) (21 ± 3) h při Listeria monocytogenes 4b Listeria monocytogenes 1/2a 00021 b 00109
Tabulka E.1 (pokračování) Prostředí pro více účelů Charakteristická reakce BPW m L ředicí roztok pro přípravu ředění při stanovení počtu všech mikroorganismů IO 6887 (všechny části) zkouší se vliv kontaktu s ředicím roztokem 45 min až 1 h při 20 C až 25 C 00012 b taphylococcus aureus 00034 b TA kvantitativní ± 30 % počtu kolonií/t 0 (± 30 % výchozího počtu kolonií) ředicí roztok pro přípravu ředění při stanovení počtu Listeria monocytogenes IO 11290-2 zkouší se vliv kontaktu s ředicím roztokem Listeria monocytogenes 4b (1 h ± 5 min) při (20 ± 2) C Listeria monocytogenes 1/2a 00021 b 00109 TA kvantitativní ± 30 % počtu kolonií/t 0 (± 30 % výchozího počtu kolonií) 21 půda pro předpomnožení při průkazu bakterií rodu půda pro předpomnožení při průkazu bakterií čeledi Enterobacteriaaceae IO 6579 IO 21528-1 Typhimurium d,i 00031 (18 ± 2) h při d,i 00030 Enteritidis (18 ± 2) h při Typhimurium d,i Enteritidis d,i 00012 b 00031 00030 zákal (1 až 2) f zákal (1 až 2) f
krevní agar počet kolonií bakterií rodu Campylobacter IO 10272-2 Tabulka E.1 (dokončení) pro stanovení počtu mikroorganismů TA n počet kolonií (41,5 ± 1) C jak je uvedeno v postupu, kde se jako referenční půda používá TA Campylobacter jejuni d 00156 00005 Campylobacter coli 00004 Bacillus cereus 00001 Bacillus subtilis subsp. spizizenii 00003 00012 Listeria monocytogenes 4b 00021 taphylococcus aureus 00034 již ověřená šarže krevního agaru již ověřená šarže TA Charakteristická reakce kvantitativní P R 0,7 kvantitativní P R 0,7 kolonie charakteristické pro jednotlivé druhy 22 DA počet kolonií jak je uvedeno v postupu, kde se jako referenční půda používá DA accharomyces cerevisiae Aspergillus brasiliensis 00058 b 00053 b již ověřená šarže DA kvantitativní P R 0,7 v závislosti na druhu: charakteristické kolonie/vegetativní rozmnožovací jednotky
Tabulka F.1 Testovací mikroorganismy a kritéria výkonnosti kultivačních půd běžně používaných v mikrobiologii vody elektivní pro stanovení počtu mikroorganismů ve srovnání s neselektivní referenční půdou organismy Funkce Inkubace Kontrolní kmeny Čísla b 00090 TA kvantitativní P R 0,5 E. coli: žluté zbarvení a fluorescence Colilert-18 L / koliformní bakterie IO 9308-2 (20 ± 2) h při (36 ± 2) C Klebsiella pneumoniae 00206 TA kvantitativní P R 0,5 koliformní bakterie: žluté zbarvení stejné nebo intenzivnější než komparátor pro koliformní bakterie 00025 d nebo NA5) 00024 žluté zbarvení méně intenzivní než komparátor 2 až 5 dní při (36 ± 2) C 5 až 10 dní při (36 ± 2) C Legionella pneumophila Legionella anisa 00107 b 00180 00106 BCYE kvantitativní P R 0,5 kolonie v odstínech bílé, šedé, modré až fialové s hladkým okrajem a charakteristickým vzhledem mléčného skla GVPC f baterie rodu Legionella IO 11731 a IO 11731-2 Enterococcus faecalis d 00009 23 3 dny při (36 ± 2) C d 00026 nebo 00025 Escherichia coli d 00012 úplná nebo částečná inhibice (0 až 1) NA5) Viz informativní národní příloha NA.
