Diagnostika a epidemiologie HIV Vratislav Němeček, Marek Malý NRL pro HIV/AIDS, Státní zdravotní ústav, Praha
Původ SIVy se přirozeně vyskytují u afrických primátů a není známo, že by vyvolávaly onemocnění Byla identifikována řada divergentních typů SIV a dá se říci, že každý infikovaný druh primátů má svůj vlastní specifický SIV x x x SIVcpz HIV-1/O SIVcpz HIV-1/N Pan troglodytes HIV-1/M SIVagmTAN SIVagmGRI Chlorocebus aethiops SIVagmVER SIVsyk Cercopithecus x HIV-2/B albogularis x HIV-2/A SIVsm Cercocebus SIVmnd atys SIVlhoest SIVsun Cercopithecus lhoesti SIVcol 0.1 Colobus guereza
Replikační cyklus viru HIV Virion HIV nese 2 kopie RNA Obalový protein HIV váže CD4+ receptor a chemokinový receptor na povrchu buňky Pučení viru z buněk a dozrávání virových částic Tvorba nových virových částic Chemokinový receptor Translace vir. proteinů Fuze vir. obalu s buněčnou membránou a vyklopení nukleokapsidy do buňky Reversní transkripce vir. genomu Vstup do jádra buněčné jádro Rozbalení Integrace provirové DNA do hostitelského genomu Transkripce Hostitelská buňka
Průběh infekce HIV 1200 Akutní fáze Chronická fáze AIDS 1000 CD4 + T buňky v krvi (buňky per mm 3 krve) 800 600 400 Rychlý pokles Set point Postupný pokles Začátek AIDS 200 Začátek infekce 6 12 2 4 6 8 10 Smrt týdny roky
Průběh infekce HIV log kopie HIV RNA/ml 1200 1000 Akutní fáze Chronická fáze AIDS 7 6 CD4 + T buňky v krvi (buňky per mm 3 krve) 800 600 400 Set point Rychlý pokles Postupný pokles Začátek AIDS 5 4 3 2 200 1 Začátek infekce 6 12 2 4 6 8 10 Smrt týdny roky
SOUČASNÁ LABORATORNÍ DIAGNOSTIKA HIV Detekce protilátek HIV-1/2 - EIA 3. generace (IgG i IgM) Současná detekce protilátek HIV-1/2 a antigenu p24 - EIA 4. gen. screeningový test (povinný pro screening dárcú krve, plasmy, dárců buněk, tkání a orgánů) i test diagnostický Detekce antigenu p24 / a konfirmace p24 antigenu Konfirmace protilátek HIV-1 nebo HIV-2 test western blot Kvantitativní průkaz HIV RNA virová nálož test PCR (v plasmě) HIV DNA (v buňkách)
LABORATOŘE VYŠETŘUJÍCÍ HIV Podmínky pro získání povolení hl. hygienika MZ ČR 1. Účast vedoucího laboratoře na jednodenním školení v NRL HIV/AIDS 2. Vedení laboratoře zajišťuje VŠ biologického zaměření 3. Pracoviště, kde se vyšetření provádí je způsobem stanoveným prováděcím právním předpisem umístěno a přístrojově a materiálově vybaveno (Vyhláška č. 306/2012 6) 4. Používání v ČR registrovaných testů 5. Dodržování pravidel správné laboratorní praxe 6. Účast v systému externí hodnocení jakosti 7. Měsíční hlášení počtu a charakteru provedených vyšetření 8. V případě reaktivního výsledku povinnost laboratoře předat vzorek k provedení konfirmačního testu do NRL HIV/AIDS
MOŽNOSTI VYŠETŘENÍ Základní vyšetření (nutný souhlas vyšetřované osoby) Screeningová povinná vyšetřování dárců krve nebo plasmy, dárců buněk, tkání, orgánů a těhotných žen. Diagnostická vyšetření indikovaná lékařem. Vyšetření na vlastní žádost pod jménem nebo anonymní pod kódem. Vyšetření v rámci prevence tj. zejména u osob s předpokládaným vyšším rizikem infekce HIV jako např. pracovníci v oblasti komerčního sexu, osoby s injekční aplikací drog, vězni, migranti, předoperační vyšetření, studie Konfirmační vyšetření Ze zákona 258/2000 Sb. je povinné každý vzorek reaktivní při základním vyšetření poslat ke konfirmaci do NRL pro HIV/AIDS. Pouze výsledek ověřený konfirmačním vyšetřením v NRL je možné označit za pozitivní.
