GOECKERMANOVA METODA TERAPIE

Transkript

1 GOECKERMANOVA METODA TERAPIE PSORIÁZY: MODEL KOMBINOVANÉ EXPOZICE POLYCYKLICKÝM AROMATICKÝM UHLOVODÍKŮM A UV ZÁŘENÍ Málková Andrea, Borská Lenka, Andrýs Ctirad, Voříšek Viktor, Beránek Martin, Chmelařová Marcela, Palička Vladimír, Hamáková Květoslava, Kremláček Jan, Köhlerová Renata a Fiala Zdeněk Ústav hygieny a preventivního lékařství, Ústav patologické fyziologie, Ústav klinické imunologie a alergologie, Ústav klinické biochemie a diagnostiky, Ústav lékařské biochemie a Klinika nemocí kožních a pohlavních Univerzita Karlova Lékařská fakulta v Hradci Králové

2 PSORIÁZA Chronické, relabující a remitující autoimunitní zánětlivé onemocnění kůže Světová prevalence 2-3% Evropská prevalence 1-2%

3 GOECKERMANOVA TERAPIE (GT) Topická aplikace pasty obsahující 3-5% farmaceutického dehtu (FD) Farmaceutický dehet obsahuje okolo 30% PAU Souběžná expozice dehtu a UV záření (UVA a UVB) Rozsah expozice: FD jednotky až desítky procent povrchu těla (zatím max 83%) UV celotělové ozařování

4 RIZIKOVÉ FAKTORY TERAPIE PAU Mutagenní, karcinogenní a imunosupresivní účinky (IARC 1, 2A, 2B) UV záření (UVA a UVB) Mutagenní, karcinogenní a imunosupresivní účinky (IARC 1) Kombinace UV záření s PAU Synergické působení - významné zvýšení mutagenního/karcinogenního potenciálu expozice

5 VYBRANÉ PAU VE VZORCÍCH FARMACEUTICKÉHO DEHTU 16 NEJVÝZNAMNĚJŠÍCH PAU (DLE US EPA), GC-MS PAU IARC % hmotnosti (n=5) mg/g Benzo(a)pyren 1 0,3-1,0 0,008 Dibenz(a,h)antracen 2A 0,3-0,6 0,000 Naftalen 2B 10,2-11,8 3,286 Benz(a)antracen 2B 0,7-1,2 0,000 Chrysen 2B 0,3-0,9 0,028 Benzo(b)fluoranthen + Benzo(k)fluoranten 2B 0,3-0,7 0,000 Indeno(1,2,3-c,d)pyren 2B 0,2-0,5 0,000 Acenaften 3 0,2-0,4 0,104 Fluoren 3 1,8-2,1 0,299 Fenantren 3 4,8-7,1 2,520 Antracen 3 1,3-1,5 2,494 Fluoranten 3 2,2-2,9 0,413 Pyren 3 3,3-4,2 0,241 Benzo(g,h,i)perylen 3 0,2-0,4 0,000 Acenaftylen 0,5-1,2 0,153 Fiala Z et al. Dermatol Res Borska L et al. Oxidative Medicine and Cellular Longevity. 2014

6 A) LONGITUDINÁLNÍ EPIDEMIOLOGICKÁ STUDIE SOUHRN

7 Cíle studie: Hodnocení zdravotních přínosů a rizik GT a návrh preventivního opatření Studium genotoxické a imunologické odpovědi lidského organismu na kombinovanou dermální modelovou expozici dvěma závažným environmentálním škodlivinám (PAU a UV záření)

8 Metoda charakteristiky souboru Pacienti léčení Goeckermanovou terapií Vyšetřeno celkem 320 pacientů, 228 dospělých (muži, ženy) a 92 dětí (dívky, chlapci) Celková anamnéza a odběr vzorků moče a krve před a po terapii

9 Ukazatele dermální absorpce PAU: Hladiny 1-hydroxypyrenu, 1-hydroxyphenanthrenu, 2- hydroxyphenanthrenu, 3-hydroxyphenanthrenu a 4-hydroxyphenanthrenu v moči

10 Ukazatele imunotoxického rizika Vybrané ukazatele buněčné a humorální imunity Treg (specializovaná populace T lymfocytů a CD163 /monocyto-makrofágový receptor/) Toll-like receptor (TLR 2) Imunoglobuliny CRP IL-6 TNF alfa