organismy laktóza TTC / koliformní bakterie IO 9308-1 Tabulka F.1 (pokračování) elektivní pro stanovení počtu mikroorganismů ve srovnání s neselektivní referenční půdou Funkce Inkubace (21 ± 3) h při (36 ± 2) C Kontrolní kmeny Enterobacter aerogenes Citrobacter freundii Čísla 00179 b 00012 00175 00006 TA kvantitativní P R 0,5 žluté zbarvení pod membránovým filtrem Enterococcus faecalis d 00009 d 00025 nebo 00026 červené kolonie, modře zbarvená půda 24 mcp Clostridium perfringens měrnice 98/83/E (21 ± 3) h při (44 ± 1) C anaerobní atmosféra Clostridium perfringens Clostridium bifermentans 00007 b 00080 00174 TA nebo jiná neselektivní půda pro anaeroby kvantitativní P R 0,5 00079 žluté kolonie; fosfatázový test pozitivní modré kolonie; fosfatázový test negativní Escherichia coli d 00012 CN IO 16266 (36 ± 2) C 00024 b 00025 00026 Escherichia coli d 00012 Enterococcus faecalis d 00009 TA kvantitativní P R 0,5 modrozelené kolonie s fluorescencí pod UV světlem (360 ± 20 nm)
Tabulka F.1 (pokračování) elektivní pro stanovení počtu mikroorganismů ve srovnání s neselektivní referenční půdou organismy Funkce Inkubace Kontrolní kmeny Čísla lanetz a Bartley intestinální enterokoky IO 7899-2 (36 ± 2) C Enterococcus faecalis 00009 b 00087 00176 Enterococcus 00177 faecium d 00178 Escherichia coli d 00012 taphylococcus aureus d 00032 nebo 00034 TA kvantitativní P R 0,5 kolonie v odstínech červené, kaštanově hnědé 25 železnato siřičitanový agar [ulfite Iron (I)] tryptózo siřičitanový agar [Tryptose ulfite (T)] anaerobní bakterie redukující sulfity (klostridie) IO 6461-2 anaerobní atmosféra Clostridium perfringens 00007 b 00080 Escherichia coli d 00012 TA nebo krevní agar, nebo jiná neselektivní půda pro anaeroby kvantitativní P R 0,5 černé kolonie bez černého zbarvení TC Clostridium perfringens IO 14189 (21 ± 3) h při (44 ± 1) C anaerobní atmosféra Clostridium perfringens Bacillus subtilis subsp. spizizenii 00007 b 00080 00174 TA nebo krevní agar, nebo jiná neselektivní půda pro anaeroby 00003 kvantitativní P R 0,5 černé kolonie
organismy Colilert-18 L / koliformní bakterie Tabulka F.1 (pokračování) elektivní pro stanovení počtu mikroorganismů ve srovnání s dříve akceptovanou šarží (pro použití ve zvláštních případech) IO 9308-2 Funkce Inkubace (20 ± 2) h při (36 ± 2) C Kontrolní kmeny Klebsiella pneumoniae Čísla b 00090 00206 již ověřená šarže Colilert již ověřená šarže Colilert kvantitativní P R 0,7 kvantitativní P R 0,7 E. coli: žluté zbarvení a fluorescence koliformní bakterie: žluté zbarvení stejné nebo intenzivnější než komparátor pro koliformní bakterie d 00025 nebo 00024 žluté zbarvení méně intenzivní než komparátor 26 GVPC f baterie rodu Legionella IO 11731 a IO 11731-2 2 až 5 dní při (36 ± 2) C 5 až 10 dní při (36 ± 2) C 3 dny při (36 ± 2) C Legionella pneumophila Legionella anisa 00107 b 00180 00106 Enterococcus faecalis d 00009 d 00026 nebo 00025 Escherichia coli d 00012 již ověřená šarže GVPC kvantitativní P R 0,7 úplná nebo částečná inhibice (0 až 1) kolonie v odstínech bílé, šedé, modré až fialové s hladkým okrajem a charakteristickým vzhledem mléčného skla
