Praktické cvičenie č. 2 z predmetu Analýza liečiv A. Teoretická príprava na praktické cvičenie vysvetlenie princípu chemických reakcii skúšok totožnosti skupín uvedených v pracovných postupoch. Zdroj teoretickej prípravy prednáška + študijná literatúra - Bezáková Ž.: Základy farmaceutickej analýzy (str. 93 123) + Ph. Eur. 8. + SFK Teoretická príprava bude overovaná učiteľom. B. Pracovné postupy skúšok totožnosti iónov a skupín text je aktualizovaný podľa Ph. Eur. 8.8. SFK 2015 (2.vydanie). Pracovné postupy skúšok totožnosti 2.3.1 Ph. Eur. 8.8 sú zhodné s pracovnými postupmi skúšok totožnosti 2.3.1 SL 1, na ktoré je odkaz v SFK 2015 (2.vydanie) a rovnako v článkoch liečiv. Dostupné sú texty článkov liečiv Ph. Eur. 8.8 v elektronickej verzii liekopisu v rámci Externých informačných zdrojov FaF UK a tiež texty článkov SL 1 v tlačenej verzii liekopisu - knižnica. Paracetamolum E. Dáva reakciu na acetylové skupiny (2.3.1). Zahrieva sa nad otvoreným plameňom Ethylis acetas C. Dáva reakciu na acetylové skupiny (2.3.1) Poznámka skúmavka so zátkou je v prípravke!
Chinini sulfas Dáva reakciu na alkaloidy (2.3.1) nie je uvedená v liekopise, modelová vzorka V tomto praktickom cvičení robí aj skúšky totožnosti B, C. B. Asi 5 mg sa rozpustí v 5 ml vody R. Pridá sa 0,2 ml brómovej vody R a 1 ml amoniaku zriedeného R2. Vznikne zelené zafarbenie. C. 0,1 g sa rozpustí v 3 ml kyseliny sírovej, zriedenej R a zriedi sa vodou R na 100 ml. Pri pozorovaní v UF žiarení pri 366 nm je viditeľná intenzívna modrá fluorescencia, ktorá takmer úplne vymizne pridaním 1 ml kyseliny chlorovodíkovej R. Pri skúške C rozpustiť 10 mg vzorky v 0,3 ml kyseliny sírovej, zriedenej R a zriediť vodou R na 10 ml. Pri pozorovaní v UF žiarení pri 366 nm je viditeľná intenzívna modrá fluorescencia, ktorá takmer úplne vymizne pridaním 0,1 ml kyseliny chlorovodíkovej R. Chinidini sulfas Dáva reakciu na alkaloidy (2.3.1) nie je uvedená v liekopise, modelová vzorka V tomto praktickom cvičení sa robí aj skúšky totožnosti B, C, D. B. Asi 5 mg sa rozpustí v 5 ml vody R. Pridá sa 0,2 ml brómovej vody R a 1 ml amoniaku zriedeného R2. Vznikne zelené zafarbenie. C. 0,1 g sa rozpustí v 3 ml kyseliny sírovej, zriedenej R a zriedi sa vodou R na 100 ml. Pri pozorovaní v UF žiarení pri 366 nm je viditeľná intenzívna modrá fluorescencia, ktorá takmer úplne vymizne pridaním 1 ml kyseliny chlorovodíkovej R. Pri skúške C rozpustiť 10 mg vzorky v 0,3 ml kyseliny sírovej, zriedenej R a zriediť vodou R na 10 ml. Pri pozorovaní v UF žiarení pri 366 nm je viditeľná intenzívna modrá fluorescencia, ktorá takmer úplne vymizne pridaním 0,1 ml kyseliny chlorovodíkovej R. D. Asi 50 mg sa rozpustí v 5 ml horúcej vody R. Po ochladení sa pridá 1 ml roztoku dusičnanu strieborného R1 a mieša sa sklenenou tyčinkou. Po niekoľkých minútach sa vylučuje biela zrazenina, ktorá sa rozpustí po pridaní kyseliny dusičnej zriedenej R. Procaini hydrochloridum F. 1 ml roztoku S sa zriedi vodou R na 100 ml. 2 ml tohto roztoku dávajú reakciu na primárne aromatické amíny (2.3.1). Roztok S. 2,5 g sa rozpustí vo vode bez oxidu uhličitého R a zriedi sa tým istým rozpúšťadlom na 50,0 ml. Z dôvodu šetrenia chemikáliami sa odváži priamo 50 mg vzorky, rozpustí sa v 1 ml vody R a zriedi sa ňou na 100,0 ml. 2 ml tohto roztoku dávajú reakciu na primárne aromatické amíny (2.3.1). Sulfanilamidum
