Možnosti využití metod molekulární biologie a genetiky v medicíně. Doc. MUDr. Iva Slaninová, Ph.D.

Podobné dokumenty
Terapeutické klonování, náhrada tkání a orgánů

Apoptóza. Veronika Žižková. Ústav klinické a molekulární patologie a Laboratoř molekulární patologie

Protinádorová imunita. Jiří Jelínek

Václav Hořejší Ústav molekulární genetiky AV ČR. IMUNITNÍ SYSTÉM vs. NÁDORY

BUNĚČNÁ TRANSFORMACE A NÁDOROVÉ BUŇKY

Genové terapie po 20 letech = více otázek než odpovědí

Personalizovaná medicína Roche v oblasti onkologie. Olga Bálková, Roche s.r.o., Diagnostics Division Pracovní dny, Praha, 11.

Sylabus témat ke zkoušce z lékařské biologie a genetiky. Struktura, reprodukce a rekombinace virů (DNA viry, RNA viry), význam v medicíně

1. Definice a historie oboru molekulární medicína. 3. Základní laboratorní techniky v molekulární medicíně

Kongres medicíny pro praxi IFDA Praha, Hotel Hilton 27.září 2014

Vakcíny z nádorových buněk

2019 STÁTNÍ ÚSTAV PRO KONTROLU LÉČIV

RIGORÓZNÍ OTÁZKY - BIOLOGIE ČLOVĚKA

Proč nemáme vakcínu proti HIV-1?

Co je to genová terapie?

Antivirotika. Včetně léčby AIDS

VZTAH DÁRCE A PŘÍJEMCE

Inovace studia molekulární a buněčné biologie

IMUNOGENETIKA I. Imunologie. nauka o obraných schopnostech organismu. imunitní systém heterogenní populace buněk lymfatické tkáně lymfatické orgány

Specifická imunitní odpověd. Veřejné zdravotnictví

Inovace studia molekulární a buněčné biologie reg. č. CZ.1.07/2.2.00/

Zhoubné nádory druhá nejčastější příčina úmrtí v rozvinutých zemích. Imunologické a genetické metody: Zlepšování dg. Zlepšování prognostiky

Transgeneze u ptáků: očekávání vs. realita

Výskyt MHC molekul. RNDr. Ivana Fellnerová, Ph.D. ajor istocompatibility omplex. Funkce MHC glykoproteinů

PREZENTACE ANTIGENU A REGULACE NA ÚROVNI Th (A DALŠÍCH) LYMFOCYTŮ PREZENTACE ANTIGENU

LPMT: DEFINICE, ZAŘAZENÍ

Molekulární mechanismy diferenciace a programované buněčné smrti - vztah k patologickým procesům buněk. Aleš Hampl

ÚVOD DO TRANSPLANTAČNÍ IMUNOLOGIE

Elementy signálních drah. cíle protinádorové terapie

Co nás učí nádory? Prof. RNDr. Jana Šmardová, CSc. Ústav patologie FN Brno Přírodovědecká a Lékařská fakulta MU Brno

Úvod do nonhla-dq genetiky celiakie

Virus lidského imunodeficitu. MUDr. Jana Bednářová, PhD. OKM FN Brno

doc. RNDr. Milan Bartoš, Ph.D.

2) Vztah mezi člověkem a bakteriemi

Petr Müller Masarykův onkologický ústav. Genová terapie

Progrese HIV infekce z pohledu laboratorní imunologie

OBRANNÝ IMUNITNÍ SYSTÉM

FUNKČNÍ VARIANTA GENU ANXA11 SNIŽUJE RIZIKO ONEMOCNĚNÍ

Změny v parametrech imunity v průběhu specifické alergenové imunoterapie. Vlas T., Vachová M., Panzner P.,

Atestační otázky z oboru alergologie a klinická imunologie

doc. RNDr. Renata Veselská, Ph.D., M.Sc. Ústav experimentální biologie Přírodovědecká fakulta MU

Molekulární biotechnologie. Nový obor, který vznikl koncem 70. let 20. století (č.1)

Obsah. Seznam zkratek Předmluva k 5. vydání... 21

Inovace studia molekulární a buněčné biologie

doc. RNDr. Renata Veselská, Ph.D., M.Sc. Ústav experimentální biologie Přírodovědecká fakulta MU

MUDr. Iva Slaninová, Ph.D. Biologický ústav LF MU

DEFEKTY NEADAPTIVNÍ (PŘIROZENÉ) ČÁSTI IMUNITNÍHO SYSTÉMU

Mnohobarevná cytometrie v klinické diagnostice

Indukovaná pluripotence. Petr Vodička Liběchov 16/11/2016

15 hodin praktických cvičení

Obsah. Seznam zkratek Předmluva k 6. vydání... 23

Mechanismy a působení alergenové imunoterapie

Molekulární biotechnologie č.12. Využití poznatků molekulární biotechnologie. Transgenní rostliny.

