Mezilaboratorní porovnávací

Mezilaboratorní porovnávací zkoušky ÚKZÚZ ELISA 2016 Kvalitativní detekce virové infekce v rostlinném materiálu Poskytovatel zkoušení způsobilosti č. 7005 akreditovaný ČIA podle ČSN EN ISO/IEC 17043 ÚKZÚZ, Národní referenční laboratoř, Oddělení mezilaboratorních porovnávacích zkoušek, Hroznová 2, 656 06 Brno

Ústřední kontrolní a zkušební ústav zemědělský Oddělení mezilaboratorních porovnávacích zkoušek Poskytovatel zkoušení způsobilosti č.7005 akreditovaný ČIA podle ČSN EN ISO/IEC 17043 Mezilaboratorní porovnávací zkoušky ÚKZÚZ pro analytické laboratoře Výsledky v roce 2016 Označení programu: MPZ ÚKZÚZ ELISA - 2016 Kvalitativní detekce virové infekce v rostlinném materiálu Osoba autorizující výsledkové přehledy: RNDr. Jaroslava Srnková, vedoucí oddělení Datum: 3. 5. 2016 Podpis: Kontaktní údaje: RNDr. Jaroslava Srnková tel.: 543 548 220, e-mail: mpz@ukzuz.cz ÚKZÚZ, Národní referenční laboratoř, Oddělení mezilaboratorních porovnávacích zkoušek Hroznová 2, 656 06 Brno

Obsah Mezilaboratorní porovnávací zkoušky ÚKZÚZ ELISA kvalitativní detekce virové infekce v rostlinném materiálu (MPZ ÚKZÚZ ELISA) Str. 1 Stručné informace o MPZ ÚKZÚZ ELISA 1 1.1 Podmínky MPZ ÚKZÚZ ELISA 1 1.2 Příprava vzorků 1 1.3 Předávání výsledků - výsledkové protokoly 2 2 Informace k MPZ ÚKZÚZ ELISA v roce 2016 3 2.1 Průvodní dopis účastníkům MPZ ÚKZÚZ ELISA 3 2.2 Rozeslané vzorky 4 2.3 Seznam zúčastněných laboratoří 4 3 Výsledky MPZ ÚKZÚZ ELISA v roce 2016 4

Mezilaboratorní porovnávací zkoušky ÚKZÚZ kvalitativní detekce virové infekce v rostlinném materiálu (MPZ ÚKZÚZ ELISA) 1 Stručné informace o MPZ ÚKZÚZ ELISA 1.1 Podmínky MPZ ÚKZÚZ ELISA Náplň a organizace MPZ ÚKZÚZ vychází jednak z požadavků ČIA na akreditované poskytovatele programů zkoušení způsobilosti podle ČSN EN ISO/IEC 17043 Posuzování shody Všeobecné požadavky na zkoušení způsobilosti a jednak z požadavků účastníků. Účelem porovnávacích zkoušek je především zajistit externí kontrolu kvality analytické laboratoře, pomoc při validaci modifikovaných postupů apod. Cílem porovnávacích zkoušek je ukázat odchylky i rozptyl při standardní práci laboratoře, proto by i vzorky mezilaboratorního porovnání měly být zpracovávány zcela standardním postupem. V rámci MPZ ÚKZÚZ ELISA na kvalitativní detekci virové infekce v rostlinném materiálu jsou od roku 2012 rozesílány lyofilizované vzorky jádrovin a peckovin. Množství (0,40 g v každé mikrozkumavce) je dostatečné pro provedení analýz. Termín pro zaslání výsledků je vždy uveden v průvodním dopise. Všechny došlé protokoly se archivují. V rámci MPZ ÚKZÚZ ELISA je zaručena úplná anonymita účastníků systémem číselného kódování. Přidělené kódové číslo je číslo laboratoře v databázi účastníků a slouží k předávání výsledků laboratoře k vyhodnocení a orientaci účastníků ve výsledkové tabulce. Pořadí laboratoří uvedených v seznamu účastníků nemá žádný vztah k přiděleným kódovým číslům. Zpracované výsledky MPZ ÚKZÚZ ELISA jsou rozesílány v pdf formátu pouze v digitální podobě a jsou předány účastníkům bez komentáře. Některé činnosti potřebné k realizaci MPZ ELISA mohou být zadány kompetentním subdodavatelům, za tyto práce odpovídá OMPZ. Konkrétně se jedná o provedení testů homogenity, subdodavatelsky zajištěných v NRL ÚKZÚZ, ve zkušební laboratoři č. 1071 akreditované ČIA. MPZ ÚKZÚZ ELISA není uveden ve výčtu programů v příloze k osvědčení o akreditaci č. 109/2013 akreditovaného subjektu č. 7005. 1.2 Příprava vzorků Pro MPZ ÚKZÚZ ELISA byly použity listy jádrovin (jeden pozitivní vzorek na virus ApMV a jeden vzorek na tento virus negativní) a listy peckovin (dva vzorky pozitivní a jeden vzorek negativní na virus ApMV). Vzorky jádrovin dodala Ing. Jana Suchá z VŠÚO Holovousy. Ing. Věra Holleinová ze Zahradnické fakulty Mendlovy univerzity v Lednici poskytla vzorky peckovin. 1

