INTENZIFIKACE PRODUKCE BIOPLYNU AKTIVACÍ ULTRAZVUKEM Ing. Petr Daněk Školitel: Prof. Ing. Pavel Ditl DrSC. Abstrakt: Článek se zabývá možností využití stimulačního ultrazvukového působení (v oblasti nižší, než samotná mez kavitace) na směsné kultury mikroorganismů produkujících bioplyn v anaerobních submerzních bioreaktorech. Cílem práce je prokázání vlivu účinku ultrazvuku, nalezení jeho optimálních parametrů (výkon, frekvence, intenzita a doba působení). Experimenty jsou prováděny v poloprovozním měřítku za použití dvou totožných fermentorů (neošetřený vs. ošetřený fermentor). Závěrem práce pak bude komplexní posouzení vlivu ultrazvuku na celkovou produkci bioplynu/metanu. Klíčová slova: Bioplyn, anaerobní digesce, intenzita ultrazvuku, mez kavitace, substrát, inokulum, 1. Úvod Bioplyn a bioplynové systémy představují energetické zdroje, které vykazují pozitivní přínosy pro ochranu a tvorbu ţivotního prostředí. Přestoţe však bioplyn není zatím schopen vytlačit fosilní paliva z jejich dominantního postavení na trhu s energiemi, má na rozdíl od nich neomezené perspektivy pro vyuţití do budoucna. Bioplynové systémy ve všech moţných uspořádání pracují jako obnovitelné energetické zdroje. 1.1 Princip vzniku bioplynu, jednotlivé fáze procesu Princip tvorby bioplynu není ţádným novodobým vynálezem, je starý jako ţivot na naší planetě (mikroorganismy produkující bioplyn anaerobní byly přítomny na planetě Zemi mnoho let předtím, neţ se objevil první kyslík v atmosféře. Teprve poté byl zahájen jejích symbiotický vývoj s mikroorganismy aerobními). Zatímco slunce podporuje růst všeho ţivého (dodává potřebnou energii k fotosyntéze), organická hmota tvořená vodou, tuky, bílkovinami, uhlovodíky a minerálními látkami se při odumírání rozkládá na své původní sloţky: vodu, oxid uhličitý a minerály. Při tomto rozkladu se uvolňuje energie. K anaerobnímu vyhnívání organických látek dochází bez přístupu vzduchu ve vlhkém prostředí prostřednictvím methanogenních bakterií. Na rozdíl od procesu tlení nevzniká při vyhnívání teplo, nýbrţ metan (kromě metanu se tvoří voda a oxid uhličitý, stopové prvky a humusové látky). Anaerobní digesce (synonymum: metanizace): je biologický děj rozkladu organické hmoty probíhající za nepřístupu kyslíku (opakem anaerobního děje je děj aerobní, který naopak přítomnost kyslík vyţaduje) na obr. 1.2 je uvedena hm. bilance anaerobního a aerobního procesu. Směsná kultura mikroorganismů postupně v několika fázích rozkládá organickou hmotu. Schéma vzniku bioplynu z biologicky rozloţitelných odpadů, včetně jednotlivých fází obr. 1.1.
