Činidlo pro test OXIDÁZA (kat. č stanovení) OFtest (kat. č.: stanovení)

Transkript

1 -apid 4 CZ Kat. č.: ro mikrobiologii ouprava -apid 4 je určena pro rychlou identifikaci významných druhů střevních bakterií z čeledi nterobacteriaceae během 4 hodin inkubace. ouprava umožňuje provést identifikaci čtyřiceti kmenů, pomocí 4 biochemických testů. esty jsou umístěny v jamkách mikrotitrační destičky, vždy tři řady po osmi jamkách obsahují testy pro identifikaci jednoho kmene. ouprava -apid 4 0 mikrotitračních destiček (každá pro identifikaci 4 kmenů) se sušidlem obsahuje: ávod na použití s diferenciační tabulkou Barevná škála pro soupravu -apid 4 40 formulářů pro záznam výsledků 0 sáčků pro inkubaci kladovací sáček (na uložení nespotřebované destičky), ks Víčko kladování, exspirace: -apid 4 je třeba skladovat při teplotě (+ až +8) C. xspirace je vyznačena na každém balení. Doporučený pracovní postup pro -apid 4 otřeby pro práci se soupravou Činidlo pro test ID (kat. č stanovení) -apid 4, které nejsou Činidlo pro test (kat. č stanovení) součástí soupravy: Činidlo pro test CI (kat. č stanovení) Činidlo pro test FFÁZ (kat. č stanovení) arafinový olej sterilizovaný (kat. č stanovení) etriho misky s kultivačním médiem Zkumavky (00 x 5) mm s ml sterilního fyziologického roztoku řístroj Densi-a-eter II, kat. č utomatická mikropipeta 0, ml, sterilní špičky ermostat 7 C Běžné laboratorní mikrobiologické vybavení (kličky, popisovače, kahan) otřeby pro práci s doplňkovými testy, které nejsou součástí soupravy: XItest (kat. č stanovení) otřebné identifikační pomůcky, které nejsou součástí soupravy: Činidlo pro test XIDÁZ (kat. č stanovení) Ftest (kat. č.: stanovení) Diagnostický seznam pro -apid 4 (kat. č ) nebo Identifikační program W pozornění: ouprava je určena pouze k profesionálnímu použití Dodržujte zásady pro práci s infekčním materiálem! Izolace kultur: Izolace kultur se provádí konvenční bakteriologickou technikou na médiích, doporučovaných pro enterobakterie. ro potvrzení příslušnosti ke střevním bakteriím proveďte test na detekci cytochromoxidázy (detekční proužek XItest), případně test na fermentaci glukózy (F test). říprava inokula: Z čisté 4 h kultury připravte ve fyziologickém roztoku suspenzi. uspenzi dobře homogenizujte. Zákal suspenze musí odpovídat. stupni cfarlandovy zákalové stupnice. ředevším slabší suspenze může vést k falešně negativním reakcím. věření čistoty inokula: říprava destičky -apid 4: V případě, že chcete ověřit čistotu inokula, proveďte stejnou kličkou jakou jste připravili suspenzi křížový roztěr. Inkubujte při 7 C. Čistotu kultury posuzujte po 4 hod. tevřete aluminiový sáček odstřihnutím těsně vedle sváru a vyjměte destičku. omocí skalpelu odřízněte příslušný počet řad (stripů) destičky, odpovídající počtu testovaných kmenů ( řady, tj. x8 testů, pro identifikaci jednoho kmene). Vyříznuté řady vyjměte z panelu, sejměte ochrannou l fólii, řady umístěte do připraveného prázdného rámečku. V případě, že se soupravou IK pracujete poprvé a prázdný rámeček nemáte k dispozici, použijte rámeček první destičky. evyužité stripy první destičky pak uložte ve skladovacím sáčku volně. Zaznamenejte čísla vyšetřovaných kultur na příslušné stripy. Zbytek nepoužité destičky se sušidlem vložte do přiloženého l sáčku na uložení nezužitkované destičky a uložte do chladničky pro další použití; dbejte na to, aby destička byla chráněna před vlhkostí. Doporučujeme destičku po prvém použití spotřebovat do 4 týdnů. Inokulace: Důkladně homogenizujte bakteriální suspenzi ve fyziologickém roztoku. Inokulujte 0, ml suspenze do všech jamek příslušného trojstripu destičky. arafinovým olejem zakapejte: jamky H,, F,, prvého řádku (testy ID,,, ) kapky parafinového oleje, jamky prvého řádku (test ) 4 kapky parafinového oleje.

