NÁRODNÍ REFERENČNÍ LABORATOŘ ÚKZÚZ 2015 Výroční zpráva
Výroční zpráva o činnosti Národní referenční laboratoře za rok 2015 Rok 2015 byl především ve znamení mnoha organizačních změn, a to jak na úrovni celého ústavu, tak i na úrovni NRL. Kromě změn daných platností Zákona o státní službě to bylo i zrušení pracoviště NRL v Plané nad Lužnicí s převedením činnosti na zbývající pracoviště. V současné době je NRL v ústavu na úrovni sekce se dvěma odbory a šesti přímo řízenými odděleními. Z hlediska obnovy a nákupů nového vybavení je možné rok 2015 hodnotit jako poměrně úspěšný a to opět především díky investičním prostředkům z Národního akčního plánu ke snížení používání pesticidů v ČR. Nové vybavení, které bylo dodáno v závěru roku, umožní například zlepšit prokazování falšování přípravků na ochranu rostlin. V platnost vešlo druhé vydání Jednotných pracovních postupů Zkoušení hnojiv. Bylo dokončeno zpracování textů Jednotných pracovních postupů pro analýzu srážkových a lyzimetrických vod. Tato publikace vyšla a postupy začaly platit v červenci 2015. Byly zahájeny práce na 4. vydání Jednotných pracovních postupů Analýza půd I. Průběžně byly revidovány a zveřejňovány i ostatní postupy. Pro širokou odbornou veřejnost zorganizoval ÚKZÚZ konferenci k problematice použití pesticidů v zemědělství ČR, na které specialisté NRL prezentovali analytickou činnost NRL v oblasti pesticidů. Mnoho úsilí bylo také věnováno přípravám na reakreditaci a celému průběhu posuzování, které probíhalo v průběhu března roku 2015. Po této reakreditaci je již Oddělení zkoušení přípravků na ochranu rostlin součástí jednoho společného akreditovaného subjektu. Velmi úspěšně se rozvíjela a prohlubovala mezinárodní spolupráce NRL. V jednotlivých konsorciích NRL při EU-RL je naše pracoviště hodnoceno mezi nejlepšími (v oblasti doplňkových látek v krmivech jako nejlepší). Úspěšně pokračovala i aktivní spolupráce s mezinárodní organizací CIPAC a ESPAC. Pro CEN TC 260 jsou zpracovávány ve spolupráci s AGES (Rakousko) a YARA (Velká Británie) nové normy pro stanovení mikroelementů v hnojivech. Úspěšně byl dokončen i společný česko-polský projekt zaměřený na aplikaci exogenní organické hmoty na půdu. 1
NRL měla více než dvacet dílčích cílů, které se většinou podařilo naplnit. Velmi rozsáhlý úkol se týkal sjednocení jednotlivých knih LIMS tak, aby odpovídaly současnému stavu společné akreditace a vyšší úrovni spolupráce jednotlivých pracovišť. Podrobněji jsou jednotlivé aktivity NRL popsány v následujících kapitolách. 1 Odborná činnost 1.1 Kontrola vstupů do půdy Ve všech oblastech činnosti (AZZP, analýzy vzorků z pokusů, monitoring, registr kontaminovaných ploch, analýzy lesních půd a vegetativních orgánů, ekologické zemědělství atd.) byly úkoly plněny podle požadavků. Do stávající organizace provádění analýz půdních vzorků AZZP zasáhlo zrušení regionálního laboratorního oddělení v Plané n. L., které bylo celou svou činností zaměřeno právě na tento druh analýz. Padesát tisíc vzorků bylo od začátku roku 2015 předáno na zbývající pracoviště v Brně, Opavě a nově i v Plzni, kam byla přemístěna i většina přístrojového vybavení. Z celkového počtu analyzovaných vzorků AZZP byla u 9500 vzorků provedena rozšířená analýza na obsah síry a mikroelementů (Cu, Fe, Al, Zn, Mn a B) a u 3500 vzorků stanovení parametrů charakterizujících kvantitativní i kvalitativní obsah organické hmoty v půdě (organický a celkový uhlík, celkový dusík a glomalin) metodou NIRS. Laboratoř v Plzni zahájila po nutných instalačních úpravách a ověření kvality práce rutinní analýzy AZZP včetně rozšířeného stanovení metodou ICP-OES ve stejném rozsahu jako laboratoře v Brně a Opavě. Na Odboru Brno bylo provedeno ověření možnosti stanovení vybraných rizikových prvků v extraktu podle Mehlicha 3. První část tohoto vývojového úkolu byla úspěšně dokončena a výsledky ukazují, že díky kvalitní instrumentální technice ICP-OES je možné tuto metodu využít i ke stanovení některých rizikových prvků (As, Cd, Cr, Ni, Pb). Ověření bude pokračovat v roce 2016 a zahrne i stanovení rizikových prvků v extraktu 0,43M kyselinou dusičnou. Pro potřeby sledování obsahu a kvality organické hmoty byly vytvořeny samostatné kalibrační modely pro predikci obsahu glomalinu v orných půdách a v organickém horizontu lesních půd. 2
Vzorky ornice 46 lokalit BMP byly analyzovány na přítomnost reziduí persistentních organických polutantů (PCB, OCP, PBDE) a pesticidů. Ve všech vzorcích ornice bylo stanovováno celkem 70 analytů pesticidních látek a vybraných metabolitů. Pro potřeby kontroly ekologického zemědělství (EZ) byly analyzovány vzorky půd a rostlin na přítomnost reziduí pesticidů a aktuálně i glyfosátu (pouze rostliny). Oddělení reziduálních analýz zpracovávalo vzorky odebrané při kontrole ekologických vinohradů (celkem 45 vzorků listů a hroznů vinné révy). Došlo k navýšení počtu vzorků konopí setého pro účely delegovaných kontrol pro SZIF a v rámci mezinárodní spolupráce i pro ÚKSÚP. Celkem bylo na obsah THC a CBD analyzováno 47 vzorků. Nárůst nových požadavků byl i pro potřeby oddělení výživy rostlin: glukosinoláty v řepce (36 vz.), nutriční parametry v pšenici (30 vz.), vitamin C v zelenině (8 vz.) a obsah škrobu v bramborách (54 vz.). Nadále rostl zájem o analýzy reziduí přípravků na ochranu rostlin (POR) ze strany inspektorů SZV a SRLP. Celkem byla přítomnost reziduí POR prokazována ve 112 vzorcích rostlin. Pro subjekty kontrolující ekologické zemědělství byly analyzovány vzorky rostlinného materiálu na přítomnost reziduí pesticidů. Bylo stanovováno 40 látek multireziduální metodou s GC-MS detekcí a 40 látek s LC-MS detekcí. Samostatným postupem byla ve vzorcích zjišťována i přítomnost polárních pesticidů a regulátorů růstu (chlormekvát, mepikvát a glyfosát). V souvislosti s programem BMP bylo v laboratoři Odboru Opava analyzováno 45 vzorků půd na stanovení PAH v rámci kontroly vstupů do půdy (kaly ČOV, sedimenty). Toto stanovení bylo provedeno i u dalších 70 vzorků (nádobové pokusy, kontrola a registrace hnojiv). Pro potřeby programu aktivního biomonitoringu bylo v Opavě analyzováno 47 rostlinných vzorků na stanovení PAH. Tyto vzorky byly upravovány lyofilizací na Odboru Brno, který má k dispozici vhodné přístrojové vybavení. Dalších 15 vzorků rostlinného materiálu na stanovení PAH bylo analyzováno ve vzorcích z nádobových zkoušek. Pracoviště NRL v Praze a Plzni dokončila přípravu nových a revidovaných pracovních postupů, které byly vydány v tištěné a elektronické podobě pod názvem Jednotné pracovní postupy Zkoušení hnojiv. Obě pracoviště zakončila rozsáhlou analytickou činnost, jejíž výsledky budou sloužit k vypracování nových norem pro stanovení mikroelementů v průmyslových hnojivech. Na základě požadavků Oddělení registrace hnojiv byly v roce 2015 vypsány dva mimořádné vývojové úkoly 3
