BIOLÉČIVA JAKÝ JE JEJICH SKUTEČNÝ POTENCIÁL? ZUZANA CHRASTILOVÁ a,b, MARTINA MACKOVÁ a, JAN ŠOTOLA b a VLADIMÍR. Obsah
|
|
- Stanislava Alexandra Doležalová
- před 10 lety
- Počet zobrazení:
Transkript
1 BIOLÉČIVA JAKÝ JE JEJICH SKUTEČNÝ POTENCIÁL? ZUZANA CHRASTILOVÁ a,b, MARTINA MACKOVÁ a, JAN ŠOTOLA b a VLADIMÍR KRÁL a,b a Vysoká škola chemicko-technologická v Praze, Technická 3, Praha 6, b Zentiva a.s. Praha, U Kabelovny 130, Praha 10 Došlo , přijato Klíčová slova: bioléčiva, biofarmaceutika, terapeutické proteiny, produkce bioléčiv Obsah 1. Úvod 2. Současný vývoj farmaceutického průmyslu aneb stanou se bioléčiva jeho nezbytnou součástí? 3. Oblasti terapeutického využití bioléčiv 4. Nové technologické přístupy pro produkci bioléčiv 4.1. Produkce v bakteriích 4.2. Produkce v kvasinkách 4.3. Produkce v hmyzích buňkách s použitím bakulovirových vektorů 4.4. Produkce v savčích buňkách 4.5. Produkce v transgenních zvířatech 4.6. Produkce v transgenních rostlinách a rostlinných tkáňových kulturách 5. Cesty zdokonalení terapeutických vlastností bioléčiv 6. Biosimilars nová generace bioléčiv 7. Závěr 1. Úvod Bioléčiva neboli biofarmaceutika nesporně zaujímají významné místo mezi prodávanými léčivy. Na rozdíl od klasických nízkomolekulárních léčiv zahrnují bioléčiva molekuly s velkou molekulovou hmotností (protilátky až 150 kda). Mezi biofarmaceutika patří rozličné peptidy (např. insulin pro léčbu diabetes mellitus), proteiny (např. srážecí faktor VIII pro léčbu hemofilie, interferon β pro léčbu roztroušené sklerózy atd.) i velké molekuly protilátek (např. protilátka proti receptoru CD-20 pro léčbu rakoviny lymfatického systému tzv. non-hodgkin lymfomu). V některých případech bioléčiva dokonce představují jedinou účinnou terapii. Například dříve neléčitelné nemoci, jako je nanismus nebo neplodnost, mohou být nyní úspěšně léčeny pomocí biofarmaceutik. Terapeutické proteiny navíc mohou být upraveny tak, aby měly optimální farmakologické vlastnosti. V posledních dvaceti letech byl zaznamenán neobyčejný nárůst produkce v biofarmaceutickém průmyslu založeném na vývoji rekombinantní DNA a hybridních technologiích. Rozsah a kvalita proteinů vhodných pro klinické využití byla dříve limitována závislostí na extrakci z přírodních zdrojů. Rekombinantní DNA technologie umožnily masovou produkci širokého spektra přírodních a modifikovaných proteinů. Navíc hybridní technologie zavedly přípravu nové třídy proteinů monoklonálních protilátek které poskytují alternativní přístup k léčbě mnoha onemocnění. První rekombinantní proteiny nahrazovaly existující proteiny, které byly izolovány z přírodních zdrojů, jako je např. krev nebo hypofýza. Prvním schváleným rekombinantním proteinem byl v roce 1982 insulin. Následoval lidský růstový hormon a srážecí faktor VIII. V některých případech byl výzkum a následná rekombinantní produkce bioléčiv také motivovány bezpečností spojenou s izolací požadovaných látek z přírodních zdrojů. V roce 1980 se objevila obava, že růstový hormon izolovaný z lidské hypofýzy může přenášet prionové částice způsobující Creutzfeld-Jacobovu nemoc, což vedlo k přípravě geneticky modifikovaných bakterií Escherichia coli produkujících lidský růstový hormon. Rekombinantní technologie také umožnily produkci virových vakcin, např. proti hepatitidě B, aniž by bylo potřeba při výrobě pracovat s nebezpečným virem 1. Významný podíl aplikací je v oblasti terapie rakoviny, další pak zahrnují léčbu imunitních a infekčních onemocnění. Počet schválených produktů stabilně roste. V roce 2000 bylo schváleno 84 biofarmaceutik v Evropě a USA, zatímco v roce 2003 to bylo již 148 (cit. 1 ). V roce 2006 tento počet narůstá až na 165 schválených bioléčiv Současný vývoj farmaceutického průmyslu aneb stanou se bioléčiva jeho nezbytnou součástí? Farmaceutický trh zaznamenává postupné vytěsňování klasických nízkomolekulárních léčiv velkými molekulami bioléčiv. Analýza společnosti Datamonitor ukazuje, že globální prodej bioléčiv v roce 2004 padesáti šesti top farmaceutickými a biotechnologickými firmami dosáhl 56,2 mld USD, což je oproti roku 2003 nárůst o 18,3 %. Z toho 20,2 mld USD zahrnoval prodej šesti klíčových tříd produktů: insulin, lidský růstový faktor, faktor stimulující kolonie (CSF), epoetin, interferon α a interferon β. Zatímco nejprodávanějšími produkty v minulosti byly epoetin a insulin, v budoucnu to budou monoklonální protilátky a terapeutické vakciny 3. Podle analýzy společnosti Datamonitor trh s terapeutickými proteiny nadále poroste. 25
2 světový prodej léčiv, mld USD Světový prodej léčiv, miliardy USD Rok rok Poruchy poruchy centrální centrální nervové nervové soustavy soustavy respirační 4 % Respirační 4% onemocnění onemocnění poruchy Poruchy 4 % 4% Ostatní ostatní reprodukce 7% 7 % Onkologie onkologie 5 % 5% 30% % infekční Infekční onemocnění 6 % 6% kardiovaskulární Kardiovaskulární onemocnění 7 % 7% Nahrazení nahrazení chybějícího hormonu / /enzymu enzymu 11 % 11% Autoimunitní Diabetes autoimunitní diabetes mellitus onemocnění 11% % 15% % Obr. 1. Světový prodej bioléčiv ve srovnání s prodejem ostatních léčiv 4 ;! světový prodej nízkomolekulárních léčiv, světový prodej bioléčiv Obr. 2. Hlavní oblasti terapeutického využití bioléčiv 21 V roce 2010 by se měl téměř zdvojnásobit a dosáhnout tak 105 mld USD (cit. 4 ) (obr. 1). Monoklonální protilátky představují největší a nejrychleji se rozvíjející skupinu biofarmaceutik, která zahrnuje široké spektrum aplikací (léčbu rakoviny, poruchy imunitního systému a některé infekční nemoci). V roce 1995 monoklonální protilátky představovaly 1 % biofarmaceutického trhu, 14 % v roce 2001 a 22 % v roce Odhaduje se, že prodej monoklonálních protilátek ročně poroste o 17,2 % do roku 2010 a zvýší se tak z 3,6 mld USD v roce 2002 na 7,9 mld USD v roce 2006 a 12,1 mld USD v roce 2010 (cit. 3 ). 3. Oblasti terapeutického využití bioléčiv Významný podíl aplikací bioléčiv je v oblasti rakoviny (např. rakovina lymfatického systému tzv. non- Hodgkin lymfomu, rakovina prsu, rakovina tlustého střeva, leukémie), dále zahrnují léčbu autoimunitních onemocnění (např. roztroušená skleróza, revmatoidní arthritida, Crohnova nemoc, psoriáza), léčbu diabetes mellitus, anémie, nahrazení chybějícího proteinu (např. lidského růstového hormonu) a další. Hlavní oblasti terapeutického využití jsou shrnuty na obr. 2. Podstatnou část mezi prodávanými bioléčivy zahrnuje prodej insulinu, lidského růstového hormonu, erythropoetinu, faktoru stimulujícího kolonie (CSF), interferonu α a interferonu β (cit. 4 ). Vedle nich zaujímají důležitou oblast monoklonální protilátky. V tabulce I jsou shrnuty nejčastěji používané terapeutické proteiny a oblasti jejich terapeutického využití. 4. Nové technologické přístupy pro produkci bioléčiv Původně byly proteiny s terapeutickým účinkem získávány z přírodních zdrojů, např. srážecí faktory a lidský sérový albumin z lidské krevní plasmy, insulin ze slinivky prasete, lidský růstový hormon z lidské hypofýzy (postmortem) a glukocerebrosidasa z lidské placenty. Jak již bylo zmíněno v úvodu, přírodní zdroje s sebou nesou určitá rizika, jako je přenos prionových částic prostřednic- Tabulka I Klíčové produkty na biofarmaceutickém trhu Produkt Insulin Lidský růstový hormon Erythropoetin Kolonie stimulující faktor (CSF) Interferon α Interferon β Monoklonální protilátky Indikace léčba diabetes mellitus léčba nedostatku růstového hormonu (nanismu) léčba anémie při léčbě autologních transplantací kostní dřeně, při léčbě toxických stavů leukocytů po chemoterapiích aj. léčba některých typů leukémie, Kaposiho sarkomu, hepatitidy aj. léčba roztroušené sklerózy léčba rakoviny, autoimunitních onemocnění, prevence odmítnutí transplantovaných orgánů aj. 26