D. Asi 5 mg sa rozpustí v 10 ml kyseliny chlorovodíkovej 1 mol/l. 1 ml tohto roztoku sa zriedi vodou R na 10 ml. Roztok bez ďalšieho pridania kyseliny dáva reakciu na primárne aromatické amíny (2.3.1). Poznámka nerobia sa priamo, návody pre študentov sú v prípravke! Phenobarbitalum D. Dáva reakciu na barbituráty nesubstituované na dusíku (2.3.1). vzorku študent nemá v stojane vzoriek (len prázdna skúmavka), ale ju dostane od poverenej osoby priamo na vykonanie reakcie Acidum benzoicum A. Teplota topenia (2.2.14): musí byť 120 C až 124 C. B. Roztok S (pozri Skúšky na čistotu) musí dávať reakciu (a) na benzoany (2.3.1) Roztok S. 5,0 g sa rozpustí v liehu 96 % R a zriedi sa tým istým rozpúšťadlom na 100,0 ml. Z dôvodu šetrenia chemikáliami sa odváži priamo 50 mg vzorky, rozpustí sa v 1 ml liehu 96 % (1 ml roztoku S). K 1,0 ml roztoku S sa pridá 0,5 ml roztoku chloridu železitého R1. Tvorí sa svetložltá zrazenina rozpustná v éteri. Natrii benzoas A. Dáva reakcie (b) a (c) na benzoany (2.3.1) Poznámka pri reakcii (c) nesuší sa vo vákuu, len v sušiarni!
Acidum citricum anhydricum, monohydricum Dáva reakciu na citrónany (2.3.1) nie je uvedené v liekopise Natrii citras dihydricus A. K 1 ml roztoku S (pozri Skúšky na čistotu) sa pridajú 4 ml vody R. Roztok dáva reakciu na citrónany (2.3.1) Roztok S. 10,0 g sa rozpustí vo vode bez oxidu uhličitého R pripravenej z destilovanej vody R a zriedi sa tým istým rozpúšťadlom na 100 ml. Predpísaný roztok 5,0 ml = 0,1 g Natrii citras dihydricus + 5 ml vody bez oxidu uhličitého R Z dôvodu šetrenia chemikáliami sa odváži priamo 50 mg vzorky 0,1 g Natrii citras dihydricus, rozpustí sa v 5 ml vody bez oxidu uhličitého R pripravenej z destilovanej vody R (1 ml roztoku S + 4 ml vody R). Roztok dáva reakciu na citrónany (2.3.1) Poznámka - zafarbenie je skôr žltohnedé, modrý prstenec vzniká až státím vzorky! Ethylis acetas D. Dáva reakciu na estery (2.3.1) Calcii lactas pentahydricus B. Dáva reakciu na mliečnany (2.3.1)
Acidum lacticum C. Dáva reakciu na mliečnany (2.3.1) Poznámka - vzniká zelený prstenec! Natrii acetas trihydricus A. 1 ml roztoku S (pozri skúšku na čistotu) dáva reakciu (b) na octany (2.3.1) Roztok S. 10,0 g sa rozpustí vo vode bez oxidu uhličitého R pripravenej z destilovanej vody R a zriedi sa tým istým rozpúšťadlom na 100, 0 ml. Z dôvodu šetrenia chemikáliami sa odváži priamo 0,10 g Natrii acetas trihydricus a rozpustí sa v 1,0 ml vody bez oxidu uhličitého R pripravenej z destilovanej vody R (1 ml roztoku