Strana: 1/ 58 Účinnost od: 01.09.2014 Výzkumný ústav rostlinné výroby, v.v.i. Výzkumný tým Genová banka (GB) Směrnice S 1 Výtisk číslo: Zpracoval za společnost: Ověřil: Schválil: Funkce: Jméno: Vedoucí skladu a dokumentace genové banky Ing. Ludmila PAPOUŠKOVÁ, Ph.D. Funkce: Jméno: Představitel vedení pro kvalitu Ing. Ludmila PAPOUŠKOVÁ, Ph.D. Funkce: Jméno: Datum: 29.8.2014 Datum: 29.8.2014 Datum: 29.8.2014 Vedoucí Výzkumného týmu GB Ing. Vojtěch HOLUBEC, CSc. Podpis: Podpis: Podpis Rozdělovník: Představitel vedení pro kvalitu Seznámení s dokumentem: Všichni pracovníci Výzkumného týmu GB Odpovědnost za změnové řízení: Funkce: Vedoucí skladu a dokumentace genové banky Jméno: Ing. Ludmila PAPOUŠKOVÁ, Ph.D. Tento dokument je duševním vlastnictvím instituce Výzkumný ústav rostlinné výroby, v.v.i. Výzkumný tým Genová banka. Rozmnožování a předávání třetí straně bez souhlasu vedoucího Výzkumného týmu Genová banka a autora není dovoleno.
Strana: 2/ 58 Účinnost od: 01.09.2014 OBSAH: OBSAH:... 2 LIST VYDÁNÍ:... 3 1. ÚČEL... 4 2. OBLAST PŮSOBNOSTI... 4 3. POJMY, DEFINICE A ZKRATKY... 4 3.1 POJMY A DEFINICE... 4 3.2 ZKRATKY... 7 4. ÚVOD... 8 4.1 POSLÁNÍ GENOVÉ BANKY... 8 4.2 KAPACITA GENOVÉ BANKY... 8 5. POPISY ČINNOSTÍ VYKONÁVANÝCH V RÁMCI GENOVÉ BANKY... 9 5.1 PŘEBÍRÁNÍ VZORKŮ PLODINOVÝCH KOLEKCÍ NP K USKLADNĚNÍ DO GB... 9 5.2 PŘÍPRAVA VZORKŮ PŘED ULOŽENÍM DO SKLADU GB... 10 5.2.1 Čistota semenných vzorků... 10 5.2.2 Zjišťování zdravotního stavu... 11 5.2.3 Zjišťování klíčivosti... 11 5.2.4 Vysoušení... 12 5.2.5 Zjišťování vlhkosti... 12 5.3 UKLÁDÁNÍ VZORKŮ PLODINOVÝCH KOLEKCÍ NP DO GB... 13 5.3.1 Seznam štítků, které označují vzorek ve skladu GB... 14 5.3.2 Záznam dat do pracovního sešitu... 16 5.4 OBJEDNÁVKA VZORKŮ Z PLODINOVÝCH KOLEKCÍ NP Z GB... 17 5.5 VÝBĚR VZORKŮ PLODINOVÝCH KOLEKCÍ NP Z GB... 18 5.5.1 Štítky k objednávce... 18 5.5.2 Sestavy k objednávce... 18 5.6 ODESÍLÁNÍ VZORKŮ PLODINOVÝCH KOLEKCÍ NP Z GENOVÉ BANKY... 20 5.7 REŽIM BEZPEČNOSTNÍCH DUPLIKACÍ... 21 5.7.1 Uskladnění slovenské bezpečnostní duplikace... 21 5.7.2 České bezpečnostní duplikace... 21 5.8 REŽIM KOLEKCE AEGIS... 21 5.9 MONITORING TEPLOTY VE SKLADU GB... 22 6. SOUVISEJÍCÍ DOKUMENTACE... 22 7. PŘÍLOHY... 22 Příloha č. 1 - Skladový záznamník... 23 Příloha č. 2 Standard Material Transfer Agreement CZ... 24 Příloha č. 3 - Standard Material Transfer Agreement ENG... 35 Příloha č. 4 - Protokol o navrácení nevyhovujícího rostlinného materiálu pro uskladnění do genové banky... 47 Příloha č. 5 - Protokol o předání vzorků do genové banky VÚRV,v.v.i. Praha... 48 Příloha č. 6 - Doporučené vlhkosti semen přijímaných k uložení do GB... 50 Příloha č. 7 Provozní řád a Pravidla pro vstup do prostor skladu a sušárny genové banky... 53
Strana: 3/ 58 Účinnost od: 01.09.2014 LIST VYDÁNÍ: Číslo vydání List číslo Popis změny Účinnost od Iniciátor změny 2 celý dokument Formální a obsahové změny v dokumentu 01.09.2012 PMK 3-0- Změna vedoucího oddělení, obsah dokumentu nezměněn 01.04.2013 PMK 4 celý dokument změna obsahu směrnice ve vazbě na změny odborné oblasti genové banky 01.09.2014 PMK
Strana: 4/ 58 Účinnost od: 01.09.2014 1. ÚČEL banky: Směrnice popisuje následující činnosti, které spadají pod proces chodu genové Přebírání vzorků plodinových kolekcí NP k uskladnění do GB, příprava vzorků před uložením do skladu GB: čistota semenných vzorků, zjišťování zdravotního stavu, zjišťování klíčivosti, vysoušení, zjišťování vlhkosti, ukládání vzorků plodinových kolekcí NP do GB, objednávka vzorků z GB, výběr vzorků plodinových kolekcí NP z GB, odesílání vzorků plodinových kolekcí NP z genové banky, režim bezpečnostních duplikací, monitoring teploty ve skladu GB, Provozní řád a pravidla vstupu do skladu a sušárny GB. 2. OBLAST PŮSOBNOSTI Tato směrnice je platná pro všechny zaměstnance instituce Výzkumný ústav rostlinné výroby, v.v.i. Výzkumný tým Genová banka. 3. POJMY, DEFINICE A ZKRATKY 3.1 Pojmy a definice AEGIS kolekce genetické zdroje rostlin zařazené do evropské virtuální kolekce v rámci ECPGR Aktivní kolekce - slouží pro střednědobé uchování životnosti semen (15 a více let) a zahrnuje veškeré GZR shromážděné v kolekcích jednotlivých druhů v plodinových kolekcích. Bezpečnostní duplikace - dlouhodobé záložní uskladnění nejvýznamnější části kolekce genetických zdrojů v jiné genové bance, zpravidla v cizině. Biologická rozmanitost - rozmanitost živých organismů z různých prostředí, včetně - mezi jinými suchozemských, mořských a dalších vodních ekosystémů a ekologických komplexů, jejichž jsou součástí; zahrnuje rozmanitost uvnitř druhů, mezi druhy a rozmanitost ekosystémů. Dohoda o přenosu materiálu - standardizovaný kontrakt nebo právně závazná dohoda mezi vlastníkem genetického materiálu a příjemcem materiálu (SMTA, Standard Material Transfer Agreement). Dostupnost - získávání a využívání genetických zdrojů konzervovaných in situ a ex situ, jejich produktů a případně jejich komponent, kromě jiného pro účely výzkumu, biologického průzkumu, konzervace, průmyslového a komerčního využití.