MOŽNOSTI VYŠETŘENÍ Speciální vyšetření Stanovení virové nálože monitorující vývoj infekce a průběh léčby, genotypizační stanovení rezistence k antivirotikům, zjištění tropismu HIV pro indikaci určitého léčebného preparátu ev. stanovení genotypu viru HIV-1 skupiny M. Rychlé testy Průkaz anti-hiv, ev. antigenu p24 v krvi, ve slinách nebo stěru z dásní orientační, výsledek za cca 10-30 minut. např. při emergentních stavech, testování v rizikových skupinách (komerční sex, kluby MSM, IDU, ), provádí zdravotník nebo řádně školený pracovník. V EU a ČR nejsou rychlé testy certifikované pro sebetestování. Každý reaktivní výsledek musí vést k laboratornímu vyšetření z odběru žilní krve a konfirmaci nálezu standardním postupem. Hlavní problémy při užití rychlých testů jsou ve validním provedení testu a interpretaci výsledku a v dostupnosti a kvalitě před a po testového poradenství.
Postup konfirmace reaktivního vzorku (v NRL HIV/AIDS) posouzení výsledku testu provedeného terénní laboratoří (hodnoty S/CO, typ testu, ) 2 EIA testy jiné než v terénní laboratoři western blot (u dárců krve, plasmy) v případě reaktivity některého z testů pokračuje testování další EIA testy western blot imunoblot antigen p24 - u p24 reaktivních vč. konfirmace reaktivity HIV RNA PCR ve specifických případech výsledky negativní nejednoznačné výsledky testů málo materiálu pro dokončení konfirmace western blot pozitivní zkonfirmovaná pozitivita vyšetření p24 antigenu Negativní Nejasný Pozitivní
Princip kombinované EIA detekce anti-hiv protilátek a antigenu p24 (combo, Ag/Ab)
Relativní citlivost testů na HIV
Dynamika markerů a záchytnost testů Akutní retrovirové symptomy anti-hiv CD4 p24 HIV RNA 7 14 3 4 5 6 dny týdny
Nové případy infekce HIV v roce 2013 Relativní údaje na 100 000 obyvatel (ECDC) Zdroj: ECDC
absolutní počet 260 240 220 200 180 160 140 120 100 80 60 40 20 0 3 NOVÉ PŘÍPADY INFEKCE HIV V ČESKÉ REPUBLICE V JEDNOTLIVÝCH LETECH (jen občané ČR a cizinci s trvalým pobytem) 23 24 35 8 15 13 23 27 38 40 Absolutní údaje ke dni 31.10.2014 51 62 30 50 58 51 50 63 72 90 91 121 148 156 1985 1986 1987 1988 1989 1990 1991 1992 1993 1994 1995 1996 1997 1998 1999 2000 2001 2002 2003 2004 2005 2006 2007 2008 2009 2010 2011 2012 2013 2014 rok 180 153 212 235 208
HIV+ V ČR PODLE POHLAVÍ A LET - ZASTOUPENÍ HIV+ MUŽŮ 300 (občané ČR a cizinci s trvalým pobytem) Údaje za období 1.1.1995-31.10.2014 absolutní počet 250 200 150 100 50 48 77.4% 41 26 80.4% 65.0% 23 76.7% 34 68.0% 44 75.9% 41 80.4% 39 78.0% 49 77.8% 55 76.4% 71 70 78.0% 77.8% 97 80.2% 121 81.8% 130 83.3% 159 88.3% 140 91.5% 185 87.3% 211 89.8% 186 89.4% 0 1995 1996 1997 1998 1999 2000 2001 2002 2003 2004 2005 2006 2007 2008 2009 2010 2011 2012 2013 2014 rok ženy muži
