Diagnostika a epidemiologie HIV. Vratislav Němeček, Marek Malý NRL pro HIV/AIDS, Státní zdravotní ústav, Praha

Transkript

1 Diagnostika a epidemiologie HIV Vratislav Němeček, Marek Malý NRL pro HIV/AIDS, Státní zdravotní ústav, Praha

2 Původ SIVy se přirozeně vyskytují u afrických primátů a není známo, že by vyvolávaly onemocnění Byla identifikována řada divergentních typů SIV a dá se říci, že každý infikovaný druh primátů má svůj vlastní specifický SIV x x x SIVcpz HIV-1/O SIVcpz HIV-1/N Pan troglodytes HIV-1/M SIVagmTAN SIVagmGRI Chlorocebus aethiops SIVagmVER SIVsyk Cercopithecus x HIV-2/B albogularis x HIV-2/A SIVsm Cercocebus SIVmnd atys SIVlhoest SIVsun Cercopithecus lhoesti SIVcol 0.1 Colobus guereza

3

4 Replikační cyklus viru HIV Virion HIV nese 2 kopie RNA Obalový protein HIV váže CD4+ receptor a chemokinový receptor na povrchu buňky Pučení viru z buněk a dozrávání virových částic Tvorba nových virových částic Chemokinový receptor Translace vir. proteinů Fuze vir. obalu s buněčnou membránou a vyklopení nukleokapsidy do buňky Reversní transkripce vir. genomu Vstup do jádra buněčné jádro Rozbalení Integrace provirové DNA do hostitelského genomu Transkripce Hostitelská buňka

5 Průběh infekce HIV 1200 Akutní fáze Chronická fáze AIDS 1000 CD4 + T buňky v krvi (buňky per mm 3 krve) Rychlý pokles Set point Postupný pokles Začátek AIDS 200 Začátek infekce Smrt týdny roky

6 Průběh infekce HIV log kopie HIV RNA/ml Akutní fáze Chronická fáze AIDS 7 6 CD4 + T buňky v krvi (buňky per mm 3 krve) Set point Rychlý pokles Postupný pokles Začátek AIDS Začátek infekce Smrt týdny roky

7 SOUČASNÁ LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA HIV Detekce protilátek HIV-1/2 - EIA 3. generace (IgG i IgM) Současná detekce protilátek HIV-1/2 a antigenu p24 - EIA 4. gen. screeningový test (povinný pro screening dárcú krve, plasmy, dárců buněk, tkání a orgánů) i test diagnostický Detekce antigenu p24 / a konfirmace p24 antigenu Konfirmace protilátek HIV-1 nebo HIV-2 test western blot Kvantitativní průkaz HIV RNA virová nálož test PCR (v plasmě) HIV DNA (v buňkách)

8 LABORATOŘE VYŠETŘUJÍCÍ HIV Podmínky pro získání povolení hl. hygienika MZ ČR 1. Účast vedoucího laboratoře na jednodenním školení v NRL HIV/AIDS 2. Vedení laboratoře zajišťuje VŠ biologického zaměření 3. Pracoviště, kde se vyšetření provádí je způsobem stanoveným prováděcím právním předpisem umístěno a přístrojově a materiálově vybaveno (Vyhláška č. 306/2012 6) 4. Používání v ČR registrovaných testů 5. Dodržování pravidel správné laboratorní praxe 6. Účast v systému externí hodnocení jakosti 7. Měsíční hlášení počtu a charakteru provedených vyšetření 8. V případě reaktivního výsledku povinnost laboratoře předat vzorek k provedení konfirmačního testu do NRL HIV/AIDS