Obr. 1.1 Schéma vzniku bioplynu (Straka, 2006) 1.2 Intenzifikace procesu přehled používaných metod Biochemické aspekty a fyzikálně chemické aspekty: zvýšení biologické rozloţitelnosti substrátu je zaloţeno ve většině případů na zpřístupnění substrátu enzymovému rozkladu (zmenšením velikosti částic dostupnými metodami, dochází k podstatnému zvětšení povrchu). Přehled moţných způsobů úprav popisuje schéma na obr. 1.3 (LYSATEC GmbH, Amalgerol, Gambi AS). Obr. 1.2 Hm. bilance anaerobního a aerobního procesu
Obr. 1.3 Základní přehled možností intenzifikací procesu 2. Vliv aktivace ultrazvukem Předpokladem je, ţe se zvolí taková intenzita ultrazvuku (uţívá se i termínu: hustota toku energie), která nezpůsobí kavitaci, tj. buňky nejsou porušeny (nedochází k implozi buněčné stěny buněčný lyzát zůstává uvnitř buňky). Ultrazvuk má za úkol v tomto případě pouze povzbudit - stimulovat - aktivitu mikroorganismů, která způsobí zvýšení tvorby bioplynu a urychlení celého procesu fermentace. Mezi nejdůleţitější parametry ultrazvuku (US) řadíme: Tabulka 1. Parametry ultrazvuku VÝKON P [W] energie spotřebovaná v průběhu US ošetření za jednotku času [s] FREKVENCE f [khz] INTENZITA (HUSTOTA TOKU [W.cm -2 výkon ultrazvuku - P [W] vztaţený ] ENERGIE) I na jednotku plochy trnu - A [cm 2 ] DOBA ZDRŢENÍ V KYVETĚ t [s] t = V kyveta /V. CELKOVÁ DOBA PŮSOBENÍ [min] US t celk t celk. =V ferm.n/v. SPECIFICKÝ VÝKON Pv [W.cm -3 výkon US vztaţený na jednotku ] objemu (objem kyvety - V [cm 3 ]) Přičemţ intenzita ultrazvuku hraje velmi důleţitou roli v určení, zda se bude jednat o dezintegraci, či o pouhou stimulaci mikroorganismů. Je známo, ţe práh kavitace u vody činí 10 W.cm -2 (Lorimer 2003). Experimenty jsou proto uskutečněny maximálně do této hranice (meze prahu kavitace). 2.1 Rešerše problematiky aktivace ultrazvukem Dosavadní výsledky v pouţití ultrazvuku, jakoţto v předčištění odpadních vod pojednává tab. 2. Ultrazvuku zde bylo pouţito v laboratorních a pilotních podmínkách, nechybí zde ani plné vyuţití (Anders, 2005), Lyzát buněk (Tiehm et al., 1997; Chu et al. 2001, Brown et al., 2003), zvýšená vyšší hodnoty CHSK COD (Tiehm et al., 1997; Chu et al. roku 2001; Lafitte-Trouqu'e a Forster, 2002; Gronroos et al., 2005), zvýšení produkce bioplynu (Tiehm et al. Roku 2001; Chu et al., 2002; Rooksby, 2001, Brown et al. 2003; Gronroos et al., 2005).
Tabulka 2. Rešerše problematiky Reference N/O a scod b [mg/l, %] VS změna c [%] Produkce bioplynu Frekvence [khz] Příkon/ob jem d [W/ml] Celk. doba působení [s] Specifický výkon e [kwh/m3] Měřítko Tiehm N 630 45,8 pilot 1997 O 2270 50,3 negativní 31 3,6 kw 64 0,064 kwh pilot O 20% zvýšení 20 0,33 7200 660 lab Tiehm N 21,5 lab 2001 O 27,3 zvýšení 41 1800 lab O Increase 33,7 zvýšení 41 9000 lab Chu 2002 O zvýšení 20 0,33 1200 110 lab Laffite- O 354% None zegativní 23 0,47 5400 12 lab Trouque Rooksby N 46 full O 78,7 25-50 % 20 5,3 kw 1,5 full Gronroose O 10-20 % 27 0,3 1800 lab Odmark O 100-400 % 20 full Anders O 375 % 13 % 20 0,42 2160 8,4 lab Bougrier N 5,8 % 3,1 lab O 41 % 36 60 % 20 0,45 lab Braguglia N 30 lab O 8 % 35 26 % 24 0,51 120 0,7 lab N 36 lab O 8 % 39 36 % 24 0,51 240 1,4 lab Climent O 500 % < 7 % 20 3,75 10-987 40 000 kj/kg Nezcaj N 187 O 1410 31 84 % 20 60-420 lab Wunsch O 44 % 20 10-90 9 lab a - neošetřeno/ošetřeno (N/O) b - jednotky [mg.l -1 ], pokud není specifikováno, pak hodnota v [%] c - jednotky [ml.g -1 ] VS, nebo [%] d - jednotky [W.ml -1 ], pokud není specifikováno, pak hodnota v[ %] e - jednotky [kwh.m -3 ],, pokud není specifikováno, pak [kwh] nebo [kj.kg -1 ] lab 2.2. Růstová křivka mikroorganismů, aplikace ultrazvuku Samotná produkce bioplynu závisí na růstové křivce mikroorganismů, ta se dělí do několika fází (Ditl, 1985) obr. 2.1: Obr. 2.1. Růstová křivka mikroorganismů
Tabulka 3. Jednotlivé fáze růstové křivky 1. LAG FÁZE mikroorganismy se postupně adaptují na dané podmínky 2. FÁZE ZRYCHLENÉHO RŮSTU přizpůsobené mikroorganismy se začínají množit 3. FÁZE EXPONENCIÁLNÍHO RŮSTU zcela přizpůsobené mikroorganismy se silně mnoţí, mají dostatečné mnoţství ţivin 4. růst mikroorganismů se zpomaluje vlivem nedostatečného FÁZE ZPOMALENÉHO RŮSTU mnoţství ţivin 5. vlivem nedostatku ţivin je počet vznikajících a zanikajících STACIONÁRNÍ FÁZE mikroorganismů v rovnováze 6. Absolutní nedostatek ţivin způsobuje postupné odumírání a rozklad mikroorganismů Aplikace ultrazvuku (sonifikace) probíhá ve druhé fázi, tj. ve fázi zrychleného růstu, kdy se přizpůsobené mikroorganismy začínají silně množit (v našich experimentech cca po 20 hodinách). Kinetiku exponenciální fáze popisuje rovnice (1): dx Rx exp X dt (1), kde rychlostní konstanta μexp dosahuje v této fázi maximálních hodnot (μexp = μmax). Rychlostní konstantu lze z rovnice (1) matematicky odvodit jako: 1 dx 1 R X X dt X (2). 2.3 Experimentální zařízení Základní schéma zařízení na obr. 2.2. Jednotlivé experimenty jsou realizovány v poloprovozním měřítku - za pouţití dvou totoţných fermentorů (F a G) - k porovnání vlivu US (první bez aplikace US, tzv. neošetřený fermentor; druhý s aplikací US, tzv. ošetřený fermentor). Místem realizace experimentů: Mikrobiologický ústav AV ČR (MBÚ Praha, Krč). Obr. 2.2. Základní schéma zařízení (ošetřený fermentor), fotografie zařízení (vpravo nahoře), detail vnitřku fermentoru (vpravo dole) Pozn.: Podrobný popis celého zařízení, včetně jednotlivých částí (Daněk 2009).