IMUNOLOGIE: VELKÝ OBOR OD MOLEKUL K PACIENTŮM CCA 20 NOBELOVÝCH CEN

Imunita a nádoryn. UK 2. lékal Praha

ČÁSTICE LIDSKÉHO PAPILLOMAVIRU (HPV)

Přehled výzkumných aktivit

IMUNOTERAPIE NÁDORŮ MOČOVÉHO MĚCHÝŘE. Michaela Matoušková

Buněčné jádro a viry

Přínos molekulární genetiky pro diagnostiku a terapii malignit GIT v posledních 10 letech

Rich Jorgensen a kolegové vložili gen produkující pigment do petunií (použili silný promotor)

Co jsou imunodeficience? Imunodeficience jsou stavy charakterizované zvýšenou náchylností k infekcím

Program na podporu zdravotnického aplikovaného výzkumu na léta

Co je to imunoterapie?

Speciace neboli vznik druhů. KBI/GENE Mgr. Zbyněk Houdek

NAŘÍZENÍ KOMISE (EU) /... ze dne , kterým se mění nařízení (ES) č. 847/2000, pokud jde o definici pojmu podobný léčivý přípravek

VÝZNAM REGULACE APOPTÓZY V MEDICÍNĚ

Nano World Cancer Day 2014

ONKOGENETIKA. Spojuje: - lékařskou genetiku. - buněčnou biologii. - molekulární biologii. - cytogenetiku. - virologii

Genová terapie - lze změnit jednou rozdané karty? Ústav patologické fyziologie Lékařská fakulta Masarykova universita

Beličková 1, J Veselá 1, E Stará 1, Z Zemanová 2, A Jonášová 2, J Čermák 1

RNDr K.Roubalová CSc.

Úloha laboratorní medicíny v komplexní léčbě nádorových onemocnění. Bohuslav Melichar Onkologická klinika LF UP a FN Olomouc

Mutace s dobrou prognózou, mutace se špatnou prognózou omezené možnosti biologické léčby pro onkologické pacienty

HIV (z klinického pohledu)

Testování biomarkerů u kolorektálního karcinomu.

Modul obecné onkochirurgie

Aciclovir AL krém 50 mg/g

GE OVÁ TERAPIE ZHOUB ÝCH ÁDORŮ

Pavel Souček Úplný výkaz pedagogické činnosti

Příloha č.4 Seznam imunologických vyšetření

Biomarkery - diagnostika a prognóza nádorových onemocnění

Teorie protinádorového dohledu Hlavní funkcí imunitního systému je boj proti infekcím

VĚDA A VÝZKUM V PERIOPERAČNÍ PÉČI. Mgr. Markéta Jašková Dana Svobodová Gynekologicko-porodnická klinika Fakultní nemocnice Ostrava

Imunitní systém člověka. Historie oboru Terminologie Členění IS

19.b - Metabolismus nukleových kyselin a proteosyntéza

Pohled genetika na racionální vyšetřování v preventivní kardiologii

Lekce z analýz genových expresních profilů u MM a návrh panelu genů pro ČR. Mgr. Silvie Dudová

Příloha č.4 Seznam imunologických vyšetření. Obsah. Seznam imunologických vyšetření

Kapitola III. Poruchy mechanizmů imunity. buňka imunitního systému a infekce

Primární prevence karcinomu děložního hrdla - HPV vakcinace. Iva Kinkorová Luňáčková

Xenobiotika a jejich analýza v klinických laboratořích

III/2- Inovace a zkvalitnění výuky prostřednictvím IVT

Terapie mnohočetného myelomu poznatky z ASH 2004

Citlivost a rezistence mikroorganismů na antimikrobiální léčiva

Výuka genetiky na PřF OU K. MALACHOVÁ

Nové přístupy v modifikaci funkce genů: CRISPR/Cas9 systém

EKONOMICKÉ ASPEKTY GENETICKÝCH VYŠETŘENÍ. I. Šubrt Společnost lékařské genetiky ČLS JEP

Keytruda (pembrolizumabum)

Možnosti využití hematologické léčby u MG

Transkript:

Možnosti využití metod molekulární biologie a genetiky v medicíně Doc. MUDr. Iva Slaninová, Ph.D.