Strana: 5/ 58 Účinnost od: 01.09.2014 Genetická rozmanitost - dědičná rozmanitost v rámci populací a mezi nimi, která je vytvářena, posilována nebo udržována evolučními nebo výběrovými silami. Genetické zdroje - genofond rostlin, živočichů nebo jiných organismů obsahující užitečné znaky a vlastnosti současné nebo potenciální hodnoty. Genetický materiál současné nebo potencionální hodnoty. Genetické zdroje rostlin pro výživu a zemědělství - jakýkoli genetický materiál rostlinného původu představující současnou či potenciální hodnotu pro výživu a zemědělství. Genová banka - zařízení, kde jsou uchovávány sbírky genetického materiálu ve formě semen, tkání nebo reprodukce schopných buněk rostlin nebo živočichů. Soubor zařízení sloužících k využívání a konzervaci genetických zdrojů ex situ. Hodnocení genetického zdroje - shromáždění a vyhodnocení údajů o genetickém zdroji stanovených metodikou Národního programu, zejména o variabilitě užitkových znaků, úrovni heterozygotnosti populace, výskytu specifických alel a dalších znaků, zjišťovaných pomocí standardních vědeckých metod. Hodnocení genetického zdroje rostlin - stanovení agronomických znaků jako odolnost k chorobám, fenotypové projevy, produkční znaky, jako výnos a kvalita, nebo odolnost ke stresům prostředí. Projev mnoha těchto znaků závisí na prostředí, a proto jsou třeba k jejich stanovení speciální pokusnická uspořádání a techniky. Charakterizace - popis podstatných vlastností organismu nebo systému. Stanovení znaků, které umožní rychlé a snadné odlišení fenotypů. Tyto znaky jsou obvykle vysoce dědivé, se stejnou expresí ve všech podmínkách, lehce zjistitelné pohledem. Obvykle jsou to morfologické znaky (včetně taxonomických), které mohou následně být doplněné i o biochemické a molekulární markery. Kolekce genetických zdrojů rostlin - genetické zdroje rostlin jednoho druhu (popř. i rodu) shromážděné pro účely dokumentace, studia, hodnocení a využívání, zejména však pro potřeby dlouhodobého uchování. Kolekce shromažďuje pokud možno veškeré genetické zdroje daného druhu vyskytující se na území státu (regionu). Je ucelenou organizační jednotkou v péči o genetické zdroje, za její vedení a uchování odpovídá kurátor kolekce. Konzervace - dlouhodobé uchování rostlinného genetického zdroje rostlin pro budoucí využití (při zachování jejich genetického základu a schopnosti reprodukce). Krajová odrůda - stará kulturní forma určitého druhu zemědělské plodiny vyvinutá z planě rostoucí populace a obvykle složená z heterogenních genotypů. Odrůda plodiny vyšlechtěná a pěstovaná zemědělci, adaptovaná na místní podmínky prostředí. Kryokonzervace - uchovávání živého materiálu při supernízkých teplotách v prostředí kapalného dusíku (-196 C); používá se při uchovávání genofondu rostlin, spermatu a časných embryí. Kultivar/Odrůda - soubor rostlin náležející k nejnižšímu stupni botanického třídění, který lze vymezit projevem znaků vyplývajících z určitého genotypu nebo kombinace genotypů, odlišný od každého jiného souboru rostlin projevem nejméně jednoho z těchto znaků a považovaný za jednotku rozmnožovatelnou beze změny. Uskupení rostlin v rámci jednoho botanického taxonu nejnižší známé úrovně definované reprodukovatelným projevem svých odlišujících genetických vlastností. Monitoring genetických zdrojů - sledování trendů vývoje genetických zdrojů prostřednictvím průběžného zjišťování a vyhodnocování souboru dat. Měření změn ve stavu, počtech nebo výskytu znaků u genetického zdroje. Národní program rostlin dokument Národní program konzervace a využívání genetických zdrojů rostlin a agrobiodiversity vydaný MZe, v němž jsou zakotveny zásady pro nekompetitivní projekt zaměřený na uchování a využívání genofondu rostlin. Je součástí
Strana: 6/ 58 Účinnost od: 01.09.2014 širšího Národního programu udržování a využívání genetických zdrojů pro výživu a zemědělství, který zahrnuje mikroorganismy a hospodářská zvířata, ryby a včely. Ochrana genových zdrojů - ochrana druhů, populací, jedinců nebo jejich částí metodami in situ nebo ex situ k zachování rozmanitosti genetického materiálu pro současnou i příští generace. Ochrana ex situ - ochrana složek biologické rozmanitosti mimo jejich přírodní prostředí. Ochrana a udržování jednotlivých organismů mimo jejich přírodní prostředí, obvykle ve formě semen, pylu, orgánů sloužících k vegetativnímu rozmnožování, tkáňových či buněčných kultur nebo jedinců. Ochrana in situ - ochrana ekosystémů, přírodních stanovišť a udržování a obnova životaschopných populací druhů v jejich přírodních podmínkách a v případě domestikovaných a pěstovaných druhů v prostředí, kde byly vyvinuty jejich odlišovací znaky. Pasportní data - veřejně přístupná část dat vedených o ex-situ uchovávaných vzorcích v genobance. Informace o vzorku a místu jeho původu, obvykle zaznamenané při sběru (druh, doba sběru, přesná lokalizace, identifikační znaky, ekologické