2.4 Substrát maximální zatížení fermentoru, testované parametry ultrazvuku Jako nejvhodnějším substrátem se ukázala kukuřičná siláţ (předtím probíhaly experimenty s drůbeţí kejdou, travní směsí, kombinací jmenovaných). Ovšem první experimenty s kukuřičnou siláţí nebyly příliš úspěšné z důvodu tzv. přetíţení fermentoru. Jde o to, ţe bakterie produkující metan mají svá optima většinou v rozmezí ph 6,2-7,8. Dojde-li k poklesu ph pod hranici 6,0, dochází k inhibici (zániku) celého procesu produkce. Námi zvolený poměr substrátu a inokula (inokulum: anaerobní kal obsahující funkční polykultury anaerobních mikroorganismů odebírán z ČOV Česká Lípa) byl 3:1 (vztaţeno hm. na TS). Tento poměr způsobil, ţe v acidogenní fázi se vytvořilo velké mnoţství kyseliny octové s následným prudkým poklesem ph pod přípustnou hodnotu. Během experimentu se takřka netvořil ţádný metan, ovšem hodnota oxidu uhličitého dosáhla téměř 95%. Bylo proto nutné, stanovit maximálně moţné zatíţení fermentoru v laboratorních podmínkách (na VŠCHT). Z dílčího experimentu, a z něj naměřených hodnot, bylo zjištěno, ţe nejvhodnějším poměrem pro produkci bioplynu je poměr inokula a substrátu 20:1. Ošetření inokula a části substrátu (extrakt z kukuřičné siláţe) ultrazvukem probíhá, cca po 20. hodinách od samotného spuštění experimentu (po uvedení fermentoru do činnosti, včetně spuštění monitorovacího a kontrolního systému) Ošetření nastalo ve fázi zrychleného růstu anaerobních mikroorganismů (viz obr. 2.1). V prvotních realizacích jednotlivých experimentů se vyuţívalo US generátoru - BANDELIN CO, typ SONOPULS HD 3400 (maximální výkon 400 W, frekvence 20 khz, možnost volby amplitudy (10 100%)), jehoţ minimální moţné nastavení intenzity US bylo 10,2 W.cm -2 (dáno minimálním nastavením výkonu a velikostí plochy trnu US). Tato hranice byla hraniční v mezi kavitace. Tabulka 4. Nastavené parametry u ultrazvukového generátoru BANDELIN, typ SONOPULS 3400 FREKVENCE f: [khz] 20 PRŮMĚR TRNU D t : [cm] 2,5 VÝKON (DLE VOLBY AMPLITUDY) P: [W] 50,2 INTENZITA ULTRAZVUKU I: [W.cm-2] 10,2 OBJEM KYVETY V kyvety : [ml] 64,0 PRŮTOK SMĚSI V: [ml.s -1 ] 11,0 DOBA ZDRŢENÍ V KYVETĚ t: [s] 5,8 CELKOVÝ ČAS t celk : [min] 115,2 Průtok směsi volen tak, aby se doba zdrţení v kyvetě pohybovala v rozmezí 5-6 sekund (velikost průtoku limitována fyzikálními vlastnostmi přečerpávané směsi) - celkový čas ošetření předběţně stanoven na 2 hodiny.
Obr. 2.3 Reálné pracovní uskupení při aplikaci ultrazvuku BANDELIN, typ SONOPULS 3400, včetně jednotlivých detailů V laboratořích mikrobiologického ústavu se v současné chvíli vyuţívá sonifikačního trnu typu BANDELIN M 1000 (max. výkon 1000 W rozsah nastavitelnosti 0 100%, frekvence 40 khz), která umoţňuje plynulé nastavení intenzity ultrazvuku bezpečně pod mezí kavitace, maximální dosaţitelná hodnota intenzity US činí cca 0,5 W/cm 2 (připomeňme si, ţe hranice meze kavitace,dle Lorimer 2003, je 10 W.cm -2 ). Dle doporučení projektu BIOFERM (v projektu byly pomocí US provedeny experimenty s červeným vínem za účelem zkrácení procesu kvašení experiment popisující pozitivní vliv US na růst kvasinek rodu Saccharomyces cerevisiae vini rovněž anaerobní proces) je hledané rozmezí hodnoty intenzity ultrazvuku v rozpětí 0,127 0,6 W/cm 2, doporučená doba zdrţení a