3 buněčná kultura genový konstrukt vložení genu do buněk podání bioléčiva pacientovi produkce bioléčiva buněčnou kulturou v bioreaktoru purifikace a příprava finálního produktu získává poměrně obtížně (purifikace zahrnuje denaturaci a renaturaci) a tato cesta je i finančně náročná 6. Bakteriální buňky nicméně představují výhodný expresní systém pro proteiny nevyžadující posttranslační modifikace (viz tab. II). V bakteriích E. coli je exprimován lidský insulin nebo jeho analogy pro léčbu cukrovky (Humulin, Humalog, Lantus, Exubera ), lidský růstový hormon pro léčbu nanismu (Protropin, Humatrope, Nutropin, Norditropin, Genotropin, Omnitrope ), parathyroidní hormon pro léčbu osteoporózy (Forteo ), interferon α pro léčbu leukémie a hepatitidy C (Intron A, Peg- Intron, Pegasys ), interferon β pro léčbu roztroušené sklerózy (Betaseron ), faktor stimulující kolonie granulocytů (G-CSF) používaný při chemoterapiích (Neupogen, Neulasta ). E. coli je také běžně používaným expresním systémem pro produkci fragmentů protilátek Produkce v kvasinkách Obr. 3. Schéma přípravy bioléčiv tvím hypofýzy nebo jiné, např. virové kontaminace. Genové inženýrství kromě zamezení těchto problémů navíc přináší možnosti úpravy proteinů na míru tak, aby byly optimalizovány i jejich farmakologické vlastnosti. Z těchto důvodů se produkce terapeutických proteinů přesunula k rekombinantním expresním systémům. Nejčastěji používanými expresními systémy jsou bakterie, kvasinky, hmyzí buňky, savčí buňky a v poslední době se studuje i možnost využití rostlinných buněk pro expresi proteinů. Schéma přípravy bioléčiv je na obr. 3. Většina terapeutických proteinů jsou glykoproteiny, které pro správnou biologickou aktivitu vyžadují N-glykosylace, jež probíhají jako posttranslační modifikace u eukaryot. Mezi různými expresními systémy existují podstatné rozdíly v posttranslačních modifikacích. Např. v bakteriích glykosylace neprobíhá vůbec, proto se nehodí pro produkci glykoproteinů Produkce v bakteriích Exprese rekombinantních proteinů v bakteriálních buňkách (nejčastěji v bakteriích Escherichia coli) zpravidla umožňuje získání velkého množství požadovaného produktu. Výhodou bakterií je rychlý růst v poměrně levném médiu, který vede k vysokému výtěžku. Obecné metody produkce v těchto buňkách zahrnují přímou intracelulární expresi, sekreci proteinu do periplasmatického prostoru a expresi fúzních proteinů zajišťujících lokalizaci produktu buď v cytoplasmě, nebo v membráně hostitelské buňky 5. Bakterie neumí produkovat proteiny, které vyžadují posttranslační modifikace pro jejich biologickou aktivitu, jako jsou např. glykosylace. Další nevýhodou bakteriální exprese je to, že proteiny jsou často exprimovány ve formě inkluzních tělísek, z kterých se biologicky aktivní protein Produkce proteinů v kvasinkách nabízí několik výhod. Je to rychlá a jednoduchá produkce s vysokým výtěžkem (který je ale nižší než v bakteriích), nízká cena kultivačního média a v neposlední řadě existence posttranslačních modifikací, jako je N-glykosylace 6,8. Rekombinantní proteiny mohou být produkovány intracelulárně nebo může být upravena sekreční dráha tak, aby byly proteiny sekretovány do média 6, což značně usnadňuje purifikaci proteinu. Jako kvasinkový expresní systém se zpravidla používá Saccharomyces cerevisiae a Pichia pastoris. Nevýhodou kvasinek je odlišná glykosylace od savčích buněk, která tak potenciálně může způsobit i nežádoucí imunogenitu produkovaných proteinů. Přítomnost mannosy specifického cukru kvasinek limituje využití kvasinkového expresního systému pro produkci proteinů, které N-glykosylace nevyžadují 8. Kvasinkový expresní systém Saccharomyces cerevisiae je používán pro produkci několika terapeutických proteinů (viz tab. II), jako je lidský insulin a jeho analogy pro léčbu cukrovky (Novolin, NovoLog ), lidský růstový hormon pro léčbu nanismu (Valtropin ), faktor stimulující kolonie granulocyrů a makrofágů (GM-CSF) používaný při chemoterapiích (Leukine ) a další. Inženýrství glykosylace kvasinek Pichia pastoris zaznamenalo v poslední době veliký pokrok. U kvasinek Pichia pastoris byla docílena eliminace syntézy nežádoucích cukrů během glykosylace a ukázalo se, že kvasinky mohou být upraveny tak, aby jejich glykosylace byly velmi podobné glykosylacím lidských proteinů 8. Choi a spol. 9 docílili humanizaci glykanů v kvasinkách Pichia pastoris tak, že inaktivovali gen pro α-1,6-mannosyltransferasu a naopak aktivovali gen pro α-1,2-mannosidasu a β-1,2-n-acetylglukosaminyltransferasu. Upravená kvasinka Pichia pastoris tak poskytuje knihovnu individuálních kmenů k produkci proteinů se specifickými humánními glykoformami s vysokým stupněm homogenity 8. Např. byl použit panel navržených Pichia pastoris k produkci různých glykoforem monoklonální protilátky se stejnou aminokyselinovou sekvencí jako má komerční 27
4 Tabulka II Výběr bioléčiv schválených v Evropě a USA Produkt Protein Oblast terapie Expresní systém Schváleno v roce Firma uvádějící produkt na trh Humulin lidský insulin diabetes mellitus E. coli 1982 Eli Lilly Protropin lidský růstový hormon nedostatek růstového hormonu E. coli 1985 Genetech (Somatrem) Intron A interferon α-2b některé typy leukémie, Kaposiho sarkom, hepatitida C aj. E. coli 1986 Schering-Plough Humatrope lidský růstový hormon nedostatek růstového hormonu E. coli 1987 Eli Lilly Epogen (Epoetin-α) erythropoetin α anémie CHO 1989 Amgen Procrit erythropoetin α anémie CHO 1990 Ortho Biotech / J&J (Epoetin-α) Novolin lidský insulin diabetes mellitus S. cerevisiae 1991 Novo Nordisk Neupogen (Filgrastim) Leukine (Sargramostim) faktor stimulující kolonie granulocytů (G-CSF) faktor stimulující kolonie granulocytů a makrofágů (GM- CSF), jedna mutace neutropenie indukovaná chemoterapií E. coli 1991 Amgen autologní transplantace kostrní dřeně, toxické stavy leukocytů po chemoterapiích, chemoterapie aj. S. cerevisiae 1991 Berlex Nutropin lidský růstový hormon nedostatek růstového hormonu E. coli 1993 Genetech Betaseron interferon β-1b roztroušená skleróza E. coli 1993 Berlex / Chiron Cerezyme (Imiglucerase) β-glukocerebrosidasa Gaucherova choroba typu 1 CHO 1994 Genzyme ReoPro (Abciximab) chimerický Fab fragment protilátky proti receptoru fibrinogenu na krevních destičkách snížení nebezpečí tvorby trombů u pacientů léčených angioplastikou a při koronárních operacích myší linie Sp2/ Eli Lilly / Centocor / J&J Norditropin lidský růstový hormon nedostatek růstového hormonu E. coli 1995 Novo Nordisk Genotropin lidský růstový hormon nedostatek růstového hormonu E. coli 1995 Pfizer/Pharmacia Humalog analog lidského insulinu diabetes mellitus E. coli 1996 Eli Lilly (Insulin Lispro) Avonex interferon β-1a roztroušená skleróza CHO 1996 Biogen Idec Retavase (Reteplase) neglykosylovaná mutantní forma lidského tkáňového aktivátoru plasminogenu trombolýza E. coli 1996 Centocor / J&J 28
5 Tabulka II Pokračování Produkt Protein Oblast terapie Expresní systém Schváleno v roce Firma uvádějící produkt na trh Gonal-F (Follitropin-α) folliotropin α (folikuly stimulující hormon) neplodnost CHO 1997 Serono BeneFIX faktor IX hemofílie CHO 1997 Genetics Institute / Wyeth Pharmaceuticals Rituxan (Rituximab) chimerická protilátka proti receptoru CD20 na B-buňkách Simulect (Basiliximab) Synagis (Palivizumab) Remicade (Infliximab) Herceptin (Trastuzumab) chimerická protilátka proti receptoru IL-2 humanizovaná protilátka proti fúznímu proteinu RSV (Respiratory Syncytial Virus) chimerická protilátka proti TNF α (Tumor Necrosis Factor α) humanizovaná protilátka proti HER-2 receptoru Enbrel (Etanercep) vázající doména TNF (Tumor Necrosis Factor) receptoru fúzovaná s Fc fragmentem lidských IgG1 Lantus (Insulin glargine) NovoLog (Insulin Aspart) ReFacto (Moroctocog-α) Mylotarg (Gemtuzumab Ozogamicin) Peg-Intron (Peginterferon α-2b) Humira (Adalimumab) analog lidského insulinu (sekvence je na 3 místech odlišná od nativního insulinu) analog lidského insulinu (mutace aminokyseliny v pozici 28) rakovina lymfatického systému (Non-Hodgkin lymfom) prevence odmítnutí transplantovaných orgánů prevence vážných onemocnění nižších dýchacích cest rizikových pediatrických pacientů Chrohnova nemoc, revmatoidní arthritida CHO 1997 Genetech / Biogen Idec myší linie NS0 myší linie NS0 Myší linie Sp2/ Novartis 1998 Medimmune 1998 Centocor / J&J rakovina prsu CHO 1998 Genetech revmatoidní arthritida a další autoimunitní nemoci jako psoriasis, spondylitis diabetes mellitus 2. typu E. coli CHO 1998 Amgeb / Wyeth 2000 Aventis diabetes mellitus S. cerevisiae 2000 Novo Nordisk faktor VIII hemofílie CHO 1999 Genetics Institute / Wyeth Pharmaceuticals humanizovaná protilátka proti CD33 konjugovaná s chemoterapeutikem calicheamicinem akutní myeloidní leukémie myší linie NS Wyeth / Celtech pegylovaný interferon α-2b hepatitida C E. coli 2001 Schering-Plough / Enzon lidská protilátka proti TNF α (Tumor Necrosis Factor α) připravená technikou fágového displeje revmatoidní arthritida CHO 2001 Abbot Laboratoires / Cambridge Antibody Technologies 29
6 Tabulka II Pokračování Produkt Protein Oblast terapie Expresní systém Schváleno v roce Firma uvádějící produkt na trh Forteo (Teriparatide) parathyroidní hormon osteoporóza E. coli 2002 Eli Lilly Aranesp (Darbepoetin-α) Neulasta (Pegfilgrastim) mutantní erythropoetin anémie CHO 2002 Amgen pegylovaný faktor stimulující kolonie granulocytů (G-CSF) neutropenie při chemoterapiích E. coli 2002 Amgen Rebif interferon β-1a roztroušená skleróza CHO 2002 Serono / Pfizer Pegasys (Peginterferon α-2a) pegylovaný interferon α-2b hepatitida C E. coli 2002 Hoffmann-La Roche Zevalin (Ibritumomab Tiuxetan) Somavert (Pegvisomant) myší protilátka proti CD20 konjugovaná s radioaktivním Y 90 mutantní somatotropin s aktivitou antagonisty somatotropinu kovalentně vázaný na polyethylenglykol Xolair (Omalizumab) humanizovaná protilátka proti lidským IgE Bexxar (Tositumomab) rakovina lymfatického systému (Non-Hodgkin lymfom) akromegalie (chorobné zvětšení okrajových částí těla) u pacientů po chirurgických zákrocích, po radioterapii myší protilátka proti CD20 rakovina lymfatického systému konjugovaná s radioaktivním I 131 (Non-Hodgkin lymfom) Erbitux (Cetuximab) chimerická protilátka proti receptoru EGF (Epidermal Growth Factor) Avastin (Bevacizumab) humanizovaná protilátka proti VEGF (Vascular Endothelial Growth Factor) Exubera analog lidského insulinu (inhalovatelný) Valtropin Omnitrope CHO 2002 Biogen Idec E. coli 2002 Pfizer/Pharmacia astma CHO 2003 Genetech / Novartis / Tanox hybridomy 2003 GSK / Corixa rakovina tlustého střeva hybridomy 2004 ImClone / Bristol Myers Squibb rakovina tlustého střeva CHO 2004 Genetech diabetes mellitus E. coli 2006 Pfizer / Aventis lidský růstový hormon nedostatek růstového hormonu S. cerevisiae 2006 Biopartners lidský růstový hormon nedostatek růstového hormonu E. coli 2006 Sandoz 30
