Příloha 2 Certifikace úspěšnosti klinické laboratoře v systému externího hodnocení kvality Obecný úvod společný pro všechny zkoušky všech oborů Platí od 1.1.2009 Zpracovali: Vladimír Bartoš, Bedřich Friedecký, Ingrid Hrachovinová, Josef Kratochvíla, Vlastimil Král, Petr Kubáč, Gustav Louženský, Miloslava Matýšková, Dalibor Novotný, Jitka Pohořská, Martin Písačka, Petr Schneiderka, Drahomíra Springer, Kristian Šafarčík, Miloš Tichý, Tomáš Zima Poznámka: Změny v textu jsou pro přehlednost označeny žlutě. V následujícím textu jsou shrnuta obecná východiska a principy přidělování certifikátů v systému. Aplikace těchto obecných principů je provedena v samostatných dokumentech, které popisují pravidla certifikace pro jednotlivé zkoušky v rámci jednotlivých oborů. Názvy těchto dokumentů jsou: Certifikace 2009 biochemie Certifikace 2009 hemokoagulace Certifikace 2009 imunoanalytické metody Certifikace 2009 imunohematologie Certifikace 2009 imunologie Certifikace 2009 krevní obraz Způsob udělování certifikátů Certifikát úspěšnosti laboratoře v programu dokumentuje analytickou způsobilost klinické laboratoře a návaznost výsledků měření a/nebo srovnatelnost výsledků měření. Potvrzuje, že analytická úroveň měření v laboratoři dosahuje požadované kvality a že výsledky zkoušek, prováděných v laboratoři, jsou dostatečně srovnatelné s výsledky dosahovanými v ostatních laboratořích. Certifikáty úspěšnosti jsou udělovány pouze pro vybrané analyty a laboratorní zkoušky, a to pro ty, kde existuje spolehlivé určení cílové hodnoty s dostatečně nízkou úrovní nejistoty (viz dokumenty Certifikace 2009 pro jednotlivé obory a zkoušky). V ostatních případech se certifikát úspěšnosti nevydává, vydává se pouze osvědčení o účasti laboratoře v programu. Cílové hodnoty Pro jednotlivé zkoušky může být jako cílová hodnota použita některá z následujících variant (ISO 13528): RMP - referenční hodnoty získané referenčními postupy měření v referenčních laboratořích. AV - hodnoty validované kalibračními laboratořemi výrobců na podkladě jejich kalibračního protokolu. ALTM - hodnoty získané jako průměry výsledků měření účastníků programu s vyloučením odlehlých hodnot. ConV aritmetický průměr stejnorodé skupiny výsledků zkoušky (opět s vyloučením odlehlých hodnot). Typ použité cílové hodnoty je vždy specifikován a uveden jako součást vyhodnocení výsledků kontrolního cyklu. Pokud jsou v konkrétním kontrolním cyklu použity cílové hodnoty typu RMP nebo AV s udaným odhadem nejistoty a koeficientem rozšíření pak jsou tyto informace součástí komentáře k vyhodnocení kontrolního cyklu. Referenční hodnoty a jejich nejistoty jsou referenčními laboratořemi určeny aplikací norem: ISO 15193:2003. Measurement of quantities in samples of biological origin Presentation of reference measurement procedures. ISO 15194:2003. Measurement of quantities in samples of biological origin Description of reference materials. ISO 15195:2003. Clinical Laboratory Medicine Requirement for Reference Measurement Laboratories.
Podrobné a průběžně aktualizované informace o referenčních metodách a referenčních materiálech naleznete např. na http://www.bipm.org (konkrétně např. dokument http://www.bipm.org/utils/en/xls/jctlm_listi.xls, dostupné též z http://www.cskb.cz). Certifikace návaznosti a certifikace srovnatelnosti Na základě typu cílové hodnoty jsou na certifikátu úspěšnosti jednotlivé zkoušky rozděleny do dvou skupin (sloupců) takto: Pro zkoušky s cílovými hodnotami typu RMP nebo AV je certifikována návaznost. Pro zkoušky s cílovými hodnotami typu ALTM nebo ConV je certifikována srovnatelnost. Poznámka: Certifikát návaznosti je nadřazen certifikátu srovnatelnosti. Jen ve výjimečných případech může být pro jednu zkoušku certifikována návaznost i srovnatelnost, a to na základě různých kritérií (jedná se o výjimečný případ aplikovaný v současné době jen pro některé hormony viz Certifikace 2009 imunoanalytické metody ). Supervizor je oprávněn v odůvodněných případech z procesu certifikace vyjmout určitou skupinu výsledků a pokud tak učiní, je povinen tuto skutečnost zdůvodnit a dokumentovat v komentáři ke kontrolnímu cyklu. Jestliže má jedna zkouška cílové hodnoty různých typů (např. vzorek A RMP a vzorek B ALTM), pak se certifikuje pouze srovnatelnost. Certifikace úspěšnosti kvantitativních zkoušek Certifikace úspěšnosti je zde založena na porovnání chyby měření laboratoře (TE lab ) s hodnotou cílové nejistoty měření - target measurement uncertainty (VIM). Hodnoty, označované jako toleranční rozpětí, jsou určeny na základě jak mezinárodních, tak i vlastních zkušeností a reflektují současný stav analytické technologie (state-of-art) a/nebo klinické požadavky. Certifikát úspěšnosti je udělen za předpokladu, že celková chyba individuální laboratoře (TE lab ) je menší nebo rovna hodnotě pro všechny výsledky dané zkoušky (tedy pro všechny kontrolní vzorky). Celková chyba laboratoře se vypočte jako odchylka jejího výsledku od cílové hodnoty vyjádřená v procentech: TE lab x TV = 100 TV [%] kde: x je výsledek měření laboratoře v programu TV je cílová hodnota (RMP nebo AV nebo ALTM nebo ConV) Certifikát úspěšnosti je vystaven, je-li TE lab pro všechny výsledky dané zkoušky. může být vyjádřena jak relativně (v %), tak v absolutních jednotkách měření. Při interpretaci hodnot (tolerančních rozpětí) je nezbytné brát v úvahu fakt, že dohodnuté referenční hodnoty mají svou nejistotu, obvykle uváděnou formou kombinované rozšířené nejistoty U ref pro faktor rozšíření k = 2. Tento fakt může supervizor kontrolního cyklu při vyhodnocení zohlednit aplikací následujících jednoduchých vztahů a zásad: 1. Jestliže platí vztah: ALTM - RMP U ref nebo ALTM - AV U ref pak lze rutinní metody měření považovat za návazné na referenci a hodnota (toleranční mez) se nekoriguje - platí její tabulková hodnota. 2. Jestliže platí vztah: ALTM - RMP > U ref nebo ALTM - AV > U ref nelze vyloučit přítomnost matričních nebo jiných vlivů a tuto skutečnost může supervizor kontrolního cyklu při jeho vyhodnocení zohlednit provedením některé z následujících korekcí: a) Jestliže platí vztah: U ref 0,3. pak obvykle platí tabulková hodnota a lze spíše uvažovat o náhradě hodnot RMP či AV hodnotami ALTM nebo ConV. b) Jestliže platí vztah: U ref > 0,3.