jiné (Svitáková 2006). Toto rozmezí hodnot vyplývá i z rešerší v tab. 2. Tabulka 5. Nastavené parametry u BANDELIN M 1000 FREKVENCE f: [khz] 40 PLOCHA US TRNU A trnu : [cm 2 ] 2270 VÝKON P: [W] 300 SONIFIKOVANÝ OBJEM V kyvety : [ml] 2800 INTENZITA I: [W/cm 2 ] 0,132 DOBA ZDRŢENÍ INOKULA (PRŮTOK ČERPADLA cca 1 l/min) t: CELKOVÁ DOBA PŮSOBENÍ ULTRAZVUKU t celk. : ČAS OŠETŘENÍ INOKULA US: [min] 2,8 [min] 80 po cca 20 hodinách od začátku experimentu Obr. 2.4 Reálné pracovní uskupení při aplikaci ultrazvuku BANDELIN M 1000, včetně detailu sonifikačního zařízení
3. Výsledky Při výpočtu celkové produkce (kumulativní křivky) bioplynu a metanu bylo pouţito sumačního vzorce (3), (4): V BIOPLYN. V dt i. V i t i (3),.. VCH4 V xch4 dt Vi xch4i i Vypočtený objem bioplynu (metanu) bylo nutné, dle základní stavové rovnice, přepočítat na objem plynu při teplotě: 0 C, tlaku: 101,325 kpa na tzv. Nl. Naměřené hodnoty experimentů jsou uvedeny v tab. 6. 3.1 Porovnání jednotlivých experimentů: intenzita US = 10,2 W.cm -2 (zařízení BANDELIN, typ SONOPULS 3400) t i (4). Obr. 3.1 Kumulativní křivka metanu srovnání všech experimentů s I = 10,2 W.cm -2 Obr. 3.2 Kumulativní křivka bioplynu srovnání všech experimentů s I = 10,2 W.cm -2
U následujících grafů na obr. 3.1, 3.2 je patrný široký rozptyl naměřených hodnot při zachování stejných parametrů ultrazvuku. Obecně vyšší výtěţnost byla generována z F fermentoru, niţší pak z G fermentoru. Jak jiţ bylo uvedeno dříve, fementory mají totoţnou konstrukci, totoţnou kontrolu procesu. Během zakládání jednotlivých experimentů bylo dbáno na dodrţení naprosto stejných poměrů inokula a substrátu (totoţné mnoţství a jejich zdroje odběru). Start fermentačního procesu probíhal vţdy ve stejný čas, totoţné počáteční nastavení mezních hodnot ph). Tabulka 6. Porovnání všech nejdůležitějších hodnot v experimentech ENZYMATICKÁ AKTIVITA 10,2 W/cm 2 - BANDELIN, typ SONOPULS 3400 EXPERIMENT I. I. II. III. III. FERMENTOR (F vs. G) F G F F G APLIKACE ULTRAZVUKU US bez US bez US US bez US PRAC. OBJEM FERMENT: [l] 75 75 75 75 75 Dis. Energie [J.cm-3] 6,3 x x 6,3 x Celk. dis. Energie [kj] 395,7 x x 411,2 x VÝSLEDKY: PRODUKCE BIOPLYNU: [Nl/kgVS], 263,8 155,4 237,4 435,7 171,7 PRODUKCE METANU: [Nl/kgVS], 127,3 80,1 103,2 188,6 86,0 x CH4 max [%] 73,6 81,9 63,2 77,1 64,6 ZVÝŠENÍ PRODUKCE BIOPLYNU: [%] (ošetřený vs. neošetřený fermentor) I. F III.F *)časově souběţné anaerobní procesy I.G 69,8 * 180,4 II. F 11,1 83,5 III.G 53,6 153,8 * ZVÝŠENÍ PRODUKCE METANU: [%] (ošetřený vs. neošetřený fermentor) I. F III.F *)časově souběţné anaerobní procesy I.G 58,9 * 135,5 II. F 23,4 82,8 III.G 48,0 119,3 * Porovnáním experimentů z téhož fermentoru (časově nesouběžné anaerobní procesy) je patrný rozdíl ve zvýšení produkce bioplynu o 11,1% a metanu dokonce o 23,4% (ošetřený vs. neošetřený fermentor) Tab. 6. zvýrazněné hodnoty u produkcí plynů (Daněk 2009).