7 protilátka Rituxan (proti receptoru CD-20), která se využívá k léčbě rakoviny lymfatického systému tzv. non- Hodgkin lymfomu Produkce v hmyzích buň kách s použitím bakulovirových vektorů Hmyzí buňky patří mezi účinné expresní systémy pro produkci glykoproteinů, zahrnující i monoklonální protilátky 8. Bakulovirový expresní systém je eukaryotický, jelikož exprese probíhá v hmyzích buňkách. Hmyzí buňky jsou tedy schopné posttranslačních modifikací, jako jsou glykosylace 5,8. Na rozdíl od bakterií, kde zůstávají produkované proteiny většinou nerozpustné, jsou rekombinantní proteiny produkované v hmyzích buňkách rozpustné. Další výhodou je velikost virového genomu (~130 kbp), což umožňuje vložení delšího úseku cizorodé DNA (cit. 5,11 ). Kultivace hmyzích buněk není tak drahá jako kultivace savčích buněk. Na rozdíl od savčích buněk hmyzí buňky nevyžadují zvýšený obsah CO 2 v atmosféře a pro jejich kultivaci tedy není zapotřebí drahý CO 2 inkubátor 5. Nevýhodou proteinů produkovaných v hmyzích buňkách je rozdílný typ glykosylace od glykosylace lidských proteinů. Možnost přítomnosti nehumánní α-1,3-fukosy (zaleží na hmyzím druhu) může zvýšit imunogenitu proteinu. Hmyzí buňky navíc nejsou vhodné pro expresi glykoproteinů, u nichž je požadována dlouhá doba přítomnosti v séru, jelikož N-glykany hmyzích buněk jsou rychle eliminovány z organismu 8. Příkladem terapeutických proteinů produkovaných hmyzími buňkami je erythropoetin 12 nebo různé monoklonální protilátky Produkce v savč ích buň kách Nejčastěji používanou linií savčích buněk pro produkci terapeutických glykoproteinů jsou buněčné linie Chinese Hamster Ovary (CHO). Dále se pak používají myší buňky NS0 a Sp2/0 (cit. 14 ). Savčí buňky jsou preferovány z několika hledisek, z nichž nejdůležitější je produkce proteinů s N-glykany, které jsou velmi podobné lidským 8. Vedle výše uvedených výhod má exprese proteinů v savčích buňkách také řadu nevýhod. Jsou zde kladeny vysoké nároky na sterilitu, jejíž porušení se projeví mnohem výrazněji než při kultivaci mikrobiálních buněk. Růst kontaminace je také podporován složením velmi bohatých médií. Zásadním nedostatkem použití savčích buněk je finanční náročnost spojená s jejich kultivací. Ta je odvozena především od vysoké ceny složek médií a enormní spotřebou sterilního plastového materiálu 5. Drahá je i následná purifikace terapeutického proteinu. Savčí buňky mohou také přenášet infekční částice, jako jsou viry nebo priony. Nevýhodou je také dlouhá doba potřebná k vytvoření produkční linie a obtížnost kontrolovat odpovídajícím způsobem N-glykosylace 8. CHO buňky jsou použitelné pro expresi glykoproteinů obsahujících kyselinu sialovou. Nicméně některé proteiny vyžadují glykoformy bez kyseliny sialové. Toho se dá docílit úpravou in vitro 8. Další problém může představovat přítomnost fukosylovaných glykanových struktur u monoklonálních protilátek produkovaných CHO buňkami. Odstranění fukosy vede ke zlepšení funkce protilátek. To bylo dosaženo některými vědeckými skupinami, jež připravily buněčné linie, které proteiny nefukosylují a produkují protilátky s vyšší ADCC aktivitou (buněčná cytotoxicita závislá na protilátkách) 8. V CHO je produkována řada terapeutických proteinů (viz tab. II), např. srážecí faktor VIII pro léčbu hemofilie (ReFacto ), srážecí faktor IX pro léčbu hemofilie (BeneFIX ), erythropoetin a jeho analogy pro léčbu anémie (Epogen, Procrit, Aranesp ), interferon β pro léčbu roztroušené sklerózy (Avonex, Rebif ), tkáňový aktivátor plasminogenu nebo jeho analogy pro léčbu trombolýzy (Retavase ), β-glukocerebrosidasa pro léčbu Gaucherovy nemoci (Cerezyme ) a řada monoklonálních protilátek, např. pro léčbu rakoviny lymfatického systému tzv. non- Hodgkin lymfomu (Rituxan, Zevalin ), pro léčbu rakoviny prsu (Herceptin ), pro léčbu rakoviny tlustého střeva (Avastin ), pro léčbu autoimunitních onemocnění (Enbrel, Humira, Raptiva ) nebo pro zmírnění astmatu (Xolair ). V buňkách myších linií NS0 jsou produkovány např. monoklonální protilátky (viz tab. II) pro prevenci odmítnutí transplantovaných orgánů (Simulect ), pro prevenci onemocnění dýchacích cest (Synagis ) a pro léčbu akutní myeloidní leukémie (Mylotarg ). V myších buňkách Sp2/0 jsou exprimovány monoklonální protilátky (viz tab. II) pro snížení nebezpečí tvorby trombů (ReoPro ) nebo pro léčbu autoimunitních onemocnění (Remicade ) Produkce v transgenních zvíř atech V poslední době se pozornost obrací k transgenním zvířatům jako alternativním expresním systémům. Některé glykoproteiny, např. monoklonální protilátky, již v těchto systémech byly exprimovány 8. Proteiny produkované transgenními živočichy obsahují více mannosy a glykany s nižším obsahem kyseliny sialové ve srovnání s lidskými glykoproteiny. To může omezit produkci proteinů, u kterých je vyžadována dlouhá doba přítomnosti v séru 8. Byla připravena transgenní myš produkující lidské monoklonální protilátky 15. Van Berkel a spol. 16 studovali možnost produkce rekombinantního lidského laktoferrinu v mléce transgenní krávy. Roku 2005 bylo docíleno produkce monoklonálních protilátek v kuřeti a jejich sekrece do vajec 17. Přes veškeré úspěchy je průmyslová produkce terapeutických proteinů transgenními zvířaty prozatím budoucností. 31
8 4.6. Produkce v transgenních rostlinách a rostlinných tkáň ových kulturách Transgenní rostliny pro produkci terapeutických glykoproteinů představují v současnosti důležitou oblast výzkumu. Rostliny jsou jako expresní systémy velkým a slibným potenciálem pro produkci monoklonálních protilátek, ale i dalších glykoproteinů 8. Rostliny mohou být kultivovány jako tkáňové kultury na aseptickém agarovém nebo tekutém médiu, jako protoplasty (tzn. bez buněčné stěny) a v neposlední řadě mohou být regenerovány v celou rostlinu, která již může být pěstována i v nesterilní půdě. V závislosti na zvolení signální sekvence lze ovlivnit lokalizaci rekombinantního proteinu. Protein může být asociován s cytoplasmatickou membránou nebo může být sekretován do média. Velkou výhodou rostlinné produkce proteinů jsou velké výtěžky za relativně nízkou cenu 18. Hlavní limitace rostlin jako expresních systémů je produkce nehumánních glykanových struktur. Rostlinné glykoproteiny postrádají galaktosu a sialovou kyselinu a navíc obsahují imunogenní cukry β-1,2-xylosu a α-1,3- -fukosu. Potenciální alergická reakce k těmto cukrům může značně omezit vývoj transgenních rostlin pro produkci terapeutických proteinů. V této souvislosti byly zaznamenány snahy humanizace rostlinných N-glykanů. Na rostlinné glykoproteiny se dají enzymově připojit chybějící cukry (tzn. galaktosa a kyselina sialová) a naopak odstranit ty nežádoucí (tzn. β-1,2-xylosa a α-1,3-fukosa) 8. Strasser a spol. 19 připravili transgenní rostliny Arabidopsis thalina s pozměněnou dráhou glykosylace, přičemž tyto rostliny produkují glykoproteiny blízké lidským tzn. bez β-1,2- -xylosy a α-1,3-fukosy. Ve 2. fázi klinických testů je protilátka CaroRX (Planet Biotechnology, Kalifornie) produkovaná rostlinami. Jedná se o hybrid monoklonální protilátky, která váže streptokokální antigen I/II, což je hlavní povrchový glykoprotein bakterie Streptococcus mutans. S. mutans způsobují bakteriální zubní kaz. Zmíněná protilátka brání bakterii, aby se mohla udržet na zubním povrchu Cesty zdokonalení terapeutických vlastností bioléčiv Kromě rekombinantních verzí přírodních proteinů je také možné připravit proteiny, které jsou upraveny s cílem modifikovat jejich vlastnosti, a to z hlediska jejich terapeutické aktivity. To znamená zvýšit jejich stabilitu, snížit rychlost eliminace látky z organismu (tzv. clearance) apod. Modifikace proteinů zahrnují substituci aminokyselin v proteinech, odstranění určitých domén, úpravu glykosylací a další. Přibližně 50 % schválených bioléčiv má modifikovanou genovou sekvenci právě z výše uvedeného hlediska 1. Existuje několik metod, jak lze upravit primární proteinovou strukturu. Jedná se např. o cílenou mutagenezi pro změnu specifické aminokyseliny proteinu. V případě insulinu bylo vyvinuto několik jeho analogů s pozměněnými aminokyselinovými sekvencemi, které ovlivňují rychlost působení hormonu. Přírodní forma insulinu existuje jako neaktivní hexamer, jenž se pomalu disociuje na