ROZDĚLENÍ HIV POZITIVNÍCH PŘÍPADŮ V ČR PODLE ZPŮSOBU PŘENOSU (občané ČR a cizinci s trvalým pobytem) Údaje za leden-říjen 2014 homo/ bisexuální 141 67.8% heterosexuální 41 19.7% neobjasněný 11 5.3% z matky na dítě 1 0.5% injekční uživatelé drog 8 3.8% homo/ bisexuální + injekční uživatelé drog 6 2.9%
VYBRANÉ KATEGORIE PŘENOSU HIV V ČESKÉ REPUBLICE podle roku diagnózy (občané ČR a cizinci s trvalým pobytem) Absolutní údaje ke dni 31.10.2014 200 180 160 140 absolutní počet 120 100 80 60 40 20 0 1985 1986 1987 1988 1989 1990 1991 1992 1993 1994 1995 1996 1997 1998 1999 2000 2001 2002 2003 2004 2005 2006 2007 2008 2009 2010 2011 2012 2013 2014 rok homo/bisexuální injekční uživatelé drog heterosexuální
Podíl infekcí HIV u MSM z celkového počtu nově hlášených případů, Evropa (EU/EEA) 2013 Zdroj: ECDC
NOVÉ PŘÍPADY HIV V ČESKÉ REPUBLICE podle země původu (občané ČR a cizinci s dlouhodobým pobytem) Relativní zastoupení v období 1.1.1995-31.10.2014 100% 90% 80% 70% podíl 60% 50% 40% 37 44 56 25 40 45 47 44 52 57 76 70 98 109 111 139 111 150 170 157 30% 20% 10% 0% 3 7 6 5 10 13 4 6 11 15 14 21 23 39 45 41 42 62 65 51 1995 1996 1997 1998 1999 2000 2001 2002 2003 2004 2005 2006 2007 2008 2009 2010 2011 2012 2013 2014 rok residenti občané ČR
TESTOVÁNÍ KREVNÍCH VZORKŮ V TRANSFUZNÍ SLUŽBĚ V JEDNOTLIVÝCH LETECH (jen občané ČR a cizinci s trvalým pobytem) Absolutní údaje 1.7. 1987-31.10.2014 14 12 10 8 6 4 210 344 410 933 411 357 367 725 378 935 334 486 324 819 465 551 4 518 216 542 768 525 868 475 701 467 778 455 124 466 774 510 389 508 127 514 523 524 892 501 877 515 905 3 701 506 953 729 1 091 151 10 5 995 252 8 923 119 6 948 178 803 481 5 5 1 200 000 1 000 000 800 000 600 000 400 000 2 1 2 1 1 1 2 1 1 2 2 1 2 1 200 000 0 0 0 0 0 0 0 0 0 1987 1988 1989 1990 1991 1992 1993 1994 1995 1996 1997 1998 1999 2000 2001 2002 2003 2004 2005 2006 2007 2008 2009 2010 2011 2012 2013 2014 rok Počet pozitivních případů Počet vyšetření
RUTINNÍ TESTOVÁNÍ HIV U GRAVIDNÍCH ŽEN V JEDNOTLIVÝCH LETECH (jen občané ČR a cizinci s trvalým pobytem) Absolutní údaje ke dni 31.10.2014 20 250 000 18 16 14 12 10 8 6 4 2 0 128 024 0 200 835 157 300 1 1 119 560 121 653 2 2 129 360 4 128 424 7 126 708 4 123 436 3 117 727 4 121 201 6 127 824 4 136 269 2 134 579 0 138 030 5 137 963 136 797 3 3 147 159 144 809 4 4 141 805 9 134 716 122 709 3 3 117 679 7 116 761 3 95 339 4 200 000 150 000 100 000 50 000 0 1990 1991 1992 1993 1994 1995 1996 1997 1998 1999 2000 2001 2002 2003 2004 2005 2006 2007 2008 2009 2010 2011 2012 2013 2014 rok Počet pozitivních případů Počet vyšetření