může být tabulková hodnota (toleranční rozpětí) odpovídajícím způsobem zvýšena (nejčastěji o 1/3 své hodnoty). Korekce hodnoty a stejně tak použití hodnot ALTM nebo ConV v programu namísto cílových hodnot RMP nebo AV musí být řádně odůvodněno. Při hodnocení výsledků kontrolního cyklu, v němž k takové korekci došlo, je nutné tuto skutečnost v komentáři příslušného kontrolního cyklu odůvodnit a výslovně uvést i s patřičnými číselnými údaji. Poznámky: Vzhledem k závislosti přesnosti metod na hodnotě množství/obsahu může supervizor pro extrémně nízké nebo extrémně vysoké cílové hodnoty zvětšit toleranční rozpětí. Korekce hodnoty musí být řádně odůvodněna a uvedena v komentáři příslušného kontrolního cyklu. Údaje ve sloupci, který můžete v tabulkách nalézt pro některé zkoušky, jsou většinou převzaty z průběžně aktualizované databáze dostupné na webové adrese http://www.westgard.com/biodatabase1.htm. Certifikace úspěšnosti kvalitativních zkoušek Pro zkoušky, které poskytují kvalitativní výsledky, probíhá certifikace úspěšnosti na základě porovnání výsledků účastníka s množinou definovaných cílových hodnot. Pro kvalitativní výsledky připadají v úvahu tyto typy cílových hodnot: AV - hodnoty validované kalibračními laboratořemi výrobců na podkladě jejich kalibračního protokolu. ConV konsenzus stejnorodé skupiny účastníků kontrolního cyklu. Kromě cílových (správných, očekávaných) hodnot (výsledků) mohou být definovány navíc ještě hodnoty akceptovatelné (podmíněně správné). Výsledek účastníka je považován za správný, ať určil přímo cílovou hodnotu, nebo některou z akceptovatelných hodnot, a to pro všechny kontrolní vzorky (není-li uvedeno v konkrétním případě jinak). Související dokumenty Tento dokument vychází zejména z následujících mezinárodních norem a doporučení: ISO/IEC Guide 43-1:1997. Proficiency testing by interlaboratory comparisons - Part 1: Development and operation of proficiency testing schemes. ILAC G13:2000. Guidelines for the Requirements for the Competence of Providers of Proficiency Testing Schemes. ISO 17511:2003. In vitro diagnostic medical devices - Measurement of quantities in biological samples Metrological traceability of values assigned to calibrators and control materials. ISO 2003. ISO 18153:2002. Measurement of quantities in samples of biological origin Metrological traceability of assigned value for catalytic concentration of enzymes in calibrators and control materials. ISO 2002. EN/CEN 14136:2003. Use of External Quality Assessment Schemes in the Assessment of the Performance of in Vitro Diagnostic Procedures. CEN 2003. ISO 13528:2003. Statistical methods for use in proficiency testing by interlaboratory comparisons. ISO 2003. EA-04/14:2003. The selection and use of Reference Materials. EA 2003. International vocabulary of basic and general terms in metrology (VIM). ISO Guide 35. Reference Materials - General and statistical principles for certification, 2006. Directive 98/79/EC of the European Parliament and of the Council of 27 October 1998 on in vitro diagnostic medical devices. Official Journal of the European Communities 1998; Dec 7: L 331/1-L 331/37. NV 453 2004 Sb. Nařízení vlády, kterým se stanoví technické požadavky na diagnostické zdravotnické prostředky in-vitro. ISO 15198:2004 Clinical laboratory medicine In vitro diagnostic medical devices Validation of user quality control procedures by the manufacturer. ISO 2004. ISO/CD TR 18112:2004 ISO In vitro diagnostic medical devices Summary of regulatory requirements for information supplied by the manufacturer. ISO 2004. ČSN EN ISO 375:2001 Informace předávané výrobcem s diagnostickými činidly in vitro pro odborné použití. ČSNI Praha 2001.