aktivní monomer. Humalog a NovoLog jsou rychle působící analogy insulinu se specifickou aminokyselinou na C-konci, které omezují skládání insulinu na neaktivní hexamer. Na druhé straně Lantus je dlouho působící varianta insulinu, která pomalu disociuje z mikrokrystalického precipitátu, což má za následek dlouhotrvající účinek. Tkáňový aktivátor plasminogenu Retavase je příkladem produktu, kde byla odstraněna celá proteinová doména. Tkáňový aktivátor plasminogenu aktivuje přeměnu plasminogenu na plasmin, který štěpí fibrin, a tím rozpouští trombus (krevní sraženinu). V preparátu Retavase byla odstraněna doména, která zodpovídala za rychlou eliminaci tkáňového aktivátoru, čímž se prodloužil účinek jeho působení. Dalším příkladem modifikace proteinových charakteristik je fúze genových sekvencí různých proteinů, což má za následek vznik nového proteinu s novými vlastnostmi. Takovým produktem je např. Enbrel. Jedná se o fúzní protein používaný pro léčbu revmatoidní arthritidy. Obsahuje vázající doménu TNF (faktor nekrotizující nádory) fúzovanou s Fc fragmentem lidských imunoglobulinů třídy IgG. Podstatný vliv na různé funkce proteinů, zahrnující aktivitu, dobu působení, rychlost eliminace z organismu a stabilitu, může mít glykosylace. Počet produktů, u nichž glykosylace proteinů byla modifikována s cílem ovlivnit jejich terapeutické vlastnosti, stále roste. Příkladem takového produktu je Aranesp (varianta erythropoetinu pro léčbu anémie) a Cerezyme (β-glukocerebrosidasa pro léčbu Gaucherovy choroby typu I). V současnosti jsou uplatňovány tři přístupy úpravy glykosylací proteinů: 1) úprava glykosylačních míst v proteinu, např. zavedení nového glykosylačního místa; 2) enzymatické modifikace glykanů in vitro; 3) genové manipulace s buněčným glykosylačním mechanismem. Pro omezení proteolytické degradace terapeutických proteinů a snížení rychlosti eliminace z organismu in vivo bývá používána metoda pegylace, což je proces, při kterém se na protein naváže polyethylenglykol. Příkladem schválených pegylovaných produktů je Pegasys (léčba hepatitidy C), Peg-Intron (léčba hepatitidy C), Neulasta (léčba neutropenie při chemoterapiích) a Somavert (léčba akromegalie). Vyvíjejí se i další pegylované proteiny, jako jsou např. pegylované fragmenty protilátek. Dalším příkladem chemických modifikací je navázání radioisotopů nebo cytotoxických léčiv k monoklonálním protilátkám, používaným zejména při léčbě rakoviny. Takovým produktem je Bexxar (léčba rakoviny lymfatického systému tzv. non-hodgkin lymfomu) monoklonální protilátka konjugovaná s radioaktivním jodem I 131, Zevalin (léčba rakoviny lymfatického systému tzv. non- 32
9 Hodgkin lymfomu) monoklonální protilátka konjugovaná s radioaktivním yridiem Y 90, a Mylotarg (léčba leukémie) monoklonální protilátka konjugovaná s chemoterapeutikem calicheamicinem. 6. Biosimilars nová generace bioléčiv Generické léky jsou ekvivalenty originálních léčivých přípravků, které mohou být uvedeny na trh po expiraci jejich patentové ochrany, obsahují stejnou účinnou látku, odpovídají stejným náročným pravidlům při vývoji, výrobě a posuzování bezpečnosti a mají stejnou kvalitu, bezpečnost a účinnost jako originální značkové léky. Hlavním významem generických ekvivalentů je jejich nižší cena ve srovnání s originálními léčivy, čímž je zvýšena dostupnost těchto moderních léků. Hlavním důvodem nižší ceny je především nižší náročnost na testování těchto léčiv, neboť není třeba opakovat všechny preklinické a klinické zkoušky, ale je možné se odkázat na klinická data originálního produktu. Vedle generických léčiv se na trhu začínají objevovat tzv. biosimilars, které jsou jejich obdobou a vychází ze stejného principu jako generická léčiva. Biosimilars jsou účinná biofarmaceutika představující velké molekuly (protilátky až 150 kda) se složitou 3D strukturou a k jejich přípravě jsou používány organismy. Často se jedná o heterogenní produkty, které je obtížné kompletně charakterizovat fyzikálně-chemickými analytickými metodami, a z těchto důvodů je i často velmi obtížné deklarovat jejich vždy stejné složení a strukturu. I malá změna při výrobním procesu, např. změna v produkční buněčné linii, může způsobit potenciální variace ve vlastnostech konečného biofarmaceutického produktu. Z tohoto hlediska je asi nejzávažnějším problémem nežádoucí imunogenita, jelikož i velmi malé rozdíly v těchto molekulách mohou způsobit rozdílné reakce organismu 2,20. Tím se biosimilars liší od klasických chemických generických léčiv, u kterých není obtížné zajistit identické složení účinné látky, jako má originální produkt. Z výše uvedených hledisek vyplývá, že v současnosti nejde zajistit, aby dva různí výrobci produkovali dvě identická biofarmaceutika, přinejlepším mohou být podobná neboli bioekvivalentní. Jako bioekvivalentní můžeme označit produkty, které mají stejné kvalitativní a kvantitativní složení, tzn. že obsahují stejnou aktivní látku ve stejné farmaceutické formě, která se chová stejně i v pacientově těle (stejná absorpční rychlost, distribuce v těle, odbourávání a exkrece) 20. Do roku 2009 řadě bioléčivům expiruje jejich patentová ochrana. Několika schváleným biofarmaceutikům patent již vypršel (např. Nutropin lidský růstový hormon pro léčbu nanismu, Humulin insulin pro léčbu diabetes mellitus, Cerezyme β-glukocerebrosidasa pro léčbu Gaucherovy choroby, Intron A Interferon α-2b pro léčbu leukémie a hepatitidy C, Epogen erythropoetin α pro léčbu anémie a další). Někteří analytikové předpokládají, že až 75 schválených terapeutických proteinů se stane cílem generických společností. Prvním biosimilar je léčivo Omnitrope (lidský růstový hormon), které bylo schváleno v roce 2005 v Austrálii a v roce 2006 v Evropě a USA. Omnitrope je obdobou léku Genotropin od firmy Pfizer/Pharmacia, jehož patent již vypršel 2. Schválení Omnitropu však zároveň přineslo několik rozporů, a to především otázku, nakolik je podobný originálnímu produktu Genotropinu, zda je stejně účinný a bezpečný. Bylo nezbytné zavést novou legislativu týkající se biosimilars, která by zaručovala bezpečnost těchto nových produktů. V Evropě se touto problematikou zabývá EMEA (European Agency for the Evaluation of Medicinal Products) a v USA FDA (Food and Drug Administration). Od roku 2001 došlo k revizi legislativy týkající se farmacie. Ačkoliv v USA zůstavá legislativa prozatím nejasná, v členských státech EU v roce 2005 a 2006 bylo přijato několik dokumentů týkající se biosimilars. Tyto dokumenty jsou dostupné na internetových stránkách EMEA: Pro zajištění bezpečnosti biosimilars a jejich stejné účinnosti, jako mají originální produkty, je v oficiálních dokumentech kladen důraz na preklinické a klinické testování těchto nových bioléčiv 2,20. Evropské regulační orgány potvrdily, že akceptují principy biosimilars tím, že v dubnu 2006 schválily druhý takový produkt Valtropin (lidský růstový hormon) Závěr Bioléčiva nabízí nové možnosti pro léčbu dříve neléčitelných nebo obtížně léčitelných onemocnění. Významný podíl aplikací biofarmaceutik je v oblasti terapie rakoviny, další důležité oblasti zahrnují imunitní onemocnění a infekční onemocnění. Mezi bioléčivy zažívají obrovský rozmach monoklonální protilátky. V současné době je na trhu 165 schválených produktů a odhaduje se, že 2500 terapeutických proteinů je ve fázi výzkumu a 1600 v preklinických a klinických testech 2. Mezi nejprodávanějšími bioléčivy v současnosti zaujímají místo následující produkty (tab. II): erythropoetin pro léčbu anémie (Procrit, Epogen, Aranesp ), insulin pro léčbu diabetes mellitus (Novolin, Humulin, Humalog ), monoklonální protilátky pro léčbu autoimunitních onemocnění (Remicade, Enbrel ), faktor stimulující kolonie (CSF) používaný při chemoterapiích (Neupogen, Neulasta ), interferon α pro léčbu leukémie a hepatitidy C (Intron A ), monoklonální protilátky pro léčbu rakoviny lymfatického systému tzv. non-hodgkin lymfomu (Rituxan ) a interferon β pro léčbu roztroušené sklerózy (Avonex ). Přes nesporný přínos biofarmaceutik je nutné připomenout i jejich problémy, které zatím čekají na řešení. Jedná se především o vysokou cenu produkce a potenciální imunogenitu. Klíčem pro snížení nákladů produkce by mohly být nové levnější expresní systémy, jako jsou kvasinky, hmyzí buňky nebo rostliny, jelikož kultivace nejčastěji používaných expresních systémů savčích CHO buněk je poměrně drahou záležitostí. Snížit cenu bioléčiv 33