Molekulární medicína Genová terapie Molekulárně cílená terapie (bioterapie) Perzonalizovaná medicína

Molekulární terapie Aplikace technik molekulární biologie a genetiky v terapii

Genová terapie Transfer nového genetického materiálu do buněk jedince za účelem dosažení léčebného efektu

Rozdělení GT Terapie somatických buněk Terapie buněk zárodečného epitelu nebo buněk embryonálních Zdroj:www.bio.miami.edu/dana/ 104/104F02_25.html.

Rozdělení GT In vivo In vitro (Ex vivo) Zdroj: www.biochem.arizona.edu/.../ Lecture25.html.

Základní strategie GT Výměna nefunkčního genu za správný Gene augmentation (posílení) vpravení kopie zdravého genu bez odstranění původního Nukleázy - Zinc Fingers (ZFN) TALENs CRISPR/Cas9 Ribozymy sirna interferující RNA Řízená sebevražda bb (VDEPT viral directed enzyme production therapy) Genetická chirurgie Antisense DNA, RNA (protismyslné oligonukleotidy) Ribozymy Protismyslné oligonukleotidy http://gslc.genetics.utah.edu/units/genetherapy/gtapproaches/

Nástroje pro editaci genů Zinc Fingers (ZFN) TALENs CRISPR/Cas9 Make DSBs at precise genome location DNA repair insertions, deletions

Kandidáti genové terapie Klasické genetické choroby Vrozené vady metabolismu Fenylketonurie Hemofilie A,B Poruchy srážlivosti Poruchy imunity ADA deficience Cystická fibroza Komplexní genetické choroby Rakovina Kardiovaskulární choroby Neurodegenerativní choroby Diabetes. Získané genetické vady virové nemoci (EBV, HBV, HIV)

Genové transportní systémy Nevirové Mechanické mikroinjekce, particle bombardment - biobalistika, elektroporace, ultrazvuk Liposomy (13%) - lipofekce Receptorem umožněný transport (liganda)- Transferin Polykationty Virové retroviry Adenoviry AAV Lentiviry Vaccinia virus Herpes viry (HSV, EBV) Papovaviry (SV 40) Transgen vnášený gen

Porovnání vektorů Vektor Výhody Nevýhody Retroviry Adenoviry AAV Liposomy Stabilní exprese, relativně bezpečný po odstranění vlastních genů Všechny typy bb Vysoký titr Bezpečný (odstranění virových genů), všechny bb, stabilní exprese Absence viru Větší DNA Vyžaduje dělící se bb, náhodná integrace, nízký titr Toxicita (virové geny), imunitní odpověď Menší inzert pracné Nestálé, nedostatečný transport do jádra

Genom retroviru Může obsahovat i onkogen LTR ψ LTR Geny pro kapsidu, polymerázu, obal Signál pro obalení viru psí Repetitivní sekvence obsahují silné promotory a enhancery, umožňují inzerci

Retrovirový vektor krotký (terapeutický) virus obsahuje požadovaný gen, je schopen tvořit virové částice, není schopen replikace Packaging cell balící buňka LTR ψ LTR pomocný virus- není schopen tvořit virové částice, ale obsahuje geny důležité pro vytvoření virové částice a tím pomáhá v replikaci krotkého viru LTR LTR PACIENT

Dr. W. French Anderson - National Heart, Lung and Blood Institute Září 1990 1. klinický experiment (SCID, deficience ADA) 4 letá holčička Ashanti DeSilva (NIH), T- lymfocyty, transformovány retrovirovým vektorem terapie ex-vivo Zdroj: http://www.pbs.org/newshour/bb/health/july-dec99/gene_therapy_splash.htm#