TĚHOTENSTVÍ U HIV POZITIVNÍCH ŽEN (jen občané ČR a cizinci s trvalým pobytem) Absolutní údaje ke dni 31.10.2014 POROD 155 NOVOROZENCI 158 (dvojčata 3x) TĚHOTENSTVÍ 202 (rutinní testování 88) POTRAT HIV STATUS umělé ukončení 34 pozitivní 4 spontánní 9 negativní 103 neuzavřený 34 neznámý 17 OČEKÁVANÝ POROD 4 DĚTI NAROZENÉ PŘED ZJIŠTĚNÍM HIV POZITIVITY U MATKY pozitivní 3
Počty vyšetření a počty HIV pozitivních v jednotlivých letech podle důvodu vyšetření (bez skríninkových vyšetření) jen občané ČR a rezidenti 1.1.2002-31.12.2013 140 105000 120 112 121 90000 počet případů 100 80 60 40 20 0 89 89 83 81 78 78 67 59 59 48 50 52 43 40 36 36 34 25 25 27 23 20 16 9 10 9 6 7 9 11 12 6 6 2 2002 2003 2004 2005 2006 2007 2008 2009 2010 2011 2012 2013 75000 60000 45000 30000 15000 0 počet vyšetření rok vlastní žádost klinická diagnóza prevence vlastní žádost klinická diagnóza prevence
absolutní počet 35 30 25 20 15 10 5 0 100.0% STADIUM AIDS - PODÍL POZDĚ ZACHYCENÝCH PŘÍPADŮ (občané ČR a cizinci s trvalým pobytem) 50.0% 0.0% 28.6% 40.0% 50.0% 44.4% 53.3% 8.3% 23.1% 26.3% 50.0% Údaje ke dni 31.10.2014 37.5% 47.1% 60.0% 1986 1987 1988 1989 1990 1991 1992 1993 1994 1995 1996 1997 1998 1999 2000 2001 2002 2003 2004 2005 2006 2007 2008 2009 2010 2011 2012 2013 2014 rok AIDS s odstupem od diagnózy HIV 62.5% 50.0% 44.4% 69.2% 69.2% 61.1% 65.2% 55.2% 65.2% 69.2% 69.2% AIDS při prvním záchytu HIV 70.0% 80.8% 80.0%
HIV / AIDS, Česká rep., 1985 31.10.2014 Celkový počet HIV pozitivních 2330 M 1950 (83,7 %) Ž 380 (16,3 %) Z TOHO AIDS 423 M 344 (81,3 %) Ž 79 (18,7 %) Úmrtí ve stadiu AIDS 219 M 178 (81,3 %) Ž 41 (18,7 %) Úmrtí z jiné příčiny 91 M 80 (87,9 %) Ž 11 (12,1 %)
OSOBY ŽIJÍCÍ S HIV/AIDS V ČESKÉ REPUBLICE (občané ČR a cizinci s trvalým pobytem) Měsíční údaje ke dni 31.10.2014 2200 2000 1800 1600 absolutní počet 1400 1200 1000 800 600 400 200 0 1986 1987 1988 1989 1990 1991 1992 1993 1994 1995 1996 1997 1998 1999 2000 2001 2002 2003 2004 2005 2006 2007 2008 2009 2010 2011 2012 2013 2014 období HIV+celkem z toho AIDS
Odhad prevalence HIV v ČR (dle modelu Spektrum) a násobek oproti zjištěnému počtu žijících osob s infekcí HIV 4000 3500 1,9 3000 2,0 1,9 2,0 2500 2,3 2,2 2000 2,3 2,4 Počet HIV+ 1500 1000 500 2,3 2,3 2,4 2,3 0 2002 2003 2004 2005 2006 2007 2008 2009 2010 2011 2012 2013 odhad prevalence rok
Děkuji za pozornost
Děkuji za pozornost
Děkuji za pozornost
Děkuji za pozornost
Děkuji za pozornost