ISO/DTS 21748:2003. Guide to the use of repeatability, reproducibility and trueness estimates in measurement uncertainty estimation. ISO 2003. Plzák Z. a kol.: Kvalimetrie 14. Použití referenčních materiálů v chemické analýze Metodická příručka vypracovaná v rámci řešení úkolu č. 41/03 programu rozvoje metrologie. Eurachem 2004. Thompson M, Ellison SLR, Wood R.: The international harmonizes protocol for the proficiency testing of analytical chemistry laboratories. Pure Appl Chem 2006,78,145-196 (Dostupné na www.iupac.org) Seznam zkratek ALTM All Laboratories Trimmed Mean (aritmetický průměr spočtený po vyloučení odlehlých hodnot) AV Assigned Value jeden z typů cílové hodnoty (hodnoty získané doporučenými metodami v referenčních nebo expertních laboratořích) CE Marking of Conformity deklarace shody ConV Consensus value jeden z typů cílové hodnoty (konsenzus stejnorodé skupiny účastníků kontrolního cyklu) CRM Certified Reference Material (certifikovaný referenční materiál) CV Coefficient of Variation (relativní směrodatná odchylka, variační koeficient) Externí hodnocení kvality FAAS Flame Atomic Absorption Spectrometry (plamenová atomová absorpční spektrofotometrie) FAES Flame Atomic Emission Spectrometry (plamenová atomová emisní fotometrie) HPLC High Performance Liquid Chromatography (vysokoúčinná kapalinová chromatografie) IC Ion Exchange Chromatography ID-GC/MS Isotopic Dilution Gas Chromatography / Mass Spectrometry ID-LC/MS Isotopic Dilution Liquid Chromatography / Mass Spectrometry ID-MS Isotopic Dilution Mass Spectrometry IFCC International Federation of Clinical Chemistry and Laboratory Medicine IRMM Institute of Reference Materials and Measurements Geel Evropský institut referenčních materiálů a měření v Geelu ILAC International Laboratory Accreditation Cooperation - Mezinárodní spolupráce při akreditaci laboratoří. ISE Iontově selektivní elektrody ISO International Organisation for Standardisation (mezinárodní organizace pro normalizaci) IVD MD In Vitro Diagnostic Medical Devices diagnostické zdravotnické prostředky in vitro používané pro zkoušení vzorků biologických materiálů v procesu diagnostiky, terapie a prevence chorobných procesů v oblasti medicíny LC Liquid Chromatography NAA Neutronová aktivační analýza NIST National Institute of Standards and Technology (USA) Americký národní ústav pro normalizaci a technologie RID Radiální imunodifuze RM Referenční materiál RMP Reference Method Procedure. Referenční hodnota měření obsahu (množství) analytu či parametru stanovená referenční metodou (dříve RMV). SRM Standard Reference Material - americká obdoba CRM TE lab Celková chyba individuální laboratoře Target Measurement Uncertainty - cílová měření (toleranční rozpětí) TV hodnota VIM International Vocabulary of Basic and General Terms in Metrology. ISO guide 99, Geneve 2008 Mezinárodní slovník základních a všeobecných termínů v metrologii.
Poznámka: Změny v textu jsou pro přehlednost označeny žlutě. Certifikace úspěšnosti klinické laboratoře v systému externího hodnocení kvality Klinická biochemie Doporučení výboru ČSKB a RLKB platné od 1.1.2009 Zpracovali: Bedřich Friedecký, Josef Kratochvíla, Petr Kubáč, Gustav Louženský, Dalibor Novotný, Petr Schneiderka, Tomáš Zima Základní informace o procesu certifikace v systému a rovněž seznam požitých zkratek naleznete v dokumentu Obecný úvod společný pro všechny zkoušky všech oborů. Certifikované zkoušky Poznámka: Ve sloupci jsou uvedeny metody, které: a) Nelze provádět na automatických analyzátorech. b) Poskytují trvale výsledky s nevhodně vysokou nejistotou. c) Nejsou používány analytickými systémy, splňujícími požadavky IVD MD a označené značkou CE. ABR - Parametry acidobazické rovnováhy ph pco 2 Měření skleněnou elektrodou, referenční metoda IFCC (4) Měření pomocí tonometrie dle doporučení IFCC (zatím neschválená ref. metoda) (4, 6) NIST/SRM 186-I,186-II, 922, 923 USA Měření skleněnou elektrodou, AB analyzátory - Měření ISE elektrodou, AB analyzátory, tonometrie po 2 - - Měření ISE elektrodou, AB analyzátory, tonometrie Sodný kation ID-MS, FAES SRM 909 b NIST, SRM 956b (Electrolytes in ISE bez ředění (direkt), ISE s ředěním (indirekt) Frozen Serum), NIST/SRM 919a USA (1, 2, 3,4) Draselný kation Chloridový anion ID-MS, FAES (1, 2, 3,4) Coulometrie, NAA (1, 2, 3,4) SRM 909b NIST, SRM 956b (Electrolytes in Frozen Serum), NIST/SRM 918a USA SRM 909b NIST, SRM 956b (Electrolytes in Frozen Serum), NIST/SRM 918a, NIST/SRM 919a USA ISE bez ředění (direkt), ISE s ředěním (indirekt) ISE bez ředění (direkt), ISE s ředěním (indirekt) 1 % 2,0 % 12 % 5,3 % 16 % 5 % 1,0 % 8 % 5,6 % 7 % 1,5 % Vápenatý kation - SRM 956b - 15 % 2,2 % AKS - Analyty krevního séra Certifikace úspěšnosti 2009 klinická biochemie Strana 16 z 27