podmínky lokality atd.). Planý příbuzný (genetický zdroj) - nepěstovaný druh, který je více či méně příbuzný pěstované plodině (obvykle téhož rodu); není běžně užíván v zemědělství, ale může se vyskytovat v agroekosystémech (např. jako plevel nebo komponent pastvin či spásaných ploch). Polní genová banka - kolekce genetických zdrojů, zpravidla víceletých druhů rostlin, uchovávaná v polní výsadbě (genofondové sady, vinice, chmelnice). Na rozdíl od semenných druhů (uchovávaných ex situ v genové bance) plní polní kolekce u vegetativně množených rostlin rovněž funkci genové banky a jejím cílem je, vedle hodnocení, dlouhodobé uchování genetických zdrojů. Součástí konzervace (dlouhodobého uchování) genetických zdrojů v polní kolekci je jejich regenerace v případě přílišného stáří rostlin či jejich poškození, které by ohrozilo další existenci genetického zdroje či jeho genetickou integritu. Pro zvýšení bezpečnosti polních kolekcí může být tato metoda doplněna jinou metodou střednědobého či dlouhodobého uchování genetických zdrojů. Polní pokus - termín je míněn ve smyslu ověřování (testování) vegetace v polních podmínkách, není zde míněn jako výzkumná (experimentální) činnost ve smyslu čl. 7.3 normy ČSN EN ISO 9001:2009. Poskytovatel - jakýkoliv stát/organizace/skupina, která vlastní genetické zdroje, nebo je správcem těchto genetických zdrojů. Právní subjekt, který poskytuje genetický zdroj za dohodnutých podmínek. Příjemce - právní subjekt, který přijímá genetický zdroj za dohodnutých podmínek. Přístup ke genetickým zdrojům a rozdělování přínosů z nich - spravedlivé rozdělování přínosů vznikajících využíváním genetických zdrojů, které zahrnuje odpovídající přístup ke genetickým zdrojům a přenos příslušných technologií, bere v úvahu všechna práva k těmto genetickým zdrojům a technologiím. Rámcová metodika - dokument Rámcová metodika Národního programu konzervace a využívání genetických zdrojů rostlin a agrobiodiversity, která uvádí zásady pro práci s genetickými zdroji rostlin pro aktuální etapu Národního programu. Řešitel kolekce (kurátor kolekce) - osoba zodpovědná za vedení kolekce Národního programu rostlin (shromažďování, konzervaci, charakterizaci, hodnocení, dokumentaci). Pracovní kolekce - kolekce genetických zdrojů uchovávaná a využívaná pouze po určitou (omezenou) dobu (např. pro potřeby šlechtění či výzkumu). Po splnění účelu se kolekce zruší, případné cenné materiály se konzervují. V pracovní kolekci se často shromažďují pouze vybrané genetické zdroje, s určitými znaky a vlastnostmi, podle potřeby uživatele kolekce.
Strana: 7/ 58 Účinnost od: 01.09.2014 Rostlinný genetický materiál - jakýkoli materiál rostlinného původu, zahrnující reprodukční a vegetativní rozmnožovací materiál, který obsahuje funkční jednotky dědičnosti. Účastník Národního programu - instituce zařazená do Národního programu rostlin pověřená zodpovědností za vedení určitých plodinových kolekcí. Vzorek genetického zdroje - jednoznačně identifikovatelná dávka semen nebo rostlinného rozmnožovacího materiálu reprezentujících genetický zdroj (odrůdu, šlechtitelskou linii nebo populaci), který je shromažďován a uchováván pro další využití. Základní kolekce - slouží pro bezpečné dlouhodobé uchování GZR (50 i více let), zahrnuje genetické zdroje místního původu a významné zahraniční genetické zdroje. Není určena k distribuci uživatelům, ale může být využita pro účely regenerace. 3.2 Zkratky AEGIS CBD DNA ECN ECPGR EVIGEZ GB GPA GZ GZR HTS ISTA ITPGRFA IU PGR MLS MZe NP SMTA ÚKZÚZ VÚRV Evropská virtuální kolekce genetických zdrojů rostlin (A European Genebank Integrated System) Úmluva o biologické rozmanitosti (Convention on Biodiversity) deoxyribonukleová kyselina Evidenční číslo národní, jednoznačný identifikátor genetického zdroje Evropský program zahrnující genetické zdroje (European Cooperative Programme for Plant Genetic Resources) informační systém genetických zdrojů rostlin používaný v genové bance a Národním programu rostlin genová banka Globální plán akcí (Global Plan of Action for Conservation and Utilization of Plant Genetic Resources for Food and Agriculture ) genetický zdroj genetický zdroj rostlin hmotnost tisíce semen v gramech Mezinárodní asociace pro testování semen (International Seed Testing Association) Mezinárodní smlouva o genetických zdrojích rostlin pro výživu a zemědělství (International Treaty on Plant Genetic Resources for Food and Agriculture) Mezinárodní ujednání o genetických zdrojích rostlin (International Undertaking on Plant Genetic Resources Multilaterální systém ITPGRFA Ministerstvo zemědělství ČR Národní program konzervace a využívání genetických zdrojů rostlin a agrobiodiverzity, Národní program rostlin Standardní dohoda o převodu rostlinného materiálu (Standard Material Transfer Agreement) Ústřední kontrolní a zkušební ústav zemědělský Výzkumný ústav rostlinné výroby, v.v.i.