10 by se dalo docílit, vedle snížení nákladů kultivace v podobě levnějších expresních systémů, i zlevněním purifikačních procesů. Snaha snížit imunogenitu nových biotechnologicky připravených produktů vedla k návrhu a úpravě některých organismů (např. kvasinka Pichia pastoris 9 nebo rostlina Arabidopsis thaliana 19 ) k využití pro produkci terapeutických proteinů 8. Úpravy spočívají především v modifikaci glykosylačních drah, které zajišťují glykosylace proteinů vlastní lidským bílkovinám. Bioléčiva představují stále rozvíjející se oblast, která má nesporný pozitivní význam. Cílem farmaceutických společností by mělo být snížení jejich ceny, a tím i rozšíření jejich dostupnosti široké veřejnosti. Tato studie byla podpořena granty GA ČR 203/06/1038 a MZ NR/ Zkratky ADCC buněčná cytotoxicita závislá na protilátkách (Antibody-Dependent Cell-mediated Cytotoxicity) CHO ovariální buňky čínského křečka (Chinese Hamster Ovary) CSF faktor stimulující kolonie (Colony-Stimulating Factor) EGF epidermální růstový faktor (Epidermal Growth Factor) EMEA evropský úřad pro kontrolu léčiv (European Agency for the Evaluation of Medicinal Products) FDA americký úřad pro kontrolu potravin a léčiv (Food and Drug Administration) G-CSF faktor stimulující kolonie granulocytů GM-CSF faktor stimulující kolonie granulocytů a makrofágů (Granulocyte-Monocyte Colony-Stimulating Factor) TNF faktor nekrotizující nádory (Tumor Necrosis Factor) VEGF vaskulární endoteliální růstový faktor (Vascular Endothelial Growth Factor) LITERATURA 1. Birch J. R., Onakunle Y., v knize: Methods in Molecular Biology (Smales C. M., James D. C., ed.), sv. 308, kap. 1. Humana Press Inc., Totowa, New Jersey Walsh G.: Nat. Biotechnol. 24, 769 (2006). 3. Datamonitor Report 2002: w w w. d a t a m o n i t o r. c o m / ~71f089ad335e4c2d931ad9a22a34da04~/products/ free/report/dmhc1803/010dmhc1803.pdf, staženo 15. listopadu Belsey M. J., Hartus L. M., Das R. R., Chertkow J.: Nat. Rev. Drug Discov. 5, 535 (2006). 5. Ruml T., Rumlová M., Pačes V. (ed.): Genove inženýrství. VŠCHT, Praha Lee S. Y., Choi J. H. a Lee S. J., v knize: Methods in Molecular Biology (Smales C. M., James D. C., ed.), sv. 308, kap. 3. Humana Press Inc., Totowa, New Jersey Popplewell A. G., Sehdev M., Spitali M., Weir A. N. C., v knize: Methods in Molecular Biology (Smales C. M., James D. C., ed.), sv. 308, kap. 2. Humana Press Inc., Totowa, New Jersey Sethuraman N., Stadheim T. A.: Curr. Opin. Biotechnol. 17, 341 (2006). 9. Choi B. K., Bobrowicz P., Davidson R. C., Hamilton S. R., Kung D. H., Li H., Miele R. G., Nett J. H., Wildt S., Gerngross T. U.: Proc. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 100, 5022 (2003). 10. Li H., Sethuraman N., Stadheim T. A., Zha D., Prinz B., Ballew N., Bobrowicz P., Choi B. K., Cook W. J., Cukan M., Houston-Cummings N.R., Davidson R., Gong B., Hamilton S. R., Hoopes J. P., Jiang Y., Kim N., Mansfield R., Nett J.H., Rios S., Strawbridge R., Wildt S., Gerngross T. U.: Nat. Biotechnol. 24, 210 (2006). 11. Jin Z., Lusheng S., Yili W., v knize: Methods in Molecular Biology (Smales C. M., James D. C., ed.), sv. 308, kap. 7. Humana Press Inc., Totowa, New Jersey Kim Y. K., Shin H. S., Tomiya N., Lee Y. C., Betenbaugh M. J, Cha H. J.: Biotechnol. Bioeng. 92, 452 (2005). 13. zu Pulitz J., Kubasek W. L., Duchene M., Marget M., von Specht B. U., Domdey H.: Biotechnology (NY) 8, 651 (1990). 14. Chu L., Blumentals I., Maheswari G., v knize: Methods in Molecular Biology (Smales C. M., James D. C., ed.), sv. 308, kap. 10. Humana Press Inc., Totowa, New Jersey He Y., Honnen W. J., Krachmarov C. P., Burkhart M., Kayman S. C., Corvalan J., Pinter A.: J. Immunol. 169, 595 (2002). 16. van Berkel P. H., Welling M. M., Geerts M., van Veen H. A., Ravensbergen B., Salaheddine M., Pauwels E. K., Pieper F., Nuijens J. H. a Nibbering P. H.: Nat. Biotechnol. 20, 484 (2002). 17. Zhu L., van de Lavoir M. C., Albanese J., Beenhouwer D. O., Cardarelli P. M., Cuison S., Deng D. F., Deshpande S., Diamond J. H., Green L., Halk E. L., Heyer B. S., Kay R. M., Kerchner A., Leighton P. A., Mather C. M., Morrison S. L., Nikolov Z. L., Passmore D. B., Pradas-Monne A., Preston B. T., Rangan V. S., Shi M., Srinivasan M., White S. G., Winters-Digiacinto P., Wong S., Zhou W., Etches R. J.: Nat. Biotechnol. 23, 1159 (2005). 18. Hiatt A., Ma J. K.-C.: Int. Rev. Immunol. 10, 139 (1993). 19. Strasser R., Altmann F., Mach L., Glossl J., Steinkellner H.: FEBS Lett. 561, 132 (2004). 34
11 20. Edfjäll C.: Eur. Biotech. News 4, (2003). 21. Business Insight: special_reports/sample.cfm?reportid=193, staženo 11. prosince, Z. Chrastilová a,b, M. Macková a, J. Šotola b, and V. Král a,b ( a Institute of Chemical Technology, Prague, b Zentiva Co., Prague): Biopharmaceuticals What Is Their Real Potential? The current and future situation in the field of biopharmaceuticals is reviewed. The position of biopharmaceuticals on pharmaceutical market is still strengthening. Biopharmaceuticals cover many therapeutic areas involving treatment of cancer, autoimmune diseases, diabetes, anemia, disorders associated with lack of some proteins (e.g. human growth hormone) and others. Production of therapeutic proteins has shifted to new biotechnologies such as recombinant DNA and hybridoma technologies for production of monoclonal antibodies. Different types of expression systems suitable for production of biopharmaceuticals are described and compared. Mammalian cells, which are currently the most often used production system for glycoproteins, have several disadvantages including high production costs. This is why several cheaper expression systems are now being explored as alternatives. Yeast, plant and insect expression systems provide a new approach and potential for reduction of cost of biopharmaceuticals. The expiration of patents on original biopharmaceuticals give a chance to develop production of new drugs biosimilars. Production of biosimilars can also reduce the cost of biopharmaceuticals, but under the condition that the safety and efficiency of biosimilars are the same as those of the original products. 35
doc. RNDr. Milan Bartoš, Ph.D.
doc. RNDr. Milan Bartoš, Ph.D. Konference Klonování a geneticky modifikované organismy Parlament České republiky, Poslanecká sněmovna 7. května 2015, Praha Výroba léků rekombinantních léčiv Výroba diagnostických
Biologická léčiva. Co jsou to biosimilars a jak se vyrábějí. Michal Hojný
Biologická léčiva Co jsou to biosimilars a jak se vyrábějí Michal Hojný Zadání Jsou to opravdu generické kopie originálů? Jsou tam nějaká nebezpečí při výrobě? Jsou ty léky úplně stejné? Jak těžké je vyrobit
B lymfocyty diferenciace B lymfocytů a tvorba protilátek. Současné možnosti využití MP transplantace, alergie, autoimunita, infekční onemocnění
Využití monoklonálních protilátek v praxi B lymfocyty diferenciace B lymfocytů a tvorba protilátek Základní poznatky o MP Současné možnosti využití MP transplantace, alergie, autoimunita, infekční onemocnění
Klinický pohled na biosimilars. Prof. MUDr Vladimír Tesař, Klinika nefrologie 1.LF UK a VFN
Klinický pohled na biosimilars Prof. MUDr Vladimír Tesař, Klinika nefrologie 1.LF UK a VFN Komu z pacientů biosimilars mohou pomoci? Je možné pacienta převést z biologického léku, který dosud užíval na
MODERNÍ BIOTECHNOLOGIE A FARMACEUTICKÝ PRŮMYSL. LADISLAV CVAK a a MARTIN FUSEK b. Obsah
MODERNÍ BIOTECHNOLOGIE A FARMACEUTICKÝ PRŮMYSL LADISLAV CVAK a a MARTIN FUSEK b a IVAX Pharmaceuticals s.r.o., Ostravská 29, 747 70 Opava, b Sigma-Aldrich, s.r.o., Pobřežní 46, 186 00 Praha 8 ladislav_cvak@ivax-cr.com,
Specifická imunitní odpověd. Veřejné zdravotnictví
Specifická imunitní odpověd Veřejné zdravotnictví MHC molekuly glykoproteiny exprimovány na všech jaderných buňkách (MHC I) nebo jenom na antigen prezentujících buňkách (MHC II) u lidí označovány jako
Biosimilars - příležitost pro udržitelný vývoj
Biosimilars - příležitost pro udržitelný vývoj Mgr. Martin Mátl Výkonný ředitel ČAFF Dialogem k reformě Zruinují biologické léky zdravotnictví? 21. září 2016, NHÚ AV ČR, Praha Biologický léčivý přípravek
Protinádorová imunita. Jiří Jelínek
Protinádorová imunita Jiří Jelínek Imunitní systém vs. nádor l imunitní systém je poslední přirozený nástroj organismu jak eliminovat vlastní buňky které se vymkly kontrole l do boje proti nádorovým buňkám
Vakcíny z nádorových buněk
Protinádorové terapeutické vakcíny Vakcíny z nádorových buněk V. Vonka, ÚHKT, Praha Výhody vakcín z nádorových buněk 1.Nabízejí imunitnímu systému pacienta celé spektrum nádorových antigenů. 2. Jejich
NAŘÍZENÍ KOMISE (EU) /... ze dne , kterým se mění nařízení (ES) č. 847/2000, pokud jde o definici pojmu podobný léčivý přípravek
EVROPSKÁ KOMISE V Bruselu dne 29.5.2018 C(2018) 3193 final NAŘÍZENÍ KOMISE (EU) /... ze dne 29.5.2018, kterým se mění nařízení (ES) č. 847/2000, pokud jde o definici pojmu podobný léčivý přípravek (Text
ÚVOD DO TRANSPLANTAČNÍ IMUNOLOGIE
ÚVOD DO TRANSPLANTAČNÍ IMUNOLOGIE Základní funkce imunitního systému Chrání integritu organizmu proti škodlivinám zevního a vnitřního původu: chrání organizmus proti patogenním mikroorganizmům a jejich
PRAKTIKUM č.2. ÚKIA, LF MU, Mgr. Olga TICHÁ
PRAKTIKUM č.2 ÚKIA, LF MU, Mgr. Olga TICHÁ PROTILÁTKY protilátky jako základní reagens při imunologických metodách základní charakteristika reakce Ag Ab Obecné principy reakce Ag - Ab Antigen látka schopná
Samotná registrace léčiva je pak předmětem aplikované farmacie.
