Základy stanovení mikroskopického obrazu ve vodě Petr Pumann

Rozměr: px

Začít zobrazení ze stránky:

Download "Základy stanovení mikroskopického obrazu ve vodě Petr Pumann"

Daniel Růžička
před 9 lety
Počet zobrazení:

1 Základy stanovení mikroskopického obrazu ve vodě Petr Pumann Sinice a řasy v praxi , Praha

2 Vyhláška č. 252/2004 Sb. mikroskopické ukazatele počet organismů živé organismy abioseston microcystin-lr důležité poznámky k jednotlivým ukazatelům

3 6 7 3, 4, 5

4 Zahuštění odstředění, centrifugace

5 Pomůcky - odstředivka odstředivka s výkyvným rotorem úhlový rotor nepřípustný kontrola otáček

6 Parametry odstřeďování 2000 otáček za minutu po dobu 5 min. bez uvedení poloměru rotoru je údaj, který necharakterizuje přesně podmínky odstřeďování přejata informativní příloha, ve které je uveden přepočet otáček v závislosti na poloměru rotoru

přesně podmínky odstřeďování přejata informativní příloha, ve

7 Pomůcky - zkumavky kalibrace na 10 ml; 1 ml; 0,5 ml; 0,2 ml ověření kalibrace osobou, která bude provádět zahušťování z 10 ml na? pitná voda 0,2 ml povrchová podle množství přítomných organismů

8 Problémy při centrifugaci ztráty chyby při odměřování objemu Důsledek pokud se zahušťuje, budou výsledky méně přesné a v některých případech podhodnocené

9 Počítací komůrka Cyrus I plocha 1 cm 2 40 x 40 pásů 0,1 mm = 100 m

10 250 m 1000 m 125 m

13 Jednotky pro vyjádření výsledků posun od protěžování jedinců k rovnoprávnosti vyjadřování výsledků v jedincích či buňkách v závislosti na účelu rozboru jedinci rychlé, v některých případech je však obtížné interpretovat výsledek buňky - především u řas a sinic, ale u některých organismů (např. velké kolonie) je nelze spočítat

rychlé, v některých případech je však obtížné interpretovat výsledek buňky -

14 Termín jedinec (organismus) Za jedince se považuje samostatná buňka (nezáleží na její velikosti), dále cenobium nebo kolonie do velikosti 100µm a vlákna do délky 100µm. Cenobia, kolonie a vlákna překračující uvedené rozměry se vyjadřují jako jejich násobky. U koloniálních nálevníků, vířníků a drobných mnohobuněčných živočichů se počítá každý jedinec zvlášť.

Cenobia, kolonie a vlákna překračující uvedené rozměry se vyjadřují jako jejich násobky.

15 Zahuštění na různé objemy podle oživení vzorku původní normy umožňovaly zahušťovat pouze na 0,2 ml revidovaná norma podle oživení vzorku zahušťovat lze v rozmezí 0,1 1 ml nezahušťovat vzorky od počtů jedinců/ml a více (původně od jedinců/ml)

oživení vzorku zahušťovat lze v rozmezí 0,1 1 ml nezahušťovat

16 Fixace Lugolovým roztokem podle Utermöhla povinnost zpracovávat část vzorku po fixaci Lugolovým roztokem podle Utermöhla při výskytu organismů, které špatně sedimentují (typicky sinice vodních květů) při výskytu většího množství organismů, které snadno podléhají destrukci

výskytu organismů, které špatně sedimentují (typicky sinice vodních

18 Nitzschia živá x mrtvá

26 Vyjádření abiosestonu kvalitativní - textová informace o typu přítomných částic abiosestonu kvantitativní odhad pokryvnosti zorného pole mikroskopu v procentech (limit pro pitnou vodu 10 %)

27 Kvalitativní stanovení Abioseston ve vodě pozůstatky těl různých organismů (např. produkty metabolizmu železitých bakterií, prázdné schránky rozsivek, zbytky schránek obrněnek, korýšů, vířníků, hmyzu, pylová a škrobová zrna, zbytky rostlinných pletiv, detritus) částice anorganického původu (např. produkty koroze, různé sraženiny, půdní částice)