Strana: 8/ 58 Účinnost od: 01.09.2014 4. ÚVOD 4.1 Poslání genové banky Genová banka (GB) je zařízením zajišťujícím ex situ konzervaci genetických zdrojů rostlin (dále GZR) a slouží k dlouhodobému uložení semeny množených druhů zemědělsky využívaných rostlin a jejich planých příbuzných druhů. Výzkumný tým Genové banky zajišťuje rovněž distribuci vzorků uživatelům. Všechny informace o vstupech a výstupech jsou dokumentovány v informačním systému EVIGEZ a příslušná dokumentace je archivována v elektronické i v tištěné formě. Seznam dostupných GZR je publikován v online aplikaci na webu. Do genové banky se dlouhodobě ukládají semenné vzorky z plodinových kolekcí registrovaných účastníků Národního programu konzervace a využívání genetických zdrojů rostlin a agro-biodiverzity (dále jen NP), dále se dočasně mohou ukládat malé vzorky nebo sady vzorků pro instituce na smluvním základě a vzorky, které jsou výsledkem projektů, meziproduktem šlechtitelské nebo výzkumné činnosti a mohou být dále využívány jako genetické zdroje. Činnost genové banky je financována MZe v rámci Národního programu konzervace a využívání genetických zdrojů rostlin a agro-biodiverzity. Služby, které genová banky poskytuje, jsou zakotveny v zákoně č. 148/2003 Sb. a specifikovány ve vyhlášce 458/2003 Sb. a vyplývají též z mezinárodních smluv a dohod, které podepsala ČR (Mezinárodní ujednání o genetických zdrojích rostlin - IU PGR, 1983, Úmluva o biologické rozmanitosti - CBD, 1993, Globální plán akcí pro konzervaci a setrvalé využívání genofondu rostlin významných pro výživu a zemědělství GPA, 1996 a Mezinárodní smlouva o genetických zdrojích rostlin významných pro výživu a zemědělství ITPGRFA, 2006). 4.2 Kapacita genové banky Genová banky byla založena roku 1988 a v roce 2009-2010 proběhla její kompletní rekonstrukce. V současné době má genová banka k dispozici 10 klimatizovaných komor s teplotou udržovanou na -18 C ±5 C. Komory č. 1, 2, 3, 4, 6, 7, 8, 9, 10 mají jednotné uspořádání: 7 regálů, 13 nad sebou umístěných polic v regálu, 9 přepravek v řadě na jedné polici a 20 skladovacích obalů v jedné přepravce. Pouze komora č. 5 je větší, má 17 regálů, 13 polic a 9 přepravek v řadě. Komory, které nejsou v současné době obsazeny, jsou udržovány v pohotovostním režimu při teplotě +5 až +7 C. Celková kapacita skladu GB je 187 200 skladovacích obalů. Kapacita jednotlivých malých komor je po 16 380 skladovacích obalech a velká komora č. 5 má kapacitu 39 780 skladovacích obalů. Jako skladovací obaly slouží komerčně používané sklenice s twist uzávěrem o objemu 370 a 210 ml. Skladovací obaly jsou po 20 kusech uloženy v plastových přepravkách a přepravky jsou uloženy na policích v posuvných regálech. Souhrnné označení komory, regálu, police, přepravky a sklenice udává lokalizaci vzorku ve skladu GB. Ve všech standardních komorách jsou umístěny vždy po 2 ks kovové skříně pro další využití, velká komora č. 5 má 5 skříní. Komory 1-4 mají ještě k dispozici pevný zadní regál pro uložení dalších vzorků, které vyžadují skladovací teplotu -18 C ±5 C (smluvně ukládané vzorky, dočasně uložené bezpečnostní duplikace, které jsou shromažďovány před hromadným odvozem do uskladnění v GB v Piešťanech, apod.). Pro krátkodobé skladování semen plodinových kolekcí nebo je k dispozici celkem 28 skříní umístěných ve třech oddílech chodby GB, které jsou chlazené na +5 C. Všechen rostlinný materiál uložený provizorně ve skříních je dokumentován a dokumentace uložena v archivu techniků skladu GB.
Strana: 9/ 58 Účinnost od: 01.09.2014 5. POPISY ČINNOSTÍ VYKONÁVANÝCH V RÁMCI GENOVÉ BANKY 5.1 Přebírání vzorků plodinových kolekcí NP k uskladnění do GB Vzorky semen k uskladnění do genové banky musí být předány pověřeným řešitelem kolekce, který je pracovníkem instituce-účastníka NP (seznam účastníků NP a zodpovědnosti za jednotlivé kolekce je uveden v Rámcové metodice Národního programu- (dále jen Metodika), která je uveřejněna na webové stránce Národního programu (http://genbank.vurv.cz/genetic/nar_prog/default.htm). Vzorky jsou předávány buď osobně (nejčastěji řešitelem kolekce, případně jeho zástupcem) nebo jsou posílány do genové banky doporučenou poštou. Vzorky jsou předávány do genové banky současně s Protokolem o předání vzorků do genové banky VÚRV,v.v.i. Praha (viz příloha č. 5 a Metodika). V předávacím protokolu zodpovědný řešitel kolekce specifikuje celkový počet předávaných GZR, způsob a rok sklizně, deklaruje zdravotní stav, vlhkost, upřesňuje způsob distribuce, případně uvádí zvláštní požadavek na další manipulaci se vzorkem. Součástí předávacího protokolu je seznam vzorků, který musí obsahovat identifikátor GZR (ECN), taxonomický druh nebo alespoň rod (latinsky), název nebo jiné označení genetického zdroje pro kontrolu správnosti (Donorno, Otherno), hmotnost vzorku v gramech a požadavek na typ uskladnění (aktivní, základní, pracovní kolekce, bezpečnostní duplikace (viz Metodika), hmotnost 1000 semen, rok sklizně. Počet předaných GZR odpovídá počtu jednotlivých ECN, nikoliv fyzickému počtu vzorků (např. 1 ECN může být předáváno jako aktivní i základní kolekce, počítán je však jen 1 GZR). Předávací protokol ve dvou vyhotoveních je opatřen podpisem řešitele kolekce a datem předání vzorku k uskladnění do skladu GB. Za genovou banku předávací protokol podepisuje vedoucí skladu genové banky, vedoucí Výzkumného týmu Genové banky nebo některý z techniků skladu genové banky a každá strana obdrží jeden originální protokol s oběma podpisy. Pokud je součástí zásilky vzorků určené k uložení do GB jen jeden originál předávacího protokolu, potom originál s podpisem předávajícího i přebírajícího je uložen v GB a kopie dokumentu se vrací řešiteli kolekce. Technik genové banky ukládá předávací protokoly v pořadí podle data dodání do dokumentace příjmu do skladu GB. Seznam ukládaných vzorků GZR z každé dodávky je uložen i v elektronické dokumentaci skladu. Technik skladu GB nejprve provede fyzickou kontrolu předávaných vzorků porovnáním se seznamem v předávacím protokolu. Pokud se zjistí nedostatky, technik skladu GB upozorní na nesrovnalosti vedoucího skladu GB, a ten kontaktuje zodpovědného řešitele kolekce, aby chyby vzniklé mimo Výzkumný tým Genové banky byly co nejdříve odstraněny. Nejčastějším nedostatkem v seznamech je nesprávně uvedené ECN, někdy seznam vzorků počtem neodpovídá přesně počtu předávaných vzorků. Vzorky, které nemají přidělené ECN a v dokumentačním systému chybějící pasportní záznam, nemohou být do genové banky uloženy. Po převzetí a vstupní kontrole jsou vzorky co nejrychleji dále zpracovávány standardním postupem před uložením do skladu GB (viz kap. 5.2). Pokud není z kapacitních důvodů možnost vzorky začít ihned připravovat pro uložení do skladu, přesouvají se do skříní v klimatizované chodbě GB, které jsou pro tento účel vyhrazeny (chodba GB č. CH2, skříně č. 1-6), kde při stálé teplotě +5 C mohou být provizorně uchovány po dobu až 1 roku před vlastním uložením na definitivní místo ve skladu GB. Schéma prostor GB je uvedeno v příloze č. 7. Předávané semenné vzorky musí splňovat základní předpoklady na označení, dokumentaci, množství, čistotu, zdravotní stav a klíčivost jak uvádí Metodika a Vyhláška 458/2003 Sb., příloha k vyhlášce č. 1 (doporučená velikost vzorku), č. 3 (minimální požadavky na klíčivost). Podmínky vstupu do skladu a sušárny GB jsou uvedeny v příloze č. 7.