Farmaceutická biotechnologie Farmaceutická biotechnologie (anglicky pharmaceutical biotechnology, pharma biotechnology) je mezioborová vědní disciplína jejíž kořeny spadají do 20. století. Na základě doporučení
Molekulární biotechnologie č.8. Produkce heterologního proteinu v eukaryontních buňkách
Molekulární biotechnologie č.8 Produkce heterologního proteinu v eukaryontních buňkách Eukaryontní buňky se využívají v případě, když Eukaryontní proteiny syntetizované v baktériích postrádají biologickou
Molekulární biotechnologie. Nový obor, který vznikl koncem 70. let 20. století (č.1)
Molekulární biotechnologie Nový obor, který vznikl koncem 70. let 20. století (č.1) Molekulární biotechnologie je založena Na přenosu genů z jednoho organismu do druhého Jeden organismus má gen, který
Nano World Cancer Day 2014
31. ledna 2014 Celoevropská akce ETPN pořádaná současně ve 13 členských zemích Evropské unie Rakousko (Štýrský Hradec), Česká republika (Praha), Finsko (Helsinky), Francie (Paříž), Německo (Erlangen),
Molekulární biotechnologie č.9. Cílená mutageneze a proteinové inženýrství
Molekulární biotechnologie č.9 Cílená mutageneze a proteinové inženýrství Gen kódující jakýkoliv protein lze izolovat z přírody, klonovat, exprimovat v hostitelském organismu. rekombinantní protein purifikovat
Terapeutické klonování, náhrada tkání a orgánů
Transfekce, elektroporace, retrovirová infekce Vnesení genů Vrstva fibroblastů, LIF Terapeutické klonování, náhrada tkání a orgánů Selekce ES buněk, v nichž došlo k začlenění vneseného genu homologní rekombinací
Rekombinantní protilátky, bakteriofágy, aptamery a peptidové scaffoldy pro analytické a terapeutické účely Luděk Eyer
Rekombinantní protilátky, bakteriofágy, aptamery a peptidové scaffoldy pro analytické a terapeutické účely Luděk Eyer Virologie a diagnostika Výzkumný ústav veterinárního lékařství, v.v.i., Brno Alternativní
Zdrojem je mrna. mrna. zpětná transkriptáza. jednořetězcová DNA. DNA polymeráza. cdna
Obsah přednášky 1) Klonování složených eukaryotických genů 2) Úprava rekombinantních genů 3) Produkce rekombinantních proteinů v expresních systémech 4) Promotory 5) Vektory 6) Reportérové geny Zdrojem
VZTAH DÁRCE A PŘÍJEMCE
TRANSPLANTAČNÍ IMUNITA Transplantace je přenos buněk, tkáně nebo orgánu z jedné části těla na jinou nebo z jednoho jedince na jiného. Transplantační reakce je dána genetickými rozdíly mezi dárcem a příjemcem.
Rozdělení imunologických laboratorních metod
Rozdělení imunologických laboratorních metod Aglutinace Mgr. Petr Bejdák Ústav klinické imunologie a alergologie Fakultní nemocnice u sv. Anny a Lékařská fakulta MU Rozdělení imunologických laboratorních
Základy molekulární biologie KBC/MBIOZ
Základy molekulární biologie KBC/MBIOZ Klonování a genetické modifikace Sci-fi Skutečnost 6. Molekulární biotechnologie a transgenní organismy Dolly the Sheep Nadexprese proteinů Genetické modifikace a
MIKROBIOLOGIE V BIOTECHNOLOGII
Biotechnologie MIKROBIOLOGIE V BIOTECHNOLOGII Termín biotechnologie byl poprvé použit v roce 1917 Procesy, při kterých se na tvorbě výsledného produktu podílejí živé organismy Širší definice: biotechnologie
Možnosti využití hematologické léčby u MG
Možnosti využití hematologické léčby u MG Tomáš Kozák 3. lékařská fakulta UK v Praze a FN Královské Vinohrady Autoimunitní choroby (AID) Ehrlich a Morgenroth, 1901: horror autotoxicus Shoenfeld, 1999,
Protilátky struktura a jejich význam
Název: Protilátky struktura a jejich význam Školitel: Ing. Soňa Křížková, Ph.D Mgr. Markéta Vaculovičová, Ph.D. Datum: 23. 5. 2014 Reg.č.projektu: CZ.1.07/2.3.00/20.0148 Název projektu: Mezinárodní spolupráce
IMUNOLOGIE: VELKÝ OBOR OD MOLEKUL K PACIENTŮM CCA 20 NOBELOVÝCH CEN
IMUNOLOGIE: VELKÝ OBOR OD MOLEKUL K PACIENTŮM CCA 20 NOBELOVÝCH CEN ZÁKLADNÍ ÚKOLY IMUNITNÍHO SYSTÉMU: - OBRANA PROTI PATOGENŮM - ODSTRAŇOVÁNÍ ABNOMÁLNÍCH BUNĚK (NÁDOROVÝCH, POŠKOZENÝCH ) BUŇKY IMUNITNÍHO
Tento projekt je spolufinancován Evropským sociálním fondem a Státním rozpočtem ČR InoBio CZ.1.07/2.2.00/28.0018
Tento projekt je spolufinancován Evropským sociálním fondem a Státním rozpočtem ČR InoBio CZ.1.07/2.2.00/28.0018 2.4 GENETICKÉ MANIPULACE in vitro - nekonvenční techniky, kterými lze modifikovat rostlinný
Making Medicines Affordable. biosimilars průvodce
Making Medicines Affordable biosimilars průvodce Making Medicines Affordable biosimilars úvod k českému vydání průvodce Průvodce Biosimilars je první ucelenou monografií o biosimilárních přípravcích,
Molekulární biotechnologie č.12. Využití poznatků molekulární biotechnologie. Transgenní rostliny.
Molekulární biotechnologie č.12 Využití poznatků molekulární biotechnologie. Transgenní rostliny. Transgenní organismy Transgenní organismus: Organismus, jehož genom byl geneticky modifikován cizorodou
Transgeneze u ptáků: očekávání vs. realita
Transgeneze u ptáků: očekávání vs. realita Proč ptáci? Kuře - základní model v anatomii, embryologii, vývojové biologii množství získaného proteinu nižší riziko cross reaktivity s tím spojená možnost produkce
Zkušební okruhy k přijímací zkoušce do magisterského studijního oboru:
Biotechnologie interakce, polarita molekul. Hydrofilní, hydrofobní a amfifilní molekuly. Stavba a struktura prokaryotní a eukaryotní buňky. Viry a reprodukce virů. Biologické membrány. Mikrobiologie -
BUNĚČNÁ TRANSFORMACE A NÁDOROVÉ BUŇKY
BUNĚČNÁ TRANSFORMACE A NÁDOROVÉ BUŇKY 1 VÝZNAM BUNĚČNÉ TRANSFORMACE V MEDICÍNĚ Příklad: Buněčná transformace: postupná kumulace genetických změn Nádorové onemocnění: kolorektální karcinom 2 3 BUNĚČNÁ TRANSFORMACE
Klonování DNA a fyzikální mapování genomu
Klonování DNA a fyzikální mapování genomu. Terminologie Klonování je proces tvorby klonů Klon je soubor identických buněk (příp. organismů) odvozených ze společného předka dělením (např. jedna bakteriální
MIKROBIOLOGIE V BIOTECHNOLOGII
Biotechnologie MIKROBIOLOGIE V BIOTECHNOLOGII Využití živých organismů pro uskutečňování definovaných chemických procesů pro průmyslové nebo komerční aplikace Organismus je geneticky upraven metodami genetického
Monoklonální protilátky jako léčiva
trastuzumab Monoklonální protilátky jako léčiva infliximab palivizumab priliximab nofetumomab merpentan rituximab Kamil Hrubý Nemocniční lékárna Liberec tositumomab Principy: Imunitní systém reaguje na
Humorální imunita. Nespecifické složky M. Průcha
Humorální imunita Nespecifické složky M. Průcha Humorální imunita Výkonné složky součásti séra Komplement Proteiny akutní fáze (RAF) Vztah k zánětu rozdílná funkce zánětu Zánět jako fyziologický kompenzační
Antigeny. Hlavní histokompatibilitní komplex a prezentace antigenu
Antigeny Hlavní histokompatibilitní komplex a prezentace antigenu Antigeny Antigeny: kompletní (imunogen) - imunogennost - specificita nekompletní (hapten) - specificita antigenní determinanty (epitopy)
1. Definice a historie oboru molekulární medicína. 3. Základní laboratorní techniky v molekulární medicíně
Obsah Předmluvy 1. Definice a historie oboru molekulární medicína 1.1. Historie molekulární medicíny 2. Základní principy molekulární biologie 2.1. Historie molekulární biologie 2.2. DNA a chromozomy 2.3.