11 Ukazatele mutagenity, genotoxicity a proapoptotického účinku: Sérové hladiny nukleosomů Sérové hladiny proteinu p53 Sérové hladiny benzo[a]pyren-7,8-diol-9,10-epoxid-dna adduktů Sérové hladiny cirkulujících protilátek proti benzo[a]pyren- 7,8-diol-9,10-epoxid-DNA adduktům Sérové hladiny oxidovaných bází 8-hydroxy-2'- deoxyguanosinu, 8-hydroxyguanosinu a 8-hydroxyguaninu (důsledek oxidativního poškození DNA a RNA) Analyzován vztah mezi individuální úrovní genetického poškození a genovým polymorfismem (CYP1A1, CYP1B1, EPHX3 a 4, GSTM, UGT) DNA zlomy v periferních lymfocytech (Comet Assay) Amesův test mutagenity moči Chromosomální aberace v periferních lymfocytech

12 B) TESTY GENOTOXICITY

13 CHROMOSOMÁLNÍ ABERACE Detekce strukturálních a numerických aberací Metodika Plná heparinizovaná krev, stimulace phytohaemagglutininem 48. h metaphase-arresting (kolchicin) 50. h zpracování a fixace Další den barvení a analýza Analýza Vizuální analýza 100 metafazických buněk Strukturální aberace (SAC), numerické aberace (NAC) a celkový počet aberovaných buněk (ABC) Rozdíl před X po léčbě GT AHEM. Metody biologického monitorování genotoxických účinků faktorů prostředí. Cytogenetická analýza periferních lymfocytů1/2007

14 CHROMOSOMÁLNÍ ABERACE (DOSPĚLÍ) Ref. ABC (%) SAC (%) NAC (%) Fiala 2006 Borská 2006 Borská 2010 Málková 2016 Borská 2003 Agova 2005 Šrám 2007 Sree Devi 2009 Sureshkumar 2013 Dospělí (n=23) Dospělí (n=30) Dospělí (n=20) Dospělí (n=29) ČR Bulharsko ČR Praha Indie Před GT 0,80 ± 0,70 0,45 ±0,60 0,35 ±0,49 Po GT 2,05 ± 1,47*** 1,20 ±1,01** 0,85 ± 0,81** 78 d po GT 1,05 ± 1,10 0,55 ± 1,00 0,50 ± 0,76 Před GT 0,97 ± 0,85 0,58 ± 0,77 0,39 ± 0,54 Po GT 2,36 ± 1,37*** 1,29 ± 1,12** 1,07 ± 0,85*** Před GT 1,0 (0,0-2,0) 1,0 (0,0-1,0) 0,0 (0,0-1,0) Po GT 3,0 (2,0-3,5)*** 1,0 (1,0-2,0)** 1,0(0,0-1,0)** Před GT 0,79 0,66 0,14 Po GT 2,03*** 1,69*** 0,35 Svářeči 2,70 ± 1,65*** 0,60 ± 0,58* 2,05 ± 1,53*** Dárci krve (kontr.) 0,55 ± 0,97 0,15 ± 0,65 0,30 ± 0,46 Městští policisté 2,55 ± 1,33** - - Úředníci 1,57 ± 0, Policisté 2,33 ± 1, Kontrola 1,94 ± 1, Dopravní policisté 6,48 ± 1, Kontrola 3,35 ± 1, Koksárna kuřáci 4,9 ± 1,7 - - Koksárna nekuř. 2,3 ± 1,1 - - Kontrola kuřáci 1,7 ± 1,0 - - Kontrola nekuř. 0,7 ± 0,7 - - Fiala Z et al. Arch Dermatol Res. 2006; Borska L et al. Physiol Res. 2006; Borska L et al. Int J Dermatol. 2010; Malkova A et al. Biomed Pap Med Fac Univ Palacky Olomouc Czech Repub. 2016; Borska L et al. Acta Medica (Hradec Kralove). 2003