2 oznámka: každou sérií neznámých kmenů a při použití nové šarže destiček -apid 4 naočkujte současně kontrolní kmeny pro ověření barevného vyjádření pozitivních a negativních reakcí. oznámka: Víčko destičky je potisknuto zkratkami testů a symboly: (zakapat parafínovým olejem) a (přidat činidlo). V případě, že víčko v průběhu práce používáte na přikrytí destičky, před použitím jeho vnitřní stranu otřete ethanolem. Inkubace: Vložte rámeček destičky s naočkovanými řadami do inkubačního sáčku. tevřený konec sáčku zahněte pod destičku, aby nedošlo k vysychání inokula. Vložte destičku -apidu 4 do termostatu, nastaveného na teplotu (5 7) C, a inkubujte po dobu 4 hodin. Hodnocení: a destičce -apidu 4 zakapejte činidly jamky:. řada, jamka H (test Indol) kapky činidla pro ID,. řada, jamka H (test ) kapka činidla pro,. řada, jamka H (test cetoin) po kapce činidla pro V I a V II,. řada, jamka (test Fenylalanin) kapka činidla pro H. Destičku nechejte inkubovat 0 minut při teplotě (5 7) C pro vývoj barevných reakcí. o uplynutí této doby odečtěte všechny testy -apidu 4 a výsledky reakcí zaznamenejte do formuláře pro záznam výsledků. oznámka: ro barevné vyjádření testu Fenylalanin se používá Činidlo pro test FFÁZ! -apid 4 obsahuje modifikaci testu Fenylalanin, poskytující po přidání činidla stabilní zbarvení, a umožňuje tak odečítat reakci fenylalaninu společně s ostatními testy. ro hodnocení barevných reakcí použijte Barevnou škálu pro soupravu -apid 4, tabulku Interpretace reakcí v návodu nebo se orientujte podle barevných reakcí kontrolních kmenů. Identifikace: Identifikaci proveďte pomocí Identifikační tabulky nebo pomocí Diagnostického seznamu pro soupravu -apid 4, ev. pomocí identifikačního programu. ři identifikaci posuzujte kulturu komplexně, vemte v úvahu původ izolátu, charakter kolonií, pigmentaci, mikroskopii, ev. další znaky. Identifikaci salmonel a shigel potvrďte sérologicky. V případě neúspěšné identifikace opakujte -apid 4, případně proveďte identifikaci pomocí soupravy test 4. oznámka: ro identifikaci pomocí diagnostického seznamu umožňuje formulář pro záznam výsledků snadno vytvořit tzv. profil, tj. číselný kód, podle nějž lze vyhledat výsledek identifikace v seznamu; postup při tvorbě profilu je popsán přímo v diagnostickém seznamu. ikvidace použitého materiálu: o použití vložte destičku do nádoby pro infekční materiál a autoklávujte nebo zničte spálením. rázdné papírové obaly se předají do sběru k recyklaci. ejčastější možné příčiny míšená nebo kontaminovaná kultura. neúspěchu při identifikaci: oužití inokula malé hustoty nebo malého objemu. Inokulum bylo rozstříknuto i do sousední řady, připravené pro další testovanou kulturu. říslušné testy nebyly převrstveny parafinovým olejem. ři hodnocení bylo činidlo vkápnuto do sousední řady. edodržení některého bodu z doporučeného pracovního postupu. ůže se jednat o atypický kmen nebo zástupce druhu nebo příbuzného rodu, který není uveden v Identifikační tabulce. chrana zdraví: Vlastnosti soupravy: Kontrola kvality testů: Komponenty soupravy neobsahují nebezpečné látky. ouprava byla testována na souboru 9 kmenů. 8, % bylo správně identifikováno 6,5 % bylo identifikováno na úroveň rodu, % nebylo identifikováno, jednalo se však o klinicky málo významné kmeny Kvalita chemikálií používaných pro výrobu destiček -apid 4 je ověřována standardním testovacím postupem. Vyrobené série destiček jsou rovněž kontrolovány funkční zkouškou pomocí kontrolních bakteriálních kmenů. ro práci s destičkami -apid 4 na Vašem pracovišti doporučujeme použití kontrolních kmenů, uvedených v tabulce Kontrolní kmeny. aké pro rutinní diagnostiku doporučujeme používat tyto standardní testovací kmeny pro ověřeni správnosti metodického postupu, průběhu testů a barevného vyjádření reakcí. Kontrolní kmeny lze doporučit použít s každou sérií neznámých kmenů a vždy při použití nové šarže soupravy, respektive dle validačního řádu laboratoře. a kontrolu funkčnosti soupravy je nutné použít vždy čerstvé izoláty kontrolních kmenů. ozor - tyto kmeny slouží pouze pro kontrolu funkčnosti soupravy, nikoli pro kontrolu správnosti, či úspěšnosti identifikace! nterobacter cloacae CC 90 (CC 0699) scherichia coli CC 988 (CC 056) roteus vulgaris CC 799 erratia marcescens CC 0 (CC 880) yto kmeny dodává Česká sbírka mikroorganismů, asarykova univerzita, vrdého 4, Brno, tel , fax , ccm@sci.muni.cz. Kmeny jsou dodávány v lyofilizovaném stavu nebo na želatinových discích. Datum poslední revize: /I/098//CH -apid 4

3 Kontrolní kmeny: Řádek H F D C B nterobacter cloacae CC 90 ID C C B F V H a bx scherichia coli CC 988 ID C C B F V H a bx roteus vulgaris CC 799 ID C s + C B F + V H a bx + erratia marcescens CC 0 ID C C B F V H a bx s + + Vysvětlivky: + = pozitivní reakce = negativní reakce s = slabě pozitivní reakce oznámka: ro kontrolu negativní reakce u testů C,, lze použít kmen yroides odoratus CC 96. -apid 4 IC KCÍ loupec est Zkratka testu eakce pozitivní negativní Řádek H Indol ID červená, růžová nažloutlá ysin modrá zelená F rnithin modrá zelená reáza červená, červenooranžová žlutá, světle oranžová D acharóza C žlutá, žlutozelená zelená C orbitol žlutá, žlutozelená zelená B rehalóza žlutá, žlutozelená zelená lukóza žlutá, žlutozelená zelená Řádek H yrrolidonylamidáza červená, oranžová žlutá skulin černá, tmavě hnědá bezbarvá, světle hnědá F Cellobióza C žlutá, žlutozelená zelená elibióza B žlutá, žlutozelená zelená D alicin žlutá, žlutozelená zelená C annóza žlutá, žlutozelená zelená B altóza žlutá, žlutozelená zelená affinóza F žlutá, žlutozelená zelená Řádek H cetoin V červená, růžová bezbarvá, mírně narůžovělá Fenylalanin H rezavě hnědá bezbarvá, nahnědlá F alonát modrá, modrozelená žlutá, žlutozelená β-alaktosidáza žlutá, slabě žlutá bezbarvá D β-lukuronidáza žlutá, slabě žlutá bezbarvá C α-alaktosidáza a žlutá, slabě žlutá bezbarvá B β-xylosidáza bx žlutá, slabě žlutá bezbarvá -acetyl-β-d-glukosaminidáza žlutá bezbarvá, lehce nažloutlá /I/098//CH -apid 4

4 -apid 4 IDIFIKČÍ BK v..0 Řádek Řádek Řádek H F D C B H F D C B H F D C B I D C C B F V H a b X Identifikace ( ) ( ) ( ) Citrobacter amalonaticus ( ) d (+) + + (+) (+) Citrobacter braakii (+) ( ) ( ) Citrobacter farmeri ( ) (+) d d ( ) (+) (+) Citrobacter freundii + + d ( ) (+) ( ) ( ) Citrobacter koseri (+) ( ) + + ( ) (+) d Citrobacter sedlakii ( ) Citrobacter werkmanii ( ) ( ) d ( ) Citrobacter youngae d d dwardsiella tarda (+) d (+) (+) + (+) nterobacter aerogenes (+) ( ) (+) ( ) + + d (+) + d + + nterobacter cloacae ( ) (+) (+) d + + d ( ) + d (+) (+) nterobacter sakazakii + + d d (+) + + d + + (+) scherichia coli + (+) d ( ) (+) d + + ( ) (+) d d scherichia fergusonii + + ( ) ( ) + d + + ( ) + d scherichia hermannii d ( ) + + ( ) (+) + + (+) scherichia vulneris ( ) ( ) + + d ( ) (+) (+) Hafnia alvei + + (+) (+) (+) ( ) Klebsiella oxytoca ( ) ( ) ( ) d (+) (+) (+) (+) (+) (+) d d Klebsiella ozaenae + (+) ( ) Klebsiella pneumoniae d + (+) + + d d (+) (+) + ( ) d Klebsiella rhinoscleromatis d (+) d Kluyvera ascorbata + ( ) d d + + d + d eclercia adecarboxylata ( ) organella morganii ssp. morganii d ( ) d organella morganii ssp. sibonii d ( ) + d + + d antoea agglomerans ( ) + roteus mirabilis + + d roteus penneri ( ) + d d (+) + ( ) roteus vulgaris + ( ) d rovidencia alcalifaciens + + ( ) + d d + + d rovidencia rettgeri + d ( ) rovidencia stuartii (+) + (+) + (+) (+) (+) d (+) almonella arizona + (+) + + d + + d ( ) d almonella choleraesuis (+) (+) + + d d almonella paratyphi + + (+) (+) + almonella spp (+) + + (+) almonella typhi + (+) d ( ) + + (+) ( ) (+) (+) d erratia ficaria (+) + + (+) (+) + d (+) + + erratia marcescens d (+) (+) + (+) d + + (+) + erratia odorifera d + (+) d (+) + d + (+) + (+) erratia odorifera d ( ) (+) + + d erratia rubidaea d ( ) (+) + ( ) + d d d d higella, B, C ( ) + (+) + + (+) d ( ) higella sonnei d + (+) ( ) d ( ) + ( ) d (+) ersinia enterocolitica d + (+) d + d d d (+) ersinia kristensenii + ( ) ( ) ( ) + d ( ) d d ( ) ersinia pseudotuberculosis ( ) d ( ) d + d d d d d d ersinia rohdei d ( ) + d d d d okenella regensburgei Vysvětlivky: + = pozitivní reakce (+) = většinou pozitivní reakce = negativní reakce ( ) = většinou negativní reakce d = variabilní reakce