9 MOŽNOSTI VYŠETŘENÍ Základní vyšetření (nutný souhlas vyšetřované osoby) Screeningová povinná vyšetřování dárců krve nebo plasmy, dárců buněk, tkání, orgánů a těhotných žen. Diagnostická vyšetření indikovaná lékařem. Vyšetření na vlastní žádost pod jménem nebo anonymní pod kódem. Vyšetření v rámci prevence tj. zejména u osob s předpokládaným vyšším rizikem infekce HIV jako např. pracovníci v oblasti komerčního sexu, osoby s injekční aplikací drog, vězni, migranti, předoperační vyšetření, studie Konfirmační vyšetření Ze zákona 258/2000 Sb. je povinné každý vzorek reaktivní při základním vyšetření poslat ke konfirmaci do NRL pro HIV/AIDS. Pouze výsledek ověřený konfirmačním vyšetřením v NRL je možné označit za pozitivní.

10 MOŽNOSTI VYŠETŘENÍ Speciální vyšetření Stanovení virové nálože monitorující vývoj infekce a průběh léčby, genotypizační stanovení rezistence k antivirotikům, zjištění tropismu HIV pro indikaci určitého léčebného preparátu ev. stanovení genotypu viru HIV-1 skupiny M. Rychlé testy Průkaz anti-hiv, ev. antigenu p24 v krvi, ve slinách nebo stěru z dásní orientační, výsledek za cca minut. např. při emergentních stavech, testování v rizikových skupinách (komerční sex, kluby MSM, IDU, ), provádí zdravotník nebo řádně školený pracovník. V EU a ČR nejsou rychlé testy certifikované pro sebetestování. Každý reaktivní výsledek musí vést k laboratornímu vyšetření z odběru žilní krve a konfirmaci nálezu standardním postupem. Hlavní problémy při užití rychlých testů jsou ve validním provedení testu a interpretaci výsledku a v dostupnosti a kvalitě před a po testového poradenství.

11 Postup konfirmace reaktivního vzorku (v NRL HIV/AIDS) posouzení výsledku testu provedeného terénní laboratoří (hodnoty S/CO, typ testu, ) 2 EIA testy jiné než v terénní laboratoři western blot (u dárců krve, plasmy) v případě reaktivity některého z testů pokračuje testování další EIA testy western blot imunoblot antigen p24 - u p24 reaktivních vč. konfirmace reaktivity HIV RNA PCR ve specifických případech výsledky negativní nejednoznačné výsledky testů málo materiálu pro dokončení konfirmace western blot pozitivní zkonfirmovaná pozitivita vyšetření p24 antigenu Negativní Nejasný Pozitivní

12 Princip kombinované EIA detekce anti-hiv protilátek a antigenu p24 (combo, Ag/Ab)

13

14 Relativní citlivost testů na HIV

15 Dynamika markerů a záchytnost testů Akutní retrovirové symptomy anti-hiv CD4 p24 HIV RNA dny týdny

16 Nové případy infekce HIV v roce 2013 Relativní údaje na obyvatel (ECDC) Zdroj: ECDC

17 absolutní počet NOVÉ PŘÍPADY INFEKCE HIV V ČESKÉ REPUBLICE V JEDNOTLIVÝCH LETECH (jen občané ČR a cizinci s trvalým pobytem) Absolutní údaje ke dni rok

18 HIV+ V ČR PODLE POHLAVÍ A LET - ZASTOUPENÍ HIV+ MUŽŮ 300 (občané ČR a cizinci s trvalým pobytem) Údaje za období absolutní počet % % 65.0% % % % % % % % % 77.8% % % % % % % % % rok ženy muži

19 ROZDĚLENÍ HIV POZITIVNÍCH PŘÍPADŮ V ČR PODLE ZPŮSOBU PŘENOSU (občané ČR a cizinci s trvalým pobytem) Údaje za leden-říjen 2014 homo/ bisexuální % heterosexuální % neobjasněný % z matky na dítě 1 0.5% injekční uživatelé drog 8 3.8% homo/ bisexuální + injekční uživatelé drog 6 2.9%