Tabulka F.1 (pokračování) elektivní pro stanovení počtu mikroorganismů ve srovnání s dříve akceptovanou šarží (pro použití ve zvláštních případech) organismy Funkce Inkubace Kontrolní kmeny Čísla laktóza TTC / koliformní bakterie IO 9308-1 (21 ± 3) h při (36 ± 2) C Enterobacter aerogenes Citrobacter freundii 00179 b 00012 00175 00006 již ověřená šarže laktóza TTC kvantitativní P R 0,7 žluté zbarvení pod membránovým filtrem Enterococcus faecalis d 00009 d 00025 nebo 00026 červené kolonie, modře zbarvená půda 27 mcp Clostridium perfringens měrnice 98/83/E (21 ± 3) h při (44 ± 1) C anaerobní atmosféra Clostridium perfringens Clostridium bifermentans 00007 b 00080 00174 již ověřená šarže mcp kvantitativní P R 0,7 00079 žluté kolonie; fosfatázový test pozitivní modré kolonie; fosfatázový test negativní Escherichia coli d 00012 CN IO 16266 (36 ± 2) C 00024 b 00025 00026 Escherichia coli d 00012 Enterococcus faecalis d 00009 již ověřená šarže CN kvantitativní P R 0,7 modrozelené kolonie s fluorescencí pod UV světlem (360 ± 20 nm)
28 organismy lanetz a Bartley železnato siřičitanový agar [ulfite Iron (I)] tryptózo siřičitanový agar [Tryptose ulfite (T)] intestinální enterokoky anaerobní bakterie redukující sulfity (klostridie) Tabulka F.1 (pokračování) elektivní pro stanovení počtu mikroorganismů ve srovnání s dříve akceptovanou šarží (pro použití ve zvláštních případech) IO 7899-2 IO 6461-2 Funkce Inkubace (36 ± 2) C anaerobní atmosféra Kontrolní kmeny Enterococcus faecalis Čísla 00009 b 00087 00176 Enterococcus 00177 faecium d 00178 Escherichia coli d 00012 taphylococcus aureus d 00032 nebo 00034 Clostridium perfringens 00007 b 00080 Escherichia coli d 00012 již ověřená šarže lanetz a Bartley kvantitativní P R 0,7 již ověřená šarže ulfite Iron (I) nebo Tryptose ulfite (T) kolonie v odstínech červené, kaštanově hnědé kvantitativní P R 0,7 černé kolonie bez černého zbarvení TC Clostridium perfringens IO 14189 (21 ± 3) h při (44 ± 1) C anaerobní atmosféra Clostridium perfringens Bacillus subtilis subsp. spizizenii 00007 b 00080 00174 již ověřená šarže TC 00003 kvantitativní P R 0,7 černé kolonie Neselektivní pro stanovení počtu mikroorganismů organismy Funkce Inkubace Kontrolní kmeny Čísla YEA celková mikroflóra IO 6222 (36 ± 2) C Escherichia coli d 00012 Bacillus subtilis subsp. spizizenii 00003 již ověřená šarže YEA kvantitativní P R 0,7
Tabulka F.1 (pokračování) elektivní pomnožovací organismy Funkce Inkubace Kontrolní kmeny Čísla Campylobacter jejuni d 00156b 00005 + Escherichia coli d 00012 Bolton Preston L bakterie rodu Campylobacter IO 17995 mikroaerobní atmosféra + Proteus mirabilis Campylobacter coli 00023 00004 b + Escherichia coli d 00012 > 10 kolonií na mccda malé ploché nebo vypouklé kolonie s lesklým povrchem + Proteus krabilis 00023 b 29 Escherichia coli d 00012 Proteus krabilis 00023 na TA MUG/EC g CM L / koliformní bakterie IO 9308-3 48 h při (44 ± 0,5) C 00179 Podrobnosti k metodám a kritériím kvality pro půdu MUG/EC jsou uvedeny v IO 9308-3:1998, příloha E. Enterococcus faecalis 00176 Enterococcus hirae 00089 MUD/F h L intestinální enterokoky IO 7899-1 (44 ± 0,5) C Enterococcus faecium Aerococcus viridans 00178 00061 Podrobnosti k metodám a kritériím kvality pro půdu MUD/F jsou uvedeny v IO 7899-1:1998, příloha E. Lactococcus lactis 00016 taphylococcus epidermidis 00132
