UNIVERZITA KARLOVA V PRAZE FARMACEUTICKÁ FAKULTA V HRADCI KRÁLOVÉ KATEDRA FARMACEUTICKÉ TECHNOLOGIE RIGORÓZNÍ PRÁCE

UNIVERZITA KARLOVA V PRAZE FARMACEUTICKÁ FAKULTA V HRADCI KRÁLOVÉ KATEDRA FARMACEUTICKÉ TECHNOLOGIE RIGORÓZNÍ PRÁCE Využití DSC pro hodnocení kusových léčivých přípravků I. Use of DSC for evaluation of single medicines I. Vypracovala: Vedoucí práce: Mgr.Pavla Melezínková RNDr.Marie Musilová, CSc. Hradec Králové, 2012

Prohlašuji, že tato práce je mým původním autorským dílem, které jsem vypracovala samostatně. Veškerá literatura a další zdroje, z nichž jsem čerpala, jsou uvedeny v seznamu použité literatury a v práci řádně citovány. Práce nebyla použita k získání jiného nebo stejného titulu... podpis diplomanta

Děkuji RNDr. Marii Musilové, CSc. za odborné vedení při zpracování rigorózní práce, za věnovaný čas a za poskytování cenných rad.

ABSTRAKT Univerzita Karlova v Praze, Farmaceutická fakulta v Hradci Králové Katedra Katedra farmaceutické technologie Kandidát Mgr. Pavla Melezínková Konzultant RNDr. Marie Musilová, CSc. Název rigorózní práce Využití DSC pro hodnocení kusových léčivých přípravků I. Tato práce je součástí skupiny prací, zabývajících se možností stanovení obsahu léčivých látek v kusových léčivých přípravcích pomocí diferenční skenovací kalorimetrie. Podmínkou tohoto typu stanovení je přítomnost vyhodnotitelného píku na DSC křivce, jehož hodnoty ΔH jsou přímo úměrné množství inkorporované léčivé látky. Teoretická část práce podává přehled o všech rektálních léčivých přípravcích dostupných v ČR. U čípků hodnocených metodou DSC je uveden přehled obsažených léčivých látek a jejich kvantitativní zastoupení v jednotlivých přípravcích. V experimentální části jsou pak prezentovány mikroskopické snímky, dokazující přítomnost suspendovaných léčivých látek v čípcích. Dále jsou zde uvedeny záznamy a vyhodnocení kalorimetrického měření a u skupiny přípravků s obsahem paracetamolu je porovnáno deklarované množství látky s hodnotou určenou pomocí diferenční skenovací kalorimetrie. Klíčová slova: DSC, čípky, léčivé látky

ABSTRACT Charles University in Prague, Faculty of Pharmacy in Hradec Králové Department of Department of Pharmaceutical Technology Candidate Mgr. Pavla Melezínková Consultant RNDr. Marie Musilová, CSc. Title of Thesis Use of DSC for evaluation of single medicines I. This thesis is part of the thesis, which deals with posibility of setting the contain of active substances in individual medicines using the differential scanning calorimetry. To set up this type, it is necessary the presence of evaluated peak on DSC curved line, which value ΔH is proportional to the amount of incorporated active substance. The theoretical part shows summary about all rectal active substances in the Czech Republic. There is summary of contained active substances at suppositories valued by DSC method and their quantitative presence in each substance. In the experimental part, there are next presented microscopic shots, which prove the presence of suspended active substances in suppositories. There are also notes and evaluation of calorimetry measuring and at the group of preparations, there is compared the declared amount of substance with the value specified with DSC. Key words: DSC, suppositories, active substances

OBSAH 1 ZADÁNÍ PRÁCE...7 2 ÚVOD...8 3 TEORETICKÁ ČÁST...9 3.1 Rektální lékové formy...9 3.1.1 Systémový účinek...10 3.1.2 Lokální účinek...10 3.1.3 Čípky...11 3.2 DSC...16 3.2.1 4 5 Měření DSC...16 EXPERIMENTÁLNÍ ČÁST...18 4.1 Použité LP a jejich charakteristiky...18 4.2 Suroviny...22 4.3 Přehled LL v použitých LP...23 4.4 Přístroje...25 4.5 Příprava vzorků a pracovní postupy...26 VÝSLEDKY A DISKUZE...27 5.1 Záznamy DSC měření jednotlivých LP...27 5.2 Záznamy DSC měření paracetamolu...52 5.3 Záznamy DSC měření ibuprofenu...59 5.4 Mikroskopie...63 6 ZÁVĚRY...79 7 SEZNAM ZKRATEK...80 8 POUŽITÁ LITERATURA...81 6

1 ZADÁNÍ PRÁCE V teoretické části: podat stručný přehled rektálních léčivých přípravků, jejich systémového i lokálního využití provést stručnou charakteristiku čípků a čípkových základů shrnout registrované rektální léčivé přípravky obchodované v ČR, uvést jejich spotřebu za minulé roky pojednat o diferenční skenovací kalorimetrii, metodě použité v následujícím experimentu V experimentální části: změřit vybrané léčivé přípravky stanovenou metodou a zpracovat výsledky do přehledných záznamů zjistit ze záznamů přítomnost vyhodnotitelných píků tání léčivých látek zhodnotit možnost využití diferenční skenovací kalorimetrie ke stanovení obsahu konkrétních léčivých látek a zjištění doplnit mikroskopickým pozorováním v případě možnosti stanovení obsahu léčivé látky pomocí stanovené metody vypracovat kalibrační křivku a porovnat deklarovaný obsah se zjištěným 7

2 ÚVOD Čípky tvoří skupinu léčivých přípravků, u nichž je stanovení obsahu léčivé látky značně komplikované. Před vlastním stanovením je totiž nejdříve nutné oddělit léčivo od čípkového základu. Metoda dynamické skenovací kalorimetrie se proto jeví u těchto přípravků jako rychlá metoda, při níž by bylo možné stanovovat léčivo bez nutnosti předchozí separace základu. Vychází se z předpokladu, že pokud bude léčivo v základě v krystalické formě, pak množství tepla potřebného na roztátí látky bude přímo úměrné jeho hmotnosti. Pomocí kalibrační křivky by se potom mohl snadno stanovit obsah. Pokud je léčivo v základě rozpuštěno nebo se bude za vyšších teplot rozpouštět, nebude možné tuto metodu aplikovat. Údaje o rozpustnosti léčiv v čípkových základech, zvláště pak za vyšší teploty, nejsou známy a proto je nutné chování léčiv za těchto podmínek prověřit. Cílem práce je zjistit, které léčivé látky v čípcích mají na záznamu vyhodnotitelný pík tání a které jsou potenciálně vhodné pro stanovení obsahu pomocí dynamické skenovací kalorimetrie. 8

3 TEORETICKÁ ČÁST 3.1 Rektální lékové formy Rektální léčivé přípravky jsou určené k podání do konečníku za účelem systémového nebo lokálního účinku, popř. pro diagnostické účely (1). První zmínka o podání léčiva per rectum je nalezena již ve starověku v egyptském Ebersově papyru v roce 1500 př. n. l. ve formě klyzma k očistě střev od škodlivin. Mongolové později využili kravského rohu k zavedení výživné tekutiny do konečníku. Klyzma s účinkem anthelmintickým, spasmolytickým, adstringentním nebo emolientním byla aplikována řeckými předchůdci dnešních gastroenterologů. Ve starověké Indii a Mezopotámii se do konečníku aplikovaly léčivé látky přimíchané do loje nebo vosku, což postupně směřovalo k dnešní výrobě čípků. Mezi historické rektální aplikační formy patří např. napuštěné dřevěné tyčinky, kovové jehly, pro aplikaci klyzma pak bambusové tyčinky nebo kravské rohy s měchýřem apod. S novými poznatky o lidské anatomii, účinku látek na organismus a s novými technologickými možnostmi se přecházelo k přípravě a výrobě bezpečnějších rektálních lékových forem (2). Český lékopis 2009 uvádí tyto rektální LP: Čípky Rektální tobolky Rektální roztoky, emulze a suspenze Prášky a tablety pro rektální roztoky a suspenze Polotuhé rektální přípravky Rektální pěny Rektální tampony s léčivy (1) 9

