Rapid-VIDITEST C. difficile Ag (GDH)

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1 Rapid-VIDITEST C. difficile Ag (GDH) (Jednokrokový test pro kvalitativní detekci glutamát dehydrogenázy Clostridium difficile) Návod k použití soupravy Výrobce: VIDIA spol. s r.o., Nad Safinou II 365, Vestec, Jesenice u Prahy, Tel: , Fax: , Web: POUŽITÍ: Rapid-VIDITEST C. difficile Ag (GDH) je jednokrokový imunochromatografický test pro kvalitativní detekci glutamát dehydrogenázy Clostridium difficile ve vzorcích stolice pro diagnostiku infekcí způsobených C. difficile. ÚVOD: Clostridium difficile je anaerobní gram-pozitivní sporulující bakterie. Klíčovou vlastností umožňující přežívání bakterie C. difficile v organizmu pacienta a v prostředí je její schopnost tvořit spóry. C. difficile je přenášena fekálně-orální cestou. C. difficile je nejzávažnějším původcem průjmů a/nebo pseudomembranózní kolitidy spjatých s podáváním antibiotik u hospitalizovaných pacientů. Vyzrálá střevní bakteriální flóra u zdravého dospělého jedince je obvykle rezistentní ke kolonizaci bakterií C. difficile. Pokud dojde k narušení normální střevní flóry, tato rezistence se ztrácí. To znamená, že jakýkoliv faktor spojený s porušením normální střevní flóry zvyšuje riziko osídlení bakterií C. difficile po podávání antibiotik, hlavně těch se širokospektrálním účinkem (penicilíny, cefalosporíny a clindamycin). C. difficile může uvolňovat 2 vysokomolekulární toxiny, toxin A a toxin B, které jsou zodpovědné za klinickou manifestaci infekce od lehkého vodnatého průjmu až po fulminantní pseudomembranózní kolitidu, toxický megakolon a smrt. Clostridium difficile glutamát dehydrogenáza (GDH) je enzym produkovaný ve velkém množství toxigenními i netoxigenními kmeny a proto je vynikajícím markerem přítomnosti této bakterie. PRINCIP TESTU: Rapid-VIDITEST C. difficile Ag (GDH) je kvalitativní imunochromatografický test pro detekci bakterií GDH antigenu ve stolici. Na testovacích zónách membrány testu jsou navázány protilátky proti GDH antigenu.v průběhu testování vzorek reaguje s barevnými částicemi potaženými anti-gdh protilátkami, zasušenými na membráně v místě aplikace vzorku. Směs pak kapilárním efektem vzlíná vzhůru po membráně. V případě pozitivního výsledku je barevný konjugát zachycen specifickými protilátkami ve výsledkové zóně, což se projeví jako barevná linka. Směs pak vzlíná dále po membráně k imobilizovaným protilátkám v kontrolní zóně, kde se vždy na konci testu objeví zelená linka. Přítomnost zelené linky ověřuje: 1

2 1) že se použil dostatečný objem vzorku, 2) že došlo ke správné vzlínavosti vzorku, 3) slouží jako vnitřní kontrola reagencií. OBSAH SOUPRAVY: - testovací kazety/blistery - zkumavky na vzorky obsahující odběrovou tyčinku a ředicí roztok - návod k použití - certifikát kontroly balení POTŘEBNÝ MATERIÁL NEDODÁVANÝ SE SOUPRAVOU - nádoba na sběr vzorků - jednorázové rukavice - stopky SBĚR A PŘÍPRAVA VZORKŮ: Odeberte dostatečné množství vzorku stolice do čistých a suchých odběrových nádob (1 až 2 gramy stolice nebo 1 až 2 ml tekutého vzorku). Test by měl proběhnout co nejdříve po odebrání vzorku stolice, pokud to není možné, lze vzorky uchovávat 7 dní v chladničce (+2 až +8 C). V případě delšího skladování by se měly vzorky uchovávat zmrazené při -20 C. Před použitím nechte vzorky vytemperovat na laboratorní teplotu a důkladně promíchejte. Zpracování vzorků stolice a) Pro každý vzorek použijte vlastní odběrovou zkumavku. Odšroubujte víčko odběrové zkumavky s ředicím roztokem (1). b) Pomocí aplikační tyčinky na víčku odběrové zkumavky odeberte malé množství vzorku stolice (cca 250mg), (nejlépe z třech různých částí vzorku) (2). Vraťte víčko s tyčinkou do zkumavky, zašroubováním víčka odběrové zkumavky ponoříte aplikační tyčinku do ředicího roztoku. V případě tekutého vzorku napipetujte 250 μl vzorku do odběrové zkumavky. c) Důkladně promíchejte obsah zkumavky za účelem dobré homogenizace vzorku (3). 2