v oblasti hnojiv, které bude řešit laboratoř v Plzni. První úkol je zaměřen na stanovení nízkých koncentrací dusíku v hnojivech. Další úkol je věnován ověření vhodnějšího postupu pro stanovení obsahu huminových látek v hnojivech podle postupu v připravované normě ISO/CD 19822. Vzájemná spolupráce obou pracovišť vedla k úspěšnému sloučení parametrů a vytvoření centrální knihy hnojiv v laboratorním informačním systému (LIMS). Kromě toho se pracoviště Praha také zúčastnilo validační studie pro stanovení celkového a vodorozpustného fosforu organizované mezinárodní organizací výrobců hnojiv. Pracoviště ONRL Praha a ONRL Plzeň se podílela na programu TAIEX Study visit on learning about methods used for fertilizer analyses pro pracovníky z Kosova. Obsah programu byl účastníky velice kladně hodnocen. Na vybraných plochách pokračoval monitoring mikrobiálních parametrů zemědělských a lesních půd. Pracoviště OMB Brno zahájilo mikrobiologický průzkum půd u vybraných variant dlouhodobého stacionárního pokusu ekologického zemědělství (celkem 36 vzorků). V půdách byly provedeny především molekulárněbiologické analýzy pro hodnocení složení nitrifikačních a denitrifikačních společenstev bakterií. V oblasti ekotoxikologie se první polovina roku zaměřila na vyhodnocování výstupů z analýzy půd a organických hnojiv v rámci příhraničního česko-polského projektu. Ve zbylé části roku byly provedeny ekotoxikologické testy (krátkodobá nitrifikační aktivita, respirace mikroorganismů, Enchytraeus crypticus a Folsomia candida) pro hodnocení čtyř přípravků dodaných oddělením hnojiv. 1.2 Bezpečnost potravních řetězců kontrola krmiv Požadavky státního odborného dozoru, monitoringu a všechny další úkoly byly splněny. V roce 2015 pokračovala cílená kontrola křížové kontaminace a kontrola používání nepovolených doplňkových látek a zakázaných stimulátorů růstu. Při kontrole křížové kontaminace, kterou provádí pracoviště chromatografických metod NRL Praha, byly sledovány obsahy doplňkových látek (halofuginon, lasalocid, maduramicin, monensin, narasin, nikarbazin, robenidin, salinomycin, semduramicin) ve 170 vzorcích kompletních a doplňkových krmných směsí a premixů metodou kapalinové chromatografie s UV detekcí (HPLC-UV) nebo hmotnostní detekcí (LC-MS/MS). Ve skupině zakázaných stimulátorů růstu se sledoval výskyt sedmi zakázaných stimulátorů, inhibitorů růstu nebo antimikrobiálních látek (amprolium, 4
carbadox, dimetridazol, nifursol, olachindox, virginamicin a Zn-bacitracin) ve 27 vzorcích krmných směsí opět metodou kapalinové chromatografie s UV detekcí (HPLC-UV) nebo hmotnostní detekcí (LC-MS/MS). Cílená kontrola kontaminace léčivy zahrnovala v roce 2015 stanovení tylosinu ve 29 vzorcích. Pracoviště Oddělení NRL Praha se v roce 2015 zúčastnilo validační studie pro úpravu metody stanovení diclazurilu z Nařízení EU 152/2009. Laboratoře NRL, které provádějí analýzu krmiv, spolupracovaly v průběhu roku 2015 na úpravách LIMS ve sjednocení názvů metod, mezí stanovitelnosti a nejistot měření pro možnost centralizace knih všech pracovišť do jedné centrální knihy krmiv. Rovněž na ONRL Brno byly splněny všechny požadavky vyplývající ze státního odborného dozoru, z cílených kontrol a z monitoringu zakázaných a nežádoucích látek (dusitany, fluoridy, těžké kovy, melamin, rezidua pesticidů, glycerol, doplňkové látky, mykotoxiny a perzistentní organické polutanty). Celkem bylo pro účely různých typů úředních kontrol analyzováno 670 vzorků. K těmto analýzám patří stanovení těžkých kovů (As, Cd, Pb) pro 131 vzorků, stanovení selenu (111 vzorků), jódu (98 vz.) a kobaltu (16), vše za použití ICP-MS. V laboratoři byly rovněž zpracovávány vzorky na stanovení vitamínu A (134 vz.), vitamínu E (45 vz.), vitamínu D3 (118 vz.), doplňkových látek a melaminu. Pro monitoring výskytu mykotoxinů a potřeby ekologického zemědělství (EZ) byla použita multimetoda na sledování 17 mykotoxinů (celkem 160 vz.). Ve 45 těchto vzorcích byly stanoveny přírodní toxiny. Získané výsledky slouží pro EFSA jako informace o výskytu toxinů a pro tvorbu budoucích rizikových limitů. Pro cílené kontroly a monitoring reziduí pesticidů bylo provedeno 200 analýz vzorků krmiv. Významná část kapacity krmivářské laboratoře patřila analýzám pro oddělení MPZ (548 vz.). Velký objem práce představují především testy homogenity pro obsah vitamínů A, E a D3 (analýza 64 vz.), mykotoxinů (54 vz.) a doplňkových látek (256 vz.) v materiálech určených pro kruhové testy. Rovněž jsou prováděny testy detekce mykotoxinů, které byly vyprodukovány plísněmi po záměrné inokulaci na rostlinách přímo v polních podmínkách. Velká pozornost byla věnována aplikaci nových poznatků, zkušeností a požadavků z EURL a z CEN do analytické praxe. Pracoviště se celkem účastnilo sedmi validačních studií zaměřených na stanovení nežádoucích látek (těžké kovy, nově sledované mykotoxiny), zakázaných látek (melamin) a doplňkových látek (jód, 5
organické kyseliny). Reakcí na požadavky EFSA na sledování přírodních toxinů je zavedení metod pro stanovení ergotových, pyrrolizidinových a opiových alkaloidů. Laboratoř molekulárně-genetické diagnostiky na NRL-OMB pokračovala v rozšiřování spektra metod pro detekci transgenů. V současné době disponuje postupy pro osm screeningových elementů a 51 transgenů. V průběhu roku bylo zahájeno zavádění metody kvantitativního stanovení GMO metodou RT- PCR. 1.3 Kvalita rostlinné produkce - analýzy pro Sekci rostlinné výroby Všechny úkoly požadované jednotlivými odbory Sekce rostlinné výroby se podařilo splnit v požadovaných termínech. Na ONRL Brno bylo celkem analyzováno 7900 vzorků obilovin (pšenice, ječmen, žito, tritikale, oves, kukuřice zrnová), olejnin (řepka, slunečnice, hořčice, len), luskovin (hrách, bob, sója), zelených hmot (makovina, konopí) a čerstvých hmot (cibule, rajčata, brambor, řepa) s celkovým počtem 62 000 stanovení. Zvládnutí situace napomohlo i další rozšíření využití techniky NIRS o nové plodiny a parametry. V současnosti je na ONRL Brno metoda NIRS využívána pro 14 plodin a na ONRL Opava pro 3 plodiny. Nově bylo pro potřeby zkoušení odrůd zavedeno stanovení NIRS vybraných parametrů u brambor. Na určeném počtu vzorků (40 vz. ječmene ozimého, 56 vz.