organismy Funkce Inkubace Tabulka F.1 (pokračování) elektivní pomnožovací Kontrolní kmeny Čísla d,i 00030 Enteritidis d,i 00031 Typhimurium + Escherichia coli d 00012 > 10 kolonií na XLD nebo na jiné půdě podle volby kolonie charakteristické podle použité (viz IO 19250) RV L bakterie rodu IO 19250 (24 ± 3) h při (41,5 ± 1) C + 00025 Escherichia coli d 00012 částečná inhibice 100 kolonií na TA 30 Enterococcus faecalis d 00009 < 10 kolonií na TA Neselektivní tekuté a ředicí roztoky organismy Funkce Inkubace Kontrolní kmeny Čísla DRCM L anaerobní bakterie redukující sulfity (klostridie) IO 6461-1 (36 ± 1) C anaerobní atmosféra Clostridium perfringens 00007 b 00080 Escherichia coli d 00012 zákal (1 až 2) j černé zbarvení zákal (0 až 1) j bez černého zbarvení
Tabulka F.1 (pokračování) Neselektivní tekuté a ředicí roztoky organismy Funkce Inkubace Kontrolní kmeny Čísla fyziologický roztok roztok s peptonem fyziologický roztok s peptonem Ringerův roztok o čtvrtinové koncentraci L ředicí roztoky IO 8199 zkouší se vliv kontaktu s ředicím roztokem 45 min až 1 h při 20 C až 25 C Escherichia coli d taphylococcus aureus 00012 TA kvantitativní 00034 b ± 30 % počtu kolonií/t 0 (± 30 % výchozího počtu kolonií) 31 roztok fosfátového pufru elektivní izolační organismy Funkce Inkubace Kontrolní kmeny Čísla Campylobacter jejuni d Campylobacter coli 00156 b nebo 00005 00004 malé ploché nebo vypouklé kolonie s lesklým povrchem mccda bakterie rodu Campylobacter IO 17995 (41,5 ± 1) C mikroaerobní atmosféra nebo 00179 nebo 00090 taphylococcus aureus d 00032 nebo 00034 úplná nebo částečná inhibice (0 až 1) žádné charakteristické kolonie
organismy XLD bakterie rodu IO 19250 Funkce Inkubace (24 ± 3) h při (36 ± 2) C Tabulka F.1 (pokračování) elektivní izolační Kontrolní kmeny Typhimurium d, i Enteritidis d,i Čísla 00031 00030 růst nebo částečná inhibice (0 až 1) kolonie s černým středem a obklopené slabě průsvitnou načervenalou zónou v důsledku změny barvy žluté kolonie Enterococcus faecalis d 00009 Prostředí pro více účelů 32 organismy BPW k L ředicí roztok pro přípravu ředění při stanovení počtu všech mikroorganismů IO 6887 Funkce zkouší se vliv kontaktu s ředicím roztokem Inkubace 45 min až 1 h při 20 C až 25 C Kontrolní kmeny d taphylococcus aureus Čísla 00012 00034 TA kvantitativní ± 30 % počtu kolonií/t 0 (± 30 % výchozího počtu kolonií) půda pro předpomnožení při průkazu bakterií rodu IO 19250 (18 ± 2) h při (36 ± 1) C d,i 00031 Typhimurium d,i 00030 Enteritidis zákal (1 až 2) j
