TOXIKOLOGICKÉ ANALÝZY NÁVYKOVÝCH LÁTEK VE VLASECH A FORENZNÍ VYUŽITÍ

Transkript

1 TOXIKOLOGICKÉ ANALÝZY NÁVYKOVÝCH LÁTEK VE VLASECH A FORENZNÍ VYUŽITÍ M. Balíková*, L. Bauer, M. Bílek, O.Boubelík, I. Grossová, R. Matlach, A. Pilín, P. Strejc, A. Vlčková Ústav soudního lékařství a toxikologie 1. LF UK a VFN v Praze 2

2 Využití vzorku vlasů proč? Jedinečný materiál pro retrospektivní zkoumání expozice organismu noxám Dlouhodobé vázání cizorodých látek uvnitř vlasů v časové relaci, kdy se vyskytovaly v krvi Stabilní matrice nepodléhající rozkladu M. Balíková

3 Využití vzorku vlasů kdy? Diagnostika abuzu návykových látek Podezření na chronické expozice, otravy Postmortem toxikologie Psychomotorická spolehlivost, řidiči Kriminální souvislosti Sociální souvislosti, rozvody, opatrovnictví dětí TDM/dodržování terapie jen kvalitativně M. Balíková

4 Využití vzorku vlasů jak? Komplexní individuální přístup dle standardních pravidel od odběru vzorků po interpretaci nálezů Odběr a zpracování vzorku dle okolností, cíle dokazování Respektování fyziologie růstu vlasů Respektování mechanismů inkorporace nox do vlasů Kritické zhodnocení nálezů s ohledem na neznámé faktory vlivu M. Balíková

5 Anatomie a fyziologie vlasu Roste z váčku nástavce kůže Základna váčku 3 5 mm pod kožním povrchem Omýván 3 typy žláz Vyživován z krevního řečiště Obsahuje proteiny (keratin), melanin, tuky, minerály, vodu Struktura cylindrická (medulla, cortex, cuticle); Cortex kůra obsahuje pigment, keratinizované buňky tvořící vlákna svinutá k sobě M. Balíková

6 Mechanismy vstupu nox do vlasů Ideál: pasivní difuzí z krevní cirkulace u základny váčku Realita: vstup do vlasu v různých místech a v různém čase během cyklu růstu Z různých zdrojů: Z krve Z potu a mazu Z tkáňového depa Z vnějšího prostředí Během 3 fází růstu: Během formace vláken Po skončení formace Po opuštění kůže M. Balíková

7 Vstup nox do vlasů a ztráty (Pragst Balíková: CCA 2006) M. Balíková

8 Transport drog do vlasů ovlivňuje: Povaha individuelní biomembrány Krevní tok, koncentrační gradient Vazba na plazmatické proteiny Lipofilnost drogy (původní formy vs. metabolity) Ionizovatelnost drogy ph gradient (izoelektrický bod keratinizovaného vlasu ph 6) Afinita k melaninu (ph melanocytů 3-5) Velikost a geometrie molekuly drogy M. Balíková

9 Cyklus růstu vlasů Nerovnoměrná rychlost růstu jednotlivých vláken Nehomogenita stáří sousedních vláken v segmentu ANAGEN tvorba nových buněk na dně váčku, metabolická aktivita, fáze růstu (cca 85% vlasů) CATAGEN ustává dělení buněk, degenerace váčku TELOGEN odumřelý vlas, snadno vypadává (cca 15 % u člověka) Důsledek: Rozmytí zóny lokalizovaných nox podél pramene vlasů M. Balíková

10 Rychlost růstu vlasů u člověka Na hlavě v průměru 1 cm/měs (0.3 mm/den) Reálně 0,6 až 1,4 cm/měs. Záleží na: typu vlasů (síla, barva ) věku (vliv hormonů) pohlaví (vliv hormonů) anatomické místo: skalp, vousy, břicho, podpaží rasové, genetické rozdíly M. Balíková

11 Interpretaci v relaci k času dávek komplikuje: Nerovné odstřižení vlasů, posun vláken v prameni Nerovnoměrný růst vláken, podíl anagen/telogen Vstup nox nad povrchem kůže z potu a mazu, kontaminace distální části Vstup nox do vlasu z dřívějších deponovaných dávek ve tkáních, kontaminace proximální části Částečná podélná difuze uvnitř vlasu M. Balíková

12 Modely rozložení koncentrací podél vlasu po měsíční konzumaci drogy zhruba před rokem M. Balíková

13 Schéma kroků vlasové analýzy M. Balíková

14 Lokalizace drogy podél vlasu a příprava segmentů k analýze M. Balíková

15 Toxikologie postmortem Variabilní opiáty Mladá žena 23 let Balíková, Habrdová: JCB 2003 Vlasy: cca 30 cm barvené, zpracováno 6 x 1,5 cm. Důkaz střídavé chronické konzumace heroinu a BROWNu Krev: morfin 164 ng/ml, kodein 28 ng/ml, acetylkodein 24 ng/ml Pitevní diagnóza:udušení po aspiraci zvratků po aplikaci heroinu. Zjištěn otok plic, mozku. Chorobné změny: Počínající arterioskleróza srdce a věnčitých tepen M. Balíková

16 Toxikologie postmortem Abuzus heroinu v těhotenství Změna tolerance Žena 29 let, krátce po porodu, nalezena mrtvá v KFC Praha, u těla stříkačka, psaníčka s heroinem, na těle vpichy různého stáří. Soudní pitva. Vlasy 30 cm, segmenty 1cm + 4x4cm Nálezy: Krev: Morfin 1013 ng/ml, kodein 22 ng/ml Vlasy: klesající zastoupení opiátů s vývojem těhotenství Příčina smrti: aspirace zvratků, dechová suprese M. Balíková