5 -apid 4 Cat. o.: For microbiology he -apid 4 kit is designed for the rapid identification of important species of the family nterоbacteriaceae within 4 hours. he kit enables the identification of fourty strains by means of twenty four biochemical tests. he tests are situated in wells on microtitration plates. hree rows with eight wells each are always intended for the identification of one strain. he -apid 4 kit 0 microtitration plates (for identification of 4 strains each) with a desiccant contains: Instructions for use including the differentiation table Colour scale for -apid 4 kit 0 polyethylene bags for incubation torage bag (for storage of an open plate), pc 40 record sheets id torage, expiry: he -apid 4 kit should be stored in a refrigerator at (+ to +8) C. Date of expiry is indicated on each package. ecommended working procedure for -apid 4 equired material for performing the identification (not included in the kit): eagent for ID test (Cat. o determinations) eagent for test (Cat. o determinations) eagent for CI test (Cat. o determinations) eagent for HH test (Cat. o determinations) araffin oil, sterilized (Cat. o determinations) etri dishes with the cultivation medium est tubes (00 x 5) mm with ml of sterile physiological saline Instrument Densi-a-eter II, Cat. o utomatic micropipette 0. ml, sterile tips hermostat 7 C sual microbiological laboratory equipment (loops, markers, burner) For cytochrome oxidase detection (if required): XItest (Cat. o determinations) eagent for XID test (Cat. o determinations) Ftest (Cat. o determinations) For results evaluation: Colour scale for -apid 4 kit Code book for -apid 4 (Cat. o ) or Identification software W Caution: For professional use only Follow the principles for working with infectious material! Isolation of cultures: erform the isolation of culture by usual techniques on medium, recommended for nterobacteriaceae. erform oxidase test (XItest), resp. Ftest to confirm, that the isolate belongs to nterobacteriaceae. reparation of inoculum: repare a suspension in saline from a pure, 4 hours old culture. he suspension must have a turbidity equal to cfarland o. turbidity scale. Culture purity control: If required confirm purity of the suspension by streaming-out a sample from the inoculated suspension medium on cultivation medium. Incubate at 7 C. Check after 4 hours. reparation of -apid 4 plate: pen the aluminium sachet close to the weld and take out the plate. Cut off required number of strips from the plate. emove the adhesive tape from individual strips and insert them into the prepared frame. In case you work with IK kit for the first time and an empty frame is not available, use the frame of the first plate. he unused strips of the first plate put into the storage bag freely. ecord number of the strains or isolates to be examined on the appropriate strips ut the rest of the plate with desiccant to the storage bag enclosed with the kit and store it in a refrigerator for further use. Keep in mind to protect it from humidity. It is recommended to use the rest of the plate within 4 weeks after the first use.

6 Inoculation: Homogenize the suspension in the saline thoroughly. Inoculate 0. ml of the suspension into all wells. fter inoculation, add the paraffin oil: st row, wells H,, F, (tests ID,,, ) drops of paraffin oil, st row, well (test ) 4 drops of paraffin oil. ote: the lid is labelled with abbreviated names of the tests and graphic symbols: (add paraffine oil) and (add a reagent). Clean the inside of the lid by ethanole just before the use. Incubation: ut the frame with inoculated strips into a polyethylene bag. Fold the open end of the bag under the plate to prevent dessication during incubation. Incubate -apid 4 plate at 7 C for 4 hours. eading: dd reagents into the following wells of -apid 4: st row, well H (test Indole) drops of the reagent for ID, nd row, well H (test ) drop of the reagent for, rd row, well H (test cetoin) drop of the reagent for V I and drop of the reagent for V II, rd row, well (test henylalanine) drop of the reagent for H. Incubate the plate for another 0 min. at 7 C. ead the reactions and record the results in the record sheet. ote: he HH reagent is used for henylalanine test! -apid 4 contains a modification of the henylalanine test which gives stable colour reaction, enabling thus to read the henylalanine reaction with all the other tests after 0 min. ead the reactions in accordance with the table Interpretation of reactions, Colour scale for - apid 4 and/or according to the colour reactions of the control strains. Identification: For the identification refer to the Identification table or Code book, or use a suitable identification program. o complete the identification take into consideration all the results available i.e. source of isolate, the character of colonies, the pigment production, microscopy etc. he biochemical identification of salmonella and shigella must be confirmed by serology. If you have failed to identify the culture, repeat the procedure as above, eventually use test 4 kit. ote: he record sheet is designed to create so called profile easily, i.e. a numerical code enabling to look for the identification result within the Code book. he procedure of the profile formation is described directly in the Code book. Disposal of used material: fter use, all ampoules, tips and strips must be autoclaved or incinerated. Discard paper packaging waste to recycling. he most frequent causes Contaminated culture. of identification failure: sing inoculum of low density or small volume. Inoculum has contaminated adjacent strips. he corresponding tests were not overlayed by paraffin oil. he reagent was dropped into an adjacent well. Failure to follow the recommended procedure. here may be a species or strains whose data are not included in the Identification table or Code book. Health protection: erformance: Quality control of -apid 4: Components of the kit do not contain any dangerous substances. he kit was tested on a set of 9 strains. he identification of 8. % strains was correct. he identification of 6.5 % strains was identified to the genus level.. % of the strains were not identified but these strains were clinically less significant. he quality control of the kits is performed systematically at various stages of their production. he batches are checked by tests on standard bacterial cultures. For those who wish to perform their own quality control tests, cultures mentioned in the table Control strains are recommended. hese strains are used to check the functionality of the kit, not to check the accuracy or success of the identification! nterobacter cloacae CC 90 (CC 0699) scherichia coli CC 988 (CC 056) roteus vulgaris CC 799 erratia marcescens CC 0 (CC 880) he strains are supplied in freeze-dried ampoules by the Czech Collection of icroorganisms, vrdého 4,60 00 Brno, Czech epublic, hone: (+40) , Fax: (+40) , ccm@sci.muni.cz. Date of last revision: /I/098//CH -apid 4

