Endokrinní disruptory ve vodních ekosystémech R studie vlivu brn nské aglomerace Mgr. Veronika Jálová RECETOX, P F MU
Projevy endokrinní disrupce u vodních ivo ich malformace pohlavních orgán feminizace samc ryb (estrogenní látky ve výpustích OV) maskulinizace samic ryb (tributylcín, pod výpust mi z papíren) zm n ný pom r pohlaví sní ená plodnost, kvalita a kvantita spermatu sní ená líhnivost sní ené p e ívání mlá at zm ny chování vymizení populací
istírny odpadních vod ( OV) na vstupu r zné látky z domácího, pr myslového a zem d lského odpadu na výstupu sm s látek, v etn áste n odbouraných látek z odpadních vod a metabolit vznikajících b hem procesu i t ní odpadních vod jeden z hlavních zdroj zne i t ní vody estrogenními látkami Vliv OV na rybí populace intersexualita a reproduk ní problémy spojené s expozicí odpadním vodám z OV zvý ená hladina vitelogeninu v plazm ryb estrogenní látky ve výpustích OV efekty p etrvávají v ekách n kolik kilometr od výpust OV
Hodnocení ED potenciálu environmentálních vzork Chemická analýza: analýza irokého spektra potenciálních endokrinních disruptor metody pro kvantifikaci jen u n kterých látek náro né na vybavení, as neposkytuje informace o biologických efektech komplexních sm sí nezohled uje mo né interakce mezi jednotlivými látkami Specifické biotesty: celková biologická aktivita látek ve sm si se specifickými mechanismy p sobení mohou indikovat p ítomnost toxikologicky významných látek, které nebyly analyticky stanoveny zohled ují mo né interakce látek ve sm sích screening v t ího mno ství vzork, rychlé, citlivé, relativn levné
Vliv brn nské aglomerace na zne i t ní í ního ekosystému endokrinními disruptory projektu M MT NPVII 2B836 ENVISCREEN: Nové molekulárn biologické a biochemické metody pro monitoring estrogen a dal ích chemických endokrinních disruptor projekt M MT 2B693: Nové postupy pro sledování vlivu m stských aglomerací na kvalitativní parametry fluviálního prost edí s d razem na identifikaci endokrinních látek propojení chemického a biologického monitoringu za ú elem získání komplexní charakteristiky zne i t ní vodního prost edí na vybraných lokalitách v rámci m stské aglomerace Brno, se zam ením primárn na endokrinní disruptory r zné typy vzork aktivní / pasivní baterie in vitro test látky se specifickým mechanismem p sobení
Vliv brn nské aglomerace na zne i t ní í ního ekosystému endokrinními disruptory BRNO: 4 obyvatel, velká OV, pr mysl 9 odb rových lokalit (Svratka, Svitava, Bobrava) vzorkování: 27-28 ( erven, íjen)
Typy odebíraných vzorků Ø sedimenty integrativní měřítko expozice vodního ekosystému; uložiště/zdroj řady environmentálních polutantů Ø voda aktivní vzorkování/jednorázové bodové odběry; nezbytné velké objemy vzorkované vody pro dosažení detekčních limitů, mohou být zmeškány epizodní události automaticky odebírané směsné vzorky odpadní vody z ČOV (přítok, odtok) roční studie Ø voda pasivní vzorkování; průměrné koncentrace kontaminantů včetně epizodních událostí, detekce stopových, přesto ekotoxikologicky relevantních koncentrací kontaminantů Schůze Čs. biologické společnosti, Brno, 15.4.29
Pasivní vzorkova e SPMD (Semipermeable Membrane Device): hydrofobní kontaminanty (PAHs, PCBs, OCPs, PCDD/Fs, alkylované fenoly, organofosfátové insekticidy, pyrethroidní insekticidy, neutrální organokovové látky, n které heterocyklické aromatické látky) stanovení p ítomnosti, ale i biodostupnosti a biokoncentra ního potenciálu organických kontaminant POCIS (Polar Organic Chemical Integrative Sampler): hydrofilní kontaminanty (pesticidy, p irozené a syntetické hormony, rezidua lé iv aj.) mimikují expozici vodních organism rozpu t ným látkám bez problém spojených s metabolismem, vylu ováním látek, úmrtností testovaných organism
Vliv OV na zne i t ní í ního ekosystému automaticky odebírané sm sné vzorky odpadní vody, pasivní vzorkova e CYTOTOXICITA vysoká cytotoxicita p ítoku (n které vzorky vykazovaly 25% cytotoxicitu i po 25-násobném z ed ní) voda na odtoku v t inou ádný cytotoxický efekt pasivní vzorkova e - efektivní sní ení cytotoxicity po úprav odpadní vody v OV ivotaschopnost (%) 12 1 8 6 4 2 1:24 1:8 1:3 1:1 1:24 1:8 1:3 1:1 1:24 1:8 1:3 1:1 1:24 1:8 1:3 1:1 1:24 1:8 1:3 1:1 1:24 1:8 1:3 1:1 MeOH 4.7.7 P ítok 4.7.7 Odtok MeOH 15.8.7 P ítok 15.8.7 Odtok 11.9.7 P ítok 11.9.7 Odtok MeOHLuc ed ní vzork AKTIVITA DIOXINOVÉHO TYPU mírná dioxinová aktivita u surové odpadní vody sní ení aktivity i t ním vody