X-SCID (Severe Combined Immunodeficiency Syndrom)- Bublinové děti Nefunkčnost T i B lymfocytů (chybění g-c-řetězce a ztráta cytokinového receptoru) Infekce Klasická léčba - transplantace HLA-identické kostní dřeně Po genové terapii (T-lymfocytů) 9 z 11 dětí zlepšení 3,5 roku po terapii 14 z 15 dětí X-SCID žije Jsou schopny žít doma, ne pouze ve sterilním stanu Mají normální počet T lymfocytů CD4 i CD8 Odpovídají normálně na vakcinaci (diphtheria, tetanus, polio produkce T lymfocytů a protilátek). Produkce pl, je normální nepotřebují infuze imunoglobulinu

R. Michael Blaese, MD with Ashanthi DeSilva (left) and Cindy Kisik at the IDF 2013 National Conference, June 29. https://primaryimmune.org/first-gene-therapy-patients-attend-conference/

Genová terapie v praxi země, nemoci Do r. 2012 1843 klinických protokolů genové terapie v 31 zemích Ginn et al., J Gene Med 2013; 15: 65 77.

Ginn et al., J Gene Med 2013; 15: 65 77. Genová terapie v praxi vektory, typy genů

Genová terapie v praxi klinické zkoušky Ginn et al., J Gene Med 2013; 15: 65 77.

Genová terapie v praxi Léčiva na bázi genové terapie 2004 Čína - Gendicine C adenivirus p53 skvamózní Ca hlavy a krku 2012 -Evropa- Glybera (alipogene triparvovec) - familiární deficience lipoprotein lipázy AAV Kerstin B. Kaufmann et al.embo Mol Med (2013) 5, 1642 1661

Terapie nádorů Imunostimulační terapie, Sebevražedné geny 1) Imunologická modulace nádorových buněk (HLA antigeny)- in situ injekce HLA genu 2) Indukce imunitní reakce (TIL) 3) Produkce imunostimulačních faktorů (IL2) 4) Rekombinantní vakcíny 5) Metabolismus toxických molekul sebevražedné geny - produkty mění některé jinak neškodné substance v látky vysoce cytotoxické. Buňka, která sebevražedný gen exprimuje, ničí sama sebe. HSV-TK (VDEPT viral directed enzyme production therapy) sebevražedný gen 7) Geny inhibující vaskularitu nádorové tkáně a tím narušují krevní zásobení nádoru 8) Zvyšování terapeutického indexu modifikace normální tkáně- geny, které ji činí resistentnější na cytostatika a radioterapii

Genová terapie vs. genetická chirurgie Genová terapie - geny mají za úkol zasáhnout nebo opravit určitou molekulu zásadní pro existenci nádorové buňky Inhibice overexprimovaných genů (onkogenů), nebo dopravení v nádoru inaktivovaného genu (tumor-supresor) Strategie genové terapie Destrukce nádoru a metastáz onkolytickými viry nebo sebevražednými geny Strategie genetické chirurgie Genetická chirurgie cílem je destrukce nádoru jako takového - využívá vlastnosti společné pro všechny nádory Onkolytické viry sebevražedná GT Anti-angiogenní therapie Viroterapie oncolytické viry (reoviry) Onkolytické vektory roznáší protinádorové geny RNA interference

Řízená sebevražda buňky VDEPT viral directed enzyme production therapy 1. Gen HSV-TK Vpraven specifickým vektorem za specifickým promotorem do nádorové bb 2. Gancyklovir prodrug HSV-TK 4. Smrt buňky 3. GCV triphosphate Toxický terminace syntézy DNA, DNA fragmentace Gancyklovir analog nukleosidů - je HSV -TK, fosforylován na monofosfát, který je dále dotvořen buněčnými kinázami na trifosfát -vysoce toxický, protože blokuje syntézu DNA.

VDEPT viral directed enzyme production therapy Bystander effect postranní účinek -Toxické metabolity pronikají mezibuněčnými spoji i do neovlivněných bb. BB musí být v S-fázi BC Nature rew cancer (2001):130-141

Rizika a problémy GT Onkoviry jako vektory Geneticky manipulované bb Přenos virových genů i onkogenů, virem indukovaná mutageneze Imunitní odpověď vůči proteinům virových vektorů Problémy s udržením hladiny genové exprese