7 Control strains: ow H F D C B nterobacter cloacae CC 90 ID C C B F V H a bx scherichia coli CC 988 ID C C B F V H a bx roteus vulgaris CC 799 ID C w + C B F + V H a bx + erratia marcescens CC 0 ID C C B F V H a bx w + + xplanations: + = positive reaction = negative reaction w = weak reaction ote: he negative reactions of the tests C,, can be checked by yroides odoratus CC 96 strain. -apid 4 II F CI Column est Code eaction positive negative ow H Indole ID red, pink yellowish ysine blue green F rnithine blue green rease red, red-to-orange yellow, pale orange D acrose C yellow, yellow-to-green green C orbitol yellow, yellow-to-green green B rehalose yellow, yellow-to-green green lucose yellow, yellow-to-green green ow H yrrolidonylamidase red, orange yellow sculin black, dark brown colourless, pale brown F Cellobiose C yellow, yellow-to-green green elibiose B yellow, yellow-to-green green D alicin yellow, yellow-to-green green C annose yellow, yellow-to-green green B altose yellow, yellow-to-green green affinose F yellow, yellow-to-green green ow H cetoin V red, pink colourless, weak pink henylalanine H rusty brown colourless, weak brown F alonate blue, blue-to-green yellow, yellow-yo-green β-alactosidase yellow, pale yellow colourless D β-lucuronidase yellow, pale yellow colourless C α-alactosidase a yellow, pale yellow colourless B β-xylosidase bx yellow, pale yellow colourless -acetyl-β-d-glukosaminidase yellow colourless, weak yellowish /I/098//CH -apid 4

8 -apid 4 IDIFICI B v..0 ow ow ow H F D C B H F D C B H F D C B I D C C B F V H a b X Identification ( ) ( ) ( ) Citrobacter amalonaticus ( ) d (+) + + (+) (+) Citrobacter braakii (+) ( ) ( ) Citrobacter farmeri ( ) (+) d d ( ) (+) (+) Citrobacter freundii + + d ( ) (+) ( ) ( ) Citrobacter koseri (+) ( ) + + ( ) (+) d Citrobacter sedlakii ( ) Citrobacter werkmanii ( ) ( ) d ( ) Citrobacter youngae d d dwardsiella tarda (+) d (+) (+) + (+) nterobacter aerogenes (+) ( ) (+) ( ) + + d (+) + d + + nterobacter cloacae ( ) (+) (+) d + + d ( ) + d (+) (+) nterobacter sakazakii + + d d (+) + + d + + (+) scherichia coli + (+) d ( ) (+) d + + ( ) (+) d d scherichia fergusonii + + ( ) ( ) + d + + ( ) + d scherichia hermannii d ( ) + + ( ) (+) + + (+) scherichia vulneris ( ) ( ) + + d ( ) (+) (+) Hafnia alvei + + (+) (+) (+) ( ) Klebsiella oxytoca ( ) ( ) ( ) d (+) (+) (+) (+) (+) (+) d d Klebsiella ozaenae + (+) ( ) Klebsiella pneumoniae d + (+) + + d d (+) (+) + ( ) d Klebsiella rhinoscleromatis d (+) d Kluyvera ascorbata + ( ) d d + + d + d eclercia adecarboxylata ( ) organella morganii ssp. morganii d ( ) d organella morganii ssp. sibonii d ( ) + d + + d antoea agglomerans ( ) + roteus mirabilis + + d roteus penneri ( ) + d d (+) + ( ) roteus vulgaris + ( ) d rovidencia alcalifaciens + + ( ) + d d + + d rovidencia rettgeri + d ( ) rovidencia stuartii (+) + (+) + (+) (+) (+) d (+) almonella arizona + (+) + + d + + d ( ) d almonella choleraesuis (+) (+) + + d d almonella paratyphi + + (+) (+) + almonella spp (+) + + (+) almonella typhi + (+) d ( ) + + (+) ( ) (+) (+) d erratia ficaria (+) + + (+) (+) + d (+) + + erratia marcescens d (+) (+) + (+) d + + (+) + erratia odorifera d + (+) d (+) + d + (+) + (+) erratia odorifera d ( ) (+) + + d erratia rubidaea d ( ) (+) + ( ) + d d d d higella, B, C ( ) + (+) + + (+) d ( ) higella sonnei d + (+) ( ) d ( ) + ( ) d (+) ersinia enterocolitica d + (+) d + d d d (+) ersinia kristensenii + ( ) ( ) ( ) + d ( ) d d ( ) ersinia pseudotuberculosis ( ) d ( ) d + d d d d d d ersinia rohdei d ( ) + d d d d okenella regensburgei xplanations: + = positive reaction (+) = mostly positive reaction = negative reaction ( ) = mostly negative reaction d = variable reaction

9 ЭНТЕРО-Рапид 4 Ном. но.: Для микробиологии Набор ЭНТЕРО-Рапид 4 предназначен для ускоренной (в течение 4 часов) биохимической идентификации микроорганизмов семейства энтеробактерий, прежде всего из клинического материала. Набор включает 0 стриппированных пластмассовых пластинок размером 8,5 х,5 см, содержащих 96 ячеек (4 трехрядных стрипа по 4 теста) с высушенными питательными средами и субстратами для 4 тестов: индол, лизин, орнитин, уреаза, сахароза, сорбитол, трегалоза, глюкоза в анаэробных условиях, пирролидонилариламидаза, эскулин, целлобиоза, мелибиоза, салицин, манноза, мальтоза, раффиноза, ацетоин, фенилаланин, малонат, β-галактозидаза, β-глюкуронидаза, α-галактозидаза, β-ксилозидаза, -ацетил-β-d-глюкозаминидаза. Набор ЭНТЕРО-Рапид 4 0 микротитровальных пластинок (каждая для идентификации 4 штаммов) с силикагелем содержит: Инструкция для пользователя с Идентификационной таблицей Цветная шкала для ЭНТЕРО-Рапид 4 0 полиэтиленовых пакетиков для инкубации Пакет для хранения частично использованной пластинки 40 бланков для регистрации результатов Крышка Хранение, срок годности: ЭНТЕРО-Рапид 4 следует хранить при температуре от + до +8 C. Срок годности указан на каждой упаковке. Инструкция к постановке ЭНТЕРО-Рапид 4 Материалы (не входят в набор): Реактив для теста ИНДОЛ, Ном. но.: 0007 для 0 определений Реактив для теста ПИР, Ном. но.: для 800 определений Реактив для теста АЦЕТОИН, Ном. но.: для 70 определений Реактив для теста ФОСФАТАЗА, Ном. но.: для 50 определений Парафиновое масло, стерильное, Ном. но.: 0007 для 0 определений Чашки Петри с культивационной средой Пробирки с мл стерильного физиологического раствора (ph 6,5 7,) Прибор Денси-ЛА-Метр II (Ном. номер ) или пробирки с суспензией степени мутности по шкале cfarland (0, мл % раствора ВаСl.Н О и 9,7 мл % раствора Н 4 ) Автоматическая микропипетка 0, мл, стерильные наконечники Термостат З7 C Традиционное оснащение микробиологической лаборатории (петли, маркеры, горелка) Дополнительные поставляемые материалы (не входят в набор): Пособия для идентификации (не входят в набор): ОКСИтест, Ном. но.: 0004 диагностические полоски для выявления оксидазы для 50 определений Реактив для теста ОКСИДАЗА, Ном. но.: для 500 определений ОФтест, Ном. но.: для 88 определений Книга кодов для набора ЭНТЕРО-Рапид 4, Ном. но.: Предупреждение: Набор предназначен только для квалифицированного использования в микробиологической лаборатории. Строго соблюдать правила работы с инфицированным материалом! Выделение культуры: Выделите чистую культуру, пользуясь общепринятыми в микробиологии методами на рекомендованной среде (Эндо агар, кровяной агар, acconkey агар). Проведите тест на оксидазу (ОКСИтест) и микроскопию мазка испытуемой культурой с окраской по Граму. Поставьте тест на ферментацию глюкозы для установления факта принадлежности выделенной культуры к группе ферментирующих микроорганизмов (ОФтест). Приготовление бактериальной Из чистой 4 часовой культуры приготовьте суспензию в физиологическом растворе. суспензии: Тщательно гомогенизируйте суспензию. Мутность суспензии должна соответствовать степени по шкале мутности cfarland. Параллельно сделайте посев суспензии культуры на неселективную среду для проверки чистоты культуры, ее ростовых свойств и/или для постановки дополнительных тестов; инкубируйте в течение 4 часов при температуре 7 C. Подготовка стриппированых пластинок: Откройте алюминиевую упаковку по сварному шву. Достаньте пластинку из алюминиевого пакета. Возьмите необходимое количество стрипов из пластинки ( трехрядный стрип, т.е. 4 теста, на одну культуру). Удалите адгезивную пленку с индивидуальных стрипов, вставьте их в подготовленную рамку. В том случае, если Вы работаете с набором Микро-Ла-Тест впервые, и у Вас нет свободной рамки, используйте рамку первой пластинки. Неиспользованные стрипы из первой пластинки поместите в пакет для хранения неиспользованных пластинок. Напишите номера штаммов на соответствующие стрипы. Остаток неиспользованных стрипов с силикагелем поместите в алюминиевый пакет для частично использованных пластинок и положите в холодильник для последующего использования; пластинку необходимо предохранять от влаги. Не рекомендуется хранить пластинку более 4 недель с момента ее вскрытия.

