Mikroskopické preparační techniky pro analýzu rostlinných stonků

Podobné dokumenty
(cv03) Metody výroby mikroskopických preparátů z rostlinných pletiv

(cv04) Metody výroby mikroskopických preparátů z rostlinných pletiv (2. část) Preparáty pro dokumentaci tvorby dřeva a lýka

Stonek. Stonek příčný řez nahosemenná rostlina borovice (Pinus)

5. Anatomická a morfologická stavba dřeva

Vznik dřeva přednáška

Praktické cvičení č. 10.

DŘEVO pracovní list II.

Praktické cvičení č. 1.

Rostlinné orgány. Kořen (radix)

Název: VNITŘNÍ STAVBA STONKU

Zvyšování kvality výuky technických oborů

Sešit pro laboratorní práci z biologie

Inovace studia molekulární a buněčné biologie reg. č. CZ.1.07/2.2.00/

Gymnázium Přírodní škola 26. únor Pracovní listy pro botanické praktikum. Vedoucí práce: Anežka Koutníková

Inovace studia molekulární a buněčné biologie

LABORATORNÍ PRÁCE KLUB PAMPELIŠKA

Kód VM: VY_52_INOVACE_ 3MER26 Projekt: Zlepšení výuky na ZŠ Schulzovy sady registrační číslo: CZ.1.07./1.4.00/

Stavba stonku. Stavba stonku

SOUHRNNÝ PŘEHLED nově vytvořených / inovovaných materiálů v sadě

ROSTLINNÁ PLETIVA I. Tělo cévnatých rostlin (kormus) je rozdělené strukturně ifunkčně na orgány: kořen, stonek a list.

téma: Úvodní praktikum autor: Mgr. Michal Novák cíl praktika: Seznámit žáky s náplní praktika doba trvání: 2 místo: odborná učebna biologie

Praktické cvičení č. 8.

Rostlinná pletiva podle tvaru buněk a síly buněčné stěny Úvod - Doplňte chybějící místa v textu:

Praktický kurz Příprava nanočástic metodami syntézy v žížalách, charakterizace - Imunohistochemické barvení

Biologické základy péče o stromy II.

Stavba kořene. Stavba kořene

LABORATORNÍ PRÁCE Č.

Makroskopická stavba dřeva

Určování dřev podle makroskopických znaků

= soubor buněk, které jsou podobné nebo úplně stejné svým tvarem a svojí funkcí

Anotace: Materiál je určen k výuce přírodopisu v 7. ročníku ZŠ. Seznamuje žáky se základy obecné botaniky. Materiál je plně funkční pouze s použitím

Identifikace neznámých vzorků dřev REJVÍZ, MALÉ MECHOVÉ JEZÍRKO

VEGETATIVNÍ ORGÁNY ROSTLIN

Makroskopická stavba dřeva

ROSTLINNÉ ORGÁNY KOŘEN A STONEK

Princip tvoření nákresů složitých struktur, orgánů:

Praktické cvičení č. 9.

Stromy. Řešení. Pracovní list

Zvyšování kvality výuky technických oborů

Zvyšování kvality výuky technických oborů

TRVALÝ PREPARÁT. Zhotovení roztěru

Měření odporu transportních cest, stupně jejich integrace a embolizace

Mikroskopická stavba dřeva jehličnatých dřevin cvičení

Inovace studia molekulární a buněčné biologie

Rostlinná pletiva BIOLOGIE

Základy mikroskopování

Sešit pro laboratorní práci z biologie

Úvod do biologie rostlin Pletiva Slide 1 ROSTLINNÉ TĚLO. Modelová rostlina suchozemská semenná neukončený růst specializované části

Faktory ovlivňující strukturu dřeva

Název: VNITŘNÍ STAVBA KOŘENE

STAVBA ROSTLINNÉHO TĚLA

Praktická cvičení z biologie na gymnáziu

LABORATORNÍ CVIČENÍ Z BIOLOGIE. Téma: STAVBA A FUNKCE MIKROSKOPU, PŘÍPRAVA DOČASNÝCH PREPARÁTŮ

KAPRAĎOROSTY - KAPRADINY

Rostlinná pletiva. Milan Dundr

téma: Úvodní praktikum autor: Mgr. Michal Novák cíl praktika: Seznámit žáky s náplní praktika doba trvání: 2 místo: odborná učebna

DIGITÁLNÍ UČEBNÍ MATERIÁL

Protokol 04. pšeničná bílkovina. masné výrobky. zkrácená verze

Název materiálu: Stonek

Rostlinná buňka příprava mikroskopického preparátu (laboratorní práce)

Identifikace dřeva. Mikroskopické techniky rostlinných pletiv

Vladimír Vinter

OCELOVÉ A DŘEVĚNÉ PRVKY A KONSTRUKCE Část: Dřevěné konstrukce

MIKROBIOLOGIE. Grampozitivní kokovitá bakterie STAPHYLOCOCCUS AUREUS bakteriální kmen dle ATCC 1260 (CCM 888).

