Analytická toxikologie

Rozměr: px

Začít zobrazení ze stránky:

Download "Analytická toxikologie"

Eliška Burešová
před 8 lety
Počet zobrazení:

1 analytická toxikologie xenobiotik/metabolitů odhad možné expozice potenciálním xenobiotikem, vyskytujícím se v prostředí (vzduch, voda, potrava) koncentrací xenobiotik / metabolitů identifikace metabolitů a makromolekulárních aduktů uplatnění toxikokinetika klinická / soudní toxikologie pracovní lékařství monitorování životního prostředí analyt látka vstupující do organismu (xenobiotikum) metabolit po biotransformaci (indikátor expozice biomonitorování) látky akumulované v tkáních, vázané na proteiny plasmy biologické vzorky tělní tekutiny (moč, sérum) tkáně, orgány metody analytické toxikologie separační (nutné pro odstranění matrice, zakoncentrování analytu) extrakce chromatografie: HPLC, GC, TLC spektrometrické: MS, AAS elektrochemické immunometody 1

organismu (xenobiotikum) metabolit po biotransformaci (indikátor expozice biomonitorování) látky akumulované v tkáních, vázané na proteiny plasmy biologické vzorky tělní tekutiny (moč,

2 vzorek tkáně (homogenizovaný) ph < 4 destilace vodní parou ph > 9 extrakce organickým rozpouštědlem destilační zbytek kovů AAS destilát těkavých složek spektrometrické metody úprava ph < 4 reextrakce org. rozp. úprava ph < 4 reextrakce vodou neanalysuje se kyselých látek TLC, GC, HPLC, úprava ph > 9 reextrakce org. rozp. neutrálních látek TLC, GC, HPLC, neanalysuje se neutrálních látek TLC, GC, HPLC, volba vzorku časové okno mezi poslední dávkou a dobou odběru vzorku HODINY krev, sliny, pot DNY moč, stolice TÝDNY A MĚSÍCE vlasy, nehty volba metody 2

úprava ph < 4 reextrakce vodou neanalysuje se kyselých látek TLC, GC, HPLC, úprava ph > 9 reextrakce org. rozp.

3 obvyklá množství vzorků materiál TLC, LS-MS immunometody krev/sérum/plasma 0,5 5,0 ml l moč 50 ml 0,5 5,0 ml l měkké tkáně 50 g 1 5 g sliny 0,5 1,0 ml vlasy mg limity kvantifikace metoda GC ethanol v krvi TLC léčiv v moči -MS, RIA LOQ 1 g/kg 0,1 1,0 mg/ml ng/ml pg/ml ng/ml biologické indikátory expozice (BEL, biologický expoziční limit) xenobiotikum indikátor BEL vzorek anilin p-aminofenol 50 mg/g kreatininu moč methemoglobin 1,5% krev kadmium kadmium 5 μg l 1 moč nitrobenzen p-nitrofenol 5 mg/g kreatininu moč trichlorethylen CCl 3 COOH 100 mg/g kreatininu moč olovo olovo 0,4 mg l 1 krev δ-aminolevulová kys. 5 mg/g kreatininu moč koproporfyrin 0,2 mg/g kreatininu moč 3

expoziční limit) xenobiotikum indikátor BEL vzorek anilin p-aminofenol 50 mg/g kreatininu moč methemoglobin 1,5% krev kadmium kadmium 5 μg l 1 moč nitrobenzen p-nitrofenol 5