3.1.1 Systémový účinek Pro dosažení systémového účinku se rektální přípravky s výhodou používají u pacientů, u kterých není perorální podání LP možné (zvracení) (3), u pacientů v bezvědomí nebo v případě, že je nutný rychlý nástup účinku (epilepsie) (4). Nenahraditelné jsou rektální LF zejména v pediatrii, kde jsou využívány hlavně čípky s obsahem paracetamolu nebo ibuprofenu k léčbě horečky u kojenců (5). V případě akutního záchvatu febrilních křečí se podává rektálně diazepam (6). Rektální aplikační formy lze využít i k navození analgosedace u dětí před bolestivým nebo stresujícím diagnostickým či terapeutickým výkonem (7), u dospělých pak také v symptomatické terapii horečnatých onemocnění (8), nauzey a zvracení (9), migrény (10), bolesti nebo viscerálních spazmů (11). Oproti LL podaným perorálně se LL obsažené v rektálních lékových formách dostávají přímo do systémové cirkulace a tím se vyhýbají presystémovému metabolismu v játrech (firstpass effect). Firstpass effect není však pro rektální přípravky zcela vyloučen. Při hlubší rektální aplikaci (za linea anorectalis resp. hranici rekta a análního kanálu) se látka dostává cestou vena mesenterica superior do portálního systému a je částečně biotransformována v játrech. Nejspolehlivější a nejrychlejší je tedy rektální aplikace těsně nad svěrač řitní při prázdné ampule (7). 3.1.2 Lokální účinek Srovnatelný význam terapeutického použití rektálních přípravku za účelem systémového působení má i jejich možnost lokální aplikace. Zejména v případě vnitřních či zevních hemoroidů je z hlediska farmakoterapie rektální aplikace mastí nebo čípků téměř nenahraditelná (12). Součástí takových přípravků jsou léčivé látky ze skupiny lokálních anestetik (cinchokain, lidokain), adstringentní a antiseptické látky (polikresulen, gallan bismutitý), látky působící na cévní stěnu (dobesilát vápenatý), antiflogistika (tribenosid), hemostatika (vápenatá sůl karboxycelulózy) nebo látky podporující hojení poškozené tkáně (vitaminy A, D) (13). Také k navození remise, ale i k prevenci relapsu ulcerózní kolitidy a Crohnovy nemoci se včetně perorálních střevních protizánětlivých léčiv ordinují rektální 10

přípravky, především čípky s obsahem derivátů aminosalicylátu nebo kortikoidních látek. Rektální formy mají v tomto případě méně nežádoucích účinků než formy perorální (14). Klyzma jsou používána za účelem vyprázdnění střevního obsahu před endoskopickými diagnostickými vyšetřovacími metodami tlustého nebo tenkého střeva nebo jsou aplikována k vyprázdnění před porodem. K léčbě zácpy lze potom podat osmoticky působící glycerinové čípky. 3.1.3 Čípky Čípky patří mezi jedny z nejčastěji používané rektální přípravky. Jedná se o jednodávkové tuhé přípravky připravené litím nebo lisováním. Obsahují jednu nebo více LL dispergovaných nebo rozpuštěných ve vhodném čípkovém základu. Mohou obsahovat i další pomocné látky, např. protimikrobní látky, barevné pigmenty, rozpouštědla, kluzné látky apod. (1). Klasickým čípkovým základem byl po dlouhou dobu kakaový olej. Ten, se ale v průběhu 2. světové války stal deficitním, a proto se začaly hledat adekvátní náhrady. Z počátku se používaly ztužené tuky, které však měly často nevyhovující konzistenci. Výsledkem dalšího bádání byly základy typu Adeps neutralis, označovaný též jako Adeps solidus nebo tvrdý tuk. Jedná se o čisté mono, di nebo triglyceroly nasycených mastných kyselin s počtem uhlíků 1216 nebo častěji o jejich směsi. Jako čípkové základy jsou požívány především směsi triacylglycerolů s menším množstvím diacylglycerolů. Obsah monoacylglycerolů je vzhledem k jejich dráždivosti limitován. Kromě hydrofobních základů se také používají hydrofilní čípkové základy. Lze je však využít jen ve specifických případech, protože jsou dráždivé. Absorbují vodu z rektální mukózy a vyvolávají tak defekační reflex. Mezi používané hydrofilní základy patří makrogoly (polyethylenglykol) nebo glycerogel želatiny (15). Někdy je nezbytné přidat další pomocné látky pro zvýšení kvality nebo zachování charakteristik čípků. Konzistence může být upravena přidáním včelího vosku, cetylpalmitátu nebo tekutého parafínu. Pokud hrozí riziko sedimentace nebo flokulace částic léčivé látky, přidávají se látky zvyšující viskozitu, jako např. bentonit, aerosil nebo glycerinmonostearát. K emulgaci vodných roztoků do hydrofobního základu se používají emulgátory, např. lecitin (15). 11

Předmětem zkoumání je také modulace uvolňování léčivé látky z čípků vrstvením dvou základů s odlišnými charakteristikami (16) nebo přidáním surfaktantu laurylsíranu sodného a Polysorbatu 80 u čípků s obsahem salbutamolu (17). Rektální přípravky jsou používány ve všech zemích světa. V některých se však těší větší oblibě, zatímco v některých je tato cesta podání považována za méně akceptovatelnou. Větší oblibu mají v jižních evropských státech, nejméně oblíbené jsou ve Velké Británii a v USA. Spotřebu rektálních LP v ČR za posledních 7 let ukazuje tab.1. Tab.2 podává přehled registrovaných obchodovaných čípků v ČR k datu 9.11.2011, jejich léčivé látky a teploty tání léčivých látek.v tab.3 jsou potom ostatní registrované rektální formy. Kromě uvedených čípků je v ČR registrováno ještě 350 homeopatických čípků, z nichž je obchodován pouze přípravek VIBURCOL. 12

Tabulka 1 Počet distribuovaných balení rektálních přípravků v ČR v letech 20032011 (*počet neuveden) (18) 13

ČÍPKY Název HVLP ALGIFEN ASACOL DICLOREUM 100 DICLOREUM 50 DOBEXIL H FAKTU INDOMETACIN 100 BERLINCHEMIE INDOMETACIN 50 BERLINCHEMIE KETONAL MONOFLAM 100 MG NUROFEN PRO DĚTI ČÍPKY 125 MG NUROFEN PRO DĚTI ČÍPKY 60 MG PANADOL BABY ČÍPKY PANADOL JUNIOR ČÍPKY PARALEN 100 PARALEN 500 SUP PENTASA PENTASA 1 G PREPARATION H RECTODELT 100 MG SALOFALK 250 SALOFALK 500 SPASMOPAN SPOFAX SUPPOSITORIA GLYCERINI LÉČIVA TORECAN TRAMAL ČÍPKY 100 MG VERAL 100 MG ZOFRAN LL Fenpiverini bromidum Metamizolum natricum monohydricum Pitofenoni hydrochloridum Mesalazinum Diclofenacum natricum Diclofenacum natricum Lidocaini hydrochloridum monohydricum Calcii dobesilas monohydricus Cinchocaini hydrochloridum Policresulenum Indometacinum Indometacinum Ketoprofenum Diclofenacum natricum Ibuprofenum Ibuprofenum Paracetamolum Paracetamolum Paracetamolum Paracetamolum Mesalazinum Mesalazinum Selachiorum hepatis oleum Faecis extractum fluidum Prednisonum Mesalazinum Mesalazinum Fenpiverini bromidum Paracetamolum Pitofenoni hydrochloridum Codeini phosphas hemihydricus Bismuthi subgallas Cinchocaini hydrochloridum Carboxycellulosum calcicum Glycerolum 85% Thiethylperazini dimaleas Tramadoli hydrochloridum Diclofenacum natricum Ondansetronum t.t. 178 (19) 180 (20) * 283 (21) 280 (1) 280 (1) 69 (21) 180185 (22) 99101 (21) * 158162 (1) 158162 (1) 9497 (1) 280 (1) 7578 (1) 7578 (1) 167172 (1) 167172 (1) 167172 (1) 167172 (1) 283 (21) 283 (21) kapalina kapalina 233235 (21) 283 (21) 283 (21) 178 (19) 167172 (1) * 220 (19) 223 (23) 99101 (21) * kapalina * 180184 (1) 280 (1) 231 (19) Tabulka 2 Přehled obchodovaných registrovaných HVLP čípků dle SÚKL k 9.11.2011, jejich LL a teploty tání LL (* nezjištěno) 14