10 Инокуляция: Суспензию бактерий тщательно встряхните. Инокулируйте по 0, мл суспензии во все лунки в соотвествующих трех рядах пластинки. После инокуляции добавьте парафиновое масло в следующие лунки: лунки Н,, F, первого ряда (тесты ID,,, ) по капли, лунки первого ряда (тест ) 4 капли. Примечание: Крышка пластинки имеет сокращенные названия тестов и символы: добавить (парафиновое масло) и (реактив) Если Вы используете крышку для накрытия пластинки, продезинфицируйте ее внутреннюю сторону спиртом. Инкубация: После инокуляции закройте пластинку крышкой или предохранительной пленкой. Вложите пластинку в пакет из полиэтилена, открытый конец пакета загните под пластинку, чтобы инокулят не высыхал при инкубации. Инкубируйте инокулированную пластинку в течение 4 часов при температуре 7 C. Учет результата: Добавьте реактивы в следующие лунки: -ый ряд, лунка Н (тест ID) капли Реактива для теста ИНДОЛ, -ой ряд, лунка H (тест ) каплю Реактива для теста ПИР, -ий ряд, лунка Н (тест V) по одной капле Реактива для ВПТ I и ВПТ II, -ий ряд, лунка (тест H ) каплю Реактива для теста ФОСФАТАЗА. Пластинку инкубируйте в течение 0 минут при температуре 5 7 C. После 0 минут учтите результаты всех реакций ЭНТЕРО-Рапид 4 и занесите в бланки. Примечание: Для выявления цветной реакции теста Фенилаланин используется Реактив для теста ФОСФАТАЗА! Модификация теста Фенилаланин в тест-системе ЭНТЕРО-Рапид 4 показывает стабильный цвет после добавления реактива, и тест возможно учитывать вместе со всеми остальными тестами. При оценке ЭНТЕРО-Рапид 4 ориентируйтесь по Цветной шкале сравнения, по таблице «Интерпретация реакций» и/или по цветным реакциям контрольных штаммов. В случае надобности проверьте рост и чистоту культуры на контрольной чашке Петри. Идентификация: Идентификацию проводите с помощью «Идентификационной таблицы» или Книги кодов для ЭНТЕРО-Рапид 4, или же с помощью компьтерных программ «Система микробиологического мониторинга «Микроб» со встроенной «Идентификацией» и «Микроб-Автомат». При окончательной идентификации следует учитывать всю дополнительную информацию (источник выделения, характер колоний, наличие пигмента, микроскопию, и другие характеристики). В случае выявления сальмонелл и шигелл подтвердите идентификацию серологически. При неудовлитворительной идентификации следует повторить ЭНТЕРО-Рапид 4, или же провести идентификацию с помощью тест-системы ЭНТЕРОтест 4. Примечание: При отрицательном тесте Глюкоза в анаэробных условиях можно предположить отношение данной культуры к неферментирующим бактериям. Для идентификации грамотрицательных неферментирующих бактерий предназначен набор НЕФЕРМтест 4. Для идентификации при помощи Книги кодов бланк для регистрации результатов позволяет легко получить так называемый профиль, т.е. цифровой код, по которому можно найти результат идентификации в Книге кодов. Расчет профиля описан в Книге кодов. Дезинфекция: После употребления микротестсистемы обеззараживаются в дезинфицирующем растворе либо автоклавируются. Бумажную упаковку сдайте в макулатуру. Наиболее частые причины Смешанная культура. неудач при идентификации: Использование суспензий с недостаточной мутностью или в недостаточном объеме. Перекрестная контаминация суспензий в расположенных рядом лунках. Соответствующие лунки не заполнены парафиновым маслом. Попадание реактивов в лунки соседнего ряда. Не точно соблюдена методика постановки теста. Возможно выделение штамма с нетипичными свойствами или его данные не заложены в таблицы. Меры предосторожности: Компоненты набора не содержат опасных веществ. Свойства набора: Набор был тестирован на 9 штаммах 8, % было идентифицировано правильно 6,5 % было идентифицировано до уровня рода, % не было идентифицировано, однако речь идет о клинически мало значимых штаммах Контроль качества: Химический контроль качества реактивов, используемых при производстве ЭНТЕРО-Рапид 4, осуществляется стандартными методами. Производственные партии пластинок контролируются с помощью контрольных референтных бактериальных культур. Для работы с пластинками ЭНТЕРО- Рапид 4 в лаборатории рекомандуем использовать следующие контрольные штаммы (показаны в таблице Контрольные штаммы). Для контроля функциональности набора необходимо всегда пользоваться свежими изолятами штаммов. Данные штаммы служат для контроля функциональности набора, а не для контроля идентификации! nterobacter cloacae CC 90 (CC 0699) scherichia coli CC 988 (CC 056) roteus vulgaris CC 799 erratia marcescens CC 0 (CC 880) CC Чешская коллекция микроорганизмов ΓИСК, Государственный НИИ стандартизации и контроля медицинских биологических препаратов им. Л. А. Τарасевича, г. Москва, телефон 8 (499) 4--9 /I/098//CH -apid 4