- pšenice ozimé, 20 vz. řepky a 56 vz. brambor) byla provedena aktualizace a ověření predikčních schopností všech stávajících kalibračních závislostí NIR pro sledované parametry u daných plodin. Hlavními úkoly Odboru Opava pro NOÚ byly analýzy metodou NIRS u 180 vzorků slunečnice, 1330 vzorků silážní kukuřice a nově u 75 vzorků sóji luštinaté, která byla převedena do Opavy z pracoviště v Brně. V souvislosti s tímto převodem byly provedeny analýzy vzorků sóji laboratorními referenčními metodami a následně i rekalibrace stávajících kalibračních modelů. Kromě toho bylo provedeno téměř 1000 stanovení sušiny pro sklizňové účely zkušební stanice Pusté Jakartice. Mírné snížení počtu dodaných vzorků slunečnice oproti plánu bylo způsobeno zrušením některých pokusů z důvodu špatných klimatických podmínek ve vegetačním období. NOÚ měl v roce 2015 požadavek na 200 analýz elektroforetických spekter odrůd brambor, která měří a shromažďuje pracoviště OSARK Lípa. Mírné zvýšení počtu vzorků bylo u analýz alkaloidů v bramborech, 70 vzorků v roce 2015 proti 62 vzorkům v 2014. Nevýznamné snížení bylo také u komplexních rozborů brambor 72 v roce 2015 a 81 v 2014. Nižší byl i počet požadavků pro uznávací řízení kvality osiva 6
Odboru osiv a sadby na stanovení glukosinolátů v osivu řepky 14 vzorků v 2015 proti 18 vzorkům v 2014, u analýz na kyselinu erukovou se jednalo o 42 stanovení proti 44 v roce 2014. Stanovení mykotoxinů metodou ELISA pro potřeby odrůdových zkoušek zajišťovalo OMB Brno v počtu 460 analýz DON, 160 analýz T-2 toxinu. Na základě požadavku NOÚ týkajícího se využití analýz DNA pro identifikaci odrůd kukuřice, řepky, ječmene, pšenice a révy vinné bylo na OMB zahájeno zavádění metod založených na analýze mikrosatelitů. V prvním pololetí proběhl výběr vhodných odrůd, testování zpracování a extrakce DNA z jednotlivých částí rostlin, včetně určení její koncentrace a kvality. Ve druhém pololetí byla zahájena optimalizace uvedené metody na devíti všeobecně známých světových odrůdách révy vinné. 1.4 Zdravotní stav rostlin ELISA testy, diagnostika metodou PCR, kontrola přítomnosti geneticky modifikovaných organismů (GMO) Počet provedených ELISA testů brambor na pracovišti OSARK Lípa (tabulka 1.4.1), byl přibližně na stejné úrovni jako v roce 2014. Počet stanovení pro OTK, která provádí OMB Brno, je uveden tabulkách 1.4.2 a 1.4.3. Tabulka 1.4.1. ELISA testy viróz brambor (OSARK Lípa u Havlíčkova Brodu). Počet stanovení 2014 2015 2015/2014 1. 15120 14760 0,98 2. 96 480 5,00 3. 15360 6720 0,44 4. 31680 27840 0,88 5. 4608 23040 5,00 6. 55296 49536 0,90 Celkem 122160 122376 1,01 Legenda 1. NOÚ 82 vzorků, 1 vzorek 30 rostlin, 6 virů, bez pěstební přípravy 2. OOS 4 vzorky, 1 vzorek 96 rostlin, 1 vir, bez pěstební přípravy 3. OOS 14 vzorků, 1 vzorek 96 rostlin, 5 virů, bez pěstební přípravy 4. OOS 58 vzorků, 1 vzorek 96 rostlin, 5 virů, včetně pěstební přípravy 5. OOS 40 vzorků, 1 vzorek 96 rostlin, 6 virů, bez pěstební přípravy 6. OOS 86 vzorků, 1 vzorek 96 rostlin, 6 virů, včetně pěstební přípravy 7
Tabulka 1.4.2. Stanovení fytoplazem pro jednotlivé plodiny metodou PCR. Vzorky Izolace DNA Amplifikace 2014 2015 2014 2015 2014 2015 Vinná réva 48 48 100 100 116 176 Jádroviny 48 168 100 350 128 392 Drobné ovoce 24 24 50 50 56 56 Peckoviny 24 24 50 53 56 61 Tabulka 1.4.3. Přehled stanovovaných virů pro OTK (OMB Brno). Testovaný virus Počet testovaných vzorků 2013 Počet testovaných vzorků 2014 Počet testovaných vzorků 2015 ApMV 475 961 449 ApCLSV 475 961 449 PPV 475 961 449 PDV 475 961 449 PNRSV 475 961 449 HpMV 0 0 0 ArMV 360 0 0 GFLV 360 0 0 GLRV-1 360 0 0 GLRV-3 360 0 0 GFkV 360 0 0 U vzorků určených pro detekci transgenů byl proveden screening promotorů 35S a FMV, terminátoru NOS, genů bar, cry 1A(b), cp4 epsps, nptii a pat. Ve vzorcích sóji byly kvalitativně detekovány transgeny MON 40-3-2 a MON89788. Ve vzorcích kompletních krmných směsí byly kvalitativně detekovány transgeny MON40-3-2, MON89788, A2704, GT 73 a virus CaMV. Přehled stanovení je uveden v tabulce 1.4.4. 8
Tabulka 1.4.4. Stanovení GMO pro jednotlivé plodiny. Vzorky Izolace DNA Amplifikace 2014 2015 2014 2015 2014 2015 Sója 15 20 40 47 434 488 Kukuřice 49 45 115 120 1022 679 Řepka 17 15 67 32 387 264 Rýže 4 3 13 8 78 42 Krmné směsi 32 28 73 74 2109 1622 Brambory 5 4 11 9 25 20 1.5 Laboratorní kontrola přípravků a dalších prostředků na ochranu rostlin Oddělení zkoušení přípravků na ochranu rostlin (OdZPOR) v roce 2015 zkontrolovalo 85 přípravků na ochranu rostlin (POR), tj. 192 laboratorních vzorků, které zahrnovaly 10 formulačních typů POR (AL, EC, EW, FS, GB, OD, SC, SL, SP a WG), ve kterých bylo analyzováno 121 účinných látek a 137 nečistot, formulačních přísad a xylenů. Mimo kontrolu účinných látek a nečistot byly u všech vzorků testovány také jejich fyzikálně-chemické a technické vlastnosti. Celkem bylo provedeno asi 3700 nerutinních zkoušek. Analyzované POR reprezentovaly 5 různých skupin použití (41 herbicidů, 26 fungicidů, 10 insekticidů, 7 růstových regulátorů a 1 moluskocid). Postregistrační kontrola Na základě plánu PRK pro rok 2015 nebo z podnětu třetí osoby bylo na OdZPOR laboratorně kontrolováno celkem 63 přípravků na ochranu rostlin, z toho 12 vzorků POR odebraných na podnět a 23 vzorků ze souběžných dovozů. Toto množství POR představovalo celkem 132 testovaných laboratorních vzorků 4 skupin použití (27 herbicidů, 21 fungicidů, 7 insekticidů, 7 růstových regulátorů a 1 moluskocid). Laboratorní kontrola vzorků v rámci zonálního povolování POR Pro potřeby hodnocení v rámci zonálního povolování bylo laboratorně testováno 22 přípravků na ochranu rostlin, tzn. analýzy byly provedeny u 60 laboratorních vzorků. Laboratorně tak byly zkontrolovány vzorky ze 3 skupin použití přípravků na ochranu rostlin, a to 14 herbicidů, 5 fungicidů a 3 insekticidy. 9