Rizika a neúspěchy GT září 1999: USA zemřel mladík s částečným vrozeným deficitem OTC (ornithine transcarbamylase) aplikována velká dávka adenovirových částic s OTC genem -zhoršení druhý den po aplikaci- další den upadl do komatu- syndrom akutní respirační tísně - dva dny později smrt na multiorgánové selhání způsobené anoxií. Syndrom systémové zánětlivé reakce (SIRS) ačkoli byl virus aplikován do jedné z jaterních cév a měl zůstat v jaterní tkáni, byl nalezen i v ostatních orgánech. $ 517000 finanční vyrovnání rodině pacienta, restrikce lékařům, kteří výkon provedli snížení investic do GT Francie 2002 terapie kmenových bb kostní dřeně - Říjen prosinec 2002!!! děti s X-SCID léčené genovou terapií leukémií T-buněk leukémie - LMO2 gen V 5 případech z 20 leukémie LMO2 = LIM domain transcription regulator angiogeneze

Molekulárně cílená terapie Cytotoxické látky používané v terapii rakoviny za účelem postihnout molekulární dráhy zodpovědné za kancerogenezi a udržení nádorového fenotypu. Terapie, která cíleně ovlivňuje pouze rakovinné buňky s minimálním účinkem na buňky normální Mírnější nežádoucí účinky než klasická chemoterapie. Inhibitory tyrosin kináz Anti-angiogenní a antimetastatické látky Inhibitory signální transdukce Inhibitory růstových faktorů a jejich receptorů (VEGF a VEGFR; EGFR) mtor inhibitory Inhibitory proteasomu Inhibitory CDK Inhibitory Bcl-2 Protilátky

Molekulárně cílená terapie Biologická terapie Biologická terapie (imunoterapie, bioterapie) Protinádorové vakcíny stimulují nebo restaurují schopnost imunitního systému postihnout nádor. 2 typy: 1) Preventivní (profylaktické) vakcíny - prevence rakoviny u zdravých. 2006 - the U.S. Food and Drug Administration (FDA) vakcína Gardasil (Silgard)- chrání proti infekci HPV (human papiloma virus) způsobuje asi 70 % Ca čípku děložního Cervarix - Evropa 2) Léčebné (terapeutické) vakcíny - léčí rakovinu posílením imunitní reakce. Oslabené nebo usmrcené nádorové buňky nesoucí nádorový antigen. Vlastní pacientovy buňky - autologní vakcína Buňky jiných pacientů - allogenní vakcína - Terapie melanomu.

Protilátky v léčbě nádorů Imunokonjugáty (imunotoxiny) Protilátky (monoklonální) konjugovány s cytotoxickou látkou, radioisotopem nebo toxin aktivujícím enzymem za účelem jejich dopravení do nádorové buňky. Nosiče dopravují cytotoxickou molekulu do nádorových buněk, aniž by poškodily bb normální.

Protilátky v léčbě nádorů Monoklonální pl po vazbě na nádorovou bb mohou: Zviditelnit nádorovou buňku pro imunitní systém. Rituxan váže se na CD20 antigen na povrchu B lymfocytů - označuje je pro reakci imunitního systému léčba leukémií Blokovat receptory růstových signálů. Cetuximab (Erbitux) - Ca střev, krku a hlavy, váže se na receptory epidermálního růstového faktoru. Dopravení radiace do nádorových bb - vazba radioaktivní částice na monoklonální protilátku - Ibritumomab (Zevalin) - non- Hodgkinův lymfom Dopravení chemoterapeutik do nádorových bb - Gemtuzumab váže se na specifické receptory leukemických buněk.

Kmenové buňky jako mediátory genů v genové terapii Použití pro obnovu funkce tkání - nosiče, které dopravují komplexní signály do cílových tkání ipsc Nobelova cena 2012 - Shinya Yamanaka Transkripční faktory Oct4, Sox2, cmyc, Klf4 Budoucnost léčba ipsc kombinováná s genovou terapií?! Kerstin B. Kaufmann et al.embo Mol Med (2013) 5, 1642 1661

Racionální návrh inhibitorů Rational drug design Molekulární terapie Vyhledání proteinu, který způsobuje nemoc (metodami proteomiky) a ušití na míru ( tailoring ) chemikálie, která narušuje funkci tohoto proteinu a to specificky s minimálními nežádoucími účinky