15 CHROMOSOMÁLNÍ ABERACE (DĚTI) ABC (%) SAC (%) NAC (%) Borská 2009 Děti Před GT 1,21 ± 1,07 0,83 ± 0,72 0,38 ± 0,79 (n=42) Po GT 2,33 ± 1,07*** 1,47 ± 1,01*** 0,85 ± 0,84** Borská 2010 Před GT 1,0 (0,0-1,0) 1,0 (0,0-1,0) 0,0 (0,0-0,0) Děti Po GT 2,0 (2,0-3,0)*** 1,5 (1,0-2,0)*** 0,5 (0,0-1,0) (n=16) 81 d po GT 1,0 (0,0-2,0)** 1,0 (0,0-1,0)** 0,0 (0,0-0,0) Borská 2014 Děti Před GT 0,0 (0,0-0,0) 0,0 (0,0-0,0) 0,0 (0,0-0,0) (n=19) Po GT 1,0 (0,0-1,0)*** 1,0 (0,0-1,0)** 0,0 (0,0-1,0) Srb 1990 ČR Formaldehyd 2,55 ± 0, Řecko Kontrola 0,6 ± 0,9 - - Tsezou 1996 Vysoký obsah NO - 3 ve vodě 2,9 ± 3,1** - - Meta-analýza Merlo 2007 Bez expozice 1, Černá 2012 ČR Bez expozice 1, Druzhinin 2015 Rusko Kontrola 2,80 ± 1, Radon (>200 Bq/m 3 ) 4,38 ± 2,57*** - - Borska L. et al. Pediatr Dermatol Borska L. et al. Mutat Res Borska L. et al. Oxidative Medicine and Cellular Longevity. 2014

16 Detekce jedno- a dvou-řetezcových zlomů DNA, alkalilabilních míst a inkompletních reparací DNA (dle modifikace) Metodika Separace lymfocytů z plné krve a fixace v agarovém gelu Lýza, alkalické/neutrální ovlivnění, elektroforéza, neutralizace Barvení a analýza Analýza Automatická analýza (LUCIA G) 100 komet Procento DNA v ohonu COMET ASSAY Rozdíl před X po léčbě GT Malkova A et al. Biomed Pap Med Fac Univ Palacky Olomouc Czech Repub. 2016

17 COMET ASSAY Jednořetězcové zlomy (%tdna) Dvouřetězcové zlomy (%tdna) Málková 2016 Před GT 1,4 7,8 Po GT 2,5 20,7*** Lymfocyty in vitro Baumgartner 2012 BaP 1,13 µm - 11,36 BaP 11,3 µm - 11,08 BaP 25 µm - 15,23 Severní Čechy - Binková /1993 7,12-2/1994 5,35 - Hininger 2004 Bez expozice 4,08 - Kontrola - Zima 2,64 - Cebulska-Wasilewska 2005 Léto 2,62 - Policisté - Zima 2,42 - Léto 2,91 - Kontrola 4,06 - Cebulska-Wasilewska 2007 Policisté + řidiči - 3,86 autobusu - Malkova A et al. Biomed Pap Med Fac Univ Palacky Olomouc Czech Repub

18 ZÁVĚRY Pozitiva Vysoká účinnost GT léčby Významný pozitivní imunosupresivní efekt bez rizika systémové imunotoxicity Negativa Vysoká úroveň dermální absorpce PAU Významné mutagenní, genotoxické a proapoptotické účinky kombinované dermální expozice PAU a UV záření Doporučena modifikace terapie s dostatečnou účinností a sníženým rizikem

19 PODĚKOVÁNÍ MZd ČR. Rozvojový projekt Fakultní nemocnice v Hradci Králové č Karlova Univerzita v Praze, Lékařská fakulta v Hradci Králové, projekt PRVOUK P37/09, P37/10 a P37/01 Institucionální podpora výzkumu SVV

20 DĚKUJI ZA POZORNOST

21 REFERENCE Borska L, Fiala Z, Smejkalova J, Tejral J. Health risk of occupational exposure in welding processes I. Genotoxic risk. Acta Medica (Hradec Kralove). 2003: 46: Borska L, Fiala Z, Smejkalova J, Hamakova K, Kremlacek J. Possible genotoxic risk of combined exposure to pharmaceutical coal tar and UV-B radiation. Cent Eur J Public Health. 2004: 12 Suppl:S Fiala Z, Borska L, Pastorkova A, et al. Genotoxic effect of Goeckerman regimen of psoriasis. Arch Dermatol Res. 2006: 298: Borska L, Fiala Z, Krejsek J, et al. Cytogenetic and immunological changes after dermal exposure to polycyclic aromatic hydrocarbons and UV radiation. Physiol Res. 2006: 55: Borska L, Andrys C, Krejsek J, et al. Genotoxic hazard and cellular stress in pediatric patients treated for psoriasis with the Goeckerman regimen. Pediatr Dermatol. 2009: 26: Borska L, Smejkalova J, Cerna M, et al. Urinary mutagenicity and genotoxic risk in children with psoriasis after therapeutic exposure to polycyclic aromatic hydrocarbons and ultraviolet radiation. Mutat Res. 2010: 696: Borska L, Andrys C, Krejsek J, et al. Genotoxic and apoptotic effects of Goeckerman therapy for psoriasis. Int J Dermatol. 2010: 49: Borska L, Andrys C, Krejsek J, et al. Oxidative Damage to Nucleic Acids and Benzo(a)pyrene- 7,8-diol-9,10-epoxide-DNA Adducts and Chromosomal Aberration in Children with Psoriasis Repeatedly Exposed to Crude Coal Tar Ointment and UV Radiation. Oxidative Medicine and Cellular Longevity. 2014: 2014:10. Borska L, Andrys C, Krejsek J, et al. Influence of dermal exposure to ultraviolet radiation and coal tar (polycyclic aromatic hydrocarbons) on the skin aging process. J Dermatol Sci. 2016: 81: Malkova A, Kohlerova R, Fiala Z, Hamakova K, Selke-Krulichova I, Borska L. Genotoxic changes in peripheral lymphocytes after therapeutic exposure to crude coal tar and ultraviolet radiation. Biomed Pap Med Fac Univ Palacky Olomouc Czech Repub