V roce 2015 pokračoval trend nárůstu vzorků ze zonálního povolování POR a vzorků obsahujících dvě a více účinných látek v jednom přípravku. Z důvodu nárůstu přísunu falšovaných POR do Evropy se rovněž zvýšil i počet požadavků na analýzy detailního chemického složení POR, čímž se zvýšila časová i odborná náročnost jednotlivých vysoce specializovaných analýz. U všech vzorků byly provedeny zkoušky totožnosti účinných látek, kvantitativní stanovení jejich obsahu, a kvalitativní, popř. kvantitativní stanovení nečistot a vybraných formulačních přísad podle technických specifikací a chemického složení POR. U přípravků EC formulací byl kontrolován také obsah xylenu. Uvedené zkoušky byly provedeny převážně metodou kapalinové a plynové chromatografie. Kontrola přípravků ze souběžného dovozu byla navíc rozšířena o srovnávací analýzy profilu nečistot s referenčním přípravkem, a to metodami HPLC/UV, GC/FID, GC/MS a FTIR a Ramanovy spektrometrie. U všech vzorků byly také testovány jejich fyzikálně-chemické a technické vlastnosti podle požadavků uvedených v platných technických specifikacích přípravku nebo FAO specifikacích. U vzorků POR odebraných na podnět třetí strany bylo mimo jejich identifikace i detailně analyzováno jejich chemické složení všemi dalšími vhodnými a dostupnými laboratorními postupy a technikami (např. porovnání vzorků metodou GC/MS, HPLC/PDA, FTIR a Raman, TGA a DSC analýzy; identifikace nečistot pomocí GC/MS spekter, identifikace formulačních přísad metodou FTIR a Ramanovou spektrometrií apod.). S úspěchem byla zavedena do praxe také metoda Ramanovy spektrometrie, která pomohla v několika případech odhalit rozdíly v chemickém složení POR od deklarovaného složení. V roce 2015 bylo verifikováno celkem 25 chromatografických metod (4 metody GC/FID, 1 metoda GC/MSD a 21 metod LC/UV). Další související laboratorní činnost Pracovníci laboratoře se také v roce 2015 podíleli na testování a připomínkování mezinárodních metodik CIPAC a aktivně se zapojili i do testování metodiky pro ESPAC. Pro CIPAC to bylo stanovení účinné látky silthiofam ve 3 technických látkách (TC) a 5 SC formulacích POR metodou kapalinové chromatografie s UV detekcí. Celkem se jednalo o 8 technických látek a přípravků, tj. 10
16 laboratorních vzorků. Pro ESPAC laboratoř testovala a připomínkovala metodiku pro stanovení účinné látky chlorantraniliprole v jedné technické látce a ve 3 typech formulací POR, a to 1x TC, 1x FS, 1xWG a 2xSC (tj.10 laboratorních vzorků). 1.6 Vývojové úkoly V roce 2015 bylo zahájeno řešení 7 nových vývojových úkolů pro potřeby analýz hnojiv a půdy (z toho jsou dva mimořádné vývojové úkoly na stanovení v hnojivech a jeden mimořádný vývojový úkol na stanovení v půdě), 3 nových vývojových úkolů pro analýzu krmiv, 8 úkolů pro testování vlastností odrůd a rostlinného materiálu a 8 úkolů pro potřeby NRL resp. více technických odborů. V roce 2015 bylo dokončeno 13 vývojových úkolů. Zbývající úkoly budou dokončeny v r. 2016 resp. v r. 2017. Výsledky vývojových úkolů jsou průběžně publikovány v Bulletinu NRL, který je zveřejněn elektronicky na www.ukzuz.cz. Ukončené vývojové úkoly 2015 1. Obdržálková, E., Malý, S., Čižmár, D., Zbíral, J.: Kvalita organické hmoty půdy stanovení glomalinu (VÚ 30.03/2012) 2. Tieffová, P., Kosubová, P.: Stanovení reziduí dithiokarbamátových fungicidů (VÚ L2/2011) 3. Kantošová, K., Kosubová, P.: Stanovení perfluoroalkylových sloučenin v komplexních matricích (VÚ 10.08/2012) 4. Tieffová, P., Nagyová, V.: Stanovení reziduí dithiokarbamátových fungicidů po reextrakci do isooktanu (VÚ 90.08/2013) 5. Prchalová, A. Zemánek, L., Šťastná, A.: Stanovení ethylenglykolu a propylenglykolu metodou GC s FID detekcí (VÚ 90.05/2014) 6. Hájková, H.: Zavedení kvalitativní detekce transgenů DAS 68416-4 a MON 87769 u sóji, (VÚ 90.04/2015) 7. Čuhel, J.: Zavedení metody na stanovení aktivity denitrifikačních enzymů v půdních vzorcích (VÚ 30.02/2015) 8. Malý, S.: Zavedení metody pro stanovení (horkou) vodou rozpustného uhlíku (VÚ 30.03/2014) 11
9. Foltýn, J., Julínková, D., Nováková, O.: Využití Ramanovy a Infračervené spektrometrie k porovnání chemického složení přípravků na ochranu rostlin, (VÚ 90.06/2015) 10. Hájková, H.: Zavedení kvantitativní detekce geneticky modifikované kukuřice MON 810, (VÚ 90.01/2015) 11. Čumová, M.: Stanovení ergotových alkaloidů (VÚ 10.09/2012) 12. Váňa, M.: Rozšíření testu pro stanovení krátkodobé nitrifikační aktivy (SNA) o možnost analyzovat potenciálně biologicky aktivní hnojiva (VÚ 30.03/2015) 13. Kantošová, K., Kosubová, P., Tieffová, P.: Analýza glyfosátu a jeho vybraných metabolitů v obilovinách (VÚ 10.07/2012) 1.7 Legislativní činnost Pracovníci NRL se podíleli na přípravě pozic pro jednání Stálého výboru - výživa zvířat. Pokračovala spolupráce s odborem pro vztahy s EU při MZe při konzultacích o překladech legislativních dokumentů. Oceněním této spolupráce bylo i pozvání k účasti na semináři Translation and legal aspects of EU legislation, organizovaném Odborem kompatibility Úřadu vlády České republiky. Pracovníci NRL se také podíleli na zpracování a připomínkování novely Vyhlášky Ministerstva životního prostředí č. 13/1994 Sb., kterou se upravují některé podrobnosti ochrany zemědělského půdního fondu, především na doplnění metod zkoušení a úpravě limitů pro jednotlivé kontaminanty. 1.8 Porovnání základních činností NRL V grafech na obrázku 1 je uveden relativní podíl hlavních činností na celkovém požadavku na analýzy v NRL. Porovnání velmi dobře dokumentuje rozdílnou finanční a časovou náročnost jednotlivých stanovení i rozdílné počty analyzovaných vzorků a parametrů. Číselné údaje jsou v tabulkách 1.8.1, 1.8.2 a 1.8.3. V tabulkách a grafech jsou uvedeny pouze činnosti, které je možné meziročně porovnávat. U činnosti vysoce variabilní je popis uveden samostatně. Celá činnost Oddělení zkoušení přípravků pro ochranu rostlin zde také není porovnávána a je uvedená v kapitole 1.5. 12
V oblasti vstupů do půdy se projevilo určité snížení požadavku především u počtu provedených stanovení. Již běžně se provádí rozšířené stanovení AZZP a průzkumové stanovení obsahu a kvality půdní organické hmoty. Došlo k rozšíření analýz reziduí pesticidů pro potřeby rostlinolékařů a pro kontrolu ekologického zemědělství. Převod analýz ze zrušeného pracoviště Planá nad Lužnicí vyžadoval vysoké úsilí především na pracovišti v Plzni, nicméně vše proběhlo bez významného narušení harmonogramu prací. V kontrole krmiv byl počet vzorků a stanovení přibližně shodný s rokem 2014, ale byly více požadovány nákladnější a pracnější analýzy (nárůst asi 10 %). Počet vzorků rostlinného materiálu (jde především o analýzy pro NOÚ) je poměrně stabilní a uvedený rozdíl odpovídá běžnému meziročnímu kolísání požadavků. V rámci NRL dochází v této oblasti k postupnému většímu zapojování Odboru NRL v Opavě do této činnosti tak, aby bylo možné dodržet velmi krátké termíny pro provedení analýz. Tabulka 1.8.1. Podíl hlavních činností na práci NRL 2014. Náklady (Kč) Čas (hod) Počet vzorků Počet stanovení Vstupy do půdy 7350392 62492 83610 682126 Kontrola krmiv 2367205 17209 3556 30854 Rostlinný materiál 2565876 20454 14493 167421 Celkem 12283473 100155 101659 880401 Tabulka 1.8.2. Podíl hlavních činností na práci NRL - 2015 Vstupy do půdy Kontrola krmiv Rostlinný materiál Celkem Náklady (Kč) Čas (hod) Počet vzorků Počet stanovení 6896085 63143 79938 601006 2638426 18935 3644 31779 2622078 19983,46 13846 169330 12156589 102061 97428 802115 13