3 PRACOVNÍ POSTUP: Před testováním nechte kazetu, vzorek stolice a kontroly vytemperovat na laboratorní teplotu (+15 až +30 C). Neotvírejte sáček, dokud nejste připraveni provést test. Postup pro KAZETU (Card): 1. Znova protřepejte odběrovou zkumavku se vzorkem stolice za účelem dobré homogenizace vzorku. Uřízněte nebo odstřihněte špičku víčka zkumavky (obr. 4). 2. Těsně před použitím vyjměte kazetu Rapid-VIDITEST C. difficile Ag (GDH) z obalové folie a položte ji na vodorovnou podložku. Nedotýkejte se membrány v místě testovací zóny a zóny pro aplikaci vzorku. Pro každý vzorek a kontrolu použijte samostatnou odběrovou zkumavku a kazetu. 3. Do okénka označeného šipkou aplikujte z odběrové zkumavky přesně 4 kapky (100 μl) naředěného vzorku (obr. 5). 4. Po 10 minutách odečtěte výsledek. Postup pro Blister test: Pro provedení testu můžete zvolit postup označený A nebo B. A. Aplikace kapky vzorku z odběrové zkumavky na blister 1. Po vytemperování blisteru otevřete obalovou folii v označeném místě. 2. Znova protřepejte odběrovou zkumavku se vzorkem stolice za účelem dobré homogenizace vzorku. Uřízněte nebo ustřihněte konec špičky zkumavky. 3. Těsně před použitím vyjměte blister Rapid-VIDITEST C. difficile Ag (GDH) z obalové folie a položte ho na vodorovnou podložku. Nedotýkejte se membrány v místě testovací zóny a zóny pro aplikaci vzorku. Pro každý vzorek a kontrolu použijte samostatnou odběrovou zkumavku a blister. 3

4 4. Aplikujte přesně 5 kapek (150 μl) naředěného vzorku z odběrové zkumavky na bílý konec blisteru (zóna pro aplikaci vzorku sample region) (obr. 4). 5. Po 10 minutách odečtěte výsledek bez další manipulace s blisterem. B. Ponořením blisteru do zkumavky 1. Po vytemperování blisteru otevřete obalovou folii v označeném místě. 2. Znova protřepejte odběrovou zkumavku se vzorkem stolice za účelem dobré homogenizace vzorku. Uřízněte nebo ustřihněte konec špičky zkumavky. 3. Přeneste 5-10 kapek vzorku homogenizovaného v ředicím roztoku z odběrové zkumavky do čisté lahvičky nebo zkumavky. Ponořte testovací blister bílým koncem do zkumavky (obr. 5). Neponořujte blister hlouběji než po rysku vyznačenou pod bílými šipkami (sample region viz obr. 6). 4. Po 10 minutách odečtěte výsledek bez další manipulace s blisterem. INTERPRETACE VÝSLEDKU: KAZETA Vzorky se aplikují do oválného okénka označeného S (sample vzorek), výsledky se odečítají v obdélníkovém okénku vprostřed kazety označeném C (kontrolní zóna) a T (výsledková-test zóna). Zelená Červená Červená 4 Negativní Pozitivní Neplatný Neplatný

5 BLISTER Kontrolní zóna Výsledková zóna Zelená Červená Červená Zóna pro nanesení vzorku Pozitivní Negativní Neplatný Negativní: V kontrolní zóně C se objeví pouze jedna zelená linka. Výsledková zóna T zůstane čistá. Pozitivní: Kromě zelené linky v kontrolní zóně C se objeví také červená linka ve výsledkové zóně T. Neplatný: Test je neplatný, pokud se v kontrolní zóně C neobjeví zelená linka, a to bez ohledu na přítomnost červené linky ve výsledkové zóně T. Nejčastějšími příčinami selhání testu jsou: nedostatečný objem vzorku, nesprávný pracovní postup nebo poškození/stárnutí reagencií. Zkontrolujte pracovní postup a zopakujte test s novou testovací sadou. Pokud potíže přetrvávají, kontaktujte svého dodavatele. Poznámka k interpretaci výsledků: Intenzita červené barevné linky v místě označeném T závisí na koncentraci antigenů ve vzorku. Nicméně, tímto testem nelze množství antigenu kvantitativně stanovit a ani hodnotit vzestup nebo pokles koncentrace v průběhu onemocnění. PLATNOST TESTU: V testu je použit interní standard. Test je platný pouze v případě, když se v kontrolní zóně objeví zelená linka. Objevení se zelené linky v kontrolní zóně je vnitřní kontrolou testu a potvrzuje použití dostatečného objemu a správnou techniku provedení testu. 5