Strana: 10/ 58 Účinnost od: 01.09.2014 5.2 Příprava vzorků před uložením do skladu GB Vzorky jsou po převzetí zaznamenány do skladového záznamníku (viz příloha č. 1), je jim přiřazeno jednoznačné pořadové číslo tzv. číslo příjmu. Prvotní záznam obsahuje datum příjmu, číslo příjmu, ECN, botanický druh/rod a název nebo označení GZR. Vzorky jsou na začátku opatřeny provizorními štítky, které vzorek označují od převzetí až po uložení do skladu GB, kdy je vzorek ve skladovacím obalu definitivně označen skladovacím štítkem. Samolepicí štítky jsou tištěny se základními ověřenými údaji přímo z pasportu a nově doplňované údaje (skladové číslo příjmu a později i kód umístění) se na provizorní štítky píší ručně. Štítky se lepí na kartonové lístky o velikosti 110 x 60 mm. Pro vzorky kultivarů, šlechtitelských materiálů s údajem ECN, druh, název GZR, stát původu, číslo příjmu. Kód skladu je přiřazován až při doplnění záznamu do skladového záznamníku před vlastním umístěním do klimatizovaného skladu: Pro vzorky získané ze sběrových expedic je doplněno kromě údajů předchozího štítku i další označení (Otherno, kde je vyznačeno číslo sběru): 5.2.1 Čistota semenných vzorků Technik skladu nejprve kontroluje vizuálně čistotu vzorků. Vzorky musí být homogenní, prosté příměsí (kamínků, částeček zeminy, úlomků semen nebo jejich obalů). Do skladu GB se ukládají jen vzorky nemořené. Úroveň čistoty musí dosahovat 98 %, jinak vzorek musí být před uskladněním dodatečně přečištěn. Pokud je přítomno menší množství příměsí v jednotlivém vzorku (max. do 10 %), přečištění je provedeno technikem skladu GB. Zjevně nevyhovující vzorky (obsahující >10 % nečistot) jsou vráceny k přečištění zpět řešiteli kolekce, který je zodpovědný za kvalitu, a tedy i čistotu uskladněných semen. Neodpovídající vzorky jsou řešiteli odesílány zpět poštou spolu se záznamem o důvodu navrácení a doporučením, jak zajistit nápravu (viz příloha č. 4 Protokol o navrácení nevyhovujícího rostlinného materiálu do GB včetně seznamu nevyhovujících vzorků). Technik skladu upozorní na případné nesrovnalosti v kvalitě a vedoucí skladu GB rozhodne o dalších opatřeních. Výjimky viz: Minimální požadavky na klíčivost a čistotu vybraných semenných vzorků předávaných pro konzervaci v genobance příloha č. 3 k Vyhlášce č. 458/2003 Sb.
Strana: 11/ 58 Účinnost od: 01.09.2014 5.2.2 Zjišťování zdravotního stavu Zdravotní stav je kontrolován vizuálně a semena musí být celistvá, prostá viditelného poškození, prostá známek infekce, prostá přítomnosti plísní nebo škůdců. Test je namátkově prováděn i pod binokulární lupou při 10 20-ti násobném zvětšení. Pokud jsou zjištěny závady ve zdravotním stavu, vzorek je řešiteli odesílán zpět poštou spolu se záznamem o důvodu navrácení (protokol o navrácení nevyhovujícího rostlinného materiálu do GB včetně seznamu nevyhovujících vzorků). Netestuje se původce případných chorob, hodnotí se jen celkový zdravotní stav. Do genové banky se ukládají jen vzorky bez viditelných známek chorob nebo mechanického působení škůdců. Pokud vzorek nevyhovuje zdravotním standardům, je vrácen zpět řešiteli kolekce poštou spolu se záznamem o důvodu navrácení a doporučením, jak zajistit nápravu (protokol o navrácení nevyhovujícího rostlinného materiálu do GB včetně seznamu nevyhovujících vzorků). Technik skladu upozorní na případné nesrovnalosti v kvalitě a vedoucí skladu GB rozhodne o dalších opatřeních. 5.2.3 Zjišťování klíčivosti Vzorky semen, které jsou ukládány do genové banky, musí splňovat minimální požadavky na klíčivost podle Metodiky a Vyhlášky 458/2003 Sb. (příloha k vyhlášce č. 3). V případě, že řešitel kolekce uvádí údaje o klíčivosti ukládaných semen v předávacím protokolu, technici genové banky tyto údaje přebírají do dokumentace a kontrolují klíčivost jen namátkově u 10 % ukládaných vzorků. Ze všech ostatních ukládaných vzorků je odebíráno po 100 semenech na zjištění klíčivosti. Pouze výjimečně u velkosemenných druhů (jako např. fazol, hrách) může být odebráno na test jen po 50 semenech. Klíčivost se zjišťuje podle pravidel ISTA (International Seed Testing Association), International Rules for Seed Testing, ISTA Edition 2011, Chapter 5 Germination, p.5-1 5-78. Standard ISTA specifikuje minimální počet testovaných semen na 100 (nebo 50 případně 25 v opakování, aby celkový minimální počet dosáhl 100). Standard ISTA je však určen pro semenářské použití, tj. pracuje s velkým množstvím dostupného osiva. V případech, kdy je k dispozici pro uložení do genové banky jen omezené množství osiva, počet semen použitých na test klíčivosti může být snížen na 50. Semena se odpočítávají do čistých Petriho misek o průměru 8,5 cm nebo 10 cm, které jsou na víčku označovány identifikátorem ECN a skladovým číslem příjmu (víčka jsou značena permanentním popisovačem na sklo) a na dně jsou Petriho misky pokryty kruhovým filtračním papírem stejného průměru. Semena pro testování klíčivosti se umísťují buď na povrch filtračního papíru, nebo mezi dvě vrstvy filtračního papíru v závislosti na druhu. Filtrační papír je zvlhčován destilovanou vodou ze střičky a Petriho miska uzavřená víčkem se ukládá do klimatizovaného boxu pro klíčení semen, teplota nastavena nejčastěji na 20 C (v případě některých druhů je potřeba nastavit nejprve teplotu 15 C a zvýšit na 