Tabulka 1.8.3. Podíl hlavních činností na práci NRL index 2015/2014 Vstupy do půdy Kontrola krmiv Rostlinný materiál Celkem Náklady (Kč) Čas (hod) Počet vzorků Počet stanovení 0,94 1,01 0,96 0,88 1,11 1,10 1,02 1,03 1,02 0,98 0,96 1,01 0,99 1,02 0,96 0,91 Údaje v tabulkách 1.8.1, 1.8.2 a 1.8.3 nezahrnují činnost pro potřebu kontroly kvality, vývoj metod a jejich validaci, přípravu technických podkladů pro výběrová řízení, publikační a prezentační činnost, zpracování norem, zavádění nových přístrojů, mezinárodní spolupráci, činnost OMPZ, OdZPOR a celou řadu dalších aktivit, které jsou popsány podrobněji v příslušných kapitolách. Obr. 1.8.1. Relativní podíl hlavních činností ústavu na celkovém požadavku na analýzy 14
1.9 Nové přístrojové vybavení Celkový objem realizovaných investic v roce 2015 byl 11 957 299 Kč. Tato částka zahrnuje i 4 359 650 Kč z Národního akčního plánu (NAP) na nákup kapalinového chromatografu se dvěma detektory a dalších zařízení. Investiční prostředky NRL bez částky z NAP byly 7 597 649 Kč. Tabulka 1.9.1. Přehled zakoupených přístrojů v roce 2015. Místo určení Název Částka (Kč) OdZPOR OMB Oddělení NRL Plzeň Odbor NRL Brno Kapalinový chromatograf se dvěma detektory 2 979 027 Analyzátor vlhkosti 167 476 Digestoře - 3 ks 269 346 PCR cycler dvoublokový 217 800 Chlazená centrifuga 166 351 PCR boxy 101 640 Termoblok MKR 13 74 129 Klimatizační jednotka P24EL 69 691 Atomový absorpční spektrometr 799 810 Centrifuga vysokokapacitní 203 002 Planetový laboratorní mlýnek 198 924 Generátor dusíku k přístroji LC-HRMS a LC-MS/MS 1 191 194 Polarimetr 599 990 Stolní chlazená odstředivka 289 458 Automatický vícemístný extraktor 684 510 Rotační vakuová odparka 151 262 Analytické váhy 108 029 Odbor NRL Opava Kapalinový chromatograf s DAD a FLD detektorem 1 531 134 OSARK Automatický analyzátor aminokyselin 1 306 800 Mineralizační blok na hydrolýzu aminokyselin 47 916 Oddělení NRL Praha Atomový absorpční spektrometr 799 810 Celkem 11 957 299 Pozn.: Proloženým písmem jsou označeny investice z NAP. 15
Kapalinový chromatograf Thermo Fisher Scientific Inc., Ultimate 300 pro Odbor NRL Opava. Bude sloužit pro stanovení PAH v půdách, kalech a rostlinném materiálu. Kapalinový chromatograf s PDA detektorem a QDa detektorem (vše od firmy Waters). Přístroj byl instalován na OdZPOR Brno. Bude využitý při stanovení účinných látek, nečistot a formulačních přísad v POR. 16
Atomový absorpční spektrometr Agilent 240FS AA pro Oddělení NRL Plzeň a Praha. Je určený pro stanovení obsahu prvků v extraktech vzorků hnojiv, půd a rostlin. Stanice na výrobu dusíku pro systémy LC-MS/MS byla instalována na Odboru NRL Brno. 17
Na OSARK se s využitím nového automatického analyzátoru aminokyselin proměřují vzorky krmiv. Analyzátor vlhkosti HS 153/M (Mettler-Toledo) bude v OdZPOR používán pro stanovení celkové vody ve formulacích POR. Velkoobjemová centrifuga Rotanta 460 v Oddělení NRL Plzeň bude sloužit při přípravě extraktů půd podle Mehlicha 3 a při stanovení huminových látek. Jednomístný planetový mlýn PM100 v Oddělení NRL Plzeň bude využitý při úpravě vzorků půd, hnojiv a rostlin. 18
Polarimetr MCP 300 bude sloužit k měření vzorků odrůd a krmiv v Brně. Extraktor B-811 je určen pro Oddělení reziduálních analýz v Brně. Centrifuga Sigma pro úpravu vzorků krmiv a dalších materiálů. Analytické váhy Centrifuga Hettich Dvoublokový PCR cycler 19
2. Zajištění a kontrola kvality 2.1 Mezilaboratorní porovnávací zkoušky V roce 2015 bylo zorganizováno deset mezilaboratorních porovnávacích zkoušek (MPZ ÚKZÚZ), kterých se zúčastnilo celkem 104 laboratoří, z tohoto počtu bylo deset účastníků z ÚKZÚZ (včetně dvou laboratoří NIRS, laboratoře odrůdového zkušebnictví a laboratoř ICP/MS) a 36 účastníků ze zahraničí (12 ze Slovenska, 4 z Chorvatska, 4 z Řecka, 2 ze Srbska a po jednom z Belgie, Bulharska, Dánska, Estonska, Francie, Itálie, Litvy, Lotyšska, Maďarska, Rakouska, Rumunska, Ruska, Slovinska a Ukrajiny). Většina subjektů se účastnila více programů. Celkový přehled všech MPZ ÚKZÚZ pořádaných v roce 2015 je uveden v tabulce 2.1.1. Tabulka 2.1.1. Přehled MPZ ÚKZÚZ 2015. MPZ ÚKZÚZ 2015 Počet period Počet vzorků Počet testovaných parametrů Počet účastníků/ z toho zahraničních Analýza půd 2 6 31 43/5 Analýza kalů a sedimentů 2 4 22 27/1 Analýza rostlinného materiálu 2 6 23 38/5 Analýza krmiv 2 6 44 76/26 Doplňkové látky v krmivech - kokcidiostatika Doplňkové látky v krmivech - vitamíny 1 8 4 17/9 1 2 3 18/8 Analýza semen olejnin 1 3 2 23/3 Mykotoxiny v krmivech a potravinách 1 2 12 26/7 ELISA 1 5 1 6/0 Detekce živočišných proteinů 1 4 2 7/3 Oddělení dále dodalo účastníkům MPZ na základě jejich žádostí celkem 295 kusů vzorků interních referenčních materiálů pro zajištění soustavné interní kontroly kvality (to je celkově více než 66 kg upravených materiálů použitých v MPZ). Pracovníci oddělení kromě toho dále průběžně zajišťují půdním zkušebnám ÚKZÚZ vzorky IRM 20
pro tři různé hladiny ph, v roce 2015 bylo zkušebnám dodáno 55 kg půdních vzorků. Akreditované laboratoře NRL se zúčastnily kromě všech MPZ poskytovaných OMPZ ÚKZÚZ i celé řady dalších mezinárodních a národních porovnávacích zkoušek pro zajištění co nejlepší úrovně externí kontroly kvality: WEPAL (Holandsko), VD LUFA (Německo), BIPEA (Francie), EURL pro mykotoxiny (Belgie), EURL pro pesticidy - speciální residuální metody (Německo), EURL pro pesticidy - ovoce, zelenina (Španělsko), EURL pro pesticidy - obiloviny a krmiva (Dánsko), EURL pro těžké kovy v potravinách a krmivech (Belgie), GEMMA (Velká Británie), MEZOS (ČR), AAPCO - POR (USA), AFSCA - POR (Belgie), VÚB + OSARK - ELISA (ČR), aj Účast v porovnávacích testech/validačních studiích v rámci spolupráce s EU RL je uvedena v kapitole 3.3. 2.2 Pověřování externích laboratoří V roce 2015 byly uskutečněny pravidelné kontrolní audity v laboratořích u tří subjektů s potvrzeními vydanými v minulých letech. 2.3 Akreditace a certifikace Laboratoře NRL jsou akreditovány ČIA pod registračním číslem 1071 v rozsahu uvedeném v Příloze k Osvědčení o akreditaci. Osvědčení o akreditaci včetně platné Přílohy se seznamy akreditovaných zkoušek je zveřejněno na webových stránkách ÚKZÚZ. V roce 2015 byla celé Národní referenční laboratoři prodloužena akreditace na dalších 5 let a bylo do ní začleněno i pracoviště OdZPOR, takže k datu vydání této Výroční zprávy má NRL 300 akreditovaných zkoušek. Posuzování probíhalo na všech pracovištích na základě uzavřené veřejnoprávní smlouvy od 16. 3. do 27. 3. 2015. V celém systému managementu NRL byly identifikovány jen dvě drobné neshody, které byly v průběhu posuzování ihned odstraněny. Podle požadavků NRL bylo vydáno Osvědčení o akreditaci včetně Přílohy. Z důvodů uvedení v platnost Zákona o státní službě došlo k organizačním změnám, které měly za důsledek změny názvů některých funkcí a organizačních útvarů NRL. Proto bylo v červnu zažádáno o mimořádný audit a o vydání nového Osvědčení o akreditaci včetně Přílohy. Posuzování proběhlo korespondenčně a příslušné dokumenty byly vydány v souladu s požadavky NRL. Dne 12. 2. 2015 se na pracovišti OMPZ konala pravidelná dozorová návštěva pracovníků z Českého institutu pro akreditaci, která proběhla opět bez jakýchkoli 21