22 REFERENCE Agova S, Groseva D, Panev T, Popov T, Toncheva DH, V. Effect of Environmental Exposure to PAHs on Somatic Chromosomes. Turk J Med Sci. 2005: 35: Baumgartner A, Kurzawa-Zegota M, Laubenthal J, Cemeli E, Anderson D. Comet-assay parameters as rapid biomarkers of exposure to dietary/environmental compounds An in vitro feasibility study on spermatozoa and lymphocytes. Mutation Research/Genetic Toxicology and Environmental Mutagenesis. 2012: 743: Binková B, Lewtas J, Mísková I, et al. Biomarker studies in northern Bohemia. Environmental Health Perspectives. 1996: 104: Campo L, Rossella F, Fustinoni S. Development of a gas chromatography/mass spectrometry method to quantify several urinary monohydroxy metabolites of polycyclic aromatic hydrocarbons in occupationally exposed subjects. J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci. 2008: 875: Carstensen U, Yang K, Levin JO, et al. Genotoxic exposures of potroom workers. Scand J Work Environ Health. 1999: 25: Cebulska-Wasilewska A, Pawlyk I, Panek A, et al. Exposure to environmental polycyclic aromatic hydrocarbons: influences on cellular susceptibility to DNA damage (sampling Kosice and Sofia). Mutat Res. 2007: 620: Cebulska-Wasilewska A, Wiechec A, Panek A, Binkova B, Sram RJ, Farmer PB. Influence of environmental exposure to PAHs on the susceptibility of lymphocytes to DNA-damage induction and on their repair capacity. Mutat Res. 2005: 588: Cerna M, Krskova A, Cejchanova M, Spevackova V. Human biomonitoring in the Czech Republic: an overview. Int J Hyg Environ Health. 2012: 215: De Meo MP, Dumenil G, Botta AH, Laget M, Zabaloueff V, Mathias A. Urine mutagenicity of steel workers exposed to coke oven emissions. Carcinogenesis. 1987: 8:

23 REFERENCE Druzhinin VG, Sinitsky MY, Larionov AV, Volobaev VP, Minina VI, Golovina TA. Assessing the level of chromosome aberrations in peripheral blood lymphocytes in long-term resident children under conditions of high exposure to radon and its decay products. Mutagenesis. 2015: 30: Gundel J, Mannschreck C, Buttner K, Ewers U, Angerer J. Urinary levels of 1-hydroxypyrene, 1-, 2-, 3-, and 4-hydroxyphenanthrene in females living in an industrial area of Germany. Arch Environ Contam Toxicol. 1996: 31: Heudorf U, Angerer J. Urinary monohydroxylated phenanthrenes and hydroxypyrene--the effects of smoking habits and changes induced by smoking on monooxygenase-mediated metabolism. Int Arch Occup Environ Health. 2001: 74: Hininger I, Chollat-Namy A, Sauvaigo S, et al. Assessment of DNA damage by comet assay on frozen total blood: method and evaluation in smokers and non-smokers. Mutation Research/Genetic Toxicology and Environmental Mutagenesis. 2004: 558: Huang W, Caudill SP, Grainger J, Needham LL, Patterson DG, Jr. Levels of 1-hydroxypyrene and other monohydroxy polycyclic aromatic hydrocarbons in children: a study based on U.S. reference range values. Toxicol Lett. 2006: 163: Huang W, Grainger J, Patterson DG, Jr., et al. Comparison of 1-hydroxypyrene exposure in the US population with that in occupational exposure studies. Int Arch Occup Environ Health. 2004: 77: Chao MR, Wang CJ, Wu MT, et al. Repeated measurements of urinary methylated/oxidative DNA lesions, acute toxicity, and mutagenicity in coke oven workers. Cancer Epidemiol Biomarkers Prev. 2008: 17: Choosong T, Phakthongsuk P, Tekasakul S, Tekasakul P. Urinary 1-hydroxypyrene levels in workers exposed to polycyclic aromatic hydrocarbon from rubber wood burning. Saf Health Work. 2014: 5: Kuljukka-Rabb T, Nylund L, Vaaranrinta R, et al. The effect of relevant genotypes on PAH exposure-related biomarkers. J Expo Anal Environ Epidemiol. 2002: 12:81-91.