Sodný kation Draselný kation Chloridový anion Vápník celkový ID-MS, FAES ID-MS, FAES coulometrie, NAA ID-MS, FAAS SRM 909 b NIST, SRM 956a (Electrolytes in Frozen Serum), NIST/SRM 919a USA SRM 909b NIST, SRM 956a (Electrolytes in Frozen Serum), NIST/SRM 918a USA SRM 909b NIST, SRM 956a (Electrolytes in Frozen Serum), NIST/SRM 918a, NIST/SRM 919a USA SRM 909b NIST, SRM 956a (Electrolytes in Frozen Serum), NIST/SRM 915a USA, BCR/CRM 303, 304 FAES (s Li spektrálním pufrem), ISE bez ředění (direkt), ISE s ředěním (indirekt) 5 % 1,0 % FAES (s Li spektrálním pufrem), ISE bez ředění (direkt), ISE s ředěním (indirekt) 8 % 5,6 % coulometrie, ISE bez ředění (direkt), ISE s ředěním (indirekt) 7 % 1,5 % FAAS, FAES (s Li spektrálním pufrem), ISE bez ředění (direkt), ISE s ředěním (indirekt), fotometrické metody (o-kresolftalexon, arsenazo III) 10 % 2,8 % FAES bez použití Li spektrálního pufru, enzymové fotometrické metody FAES bez použití Li spektrálního pufru, enzymové fotometrické metody fotometrická metoda Fosfáty anorganické navrhované metody ID-MS, DGKCh (Referenz institut für Bioanalytik, Bonn) UV molybdátová metoda fotometrie na bázi molybdenové modři, IC 15 % 9,4 % fotometrie s komplexem molybdát, vanadát (málo robustní metoda) Železo celkové neexistuje NIST/SRM 937 USA fotometrie s ferrozinem 15 % 23,2 % metody s deproteinací Hořčík celkový Lithium Celková bílkovina FAAS FAAS reakce s biuretovým činidlem (4, 5) SRM 909b NIST, NIST/SRM 929, SRM 956a (Electrolytes in Frozen Serum), USA, BCR/CRM 303, 304 SRM 909b NIST, NIST/SRM 924a, SRM 956a (Electrolytes in Frozen Serum), USA NIST/SRM 927a FAAS, enzymová UV metoda, fotometrické metody 15 % 6,4 % FAAS, FAES, ISE bez ředění (direkt), ISE s ředěním (indirekt) 12 % 12,6 % reakce s biuretovým činidlem 9 % 4,0 % Albumin IFCC metoda ERM DA470 (IRMM Geel, Belgie) fotometrické metody (BCG, BCP), (koncentrace albuminu vyšší imunoturbidimetrie, imunonefelometrie než 60 g/l nebudou 12 % 4,2 % hodnoceny) Osmolalita - - Osmometry 8 % Výpočet Laktát - - Enzymové metody včetně metod se senzory 18 % Bilirubin celkový Doumas - Perry SRM 916a (NIST, USA) Jendrassik-Gróf, fotometrické metody s DCA a (19, 20, 21, 22, 23) DPD, přímá bilirubinometrie 21 % 30,5 % Cholesterol ID-GC/MS, ID-LC/MS SRM 909 b NIST, SRM 911b NIST, NIST/SRM Metoda CHOD-PAP metoda dle Lieberman-Burchardta 1952a (Cholesterol in Frozen Serum), SRM 1951b 10 % 15,2 % NIST, USA, JCCRM 211, Japonsko Glukóza ID-GC/MS SRM 909b NIST, NIST/SRM 917a, NIST/SRM GOD-PAP fotometricky, GOD-PAP neenzymové metody (1, 2, 3, 25) 965 USA elektrometricky, metoda s hexokinázou, enzymové 10 % 6,9 % elektrody (biosenzory), glukózadehydrogenáza Kyselina močová ID-GC/MS, HPLC SRM 909b NIST, NIST/SRM 913a USA enzymové fotometrické metody redukční metody a enzymová metoda dle 14 % 17,2 % Kageyamy Močovina ID-GC/MS SRM 909b NIST, NIST/SRM 912a USA UV enzymová metoda (s GMD), elektrochemické fotometrické metody s DAM a s OPDA 15 % 18,3 % (14) stanovení (biosenzory) Kreatinin ID-GC/MS, ID-LC/MS SRM 909b NIST, NIST/SRM 914a USA enzymové metody, HPLC, Jaffé bez deproteinace 15 % 12,9 % Jaffé s deproteinací (1, 2, 3, 6, 24, 26) Certifikace úspěšnosti 2009 klinická biochemie Strana 17 z 27
Triacylglyceroly ID-GC/MS SRM 909b NIST, NIST/SRM 1951a USA, JCCRM 223, Japonsko metoda s GPO-PAP ALP v oponentním řízení JC ERM 20327 doporučená metoda ALP s pufrem AMP (7, 9, 10, 12) α-amyláza IFCC metoda ERM-AD456 (IRMM Geel) IFCC / IRMM metoda JC ERM 20327 AST IFCC / IRMM ERM-AD v přípravě (IRMM Geel) IFCC / IRMM metoda (8, 12, 13) JC ERM 20327 ALT IFCC / IRMM ERM-AD454 (IRMM Geel) IFCC / IRMM metoda (8, 12, 13) JC ERM 20327 CK IFCC / IRMM ERM-AD455 (IRMM Geel) IFCC / IRMM metoda (8, 12, 13) JC ERM 20327 GGT IFCC / IRMM (8, 12, 13) ERM-AD452 (IRMM Geel) JC ERM 20327 IFCC / IRMM metoda LD IFCC metoda ERM-AD453 JC ERM 20327 IFCC / IRMM metoda Cholinesteráza IFCC / IRMM zatím nedostupný, v přípravě IFCC / IRMM metoda (8, 12, 13) Albumin (elfo.) - - AGE (agarózová gelová elektroforéza) CE (kapilární elektroforéza) γ-globulin (elfo.) - - AGE (agarózová gelová elektroforéza) CE (kapilární elektroforéza) α-amyláza pankreatická 15 % 37,2 % 21 % 24,8 % 21 % 29,8 % 21 % 17,9 % 21 % 41,6 % 21 % 40,0 % 20 % 41,0 % 21 % 21 % 10,4 % IFCC metoda IRMM/IFCC 456 (IRMM Geel) metody kalibrované na materiál s návazností na IRMM/IFCC 456 21 % 29,8 % 15 % 30 % fotometrické neenzymové metody metody nonifcc, metoda s DEA pufrem metody nonifcc metody nonifcc, metody bez použití pyridoxal-5-fosfátu metody nonifcc, metody bez použití pyridoxal-5-fosfátu metody nonifcc metody nonifcc, všechny metody s nerozpustným substrátem metody nonifcc (se substrátem pyruvát) metody kalibrované na materiál bez návaznosti na IRMM/IFCC 456 ALB Albumin v moči Zkouška Referenční metoda Certifikovaný referenční materiál Doporučené rutinní metody stanovení Albumin v moči - ERM DA470 (IRRM Geel) imunoturbidimetrie, imunonefelometrie, HPLC (1, 2) 21 % (konc. > 30 mg/l) 30 % (konc. < 30 mg/l) 55 % radiální imunodifuze, ELISA Certifikace úspěšnosti 2009 klinická biochemie Strana 18 z 27