20 C, případně u jiných druhů zvýšit na přechodnou dobu z 20 C na 30 C). Předepsané doby klíčení, teploty, způsob osvětlení a další podmínky nutné pro standardní zjišťování klíčivosti jednotlivých druhů jsou uvedeny v pravidlech ISTA (tabulka 5A). V tabulce 5A jsou uváděny doby klíčení pro jednotlivé druhy a podrobně je popisován způsob hodnocení klíčenců na normální a abnormální, odlišována jsou dormantní a mrtvá semena. V případě dormance semen jsou uvedeny způsoby, jak dormanci přerušit. V případě tvrdosemennosti (např. jeteloviny) je nutné provádět skarifikaci, tj. narušit tvrdé osemení skalpelem nebo jehlou, aby klíček rostliny mohl snáze prorůst. Skarifikace musí být prováděna velmi opatrně, aby nedošlo k poškození embrya. Po uplynutí předepsané doby klíčení se počítá výsledná klíčivost jako % normálních klíčenců a všechny údaje (o normálních a abnormálních klíčencích, mrtvých semenech
Strana: 12/ 58 Účinnost od: 01.09.2014 případně tvrdosemennosti nebo dormanci) se zaznamenávají do skladového záznamníku a posléze do skladové databáze. Pokud vzorek nevyhovuje standardům klíčivosti, může být vrácen zpět řešiteli kolekce poštou spolu se záznamem o důvodu navrácení a doporučením, jak zajistit nápravu (protokol o navrácení nevyhovujícího rostlinného materiálu do GB včetně seznamu nevyhovujících vzorků). Technik skladu upozorní na případné nesrovnalosti v kvalitě a vedoucí skladu GB rozhodne o dalších opatřeních. Výjimky viz: Minimální požadavky na klíčivost a čistotu vybraných semenných vzorků předávaných pro konzervaci v genobance Příloha č. 3 k Vyhlášce č. 458/2003 Sb. a Metodika. Poznámka: Někdy je potřeba vzorek uskladnit, i když plně nevyhovuje standardům a konzervovat ho do doby další regenerace, kterou řešitel naplánuje na nejbližší možný termín. Pokud je z nějakého důvodu již převzatý a zaznamenaný vzorek vyřazen ze skladování, je zrušen jeho záznam ve skladovém sešitě a příslušné číslo příjmu zůstane prázdné nepoužívá se znovu pro jiný GZR, podobně jako je tomu u zrušených ECN (viz Metodika. 5.2.4 Vysoušení Předpokladem pro převzetí vzorku ke skladování v GB je doporučená vstupní vlhkost 12-15 %, tj. zralé vzorky ortodoxních semen po standardní sklizni při normální vzdušné vlhkosti. Před vlastním uložením do skladovacích obalů se vlhkost semen snižuje vysoušením v sušárně. Sušárna genové banky je uzavřená místnost s kontrolovanou nastavitelnou teplotou (klimatizační jednotka Hitachi) a kontrolovanou nastavitelnou vlhkostí (vysoušecí jednotka DST-S6 Consorb DC 031B doplněná elektronickým vlhkoměrem EH-4 s displejem od firmy Siba Geiku). Vzorky jsou umisťovány v tenké vrstvě (max. do 1-1,5 cm) do obdélníkových plastových misek (280 x 150 x 40 mm) a označovány jsou provizorními štítky. Misky jsou vkládány až po112 kusech do sušárenského vozíku. Vozíky s miskami jsou umisťovány do sušárny, kde při teplotě 15-20 C a při relativní vlhkosti 17-20 % dochází k pomalému snižování vlhkosti semen. Sušárna pojme až 6 plných sušárenských vozíků. Vzorky obilnin jsou při těchto podmínkách vysoušeny po dobu 2-4 týdnů, drobnosemenné druhy (např. trávy, aromatické druhy) mohou být vysušené dostatečně již po 1-2 týdnech a naopak, velkosemenné vzorky (např. fazol, hrách) se vysušují po dobu 6-8 týdnů, pokud je to potřeba, i déle. Vlastní doba vysoušení je ovlivněna i počtem současně vysoušených vzorků v prostoru sušárny a vstupní vlhkostí vzorků. Pro výsledek je rozhodující tzv. doporučená úroveň obsahu vody v semenech pro dlouhodobé uskladnění, která záleží na druhu (viz Metodika. Obecně je úroveň obsahu vody ve skladovaných semenech vedle teploty skladování rozhodujícím faktorem při dlouhodobém udržení životnosti semen. 5.2.5 Zjišťování vlhkosti Vstupní vlhkost přijímaných vzorků nemá podle Rámcové metodiky přesahovat 15 %. Zjišťování vlhkosti semen je prováděno destruktivním způsobem pomocí sušící váhy Radwag MAC 50/01 nebo Sartorius MA30. Přístroj je vybaven automatickými vahami a elektrickou píckou s prostorem určeným k žíhání semen při teplotě 130 C pro běžná semena nebo 105 C pro olejnatá semena. Váhy jsou nejprve vytárovány na 0 s prázdnou násypkou. Na násypku se navažuje 5 g drobných semen. Pokud velikost semen přesahuje v průměru 1-2 mm, semena jsou před stanovením vlhkosti rozemleta v mlýnku na velikost částeček do 0,5 mm. Velikost semen
Strana: 13/ 58 Účinnost od: 01.09.2014 nutná pro rozemletí je hodnocena vizuálně zkušeností technika. Automatické váhy s pamětí zaznamenají vstupní hmotnost, zapne se žíhání v pícce a po docílení neměnné výsledné hmotnosti váhy zvukovým signálem označí konec žíhání, pícka se automaticky vypne a váhy na displeji ukážou výslednou vlhkost v %. Výsledná vlhkost je porovnána s tabulkou doporučených vlhkostí pro daný druh (viz příloha č. 6 Doporučené vlhkosti semen přijímaných k uložení do GB), a pokud se pohybuje v doporučeném intervalu, semena mohou být ukládána do skladu GB (viz Metodika. Pokud je vlhkost vyšší než doporučený interval, vzorek se vrací do sušárny a technik odhadne podle doby vysoušení a konečné vlhkosti, jak dlouho bude potřeba vzorek dále dosoušet. Po této době se měření vlhkosti opakuje. Vlhkost se testuje jen u nejvýše 5 % vzorků stejného druhu, který byl předán jedním řešitelem, neboť se předpokládá stejná úroveň obsahu vody. Vzhledem ke skutečnosti, že vzorky mají jen omezenou hmotnost, která většinou právě naplní požadavky jednoho typu kolekce (aktivní nebo základní) a nelze příliš snižovat jejich množství, na vlhkost testují se jen vzorky s největší hmotností. U drobnosemenných druhů s nízkou hmotností 1000 semen, kdy doporučené množství pro uskladnění v GB je nižší nebo rovno 5 g, nelze vlhkost zjišťovat, neboť by vzorek byl testem vlhkosti zlikvidován. Musí být brán rovněž zřetel na omezené možnosti přesevů u některých genetických zdrojů. Výsledná vlhkost je zaznamenána do skladového záznamníku (viz Příloha č. 1). Po vysušení a testu vlhkosti je vzorek zvážen na automatických vahách Sartorius s přesností na 0,1 g a údaj je zaznamenán do skladového záznamníku. 