S). Tento roztok dáva reakciu (b) na octany (2.3.1). Plumbi acetas (nie je uvedený v liekopise, modelová vzorka) Dáva reakciu (b) na octany (2.3.1) Acidum salicylicum C. Asi 30 mg sa rozpustí v 5 ml roztoku hydroxidu sodného 0,05 mol/, ak treba roztok sa zneutralizuje a zriedi vodou R na 20,0 ml. 1 ml tohto roztoku dáva reakciu (a) na salicylany (2.3.1) Natrii salicylas B. roztok S (pozri Skúšky na čistotu) dáva reakcie na salicylany (2.3.1). Roztok S. 5,0 g sa rozpustí vo vode bez oxidu uhličitého R pripravenej z destilovanej vody R a zriedi sa tým istým rozpúšťadlom na 50 ml. Z dôvodu šetrenia chemikáliami sa odváži priamo 0,10 g Natrii salicylas, pridá sa 1,0 ml vody bez oxidu uhličitého R pripravenej z destilovanej vody R (1 ml roztoku S). Dáva reakcie na salicylany (2.3.1). Acidum acetylsalicylicum po alkalickej hydrolýze D. 20 mg zrazeniny zo skúšky totožnosti B sa zahriatím rozpustí v 10,0 ml vody R a ochladí sa. Roztok dáva reakciu (a) na salicylany (2.3.1)
B. K 0,20 g sa pridajú 4 ml hydroxidu sodného, zriedeného roztoku R a 3 min. sa varí. Po ochladení sa pridá 5 ml kyseliny sírovej zriedenej R a vylúčená zrazenina sa odfiltruje premyje a vysuší sa pri teplote 100 C až 105 C. Teplota topenia (2.2.14) je 156 C až 161 C. Poznámka skúška (a) sa robí podľa liekopisu, skúška (b) sa nesuší vo vákuu, len v sušiarni! Acidum tartaricum B. Dáva reakcie na vínany (2.3.1) Poznámka pri reakcii (a) treba presne dodržať návažky a predpísané množstvá a poradie pridávaných činidiel síranu železnatého a peroxidu vodíka vzniknuté žlté zafarbenie musí zmiznúť (zmizne až po dlhšom státí) až potom sa pridá po kvapkách zriedený roztok hydroxidu sodného R. Mr = 150,1 Kalii natrii tartaras tetrahydricus B. Dáva reakciu (b) na vínany (2.3.1) Mr = 282,22 Coffeinum F. Dáva reakciu na xantíny (2.3.1) Okrem skúšky F urobiť na cvičení aj skúšky C a D, ktoré spadajú pod 3. cvičenie C. K 2 ml nasýteného roztoku kofeínu sa pridá 0,05 ml jódového roztoku R. Roztok je číry. Pridá sa 0,1 ml kyseliny chlorovodíkovej, zriedenej 7 % R. Vznikne hnedá zrazenina. Po neutralizácii hydroxidom sodným, zriedeným roztokom R sa zrazenina rozpustí. D. Asi 10 mg sa v skúmavke so sklenenou zátkou rozpustí v 0,25 ml zmesi 0,5 ml acetylacetónu R a 5 ml hydroxidu sodného, zriedeného roztoku R. Zahrieva sa na vodnom kúpeli 7 min pri teplote 80 C. Po ochladení sa pridá 0,5 ml roztoku
dimetylaminobenzaldehydu R2. Znova sa 7 min zahrieva na vodnom kúpeli pri teplote 80 C. Ochladí sa a pridá sa 10 ml vody R. Vznikne intenzívne modré zafarbenie. Theobrominum C. Dáva reakciu na xantíny (2.3.1) Okrem skúšky C urobiť aj skúšku B, ktorá spadá pod 3. cvičenie B. Asi 20 mg sa miernym zahrievaním rozpustí v 2 ml amoniaku zriedeného R1 (asi 6 mol/l) a ochladí sa. Pridajú sa 2 ml dusičnanu strieborného, roztoku R2. Roztok zostáva číry. Roztok sa niekoľko minút zahrieva pri teplote varu. Vznikne biela kryštalická zrazenina.