Advanced Therapies Products Produkty Moderní terapie a výrobní laboratoře. Barbara Kubešová
Advanced Therapies Products Produkty Moderní terapie a výrobní laboratoře Barbara Kubešová Národní Tkáňové Centrum, a.s. vyvíjí a vyrábí léčivé přípravky pro Advancedtherapiesa zpracovává tkáně a buňky
Václav Hořejší Ústav molekulární genetiky AV ČR. IMUNITNÍ SYSTÉM vs. NÁDORY
Václav Hořejší Ústav molekulární genetiky AV ČR IMUNITNÍ SYSTÉM vs. NÁDORY PROTINÁDOROVÁ IMUNITA - HISTORIE 1891 W. Coley - otec imunoterapie 1957 F.M. Burnet hypotéza imunitního dozoru 1976 A.W. Bruce
Biologická terapie. Jan Krejsek. Ústav klinické imunologie a alergologie, FN a LF UK v Hradci Králové
Biologická terapie Jan Krejsek Ústav klinické imunologie a alergologie, FN a LF UK v Hradci Králové ochrana zánět poškození vnitřní příčiny vnější příčiny narušení homeostáza obnova odstranění odstranění
Základy imunologických metod: interakce antigen-protilátka využití v laboratorních metodách
Základy imunologických metod: interakce antigen-protilátka využití v laboratorních metodách Obecné principy reakce antigenprotilátka 1929 Kendall a Heidelberg Precipitační reakce Oblast nadbytku protilátky
Výskyt MHC molekul. RNDr. Ivana Fellnerová, Ph.D. ajor istocompatibility omplex. Funkce MHC glykoproteinů
RNDr. Ivana Fellnerová, Ph.D. Katedra zoologie, PřF UP Olomouc = ajor istocompatibility omplex Skupina genů na 6. chromozomu (u člověka) Kódují membránové glykoproteiny, tzv. MHC molekuly, MHC molekuly
ZÁKLADY IMUNOLOGIE V.Hořejší, J.Bartůňková, T.Brdička, R.Špíšek. 6. vydání Triton, Praha (k dostání v Lípové ulici)
ZÁKLADY IMUNOLOGIE V.Hořejší, J.Bartůňková, T.Brdička, R.Špíšek 6. vydání Triton, Praha 2017 (k dostání v Lípové ulici) PRAKTIKA prof. J.Černý ZKOUŠKA písemná seznam otázek, ppt prezentace: k dispozici
Urychlení úpravy krvetvorby poškozené cytostatickou terapií (5-fluorouracil a cisplatina) p.o. aplikací IMUNORu
Urychlení úpravy krvetvorby poškozené cytostatickou terapií (5-fluorouracil a cisplatina) p.o. aplikací IMUNORu Úvod Myelosuprese (poškození krvetvorby) patří mezi nejčastější vedlejší účinky chemoterapie.
IMUNOGENETIKA I. Imunologie. nauka o obraných schopnostech organismu. imunitní systém heterogenní populace buněk lymfatické tkáně lymfatické orgány
IMUNOGENETIKA I Imunologie nauka o obraných schopnostech organismu imunitní systém heterogenní populace buněk lymfatické tkáně lymfatické orgány lymfatická tkáň thymus Imunita reakce organismu proti cizorodým
Obsah. Sarkosin Charakterizace slepičích protilátek proti sarkosinu. Dagmar Uhlířová
Investice do rozvoje vzdělávání Charakterizace slepičích protilátek proti sarkosinu Dagmar Uhlířová 7.2.2014 Reg.č.projektu: CZ.1.07/2.4.00/31.0023 NanoBioMetalNet Název projektu: Partnerská síť centra
REGULAČNÍ ASPEKTY FARMAKOKINETIKY. Farmakologický ústav 1. LF UK a VFN. Ondřej Slanař
Ondřej Slanař Farmakologický ústav 1. LF UK a VFN REGULAČNÍ ASPEKTY FARMAKOKINETIKY Farmakokinetika ve vývoji léku Samostatné registrace FK- NC; toxokinetika FK - Klinická Cíle: dávkování, způsob podání,
Genové terapie po 20 letech = více otázek než odpovědí
Genové terapie po 20 letech = více otázek než odpovědí Jiří Heřmánek Genzyme 25.11.2008 Disclosure statement Ač vzděláním biochemik, nejsem odborník na genové terapie, tzn. považujte mne prosím za poučeného
Nativní a rekombinantní Ag
Antigeny z hlediska diagnostiky a pro potřeby imunizace Nativní a rekombinantní Ag Ag schopna vyvolat I odpověď, komplexní, nekomplexní Ag, hapten, determinanty, nosič V laboratořích: Stanovení Ab proti:
Terapie hairy-cell leukémie
Terapie hairy-cell leukémie David Belada, II.interní klinika, OKH FN a LF v Hradci Králové Lymfomové fórum 2010 Grand Hotel Bellevue, Vysoké Tatry 12.-14.3.2010 Úvod Poprvé popsána v roce 1958 (Bouroncle
Nové směry v rostlinných biotechnologiích
Nové směry v rostlinných biotechnologiích Tomáš Moravec Ústav Experimentální Botaniky AV ČR Praha 2015-05-07 Praha Prvních 30. let transgenních rostlin * V roce 2014 byly GM plodiny pěstovány na ploše
nejsou vytvářeny podle genetické přeskupováním genových segmentů Variabilita takto vytvořených což je více než skutečný počet sloučenin v přírodě
PROTILÁTKY Specifické rozpoznání v imunitním systému zprostředkují speciální proteinové molekuly jediné, které nejsou vytvářeny podle genetické matrice, ale nahodilým přeskupováním genových segmentů Variabilita
METODY VYŠETŘOVÁNÍ BUNĚČNÉ IMUNITY. Veřejné zdravotnictví
METODY VYŠETŘOVÁNÍ BUNĚČNÉ IMUNITY Veřejné zdravotnictví METODY VYŠETŘOVÁNÍ BUNĚČNÉ IMUNITY průtoková cytometrie metody stanovení funkční aktivity lymfocytů testy fagocytárních funkcí Průtoková cytometrie
Imunopatologie. Viz také video: 15-Imunopatologie.mov. -nepřiměřené imunitní reakce. - na cizorodé netoxické antigeny (alergie)
Imunopatologie -nepřiměřené imunitní reakce - na cizorodé netoxické antigeny (alergie) - na vlastní antigeny (autoimunita) Viz také video: 15-Imunopatologie.mov Imunopatologické reakce Reakce I.S. podobné
OBRANNÝ IMUNITNÍ SYSTÉM
Mgr. Šárka Vopěnková Gymnázium, SOŠ a VOŠ Ledeč nad Sázavou VY_32_INOVACE_02_3_04_BI2 OBRANNÝ IMUNITNÍ SYSTÉM Základní znaky: není vrozená specificky rozpoznává cizorodé látky ( antigeny) vyznačuje se
Rozvoj vzdělávání žáků karvinských základních škol v oblasti cizích jazyků Registrační číslo projektu: CZ.1.07/1.1.07/02.0162
ZŠ Určeno pro Sekce Předmět Rozvoj vzdělávání žáků karvinských základních škol v oblasti cizích jazyků Registrační číslo projektu: CZ.1.07/1.1.07/02.0162 Téma / kapitola Mendelova 2. stupeň Základní Zdravověda
Magnetické částice, izolace a detekce chřipky (hemaglutininu)
Název: Magnetické částice, izolace a detekce chřipky (hemaglutininu) Školitel: Ludmila Krejčová, MVDr. Datum: 7.11. 2013 Reg.č.projektu: CZ.1.07/2.4.00/31.0023 Název projektu: Partnerská síť centra excelentního
Příloha č.4 Seznam imunologických vyšetření. Obsah. Seznam imunologických vyšetření
Příloha č.4 Seznam imunologických vyšetření Obsah IgA... 2 IgG... 3 IgM... 4 IgE celkové... 5 Informační zdroje:... 6 Stránka 1 z 6 Název: IgA Zkratka: IgA Typ: kvantitativní Princip: turbidimetrie Jednotky:
Okruhy otázek ke zkoušce
Okruhy otázek ke zkoušce 1. Úvod do biologie. Vznik života na Zemi. Evoluční vývoj organizmů. Taxonomie organizmů. Původ a vývoj člověka, průběh hominizace a sapientace u předků člověka vyšších primátů.
MUDr Zdeněk Pospíšil
MUDr Zdeněk Pospíšil Imunita Charakteristika-soubor buněk,molekul a humorálních faktorů majících schopnost rozlišit cizorodé látky a odstranit je /rozeznává vlastní od cizích/ Zajišťuje-homeostazu,obranyschopnost
PROFIL SPOLEČNOSTI ZENTIVA
PROFIL SPOLEČNOSTI ZENTIVA Zentiva mezinarodní farmaceutická společnost vyrábějící a prodávající cenově dostupné generické léky. Z APATYKY K MEZINÁRODNÍ FARMACEUTICKÉ FIRMĚ Za zakladatele výroby léčiv
Příloha č.4 Seznam imunologických vyšetření
Příloha č.6 Laboratorní příručka Laboratoří MeDiLa, v05 - Seznam imunologických Příloha č.4 Seznam imunologických Obsah IgA... 2 IgG... 3 IgM... 4 IgE celkové... 5 Informační zdroje:... 6 Stránka 1 z 6
Obsah. Seznam zkratek... 15. Předmluva k 5. vydání... 21
Obsah Seznam zkratek... 15 Předmluva k 5. vydání... 21 1 Základní pojmy, funkce a složky imunitního systému... 23 1.1 Hlavní funkce imunitního systému... 23 1.2 Antigeny... 23 1.3 Druhy imunitních mechanismů...