AM Analyty moče Sodný kation Draselný kation Chloridový anion Vápník celkový Fosfáty anorganické ID-MS, FAES ID-MS, FAES coulometrie, NAA ID-MS, FAAS neexistuje (navrhované metody ID-MS, IC) SRM 909b NIST, SRM 956a (Electrolytes in Frozen Serum), NIST/SRM 919a USA pouze pro sérum SRM 909b NIST, SRM 956a (Electrolytes in Frozen Serum), NIST/SRM 918a USA pouze pro sérum SRM 909b NIST, SRM 956a (Electrolytes in Frozen Serum) NIST, NIST/SRM 918a, NIST/SRM 919a USA pouze pro sérum SRM 909b NIST, SRM 956a (Electrolytes in Frozen Serum) NIST, NIST/SRM 915a USA pouze pro sérum FAES (s Li spektrálním pufrem), ISE bez ředění (direkt), ISE s ředěním (indirekt) 11 % 26,8 % FAES (s Li spektrálním pufrem), ISE bez ředění (direkt), ISE s ředěním (indirekt) 17 % 23,2 % coulometrie, ISE bez ředění (direkt), ISE s ředěním (indirekt) 14 % - FAAS, FAES, ISE bez ředění (direkt), ISE s ředěním (indirekt), fotometrické metody (okresolftalexon, arsenazo III) - UV molybdátová metoda 18 % 36,6 % 18 % 26,5 % FAES bez použití Li spektrálního pufru, enzymové fotometrické metody FAES bez použití Li spektrálního pufru, enzymové fotometrické metody fotometrická metoda fotometrie na bázi molybdenové modři, fotometrie s komplexem molybdát, vanadát (málo robustní metoda) Osmolalita - - Osmometry 8 % Výpočet Močovina ID-GC/MS SRM 909b NIST, NIST/SRM 912a USA pouze UV enzymová metoda (s GMD), elektrochemické fotometrické metody s DAM a s OPDA 17 % 25,9 % (4) pro sérum stanovení (biosenzory) Kreatinin ID-GC/MS, HPLC SRM 909 b NIST, NIST/SRM 914a USA pouze enzymové metody, HPLC, Jaffé bez deproteinace Jaffé s deproteinací 24 % 24,5 % pro sérum Kyselina močová ID-GC/MS, HPLC SRM 909 b NIST, NIST/SRM 913a USA pouze enzymové fotometrické metody redukční metody a enzymová metoda dle 26 % 22,1 % pro sérum Kageyamy Glukóza ID-GC/MS SRM 909 b NIST,SRM 965 NIST GOD-PAP fotometricky, GOD-PAP neenzymové metody (Glucose in Frozen Human Serum), NIST/SRM 917a USA pouze pro sérum elektrometricky, metoda s hexokinázou, enzymové elektrody (biosenzory) 22 % - ph Měření skleněnou NIST/SRM 186-I,186-II, 922, 923 USA Skleněná elektroda testovací proužky elektrodou, referenční metoda IFCC (4) 5 % - Hořčík celkový FAAS, SRM 909 b NIST, SRM 956a (Electrolytes in FAAS, enzymová UV metoda fotometrická titrace IC navržená Frozen Serum), NIST/SRM 929 USA pro sérum 20 % 37,4 % BIL Bilirubin novorozenecký Bilirubin celkový viz oddíl AKS - Analyty krevního séra Certifikace úspěšnosti 2009 klinická biochemie Strana 19 z 27
CRP Stanovení CRP C-reaktivní protein viz publikace prof. Soren Blirup-Jensen v časopisu Clin.Chem.Lab.Med. (2001 39/11 1076 1127) ERM DA 470 (IRMM Geel) Poznámka: Stanovení CRP ultrasenzitivními metodami a systémy POCT není předmětem certifikace. imunoturbidimetrie, imunonefelometrie 24 % 84,4 % kvalitativní metody GLC Stanovení glukózy Glukóza Certifikát bude vydáván pro všechny výsledky kromě těch, které byly získány na systémech POCT - glukometrech. Kritéria pro udělení certifikátu viz oddíl AKS - Analyty krevního séra KD Sledování kompenzace diabetu Hemoglobin A 1c HPLC-ESI/MS nebo HPLC- CE metoda IFCC (1, 2, 3, 7, 8) IRMM 466, IRMM 467 (4, 5, 6) HPLC, LC, (preferované metody), imunochemické metody s certifikátem návaznosti NGSP (www.aacc.org/standards) 20 % 4,0 % manuální ionexová a afinitní chromatografie (zvláště kolonky), imunochemické metody bez certifikace návaznosti NGSP MS Močový sediment Močový sediment Účastníci hodnotí v každém kontrolním cyklu 4 fotografie močového sedimentu. Certifikát úspěšnosti bude vydáván pro ty účastníky, kteří uvedou alespoň 3 správné (nebo alespoň akceptovatelné) výsledky ze 4. Certifikace úspěšnosti 2009 klinická biochemie Strana 20 z 27
PRO Proteiny v krevním séru Imunoglobulin A - ERM DA 470 (IRMM Geel) imunoturbidimetrie, imunonefelometrie 24 % 35,9 % RID Imunoglobulin G - ERM DA 470 (IRMM Geel) imunoturbidimetrie, imunonefelometrie 18 % 16,5 % RID Imunoglobulin M - ERM DA 470 (IRMM Geel) imunoturbidimetrie, imunonefelometrie 26 % 47,3 % RID Transferin - ERM DA 470 (IRMM Geel) imunoturbidimetrie, imunonefelometrie 18 % 4,3 % RID Albumin viz oddíl AKS - Analyty krevního séra α-1-antitrypsin - ERM DA 470 (IRMM Geel) imunoturbidimetrie, imunonefelometrie 23 % 16,3 % RID C3 komplement - ERM DA 470 (IRMM Geel) imunoturbidimetrie, imunonefelometrie 20 % 15,6 % RID Prealbumin - ERM DA 470 (IRMM Geel) imunoturbidimetrie, imunonefelometrie 23 % 19,1 % RID Ceruloplazmin - ERM DA 470 (IRMM Geel) imunoturbidimetrie, imunonefelometrie 39 % 11,1 % RID Orosomukoid - ERM DA 470 (IRMM Geel) imunoturbidimetrie, imunonefelometrie 18 % - RID Haptoglobin - ERM DA 470 (IRMM Geel) imunoturbidimetrie, imunonefelometrie 16 % 36,4 % RID