Listy jádrovin i peckovin byly upraveny v lyofilizátoru. Bez předchozího zamražení byly listy umístěny do otevřených mikrotenových sáčků tak, aby jejich vrstva byla přibližně 1,5 cm. Teplota poliček v lyofilizátoru byla nastavena na 20 C, tlak 0,1 mba, doba lyofilizace 24 hodin. K lyofilizaci byl použit lyofilizátor ALPHA 1. Po skončení lyofilizace byly listy zhomogenizovány v celém objemu na homogenizátoru RETCH GM 200 a následně byly provedeny testy homogenity. Po provedení testů homogenity byly vzorky rozváženy po 0,40 g do mikrozkumavek Eppendorf a takto uchovávány v mrazničce při teplotě -80 o C. Před rozesláním účastníkům byly vzorky připravené v roce 2014 znovu přetestovány. Vzorky byly testovány dle JPP ÚKZÚZ [1] za použití diagnostiky Bioreba AG. Všechny negativní vzorky vykázaly negativní reakci a všechny pozitivní vzorky vykázaly pozitivní reakci na ApMV. 1.3 Předávání výsledků - výsledkové protokoly Vzorek je označen vždy číslem a písmenem J (jádrovina) nebo P (peckovina). Po analýze vzorků je výsledkový protokol vyplněn následujícím způsobem: pozitivní nález +, negativní nález. Při předávání výsledků prostřednictvím elektronické pošty je nezbytné zaslat organizátorovi vyplněné a naskenované výsledkové formuláře opatřené razítkem laboratoře a podpisem odpovědného pracovníka. Tyto formuláře slouží pro případné reklamace ze strany účastníka a pro účely archivace. Literatura: 1. Bartušková I., Ryšavý P., Kopotová J., Suchomelová M., Stehlíková J.: Jednotné pracovní postupy ÚKZÚZ Stanovení rostlinných viróz metodou DAS ELISA a stanovení přítomnosti GMO metodou PCR, ÚKZÚZ, Brno 2007 2

2 Informace k MPZ ÚKZÚZ ELISA 2016 2.1 Průvodní dopis účastníkům MPZ ÚKZÚZ ELISA 3

2.2 Rozeslané vzorky Byly použity vzorky, které byly upraveny liofilizací v roce 2014. Lyofilizované vzorky byly uchovány po celou dobu v mrazničce při teplotě -80 C. V měsíci únoru 2016 byly vzorky opětovně otestovány na pracovišti OMB Brno. vzorek vzorek vzorek vzorek vzorek jádrovina pozitivní na virus ApMV jádrovina negativní na virus ApMV peckovina pozitivní na virus ApMV peckovina pozitivní na virus ApMV peckovina negativní na virus ApMV 2.3 Seznam zúčastněných laboratoří Chmelařský institut s.r.o., Žatec, ČR Mendelova univerzita v Brně, Zahradnická fakulta, Lednice, ČR ÚKZÚZ Brno, oddělení OMB, ČR ÚKZÚZ Olomouc, diagnostická laboratoř, referát virologie, ČR V. F. Humulus, s.r.o., Žatec, ČR Výzkumný a šlechtitelský ústav ovocnářský Holovousy s.r.o., ČR 3 Výsledky MPZ ÚKZÚZ ELISA 2016 Výsledky jsou zpracovány v tabulce č.1. Pracoviště jsou uvedena pod kódovými čísly, pod kterými se porovnání zúčastnila. V prvním řádku je vyznačen druh a přítomnost či nepřítomnost viru ApMV ve, který byl laboratoři zaslán, ve druhém řádku je zjištění laboratoře. Žádná z laboratoří neuvedla neshodný výsledek. 4

Tabulka č.1: Výsledková tabulka MPZ ÚKZÚZ - ELISA 2016 Kódové číslo Vzorek č. 1 laboratoře Označení Označení Vzorek č. 2 01 vz.č.1 02 vz.č.1 03 vz.č.1 04 vz.č.1 05 vz.č.1 06 vz.č.1 Legenda vzorek jádrovina pozitivní vzorek jádrovina negativní vzorek peckovina pozitivní vzorek peckovina pozitivní vzorek peckovina negativní Vzorek č. 3 Označení Vzorek č. 4 Označení Vzorek č. 5 Označení 5

Mezilaboratorní porovnávací zkoušky ÚKZÚZ ELISA Výsledky v roce 2016 Vydal : Ústřední kontrolní a zkušební ústav zemědělský v roce 2016 Odpovědný redaktor : RNDr. Jaroslava Srnková Technická spolupráce: Hana Srbová Počet stran: 5 Texty neprošly jazykovou úpravou.