6 OČEKÁVANÉ VÝSLEDKY: Clostridium difficile je spojováno s % případů pseudomembranózní kolitidy, s 60-75% případů kolitidy související s podáváním antibiotik a s 35% případů průjmů, které souvisí s podáváním antibiotik. OMEZENÍ TESTU: 1. C. difficile Ag (GDH) test ukazuje jen přítomnost Clostridium difficile ve vzorku (kvalitativní detekce) a měl by být použit jen pro detekci Clostridium difficile ve vzorku stolice. Tento test nemůže být použit ani pro kvantitativní detekci ani pro určení míry zvyšování koncentrace antigenu. 2. Test musí být proveden do 2 hodin po otevření vzduchotěsného obalu. 3. Nadbytečné množství vzorku stolice může vést k nesprávnému výsledku (objevují se hnědé linky). 4. Některé vzorky stolice mohou způsobit snížení intenzity kontrolní zelené linky. 5. Test poskytuje pravděpodobnou diagnózu infekce Clostridium difficile. Potvrzení diagnózy může provést až lékař po zvážení klinického a laboratorního nálezu. 6. Pozitivní výsledek potvrzuje přítomnost Clostridium difficile-gdh ve vzorku stolice. Nicméně, tento výsledek může znamenat přítomnost toxigenních i netoxigenních kmenů. Po zjištění pozitivního výsledku by mělo navazovat rozlišení Clostridium difficile kmenů dalšími laboratorními metodami. ÚČINNOST TESTU: Citlivost a Specifita: Byla provedena studie se vzorky stolic od pacientů s průjmem. Výsledky z C. difficile Ag (GDH) byly porovnány s jinou komerční soupravou (C. DIFF QUIK CHEK Complete TechLab). C. difficile Ag (GDH) Card/Blister vykazuje > 99% citlivost a > 99% specifitu. Zkřížená reaktivita: Byly stanoveny zkřížené reakce Rapid-VIDITEST C. difficile Ag (GDH) testu. Nebyla nalezena žádná zkřížená reaktivita s běžnými střevními patogeny a dalšími organismy a látkami občasně se vyskytujícími ve stolici (H. pylori, Escherichia coli spp, Yersinia spp, Campylobacter spp., Salmonella spp., Shigella spp). SKLADOVÁNÍ A STABILITA: Skladujte v originálním obalu při teplotě +2 až +30 C. Test je stabilní do data expirace uvedeného na obalu. Nezmrazujte. 6

7 BEZPEČNOSTNÍ OPATŘENÍ: - pouze pro diagnostiku in vitro - nepoužívejte po uplynutí expirační doby - se vzorky manipulujte jako s potenciálně infekčním materiálem - odpad likvidujte jako biologický infekční odpad v souladu s příslušnými předpisy REFERENCE: 1. Wren, M.W.D, et al. Laboratory diagnosis of Clostridium difficile infection. An evaluation of tests for faecal toxin, glutamate dehydrogenase, lactoferrin and toxigenic culture in the diagnostic laboratory. British Journal of Biomedical Science, 66 (1), Vaishnavi, Ch., Clinical spectrum & pathogenesis of Clostridium difficile associated diseases. Indican J. Med. Res. 131, April 2010, pp POUTANEN, S. M. et al. Clostridium difficile-associated diarrhoea in adults, CMAJ, 171(1) July 2004, pp POUŽITÉ SYMBOLY: Určeno pro diagnostiku in vitro Datum expirace Číslo šarže (LOT) Výrobce Poslední revize tohoto návodu: 05/2012 7

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我 可 以 向 你 们 保 证 以 下 的 内 容 100% 真 实, 请 您 一 定 耐 心 看 完 从 医 15 年 来, 我 也 反 复 告 诉 病 人 这 些 事 实 但 是 没 有 人 愿 意 去 听, 更 没 有 人 愿 意 去 相 信 或 许, 我 们 的 同 胞 们 真 的 需 要 保 健 : 顶 尖 专 家 谈 癌 症 2014-03-22 权 健 3813 服 务 中 心 环 境 污 染 不 良 生 活 方 式 与 现 代 社 会 生 活 造 成 的 精 神 压 力 等 等 原 因, 使 得 我 国 癌 情 汹 涌, 人 们 也 日 益 变 得 谈 癌 色 变 最 新 数 据 显 示, 中 国 每 天 8550 人 成 为 癌 症 患 者 ; 中 国 癌 症 患 者 年 轻

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(Microsoft Word - 1012-2\256\325\260\310\267|\304\263\254\366\277\375.doc) 國 立 屏 北 高 級 中 學 101 學 年 度 第 2 學 期 第 2 次 校 務 會 議 紀 錄 壹 會 議 名 稱 :101 學 年 度 第 2 學 期 第 2 次 校 務 會 議 貳 時 間 :102 年 6 月 28 日 ( 星 期 五 ) 下 午 13 時 10 分 參 地 點 : 本 校 圖 書 館 四 樓 視 聽 會 議 室 肆 出 列 席 人 員 : 詳 如 簽 到 簿 伍 主