4 toxické vlastnosti látek hodnoceny na zvířatech (in vivo) experimentální toxikologie na tkáňových a jiných kulturách (in vitro) sběrem dat pracovní lékařství a klinická toxikologie (ex post) odhadem (per analogiam) výpočtem ze struktury (in silico) z etických důvodů se přímé testování na člověku neprovádí toxických vlastností látek příslušných limitů problém obrovské množství xenobiotik desítky milionů sloučenin prvním krokem studium chemických / toxikologických informačních zdrojů (SciFinder, databáze) Testy na zvířatech (in vivo) existence mezidruhových rozdílů nesnadná interpretace dat rozdílný metabolismus rozdílné prostředí: kontrolované reálné počty jednotlivců: vyšlechtěných zvířat miliardy lidí počty buněk v orgánech: myš 12 citlivější potkan 6 citlivější pes 2 citlivější genetická homogenita: vyšlechtěná zvířata lidské rasy 4

milionů sloučenin prvním krokem studium chemických / toxikologických informačních zdrojů (SciFinder, databáze) Testy na zvířatech (in vivo) existence mezidruhových rozdílů nesnadná interpretace dat

5 klíčový správný výběr pokusného zvířete laboratorní myš (Mus musculus) laboratorní potkan (Rattus norvegicus) králík domácí (Oryctolagus cuniculus) křeček zlatý-syrský (Mesocricetus auratus) pes domácí (Canis familiaris), plemeno Beagle vhodné uspořádání testu (cesta podání, dávkování) správný postup získávání a interpretace dat testuje / testovalo se akutní toxicita LD 50,LC 50, dermální dráždivost subakutní toxicita chronická toxicita kancerogenita, mutagenita, genotoxicita pro experimenty platí přísná pravidla (zákony a nařízení) způsob ustájení (čistota, krmivo, světlo, teplo, vlhko, světlo tma) zdravotní kontrola zvířat (stres) dodržování předepsaného postupu, protokoly dodržování správné laboratorní praxe, kontroly a řízení kvality pokusů test obvykle alespoň dva druhy zvířat (hlodavec nehlodavec) parita pohlaví vhodné stáří nejméně jedna kontrolní skupina 5

dráždivost subakutní toxicita chronická toxicita kancerogenita, mutagenita, genotoxicita pro experimenty platí přísná pravidla (zákony a nařízení) způsob ustájení (čistota, krmivo, světlo, teplo,

6 Alternativní metody testování toxicity vyvíjeny z etických i ekonomických důvodů 3R = Reduction, Replacement, Refinement testy na nižších jednoduchých organismech bakterie (Phosphobacter Microtox) prvoci (bičíkovci Tetrahymena pyriformis) rybky (paví očka) červi (nítěnka Tubifex tubifex) testy ve zkumavce (in vitro) tkáňové kultury: izolované orgány, kuřecí zárodky buněčné kultury: bílé krvinky, hepatocyty 6

prvoci (bičíkovci Tetrahymena pyriformis) rybky (paví očka) červi (nítěnka Tubifex tubifex) testy ve

7 screeningové testy genotoxicity využití zpětných mutací u vybraných kmenů auxotrofních bakterií Amesův test Predikční toxikologie odhad účinku xenobiotika prostou úvahou kyseliny, zásady dráždí až leptají PAH pokud se neprokáže opak automaticky kancerogen aromatické aminy, nitrosloučeniny pokud se neprokáže opak automaticky kancerogenní, budou působit methemoglobinémii organické sloučeniny fosforu obvykle inhibitory acetylcholinesterázy modelové výpočty účinků xenobiotik odhad toxicity z fyzikálně-chemických vlastností xenobiotika, zejména pk a, log P, reaktivita QSAR Quantitative Structure-Activity Relationships komerčně dostupné programy vždy jde jen o přiblížení, rozhodnout musí experiment 7

působit methemoglobinémii organické sloučeniny fosforu obvykle inhibitory acetylcholinesterázy modelové výpočty účinků xenobiotik odhad toxicity z fyzikálně-chemických

Podobné dokumenty

Hygiena a toxikologie, 3. ročník, Ekologie a životní prostředí

Hygiena a toxikologie, 3. ročník, Ekologie a životní prostředí Název školy: Číslo a název projektu: Číslo a název šablony klíčové aktivity: Označení materiálu: Typ materiálu: Předmět, ročník, obor: Číslo a název sady: Téma: Jméno a příjmení autora: STŘEDNÍ ODBORNÁ