SKANÁ imunita. VROZENÁ imunita. kladní znalosti z biochemie, stavby membrán n a fyziologie krve. Prezentace navazuje na základnz
RNDr. Ivana Fellnerová, Ph.D. Katedra zoologie, PřF UP Olomouc Prezentace navazuje na základnz kladní znalosti z biochemie, stavby membrán n a fyziologie krve Rozšiřuje témata: Proteiny přehled pro fyziologii
Biologie buňky. systém schopný udržovat se a rozmnožovat
Biologie buňky 1665 - Robert Hook (korek, cellulae = buňka) Cytologie - věda zabývající se studiem buňek Buňka ozákladní funkční a stavební jednotka živých organismů onejmenší známý uspořádaný dynamický
Tématické okruhy pro státní závěrečné zkoušky
Tématické okruhy pro státní závěrečné zkoušky Obor Povinný okruh Volitelný okruh (jeden ze dvou) Forenzní biologická Biochemie, pathobiochemie a Toxikologie a bioterorismus analýza genové inženýrství Kriminalistické
Bílkoviny a rostlinná buňka
Bílkoviny a rostlinná buňka Bílkoviny Rostliny --- kontinuální diferenciace vytváření orgánů: - mitotická dělení -zvětšování buněk a tvorba buněčné stěny syntéza bílkovin --- fotosyntéza syntéza bílkovin
www.printo.it/pediatric-rheumatology/cz/intro Terapie Verze č 2016 13. Biologická léčba Nové perspektivy v léčbě se rozvinuly v posledních letech s nástupem tzv. biologických léků. Tento název je používán
LPMT: DEFINICE, ZAŘAZENÍ
1 LPMT: DEFINICE, ZAŘAZENÍ MUDr. Tomáš Boráň Státní ústav pro kontrolu léčiv 2 Obsah Definice LPMT Legislativa EU Legislativa ČR Zařazení mezi LPMT a příklady somatobuněčná terapie tkáňové inženýrství
c 2002 Intellectronics
Gymnázium Tachov, seminář 25. září 2002 Klonování lidských embryonálních kmenových buněk Jiří Svršek 1 c 2002 Intellectronics Abstract V prosinci 1998 společnost Advanced Cell Technology, Inc. oznámila
Struktura a funkce biomakromolekul KBC/BPOL
Struktura a funkce biomakromolekul KBC/BPOL 2. Posttranslační modifikace a skládání proteinů Ivo Frébort Biosyntéza proteinů Kovalentní modifikace proteinů Modifikace proteinu může nastat předtím než je
RECEPTORY CYTOKINŮ A PŘENOS SIGNÁLU. Jana Novotná
RECEPTORY CYTOKINŮ A PŘENOS SIGNÁLU Jana Novotná Co jsou to cytokiny? Skupina proteinů a peptidů (glykopeptidů( glykopeptidů), vylučovaných živočišnými buňkami a ovlivňujících buněčný růst (též růstové
RNDr. Ivana Fellnerová, Ph.D. Katedra zoologie, PřF UP Olomouc
RNDr. Ivana Fellnerová, Ph.D. Katedra zoologie, PřF UP Olomouc Výukové materiály: http://www.zoologie.upol.cz/osoby/fellnerova.htm Prezentace navazuje na základní znalosti Biochemie a cytologie. Bezprostředně
Přípravek Avastin se společně s jinými protinádorovými léčivými přípravky používá u dospělých k léčbě těchto typů rakoviny:
EMA/175824/2015 EMEA/H/C/000582 Souhrn zprávy EPAR určený pro veřejnost bevacizumabum Tento dokument je souhrnem Evropské veřejné zprávy o hodnocení (European Public Assessment Report, EPAR) pro přípravek.
Bezpečnostně právní akademie Brno
Bezpečnostně právní akademie Brno Číslo projektu: CZ.1.07/1.5.00/34.0036 Název projektu: Inovace a individualizace výuky Autor: Mgr. Eva Hrobařová Název materiálu: Nemoci imunitního systému Označení materiálu:
Imunopatologie. Luděk Bláha
Imunopatologie Luděk Bláha blaha@recetox.muni.cz Imunopatologie nepřiměřené imunitní reakce na cizorodé netoxické antigeny (alergie) na vlastní antigeny (autoimunita) Viz také video: 15-Imunopatologie.mov
Struktura a funkce biomakromolekul KBC/BPOL
Struktura a funkce biomakromolekul KBC/BPOL 2. Posttranslační modifikace a skládání proteinů Ivo Frébort Biosyntéza proteinů Kovalentní modifikace proteinů Modifikace proteinu může nastat předtím než je
Co přináší biologická léčba nespecifických zánětů střevních. Keil R.
Co přináší biologická léčba nespecifických zánětů střevních Keil R. Příčiny vzniku nespecifických střevních zánětů Vzniká u geneticky disponovaných osob Je důsledkem abnormální imunitní odpovědi na faktory
Izolace nukleových kyselin
Izolace nukleových kyselin Požadavky na izolaci nukleových kyselin V nativním stavu z přirozeného materiálu v dostatečném množství požadované čistotě. Nukleové kyseliny je třeba zbavit všech látek, které
Sylabus témat ke zkoušce z lékařské biologie a genetiky. Struktura, reprodukce a rekombinace virů (DNA viry, RNA viry), význam v medicíně
Sylabus témat ke zkoušce z lékařské biologie a genetiky Buněčná podstata reprodukce a dědičnosti Struktura a funkce prokaryot Struktura, reprodukce a rekombinace virů (DNA viry, RNA viry), význam v medicíně
Doprovodný materiál k práci s přípravným textem Biologické olympiády 2014/2015 pro soutěžící a organizátory kategorie B
Doprovodný materiál k práci s přípravným textem Biologické olympiády 2014/2015 pro soutěžící a organizátory kategorie B Níže uvedené komentáře by měly pomoci soutěžícím z kategorie B ke snazší orientaci
Vývoj nového léčiva. as. MUDr. Martin Votava, PhD.
Vývoj nového léčiva as. MUDr. Martin Votava, PhD. Příprava na vývoj a registraci LP Náklady na vývoj: 800 mil USD Doba vývoje: 10 let Úspěšnost: 0,005% - 0,001% Vývoj nového léčivého přípravku IND NDA
rní tekutinu (ECF), tj. cca 1/3 celkového množstv
Představují tzv. extracelulárn rní tekutinu (ECF), tj. cca 1/3 celkového množstv ství vody v tělet (voda tvoří 65-75% váhy v těla; t z toho 2/3 vody jsou vázanv zané intracelulárn rně) Lymfa (míza) Tkáňový
Program na podporu zdravotnického aplikovaného výzkumu na léta 2015 2022
Program na podporu zdravotnického aplikovaného výzkumu na léta 2015 2022 Ukončení příjmů projektů: 30. 6. 2015 Délka trvání řešení projektů: 45 měsíců Místo realizace: Celá ČR Oblast působení: Výzkum a
16:30 17:00 příchod hostů 17:00 18:00 představení jednotlivých firem v rozsahu 120 vteřin 18:00 22:00 neformální část akce
16:30 17:00 příchod hostů 17:00 18:00 představení jednotlivých firem v rozsahu 120 vteřin 18:00 22:00 neformální část akce JIC, zájmové sdružení právnických osob Brno, U Vodárny 2, PSČ 616 00 tel. +420
Mechanismy a působení alergenové imunoterapie
Mechanismy a působení alergenové imunoterapie Petr Panzner Ústav imunologie a alergologie LF UK a FN Plzeň Zavedení termínu alergie - rozlišení imunity a přecitlivělosti Pasivní přenos alergenspecifické
Beličková 1, J Veselá 1, E Stará 1, Z Zemanová 2, A Jonášová 2, J Čermák 1
Beličková 1, J Veselá 1, E Stará 1, Z Zemanová 2, A Jonášová 2, J Čermák 1 1 Ústav hematologie a krevní transfuze, Praha 2 Všeobecná fakultní nemocnice, Praha MDS Myelodysplastický syndrom (MDS) je heterogenní
Inovace studia molekulární a buněčné biologie
Inovace studia molekulární a buněčné biologie Tento projekt je spolufinancován Evropským sociálním fondem a státním rozpočtem České republiky. MBIO1/Molekulární biologie 1 Tento projekt je spolufinancován
III/2- Inovace a zkvalitnění výuky prostřednictvím IVT
GYMNÁZIUM TÝN NAD VLTAVOU, HAVLÍČKOVA 13 Číslo projektu Číslo a název šablony klíčové aktivity Tematická oblast CZ.1.07/1.5.00/34.0437 III/2- Inovace a zkvalitnění výuky prostřednictvím IVT Člověk a příroda
Přínos farmakokinetického monitorování pro optimalizaci biologické léčby ISZ. T. Vaňásek (Hradec Králové)
Přínos farmakokinetického monitorování pro optimalizaci biologické léčby ISZ T. Vaňásek (Hradec Králové) Farmakokinetické monitorování BL Biologická léčba Cílená modifikace imunitní reakce spojené s patogenezí
Variabilita takto vytvořených molekul se odhaduje na , což je více než skutečný počet sloučenin v přírodě GENETICKÝ ZÁKLAD TĚŽKÉHO ŘETĚZCE
PROTILÁTKY Specifické rozpoznání v imunitním systému zprostředkují speciální proteinové molekuly jediné, které nejsou vytvářeny podle genetické matrice, ale nahodilým přeskupováním genových segmentů GENETICKÝ
Obsah. Seznam zkratek Předmluva k 6. vydání... 23
Obsah Seznam zkratek... 17 Předmluva k 6. vydání... 23 1 Základní pojmy, funkce a složky imunitního systému... 25 1.1 Hlavní funkce imunitního systému... 25 1.2 Antigeny... 25 1.3 Druhy imunitních mechanismů...
Vývoj nových léčiv. Preklinický výzkum Klinický výzkum
Vývoj nových léčiv Preklinický výzkum Klinický výzkum Úvod Léčivo = nejprověřenější potravina vstupující do organismu Ideální léčivo kvalitní, účinné, bezpečné a dostupné Financování výzkumu léčiv souvislost
Odběr krvetvorných buněk z periferní krve: příprava, průběh a komplikace
Odběr krvetvorných buněk z periferní krve: příprava, průběh a komplikace Helena Švábová, Andrea Žmijáková Interní hematologická a onkologická klinika FN Brno Separační středisko je součástí Interní hematologické
Bunka a bunecné interakce v patogeneze tkánového poškození
Bunka a bunecné interakce v patogeneze tkánového poškození bunka - stejná genetická výbava - funkce (proliferace, produkce látek atd.) závisí na diferenciaci diferenciace tkán - specializovaná produkce
Ekonomické dopady vstupu biosimilars v ČR
Ekonomické dopady vstupu biosimilars v ČR Tomáš Doležal Institut pro zdravotní ekonomiku Farmakologický ústav 2. LF UK OSNOVA Zkušenosti v jiných zemích Co můžeme očekávat ve změně úhrady? Jaký bude dopad
Inovace studia molekulární a buněčné biologie reg. č. CZ.1.07/2.2.00/
I n v e s t i c e d o r o z v o j e v z d ě l á v á n í Inovace studia molekulární a buněčné biologie reg. č. CZ.1.07/2.2.00/07.0354 Tento projekt je spolufinancován Evropským sociálním fondem a státním
Metody testování humorální imunity
Metody testování humorální imunity Co je to humorální imunita? Humorální = látková Buněčné produkty Nespecifická imunita příklady:» Lysozym v slinách, slzách» Sérové proteiny (proteiny akutní fáze)» Komplementový