neshodných nálezů. Osvědčení o akreditaci č.109/2013 pro oddělení mezilaboratorních porovnávacích zkoušek jako pro poskytovatele programů zkoušení způsobilosti č. 7005 zůstává v platnosti do 14. 7. 2016. 3. Mezinárodní spolupráce 3.1 Mezinárodní projekty V současné době ÚKZÚZ vynakládá značné úsilí na zapojení do mezinárodních projektů orientovaných především na přípravu norem pro hnojiva a krmiva. NRL se také zapojila do několika významných mezinárodních validačních projektů, které jsou popsány v kapitole 3.2. Spolupráce s AGES (Agentur für Gesundheim und Ernährungssicherheit), Rakousko Pokračovala úzká spolupráce v rámci CEN/TC 260/WG7 v rámci mandátu CEN pro metody stanovení mikroelementů v minerálních hnojivech. Na splnění úkolu z mandátu M/335 se podílí pracoviště NRL ÚKZÚZ, AGES a YARA. V lednu 2015 připravily a rozeslaly pracovnice OMPZ vzorky účastníkům rozsáhlé mezinárodní validační studie týkající se dvou extrakčních metod a dvou metod stanovení mikroelementů v hnojivech moderními technikami ICP-OES a FAAS. J. Zbíral a J. Srnková zpracovali ve spolupráci s paní H. Sun z AGES výsledky validační studie, kterých bylo téměř 6000, napsali zprávu, kterou J. Zbíral prezentoval na jaře na zasedání pracovní skupiny CEN/TC 260/WG7 ve Vídni. Dále se pokračovalo na plnění zadání Projektu M335 a to na verifikacích metod na stanovení boru a molybdenu, kde byly porovnávány staré, avšak dosud používané, postupy s postupy moderními. Byla rovněž zpracována zpráva, která měla být prezentována v listopadu na podzimním zasedání CEN/TC 260/WG7 v Paříži, avšak toto zasedání bylo kvůli teroristickým útokům v Paříži zrušeno. Rizika a přínosy aplikace exogenní organické hmoty na půdu V první polovině roku byly připraveny závěrečné materiály projektu, které zahrnovaly manuál laboratorních metod (v angličtině) a brožury (plnou a zkrácenou verzi) s popisem získaných výsledků a jejich praktickou interpretací (v češtině a polštině). 22
V květnu uspořádal ÚKZÚZ závěrečný projektový seminář v Ostravě, kterého se zúčastnili zástupci státní správy, veřejné správy a výzkumných institucí. Přednášky pokryly nejen oblasti sledované v rámci projektu, ale i širší otázky spojené s legislativou a ochranou půdy. Mandát pro zpracování norem pro krmiva V rámci III. Mandátu pro zpracování norem pro krmiva byl vypracován projekt pro veřejnou soutěž pro metodu stanovení vitaminů A, D a E. Ve výběrovém řízení byl projekt CEN vyhodnocen jako nejlepší a byl předán EK k podpisu v rámci skupiny metod M 523. Vzhledem k administrativním průtahům však k podpisu smlouvy v roce 2015 nedošlo, ale akce se přesunula na začátek roku 2016. Podle dohody CEN TC/327, WG 3 však byly práce na projektu zahájeny a v současné době je připraven text normy a vyhodnocen dotazník potenciálních zájemců o validaci metody. TAIEX V rámci spolupráce s TAIEX byl v ÚKZÚZ spolu se specialisty SZV zorganizován studijní pobyt týkající se úřední kontroly hnojiv a jejich používání. (TAIEX IND /STUD EXP 58620. Study Visit on Learning about Methods Used for Fertilizer Analysis. Kosovo). Na žádost egyptského Ministerstva průmyslu byl připraven cyklus přednášek týkajících se přípravy vzorků, stanovení různých forem dusíku, validace a akreditace úředních laboratoří, stanovení mikroelementů, moderních analytických postupů apod. (TAIEX INT MARKT IND/EXP 60089. Methods of Sampling and Analysing Fertilisers, Egypt, Káhira. 26. do 27. 10. 2015). 3.2 Evropská a mezinárodní standardizace Specialisté NRL pracují v několika technických skupinách ISO (190,134,34) a CEN (345, 327, 223, 400, 260, 444). Připomínky k projednávaným materiálům byly zasílány průběžně podle schváleného harmonogramu v průběhu celého roku. 23
J. Zbíral, J. Srnková a S. Malý se zúčastnili týdenního zasedání všech pracovních skupin ISO TC 190 Soil quality ve Vídni. J. Zbíral se zúčastnil společného zasedání CEN 345, 292 a 400 Soil characterization, které se rovněž konalo v roce 2015 ve Vídni. Nominovaní pracovníci zasílali připomínky k rozpracovaným materiálům podle schváleného harmonogramu v průběhu celého roku ke všem základním oblastem (chemické metody, vzorkování, ekotoxikologie, půdní biologie a půda a životní prostředí). Zároveň byly pro ÚNMZ připomínkovány i překlady vybraných norem. Pracoviště ONRL Brno se zúčastnilo validační studie pro extrakci zředěnou 0,43M kyselinou dusičnou se stanovením metodou ICP-OES. CEN TC 260: V oblasti normalizace hnojiv se NRL zapojila do několika validačních studií, ale hlavním úkolem je práce v konsorciu AGES ÚKZÚZ YARA, která je popsána v kapitole věnované mezinárodní spolupráci. Na zasedání ve Vídni byly prezentovány výsledky rozsáhlé validační studie. Podzimní zasedání bylo z důvodu hrozby teroristických útoků zrušeno a bude zorganizováno v roce 2016. Zpoždění harmonogramu prací se však nepředpokládá. Zároveň se NRL (ONRL Brno) podílí na probíhající validaci normy pro stanovení obsahu chloristanů v průmyslových hnojivech metodou iontové chromatografie s konduktometrickou detekcí (IC-CD). ISO TC 34 SC 10: V roce 2015 pokračovaly činnosti zahájené v loňském roce a ve všech těchto činnostech se specialisté NRL aktivně účastnili. V rámci této subkomise byla nově vytvořena pracovní skupina pro NIR spektrometrii a terminologii. ISO TC 134. V roce 2015 se NRL zúčastnila dvou validačních testů pro stanovení chelatačních činidel a aktivně se účastní běžné agendy technické skupiny. CEN TC 327: Práce této technické skupiny pro zpracovávání evropských norem probíhá ve spolupráci evropskou komisí. V roce 2015 probíhaly intenzivní práce na zpracování norem z podepsaných mandátů M 521 a M 522. Podpis mandátu M 523 byl z administrativních důvodů opět odložen, ale je předpoklad, že k němu dojde počátkem roku 2016. Specialisté ONRL Brno se aktivně zapojili do několika validačních studií. První se týkala stanovení stopových prvků, těžkých kovů a dalších 24