3.2 Porovnání jednotlivých experimentů, intenzita US < 0,5 W/cm 2, BANDELIN M 1000 Nastavením parametrů u sonifikačního zařízení BANDELIN M 1000 dle tab. 5. vedlo k opačnému efektu, a to, ţe u neošetřeného fermentoru byla produkce podstatně vyšší, neţ u fermentoru ošetřeného US. Negativní výsledek tohoto experimentu byl zřejmě zapříčiněn technickým problémem při přečerpávání kalu přes US smyčku ucpáním sacího koše následné předčasné ukončení, s krátkodobou kontaminací okolním vzduchem (kyslíkem), obr. 3.3 patrná kinetika celého procesu dle rovnice (1). 4. Závěry a doporučení 4.1 Závěry Obr. 3.3 Kumulativní křivka bioplynu V experimentech byl otestován vliv účinku ultrazvuku, vedoucího ke zvýšení produkce bioplynu (sonifikační zařízení BANDELIN, typ SONOPULS 3400, hodnota intenzity ultrazvuku 10,2 W/cm 2 ). Působení ultrazvuku v počáteční době vede ke stimulaci enzymatické aktivity, eventuelně urychlení přeměny bílkovin. Do této chvíle se osvědčily tyto parametry: Výkon ultrazvuku [W] 50 Frekvence [khz] 20 Intenzita ultrazvuku [W.cm-2] 10 Doba zdrţení v kyvetě [s] 6 Doba působení [min] 2 x 60 Start aplikace ultrazvuku: cca po 20 hodinách, v počátku fáze zrychleného růstu mikroorg.
Experimenty byly prováděny v poloprovozním měřítku za pouţití dvou totoţných fermentorů k porovnání vlivu ultrazvuku (první bez aplikace ultrazvuku, tzv. neošetřený fermentor; druhý s aplikací ultrazvuku, tzv. ošetřený fermentor). Z výsledků uvedených v tab. 6. je patrné zvýšení produkce bioplynu/metanu. U časově souběţných experimentů zvýšení bioplynu/metanu dosahuje hodnot 153/112%. Během experimentů se však prokázala nevhodná funkčnost jednoho z fermentorů (G). Z tohoto důvodu došlo k porovnání časově nesouběţných experimentů (experimenty probíhaly v témţe fermentoru), zde zvýšení produkce bioplynu dosahovalo 11%, metanu dokonce 23%. V současné době probíhá další experiment, který má potvrdit, či vyvrátit stimulační ultrazvukové působení dle tab. 5. 4.2 Doporučení: Provedení dalších sérií experimentů na výchozím substrátu (kukuřičná siláţ), v širším spektru hodnot intenzity ultrazvuku (za pomoci sonifikačního zařízení BANDELIN M 1000), např. dle projektu BIOFERM doporučené hodnoty: 0,127 0,6 W/cm 2, frekvence 20-40 khz, doba zdrţení min 2 min, či dle tabulky s rešerší 2. Ekonomické zhodnocení (energetickou bilanci, návratnost investice). Stanovení parametrů ultrazvuku pro různé druhy substrátu. Experimenty převést na reálná zařízení. Seznam symbolů A plocha [cm 2 ] D průměr trnu [cm] E energie ultrazvuku [kj] I intenzita ultrazvuku (hustota toku en.) [W.cm -2 ] m hmotnost [kg] n počet aplikací [ - ] P výkon ultrazvuku [W] P v specifický výkon [W.cm -3 ] R rychlost látkové přeměny [mol.(m 3.s) -1 ] t doba zdrţení v kyvetě [s] t celk celková doba působení US [min] TS obsah sušiny (total solids) [hm. %] US ultrazvuk (ultrasound) [ - ]