Praktické cvičení č. 11.

45 minut určování, v případě většího počtu vzorků dřeva i 90 minut, ideální činnost pro individuální práci nebo pro malé skupiny

Vitální barvení, rostlinná buňka, buněčné organely

Historie mikroskopu. 1 Přílohy. 1.1 Příloha 1: Prezentace k laboratorní práci. Mikroskop

Vegetativní rostlinné orgány. Milan Dundr

Příprava krevního roztěru

Gymnázium Olomouc Hejčín. Člověk a příroda versus Příroda a člověk Listnaté stromy olomouckého kraje (podtéma:stromy kolem nás)

1 Popis vzorku. 2 Detekční limit vyšetření. 3 Časová náročnost. 4 Zpracování vzorku. 4.1 Množství vzorku. 4.2 Odběr vzorků

Podtéma: Stromy. Název práce: Javory x-krát jinak. Členové Přírodovědného kroužku Klubu NATURA při Gymnáziu ve Dvoře Králové nad Labem

Vodní režim rostlin. Transport vody v xylemu. Kohezní teorie. Transport půda-rostlina-atmosféra. Metody měření. Kavitace

Vývoj stélé. parenchym. floém. xylém

KAPRAĎOROSTY. pracovní list

OBSAH 1 ÚVOD Výrobek a materiál Přehled a klasifikace materiálů pro výrobu ZDROJE DŘEVA... 13

Rozvoj vzdělávání žáků karvinských základních škol v oblasti cizích jazyků Registrační číslo projektu: CZ.1.07/1.1.07/

Jazykové gymnázium Pavla Tigrida, Ostrava-Poruba Název projektu: Podpora rozvoje praktické výchovy ve fyzice a chemii

Stavba těla rostlin. VY_32_Inovace_05_10_stavba_těla_rostlin_2.notebook. March 23, Škola. Vzdělávací oblast. Anotace.

BIOMASA OBNOVITELNÝ ZDROJ ENERGIE

Název: POZOROVÁNÍ PLASTIDŮ,VAKUOL, BUNĚČNÉ STĚNY Autor: Paed.Dr.Ludmila Pipková

Ing. Lubomír Kacálek III/2 Inovace a zkvalitnění výuky prostřednictvím ICT VY_32_INOVACE_TDŘ0513Vady dřeva I. vady struktury dřeva

ZÁKLADY ARBORISTIKY. Barbora Vojáčková, a kol. Mendelova univerzita v Brně Lesnická a dřevařská fakulta. Skriptum 2013

Rostliny na jaře - test

Inovace studia molekulární a buněčné biologie reg. č. CZ.1.07/2.2.00/

Jehličnany (laboratorní práce)

Sešit pro laboratorní práci z biologie

Stavba dřeva. Reakční dřevo. přednáška

Interní norma č /01 Rozlišení lnu a konopí ve formě vláken Kroucení vláken při dehydrataci

L01KA Fytocenologický výzkum

Praktické určování vybraných dřev listnatých dřevin s kruhovitě a polokruhovitě pórovitou stavbou podle mikroskopických znaků

BUNĚČNÁ STĚNA - struktura a role v rostlinné buňce

Transport živin do rostliny. Radiální a xylémový transport. Mimokořenová výživa rostlin.


Moravské gymnázium Brno s.r.o. RNDr. Monika Jörková. Tematická oblast. Biologie 22 Pletiva. Ročník 1. Datum tvorby

MIKROSKOPICKÁ STAVBA DŘEVA

Výzkumná zpráva. Dendrochronologické datování dřevěných konstrukčních prvků zámeckého divadla v Českém Krumlově

Úvod do biologie rostlin Úvod PŘEHLED UČIVA

Praktické cvičení č. 5.

Transkript:

