PROTOKOL 1A NÁZOV PRÁCE: PRÍPRAVA A STERILIZÁCIA ŽIVNÝCH MÉDIÍ MENO: DÁTUM: SKUPINA: ÚLOHY 1. Uveďte, čo je kultivačné médium a jeho význam. 2. Uveďte, čo je sterilizácia a jej význam. 3. Vymenujte a charakterizujte živné médiá pripravené v priebehu cvičenia: Uveďte, pre ktoré skupiny mikroorganizmov sú určené. 4. Uveďte podmienky sterilizácie živných médií pripravených na laboratórnom cvičení. 5. V bodoch popíšte postup prípravy agarových platní. 6. V bodoch popíšte postup prípravy šikmých agarov. 7. Na aké účely slúžia: a) agarové platne: b) šikmé agary:
PROTOKOL 1B NÁZOV PRÁCE: ZÍSKAVANIE MIKROORGANIZMOV Z OKOLITÉHO PROSTREDIA MENO: DÁTUM: SKUPINA: ÚLOHY 1. Zhodnoťte makrovzhľad vyrastených kolónií na rôznych druhoch živných médií (z každej Petriho misky vyberte jednu kolóniu na ďalšiu charakterizáciu). 2. Vyplňte tabuľku: Živné médium Zdroj mikrooganizmov Skupina mikroorganizmov Počet kolónií Podmienky kultivácie (teplota, čas, svetelný režim, spôsob) Nákres 1 vybranej kolónie MPA SLA 1 SLA 2
PROTOKOL 2A NÁZOV PRÁCE: MIKROSKOPICKÉ POZOROVANIE ŽIVÝCH MIKROORGANIZMOV MENO: DÁTUM: SKUPINA: ÚLOHY 1. Uveďte, čo je natívny preparát a aké je jeho praktické uplatnenie. 2. Zakreslite výsledky mikroskopického pozorovania natívnych preparátov modelových i vlastných mikroorganizmov: a) modelových kvasiniek: názov kvasinky: názov kvasinky: b) vlastnej kvasinky:
c) modelových baktérií: názov baktérie: pohyb: názov baktérie: pohyb: d) vlastnej baktérie: pohyb: 3. Popíšte použitý postup negatívneho farbenia baktérií. 4. Zakreslite výsledky mikroskopického pozorovania negatívneho farbenia modelovej a vlastnej baktérie. usporiadanie buniek: usporiadanie buniek:
PROTOKOL 2B NÁZOV PRÁCE: IZOLÁCIA ČISTEJ KULTÚRY MIKROORGANIZMOV MENO: DÁTUM: SKUPINA: ÚLOHY 1. Charakterizujte čistú kultúru mikroorganizmov, jej význam a praktické uplatnenie. 2. Popíšte použitú metódu izolácie čistej kultúry. Čo je princípom tejto metódy? 3. Vyhodnoťte izolácie čistých kultúr baktérií a kvasiniek zo zmesi mikroorganizmov podľa tabuľky: Druh izolovaného mikrooragnizmu baktérie Živné médium Kultivačné podmienky Počet typov samostatných kolónií Popis makroskopických morfologických znakov vybranej kolónie samostatne rastúcej po izolácii kvasinky 4. Zhodnoťte úspešnosť svojej izolácie čistej kultúry (získanie samostatných kolónií mikroorganizmov, vhodných k ďalšiemu pasážovaniu na šikmý agar). Uveďte aj prípadné problémy a vysvetlite ich príčinu.