REKTÁLNÍ SUSPENZE Název HVLP ASACOL ENEMA 4 G PENTASA 1 G SALOFALK 4 G LL Mesalazinum Mesalazinum Mesalazinum REKTÁLNÍ ROZTOKY Název HVLP LL DIAZEPAM DESITIN RECTAL TUBE 10 MG Diazepamum DIAZEPAM DESITIN RECTAL TUBE 5 MG Diazepamum Docusatum natricum YAL Sorbitolum REKTÁLNÍ MASTI A KRÉMY Název HVLP LL Lidocaini hydrochloridum monohydricum DOBEXIL H UNG Calcii dobesilas monohydricus Lidocaini hydrochloridum monohydricum DOXIPROCT Calcii dobesilas monohydricus Lidocaini hydrochloridum monohydricum DOXIPROCT PLUS Dexamethasoni acetas Calcii dobesilas monohydricus Cinchocaini hydrochloridum FAKTU Policresulenum Selachiorum hepatis oleum PREPARATION H Faecis extractum fluidum Tribenosidum PROCTOGLYVENOL Lidocaini hydrochloridum TABLETY PRO PŘÍPRAVU REKTÁLNÍ SUSPENZE Název HVLP ENTOCORT KLYZMA 2 MG LL Budenosidum Tabulka 3 Přehled ostatních obchodovaných registrovaných rektálních LP v ČR dle SÚKL k 9.11.2011 15

3.2 DSC DSC (diferenční skenovací kalorimetrie) je jednou z nejvyužívanějších metod termální analýzy. Metody termické analýzy se využívají k testování kapalných i pevných materiálů. Jsou součástí spektra analýz používaných ke sledování fyzikálních a chemických vlastností vzorku (odpaření rozpouštědel, sublimace, rozkladné procesy, uvolňování vody z hydrátů apod.) (24). Uplatnění nalézá DSC v rozmanitých oborech průmyslu, jako např. v potravinářství a kosmetice, ve sklářství, elektronice, v technologii polymerů, v chemickém a strojním průmyslu atd. (24). Pro svou přesnost a spolehlivost bývá DSC také součástí výzkumných a vývojových laboratoří farmaceutického průmyslu (25). Metoda DSC je také popsaná v lékopisech Ph.Eur. a USP (24). 3.2.1 Měření DSC Technika měření DSC spočívá ve zkoumání tepelné vlastnosti vzorku vystaveného teplotnímu programu. Vzorek je ohříván nebo chlazen definovanou rychlostí spolu se vzorkem kontrolním. Kelímky se zkoumaným vzorkem a referenční látkou jsou umístěny v oddělených komorách, popř. ve společné komoře. Během zahřívání a chlazení vzorku dochází ke změně rovnovážných podmínek mezi vzorkem a standardem, což je způsobeno spotřebováním nebo uvolněním tepla ze vzorku. Jeden typ DSC přesně detekuje a zaznamenává energii endotermní nebo exotermní reakce jako rozdíl mezi vzorkem a referenční látkou. Druhý typ měří energii spotřebovanou k udržení obou kelímků v rovnováze (26). 16

Obrázek 1 Schéma DSC aparátu (27) 17

4 EXPERIMENTÁLNÍ ČÁST 4.1 Použité LP a jejich charakteristiky LP ALGIFEN Šarže 3010209 BENURON 1000 523036 BENURON 250 501105 BENURON 125 522105 DOBEXIL H FAKTU 2010609 292126 GYNOPEVARYL 9BS0P00 INDOMETACIN 100 BERLINCHEMIE 13023 INDOMETACIN 50 BERLINCHEMIE 12006 BerlinChemie AG (Menarini Group), Berlín, Německo KETONAL AG0270 Lek Pharmaceuticals d.d., Ljubljana, Slovinsko 160 Famar S.A., Avlonas, Attiki, Řecko 1010298 Farmea, Angers Cedex, Francie NUROFEN PRO DĚTI ČÍPKY 125 MG NUROFEN PRO DĚTI ČÍPKY 60 MG PANADOL BABY ČÍPKY 8035 PANADOL JUNIOR ČÍPKY A016 PARALEN 100 PARALEN 500 SUP 2040909 2020309 PROCTOGLYVENOL H5132 SPASMOPAN SPOFAX 2010309 2020409 TALVOSILEN FORTE 514K08 TORECAN C52397 TRAMAL ČÍPKY 100 MG 136B05 Výrobce Zentiva, k. s., Praha, Česká republika BeneArzneimittel GmbH, Mnichov, SRN BeneArzneimittel GmbH, Mnichov, SRN BeneArzneimittel GmbH, Mnichov, SRN Zentiva, k. s., Praha, Česká republika Nycomed GmbH, Singen, Německo Janssen Pharmaceutica N.V., Beerse, Belgie BerlinChemie AG (Menarini Group), Berlín, Německo Farmaclair, HérouvilleSaintClair, Francie Farmaclair, HérouvilleSaintClair, Francie Zentiva, k. s., Praha, Česká republika Zentiva, k. s., Praha, Česká republika Novartis s.r.o., Praha, Česká republika Zentiva, k. s., Praha, Česká republika Zentiva, k. s., Praha, Česká republika BeneArzneimittel GmbH, Mnichov, SRN KRKA, d.d., Novo mesto, Slovinsko GRÜNENTHAL GmbH, Stolberg, Německo Tabulka 4 Použité LP, jejich výrobce a výrobní šarže 18

Název LP ALGIFEN BENURON 1000 BENURON 250 BENURON 125 DOBEXIL H LL v mg LL Fenpiverini bromidum Metamizolum natricum monohydricum Pitofenoni hydrochloridum Paracetamolum Paracetamolum Paracetamolum Calcii dobesilas monohydricus 0,1 LL % Zjištěná hmotn. čípku 0,004 1000 41,999 2,381 10 0,420 1000 45,312 2,20694 250 20,224 1,23617 125 10,579 1,18156 250 11,622 2,15115 Lidocaini hydrochloridum monohydricum Cinchocaini hydrochloridum Policresulenum Econazoli nitras 100 150 2,09992 4,762 5,591 2,68305 Indometacinum 100 5,261 Indometacinum 50 5,273 0,94822 Ketoprofenum 100 4,612 2,16814 Ibuprofenum 125 10,367 1,20575 NUROFEN PRO DĚTI Ibuprofenum ČÍPKY 60 MG 60 10,321 0,58136 FAKTU GYNOPEVARYL INDOMETACIN 100 BERLINCHEMIE INDOMETACIN 50 BERLINCHEMIE KETONAL NUROFEN PRO DĚTI ČÍPKY 125 MG PANADOL BABY ČÍPKY PANADOL JUNIOR ČÍPKY PARALEN 100 PARALEN 500 SUP PROCTOGLYVENOL SPASMOPAN 40 1,860 2,5 0,119 1,9009 Paracetamolum 125 12,485 Paracetamolum 250 22,513 1,11048 Paracetamolum Paracetamolum Lidocaini hydrochloridum monohydricum Tribenosidum Codeini phosphas hemihydricus Fenpiverini bromidum Paracetamolum Pitofenoni hydrochloridum 100 9,168 1,09074 500 16,194 3,08756 40 1,982 1,0012 2,01853 400 19,816 19,2 0,923 0,1 0,005 2,07944 500 24,045 10,5 0,505 Tabulka 5 Použité LP, jejich LL, deklarované množství LL v mg, zjištěná hmotnost hodnoceného čípku a vypočítané množství LL v % 19