28 Sládeček, Sládečková Atlas vodních organismů se zřetelem na vodárenství... určování podle kreseb je problematické

30 Sraženiny železa foceno objektivem 20x

31 Sraženiny železa foceno objektivem 100x

32 Sraženiny železa foceno objektivem 100x

33 vysrážené železo stěna láhve se železitou minerální lahve

34 vysrážené železo stěna láhve se železitou minerální lahve

35 vysrážené železo stěna láhve se železitou minerální lahve

36 Sraženiny železa foceno objektivem 100x

37 Sraženiny manganu

38 Gallionella ferruginea stopka

39 Gallionella ferruginea - stopka

40 Gallionella ferruginea - stopka

41 produkty železitých bakterií Gallionella; foceno objektivem 20x

42 Crenothrix polyspora

43 Leptothrix ochracea

44 Toxothrix trichogenes

45 Leptothrix echinata

46 Siderocapsa

47 Planktomyces bekefii (plankton)

48 kalcit krystaly

50 Přechodná tvrdost - uhličitan

51 Přechodná tvrdost uhličitan vápenatý a?

52 Vzorek úlomky skla 3A ze skleněného zábrusu úlomky shluk bakterií skla ze (šipka) skleněného zábrusu foceno objektivem 100x

53 úlomky skla ze skleněného zábrusu foceno objektivem 100x

54 pylové zrno břízy

55 1. pyl břízy 2. heterotrofní bakterie

56 1. pyl vrby 2. spory micromycét

57 bramborový škrob

59 Scenedesmus (Desmodesmus) - prázdný

61 Gomphonema (rozsivka) - prázdná

62 Problémy při počítání - prázdné schránky rozsivek Příčinou chyb při kvantifikaci může být také nejednotný přístup k prázdným a téměř prázdným schránkám rozsivek. Na příkladech je ukázáno, jak jsme posuzovali jednotlivé organismy v naší laboratoři, i když u organismů v prostředním rámečku není podle našeho názoru situace jednoznačná. Nepočítali Počítali Nepočítali

63 Zbytky pancířů obrněnek

64 Jedlice sladkovodních hub

65 zbytky chitinu z hmyzu

66 šupina z křídla motýla

67 zbytek rostlinného pletiva

68 vata kontaminace v laboratoři buničina kontaminace v laboratoři Vata je slisované vlákenné rouno o hustotě až 80 kg/m³, jehož vlákna drží vlastní silou pohromadě. Vyrábí se z krátké bavlny, bavlněného odpadu nebo z viskózové stříže ke zdravotnickým, hygienickým a kosmetickým účelům. Buničitá vata se vyrábí ve tvaru listu z bělené sulfitové nebo sulfátové buničiny, do které se smí přimíchávat až 20 % dřevní buničiny (papíru). Konečný výrobek sestává z jednoho listu nebo z několika vrstev nad sebou. Pro zdravotnické účely se vata dodává adjustovaná nebo dělená v různých formách a velikostech.

69 prach v laboratoři

70 Kvantitativní stanovení abiosestonu podle ČSN společně s biosestonem odstředění 10 ml vzorku zahuštění na 0,2 ml přenesení do komůrky Cyrus I. pozorování při 200 násobném zvětšení odhad pokryvnosti zorného pole v procentech

71 Problémy s ČSN

72 ? %

73 Hlavní příčiny velmi subjektivní tabule nejsou příliš podobné skutečnému pohledu do mikroskopu

74 Jak si pomoci (i bez analýzy obrazu)?

75 Analýza obrazu stejné jako u ČSN místo odhadu použití analýzy obrazu nutné vybavení mikroskop s digitálním fotoaparátem nebo kamerou vhodný software

Podobné dokumenty

Stanovení abiosestonu

Stanovení abiosestonu Petr Pumann verze červen 2010 (pro kurz Základy mikroskopického obrazu) Vyjádření abiosestonu kvalitativní - textová informace o typu přítomných částic abiosestonu kvantitativní odhad