Tabulka F.1 (dokončení) pro stanovení počtu mikroorganismů organismy Funkce Inkubace Kontrolní kmeny Čísla BCYE počet kolonií IO 11731 a IO 11731-2 2 až 5 dní při (36 ± 2) C Legionella pneumophila b již ověřená 00107 šarže BCYE kvantitativní P R 0,7 kolonie v odstínech bílé, šedé, modré až fialové s hladkým okrajem a charakteristickým vzhledem mléčného skla TA l počet kolonií jak je uvedeno v postupu, kde se jako referenční půda používá TA 00179 00090 Clostridium perfringens 00007 00024 již ověřená šarže TA kvantitativní P R 0,7 kolonie charakteristické pro jednotlivé druhy Enterococcus faecalis 00087 33
Do tabulky E1 jsou zapracovány tyto opravy: elektivní pro stanovení počtu mikroorganismů půda mccda: u obou druhů r. Campylobacter bylo vypuštěno d, u čísla WDCM 00156 bylo doplněno b ; půda mccda: u kontrolního kmene E. coli bylo upraveno kritérium na úplná nebo částečná inhibice (0 až 1) a u kontrolního kmene. aureus na ; půda TC: byl vypuštěn řádek obsahující a číslo WDCM 00025. elektivní pomnožovací půda Bolton, : směsi kontrolních kmenů byly rozděleny do dvou oddělených buněk; půda ITC, : byla přidána nová směs kontrolních kmenů; půda PB : po čísle WDCM 00025 bylo přidáno b ; elektivní izolační půda mccda: u obou druhů r. Campylobacter bylo vypuštěno d, u čísla WDCM 00156 bylo doplněno b ; půda PEMBA, aspekt : po slovech bylo vypuštěno i ; Neselektivní izolační půda TYEA: bylo opraveno jméno a číslo WDCM na Listeria monocytogenes 4b WDCM 00021 b. pro stanovení počtu mikroorganismů půda TA: bylo vypuštěno O157:H7 WDCM 00014 (netoxinogenní kmen) ; půda DA: u kontrolního kmene Aspergillus brasiliensis byla doplněna specifikace takto: WDCM 00053 b. Do tabulky F1 jsou zapracovány tyto opravy: elektivní pro stanovení počtu mikroorganismů ve srovnání s neselektivní referenční půdou půda Colilert: byl upraven název na Colilert-18 a číslo WDCM kontrolního kmene bylo změněno z 00207 na 00024. elektivní pro stanovení počtu mikroorganismů ve srovnání s dříve akceptovanou šarží (pro použití ve zvláštních případech) půda Colilert: byl upraven název na Colilert-18 a číslo WDCM kontrolního kmene bylo změněno z 00207 na 00024; půda laktóza TTC: mezi kontrolními kmeny Enterococcus faecalis a včetně jejich čísel WDCM byla doplněna dělicí čára. elektivní pomnožovací půda Bolton/Preston, : směsi kontrolních kmenů byly rozděleny do dvou oddělených buněk. Neselektivní tekuté a ředicí roztoky fyziologický roztok: u kontrolního kmene taphylococcus aureus WDCM 00034 bylo doplněno b ; elektivní izolační půda mccda: u obou druhů r. Campylobacter bylo vypuštěno d, u čísla WDCM 00156 bylo doplněno b. Vypracování opravy normy Zpracovatel: Úřad pro technickou lizaci, metrologii a státní zkušebnictví, IČ 48135267, ve spolupráci s RNDr. Ljubou chlemmerovou, Cc. Pracovník Úřadu pro technickou lizaci, metrologii a státní zkušebnictví: Ing. Kateřina Hanzlová 34
Upozornění : Změny a doplňky, jakož i zprávy o nově vydaných normách jsou uveřejňovány ve Věstníku Úřadu pro technickou lizaci, metrologii a státní zkušebnictví. Vaše názory, podněty a připomínky týkající se technických norem a zájem o možnou účast v procesech technické lizace lze zaslat na e-mailovou adresu info@unmz.cz. ČN EN IO 11133 OPRAVA 1 Vydal Úřad pro technickou lizaci, metrologii a státní zkušebnictví, Praha Rok vydání 2015, 36 stran 96725 Cenová skupina 998 +!5J0JG3-jghcfh!