prvků v krmivech metodou ICP-MS. Celkem bylo analyzováno 8 vzorků krmiv metodou ICP MS po mikrovlnném rozkladu v kyselině dusičné. Další validace se týkala stanovení jódu v krmivech metodou ICP-MS po alkalické extrakci a stanovení melaminu a kyseliny kyanurové metodou LC-MS/MS 3.3 Spolupráce s Referenčními laboratořemi Evropských Společenství (EU RL) NRL ÚKZÚZ je podle Nařízení č. 882/2004/ES jmenována jako Národní referenční laboratoř pro rezidua pesticidů v obilovinách a krmivech a pro těžké kovy v krmivech. Od roku 2010 bylo jmenování rozšířeno o Národní referenční laboratoř pro mykotoxiny v krmivech a od roku 2012 o Národní referenční laboratoř pro doplňkové látky v krmivech. NRL ÚKZÚZ byla v roce 2004 jmenována Národní referenční laboratoří pro doplňkové látky v krmivech podle Nařízení č. 1831/2003/ES (posuzování analytických metod navržených žadatelem k úřední kontrole doplňkových látek) a v roce 2012 bylo toto jmenování rozšířeno podle Nařízení 882/2004/ES (zajištění srovnatelnosti výsledků rozborů v jednotlivých státech EU). Pesticidy v obilovinách a krmivech: V roce 2015 se pracovníci OdRA zúčastnili čtyř porovnávacích testů, EUPT CF 9 (kukuřičná mouka), EUPT SRM 10 (kukuřičná mouka), EUPT FV 17 (brokolice) a poprvé i testu na screeningové metody EUPT SM 08 (brokolice). Ve všech testech bylo dosaženo dobrých výsledků. Účast v testu pro screeningové metody EUPT SM byla první příležitostí pro ověření možnosti nově pořízeného přístroje UHPLC-QTOF pro tyto účely. V extraktu vzorku brokolice bylo během 72 hodin od doručení vzorku stanoveno všech 14 obsažených látek na základě porovnání naměřených údajů/hmotnostních spekter s komerčně dostupnou databází, bez předchozího upřesnění rozsahu možných analytů. Společného Workshopu všech čtyř skupin pesticidních referenčních laboratoří ve Stuttgartu se zúčastnila P. Tieffová. Doplňkové látky v krmivech: Národní referenční laboratoř ÚKZÚZ pro doplňkové látky zpracovala 40 komentářů k hodnocení analytické části žádostí o autorizaci doplňkových látek a byla opět vyhodnocena jako nejaktivnější laboratoř konsorcia NRL na pravidelném workshopu EURL FA Authorisation. EURL FA Control zorganizovala v listopadu čtvrtý workshop, kde hlavní náplní bylo vyhodnocení validace upravené metody na stanovení diclazurilu a příprava metody 25
na stanovení karotenoidů. NRL ČR přispěla svou prezentací o stanovení diclazurilu k širší diskuzi o možnostech úprav metod uvedených v nařízení 152/2009. Těžké kovy v krmivech: V rámci kontroly způsobilosti se NRL úspěšně účastnila dvou testů způsobilosti (EURL-HM-20 Stanovení As, Cd, Pb, Hg a As v čokoládě, EURL-HM-21 Stanovení As, Cd, Hg, As a extrahovatelného Pb v kaolinitickém jílu). E. Čižmárová se účastnila 10. Pracovního setkání NRL organizovaného EU RL Geel v Bruselu. V rámci tohoto setkání byly diskutovány výsledky testů způsobilosti, problematika těžkých kovů z pohledu EFSA a nová legislativa určující limity TK v krmivech a potravinách. Národní referenční laboratoř ÚKZÚZ je v pravidelném kontaktu s Národní referenční laboratoří SVÚ.(detašované pracoviště Kroměříž). Mykotoxiny v krmivech: V roce 2015 pořádala EURL pouze jeden klasický test způsobilosti, a to na přítomnost citrininu v červené rýži. Další bylo formou validačních studií, které byly pořádány pod záštitou EU-RL. ONRL Brno se zúčastnil validačních studií na stanovení osmi mykotoxinů multimetodou LC-MS, stanovení phomopsinu A v lupině a multimetody pro screening mykotoxinů v krmivech metodou LC-MS. Ve všech studiích byly dosaženy výborné výsledky. V říjnu se v Bruselu uskutečnilo desáté pracovní setkání zástupců NRL pro oblast mykotoxinů v potravinách a krmivech, kterého se zúčastnily M. Pospíchalová a M. Čumová. Vedle hodnocení PT a validačních studií byly projednávány např. identifikační kritéria pro multimetody stanovení mykotoxinů. Rovněž byly prezentovány aktuální požadavky EFSA, podle kterých by měly národní referenční laboratoře analyticky zvládat stanovení i dalších přírodních toxinů: ergotových alkaloidů, pyrrolizidinových alkaloidů, opiových alkaloidů, kyseliny erukové, tropanových alkaloidů a tetrahydrocannabinolu. Laboratoř spolupracuje v této oblasti se SZPI a VŠCHT Praha a s OMPZ ÚKZÚZ, které již několik let organizuje kruhové testy pro stanovení mykotoxinů. 3.4 Spolupráce s CIPAC a ESPAC CIPAC: Oddělení zkoušení přípravků na ochranu rostlin se i v roce 2015 aktivně účastnilo mezinárodního testování metodik POR, které pořádá organizace CIPAC. Připomínky OdZPOR k analytickým metodám byly obhájeny na pravidelném pracovním zasedání CIPAC a společném zasedání FAO/WHO/CIPAC v červnu 2015 v Athénách v Řecku, kterého se za ČR zúčastnili O. Nováková a J. Foltýn. 26
ESPAC: Hlavní činností této pracovní skupiny je poskytovat podporu organizaci CIPAC, a to ve smyslu provádění malých mezilaboratorních testů a připomínkování analytických metod ještě před velkými mezilaboratorními testy pořádanými CIPAC. I v roce 2015 se OdZPOR aktivně účastnilo testování metodiky POR pro stanovení účinné látky chlorantraniliprole (viz kap. 1.5). V současné době OdZPOR patří mezi nejlepší laboratoře, které provádějí kontrolu POR v EU, a proto na žádost komisařky DG SANTE byla O. Nováková požádána o předání zkušeností s laboratorními analýzami falšovaných POR. V rámci programu Better Training for Safer Food (BTSF) pořádaného pro členské státy EU ve dnech 23.- 25. 9. 2015 v Irsku, prezentovala s velkým úspěchem zkušenosti OdZPOR s odhalováním falšovaných POR. 4. Vzdělávání a publikační činnost 4.1 Vzdělávání pracovníků NRL Několik pracovníků se aktivně účastnilo významných domácích i zahraničních odborných akcí. Jednalo se především o pracovní zasedání EURL a konsorcií národních referenčních laboratoří pro doplňkové látky, pesticidy, těžké kovy a mykotoxiny v krmivech, pracovní zasedání CIPAC a společné zasedání CIPAC/FAO/WHO. Proběhla zaškolení příslušných pracovníků na nově zakoupené přístrojové vybavení. Pracovníci NRL se aktivně zúčastnili mezinárodních konferencí a workshopů. Z významnějších to byly např CIPAC Symposium 2015, Atény, Řecko; BTSF workshop: The role of formulation analysis in the detection of counterfeit/illegal pesticides, Grange, Irsko; Soil Science in a Changing World, Wageningen, Holandsko; 37. workshop mykotoxinové společnosti, Bratislava, Slovensko; 7th International Symposium on Recent Advances in Food Analysis (RAFA), Praha; pracovní workshop pro uživatele měřicí techniky LC-HRMS, Kodaň, Dánsko. Pracovníci NRL se v r. 2015 účastnili specializovaných školení a seminářů se zaměřením na analytiku, instrumentální vybavení, validaci, metrologii, IRM a MPZ. Manažeři kvality a specialisté akreditovaných zkušebních laboratoří se účastnili pro ně určených kursů. 27
