Krev, složení krve, formované krevní elementy Ústav pro histologii a embryologii Předmět: Histologie a embryologie 1, B01131, obor Zubní lékařství Datum přednášky: 5.11.2013
SLOŽENÍ Celkový objem krve u dospělého 4 6 litrů. Krevní plazma 10%ní roztok proteinů ve vodě albumin, α, β, γ globuliny, fibrinogen celkem 7 % anorganické soli 0,9 % organické látky transportované krví Koagulace přeměna fibrinogenu na nerozpustný fibrin» vzniká tak sérum (krevní plazma bez fibrinogenu) Formované krevní elementy Erytrocyty Leukocyty Trombocyty Hematokrit podíl objemu erytrocytů v jednotce objemu krve norma muži: 0,42 0,52 ženy: 0,37 0,47 ERYTROCYTY Počet muži: 4,5 6 milionů v 1 µl krve ženy: 4,0 5,2 milionu v 1 µl krve Snížení počtu erytrocytů provází obvykle anemii. Zvýšené množství, polycytemie (erytrocytóza), může být fyziologickou adaptací. Tvar, velikost Bikonkávní disk, průměr 7,5 µm, tloušťka 2,6 (0,8) µm. Tvar bikonkávního disku poskytuje při daném objemu maximální zvětšení povrchu, potřebné pro výměnu plynů. Makrocyty erytrocyty o průměru větším než 9 µm Mikrocyty erytrocyty o průměru menším než 6 µm Anizocytóza významná přítomnost různě velkých erytrocytů Poikilocytóza významná přítomnost různě deformovaných erytrocytů Plazmalema erytrocytu Periferní proteiny vnitřního povrchu membrány asociované s jejími integrálními proteiny udržují speciální tvar a flexibilitu erytrocytu, nutnou pro průchod kapilárním systémem. Glykoproteiny a glykolipidy membrány erytrocytů determinují krevní skupiny (AB0 a MN systém). 1
Membrána erytrocytu funguje jako semipermeabilní membrána. v hypotonickém prostředí bobtnání, zakulacování erytrocytů s porušením membrány a únikem hemoglobinu hemolýza. Hemolyzovaná krev má pak lakový vzhled. Vyprázdněné membrány se jeví jako stíny ( ghosts ). v hypertonickém prostředí svrašťování erytrocytů, které pak mají ostnitý vzhled. Hemoglobin Erytrocyt obsahuje 33%ní roztok hemoglobinu. Hemoglobin konjugovaný protein dva α-polypeptidové řetězce, dva β-polypeptidové řetězce vázané na hem. Hem derivát porfyrinu obsahující dvojmocné železo. Hemoglobin s reverzibilně navázaným kyslíkem oxyhemoglobin Hemoglobin s reverzibilně navázaným oxidem uhličitým karbaminohemoglobin Který z plynů se naváže, závisí na jeho parciálním tlaku v daném prostředí. Oxid uhelnatý se váže ireverzibilně za vzniku karboxyhemoglobinu a znemožňuje tak transport dýchacích plynů. Oxidací dvojmocného železa hemoglobinu na železo trojmocné vzniká methemoglobin, který rovněž nemá schopnost vázat reverzibilně kyslík. Pokles koncentrace hemoglobinu v krvi je patologický stav anemie. Bývá, ale nemusí být spojena s poklesem počtu erytrocytů. Životnost erytrocytů 24 48 hodin po vyplavení z kostní dřeně do periferní krve obsahují erytrocyty zbytky ribosomální RNA (barvitelné brilant-kresylovou modří) substantia reticulofilamentosa. Podle ní se nazývají retikulocyty. 0,5 1 % celkového množství erytrocytů jsou retikulocyty. Jejich počet informuje o současné aktivitě kostní dřeně při produkci erytrocytů. Erytrocyty setrvávají v cirkulaci cca 120 dní. Poté jsou odbourávány ve slezině a kostní dřeni makrofágy. Signálem pro odbourání opotřebovaného erytrocytu jsou změny ve struktuře membrány. LEUKOCYTY Počet 4 000 10 000 v 1 µl krve Snížení počtu leukocytů leukopenie Zvýšení počtu leukocytů leukocytóza Základní rozdělení Granulocyty obsahují v cytoplazmě specifická granula podle barvitelnosti granul Neutrofilní granulocyty Eozinofilní granulocyty Bazofilní granulocyty 2