V objem [ml], V. objemový průtok [ml.s -1, Nl.hod -1 ] X hustota mikroorg. v tuhé fázi [kg.m -3 ] rychlostní konstatna [ - ] Dolní indexy: celk dis ferm celkový disipovaná fermentor Seznam použité literatury AMALGEROL. Vliv cílené aplikace Amalgerolu Classic na zvýšení výtěžnosti bioplynu ze stájové biomasy [online]. 2001 [cit. 2008-09-15]. Dostupný z WWW: <http://www.amalgerol.cz/bioplyn.html>. ANDERS, Ek. Ultrasonic treatment of sewage sludge in order to increase biogas yields. Linköping : [s.n.], 2005. ISBN LIU-TEMAV/TBM. s. 35. BOUGRIER, C, CARR`ERE, H. Solubilisation of waste-activated sludge by ultrasonic treatment. [s.l.] : Chemical Engineering Journal., 2005. s. 163-169. BRAGUGLIA, C.M., MININNI, G. Is sonication effective to improve biogas production and solids reduction in excess sludge digestion. Moncton : Managerial and Public Synergy, 2007. s. 699-704. CAMBI. Thermal Hydrolysis Process (THP) [online]. Norsko: 2001 [cit. 2008-09-15]. Dostupný z WWW: <http://www.cambi.no/wip4/>. CLIMENT, M. Effects of thermal and mechanical pretreatments of secondary sludge on biogas production under thermophilic conditions. [s.l.] : Chemical Engineering Journal., 2007. s. 335-342. DANĚK, Petr. Vliv aktivace ultrazvukem na zvýšení produkce bioplynu. Praha, 2009. 82 s. Diplomová práce. ČVUT v Praze. DITL, Pavel. Technika stavby reaktorů. 1. vyd. Praha : Ediční středisko Českého vysokého učení technického, 1985. s. 252. EDER, B. Practical experience of sewage sludge disintegration by ultrasound. Hamburg : Anitary Engineering 35, 2002. ISBN 3-930400-47-2. s. 16. GRONROOS, Antti. Ultrasound assisted method to increase soluble chemical oxygen demand (SCOD) of sewage sludge for digestion. [s.l.] : Ultrasonics Sonochemistry., 2005. s. 115-120. CHU, C.P. Observations on changes in ultrasonically treated waste-activated sludge. Taipei : 1Chemical Engineering Department, 2001. s. 1038-1046
SCHULZ, Heinz, EDER, Barbara. Bioplyn v praxi. 1. upr. vyd. Ostrava: Hel, 2004. ISBN 80-86167-21-6. s. 10-121. STRAKA, František. Bioplyn. 2. rozš. vyd. Praha: GAS s.r.o., 2006. ISBN 80-7328-090-6. s. 9-27. SVITÁKOVÁ, Petra. BIOWELL - Ultrasonic Bioreactors Sardinia. Praha : Czech Technical University, 2006. s. 18. LAFITE-TROUQUE, S., FOSTER, C.F. The use of ultrasound and c-irradiation as pretreatments for the anaerobic digestion of waste activated sludge at mesophilic and thermophilic temperatures. [s.l.] : The Bioresource Technology., 2002. s. 113-118. LIU, Hong, YAN, Yixin. Low intensity ultrasound stimulates biological activity of aerobic activated sludge. [s.l.] : Higher Education Press and Springer-Verlag, 2007. s 67-72. LORIMER, J.P., PHULL, S.S. Potential uses of ultrasoundnext term in the biological decontamination of water. Coventry (UK) : School of Science and the Environment, 2003. s. 319-323. LYSATEC GmbH. Lyzační odstředivka [online]. c1999 [cit. 2008-09-15]. Dostupný z WWW: <http://www.lysatec.com>. NECZAJ, Ewa, LACH, Joanna. The use of ultrasound to accelerate the anaerobic digestion of waste activated sludge. [s.l.] : In The Sixth International Symposium and Exhibition on Environmental Contamination in Central and Eastern Europe and the Commonwealth of Independent States, 2003. s. 16. TIEHM, Andreas. Ultrasonic waste activated sludge desintegration for improving anaerobic stabilization. Water Research [online]. 2001 s. 2003-2009. WUNSCH, Britta, HEINE, Wolfgang. Combatting bulking sludge with ultrasound : Reports on Sanitary Engineering. Hamburg: Ultrasound in Environmental Engineering II, 2002. ISBN 3-930400-47-2. s. 11. ZÁVACKÝ, Martin. BIOWELL - Increased Renewable Energy Recovery from Biomass by highly Efficient Disruption Process. INT. 2008 [cit. 2008-10-23].