5.3 Ukládání vzorků plodinových kolekcí NP do GB Vzorky, které splňují požadavky na čistotu, klíčivost, hmotnost, vlhkost a jsou doplněny příslušnými informacemi (ECN, číslo příjmu) jsou seřazeny nejčastěji podle ECN nebo podle čísla příjmu a je jim podle typu kolekce, do níž mají být zařazeny, určena lokalizace ve skladu. Jednotlivé typy kolekcí (viz Metodika) mají v komorách vyhrazené místo a označení. Schéma rozmístění jednotlivých typů kolekcí v komorách uvádí tabulka v Metodice. Systém značení regálů pro jednotlivé typy kolekcí vychází ze starého značení původních komor 1-5 před rekonstrukcí a liší se uspořádáním v jednotlivých komorách. (Např. komora č. komora č. 5 obsahuje pouze aktivní kolekci; komora č. 4 zahrnuje všechny 4 typy kolekcí: aktivní, základní, pracovní i bezpečnostní duplikaci). Nové komory, které byly doplněny při rekonstrukci, mají jednotný návrh uspořádání vždy pro 3 typy kolekcí: základní (regály A a B), aktivní (regály C - F) a buď pracovní, nebo bezpečnostní duplikaci v regálu G. Vzorky kolekcí genetických zdrojů, které jsou součástí Národního programu, jsou řádně dokumentovány a umístěny v kódovaných regálech, ostatní vzorky jsou ukládány do skříní v komorách nebo v zadních pevných regálech komor 1-4. Komory jsou značeny na dveřích zvenku velkými čísly 1-10. Fyzické označení skladového kódu na regálech jednotlivých komor černě vytištěné štítky: Regály velká písmena A - G (velká komora A - Q) Na regálech jsou umístěny ještě barevné štítky, které označují typ kolekce: Zelené A aktivní kolekce Červené Z základní kolekce Modré W pracovní kolekce Žluté S bezpečnostní duplikace Fialové E AEGIS kolekce
Strana: 14/ 58 Účinnost od: 01.09.2014 Vlastní kód lokalizace vzorku ve skladu je šestimístný alfanumerický údaj, který sestává z následujících kódovaných součástí: komora, regál, police, přepravka a skladovací obal (sklenice). Jednotlivé části údaje jsou označeny kódy v rozmezí: Komory čísla 1-10 Regály 1 znak, velká písmena A - G (velká komora A - Q) Police 1 znak, velká písmena A - M Přepravky 1 znak, čísla 1-9 Skladovací obaly (sklenice) 2 znaky, čísla 1-20 Do jedné lokalizace (skladovacího obalu) se umisťuje vždy jen 1 vzorek. Objemově menší vzorky drobnosemenných druhů se vkládají do skladovacích obalů 210 ml, všechny ostatní druhy jsou uchovávány v skladovacích obalech o objemu 370 ml. Poznámka: Před rekonstrukcí skladu GB muselo být v minulosti z důvodu nedostatku místa v případě některých malých vzorků (zvláště u pracovních kolekcí nebo vzorků získaných ze sběrových expedic) vkládáno i několik vzorků do jednoho skladovacího obalu. Vzorky se ponechávaly v originálních obalech (většinou papírových sáčcích), aby nedošlo k jejich záměně. Takové vzorky s duplikovaným uložením v 1 skladovacím obalu jsou označeny příznakem v dokumentaci, takže mohou být snadno dohledány. Vzorky, které jsou připraveny na uskladnění, se pomocí kónické násypky vkládají do čistých a suchých skladovacích obalů a značí se definitivními štítky, každý skladovací obal má celkem 3 štítky. V případě, že dochází k doplnění starých štítků za nové s čárovými kódy, ponechává se i původní štítek ve skladovacím obalu, a pak označení sestává ze 4 štítků. 5.3.1 Seznam štítků, které označují vzorek ve skladu GB Samolepicí štítek na sklenici speciální plast, velikost 61 x 38 mm, termotisk, lepí se po délce zvenku na skladovací obal čárový kód 2. řádek: ECN čárový kód poslední řádek: číslo příjmu, oddělovač:*, kolekce, kód skladu (komora, regál, police, přepravka, sklenice) Samolepicí štítek do sklenice papír, laserový tisk, velikost 105 x 37 mm, lepí se na kartonový štítek velikosti 110 x 60 mm a vkládá se spolu se semeny dovnitř skladovacího obalu. čárový kód 2. řádek: ECN čárový kód poslední řádek: číslo příjmu, oddělovač:*, kolekce, kód skladu (komora, regál, police, přepravka, sklenice)