Vliv OV na zne i t ní í ního ekosystému ESTROGENNÍ A ANDROGENNÍ AKTIVITA odpadní voda, POCIS sní ení estrogenní i androgenní aktivity po pr chodu OV EEQ (ng E2/L) 16 14 12 1 8 6 4 2 9.5.27 1.5.27 6.6.27 3.7.27 4.7.27 15.8.27 11.9.27 Datum odb ru OV - surová odpadní voda OV - voda na odtoku 16.1.27 7.11.27 6.12.27 9.1.28 7.2.28 5.3.28 3.4.28 ANTIESTROGENNÍ AKTIVITA odpadní voda antiestrogenita pouze u n kterých vzork vody na odtoku SPMD vy í antiestrogenní aktivita na výstupu OV ne na vstupu ANTIANDROGENNÍ AKTIVITA POCIS antiandrogenita pouze na vstupu SPMD vy í antiandrogenní aktivita na vstupu EEQ (ng E2/membrána) 45 4 35 3 25 2 15 1 5 POCIS OV - vstup jaro 27 podzim 27 jaro 28 podzim 28 OV - výstup
Zne i t ní povrchové vody sedimenty, pasivní vzorkova e CYTOTOXICITA na v t in lokalit v sedimentech i v pasivních vzorkova ích nejv t í cytotoxicita - lokality na Svratce pod Brnem, p edev ím OV (u pasivních vzorkova ) Cytotoxicita (1/IC5) v sedimentech 6 5 4 3 2 1 Bílovice nad Svitavou Svitava nad soutokem Svratka, Kníni ky Svratka nad soutokem jaro 27 podzim 27 jaro 28 podzim 28 OV Mod ice Svratka, Rajhradice Svratka, idlochovice Bobrava 9 8 Sedimenty (jaro 27) TEQbio (ng TCDD/g sedimentu) 7 6 5 4 3 2 1 AKTIVITA DIOXINOVÉHO TYPU na v ech lokalitách POCIS nejni í indukce nejv t í aktivita lokality na Svratce Bílovice nad Svitavou Svitava nad soutokem Svratka nad soutokem OV Mod ice Svratka, Rajhradice Svratka, idlochovice Bobrava
Zne i t ní povrchové vody ESTROGENNÍ A ANDROGENNÍ AKTIVITA sedimenty a SPMD nedetekována estrogenní aktivita POCIS mírná estrogenní aktivita, nejvy í u OV Mod ice sedimenty mírná androgenní aktivita na n kterých lokalitách ANTIESTROGENNÍ AKTIVITA na v ech lokalitách v sedimentech i pasivních vzorkova ích Index antiestrogenity (1/IC2) 18 16 14 12 1 8 6 4 2 Sedimenty (podzim 27) Bílovice nad Svitavou Svitava nad soutokem Svratka, Kníni ky Svratka nad soutokem OV Mod ice Svratka, Rajhradice Svratka, idlochovice Bobrava Index antiestrogenity (1/IC5) 45 4 35 3 25 2 15 1 5 Bílovice nad Svitavou Svitava nad soutokem Pasivní vzorkova e (podzim 27) Svratka, Kníni ky Svratka nad soutokem OV - vstup OV - výstup Svratka, Rajhradice Svratka, idlochovice SPMD POCIS Bobrava
Zne i t ní povrchové vody ANTIANDROGENNÍ AKTIVITA detekována na p evá né ásti lokalit vy í antiandrogenní aktivity podzim 27 Svratka pod Brnem vy í aktivity ne Svitava Index antiandrogenity (1/IC5) 6 5 4 3 2 1 Sedimenty jaro 27 podzim 27 Index antiandrogenity (1/IC5) 3 25 2 15 1 5 jaro 27 podzim 27 SPMD Bilovice nad Svitavou Svitava nad soutokem Svratka, Kníni ky Svratka nad soutokem OV Mod ice Svratka, Rajhradice Svratka, idlochovice Bobrava Bílovice nad Svitavou Svitava nad soutokem Svratka, Kníni ky Svratka nad soutokem OV - vstup OV - výstup Svratka, Rajhradice Svratka, idlochovice Bobrava
Shrnutí výsledk významná CYTOTOXICITA korelující s vysokými koncentracemi polutant stanovenými analyticky p ítomnost XENOANDROGEN a XENOESTROGEN ve vzorcích surové odpadní vody z OV (koncentrace srovnatelné se zahrani ními daty) vysoká elimina ní schopnost OV (cytotoxicita, xenoandrogeny 96-99%, xenoestrogeny 81-99%) AKTIVITA DIOXINOVÉHO TYPU ve v ech matricích (sedimenty, SPMD, POCIS) p ítomnost lipofilních a polárních látek schopných indukce aryl hydrokarbonového receptoru, korelace s chemickými analýzami ANTIESTROGENNÍ a ANTIANDROGENNÍ aktivity detekovány ve v t in vzork (sediment, SPMD a POCIS) p ítomnost antiestrogenních a antiandrogenních látek
ZÁV R komplexní p ístup umo uje stanovení p ítomnosti a distribuce látek se specifickým mechanismem p sobení v r zných slo kách í ního ekosystému ke sledovaným biologickým aktivitám p ispívají hydrofobní i hydrofilní látky komplementarita výsledk in vitro test a chemických analýz aplikovatelné pro r zné typy matric (environmentálních sm sí)
Pod kování: Projekt M MT 2B693, INCHEMBIOL 21622412, ENVISCREEN 2B836 Zdravotní ústav se sídlem v Ostrav eský hydrometeorologický ústav, Brno Recetox P F MU Mgr. Klára Hilscherová, Ph.D., Mgr. Barbora Jedli ková, Bc. Martina Ondrá ková D KUJI ZA POZORNOST