Úloha č. 1 Odměřování objemů, ředění roztoků Strana 1 Teoretický úvod Uveďte vzorec pro: výpočet směrodatné odchylky výpočet relativní chyby měření [%] Použitý materiál, pomůcky a přístroje Úkol 1. Ředění roztoků a) Dle tabulky uvedené níže byla do zkumavek skleněnou pipetou pipetována nejprve..., pak byl přidán příslušný objem.... Celkový objem každého roztoku byl... ml. Roztoky byly míchány na Vortexu. b) Pro přípravu roztoku ředěním v poměru 1:4 byly skleněnou pipetou odměřeny... destilované vody, ke kterým bylo přidáno... 3x naředěného roztoku barviva. Roztok byl zamíchán na Vortexu. ředění V H2O (ml) V zásobního barviva (ml) 3x 7x 12x Uveďte případné odchylky od postupů: a) b) ředění c barviva v (g/l) Výsledné ředění zásobního barviva : 3x 7x 12x Výsledná koncentrace připraveného :
Úloha č. 1 Odměřování objemů, ředění roztoků Strana 2 Úkol 2. Ředicí řady a) Aritmetická ředicí řada Automatickou pipetou byla do připravených stejných zkumavek nejprve pipetována destilovaná voda, ke které byl automatickou pipetou následně pipetován zásobní roztok barviva. Celkový objem každého roztoku byl.... Pipetované objemy jsou uvedeny v tabulce: ředění 1:9 2:8 3:7 4:6 5:5 6:4 7:3 8:2 9:1 V H2O (ml) V zásobního barviva (ml) b) Geometrická ředicí řada Do pěti stejných zkumavek bylo skleněnou pipetou pipetováno... destilované vody. Ze zásobního roztoku barviva bylo odebráno... roztoku skleněnou pipetou na... ml a přeneseno do první zkumavky. Roztok byl důkladně zamíchán. Z první zkumavky bylo odměřeno... roztoku a přeneseno do druhé zkumavky. Roztok byl důkladně zamíchán. Postup byl opakován až k poslední zkumavce, ze které bylo po zamíchání odebráno... roztoku. Výsledný objem byl ve všech zkumavkách.... c) Mikrotitrační destička Uveďte zadaný poměr ředění pro přípravu geometrické ředicí řady v mikrotitrační destičce:... Uveďtě zadaný objem roztoku v jednotlivých jamkách mikrotitrační destičky:... Do osmi jamek v první řadě mikrotitrační destičky bylo automatickou pipetou s rozsahem objemů... pipetováno... destilované vody. Ze zásobního roztoku barviva bylo automatickou pipetou odebráno... roztoku a přeneseno do první jamky. Roztok byl důkladně zamíchán opakovaným nasátím a vypuštěním ze špičky automatické pipety. Z první jamky bylo pak odměřeno... roztoku a přeneseno do druhé jamky. Roztok byl důkladně zamíchán. Postup byl opakován až k poslední jamce, ze které bylo po zamíchání odebráno... roztoku. Výsledný objem byl ve všech jamkách.... Uveďte případné odchylky od postupu:
Úloha č. 1 Odměřování objemů, ředění roztoků Strana 3 a) Doplňte tabulku (do závorek uveďte jednotky): ředění 1:9 2:8 3:7 4:6 5:5 6:4 7:3 8:2 9:1 c barviva ( ) b) Doplňte tabulku (do závorek uveďte jednotky): číslo zkumavky ředění zásobního barviva c barviva ( ) 1 3x 2 3 4 5 c) Doplňte tabulku (do závorek uveďte jednotky): číslo jamky 1 2 3 4 5 6 7 8 c barviva ( ) Úkol 3. Pipetování těkavých a viskózních kapalin automatickou pipetou Vlastními slovy uveďte postup práce při pipetování ethylacetátu, glycerolu a zásobního roztoku barviva různými pipetovacími technikami.
Úloha č. 1 Odměřování objemů, ředění roztoků Strana 4 Popište pozorované výsledky. Jak se liší pipetované objemy roztoku barviva, glycerolu a ethylacetátu za použití základní pipetovací techniky a alternativních metod (reverzní technika pipetování, pipetování s ustřiženou špičkou)? Diskuze Vysvětlete příčiny rozdílů v pipetování použitých 3 kapalin. Jaké změny v pipetování vedou ke zlepšení odměření správného objemu glycerolu a ethylacetátu automatickou pipetou? ÚKOL 4. PŘESNOST PIPETOVÁNÍ AUTOMATICKOU PIPETOU, ANALYTICKÉ VÁHY a) Přesnost a správnost při pipetování téhož objemu b) Správnost odměření objemu 200 l
Úloha č. 1 Odměřování objemů, ředění roztoků Strana 5 a) Doplňte tabulku: číslo měření hmotnost 800 l vody (g) hustota vody: H2O = teoretická hmotnost 800 l destilované vody (uveďte výpočet): směrodatná odchylka měření aritmetický průměr naměřených hodnot hmotnosti 800 l vody: relativní chyba měření (%) správnost pipetování směrodatná odchylka (%) přesnost pipetování b) teoretická hmotnost 200 l destilované vody: m = Doplňte tabulku pipetování 10x 20 l H 2 O (do závorek uveďte jednotky): počet přídavků 20 l vody celková hmotnost pipetované vody ( ) hmotnost přídavku ( ) objem přídavku ( ) 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 celková hmotnost 200 l H 2 O pipetované 10x 20 l: relativní chyba měření (%) správnost pipetování: Doplňte tabulku pipetování 1x 200 l H 2 O: číslo měření 1 2 3 hmotnost 200 l vody ( g ) aritmetický průměr hmotnosti 200 l vody: směrodatná odchylka měření relativní chyba měření (%) správnost pipetování
Úloha č. 1 Odměřování objemů, ředění roztoků Strana 6 Diskuze a) Diskutujte správnost a přesnost Vašeho pipetování a vážení, možné zdroje chyb, o jaké chyby se jedná (náhodné/systematické/hrubé). b) Porovnejte správnost pipetování výsledného objemu způsobem 10 x 20 l vůči pipetování rovnou 200 l. Která z použitých metod pipetování vedla ke správnějšímu odměření požadovaného objemu? Diskutujte možné zdroje chyb, určete o jaké chyby se jedná. Závěr Vlastními slovy stručně shrňte nejdůležitější výsledky a poznatky.