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得 依 法 召 集 股 東 臨 時 會 第 十 一 條 : 股 東 常 會 之 召 集 應 於 開 會 三 十 日 前, 股 東 臨 時 會 之 召 集 應 於 開 會 十 五 日 前, 將 開 會 日 期 地 點 及 召 集 事 由 通 知 各 股 東 並 公 告 之 第 十 二 條 : 本 公

得 依 法 召 集 股 東 臨 時 會 第 十 一 條 : 股 東 常 會 之 召 集 應 於 開 會 三 十 日 前, 股 東 臨 時 會 之 召 集 應 於 開 會 十 五 日 前, 將 開 會 日 期 地 點 及 召 集 事 由 通 知 各 股 東 並 公 告 之 第 十 二 條 : 本 公 旺 旺 友 聯 產 物 保 險 股 份 有 限 公 司 章 程 第 一 章 總 則 第 一 條 : 本 公 司 依 照 公 司 法 及 保 險 法 之 規 定 組 織 設 立, 定 名 為 旺 旺 友 聯 產 物 保 險 股 份 有 限 公 司 第 二 條 : 本 公 司 以 辦 理 產 物 保 險 業 務, 促 進 社 會 福 利 及 工 商 繁 榮 為 宗 旨 第 三 條 : 本 公 司 設 總

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同 時, 那 些 百 萬 富 翁 們 正 乘 坐 着 私 家 噴 射 機 駛 往 歐 洲, 甘 願 花 大 把 的 鈔 票 接 受 替 代 療 法 並 且 重 獲 了 健 康 替 代 療 法 總 是 很 靈 嗎? 不, 當 然 不 是 在 這 世 界 上 没 有 盡 善 盡 美 的 事 物 但 是 美 國 頂 尖 醫 生 談 癌 症 - 太 珍 貴 了!! 我 可 以 向 你 們 保 證 以 下 的 内 容 100% 真 實, 請 您 一 定 耐 心 看 完 從 醫 15 年 來, 我 也 反 覆 告 訴 病 人 這 些 事 實, 但 是 没 有 人 願 意 去 聽, 更 没 有 人 願 意 去 相 信 或 許, 我 們 的 同 胞 們 真 的 需 要 清 醒 了 說 的 直 白 一 點, 癌

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高校发展动态

高校发展动态 2010 NO.29 2010 No.4 ( 29 ) 20010-06-30 2010 No.4 28 ) [0] 2010 () 2010 04 ( 29 ) 2010 6 30 (0459)6819372-8602 E-mail 2010 20+20 60% 32 : 30 70 7700 3% 61 2010 No.4( 29 ) [1] 2010 T T 2010 No.4( 29 ) [2]

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目 录 内 容 摘 要...1 第 一 部 分 区 域 金 融 运 行 情 况... 3 一 各 地 区 银 行 业... 3 二 各 地 区 证 券 业... 12 三 各 地 区 保 险 业... 13 四 资 金 流 向 和 融 资 结 构... 15 五 金 融 改 革 创 新... 17

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一 敬 拜 诗 歌 二 灵 修 读 经 - 传 道 书 第 五 章 在 神 前 存 敬 畏 的 心 Ecc 5:1 你 到 神 的 殿 要 谨 慎 脚 步 ; 因 为 近 前 听, 胜 过 愚 昧 人 献 祭 ( 或 作 : 胜 过 献 愚 昧 人 的 祭 ), 他 们 本 不 知 道 所 做 的 第 一 九 三 天 2015-08-19 一 敬 拜 诗 歌 给 我 清 洁 的 心 二 灵 修 读 经 传 道 书 第 5 章 三 旧 约 行 程 约 伯 记 第 38-40 章 四 新 约 行 程 歌 罗 西 书 第 1 章 五 每 日 灵 粮 第 1 页 一 敬 拜 诗 歌 二 灵 修 读 经 - 传 道 书 第 五 章 在 神 前 存 敬 畏 的 心 Ecc 5:1 你 到 神 的 殿 要

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<B8BDB1EDD2BBA3BACDB3D2BBB6A8BCDBD2A9C6B7D7EEB8DFC1E3CADBBCDBB8F1B1ED2E786C73> 附 表 一 : 统 一 定 价 药 品 表 金 额 : 元 定 价 目 1 293 追 风 透 骨 片 48 片 追 风 透 骨 片 24 片 追 风 透 骨 片 24 片 ( 薄 膜 追 风 透 骨 片 48 片 ( 薄 膜 ( 瓶 ) 30.0 * ( 瓶 ) 15.4 ( 瓶 ) 16.9 ( 瓶 ) 33.0 追 风 透 骨 丸 水 蜜 丸 6g 袋 1.8 * 追 风 透 骨 丸 水 蜜

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