PROTOKOL 3 NÁZOV PRÁCE: DIAGNOSTICKÉ FARBENIE BAKTÉRIÍ, KOH-TEST MENO: DÁTUM: SKUPINA: ÚLOHY 1. Uveďte druhy diagnostických farbení, ich princípy a význam. 2. Ktoré štruktúry baktérií majú diagnostický význam a ako ich najčastejšie dokazujeme. 3. Vysvetlite rozdiely medzi natívnym a fixovaným preparátom. Aký je najčastejší spôsob fixácie používaný v bakteriológii. 4. Opíšte použité postupy farbení Gramovo farbenie: Farbenie bakteriálnych endospór:
5. Zakreslite výsledky mikroskopického pozorovania preparátov a) modelové baktérie (Gramovo farbenie): názov baktérie: názov baktérie: názov baktérie: názov baktérie: b) vlastná baktéria (Gramovo farbenie):
c) modelová baktéria (farbenie spór): názov baktérie: výsledná farba bakteriálnych endospór: výsledná farba vegetatívnych buniek: 6. Uveďte princíp pomocného KOH testu a účel, na ktorý sa používa. Aké iné postupy možno použiť na rozlíšenie G + a G baktérií? 7. Uveďte výsledky Gramovho farbenia a KOH testu do nasledujúcej tabuľky: Testovaná baktéria Výsledná farba po Gramovom farbení "Nitka" pri pomocnom KOH teste Príslušnosť podľa Grama Modelová baktéria: Modelová baktéria: Modelová baktéria: Modelová baktéria: Vlastná izolovaná baktéria
PROTOKOL 4 NÁZOV PRÁCE: MIKROSKOPIA NIŽŠÍCH A VYŠŠÍCH VLÁKNITÝCH HÚB Meno: Dátum: Skupina: ÚLOHY: 1. Charakterizujte nižšie a vyššie huby (zaradenie do systému húb, morfológia, spôsob nepohlavného a pohlavného rozmnožovania). 2. Uveďte použitý postup pri príprave preparátu mikromycét pre mikroskopické pozorovanie. 3. Zakreslite a popíšte morfologické znaky modelových húb: a) názov: Rhizopus makroskopické znaky: b) názov: Mucor makroskopické znaky:
c) názov: Aspergillus makroskopické znaky: d) názov: Penicillium makroskopické znaky: e) názov: Alternaria alternata makroskopické znaky: f) názov: Fusarium makroskopické znaky:
4. Charakterizujte makroskopický, prípadne mikroskopický vzhľad vlastnej izolovanej myceliárnej huby. 5. Na základe morfologického hodnotenia zaraďte svoju izolovanú hubu medzi vyššie, príp. nižšie huby.
PROTOL 5A NÁZOV PRÁCE: MIKROSKOPIA KVASINIEK A KVASINKOVITÝCH MIKROORGANIZMOV Meno: Dátum: Skupina: ÚLOHY: 1. Charakterizujte kvasinky (zaradenie do systému húb, morfológia, spôsob nepohlavného a pohlavného rozmnožovania). 2. Uveďte znaky, ktoré sledujeme pri mikroskopickej charakterizácii kvasiniek. 3. Uveďte použité postupy prípravy preparátov kvasiniek pre mikroskopické pozorovanie. 4. Zakreslite a popíšte morfologické znaky modelových kvasiniek: a) názov: Saccharomyces cerevisiae makroskopické znaky na stuženom médiu: b) názov: Schizosaccharomyces pombe makroskopické znaky na stuženom médiu:
c) názov: Candida utilis makroskopické znaky na stuženom médiu: d) názov: Rhodotorula glutinis makroskopické znaky na stuženom médiu: e) názov: Aureobasidium pullulans makroskopické znaky na stuženom médiu: f) názov: Endomycopsis javanensis makroskopické znaky na stuženom médiu:
5. Charakterizujte makroskopické a mikroskopické morfologické znaky vlastnej kvasinky makroskopické: - na stuženom médiu - v kvapalnom médiu mikroskopické: 6. Uveďte princíp a význam testu vitality kvasiniek.
PROTOKOL 5B NÁZOV PRÁCE: METÓDY STANOVENIE POČTU MIKROORGANIZMOV Meno: Dátum: Skupina: ÚLOHY: 1. Uveďte základné metódy stanovenia počtu mikroorganizmov a ich princípy. 2. Napíšte postup a podmienky stanovenia počtu kvasiniek priamou mikroskopickou metódou (v Bürkerovej komôrke). 3. Uveď výsledky a spôsob výpočtu pri stanovení počtu kvasiniek v 1 ml suspenzie.