Rational drug design racionální návrh inhibitorů, Chemická genetika Strukturní biologie Malé molekuly, inhibitory kináz Three dimensional structure of a protein whose activity is implicated in certain cancers. At right is a close-up view of the structure with a bound inhibitory drug (potential chemotherepeutic). Počítačová metoda ( in silico ) kombinuje strukturní determinaci a počítačové modelování za účelem identifikace malé molekuly, komplementující se zbytky AMK v aktivním místě enzymu 3D rekonstrukce Léky na AIDS (Argenase, Viracept) vyvinuty na základě krystalické struktury HIVproteázy Léky na rakovinu Gleevec (Imatinib; BCR-ABL), Tarceva (EGFR) Léky na chřipku - Relenza, Tamiflu krystalická struktura neuraminidazy

Post-genomická éra a personalizovaná medicína

Post-genomická éra 2003 HUGO Asociační genomické studie (Genome-wide association studies - GWAS) Jednonukleotidový polymorfismus (SNP single nucleotide polymorphism) Personalizovaná medicína Farmakogenetika Asociační genomické studie (GWAS) :. Studie zabývající se variacemi lidského genomu zaměřené na identifikaci genů asociovaných s určitými znaky nebo výskytem určitých chorob nebo naopak odolností proti těmto chorobám.

Lidský genom obsahuje: - 21 000 genů kódujících proteiny - 2 850 genů pro monogenní mendelistické choroby - 1 100 lokusů ovlivňujících 165 polygenních chorob - 230 genů souvisejících s rakovinou E. S. Lander (2011) : Nature 470. 187-197.

Perzonalizovaná medicína It s far more important to know what person the disease has than what disease the person has. Hippocrates Navržení léčby na míru jednotlivým pacientům založené na porozumění molekulárním mechanismům choroby a vyšetření pacienta metodami molekulární biologie. The Case for Personalized Medicine 4th Edition 2014

Perzonalizovaná medicína Farmakogenetika Paving the Way for Personalized Medicine: FDA s Role in a New Era of Medical Product Development. FDA s Role in a New Era of Medical Product Development

Perzonalizovaná medicína % pacientů, u kterých dané léky nezabírají Paving the Way for Personalized Medicine: FDA s Role in a New Era of Medical Product Development. FDA s Role in a New Era of Medical Product Development

Paving the Way for Personalized Medicine: FDA s Role in a New Era of Medical Product Development. FDA s Role in a New Era of Medical Product Development Cílená terapie a diagnostika Trastuzumab (Herceptin, Genentech, Inc.) - Robert Weinberg 1979 objev HER-2, genu, jehož produkt je zúčastněn v několika drahách řídících růst nádorů. 20 let studia Dennis Slamon - Overexprese HER2 se objevuje u 20-25% nádprů prsu, Květen 1998, meeting American Society for Clinical Oncology (ASCO), Slamon presentoval Herceptin protilátku pro léčbu HER2 pozitivních nádorů revoluční okamžik první molekulárně cílená terapie - vypnutí funkce HER2 genu a zpomalující růst nádoru, aniž by poškozovala zdravé tkáně. Září 1998, FDA potvrdila Herceptin pro terapii HER2 pozitivních nádorů prsu. Ve stejný den uveden do praxe HercepTest (DAKO), in vitro assay detekující HER2 overexpresi = zároveň vyvinut cílený lék a cílená diagnostika nemoci U pacientek bez mutace HER2 je lék neúčinný, nebo může průběh nemoci zhoršit!!! Vemurafenib (Zelboraf) srpen 2011, FDA současně zavedla vemurafenib (Zelboraf) společně s Cobas 4800 BRAF V600E mutation testem, pro léčbu metastatického melanomu. Vemurafenib inhibuje BRAF V600E mutaci, ta se vyskytuje asi u 50% pacientů s melanomem. Všechny nádory nejsou stejné ani na nádory 1 orgánu není možno pohlížet jako na 1 nemoc!!!

Výhody perzonalizované medicíny The Case for Personalized Medicine 4th Edition 2014

Nádory se specifickou mutací The Case for Personalized Medicine 4th Edition 2014

Léky gb PHARM Warfarin The Case for Personalized Medicine 4th Edition 2014

Genetické testy gb PHARM Warfarin The Case for Personalized Medicine 4th Edition 2014

Perzonalizovaná medicína based medicine http://www.nejm.org/doi/full/10.1056/nejmp1006304 genome- http://www.genetherapynet.com/societies.h tml http://www.fda.gov/biologicsbloodvaccines /cellulargenetherapyproducts/default.htm