V r. 2015-1 pracovnice pokračovala v magisterské studiu, - 1 pracovnice ukončila magisterské studium, - 2 pracovnice pokračovaly v doktorandském studiu, - 1 pracovnice ukončila doktorandské studium. Jazykové vzdělávání probíhalo v souladu s platnými vnitroústavními předpisy. 4.2 Publikace a prezentace na odborných akcích Průběžně bylo v r. 2015 vydáno 6 publikací k mezilaboratorním porovnávacím zkouškám (MPZ). Tři čísla Bulletinu NRL byla zveřejněna elektronicky na internetových stránkách ústavu. Průběžně byly aktualizovány a doplňovány JPP Zkoušení krmiv a JPP Analýza půd. V únoru 2015 vešlo v platnost druhé vydání JPP Zkoušení hnojiv. Soubor postupů byl vydán jako tištěná publikace i elektronicky na CD. Postupy zkoušení hnojiv vycházejí z platných předpisů a norem a byly doplněny o řadu poznámek, které byly získány dlouholetými zkušenostmi v laboratoři. V červenci 2015 byl vydán a vešel v platnost nově sepsaný soubor postupů JPP Analýza srážkových a lyzimetrických vod. Všechny uvedené publikace jsou výsledkem usilovné práce týmů specialistů NRL a v konečné fázi příprav také pracovnic Edičního střediska ústavu. Pokračovala úzká spolupráce v rámci CEN/TC 260 WG7 v rámci mandátu CEN pro metody stanovení mikroelementů v minerálních hnojivech. Na splnění úkolu z mandátu M/335 se podílí pracoviště NRL ÚKZÚZ, AGES a YARA. Výsledkem spolupráce byly dvě publikace zpráva z validační studie. V průběhu roku 2015 publikovali specialisté NRL v mnoha odborných časopisech, prezentovali práci NRL na konferencích a seminářích. Úplný výčet publikační činnosti pracovníků NRL je obsažen v kapitole 4.3. Mimo to Oddělení NRL-OMB v rámci spolupráce s Centrem pro výzkum toxických látek v prostředí (Masarykova univerzita, Brno) zajistilo krátkodobé stáže studentů, kteří projevili zájem navštívit toto pracoviště. ONRL Brno poskytl odborné vedení pro SOČ pro tři studenty SPŠCH (stanovení ergotových alkaloidů, stanovení opiových alkaloidů, stanovení těžkých kovů). Oddělení TO ONRL Brno v rámci spolupráce s Ústavem chemie potravin, VÚT umožnilo naměření vzorků pšenice pro bakalářskou práci. 28
Obrázek 4.2.1. JPP Zkoušení hnojiv. Obrázek 4.2.3. JPP Analýza srážkových a lyzimetrických vod. Obrázek 4.2.4. Zprávy k validační studii (Projekt M335/2013-08 ). 29
Obrázek 4.2.5. Závěrečné publikace k česko-polskému projektu. V r. 2015 byly aktualizovány webové stránky NRL s ohledem na novou organizační strukturu NRL. Intranet pod platformou eagri i nadále spolehlivě slouží potřebám NRL. 4. 3 Publikační činnost pracovníků NRL 2015 Rypl, V., Žalmanová, A.: Kvantitativní stanovení kyseliny močové v organických hnojivech metodou HPLC, Bulletin NRL 2015, číslo 1/2015, ročník XIX, str. 1 7, ISSN 1801 9196 Urbánková, E., Niedobová, E., Zbíral, J.: Ověření postupu analýzy hnojiv metodou FAAS a ICP-OES, Bulletin NRL 2015, číslo 1/2015, ročník XIX, str. 8 18, ISSN 1801 9196 Staňková, K.: Izolace a stanovení počtu bakterií rodu Enterococcus (Enterococcus faecium) podle ČSN EN 15788, Bulletin NRL 2015, číslo 1/2015, ročník XIX, str. 19 34, ISSN 1801 9196 Tieffová P., Kosubová, P.: Stanovení reziduí dithiokarbamátových fungicidů, Bulletin NRL 2015, číslo 2/2015, ročník XIX, str. 1 8, ISSN 1801 9196 Kantošová, K., Kosubová, P.: Stanovení perfluoroalkylových sloučenin v komplexních matricích, Bulletin NRL 2015, číslo 2/2015, ročník XIX, str. 9 27, ISSN 1801 9196 Čumová, M., Kosubová, P., Mrkvicová, M.: Stanovení pyrrolizidinových alkaloidů v rostlinném materiálu, Bulletin NRL 2015, číslo 2/2015, ročník XIX, str. 28 39, ISSN 1801 9196 30
Váňa, M.: Zavedení testu ekotoxicity se salátem Lactuca sativa, Bulletin NRL 2015, číslo 3/2015, ročník XIX, str. 1 10, ISSN 1801 9196 Čuhel, J.: Extrakce mikrobiální DNA ze vzorků lesních půd, Bulletin NRL 2015, číslo 3/2015, ročník XIX, str. 11 22, ISSN 1801 9196 Šulová, R., Balarinová, A., Kabátová, N.: Stanovení obsahu taninu v čiroku spektrofotometricky, Bulletin NRL 2015, číslo 3/2015, ročník XIX, str. 23 35, ISSN 1801 9196 Srnková, J. et al.: Mezilaboratorní porovnávací zkoušky ÚKZÚZ pro analytické laboratoře Výsledky v periodě 2015 1. Analýza půd, kalů a sedimentů. OMPZ ÚKZÚZ, Brno, 117 s., ISSN 1212-5105 Srnková, J. et al.: Mezilaboratorní porovnávací zkoušky ÚKZÚZ pro analytické laboratoře Výsledky v periodě 2015 1. Analýza rostlinného materiálu a krmiv. OMPZ ÚKZÚZ, Brno, 176 s., ISSN 1212-5091 Srnková, J. et al.: Mezilaboratorní porovnávací zkoušky ÚKZÚZ pro analytické laboratoře Výsledky v periodě 2015 2. Analýza půd, kalů a sedimentů. OMPZ ÚKZÚZ, Brno, 103 s., ISSN 1212-5105. Srnková, J. et al.: Mezilaboratorní porovnávací zkoušky ÚKZUZ pro analytické laboratoře Výsledky v periodě 2015 2. Analýza rostlinného materiálu a krmiv. OMPZ ÚKZÚZ, Brno, 169 s., ISSN 1212-5091. Srnková, J. et al.: Mezilaboratorní porovnávací zkoušky ÚKZÚZ pro analytické laboratoře Souhrnné statistické zpracování za rok 2015. OMPZ ÚKZÚZ, Brno. 127 s., ISBN 978-80-7401-117-7. Srnková, J. et al.: Mezilaboratorní porovnávací zkoušky ÚKZUZ pro analytické laboratoře Výsledky v roce 2015. Stanovení mykotoxinů v krmivech a potravinách. OMPZ ÚKZÚZ, Brno, 32 s., ISBN 978-80-7401-105-4. Žalmanová, A., Varmužová, R., Zbíral, J., Rypl, V., Petrová, J., Niedobová, E.: Jednotné pracovní postupy Zkoušení hnojiv, vydání druhé, 396 s., NRL, ÚKZÚZ, Brno 2015, ISBN 978-80-7401-101-6 Žalmanová, A., Varmužová, R., Zbíral, J., Rypl, V., Petrová, J., Niedobová, E.: Jednotné pracovní postupy Zkoušení hnojiv, vydání druhé, elektronické (CD), NRL, ÚKZÚZ, Brno 2015, ISBN 978-80-7401-100-9 Bolechová, M.; Benešová, K.; Běláková, S.; Čáslavský, J.; Pospíchalová, M.; Mikulíková, R.: Determination of seventeen mycotoxins in barley and malt in the Czech Republic, Food Control, 2015, roč. 47, s. 108-113. ISSN: 0956-7135. Bolechová, M.; Čáslavský, J.; Pospíchalová, M.; Kosubová, P.: UPLC-MS/MS method for determination of selected pyrrolizidine alkaloids in feed, Food Chemistry, 2015, roč. 170, s. 265-270. ISSN: 0308-8146. 31