C4 komplement - ERM DA 470 (IRMM Geel) imunoturbidimetrie, imunonefelometrie 28 % 33,4 % RID α-2-makroglobulimn - ERM DA 470 (IRMM Geel) imunoturbidimetrie, imunonefelometrie 30 % 18,7 % RID Celková bílkovina viz oddíl AKS - Analyty krevního séra RFA Rizikové faktory aterosklerózy Cholesterol Triacylglyceroly Cholesterol HDL viz oddíl AKS - Analyty krevního séra viz oddíl AKS - Analyty krevního séra Ultracentrifugace a SRM 911a NIST, SRM 1951a NIST (Lipids kvantitativní stanovení in Fresh-Frozen Human Serum) USA, (1) JCCRM 211, JCCRM 223, Japonsko CDC metoda (2) Metody přímé (bez precipitace lipoproteinů obsahujících apo B) Apolipoprotein AI neexistuje SP1-01 WHO Metody imunoturbidimetrické, imunonefelometrické Apolipoprotein B neexistuje SP3-07 WHO Metody imunoturbidimetrické, imunonefelometrické 15 % 19,7 % 21 % 13,4 % 21 % 22,8 % radiální imunodifuze radiální imunodifuze Certifikace úspěšnosti 2009 klinická biochemie Strana 21 z 27
TDM Koncentrace lékových hladin Digoxin FPIA, EIA, LIA 24 % 20 % Teofylin FPIA, EIA, LIA, HPLC 27 % 25 % Fenytoin SRM 900 FPIA, EIA, LIA, HPLC 24 % 25 % Karbamazepin SRM 1599 FPIA, EIA, LIA, HPLC 24 % 25 % Kyselina valproová SRM 1599 FPIA, EIA, LIA, HPLC 24 % 25 % Literatura Literatura obecně Friedecký B., Kratochvíla J.: Analytická kvalita v klinické laboratoři, publikace CD-ROM, SEKK, 2002. Plzák Z., Koruna I., Friedecký B., Kratochvíla J.: Metrologická terminologie v analytické laboratoři, publikace CD-ROM, SEKK, 2003. Informace dostupné na webech: http://www.sekk.cz (oddíl Infoservis) http://www.hectef-src.or.jp/images/jctlm_listi.1.pdf http://www.bipm.com http://www.westgard.com Literatura k oddílu ABR Parametry acidobazické rovnováhy 1. Stöckl D, Franzini C, Kratochvila J, Middle J, Ricos C, Siekmann L, Thienpont LM.: Compilation of characteristics of reference methods in use, including a literature review on reference methods and related topics, Europ.J.Clin.Chem.Clin.Biochem. 1995 33 455 466 2. Thienpont LM, Franzini C, Kratochvila J, Middle J, Ricos C, Siekmann L, Stöckl D.: Analytical quality specifications of reference methods and operating specifications for network of reference laboratories, Europ.J.Clin.Chem.Clin.Biochem 1995 33 949 957 3. Couck P, Ghys T, Van Gastel E, Van Coilie m, Gorus F, Gerlo E: Preliminary performane evaluation of blood gas analyses, Clin Chem Lab Med 2006 44 1030-1034 4. Maas AHJ.: IFCC reference method and materials for measurement of ph, gases and electrolytes in blood, Scand.J.Clin.Lab.Invest. 1993 53 Suppl.214 83 94. 5. Olafsdottir E, Westgard JO, Ehrmeyer SS, Falkon KD.: Matrix effects and the performance and selection of quality-control procedures to monitor po 2 measurements, 1996 42/3 392 396 6. WG ISE IFCC: IFCC reference procedure for substance concentration determination of total carbon dioxide in blood, plasma or serum, 2001 39/3 283 289 7. Burnett RW.: Matrix effects in blood gas proficiency testing. Arch Pathol Lab With 1993 117 365 368 8. Wang L, Han Q.: Primary reference materials and traceability chain for gas composition, Accred.Qual.Assur. 2002 7 217 219 9. Recommendation for measuring and reporting chloride by ISEs in undiluted serum, plasma or blood, Clin Chem Lab Med 2006 44 346 352 Literatura k oddílu AKS Analyty krevního séra 1. Stöckl D, Franzini C, Kratochvila J, Middle J, Ricos C, Siekmann L, Thienpont LM.: Compilation of characteristics of reference methods in use, including a literature review on reference methods and related topics, Europ.J.Clin.Chem.Clin.Biochem. 1995 33 455 466 2. Thienpont LM, Franzini C, Kratochvila J, Middle J, Ricos C, Siekmann L, Stöckl D.: Analytical quality specifications of reference methods and operating specifications for network of reference laboratories, Europ.J.Clin.Chem.Clin.Biochem 1995 33 949 957 3. Friedecký B, Kratochvíla J.: Přehled referenčních metod stanovení základních analytů v klinické biochemii (lidské krevní sérum, krev, moč), Fons 1992 číslo 2 4. Doumas BT, Bayse DD.: A Candidate Reference Method for Determination of Total Protein in Serum I. Development and Validation, Clin.Chem. 1981 27 1642 1650 5. Doumas BT, Bayse DD, Borner K.: A Candidate Reference Method for Determination of Total Protein in Serum. II. Test for Transferability, Clin.Chem. 1981 27 1651 1654 6. Friedecky B, Kratochvila J, Budina M, Jabor A. Quality of serum creatinine measurement in light of EQA programs. Clin Chem Lab Med 2007; 45(5):685-8 7. Enzyme Working Group: Proposal of Standard Methods for the Determination of Enzyme Catalytic Concentrations in Serum and plasma at 37 C. 1. Alkaline phosphatase, Eur.J.Clin.Chem.Clin.Biochem. 1992 30 247 256 8. Enzyme Working Group: Approved recommendation on IFCC Methods for the Measurement of Catalytic Concentration of Enzymes. 8. IFCC Method for Lactate Dehydrogenase, Certifikace úspěšnosti 2009 klinická biochemie Strana 22 z 27