24 REFERENCE Kuo CT, Chen HW, Chen JL. Determination of 1-hydroxypyrene in children urine using columnswitching liquid chromatography and fluorescence detection. J Chromatogr B Analyt Technol Biomed Life Sci. 2004: 805: Merlo DF, Ceppi M, Stagi E, Bocchini V, Sram RJ, Rössner P. Baseline chromosome aberrations in children. Toxicology Letters. 2007: 172: Mori T, Yoshinaga J, Suzuki K, et al. Exposure to polycyclic aromatic hydrocarbons, arsenic and environmental tobacco smoke, nutrient intake, and oxidative stress in Japanese preschool children. Sci Total Environ. 2011: 409: Poyen D, De Meo MP, Botta A, Gouvernet J, Dumenil G. Handling of cytostatic drugs and urine mutagenesis. Int Arch Occup Environ Health. 1988: 61: Sram RJ, Beskid O, Rossnerova A, et al. Environmental exposure to carcinogenic polycyclic aromatic hydrocarbons--the interpretation of cytogenetic analysis by FISH. Toxicol Lett. 2007: 172: Srb,V.,Rossner,P.,Zudova, Z., et al. Effects of formaldehyde and toluene on some cytogenetic indicators of the Prentices. Cs. Hyg. 1990: 35: Sree Devi V, Durga Rao V, Hara Gopal VV, et al. Cytogenetic evaluation of traffic policemen occupationally exposed to vehicular exhaust. Indian J Med Res. 2009: 130: Sureshkumar S, Balachandar V, Devi SM, et al. Estimation of cytogenetic risk among coke oven workers exposed to polycyclic aromatic hydrocarbons. Acta Biochim Pol. 2013: 60: Tsezou A, Kitsiou-Tzeli S, Galla A, et al. High nitrate content in drinking water: cytogenetic effects in exposed children. Arch Environ Health. 1996: 51: Wang Z, Zheng Y, Zhao B, et al. Human metabolic responses to chronic environmental polycyclic aromatic hydrocarbon exposure by a metabolomic approach. J Proteome Res. 2015: 14: Yamano Y, Hara K, Ichiba M, Hanaoka T, Pan G, Nakadate T. Urinary 1-hydroxypyrene as a comprehensive carcinogenic biomarker of exposure to polycyclic aromatic hydrocarbons: a crosssectional study of coke oven workers in China. Int Arch Occup Environ Health. 2014: 87:

25 ÚVOD RIZIKOVÉ FAKTORY GT Pacient 1,8m 2, 50% psoriáza, expozice 12 hod 3% dehtová pasta 10,3 mg 16 vybraných PAU 8,64 µg prokázaných a 3,58 mg pravděpodobných karcinogenů 5% dehtová pasta 17,2 mg 16 vybraných PAU 14,4 µg prokázaných a 5,97 mg pravděpodobných karcinogenů Borska L et al. Oxidative Medicine and Cellular Longevity Borska L et al. J Dermatol Sci

26 VÝSLEDKY A DISKUZE DETEKCE METABOLITŮ PAU (DOSPĚLÍ) Fiala 2006 Borská 2016 Carstensen 1999 Kuljukka-Rabb 2002 Gao OHP (µmol/mol C) Před GT 0,25 (0,16-0,83) Střed 6,52 (4,51-16,94) Po GT 4,80 (3,99-12,02) Po 1. aplikaci GT 1,82 (10,7-3,03) Po GT 4,64 (3,08-5,88) Hliníkárna, Švédsko Kontrola před prací 0,11 (0,02-0,99) Kontrola po práci 0,13 (0,06-0,75) Exponovaná skupina před prací 3,43 (0,07-26,6) Exponovaná skupina po práci 4,31 (0,09-17,7) Čína venkov 0,27 Čína koksárna 3,44 Čína kontrola 0,55 ± 0,28 Čína koksárna 9,36 ± 2,14 Fiala Z et al. Arch Dermatol Res Borska L et al. J Dermatol Sci