Agranulocyty obsahují azurofilní granula Lymfocyty Monocyty DIFERENCIÁLNÍ KREVNÍ OBRAZ Dospělí (%) Děti (%) Neutrofilní segmenty 40 70 25 60 Granulocyty Neutrofilní tyčky do 5 do 6 Eozinofilní 2 10 1 5 Bazofilní 0 1 0 1 Agranulocyty Lymfocyty 20 40 25 50 Monocyty 2 10 1 6 Neutrofilní granulocyty Velikost 10-12 µm. Jádro nesegmentované, ve tvaru podkovy u tyček nejmladší neutrofily 2 5 segmentové podle stáří neutrofilů Hynkovo číslo = průměrný počet segmentů v jednom neutrofilním granulocytu (norma 2,76), postupná segmentace dovoluje zhodnocení stáří. Arnethův obraz řadí neutrofily podle počtu segmentů do 5 tříd posun doleva (převaha mladých buněk) posun max. četnosti z 3. třídy k nižším posun doprava (převaha starších buněk) posun k třídám 4 a 5 Stejné označení se používá i pro vyjádření poklesu či vzestupu hodnoty Hynkova čísla. V některých neutrofilních granulocytech je u žen dobře patrný sex-chromatin (Barrovo tělísko) paličkovitý útvar na jednom ze segmentů jádra. Cytoplazma lehce eozinofilní. Granula specifická drobná, lososová, na hranici rozlišovací schopnosti mikroskopu, obsahují četné enzymy. Granula nespecifická purpurová, azurofilní, jsou lyzosomální povahy. Životnost 6 7 hod v krevním oběhu, 1 4 dny pokud vycestují do vaziva. Po vycestování přes kapilární stěnu (diapedéza) se aktivně pohybují a fagocytují zejména bakterie (proto mikrofágy). Odumřelé neutrofily, hromadící se v místě zánětlivého procesu, jsou součástí hnisu (pus). 3
Eozinofilní granulocyty Velikost 12 14 µm. Jádro dvoulaločné, typicky brýlovitého tvaru. Cytoplazma lehce bazofilní. Granula specifická uniformní, kulovitého tvaru, dobře rozlišitelná, cihlově červená. Fagocytují hlavně komplexy antigen- protilátka, produkované zejména při alergických reakcích, ale i jako projev humorální imunitní reakce. Likvidují parazitické červy. Tyto procesy jsou spojeny s jejich zmnožením eozinofilie. Bazofilní granulocyty Velikost 10 µm. Jádro nepravidelně laločnaté, překryté granuly. Cytoplazma eozinofilní. Granula specifická nestejná, nepravidelná, hrubá, hnědofialově zbarvená. Obsahují histamin a heparin. Mohou spolupůsobit s žírnými buňkami při některých projevech kožní hypersenzitivity. Lymfocyty Velikost: malé 6 8 µm, střední a velké do 18 µm. V krvi převládají malé. Jádro kulovité s kondenzovaným chromatinem. Cytoplasma v tenké vrstvičce obklopuje jádro, bazofilní. Granula nespecifická azurofilní. B- a T- lymfocyty se liší úlohou v obranné reakci organismu, místem diferenciace, životností a dalšími znaky. Na běžně zpracovaném krevním nátěru nejsou rozlišitelné. Jejich problematika je probrána v kapitole Lymfatický systém. Monocyty Velikost 12 20 µm. Jádro oválné, ledvinovité až podkovovité, excentricky uložené. Ve srovnání s lymfocytem chromatin méně kondenzovaný. Cytoplazma bazofilní. 4
Nespecifická granula azurofilní. Monocyty cirkulující v krvi představují prekurzory elementů monocytomakrofágového systému. Po opuštění cévního řečiště se ve vazivu diferencují v makrofágy. TROMBOCYTY Počet 150 000 400 000 v 1 µl krve. Velikost 2 4 µm. Trombocyty jsou fragmenty cytoplazmy megakaryocytů, obrovských polyploidních buněk sídlících v kostní dřeni. Tvar čočkovitý, na krevních nátěrech většinou ve shlucích. Periferní světlá zóna je transparentní (hyaloméra), v centru granuloméra, obsahující purpurově zbarvená granula. Periferie trombocytu je vyztužena prstencem mikrotubulů a obsahuje kanalikulární systém invaginací povrchové membrány. Granuloméra obsahuje tři typy granul. Látky v nich obsažené se uplatňují při procesech spojených s reakcí trombocytů na porušení celistvosti a protisrážlivé funkce endotelu cév. Součásti této reakce jsou vznik destičkového trombu a uvolnění destičkových faktorů, potřebných při hemokoagulaci. Obr. 1. Krevní elementy (http://www.highlands.edu/academics/divisions/scipe/biology/faculty/harnden/2122/im ages/wbcells.jpg). NEUTROFILNÍ GRANULOCYT EOZINOFILNÍ GRANULOCYT BAZOFILNÍ GRANULOCYT TYČKA trombocyt erytrocyt LYMFOCYT MONOCYT 5
Obr. 2. Typy leukocytů (Junqueira, Carneiro, Kelley 1992, Basic Histology). NEUTROFILNÍ GRANULOCYT EOZINOFILNÍ GRANULOCYT BAZOFILNÍ GRANULOCYT LYMFOCYT MONOCYTY 6
HEMOPOESA Vývoj jednotlivých krevních elementů bude probrán na praktických cvičeních. Obecný přehled hemopoesy viz obr. 3. Obr. 3. Stadia hemopoesy (Lullmann-Rauch 2012, Histologie). 7