Mikroskopické preparační techniky pro analýzu rostlinných stonků Cílem cvičení je demonstrace rychlé a efektivní mikroskopické preparační metody, která byla vyvinuta na základě letitých zkušeností v laboratořích ve Švýcarsku (Swiss Federal Research Institute WSL, Birmensdorf). Tato metoda umožňuje připravit mikrořezy částí rostlinných těl ve vysoké kvalitě a tím nám poskytuje další možnost, jak doplnit informace o životě zkoumaných rostlin. Anatomická stavba je u všech rostlinných druhů unikátní. Úvod: Kmeny stonky dvouděložných rostlin tloustnou díky činnosti kambia. Kambium je druhotné dělivé pletivo a nacházející se mezi lýkem (floém) a dřevem (xylém). Buňky kambia rostou ve směru poloměru stonku. Kambium vytváří xylémové složky a floém vytváří části cévních svazků a dřeňové paprsky. Činnost kambia je ovlivňována vnějším prostředím. Herbochronologie je anatomická metoda, která doplňuje informace o životě vytrvalých rostlin. V herbochronologické analýze je hlavním výstupem stanovení věku vytrvalých dvouděložných rostlin na základě počítání ročních přírůstů. Roční přírůsty letokruhy se objevují u rostlin, které jsou vystaveny jisté sezonalitě (střídání ročních období). Absolutní věk se zjišťuje z vytrvalé části rostlinného těla kořenového krčku (root collar), kde přechází kořen ve stonek (Crivellaro & Schweingruber, 2015). Během první části praktického cvičení si připravíme příčné mikrořezy (cross sections) u vybraných rozdílných rostlinných druhů (záleží na roční době a dostupnosti vhodného materiálu). Na základě příčných mikrořezů si určíme, jak byla rostlina stará a popíšeme si anatomickou stavbu mikrořezu. Doporučuji použít jako modelové druhy dvouděložných bylin jitrocel (Plantago), jahodník (Fragaria) a podběl (Tussilago). Druhá část praktického cvičení bude porovnání morfologické a anatomické stavby větvičky listnatého stromu. Zjistíme, jestli počet letokruhů na mikrořezu odpovídá odhadovanému stáří části větvičky a popíšeme si anatomickou stavbu vybraného listnatého stromu. Mikrořezy připravíme na Lab-Microtome. Následně preparáty vyčistíme chlornanem sodným (odstraníme fenoly a další nečistoty) a pak mikrořezy obarvíme barvivy AstraBlue (modrá) a Safranin (červená). Červeně se obarví buňky, které obsahují v buněčných stěnách lignin a modře se obarví buňky, které lignifikované nejsou. Díky dvojitému barvení vizuálně vyniknou dřevní části (xylem) letokruhy roční přírůsty. Upozornění: Při přípravě mikroskopických preparátů se používají chemikálie. Přineste si prosím laboratorní plášť.

Postup práce: 1. Část a) Připravíme si příčné mikrořezy kořenových krčků vybraných druhů dvouděložných rostlin. b) Mikrořezy vybělíme pomocí chlornanu sodného (preparáty zbavíme fenolů). Na preparáty nakapeme několik kapek chlornanu a necháme působit ca 2 minuty. c) Mikrořezy důkladně opláchneme destilovanou vodou. d) Na mikrořezy naneseme směs barviv (AstraBlue a Safranin poměr 6:4). Necháme působit ca 1 minutu. e) Přebytečnou barvu postupně vypláchneme lihem (1. technický líh, 2. 96% líh, 3. absolutní líh) a tím také dehydratujeme preparát. f) Poslední krok je důkladně opláchnout mikrořez xylenem. g) K fixaci preparátu se běžně používá Kanadský balzám. Nanese se pár kapek na preparát a přikryje se krycím sklem. Takto připravený preparát se zatíží magnetem a dá se sušit do sušárny na 60 C / 26 hodin. Abychom nemuseli příliš dlouho čekat, použijeme místo Kanadského balzámu průhledný lak na nehty. h) Počkáme půl hodiny. Po zaschnutí mikrořezy nafotíme a spolu je popíšeme. Obr. 1: Roční přírůsty vybraných druhů rostlin (jetel, jahodník a podběl). Předpokládaný výsledek první části praktického cvičení. Zde jsou fotografie bez popisu.

2. Část a) Vybereme si větvičku listnatého stromu a na základě její morfologické stavby odhadneme stáří jednotlivých letorostů. Označíme si je a vyfotíme. Připravíme si příčný mikrořez vybrané části větvičky listnatého stromu. b) h) se opakuje podle první části praktického cvičení. Obr. 2: Předpokládaný výsledek druhé části praktického cvičení.

Fotografický postup přípravy mikrořezů: Obr. P1: Technická údržba Lab-Microtome výměna žiletky a čištění. Obr. P2: Detailní náhled na uchycení vzorku do držáku mikrotomu. Obr. P3: Řezání příčného mikrořezu vzorku a manipulace s ním pomocí štětce.

Obr. P4: Potřebné chemikálie a laboratorní pomůcky k barvení a fixaci mikrořezů. Obr: P5: Postup oplachovaní mikrořezu a barvení mikrořezu. Obr. P6: Oplachovaní přebytečné barvy z mikrořezu pomocí několika typů lihů a xylenu.

Obr. P7: Fixace mikrořezu Kanadským balzámem.

Obr. P8: Zatížení magnety čerstvě zafixovaných mikrořezů a sušení v peci. Literatura: CRIVELLARO, Alan, Fritz H. SCHWEINGRUBER. 2015. Stem anatomical feature sof dicotyledons. Xylem, phloem, cortex and periderm characteristics for ecological and taxonomical analyses. ISBN: 978-3-945941-08-9. 2015 Verlag Dr. Kessel Poznámka: Fotografie s anglickým popisem byly vybrány z příručky Microscopic Preparation Techniques for Plant Stem Analysis (Crivellaro & Schweingruber, 2015).