27 VÝSLEDKY A DISKUZE DETEKCE METABOLITŮ PAU (DOSPĚLÍ) Fiala 2006 Gündel 2000 Heudorf 2001 Campo 2008 Yamano OHPhe (µmol/mol C) 2-OHPhe (µmol/mol C) 3-OHPhe (µmol/mol C) 4-OHPhe (µmol/mol C) Před GT 0,19 (0,10-0,52) 0,12 (0,05-0,36) 0,23 (0,16-0,98) 0,08 (0,05-0,10) Střed 4,16 (3,00-10,05) 2,56 (1,09-7,20) 5,23 (2,07-12,85) 0,39 (0,36-0,78) Po GT 3,69 (1,45-6,99) 1,65 (0,67-2,90) 4,51 (2,75-9,95) 0,27 (0,21-0,67) Výroba ohnivzdorných materiálů 0,98 0,83 1,14 0,16 Německo Nekuřáci 0,23 0,14 0,16 0,03 Kuřáci 0,23 0,16 0,25 0,03 Itálie Koksárny 8,84 4,19 9,19 0,67 Čína koksárna 5,90-4,26 - Čína učitelé (kontr.) 1,26-0,78 - Fiala Z et al. Arch Dermatol Res

28 VÝSLEDKY A DISKUZE DETEKCE METABOLITŮ PAU (DĚTI) 1-OHP (µg/g C) 1-OHPhe (µg/g C) 2-OHPhe (µg/g C) 3-OHPhe (µg/g C) 4-OHPhe (µg/g C) Borská 2010 Wang 2015 Kuo 2004 Huang 2004 Huang 2006 Mori 2011 Před GT 0,25 (0,13-0,35) 0,07 (0,06-0,12) 0,06 (0,04-0,07) 0,07 (0,04-0,07) 0,05 (0,04-0,07) Po GT 7,64 (2,26-24,75) 4,74 (1,53-9,46) 1,70 (0,34-2,68) 2,28 (0,86-5,12) 0,33 (0,09-0,81) Čína 2km koksovna 2,00 3,5 1,1 2,5 0,31 Čína kontrola 1,25 1,9 0,8 1,6 0,22 Tchaj-wan Město Petrochem. 0,156 prům Venkov 0, US 6-11 let 0, US let 0, US 6-11 let 0, US let 0, Tokio 3-6 let 0, Borska L et al. Mutat Res

29 AMESŮV TEST Detekce karcinogenního a mutagenního potenciálu Metodika Moč, inkubace s β-glukuronidázou-arylsulfatázou a extrakce na pevné fázi S. typhimurium TA98, YG1041 S či bez metabolické aktivace s S9 frakcí Analýza Počet revertantů/mg kreatininu AHEM. Standardní operační postupy pro biologické monitorování genotoxických účinků faktorů prostředí 3/2003.

30 AMESŮV TEST Fiala 2006 Borská 2010 De Meo 1987 Poyen 1988 Chao 2008 TA98+S9 YG1041-S9 YG1041+S9 ** p<0,01; *** p<0,001 (rev/mg kreatininu) Před GT 2,66 ± 4,37 5,98 ± 6,18 16,49 ± 17,32 Dospělí (n=23) Uprostřed GT 6,99 ± 6,13** 33,79 ± 27,46*** 126,10 ± 91,02*** Po GT 8,27 ± 8,54** 41,00 ± 42,66*** 135,30 ± 122,39*** Děti (n=16) Ocelárna Neexponovaní Před GT 0,00 (0,00-0,00) 0,00 (0,00-2,30) 11,15 (8,45-14,30) Po GT 9,60 (3,80-19,50)** 45,60 (8,55-61,05)** 117,65 (47,05-196,80)*** Kuřáci 8,62 ± 6, Nekuřáci 1,1 ± 0, Kuřáci 5,07 ± 3, Nekuřáci 0,47 ± 0, Dospělí (n=37) Cytostatika 7,23 ± 6,74 Koksárna Tchaj-wan Fiala Z et al. Arch Dermatol Res Borska L et al. Mutat Res Vysoce exponovaní 55 ± 49,0 - - Nízce exponovaní 35,5 ± 22,9 - -