Laboratórne cvičenie č. 6 Dátum: 24.04.2015 Meno: Katarína Zdráhalová Téma: Bielkoviny Spolupracovníci: Filip Kubus Úlohy: 1. Dôkaz bielkovín vo vaječnom bielku Pomôcky: kadička, lyžička, skúmavky, držiak na skúmavky, plynový kahan, stojan na skúmavky, varič Chemikálie: vajcový bielok, vodný roztok modrej skalice (CuSO 4. 5H 2 O, w= 30%), etanol ( CH 3 CH 2 OH, w=96%) Postup práce z vajca oddelíme vajcový bielok a rozpustíme ho v kadičke v 100 cm 3 vody do troch pripravených skúmaviek nalejeme malé množstvo vajcového bielka do jednej skúmavky následne pridáme vodný roztok modrej skalice, do druhej etanol a tretiu skúmavku budeme jemne zahrievať nad plynovým kahanom pozorujeme zmeny v skúmavkách Aparatúra -> skúmavky s obsahom vajcového bielka Modrá skalica etanol zahrievanie -> pridané chemikálie Záver a vysvetlenie : V prvej skúmavke sa reakciou vajcového bielku a modrej skalice vytvorila bielo-modrá zrazenina, v dôsledku reakcie bielkoviny na soli ťažkých kovov( v našom prípade išlo o CuSO 4 ). V druhej skúmavke sa reakciou vajcového bielku a etanolu vytvorila biela zrazenina, v dôsledku reakcie bielkoviny na soli ťažkých kovov(v našom prípade išlo o etanol, kt. zabezpečuje taktiež vratne zrážanie bielkoviny. Zahriatím tretej skúmavky sa z vajcového bielka vytvorila taktiež biela zrazenina v dôsledku denaturácie, kt. mení štruktúru bielkoviny a tie strácajú svoju funkciu v organizme. Fotodokumentácia:
Skúmavky, roztok modrej skalice (naľavo) a vajcový bielok (napravo) bielka zahrievanie vajcového vzniknuté zrazeniny reakcie vajcového bielka
2. Izolácia bielkovín z mlieka Pomôcky: dve kadičky, stojan, železný kruh, filtračný papier, filtračný lievik, varič Chemikálie: mlieko, roztok kyseliny octovej( CH 3 COOH, w=8%) Postup práce: do kadičky nalejeme asi 50 cm 3 mlieka, do kt. prikvapneme roztok kyseliny octovej následne kadičku položíme na varič a pozorujeme zmeny v mlieku po chvíľkovom zahriatí mlieko vylejeme postupne do filtračného papiera, kt. sa nachádza vo filtračnom lieviku a pozorujeme filtrovanie vzniknutej tuhej látky Aparatúra: Záver a vysvetlenie: pridaním roztoku kyseliny octovej do mlieka sme pripravili tzv. kyslé mlieko. Jeho následným zahriatím sa v mlieku vytvorila zrazenina-tvaroh, kt. sa po preliatí do filtračného lievika prilepil na filtračný papier. Fotodokumentácia : -> zahrievanie mlieka s roztokom kyseliny octovej -> zvyšky zrazeniny (tvarohu) na filtračnom papieri
3. Xantoproteinová reakcia Pomôcky: skúmavka, plynový kahan, držiak na skúmavky Chemikálie: vajcový bielok, koncentrovaná kyselina dusičná (HNO 3 Postup práce: Do skúmavky nalejeme vajcový bielok a následne pridáme koncentrovanú kyselinu dusičnú (HNO 3 ) Skúmavku jemne zohrievame nad plameňom a pozorujeme reakciu vajcového bielku Xantoproteinová Reakcia: Vajcový bielok + HNO 3 + t -> žltobiele sfarbenie Záver a vysvetlenie: Prebehnutím xantoproteinovej reakcie vzniklo žltobielesfarbenie vajcového bielku a jeho konzistencia sa zmenila z kvapalnej na pevnú, čím sa dokázala prítomnosť bielkovín vo vajcovom roztoku. Fotodokumentácia: -> vzniknutá žltobiela zrazenina 4. Biuretová reakcia: Pomôcky: skúmavka, plynový kahan, držiak na skúmavky Chemikálie: vajcový bielok, roztok modrej skalice (CuSO 4, w=1%), roztok KOH (w= 20%) Postup práce: Do skúmavky nalejeme vajcový bielok a následne do nej pridáme aj roztok modrej skalice a roztok KOH Skúmavku budeme následne zohrievať nad plameňom a pozorovať danú reakciu Biuretová reakcia: Vajcový bielok + KOH + CuSO 4 + t -> fialová zrazenina Záver a vysvetlenie: Zmiešaním vajcového bielku, roztoku KOH a roztoku modrej skalice sa daný roztok farebne zmenil na modro a jeho zahriatím sa v ňom vytvorila fialová zrazenina. Fotodokumentácia:
-> zmiešaný roztok KOH, vajcového bielka a CuSO 4 -> vytvorená zrazenina po zahriati roztoku Záver: Na laboratórnom cvičení sme dokázali prítomnosť bielkovín vo vajcovom bielku( úloha1. a úloha3.), izoláciu bielkovín od mlieka(úloha2.) a taktiež biuretovú reakciu bielkovín.