Název LP LL v mg LL SPOFAX TALVOSILEN FORTE TORECAN TRAMAL ČÍPKY 100 MG Cinchocaini hydrochloridum Bismuthi subgallas Carboxycellulosum calcicum Codeini phosphas hemihydricus Paracetamolum Thiethylperazinum dimaleas Tramadolum hydrochloridum LL % 5 100 Zjištěná hmotn. čípku 0,228 4,559 2,19362 300 13,676 60 2,489 2,41103 1000 41,476 6,5 0,315 2,06134 100 9,746 1,02603 Tabulka 6 Pokračovaní tab.5 LP NUROFEN PRO DĚTI ČÍPKY 125 MG NUROFEN PRO DĚTI ČÍPKY 60 MG INDOMETACIN 50 BERLINCHEMIE INDOMETACIN 50 BERLINCHEMIE KETONAL GYNOPEVARYL BENURON 1000 BENURON 250 BENURON 125 PANADOL BABY ČÍPKY PANADOL JUNIOR ČÍPKY PARALEN 100 PARALEN 500 SUP TORECAN TRAMAL ČÍPKY 100 MG LL Ibuprofenum Indometacinum Ketoprofenum Econazoli nitras Paracetamolum Thiethylperazinum dimaleas Tramadolum hydrochloridum % LL 10,367 103,6699 10,321 103,2063 5,261 52,60666 5,273 4,612 5,591 45,312 20,224 10,579 12,485 22,513 9,168 16,194 52,73038 46,12248 55,90652 453,1161 202,2376 105,7923 124,8502 225,1279 91,68088 161,9402 0,315 3,15329 9,746 97,46304 Tabulka 7 Hodnocené LP s obsahem jedné LL a jejich charakteristiky 20 LL [mg] v 1 g čípku

LP DOBEXIL H FAKTU PROCTOGLYVENOL TALVOSILEN FORTE LL Calcii dobesilas monohydricus Lidocaini hydrochloridum monohydricum Cinchocaini hydrochloridum Policresulenum Lidocaini hydrochloridum monohydricum Tribenosidum Codeini phosphas hemihydricus Paracetamolum % LL LL [mg] v 1 g čípku 11,622 134,8116 1,86 0,119 48,8114 4,762 1,982 217,9804 19,816 2,489 439,6461 41,476 Tabulka 8 Hodnocené LP s obsahem dvou LL a jejich charakteristiky LP ALGIFEN SPASMOPAN SPOFAX LL Fenpiverini bromidum Metamizolum natricum monohydricum Pitofenoni hydrochloridum Codeini phosphas hemihydricus Fenpiverini bromidum Paracetamolum Pitofenoni hydrochloridum Cinchocaini hydrochloridum Bismuthi subgallas Carboxycellulosum calcicum % LL 0,004 41,999 424,2335 0,420 0,923 0,005 254,7801 24,045 0,505 0,228 4,559 184,6263 13,676 Tabulka 9 Hodnocené LP s obsahem tří a více LL a jejich charakteristiky 21 LL [mg] v 1 g čípku

4.2 Suroviny Surovina Dodavatel Adeps solidus Dr. Kulich Pharma, s.r.o., Hradec Králové, ČR Ibuprofenum Dr. Kulich Pharma, s.r.o., Hradec Králové, ČR Paracetamolum Dr. Kulich Pharma, s.r.o., Hradec Králové, ČR 22

4.3 Přehled LL v použitých LP LL Bismuthi subgallas t.t. [ C] 223 (21) LP SPOFAX Calcii dobesilas monohydricus * DOBEXIL H Carboxycellulosum calcicum * SPOFAX FAKTU Cinchocaini hydrochloridum 99101 (21) Codeini phosphas hemihydricus 220 (19) Econazoli nitras 162 (23) SPOFAX SPASMOPAN TALVOSILEN FORTE GYNOPEVARYL SPASMOPAN Fenpiverini bromidum 178 (19) ALGIFEN 23 další LL v LP Carboxycellulosum calcicum Cinchocaini hydrochloridum Lidocaini hydrochloridum monohydricum Bismuthi subgallas Cinchocaini hydrochloridum Policresulenum Bismuthi subgallas Carboxycellulosum calcicum Fenpiverini bromidum Paracetamolum Pitofenoni hydrochloridum Paracetamolum Codeini phosphas hemihydricus Paracetamolum Pitofenoni hydrochloridum Metamizolum natricum monohydricum Pitofenoni hydrochloridum

LL Ibuprofenum Indometacinum t.t. [ C] 7578 (1) 154158 (1) LP NUROFEN PRO DĚTI ČÍPKY 125 MG další LL v LP NUROFEN PRO DĚTI ČÍPKY 60 MG INDOMETACIN 100 BERLINCHEMIE INDOMETACIN 50 BERLINCHEMIE Ketoprofenum 9497 (1) KETONAL Lidocaini hydrochloridum monohydricum Calcii dobesilas monohydricus PROCTOGLYVENOL Tribenosidum Fenpiverini bromidum 180 (20) ALGIFEN Pitofenoni hydrochloridum BENURON BENURON BENURON PANADOL BABY ČÍPKY PANADOL JUNIOR ČÍPKY PARALEN 100 167172 PARALEN 500 SUP (1) Codeini phosphas hemihydricus SPASMOPAN Fenpiverini bromidum Pitofenoni hydrochloridum Metamizolum natricum monohydricum Paracetamolum 69 (21) DOBEXIL H TALVOSILEN FORTE Codeini phosphas hemihydricus Cinchocaini hydrochloridum Policresulenum * FAKTU Thiethylperazinum dimaleas * TORECAN Tramadolum hydrochloridum 180184 (1) TRAMAL ČÍPKY 100 MG Tribenosidum kapalina PROCTOGLYVENOL 24 Lidocaini hydrochloridum monohydricum

4.4 Přístroje Název Typ Lékárenská infralampa IL1 Diferenční skenovací kalorimetr Digitální analytické váhy DSC 200 F3 Maia CAHN 26 Váhy OHAUS Discovery Fluorescenční mikroskop OLYMPUS BX51 25 Výrobce HEROS Výrobna lékárenské techniky, Olomouc, ČR NETZSCH Gerätebau GmbH, Selb, Německo CAHN Instruments, USA Ohaus Corporation, Pine Brook, USA Olympus Corporation, Tokyo, Japonsko

4.5 Příprava vzorků a pracovní postupy 1) Všechny HVLP vzorky (čípky) byly nejdříve jednotlivě zváženy na digitálních analytických vahách pro následný výpočet procentuelního obsahu LL. 2) Pro měření na DSC byly připravovány vzorky odebráním hmoty ze středu rozpůleného čípku. 3) Laboratorně připravené vzorky byly zhotoveny roztavením čípkového základu pod infralampou a postupnou dispergací práškové LL v nataveném základě. Po homogenizaci byla směs odlita na hliníkovou folii. Vzorek pro DSC měření byl odebrán ze středu ztuhnuté směsi. 4) Práškované LL byly naváženy přímo do měřících kelímků bez jakékoliv předchozí úpravy. 5) Vzorky pro mikroskopii byly připraveny tak, že podložní sklíčko se nahřálo pod infralampou. Po povrchu nahřátého sklíčka se rozetřel tuhý čípek, který teplem měkl a vytvořil na sklíčku tenkou vrstvu. Krycí sklíčko použito nebylo. Pozorování mikroskopem probíhalo okamžitě, než došlo ke ztuhnutí základu. 6) Pro mikroskopické zobrazení bylo použito okulárové zvětšení 10x a zvětšení objektivu 10x nebo 20x. V některých případech byly pozorovány krystaly LL za pomoci polarizačního nástavce. Výsledky pozorování byly fotograficky zdokumentovány. 7) Všechny vzorky pro DSC měření byly navažovány do hliníkových kelímků o objemu 25 µl. Uzavřeny byly víčkem s dírkou na ručním lisu. 8) Navážky se pohybovaly v rozmezí 712 µg. V případě konstrukce kalibrační křivky paracetamolu byly navážky zvoleny tak, aby byl pokryt rozsah množství LL v čípcích. 9) Měření probíhalo tak, že po počáteční izotermě byl vzorek ochlazen rychlostí 10 ºC/min na teplotu 40ºC, následovala 5min temperance a ohřev nad teplotu tání LL. Rychlost ohřevu byla u látek s t.t. do 100ºC 5ºC/min a u látek s vyšší t.t. 10 ºC/min. Poté byl vzorek opět chlazen rychlostí 10 ºC/min na teplotu 40 ºC. Po 5min izotermě následoval druhý ohřev za stejných podmínek jako první. 26