Eur.J.Clin.Chem.Clin.Biochem. 1994 32 639 655 9. Standardmethoden 1994 für Enzymaktivitätbestimmungen, Siekmann L, Mitt. Dt.Ges.Klin.Chem. 1994 25 267 271 10. Einführung der neuen Standardmethoden 1994 zur Bestimmung der katalytischen Enzymkonzentrationen bei 37 C, Lorentz K, Röhle G, Siekmann L, Mitt.Dt.Ges.Klin. Chem. 1995 26 190 192 11. Usefulness of Reference Materials in Calibration of Enzyme Activities, Lessinger JM, Férard G, Grafmeyer D, Labbé D, Maire I, Schiele F, Vassault A, Eur.J.Clin.Chem.Clin.Biochem. 1995 32 859 864 12. Kratochvíla J, Friedecký B.: Katalytické koncentrace enzymů. Mezilaboratorní srovnatelnost. Referenční intervaly. Stav v Evropě., Klin.Biochem.Metab. 1993 2 113 115 13. Enzyme Working Group: Recommendations for Carrying out Standard ECCLS Procedures (1988) for Catalytic Concentrations of CK, AST, ALT and gamma-gt at 37 C, Eur.J.Clin.Chem.Clin.Biochem. 1993 31 901 909 14. Kessler A, Siekmann L.: Measurement of Urea in Human Serum by Isotope Dilution Mass Spectrometry: A Reference Procedure, Clinical Chemistry 1999, 45/9 1523-1529 15. Lessinger JM, Férard G, Grafmeyer D, Labbé D, Maire I, Schiele F, Vassault A.: Usefulness of Reference Materials in Calibration of Enzyme Activities. Eur.J.Clin.Chem.Clin.Biochem. 1995 32 859 864 16. Lorentz K. et all. Enzyme Working Group: Approved recommendation on IFCC Methods for the Measurement of Catalytic Concentration of Enzymes. Part 9. IFCC Method for a-amylase (1,4-a-D-glucan glucanohydrolase, EC 3.2.1.1.) Clin.Chim.Acta 1999 281 S5 S39. 17. Lorentz K, Gütschow B, Renner F.: Evaluation of a Direct a-amylase Assay Using 2-chloro-4-nitro-phenyl-a-D-maltotrioside, Clin.Chem.Lab.Med. 1999 (11/12) 1053 1062. 18. Lorentz K.:Routine a-amylase Assay Using Protected 4-Nitrophenyl-1,4-a-D-maltoheptaoside and a Novel a-glucosidase. Clin Chem 2000 46/5 649 655 19. Doumas B.T. et all.: Standardization in Bilirubin Assays: Evaluation of Selected Methods and Stability of Bilirubin Solutions Clin.Chem. 19 894-993 (1973) 20. Perry B.W. et all.: A Candidate Reference Method for Determination of Bilirubin in Serum. Test for Transferability. Clin.Chem.29 297 301 (1983) 21. Recommendation on a Uniform Bilirubin Standard Clin.Chem. 8 405 407 (1962) 22. National Reference System for Total Bilirubin Report on Analyse Reference Summaries of the National Reference Systém for the Clinical Laboratory, NCCLS Villanova PA 19085 23. Doumas B.T. et all.: Candidate Reference Method for Determination of Total Bilirubin in Serum. Development and Validation. Clin.Chem., 31 1779 1789 (1985) 24. Pantegini M, Myers GL, Greg Miller W, Greenberg N. The importance of metrological traceability on the validity of creatinine measurement as an index of renal function, Clin Chem Lab Med 2006;44(10):1287-92 25 NACB guidelines and recommendations for laboratory analyses in the diagnosis and management of diabetes mellitus. Update 2008. www.aacc.org 26 Pantegini M.: Enzymatic assays for creatinine. Time for action, Scand.J.Clin.Lab.Invest. 2008 68 Suppl.241 84 88. Literatura k oddílu ALB - Albumin v moči 1. Comper WD, Osicka TM, Clark M, Maclsaac RJ, Jerums G. Earlier detection of microalbuminuria in diabetic patients using a new urinary albumin assay. Kidney Int 2004; 65:1850-5. 2. Osicka TM, Comper WD. Characterisation of immunochemically nonreactive urinary albumine. Clin Chem 2004;50:2289-91. Literatura k oddílu AM - Analyty moče 1. Stöckl D, Franzini C, Kratochvila J, Middle J, Ricos C, Siekmann L, Thienpont LM.: Compilation of characteristics of reference methods in use, including a literature review on reference methods and related topics, Europ.J.Clin.Chem.Clin.Biochem. 1995 33 455 466 2. Thienpont LM, Franzini C, Kratochvila J, Middle J, Ricos C, Siekmann L, Stöckl D.: Analytical quality specifications of reference methods and operating specifications for network of reference laboratories, Europ.J.Clin.Chem.Clin.Biochem 1995 33 949 957 3. Friedecký B, Kratochvíla J.: Přehled referenčních metod stanovení základních analytů v klinické biochemii (lidské krevní sérum, krev, moč), Fons 1992 číslo 2 4. Kessler A, Siekmann L.: Measurement of Urea in Human Serum by Isotope Dilution Mass Spectrometry: A Reference Procedure, Clinical Chemistry 1999, 45/9 1523-1529 5. Appel W.: Qualitätsicherung in der quantitativen Urinanalytik, Externe Qualitätsicherung: INSTAND Ringversuche 1987 1994, Klin.Lab. 1994, 40/11 1033-1047 6. Doporučení ČSKB 2001: Evropská Direktiva pro Analýzu moči, CD-ROM, vydal SEKK s.r.o. 2001, překlad: J.Kratochvíla, G.Louženský Literatura k oddílu KD - Hemoglobin A 1c 1. Willekens E, Thienpont LM, Stöckl D, Kobold U, Hoelzel W, DeLeenheer AP.: Quantification of Glycohemoglobin in Blood by Mass Spectrometry Applying Multiple-Reaction Monitoring, Clin.Chem. 2000 46/2 281 283. 