17 ng/mg Toxikologie postmortem Chronická konzumace methamfetaminu Pitvané osoby bez dostatku anamnestických informací. Patologické pitevní nálezy. Příčiny??? Muž 31 let, chronický uživatel pervitinu min. 8 měsíců. Poslední dávka s přítelem, nevolnost, rychlé úmrtí. Posmrtné nálezy: Krev:methamfetamin 1500ng/ml Hypertrofie srdce, pokročilá srdeční myofibróza. Arteriosklerotické změny v myokardu a plicích. 160 čpp Beránková aj.: Forensic Sci Int Drugs in 2cm hair segments segment Methamphetamine Amphetamine Ephedrine Příčina úmrtí: Edém mozku s krvácením do mozečku M. Balíková

18 Toxikologie postmortem Předávkování směsí drog - buprenorfin Muž 38 let, nalezen mrtvý v parku, u těla zbytky léčiv, stříkačka. Ve stříkačce - stopy po methamfetaminu, heroinu, buprenorfinu Vlasy: tenký 7 cm pramen, zpracovány vcelku, cíleně opiáty a aminy. Vysoká hodnota MAMP v 7 cm prameni svědčí o chronické konzumaci. Příčina úmrtí: Dechová a srdeční nedostatečnost po požití OPL, léčiv. Akutní předávkování buprenorfinem po aplikaci i. v. Patologický nález: hnisavá bronchopneumonie, vleklá nedostatečnost srdce, dlouhodobé překrvení a ztukovění jater, sliznice žlučníku, nezhoubný cévní nádor jater. Jizvy po vpiších, defekt konečníku M. Balíková

19 Sexuální zneužívání mladistvého. Určení období podání methamfetaminu 13 letý chlapec - chovanec DD do listopadu, v prosinci 2006 přemístěn do jiného zařízení Vlasy: 8 cm dlouhé, odběr 16/1 Kritická událost září-listopad Segmenty 1cm, distální 2-3 cm Závěr: Negativní nález v proximálním SG1 svědčí o absenci konzumace drogy během prosince. Maximum konzumace odpovídá říjnu (1cm/měs). Při růstu 0,6 až 1,4 cm/měs širší období prokázané konzumace září až listopad. Podíl potu a mazu na inkorporaci v distálních segmentech nelze vyloučit. M. Balíková

20 Opatrovnictví dětí Kojící matka, batole a methamfetamin Zadavatel vyšetření otec dítěte, žije odděleně. Vlasy matky 30 cm dlouhé odbarvené. Zpracovány 2cm při kůži (odpovídá cca 2,5 měsícům před odběrem; 1cm/měs) Vlasy dítěte (16 měs) 7 cm dlouhé. Zpracovány vcelku jako pool. Nálezy: Matka: methamfetamin 2,8 ng/mg Dítě: methamfetamin 2,7 ng/mg Verdiktem opatrovnického soudu dítě svěřeno do péče otce M. Balíková

21 Opatrovnictví dětí rozvodové řízení a kokain Manžel podnikatel, agresivní záchvaty. Popírá užívání kokainu, vlasy si stále stříhá. V rodině malé dítě. Manželka opakovaně zadává vyšetření kokainu v chumáči vyhozených ostříhaných vlasů manžela (délka 5 mm). Uvažuje o rozvodu, pokud nenastane abstinence. M. Balíková

22 Fatální dopravní nehoda Řidič - chronický uživatel drog Žadatel muž 32 let,řidič po fatální dopravní nehodě střet s autem v protisměru. Hospitalizován, v moči na OKB pozitivní screening aminy a kanabinoidy. V trestním řízení přiznává chronický abuzus marihuany, popírá chronické užívání budivých aminů. Údajně 1 x šňupnul pervitin v sobotu, k nehodě došlo až v pondělí Vlasy: Odběr tj. za 2, 5 měs po nehodě. Délka vlasů 3,5 cm, vyšetřeny 2 x SG 1,7 cm. Nálezy: (předpoklad růstu 1cm/měs; 0,5cm kořínek vlasu zůstává pod kůží) Proximální SG 1: pervitin neprokázán. Odpovídá abstinenci po nehodě (zhruba 2 měsíce). Přípustné je i širší období +/- 1 měsíc. Distální SG 2: pervitin 0,15 ng/mg. Odpovídá konzumaci pervitinu před nehodou (zhruba 2 měsíce). M. Balíková

23 Závěry využití vlasových analýz Ideální požadavky na vlasové analýzy splňují tvrdé bazické drogy např. amfetaminy, kokain, opiáty Kanabinoidy ztížený přestup do vlasů, nižší koncentrace, potřeba vysoce citlivých metod Lze odhalit chronický alkoholismus - dokazování markrů alkoholismu ve vlasech esterů mastných kyselin a ethylglukuronidu. Posuzování pracovní spolehlivosti, opětovné vydání řidičských oprávnění Vlasy unikátní materiál k retrospektivnímu zkoumání, dokazování abstinence či konzumace drog v určitém období, relativní vzestup či pokles Neexistuje zobecnitelná korelace mezi koncentrací drog ve vlasech a dávkou nebo množstvím dávek individuální vztah M. Balíková

24 Více informací např. : Pragst F. et al.: Forensic Sci Rev 10/2 (1998) Pragst F., Balíková M. A.: Clin. Chim. Acta 370 (2006) Madea B., Musshof F, ed.: Haaranalytik-Technik und Interpretation für Medizin und Recht. Köln, Deutsche Ärzte Verlag, 2004 Děkuji vám za pozornost mbali@lf1.cuni.cz M. Balíková