11 Контрольные штаммы: Ряд H F D C B nterobacter cloacae CC 90 ID C C B F V H a bx scherichia coli CC 988 ID C C B F V H a bx roteus vulgaris CC 799 ID C с + C B F + V H a bx + erratia marcescens CC 0 ID C C B F V H a bx с + + Пояснения: + = положительная реакция = отрицательная реакция с = слабоположительная реакция Примечание: Для контроля отрицательной реакции тестов C,, можно использовать штамм yroides odoratus CC 96. ЭНТЕРО-Рапид 4 ИНТЕРПРЕТАЦИЯ РЕАКЦИЙ Колонка Тест Код Реакция положительная отрицательная Ряд H Индол ID красная, розовая желтоватая Лизин синяя зеленая F Орнитин синяя зеленая Уреаза красная, красно-оранжевая желтая, бледно-оранжевая D Сахароза C желтая, желто-зеленая зеленая C Сорбитол желтая, желто-зеленая зеленая B Трегалоза желтая, желто-зеленая зеленая Глюкоза желтая, желто-зеленая зеленая Ряд H Пирролидонилариламидаза красная, красно-оранжевая желтая Эскулин черная, темно-коричневая бесцветная, светло-коричневая F Целлобиоза C желтая, желто-зеленая зеленая Мелибиоза B желтая, желто-зеленая зеленая D Салицин желтая, желто-зеленая зеленая C Манноза желтая, желто-зеленая зеленая B Мальтоза желтая, желто-зеленая зеленая Раффиноза F желтая, желто-зеленая зеленая Ряд H Ацетоин V красная, розовая бесцветная, бледно-розовая Фенилаланин H рыже-коричневая бесцветная, бледно-коричневая F Малонат синяя, сине-зеленая желтая, желто-зеленая β-галактозидаза желтая, бледно-желтая бесцветная D β-глюкуронидаза желтая, бледно-желтая бесцветная C α-галактозидаза a желтая, бледно-желтая бесцветная B β-ксилозидаза bx желтая, бледно-желтая бесцветная -ацетил-β-d-галактозаминидаза желтая бесцветная, бледно-желтоватая /I/098//CH -apid 4

12 ЭНТЕРО-Рапид 4 ИДЕНТИФИКАЦИОННАЯ ТАБЛИЦА в..0 Ряд Ряд Ряд H F D C B H F D C B H F D C B I D C C B F V H a b X Идентификация ( ) ( ) ( ) Citrobacter amalonaticus ( ) d (+) + + (+) (+) Citrobacter braakii (+) ( ) ( ) Citrobacter farmeri ( ) (+) d d ( ) (+) (+) Citrobacter freundii + + d ( ) (+) ( ) ( ) Citrobacter koseri (+) ( ) + + ( ) (+) d Citrobacter sedlakii ( ) Citrobacter werkmanii ( ) ( ) d ( ) Citrobacter youngae d d dwardsiella tarda (+) d (+) (+) + (+) nterobacter aerogenes (+) ( ) (+) ( ) + + d (+) + d + + nterobacter cloacae ( ) (+) (+) d + + d ( ) + d (+) (+) nterobacter sakazakii + + d d (+) + + d + + (+) scherichia coli + (+) d ( ) (+) d + + ( ) (+) d d scherichia fergusonii + + ( ) ( ) + d + + ( ) + d scherichia hermannii d ( ) + + ( ) (+) + + (+) scherichia vulneris ( ) ( ) + + d ( ) (+) (+) Hafnia alvei + + (+) (+) (+) ( ) Klebsiella oxytoca ( ) ( ) ( ) d (+) (+) (+) (+) (+) (+) d d Klebsiella ozaenae + (+) ( ) Klebsiella pneumoniae d + (+) + + d d (+) (+) + ( ) d Klebsiella rhinoscleromatis d (+) d Kluyvera ascorbata + ( ) d d + + d + d eclercia adecarboxylata ( ) organella morganii ssp. morganii d ( ) d organella morganii ssp. sibonii d ( ) + d + + d antoea agglomerans ( ) + roteus mirabilis + + d roteus penneri ( ) + d d (+) + ( ) roteus vulgaris + ( ) d rovidencia alcalifaciens + + ( ) + d d + + d rovidencia rettgeri + d ( ) rovidencia stuartii (+) + (+) + (+) (+) (+) d (+) almonella arizonaе + (+) + + d + + d ( ) d almonella choleraesuis (+) (+) + + d d almonella paratyphi + + (+) (+) + almonella spp (+) + + (+) almonella typhi + (+) d ( ) + + (+) ( ) (+) (+) d erratia ficaria (+) + + (+) (+) + d (+) + + erratia marcescens d (+) (+) + (+) d + + (+) + erratia odorifera d + (+) d (+) + d + (+) + (+) erratia odorifera d ( ) (+) + + d erratia rubidaea d ( ) (+) + ( ) + d d d d higella, B, C ( ) + (+) + + (+) d ( ) higella sonnei d + (+) ( ) d ( ) + ( ) d (+) ersinia enterocolitica d + (+) d + d d d (+) ersinia kristensenii + ( ) ( ) ( ) + d ( ) d d ( ) ersinia pseudotuberculosis ( ) d ( ) d + d d d d d d ersinia rohdei d ( ) + d d d d okenella regensburgei Пояснения: + = положительная реакция (+) = большей частью положительная реакция = отрицательная реакция ( ) = большей частью отрицательная реакция d = вариабельная реакция Дата проведения последнего контроля: 7.. 0