2. Hoelzel W, Miedema K.: Development of Reference System for the International Standardisation of HbA1c Glycohemoglobin Determinations, JIFCC 1996 9 62 67 3. Kobold U, Jeppsson JO, Mauri P, Miedema K, Mosca A, Niederau C, et all.: International Network of Reference Laboratories for the Determination of HbA1c, Clin.Chem. 1998 44 (Suppl S6) A22 4. Mosca A, Paleari R, Made A, Ferrero C, Locatelli M, Ceriotti F.: Commutability of Control Materials in Glycohemoglobin Determinations, Clin.Chem., 1998 44/3 632 638 5. Pantegini M, Garry John W.: Implementation of haemoglobin A1c results traceable to the IFCC reference system: the way forward, Clin Chem Lab Med 2007;45(8):942-944 6. IFCC WG-HbA1c: Global standardization of glycated hemoglobin measurement: the position of the IFCC Working Group, Clin Chem Lab Med 2007;45(8):1077-1080 7. Nordin G, Dybkaer R.: Recomendation for term and measurement unit for HbA1c, Clin Chem Lab Med 2007;45(8):1081-1082 8. Goodall I, Colman P, Schneider H, McLean M, Barker G.: Desirable performance standards for HbA1c analysis precision, accuracy and standardisation, Clin Chem Lab Med 2007;45(8):1083-1097 Certifikace úspěšnosti 2009 klinická biochemie Strana 23 z 27
Literatura k oddílu PRO Proteiny v krevním séru a CRP Stanovení CRP 1. Blirup-Jensen S, Myron Johnson A., Larsen M.: Protein standardization V: value transfer. A practical protocol for the assignment of serum protein values from a Reference Material to a Target Material, Clin Chem 46, 2008, Literatura k oddílu RFA - Rizikové faktory aterosklerózy 1. Havel R.J., Eder H.A., Bragdon J.H.: The distribution and chemical composition of ultracentrifugally separated lipoproteins in human serum. J Clin Invest 34, 1955, 1345-53. 2. Warnick G.R., Wood P.D.: National Cholesterol Education Program recommendations for measurement of high-density lipoprotein cholesterol. Clin Chem 41, 1995, 1427-33. Certifikace úspěšnosti 2009 klinická biochemie Strana 24 z 27
Certifikace úspěšnosti klinické laboratoře v systému externího hodnocení kvality Imunoanalytické kontrolní cykly Doporučení výborů ČSNM a ČSKB a RL RSA, platné od 1.1.2009 Zpracovali: Vladimír Bartoš, Drahomíra Springer, Kristian Šafarčík Poznámka: Změny v textu jsou pro přehlednost označeny žlutě. Základní informace o procesu certifikace v systému a rovněž seznam požitých zkratek naleznete v dokumentu Obecný úvod společný pro všechny zkoušky všech oborů. Současný stav vývoje imunoanalytických metod neumožňuje u řady níže uvedených analytů a parametrů adekvátně posuzovat návaznost získaných výsledků, neboť pro stanovení těchto parametrů neexistují uznávané referenční metody. Současně existuje poměrně významná různorodost výsledků způsobená závislostí na konkrétně použitém analytickém systému. Tato skutečnost může být podmíněna některými objektivními faktory a je proto naší snahou při posuzování úspěšnosti laboratoře tyto aspekty zohlednit. Základem pro určení je průměrná hodnota mezilaboratorní reprodukovatelnosti výsledků získaných v metodicky homogenních skupinách s minimálním počtem účastníků n > 10. Pro každý analyt se tato charakteristická hodnota CV 1rok upřesňuje jednou ročně s platností pro další rok (výpočet se provádí z výsledků kontrolních cyklů druhé poloviny předchozího a první poloviny aktuálního roku). Poznámka: Širší rozpětí pro návaznost odráží vyšší heterogenitu odchylek výsledků porovnávaných s jedinou vztažnou hodnotou. Certifikované zkoušky E1 - Endokrinologie 1 Zkouška certifikace certifikace srovnatelnosti návaznosti T3 celkový konc. > 1,5 nmol/l konc. < 1,5 nmol/l 15 % 0,225 nmol/l 20 % 0,3 nmol/l T4 celkový 13 % 17 % TSH 14 % - T4 volný 13 % - T3 volný konc. > 4 pmol/l konc. < 4 pmol/l 15 % 0,6 pmol/l - - Feritin 24 % - Estriol volný 33 % 44 % Kortizol 16 % 22 % Estradiol konc. > 200 pmol/l konc. < 200 pmol/l 22 % 44 pmol/l 30 % 60 pmol/l Aldosteron 26 % 35 % Progesteron 20 % 26 % Testosteron 22 % 30 % 17-OH-Progesteron konc. > 6 nmol/l konc. < 6 nmol/l 30 % 1,8 nmol/l 40 % 2,4 nmol/l DHEA-sulfát 21 % - TBG 17 % - Strana 25 ze 27
E2 - Endokrinologie 2 Zkouška Feritin 24 % LH 15 % FSH 15 % Prolaktin konc. > 110 mu/l 16 % konc. < 110 mu/l 17,6 mu/l Inzulin 20 % Kyselina listová 27 % Vitamin B 12 20 % hgh konc. > 8,1 mu/l konc. < 8,1 mu/l 26 % 2,11 mu/l IGF-1 22 % Renin 20 % Aktivita reninu 45 % IGF-BP3 20 % TM - Tumorové markery Zkouška CA 125 17 % CA 15-3 18 % CA 19-9 20 % CA 72-4 konc. > 3 ku/l 20 % 0,6 ku/l 15 % 0,195 µg/l konc. < 3 ku/l CYFRA 21-1 konc. > 1,3 µg/l konc. < 1,3 µg/l AFP 20 % hcg 18 % CEA 16 % TPS konc. > 60 U/l konc. < 60 U/l 15 % 9 U/l PSA celkový 15 % NSE konc. > 12,5 µg/l konc. < 12,5 µg/l 22 % 2,75 µg/l SCCA konc. > 3 µg/l konc. < 3 µg/l 23 % 0,7 µg/l TPA konc. > 50 U/l konc. < 50 U/l 25 % 12,5 U/l PSA volný konc. > 1,25 µg/l konc. < 1,25 µg/l 16 % 0,2 µg/l S-100 20 % Strana 26 ze 27