5 VÝSLEDKY A DISKUZE 5.1 Záznamy DSC měření jednotlivých LP 27

1) ALGIFEN LL Fenpiverini bromidum Metamizolum natricum monohydricum Pitofenoni hydrochloridum Navážka: % LL t.t. 0,004 177 (19) 41,999 180 (20) 0,42 nezjištěna PL Sojový lecitin Čípkový základ H 15 Čípkový základ W 35 10,432 mg Obrázek 2 Záznam měření DSC přípravku ALGIFEN Obrázek 3 Vyhodnocení měření DSC přípravku ALGIFEN 28

2) BENURON 1000 LL % t.t [ C] 45,312 167172 (1) Paracetamolum Navážka: PL Adeps solidus Sojae lecithinum 9,577 mg Obrázek 4 Záznam měření DSC přípravku BENURON 1000 Obrázek 5 Vyhodnocení měření DSC přípravku BENURON 1000 29

5) DOBEXIL H LL Calcii dobesilas monohydricus Lidocaini hydrochl. monohydr. Navážka: % 11,622 1,86 t.t [ C] nezjišt. 69 (21) PL Antioxidans lipidorum cum BHT Adeps pro suppositorio H15 Adeps pro suppositorio W35 8,787 mg Obrázek 10 Záznam měření DSC přípravku DOBEXIL H Obrázek 11 Vyhodnocení měření DSC přípravku DOBEXIL H 32

6) FAKTU LL Cinchocaini hydrochlorid. Policresulenum Navážka: % t.t [ C] 0,119 99101 (21) 4,762 nezjištěna PL Adeps solidus Cellulosum microcristalinum Silica colloidalis anhydrica Natrii hydroxidum Sojae lecithinum 9,603 mg Obrázek 12 Záznam měření DSC přípravku FAKTU Obrázek 13 Vyhodnocení měření DSC přípravku FAKTU 33

7) GYNOPEVARYL LL Econazoli nitras Navážka: % 5,591 t.t [ C] 162 (23) PL Adeps pro suppositorio Wecobee Adeps pro suppositorio Wecobee FS 10, 463 mg Obrázek 14 Záznam měření DSC přípravku GYNOPEVARYL Obrázek 15 Vyhodnocení měření DSC přípravku GYNOPEVARYL 34

8) INDOMETACIN 50 BERLINCHEMIE LL Indometacinum % 5,273 t.t [ C] 154158 (1) Navážka: 9,139 mg PL Adeps solidus Maydis amylum Obrázek 16 Záznam měření DSC přípravku INDOMETACIN 50 BERLINCHEMIE Obrázek 17 Vyhodnocení měření DSC přípravku INDOMETACIN 50 BERLINCHEMIE 35

9) INDOMETACIN 100 BERLINCHEMIE LL Indometacinum % t.t [ C] 5,261 154158 (1) Navážka: 8,53 mg PL Adeps solidus Maydis amylum Obrázek 18 Záznam měření DSC přípravku INDOMETACIN 100 BERLINCHEMIE Obrázek 19 Vyhodnocení měření DSC přípravku INDOMETACIN 100 BERLINCHEMIE 36

10) KETONAL LL Ketoprofenum Navážka: % t.t [ C] 4,612 9497 (1) PL Adeps solidus Triglycerida saturata media 8,024 mg Obrázek 20 Záznam měření DSC přípravku KETONAL Obrázek 21 Vyhodnocení měření DSC přípravku KETONAL 37

11) NUROFEN PRO DĚTI ČÍPKY 125 MG LL Ibuprofenum Navážka: % 10,367 t.t [ C] 7578 (1) PL Adeps solidus 8,928 mg Obrázek 22 Záznam měření DSC přípravku NUROFEN PRO DĚTI ČÍPKY 125 MG Obrázek 23 Vyhodnocení měření DSC přípravku NUROFEN PRO DĚTI ČÍPKY 125 MG 38

12) NUROFEN PRO DĚTI ČÍPKY 60 MG LL Ibuprofenum Navážka: % 10,321 t.t [ C] 7578 (1) PL Adeps solidus 8,322 mg Obrázek 24 Záznam měření DSC přípravku NUROFEN PRO DĚTI ČÍPKY 60 MG Obrázek 25 Vyhodnocení měření DSC přípravku NUROFEN PRO DĚTI ČÍPKY 60 MG 39

PANADOL BABY ČÍPKY 13) LL Paracetamolum Navážka: % t.t [ C] 12,485 167172 (1) PL Adeps solidus 8,512 mg Obrázek 26 Záznam měření DSC přípravku PANADOL BABY ČÍPKY Obrázek 27 Vyhodnocení měření DSC přípravku PANADOL BABY ČÍPKY 40

14) PANADOL JUNIOR ČÍPKY LL Paracetamolum Navážka: % t.t [ C] 22,513 167172 (1) PL Adeps solidus 11,451 mg Obrázek 28 Záznam měření DSC přípravku PANADOL JUNIOR ČÍPKY Obrázek 29 Vyhodnocení měření DSC přípravku PANADOL JUNIOR ČÍPKY 41

15) PARALEN 100 LL Paracetamolum % 9,168 t.t [ C] 167172 (1) Navážka: 9,404 mg PL Adeps pro suppositorio H15 Adeps pro suppositorio W35 Obrázek 30 Záznam měření DSC přípravku PARALEN 100 Obrázek 31 Vyhodnocení měření DSC přípravku PARALEN 100 42

16) PARALEN 500 SUP LL Paracetamolum % 16,194 t.t [ C] 167172 (1) Navážka: 7,846 mg PL Adeps pro suppositorio H15 Adeps pro suppositorio W35 Obrázek 32 Záznam měření DSC přípravku PARALEN 500 SUP Obrázek 33 Vyhodnocení měření DSC přípravku PARALEN 500 SUP 43

17) PROCTOGLYVENOL LL % Lidocaini hydrochlorium monohydr. 1,982 Tribenosidum 19,816 Navážka: t.t [ C] 69 (21) kapalina PL Adeps pro suppositorio E85 Adeps pro suppositorio W35 10,818 mg Obrázek 34 Záznam měření DSC přípravku PROCTOGLYVENOL Obrázek 35 Vyhodnocení měření DSC přípravku PROCTOGLYVENOL 44

18) SPASMOPAN LL % Codeini phosphas hemihydricus Fenpiverini bromidum Paracetamolum Pitofenoni hydrochloridum Navážka: 0,923 t.t [ C] 220 (19) 0,005 178 (19) 24,045 167172 (1) 0,505 nezjištěna PL Alcoholes C 1216 oxyethylenati Adeps pro suppositorio H15 Adeps pro suppositorio W35 10,11 mg Obrázek 36 Záznam měření DSC přípravku SPASMOPAN Obrázek 37 Vyhodnocení měření DSC přípravku SPASMOPAN 45

19) SPOFAX LL Cinchocaini hydrochlorid. Bismuthi subgallas Carboxycellulosum calc. Navážka: % 0,228 4,559 t.t [ C] 99101 (21) 223 (23) 13,676 nezjištěna PL Adeps pro suppositorio H15 Adeps pro suppositorio W35 11,162 mg Obrázek 38 Záznam měření DSC přípravku SPOFAX Obrázek 39 Vyhodnocení měření DSC přípravku SPOFAX 46

20) TALVOSILEN FORTE LL Codeini phosphas hemihydr. Paracetamolum Navážka: % t.t [ C] 2,489 220 (19) 41,476 167172 (1) PL Sojae lecithinum Adeps solidus 8,726 mg Obrázek 40 Záznam měření DSC přípravku TALVOSILEN FORTE Obrázek 41 Vyhodnocení měření DSC přípravku TALVOSILEN FORTE 47

21) TORECAN LL % Thiethylperazini dimaleas 0,5 Navážka: t.t [ C] nezjišt. PL Lactosum Adeps solidus 8,941 mg Obrázek 42 Záznam měření DSC přípravku TORECAN Obrázek 43 Vyhodnocení měření DSC přípravku TORECAN 48

22) TRAMAL ČÍPKY 100 MG LL % t.t [ C] Tramadoli hydrochloridum 9,746 180184 (1) Navážka: PL Adeps solidus 7,932 mg Obrázek 44 Záznam měření DSC přípravku TRAMAL ČÍPKY 100 MG Obrázek 45 Vyhodnocení měření DSC přípravku TRAMAL ČÍPKY 100 MG 49