13 -apid 4 r kat.: Do celów mikrobiologicznych Zestaw -apid 4 przeznaczony jest do szybkiej identyfikacji ważnych gatunków bakterii jelitowych z rodziny nterobacteriaceae w ciągu 4 godzin inkubacji. Zestaw umożliwia identyfikację 40 szczepów, każdy za pomocą dwudziestu czterech testów biochemicznych. esty umieszczone są we wgłębieniach na płytkach do mikromiareczkowania, trzy rzędy po osiem wgłębień do identyfikacji jednego szczepu. Zestaw -apid 4 zawiera: 0 paneli identyfikacyjnych (każdy do identyfikacji 4 szczepów) z wysuszaczem Instrukcję obsługi wraz z tabelą identyfikacyjną orównawczą skalę barw dla -apid 4 0 torebek do inkubacji orebkę do przechowywania przeznaczoną do ułożenia niezużytej reszty płytki, szt. 40 formularzy do wpisywania wyników okrywę rzechowywanie, termin ważności: Zestaw -apid 4 należy przechowywać w lodówce w temperaturze + do +8 C. ermin ważności podany jest na każdym opakowaniu ateriały potrzebne do pracy z zestawem -apid 4, które nie wchodzą w skład zestawu: Zalecany sposób postępowania dla -apid 4 dczynnik do testu ID, nr kat oznaczeń/op. dczynnik do testu, nr kat oznaczeń/op. dczynnik do testu CI, nr kat oznaczeń/op. dczynnik do testu FFZ, nr kat oznaczeń/op. terylizowany olej parafinowy, nr kat oznaczeń/op. zalki etriego z podłożem hodowlanym robówki (00 x 5) mm z ml sterylnego roztworu soli fizjologicznej rządzenie Densi-a-eter II, nr kat utomatyczna mikropipeta 0, ml, sterylne końcówki Cieplarka 7 C odstawowe wyposażenie laboratorium mikrobiologicznego (ezy, markery, palnik) ateriały potrzebne do pracy z testami uzupełniającymi, które nie wchodzą w skład zestawu: XItest, nr kat oznaczeń/op. dczynnik do próby oksydazowej, nr kat oznaczeń/op. Ftest, nr kat oznaczeń/op. iezbędne pomoce identyfikacyjne, które nie wchodzą w skład zestawu: Książka kodów do -apid 4 (nr kat ) rogram identyfikacyjny W waga: Zestaw przeznaczony jest do profesjonalnego zastosowania rzestrzegaj zasad pracy z materiałem zakaźnym! Izolowanie kultury: Izolowanie kultury powinno zostać przeprowadzone tradycyjną techniką na pożywce zalecanej do izolowania nterobacteriaceae. rzeprowadzić test na obecność oksydazy cytochromowej (XItest), odp. test /F(test na fermentację glukozy) w celu potwierdzenia, że izolat należy do nterobacteriaceae. rzygotowanie inokulum: porządzić zawiesinę bakteryjną w roztworze soli fizjologicznej z czystej, 4-godzinnej kultury. Zawiesinę należy dokładnie zhomogenizować. Zmętnienie zawiesiny powinno odpowiadać wartości w zmętnieniowej skali cfarlanda. rzede wszystkim słabsza zawiesina może powodować fałszywie ujemne reakcje. ą samą ezą, którą przygotowano zawiesinę, przeprowadzić wysiew krzyżowy na podłożu nieselektywnym. Inkubować w temp. 7 C. Czystość kultury należy oceniać po 4 godz. rzygotowanie panelu zestawu -apid 4: tworzyć torebkę poprzez odcięcie brzegu torebki obok miejsca spawu oraz wyjąć płytkę. rzy pomocy skalpela należy odciąć odpowiednią ilość pasków płytki, zgodnie z ilością badanych szczepów ( rzędy, tj. 4 studzienek do identyfikacji jednego szczepu). dcięte paski należy wyjąć z panelu, zdjąć ochronną folię, paski włożyć do przygotowanej pustej ramki. W przypadku pracy z zestawem IK po raz pierwszy i niedysponowaniem wolną ramką, należy wyjąć niezużyte studzienki z pierwszej pełnej ramki, ułożyć luzem w torebce do przechowywania a ramkę tej pierwszej płytki wykorzystać do inkubacji. Wpisać nr badanych kultur na odpowiednie paski. esztę niezużytej płytki z wysuszaczem włożyć do dołączonej torebki przeznaczonej do włożenia niezużytej płytki i całość następnie włożyć do lodówki do kolejnego użycia; plytkę należy chronić przed wilgocią. Zalecamy zużyć płytkę do 4 tygodni od pierwszego zastosowania.

14 Inokulacja: Zhomogenizować dokładnie zawiesinę w roztworze soli fizjologicznej. Wykonać posiew 0, ml zawiesiny do wszystkich wgłębień poszczególnych trzech rzędów paska płytki ( pasek x 8 wgłębień). o posiewie dodać olej parafinowy: rząd, wgłębienia H,, F, (testy ID,,, ) krople oleju, rząd, wgłębienie (test ) 4 krople oleju. waga: okrywa ramki płytki zawiera nadruk skrótów testów i symboli: (zakropić olejem parafinowym) i (dodać odczynnik). W przypadku wykorzystywania pokrywy w trakcie pracy do nakrycia płytki, należy przed zastosowaniem wewnętrzną stronę pokrywy zdezynfekować etanolem. Inkubacja: mieścić ramkę z paskami w torebce z polietylenu. Założyć otwarty brzeg torebki pod płytkę, aby uniknąć wysychania podczas inkubacji. Inkubować płytkę -apid 4 w temp. 7 C przez 4 godziny. dczyt: Dodać odczynniki do następujących wgłębień -apid 4: rząd, wgłębienie H (test ID) krople odczynnika do testu ID, rząd, wgłębienie H (test ) kropla odczynnika do test, rząd, wgłębienie H (test CI) kropla odczynnika do V I oraz kropla odczynnika do V II, rząd, wgłębienie (test FI) kropla odczynnika do H. Inkubować płytkę przez kolejne 0 minut w temp. 7 C. dczytać reakcje i zapisać wyniki na arkuszu. waga: dczynnik do testu FFZ (H) używany jest do testu FI! -apid 4 zawiera modyfikację testu FI, który daje stabilną reakcję barwną, umożliwiając odczytanie reakcji fenyloalaniny razem z wszystkimi pozostałymi testami. dczytać reakcje na podstawie orównawczej skali barw do -apid 4, tabeli Interpretacja reakcji i/lub reakcji barwnych szczepów kontrolnych. Identyfikacja: odczas identyfikacji należy korzystać z abeli identyfikacyjnej lub Książki kodów, odp. przeprowadzić identyfikację z pomocą programu identyfikacyjnego. odczas identyfikacji należy uwzględnić wszystkie wyniki łącznie z dodatkowymi dostępnymi cechami charakterystycznymi, takimi jak pochodzenie izolatu, rodzaj kolonii, wytwarzanie pigmentu, badanie mikroskopowe itd. Biochemiczną identyfikację rodzajów almonella i higella należy potwierdzić serologicznie. W razie niepowodzenia w identyfikacji kultury powtórzyć powyższą procedurę, ewentualnie zastosować zestaw test 4. waga: odczas identyfikacji przy pomocy Książki kodów formularz do wpisywania wyników umożliwia łatwe utworzenie tak zwanego profilu, tj. kodu numerycznego, który umożliwia wyszukanie wyniku identyfikacji w książce kodów. rocedura tworzenia profilu opisana jest w książce kodów. suwanie wykorzystanych materiałów: o zużyciu wszystkie ampułki, końcówki i paski należy wysterylizować w autoklawie lub spalić. ajczęstsze przyczyny Zanieczyszczona kultura. niepowodzenia identyfikacji: Zastosowano inokulum o niskiej gęstości lub zbyt małą ilość inokulum. Inokulum zanieczyściło sąsiadujące paski. dpowiednie testy nie zostały pokryte warstwą oleju parafinowego. dczynnik wkropiono do sąsiedniego wgłębienia. ieprzestrzeganie kolejnych etapów zalecanej procedury. ietypowy szczep lub przedstawiciel gatunku, który nie jest zawarty w abeli identyfikacyjnej. chrona zdrowia: Właściwości zestawu: kładniki zestawu nie zawierają substancji niebezpiecznych. Zestaw został przetestowany z pomocą 9 szczepów. 8, % zidentyfikowano prawidłowo 6,5 % zidentyfikowano na poziomie rodzaju, % nie zidentyfikowano, były to jednak mało klinicznie istotne szczepy Kontrola jakości -apid 4: Jakość chemikaliów stosowanych do produkcji płytek -apid 4 sprawdzana jest przy użyciu standardowego sposobu testowania. Wyprodukowane partie płytek sprawdzane są także za pomocą standardowych referencyjnych kultur bakteryjnych. Do pracy z płytkami -apid 4 w aństwa laboratorium zalecamy zastosowanie szczepów kontrolnych wymienionych w tabeli zczepy kontrolne. akże w celach rutynowej diagnostyki zalecamy zastosowanie tych standardowych szczepów kontrolnych do sprawdzenia prawidłowości sposobu postępowania, przebiegu testów i wyrażenia reakcji barwnych. życie szczepów kontrolnych zalecane jest w przypadku każdej serii nieznanych szczepów, w przypadku każdej nowej serii zestawu oraz zgodnie z systemem walidacji laboratorium. Do kontroli funkcyjności zestawu niezbędne są świeże izolaty szczepów kontrolnych. waga szczepy te służą wyłącznie do kontroli funkcyjności zestawu, nie służą do kontroli prawidłowości lub powodzenia identyfikacji! nterobacter cloacae CC 90 (CC 0699) scherichia coli CC 988 (CC 056) roteus vulgaris CC 799 erratia marcescens CC 0 (CC 880) zczepy dostarczane są w postaci liofilizowanej lub na krążkach żelatynowych przez: Czech Collection of icroorganisms, vrdého 6, Brno, epublika Czeska, tel. (+40-5) 4 4 7, fax. (+40-5) 4 4. Data ostatniej rewizji: /I/098//CH -apid 4

