DISTRIBUCE RTUTI DO VYBRANÝCH TKÁNÍ KAPRA OBECNÉHO (CYPRINUS CARPIO) Petra Vičarová Mendelova univerzita v Brně Ústav chemie a biochemie
OBSAH Rtuť Experiment Výsledky Závěr - experimentální část (odběr vzorků, analýza vzorků) - srovnání dní i koncentrací
RTUŤ Snadno vstupuje do vodních organismů (biogeochemický cyklus) Prostupy do trofického řetězce: spalování fosilních paliv, metalurgie, průmyslové odpady Vysoce toxická (ADI 0,05 mg.kg -1 ) Průměrná hodnota NPM v rybách: 0,5 mg.kg -1 (1 mg.kg -1 ) NAŘÍZENÍ KOMISE (EU) č. 1881/2006; NAŘÍZENÍ KOMISE (EU) č. 420/2011 Speciace působení na lidský organismus: elementární rtuť - inhalace (poškození CNS) anorganická rtuť - nízká absorpce z GIT (ledviny) organická rtuť - snadná absorpce (mozek) 3 Biogeochemický cyklus
CÍL EXPERIMENTU Jaká je distribuce anorganické rtuti do tkání kapra obecného (Cyprinus carpio)? 4
EXPERIMENTÁLNÍ ČÁST Obohacení skleněných akvárií třemi různými koncentracemi rtuti (0,5 μg.l -1 ; 1,5 μg.l -1 ; 3,0 μg.l -1 ) + kontrola ve vodovodní vodě Udržování koncentrací po dobu 10 dní nasycení nádrží Nasazení ryb (kapří plůdek o hmotnosti 47,67 ± 4,61 g, lysec, plemeno M72, před zařazením do testu odchováván v RAS, umělý výtěr Vodňany) - nekrmeny Expozice 14 dní Odběry vzorků Kontrola koncentrace rtuti v jednotlivých akváriích (po 12 hodinách) + kontrola kvality vody (ph, teplota, vodivost, množství amoniaku, množství kyslíku) Akvária s rybami a různou koncentrací rtuti 5
ODBĚR VZORKŮ 0. den, 4. den, 9. den, 14. den Sledované tkáně: sval levý, sval pravý, kůže, šupiny, žlučový váček, mozek, oči, ledviny, slezina, žaberní lístky a játra Ukládány do polyethylenových sáčku / plastových zkumavek Uchovány při -50 C až po analýzu Celkem analyzováno 60 ryb + 5 ryb v 0. den 6 Odběr vzorků
ANALÝZA VZORKŮ Atomový absorpční spektrometr AMA 254 (Altec, Praha) Časový program : 60 s 150 s 45 s (sušení rozklad čekání) Navážka : 10 400 mg Vlnová délka: 253,6 nm Limit detekce: 0,1 µg.kg -1 Referenční materiál: DORM-4 (rybí proteinový homogenát) 7 Spektrometr AMA 254
Koncentrace celkové rtuti (mg.kg -1 ) VÝSLEDKY SROVNÁNÍ JEDNOTLIVÝCH DNÍ 6 Kontrola 5,5 0,5 µg.l-1 5 4,5 1,5 µg.l-1 4 3,0 µg.l-1 3,5 3 2,5 2 1,5 1 0,5 0 Den čtvrtý 8 p<0,05
Koncentrace celkové rtuti (mg.kg -1 ) VÝSLEDKY SROVNÁNÍ JEDNOTLIVÝCH DNÍ 12 11 Kontrola Den devátý 10 0,5 µg.l-1 9 1,5 µg.l-1 8 3,0 µg.l-1 7 6 5 4 3 2 1 0 9 p<0,05
Koncentrace celkové rtuti (mg.kg -1 ) VÝSLEDKY SROVNÁNÍ JEDNOTLIVÝCH DNÍ 28 26 Kontrola 24 0,5 µg.l-1 22 1,5 µg.l-1 20 18 3,0 µg.l-1 16 14 12 10 8 6 4 2 0 Den čtrnáctý 10 p<0,05
Koncentrace celkové rtuti (mg.kg -1 ) VÝSLEDKY SROVNÁNÍ JEDNOTLIVÝCH KONCENTRACÍ Kontrola 0,07 0,06 0,05 D4 D9 D14 0,04 0,03 0,02 0,01 0 11 p<0,05
Koncentrace celkové rtuti (mg.kg -1 ) VÝSLEDKY SROVNÁNÍ JEDNOTLIVÝCH KONCENTRACÍ 1,8 1,6 1,4 1,2 1 0,8 0,6 0,4 0,2 0 0,5 µg.l -1 D4 D9 D14 12 p<0,05
Koncentrace celkové rtuti (mg.kg -1 ) Výsledky srovnání jednotlivých koncentrací 1,5 µg.l -1 6 5,5 5 4,5 4 3,5 3 2,5 2 1,5 1 0,5 0 D4 D9 D14 13 p<0,05
Koncentrace celkové rtuti (mg.kg -1 ) Výsledky srovnání jednotlivých koncentrací 3,0 µg.l -1 27 24 21 18 15 12 9 6 3 0 D4 D9 D14 14 p<0,05
ZÁVĚR Ryby chované ve vodě bez přídavku rtuti (kontrola) nevykazovaly ve sledovaných orgánech v průběhu celé doby experimentu změny v obsahu rtuti. U koncentrace 0,5 µg.l -1 - postupné zvyšování koncentrace rtuti a to v ledvinách, slezině, žaberních lístcích, játrech, v levém i pravém svalu, a v žlučovém váčku. U koncentrace 1,5 µg.l -1 - postupné zvyšování u ledvin, sleziny, žaberních lístků, jater, levého i pravého svalu, mozku, očí a kůže. U koncentrace 3 µg.l -1 - postupné zvyšování koncentrace rtuti u ledvin, sleziny, žaberních lístků, jater, levého a pravého svalu, mozku a očí. U zbylých tkání kapra, buď ke zvyšování koncentrace rtuti nedocházelo, nebo rozdíly nebyly statistický významné. Lze říci, že se rtuť ukládala do detoxifikačních orgánů a tkání, které přišly do přímého styku s kontaminovanou vodou. 15
DĚKUJI ZA POZORNOST Poděkování: Práce byla financována z projektu CZ.1.07/2.2.00/28.0302: Inovace studijních programů AF a ZF MENDELU směřující k vytvoření mezioborové integrace. Tento projekt je spolufinancován z Evropského sociálního fondu a státního rozpočtu České republiky 16