LL % obsah Hmotnost % obsah ostatních čípku v g LL LL LP Pík Bismuthi subgallas SPOFAX 2,194 4,559 18,235 Calcii dobesilas monohydricus DOBEXIL H 2,151 11,622 1,86 Carboxycellulosum calcicum SPOFAX 2,194 13,676 18,235 2,1 0,119 4,762 SPOFAX 2,194 0,228 18,235 SPASMOPAN 2,079 0,923 24,555 TALVOSILEN FORTE 2,411 2,489 41,476 GYNOPEVARYL 2,683 5,59065 0 ALGIFEN 2,381 0,004 42,419 SPASMOPAN NUROFEN PRO DĚTI ČÍPKY 125 MG NUROFEN PRO DĚTI ČÍPKY 60 MG INDOMETACIN 100 BERLINCHEMIE 2,079 0,005 25,473 1,206 10,367 0 0,581 10,321 0 1,901 5,261 0 INDOMETACIN 50 BERLINCHEMIE 0,948 5,273 0 KETONAL 2,168 4,612 0 DOBEXIL H 2,151 1,859 11,622 PROCTOGLYVENOL 2,019 1,982 19,816 ALGIFEN 2,381 41,999 0,424 Cinchocaini hydrochloridum Codeini phosphas hemihydricus Econazoli nitras Fenpiverini bromidum Ibuprofenum Indometacinum Ketoprofenum Lidocaini hydrochloridum monohydricum Metamizolum natricum monohydricum FAKTU Tabulka 10 Přehled LL v jednotlivých LP a jejich charakteristiky 50

Paracetamolum Pitofenoni hydrochloridum BENURON 1000 2,207 45,312 0 BENURON 250 1,236 20,224 0 BENURON 125 1,182 10,579 0 PANADOL BABY ČÍPKY 1,001 12,485 0 PANADOL JUNIOR ČÍPKY PARALEN 100 PARALEN 500 SUP 1,111 22,513 0 1,091 9,168 0 3,088 16,194 0 SPASMOPAN 2,079 24,045 1,409 TALVOSILEN FORTE 2,411 41,476 2,489 ALGIFEN 2,381 0,42 42,003 SPASMOPAN 2,079 0,505 24,973 2,1 4,762 0,119 Policresulenum FAKTU Thiethylperazini dimaleas TORECAN 2,061 0,5 0 Tramadoli hydrochloridum TRAMAL ČÍPKY 100 MG 1,026 9,746 0 Tribenosidum PROCTOGLYVENOL 2,019 19,816 1,982 Tabulka 11 Pokračování tabulky 9 Pozn.: Pík je uveden pouze u látek, u kterých je prokazatelné, že jim daný pík přísluší. V případě přípravku TORECAN se lze jen domnívat, že pík přísluší látce Thiethylperazini dimaleas, protože tento přípravek jinou látku neobsahuje. Nelze toto však potvrdit, protože nebyla pro danou LL dohledána t.t. 51

5.2 Záznamy DSC měření paracetamolu Obrázek 46 Záznam měření DSC paracetamolu o navážce 0,59 mg Obrázek 47 Vyhodnocení měření DSC paracetamolu o navážce 0,59 mg 52

Obrázek 48 Záznam měření DSC paracetamolu o navážce 1,27 mg Obrázek 49 Vyhodnocení měření DSC paracetamolu o navážce 1,27 mg 53

Závislost ΔH na množství paracetamolu 0,9 y = 0,1763x 0,0131 R² = 0,996 0,8 0,7 0,6 ΔH (J) 0,5 0,4 0,3 0,2 0,1 0 0 1 2 3 4 5 navážka par. (mg) Obrázek 58 Graf závislosti ΔH na navážce paracetamolu Koncentrace par. v LP (%) LP BENURON 1000 BENURON 250 BENURON 125 PANADOL BABY ČÍPKY PANADOL JUNIOR ČÍPKY PARALEN 100 PARALEN 500 SUP SPASMOPAN TAVOSILEN forte 45,312 20,224 10,579 12,485 22,513 9,168 16,194 24,045 41,476 Δ H (J/g navážky LP) 69,32 32,63 16,42 22,1 40,98 12,49 25,5 28,22 67,33 Zjištěná Δ H (J) 0,6639 0,2650 0,1824 0,1881 0,4693 0,1175 0,2001 0,2853 0,5875 Vypočítaná % zjišt. Δ H z Δ H (J) vypoč. Δ H 0,7508 0,2760 0,1938 0,2734 0,4407 0,1387 0,2106 0,4148 0,6240 Tabulka 12 Hodnocené přípravky s obsahem paracetamolu 58 88,4 96,0 94,1 68,8 106,5 84,7 95,0 68,8 94,2

5.3 Záznamy DSC měření ibuprofenu Obrázek 59 Záznam měření DSC 19,915 % ibuprofenu v adeps solidus Obrázek 60 Vyhodnocení měření DSC 19,915 % ibuprofenu v adeps solidus 59

Obrázek 61 Záznam měření DSC 30,629 % ibuprofenu v adeps solidus Obrázek 62 Vyhodnocení měření DSC 30,629 % ibuprofenu v adeps solidus 60

5.4 Mikroskopie Na obrázcích 6787 jsou zdokumentovány mikroskopické snímky krystalů LL v daných LP bez použití polarizačního nástavce. Použito bylo celkové zvětšení mikroskopu 200x. ALGIFEN: Metamizolum natricum monohydricum 41,999 % Pitofenoni hydrochloridum 0,42 % Fenpiverini bromidum 0,004 % Obrázek 67 Mikroskopický snímek krystalů LL v přípravku ALGIFEN 63

BENURON 1000: Paracetamolum 45,311 % Obrázek 68 Mikroskopický snímek krystalů LL v přípravku BENURON 1000 BENURON 250 : Paracetamolum 20,224 % Obrázek 69 Mikroskopický snímek krystalů LL v přípravku BENURON 250 64

BENURON 125 : Paracetamolum 10,579 % Obrázek 70 Mikroskopický snímek krystalů LL v přípravku BENURON 125 DOBEXIL H : Calcii dobesilas monohydricus 11,622 % Lidocaini hydrochloridum monohydricum 1,86 % Obrázek 71 Mikroskopický snímek krystalů LL v přípravku DOBEXIL H 65

FAKTU : Policresulenum 4,762 % Cinchocaini hydrochloridum 0,119 % Obrázek 72 Mikroskopický snímek krystalů LL v přípravku FAKTU GYNOPEVARYL : Econazoli nitras 5,591 % Obrázek 73 Mikroskopický snímek krystalů LL v přípravku GYNOPEVARYL 66

INDOMETACIN 100 BERLINCHEMIE : Indometacinum 5,261 % Obrázek 74 Mikroskopický snímek krystalů LL v přípravku INDOMETACIN 100 BERLINCHEMIE INDOMETACIN 50 BERLINCHEMIE : Indometacinum 5,273 % Obrázek 75 Mikroskopický snímek krystalů LL v přípravku INDOMETACIN 50 BERLINCHEMIE 67

KETONAL : Ketoprofenum 4,612 % Obrázek 76 Mikroskopický snímek krystalů LL v přípravku KETONAL NUROFEN PRO DĚTI ČÍPKY 60 MG: NUROFEN PRO DĚTI ČÍPKY 125 MG : Ibuprofenum 10,321 % Ibuprofenum 10,367 % Obrázek 77 Mikroskopický snímek přípravku NUROFEN PRO DĚTI ČÍPKY 60 MG a 125 MG 68

PANADOL BABY ČÍPKY : Paracetamolum 12,485 % Obrázek 78 Mikroskopický snímek krystalů LL v přípravku PANADOL BABY ČÍPKY PANADOL JUNIOR ČÍPKY : Paracetamolum 22,513 % Obrázek 79 Mikroskopický snímek krystalů LL v přípravku PANADOL JUNIOR ČÍPKY 69

PARALEN 100 : Paracetamolum 9,168 % Obrázek 80 Mikroskopický snímek krystalů LL v přípravku PARALEN 100 PARALEN 500 SUP : Paracetamolum 16,194 % Obrázek 81 Mikroskopický snímek krystalů LL v přípravku PARALEN 500 SUP 70

