Praktické cvičení č. 1.

Transkript

1 Praktické cvičení č. 1.

2 Cvičení Všeobecné pokyny ke cvičení, zápočtu a zkoušce Bezpečnost práce 2. Mikroskopie - mikroskop a mikroskopická technika - převzetí pracovních pomůcek - pozorování trvalého preparátu a) příčný řez dřevem Fraxinus excelsior L. (jasan ztepilý) - pozorování dočasného preparátu b) nativní preparát Saccharomyces cerevisiae - kvasinka pivní pekařské droždí, přímé pozorování v kapce vody c) vitální barvení preparátu Saccharomyces cerevisiae 0,5 % roztokem metylenové modři d) nativní preparát Saccharomyces ellipsoideus kvasinka vinná

3 Pomůcky: nelinkovaný A4 sešit, tužka, propiska, pastelky (alespoň červená, zelená a hnědá), guma, žiletka, nechlupatící hadřík Protokol: Datum, zadání, poznámky k výkladu, vypracování Zápočet: Protokoly, 80 % docházka (cvičení cévní svazky, kořen, stonek, list povinné), praktická znalost Zkouška: Zápočet Znalost teoretická ze cvičení, přednášek, literatury Literatura: Procházka, S. a kol. (1998): Botanika, morfologie a fyziologie rostlin. MZLU Brno, 242 s. Kolařík, J. et al. (2005): Péče o dřeviny rostoucí mimo les II., ČSOP Vlašim, 720 s.

4 Příprava dočasného preparátu Pracovní postup: - zhotovení mikroskopického řezu přesně orientovaného - tloušťka 1-2 buněčné vrstvy Orientace řezu: příčná podélná (=transverzální) a/ radiální prochází středem b/ tangenciální mimo střed Zalití řezu: pokládání krycího sklíčka pomocí preparační jehly Krycí sklíčko Podložní sklíčko Řez v kapce vody Preparační jehla

5 Pravidla: - podložní a krycí sklíčka musí být čistá a suchá - přebytek vody v preparátu odsát filtračním papírem přiložením ke hraně krycího sklíčka, voda nesmí být na svrchní straně krycího sklíčka - nedostatek vody v preparátu ke kraji krycího sklíčka přikápnout vodu Práce s mikroskopem - dbáme na správné osvětlení seřídíme nastavením osvětlovací lampy, zrcátkem, kondenzorem, clonou, filtrem - preparát nejprve sledujeme při nejmenším zvětšení, potom nastavíme silnější objektiv - makrošroubem snížíme tubus, sledujeme jak se čočka objektivu blíží ke krycímu sklíčku, zvedáním tubusu potom zaostříme a doostříme mikrošroubem - dbát na to, aby pracovní stolek mikroskopu a optické části byly suché a nepolité chemikáliemi používanými k barvení preparátů! Vždy důkladně očistit!

6 Mikroskop: Části mechanické tubus, pracovní stolek (7) s úchytkami a posunem preparátu posun vertikálně makrošroubem (5), mikrošroubem (6), stativ (rukojeť a podkova), posun kondenzoru, regulace osvětlení (3), clona (4) Části optické okulár (1) - výměna vysunutím, objektiv (2) - výměna otočením revolverového měniče, kondenzor, modrý filtr, zrcátko

7 Příčný řez dřevem Fraxinus excelsior L. (jasan ztepilý) - pozorování trvalého preparátu Stavba dřeva kruhovitě pórovitá hranice letokruhu letní dřevo jarní dřevo (velké cévy uspořádané do kruhu) dřeňové paprsky letokruh

8 Příčný řez dřevem Fraxinus excelsior L. (jasan ztepilý) - pozorování trvalého preparátu Stavba dřeva kruhovitě pórovitá dřeňové paprsky hranice letokruhu letní dřevo jarní dřevo (velké cévy uspořádané do kruhu) letokruh dřeňové paprsky

9 Zhotovení nativního preparátu Saccharomyces cerevisiae - kvasinka pivní a přímé pozorování v kapce vody Na podložní sklo dáme do kapky vody kapku kvasnic smíchaných s vodou a trochou cukru. Zakryjeme krycím sklem a budeme sledovat pod mikroskopem při malém a velkém zvětšení: Kvasinky jsou jednobuněčné, oválné organismy. Rozmnožují se pučením (vegetativní rozmnožování). V preparátu probíhá kvašení, které se projevuje unikáním CO 2 (bublinky) C 6 H 12 O 6 -> 2C 2 H 5 OH + CO ,4kJ

10 Barvení preparátu Saccharomyces cerevisiae (vitální barvení) - přikápneme k hraně krycího skla kapku 0,5 % roztoku methylenové modři a prosajeme filtračním papírem. Výsledné zjištění: Mrtvé buňky budou tmavě modře zbarvené, živé buňky budou nezbarvené.

11 Saccharomyces ellipsoideus kvasinka vinná kvasinka rafid