20 VYBRANÉ KATEGORIE PŘENOSU HIV V ČESKÉ REPUBLICE podle roku diagnózy (občané ČR a cizinci s trvalým pobytem) Absolutní údaje ke dni absolutní počet rok homo/bisexuální injekční uživatelé drog heterosexuální

21 Podíl infekcí HIV u MSM z celkového počtu nově hlášených případů, Evropa (EU/EEA) 2013 Zdroj: ECDC

22 NOVÉ PŘÍPADY HIV V ČESKÉ REPUBLICE podle země původu (občané ČR a cizinci s dlouhodobým pobytem) Relativní zastoupení v období % 90% 80% 70% podíl 60% 50% 40% % 20% 10% 0% rok residenti občané ČR

23 TESTOVÁNÍ KREVNÍCH VZORKŮ V TRANSFUZNÍ SLUŽBĚ V JEDNOTLIVÝCH LETECH (jen občané ČR a cizinci s trvalým pobytem) Absolutní údaje rok Počet pozitivních případů Počet vyšetření

24 RUTINNÍ TESTOVÁNÍ HIV U GRAVIDNÍCH ŽEN V JEDNOTLIVÝCH LETECH (jen občané ČR a cizinci s trvalým pobytem) Absolutní údaje ke dni rok Počet pozitivních případů Počet vyšetření

25 TĚHOTENSTVÍ U HIV POZITIVNÍCH ŽEN (jen občané ČR a cizinci s trvalým pobytem) Absolutní údaje ke dni POROD 155 NOVOROZENCI 158 (dvojčata 3x) TĚHOTENSTVÍ 202 (rutinní testování 88) POTRAT HIV STATUS umělé ukončení 34 pozitivní 4 spontánní 9 negativní 103 neuzavřený 34 neznámý 17 OČEKÁVANÝ POROD 4 DĚTI NAROZENÉ PŘED ZJIŠTĚNÍM HIV POZITIVITY U MATKY pozitivní 3

26 Počty vyšetření a počty HIV pozitivních v jednotlivých letech podle důvodu vyšetření (bez skríninkových vyšetření) jen občané ČR a rezidenti počet případů počet vyšetření rok vlastní žádost klinická diagnóza prevence vlastní žádost klinická diagnóza prevence

27 absolutní počet % STADIUM AIDS - PODÍL POZDĚ ZACHYCENÝCH PŘÍPADŮ (občané ČR a cizinci s trvalým pobytem) 50.0% 0.0% 28.6% 40.0% 50.0% 44.4% 53.3% 8.3% 23.1% 26.3% 50.0% Údaje ke dni % 47.1% 60.0% rok AIDS s odstupem od diagnózy HIV 62.5% 50.0% 44.4% 69.2% 69.2% 61.1% 65.2% 55.2% 65.2% 69.2% 69.2% AIDS při prvním záchytu HIV 70.0% 80.8% 80.0%

28 HIV / AIDS, Česká rep., Celkový počet HIV pozitivních 2330 M 1950 (83,7 %) Ž 380 (16,3 %) Z TOHO AIDS 423 M 344 (81,3 %) Ž 79 (18,7 %) Úmrtí ve stadiu AIDS 219 M 178 (81,3 %) Ž 41 (18,7 %) Úmrtí z jiné příčiny 91 M 80 (87,9 %) Ž 11 (12,1 %)

29 OSOBY ŽIJÍCÍ S HIV/AIDS V ČESKÉ REPUBLICE (občané ČR a cizinci s trvalým pobytem) Měsíční údaje ke dni absolutní počet období HIV+celkem z toho AIDS

30 Odhad prevalence HIV v ČR (dle modelu Spektrum) a násobek oproti zjištěnému počtu žijících osob s infekcí HIV , ,0 1,9 2, ,3 2, ,3 2,4 Počet HIV ,3 2,3 2,4 2, odhad prevalence rok

31 Děkuji za pozornost

32 Děkuji za pozornost

33 Děkuji za pozornost

34 Děkuji za pozornost

35 Děkuji za pozornost