PROCTOGLYVENOL : Tribenosidum 19,816 % Lidocaini hydrochloridum monohydricum 1,982 % Obrázek 82 Mikroskopický snímek krystalů LL v přípravku PROCTOGLYVENOL SPASMOPAN : Paracetamolum 24,045 % Codeini dihydrogenphosphas hemihydricus 0,923 % Pitofenoni hydrochloridum 0,505 % Fenpiverini bromidum 0,005 % Obrázek 83 Mikroskopický snímek krystalů LL v přípravku 71

SPOFAX : Carboxycellulosum calcicum 13,676 % Bismuthi subgallas 4,559 % Cinchocaini hydrochloridum 0,228 % Obrázek 84 Mikroskopický snímek krystalů LL v přípravku SPOFAX TALVOSILEN FORTE : Paracetamolum 41,476 % Codeini phosphas hemihydricus 2,489 % Obrázek 85 Mikroskopický snímek krystalů LL v přípravku TALVOSILEN FORTE 72

TORECAN : Thiethylperazini dimaleas 0,315 % Obrázek 86 Mikroskopický snímek krystalů LL v přípravku TORECAN TRAMAL ČÍPKY 100 MG : Tramadoli hydrochloridum 9,746 % Obrázek 87 Mikroskopický snímek krystalů LL v přípravku TRAMAL ČÍPKY 100 MG 73

LP LL Fenpiverini bromidum Metamizolum natricum monohydricum Pitofenoni hydrochloridum Paracetamolum Paracetamolum Paracetamolum Calcii dobesilas monohydricus Lidocaini hydrochloridum monohydricum Cinchocaini hydrochloridum Policresulenum Econazoli nitras Pík % roztav. Mikros ČZ při kop. 37 C přít. LL 33,810 38,134 18,983 14,523 23,061 60,665 45,045 Indometacinum 32,902 INDOMETACIN 50 BERLINCHEMIE KETONAL Indometacinum 91,693 Ketoprofenum 46,203 NUROFEN PRO DĚTI ČÍPKY 125 MG NUROFEN PRO DĚTI ČÍPKY 60 MG PANADOL BABY ČÍPKY PANADOL JUNIOR ČÍPKY PARALEN 100 PARALEN 500 SUP Ibuprofenum 35,759 Ibuprofenum 79,794 47,694 49,169 17,895 20,247 34,538 23,339 16,735 46,726 47,266 47,654 ALGIFEN BENURON 1000 BENURON 250 BENURON 125 DOBEXIL H FAKTU GYNOPEVARYL INDOMETACIN 100 BERLINCHEMIE PROCTOGLYVENOL SPASMOPAN SPOFAX TALVOSILEN FORTE TORECAN TRAMAL ČÍPKY Paracetamolum Paracetamolum Paracetamolum Paracetamolum Lidocaini hydrochloridum monohydricum Tribenosidum Codeini phosphas hemihydricus Fenpiverini bromidum Paracetamolum Pitofenoni hydrochloridum Cinchocaini hydrochloridum Bismuthi subgallas Carboxycellulosum calcicum Codeini phosphas hemihydricus Paracetamolum Thiethylperazini dimaleas Tramadoli hydrochloridum Tabulka 13 Přehled hodnocených čípků a jejich charakteristiky 74

Práce je zaměřena na kalorimetrické hodnocení hromadně vyráběných čípků s cílem zjistit, zda je možné u těchto přípravků využít DSC k identifikaci léčiva a jeho kvantitativnímu stanovení. Identifikace by byla možná na základě teploty tání léčivé látky. Kvantitativní analýza by byla možná v případě, že bude léčivo přítomno v LP v krystalické formě. V tom případě množství tepla potřebné na roztátí léčiva bude přímo úměrné jeho množství, to lze potom odečíst z kalibrační křivky. Vzhledem k bodu vzplanutí čípkového základu musí být ze stanovení vyřazeny přípravky, v nichž léčivá látka taje při teplotě vyšší než 200 C. Konkrétně byly z hodnocení vyřazeny přípravky s obsahem Diclofenacum natricum DICLOREUM 100, DICLOREUM 50, MONOFLAM 100 MG, VERAL 100 MG; s obsahem Mesalazinum ASACOL, PENTASA, PENTASA 1G, SALOFALK 250, SALOFALK 500; s obsahem Prednisonum RECTODELT 100 MG a s obsahem OndansetronumZOFRAN. Abecední seznam 22 použitých LP je uveden v části 4.1 Použité LP a jejich charakteristiky. V tab.4 je u jednotlivých LP uvedena výrobní šarže a výrobce. Tab.5 a tab.6 podávají přehled o LL obsažených v LP, jejich procentuálním množství a množství v mg. Dále jsou zde uvedeny přesné hmotnosti čípků, které byly zjištěny zvážením na analytických vahách. Následující tabulky dělí LP na LP s obsahem jedné LL (tab.7), s obsahem dvou LL (tab.8) a s obsahem tří a více LL (tab.9). Tab.79 také obsahují procentuální množství LL a množství všech LL v mg na 1 g hmotnosti čípku. Záznamy DSC měření jsou uvedeny pro každý hodnocený LP a jsou řazeny abecedně. Pro počátek měření byla zvolena teplota hluboko pod 0 C. Tato velmi nízká teplota umožnila i kvalitní zachycení záznamu tání čípkového základu. Vyhodnocené charakteristiky jsou prezentovány přímo v grafech. Přítomnost či nepřítomnost teplotního efektu LL je znázorněna v tab.10 a 11. I tyto tabulky obsahují hmotnosti čípků a procentuální zastoupení LL v LP. Z tohoto přehledu vyplývá, že na záznamu DSC se prezentuje pík paracetamolu u všech přípravků obsahujících tuto látku. Další látky vykazující pík jsou Econazoli nitras, Thiethylperazini dimaleas a Tramadoli hydrochloridum. Tyto látky jsou v přípravcích, které neobsahují žádnou další LL. Z toho důvodu lze konstatovat, že pík odpovídá dané LL. U přípravku TRAMAL ČÍPKY 100 MG (Tramadoli hydrochloridum) se hodnota maxima píku shoduje s udávanou t.t. této látky. Pro tuto 75

látku je tedy předpoklad, že by u ní bylo možné provádět stanovení obsahu metodou DSC. Přípravek GYNOPEVARYL (Econazoli nitras) vykazuje pík LL při teplotě 164 C. Dle dostupného zdroje je t.t. této soli ekonazolu 162 C., přesto i toto léčivo lze teoreticky pokládat za vhodné ke stanovení obsahu LL metodou DSC. Pro nedostupnost čistých substancí však nebylo možné tento předpoklad ověřit. Další přípravek, který vykazuje pík je TORECAN s LL Thiethylperazini dimaleas. Na záznamu je zřetelný pík s maximem při teplotě 139 C Pro tuto LL nebyla dohledána deklarovaná teplota tání, proto nelze posoudit, zda pík přísluší skutečně LL. Mezi další přípravky vykazující pík patří ALGIFEN, DOBEXIL H, SPASMOPAN a TALVOSILEN FORTE. Tyto LP však obsahují více LL. U přípravku ALGIFEN má pík tání širokou základnu, jejíž rozsah je cca 90170 C. Nebude se tedy pravděpodobně jednat o tání čisté látky, ale o překrývání více píků nebo o rozpouštění části LL v roztaveném základě. Bohužel t.t. Pitofenoni hydrochloridum nebyla dohledána. Avšak ze záznamu jiného přípravku (SPASMOPAN) s obsahem stejné látky, je zřejmé, že pík nepatří této LL. Pík SPASMOPANU odpovídá Paracetamolum. Stejně tak u přípravku TALVOSILEN FORTE se maximum píku nalézá v rozmezí t.t. Paracetamolum 167172 C. Dvě LL obsahuje přípravek DOBEXIL H. Pík je zde malý a neodpovídá žádné LL. Při porovnání s přípravkem PROCTOGLYVENOL lze konstatovat, že pík nepřísluší Lidocaini hydrochloridum monohydricum, protože tato látka u tohoto přípravku pík nevykazuje. Z 22 hodnocených LP je znatelný pík tání LL u 13 přípravků. 9 LP nevykazuje na záznamu tání LL, proto bylo nutné ověřit, zda nedošlo k rozpuštění LL již při výrobě čípků. Z toho důvodu bylo provedeno mikroskopické hodnocení, při kterém nebyl přípravek zahřát na vyšší teplotu, než odpovídá tání čípkového základu. Za těchto podmínek nemohlo dojít k rozpuštění léčiva, které by v tom případě bylo přítomno v krystalické formě. Záznamy z mikroskopického pozorování jsou uvedeny na obr.6787. Tab.12 potom shrnuje jak výsledky mikroskopického hodnocení, tak i přítomnost či nepřítomnost píku tání z DSC záznamů. 76