15 zczepy kontrolne: -apid 4 ząd H F D C B nterobacter cloacae CC 90 ID C C B F V H a bx scherichia coli CC 988 ID C C B F V H a bx roteus vulgaris CC 799 ID C w + C B F + V H a bx + erratia marcescens CC 0 ID C C B F V H a bx w + + bjaśnienia: + = reakcja dodatnia, = reakcja ujemna, w = słaba reakcja waga: jemna reakcja testów C,, może być sprawdzona za pomocą szczepu yroides odoratus CC 96 Interpretacja reakcji Kolumna est krót testu eakcja dodatnia ujemna ząd H indol ID czerwona, różowa żółtawa lizyna niebieska zielona F ornityna niebieska zielona ureaza czerwona, czerwono-pom. żółta, bladopomar. D sacharoza C żółta, żółtoziel. zielona C sorbitol żółta, żółtoziel. zielona B trehaloza żółta, żółtoziel. zielona glukoza żółta, żółtoziel. zielona ząd H arylamidaza pyrollidonylowa czerwona, pomarańczowa żółta eskulina czarna, ciemnobrązowa bezbarwna, bladobrązowa F celobioza C żółta, żółtoziel. zielona melibioza B żółta, żółtoziel. zielona D salicyna żółta, żółtoziel. zielona C mannoza żółta, żółtoziel. zielona B maltoza żółta, żółtoziel. zielona rafinoza F żółta, żółtoziel. zielona ząd H acetoina V czerwona, różowa bezbarwna, bladoróż. fenyloalanina H rdzawobrązowa bezbarwna, bladobrązowa F malonian niebieska, nieb.-ziel. żółta, żółto-zielona β-galaktozydaza żółta, jasnożółta bezbarwna D β-glukuronidaza żółta, jasnożółta bezbarwna C α-galaktozydaza a żółta, jasnożółta bezbarwna B β-ksylozydaza bx żółta, jasnożółta bezbarwna β-d-glukozoaminidaza -acetylowa żółta bezbarwna, bladożółtawa DC: rba achema s.r.o., Karásek d, 6 B, BIK CZK rzedstawicielstwo w olsce: l. zamocińska, 6-47 oznań, tel. kom: , fax: , tvrdon@lachema.com, /I/098//CH -apid 4

16 -apid 4 abela identyfikacyjna v..0 ząd ząd ząd H F D C B H F D C B H F D C B I D C C B F Identyfikacja ( ) ( ) ( ) Citrobacter amalonaticus ( ) d (+) + + (+) (+) Citrobacter braakii (+) ( ) ( ) Citrobacter farmeri ( ) (+) d d ( ) (+) (+) Citrobacter freundii + + d ( ) (+) ( ) ( ) Citrobacter koseri (+) ( ) + + ( ) (+) d Citrobacter sedlakii ( ) Citrobacter werkmanii ( ) ( ) d ( ) Citrobacter youngae d d dwardsiella tarda (+) d (+) (+) + (+) nterobacter aerogenes (+) ( ) (+) ( ) + + d (+) + d + + nterobacter cloacae ( ) (+) (+) d + + d ( ) + d (+) (+) nterobacter sakazakii + + d d (+) + + d + + (+) scherichia coli + (+) d ( ) (+) d + + ( ) (+) d d scherichia fergusonii + + ( ) ( ) + d + + ( ) + d scherichia hermannii d ( ) + + ( ) (+) + + (+) scherichia vulneris ( ) ( ) + + d ( ) (+) (+) Hafnia alvei + + (+) (+) (+) ( ) Klebsiella oxytoca ( ) ( ) ( ) d (+) (+) (+) (+) (+) (+) d d Klebsiella ozaenae + (+) ( ) Klebsiella pneumoniae d + (+) + + d d (+) (+) + ( ) d Klebsiella rhinoscleromatis d (+) d Kluyvera ascorbata + ( ) d d + + d + d eclercia adecarboxylata V ( ) organella morganii ssp. morganii d ( ) d organella morganii ssp. sibonii d ( ) + d + + d antoea agglomerans ( ) + roteus mirabilis + + d roteus penneri ( ) + d d (+) + ( ) roteus vulgaris + ( ) d rovidencia alcalifaciens + + ( ) + d d + + d rovidencia rettgeri + d ( ) rovidencia stuartii (+) + (+) + (+) (+) (+) d (+) almonella arizona + (+) + + d + + d ( ) d almonella choleraesuis (+) (+) + + d d almonella paratyphi + + (+) (+) + almonella spp (+) + + (+) almonella typhi + (+) d ( ) + + (+) ( ) (+) (+) d erratia ficaria (+) + + (+) (+) + d (+) + + erratia marcescens d (+) (+) + (+) d + + (+) + erratia odorifera d + (+) d (+) + d + (+) + (+) erratia odorifera d ( ) (+) + + d erratia rubidaea d ( ) (+) + ( ) + d d d d higella, B, C ( ) + (+) + + (+) d ( ) higella sonnei d + (+) ( ) d ( ) + ( ) d (+) ersinia enterocolitica d + (+) d + d d d (+) ersinia kristensenii + ( ) ( ) ( ) + d ( ) d d ( ) ersinia pseudotuberculosis ( ) d ( ) d + d d d d d d ersinia rohdei d ( ) + d d d d okenella regensburgei bjaśnienia: + = reakcja dodatnia (+) = reakcja przeważnie dodatnia = reakcja ujemna ( ) = reakcja przeważnie ujemna d = reakcja zmienna H a b X