U přípravků obsahujících ibuprofen nebyly viditelné pevné částice léčiva. Další přípravek nevykazující krystaly je PROCTOGLYVENOL, který obsahuje lidokain a kapalnou látku Tribenosidum. U všech ostatních LP je na mikroskopických snímcích zřetelná přítomnost tuhých částic v základě. Pokud tedy záznam DSC nevykazuje příslušný pík, dochází při vyšších teplotách k rozpouštění LL v roztaveném základě. Jako perspektivní pro stanovení obsahu metodou DSC se proto jeví látka Paracetamolum. Pomocí DSC bylo tedy změřeno 6 různých navážek paracetamolu, z nichž se potom vytvořila kalibrační křivka. Navážky byly voleny tak, aby pokryly celý rozsah množství paracetamolu v jednotlivých LP. Kalibrační křivka je uvedena na obr.58. Křivka má lineární charakter s koeficientem determinace 0,996. U 9 přípravků s obsahem paracetamolu bylo ze záznamu stanoveno teplo tání příslušející paracetamolu. Pomocí kalibrační křivky bylo vypočítáno, jaké teplo by měl vzorek mít podle deklarovaného obsahu. Výsledky a porovnání zjištěné a vypočítané hodnoty jsou uvedeny v tab.12. Tabulka dále obsahuje, kolik procent teoretické hodnoty bylo ve skutečnosti zjištěno. S výjimkou přípravku PANADOL JUNIOR ČÍPKY všechny přípravky vykazují nižší obsah paracetamolu, než je deklarován. Tento závěr však vychází pouze z jednoho měření. Nelze tedy z výsledku usuzovat, že přípravky deklarované množství paracetamolu neobsahují. Může se jednat o rozdíly způsobené nehomogenitou vzorku, jejíž příčinou může být např. sedimentace léčiva v čípcích před jeho ztuhnutím. V dalších krocích byla pozornost věnována látce Ibuprofenum. Tato látka nevykazuje na záznamech DSC pík a ani mikroskopicky nebyla zaznamenána přítomnost tuhé fáze. Proto byly připraveny laboratorně čípky s rozdílnou koncentrací tohoto léčiva a po týdnu stání změřeny pomocí DSC. Záznamy měření jsou uvedeny na obr.5966. Z těchto záznamů vyplývá, že ibuprofen se částečně v základu rozpouští. Teprve od 20% obsahu látky v čípku lze na záznamu pozorovat pík, který je však z hlediska kvantitativní analýzy nevyhodnotitelný. Toto zjištění je plně v souladu s hodnocením přípravků NUROFEN PRO DĚTI ČÍPKY 125 MG a NUROFEN PRO DĚTI ČÍPKY 60MG, které mají deklarovaný obsah ibuprofenu 10%. 77

Závěrem lze konstatovat, že metodu DSC nelze využít pro stanovení jakékoliv LL v hydrofobních čípkových základech. Počet látek, pro které by šla využít je velmi malý. Z hodnoceného počtu LL by v úvahu připadaly Paracetamolum, Tramadoli hydrochloridum, Econazoli nitras a Thiethylperazini dimaleas. U tří naposledy zmíněných látek je toto potřeba blíže prozkoumat. 78

6 ZÁVĚRY 1. S výjimkou přípravků PROCTOGLYVENOL, NUROFEN PRO DĚTI ČÍPKY 125 MG a NUROFEN PRO DĚTI ČÍPKY 60 MG byla u všech přípravků mikroskopicky potvrzena přítomnost léčivé látky. 2. Většina léčivých látek se za vyšších teplot v roztaveném čípkovém základě rozpustila. Na záznamu DSC vykazují pík tání pouze látky Paracetamolum, Econazoli nitras, Tramadoli hydrochloridum a Thiethylperazini dimaleas. 3. Křivka závislosti tepla tání na navážce má pro paracetamol lineární charakter s koeficientem determinace 0,996. Lze ji proto použít jako kalibrační křivku 4. Zjištěný obsah paracetamolu pomocí DSC se liší u 9 stanovených HVLP přípravků o 4,0 31,2 % 79

7 SEZNAM ZKRATEK LL léčivá látka LP léčivý přípravek HVLP hromadně vyráběný léčivý přípravek DSC diferenční skenovací kalorimetrie t.t. teplota tání par. paracetamol 80

8 POUŽITÁ LITERATURA 1. Ministerstvo zdravotnictví. Český lékopis 2009. Praha : Grada, 2009. ISBN 9788024729947. 2. DOYLE, D. Per rectum: a history of enemata. Royal College of Physicians of Edinburgh. [Online] 2005, Sv. 35, 4. [Citace: 11. duben 2012.] Dostupné z http://www.rcpe.ac.uk/journal/issue/ journal_35_4/doyle.pdf 3. WHITE, Lois. Foundations of nursing. Foundations of nursing. New York : Thomson Delmar Learning [Online] 2005. [Citace: 13. duben 2012.] Dostupné z http://www.google.cz/search?q=foundationsofnursing.&btng=hledatknihy&tbm=b ks&tbo=1&hl=cs 4. SHORVON, Simon D. Handbook of Epilepsy Treatment. Singapore : WileyBlackwell, [Online] 2010. ISBN 9781405198189. [Citace: 13. březen 2012.] Dostupné z http://books.google.cz/books/about/handbook_of_epilepsy_treatment.html?hl=cs&id=ce1ygxlllsgc 5. DOLEŽEL, Zdeněk, Léčba horečky u dětí. Pediatrie pro praxi. Solen Medical Education [Online] 2007, Sv. 1. [Citace: 6. duben 2012.] Dostupné z http:// www.pediatriepropraxi.cz/pdfs/ped/2007/01/05.pdf 6. GOLDEMUND, Karel, Febrilní křeče. Pediatrie pro praxi. Solen Medical Education [Online] 2001, Sv. 4. [Citace: 4. duben 2012.] Dostupné z http:// www.pediatriepropraxi.cz/pdfs/ped/2001/04/05.pdf 7. HRDLIČKA, Jan Analgosedace při diagnostických a pediatrických výkonech v pediatrii. Pediatrie v praxi. Solen Medical Education [Online] 2002, Sv. 5. [Citace: 4. duben 2012.] Dostupné z http://www.pediatriepropraxi.cz/pdfs/ped/2002/05/05.pdf 8. WARD, Barney, ALEXANDERWILLIAMS, J Mark, Paracetamol revisited: A review of the pharmacokinetics and pharmacodynamics. Acute pain. [Online] 1999, Sv. 2, 3. [Citace: 27.březen 2012.] Dostupné z http://www.sciencedirect.com 9. FUMOLEAU, P. et al. Ondansetron Suppository: an Effective Treatment for the Prevention of Emetic Disorders Induced by Cisplatinbased. Oral oncology. Elsevier Science [Online] 1997, Sv. 33, 5. [Citace: 27.březen 2012.] Dostupné z http:// www.sciencedirect.com 10. OLESEN, Jes et al. The headaches. Philadelphia : Lippincott Wiliams and Wilkins [Online] 2006.ISBN 0781754003. [Citace: 25.březen 2012.] Dostupné z http:// books.google.cz/books/about/the_headaches.html?hl=cs&id=f5vmland9iyc 11. BORTLÍK, Martin Spazmolytika v gastroenterologii. Remedia.cz. [Online] Remedia, s.r.o., 2009. [Citace: 26. březen 2012.] http://www.remedia.cz/clanky/ Prehledynazorydiskuse/Spasmolytikavgastroenterologii/6Fff.magarticle. aspx. 81