Strana: 15/ 58 Účinnost od: 01.09.2014 Štítek umísťovaný do sklenice je obsahem informace shodný se štítkem nalepeným vně skladovacího obalu, pouze materiálem se štítky liší. Samolepicí štítek na víčko skladovacího obalu speciální plast, velikost 32 x 25 mm, termotisk čárový kód: komora, regál, police, přepravka, sklenice je shodný s poslední částí kódu předchozích dvou štítků na umísťovaných na skladovací obal a dovnitř skladovacího obalu Pokud je vzorek objemnější než 1 sklenice, rozděluje se do více skladovacích obalů. To platí především pro velkosemenné druhy. Aby bylo dosaženo doporučeného minimálního počtu semen pro aktivní a základní kolekci (Metodika: standard 1 nebo standard 2), bývá nutné jeden vzorek umístit do několika skladovacích obalů. Počet skladovacích obalů pro jeden vzorek není omezen, ale celkové množství se řídí doporučenými počty semen. Někdy je tentýž vzorek ukládán zároveň do základní i aktivní kolekce a je potřeba ho rozdělit do více skladovacích obalů. Pokud neurčí řešitel kolekce jinak, je 1/3 vzorku ukládána do základní kolekce a 2/3 do aktivní kolekce. Hmotnosti jednoznačně lokalizovaných vzorků jsou zaznamenány do skladové dokumentace (manuálně do pracovního sešitu a elektronicky do databáze). Pokud je uvedena hmotnost tisíce semen (HTS), lze vypočítat celkový počet semen ve skladovacím obalu, případně celkový počet semen v ukládání vzorku. Do označených skladovacích obalů na umístěná semena se volně vkládá malý sáček se silikagelem obarveným indikátorem vlhkosti (modrým, který při zvýšení vlhkosti mění barvu do růžova, případně oranžovým, který se zvlhčením barví do zelena). Plastové sáčky o velikosti 7 x 4 cm naplněné vysušeným obarevným silikagelem (5 8 g) se připravují předem, plast se vícenásobně propichuje jehlou, aby se zajistila prodyšnost. Sáčky se silikagelem se uchovávají v uzavřených exsikátorech s volně uloženým silikagelem, aby nedocházelo k jejich zvlhnutí ještě před vložením do skladovacích obalů se semeny. Štítkem označené víčko s kódem skladu (shodným s kódem na štítku na skladovacím obalu a uvnitř sklenice a odpovídajícím umístění ve skladu) se uzavře pootočením po směru hodinových ručiček co nejpevněji na sklenici. Označený skladovací obal se semeny a sáčkem silikagelu se vkládá do plastové přepravky pro 20 pozic podle následujícího schématu:
Strana: 16/ 58 Účinnost od: 01.09.2014 Schéma řazení skladovacích obalů do přepravek 17 18 19 20 16 15 14 13 9 10 11 12 8 7 6 5 1 2 3 4 Přepravky určené k uložení do skladu GB jsou označeny následujícím typem štítků 2x (zleva a zprava) na přední straně přepravky. Samolepicí štítek na přepravku speciální plast, velikost 32 x 25 mm, termotisk čárový kód: komora, regál, police, přepravka Označené a naplněné přepravky se podle kódu skladu umisťují do příslušných komor, regálů a polic. 5.3.2 Záznam dat do pracovního sešitu Všechna data jsou zaznamenána do skladového záznamníku (sešitu). Součástí záznamu je datum příjmu vzorku, pořadové číslo příjmu, identifikátor genetického zdroje (ECN), botanický druh (nebo rod), název GZR, nebo jiné označení, rok sklizně, vlhkost při vstupu do skladu GB, klíčivost zjištěná v GB nebo deklarovaná zodpovědným řešitelem, hmotnost vzorku v g, hmotnost tisíce semen (HTS) v g, datum uložení do GB, typ kolekce, lokalizace ve skladu GB (kombinace kódu komora + regál + police + přepravka + sklenice). Kombinace ECN, čísla příjmu a lokalizace ve skladu je jedinečným identifikátorem vzorku. Záznamy v skladovém sešitě jsou archivovány a mohou sloužit k zpětnému dohledání případných chyb, které mohou vzniknout při přepisu informace do dokumentačního systému. Všechny údaje jsou zaznamenány do dokumentačního systému EVIGEZ pomocí formulářů určených k záznamu ukládaných vzorků přepisem dat z pracovního sešitu. Poznámka: Teprve po záznamu skladovacích údajů lze tisknout shora popsané štítky k trvalému označení skladovacích obalů, víček a přepravek.
Strana: 17/ 58 Účinnost od: 01.09.2014 5.4 Objednávka vzorků z plodinových kolekcí NP z GB Objednávka vzorků z genové banky probíhá podle Metodiky. Uživatelé mohou objednat vzorky genetických zdrojů rostlin poštou, faxem nebo emailem, případně i telefonicky, a to buď přímo v genové bance, nebo u řešitele příslušné kolekce. Řešitel kolekce může objednávku vyřídit sám nebo může objednávku přeposlat do GB, pokud se jedná o generativně množené druhy. K výběru materiálu slouží uživatelům on-line katalog genetických zdrojů rostlin EVIGEZ (http://genbank.vurv.cz/genetic/resources/), kde je uvedena i okamžitá dostupnost jednotlivých vzorků. Vzorky jsou poskytovány uživatelům v souladu se zákonem č. 148/2003 Sb. a závaznými mezinárodními dokumenty pro účely výzkumu, šlechtění a vzdělávání. Objednávka musí obsahovat adresu uživatele, účel, ke kterému bude rostlinný materiál použit a seznam požadovaných genetických zdrojů. Seznam požadavků by měl obsahovat identifikátor GZR, druh nebo rod, název nebo jiné označení. Objednávka je pracovníky genové banky vyřizována v co nejkratším možném termínu ( Metodika NP). Odpověď na požadavek uživatele je odeslán do 14 dní od jeho doručení do GB, i v případě, že požadavek nemůže být ze závažného důvodu uspokojen. Došlá objednávka obdrží pořadové číslo, které se skládá z roku objednávky (čtyřčíslí), lomítka a pořadového čtyřmístného čísla v rámci roku (volná místa vpředu jsou vyplněna nulami) Příklad: 2011/0006. Tímto číslem jsou opatřeny všechny dokumenty, které se týkají jedné objednávky. Text objednávky je archivován spolu s dalšími dokumenty týkajícími se objednávky. V případě, že se jedná o požadavek, který může být uspokojen materiálem, který je v příruční rezervě řešitele příslušné kolekce (např. zbytky originálního materiálu získané přímo od šlechtitelských firem nebo semenný materiál z poslední sklizně, apod.), pak číslo objednávky má tvar rok objednávky (čtyřčíslí), lomítko, písmena SK a 2 číslice (jednotky s nulou vpředu) Příklad: 2011/SK03. Objednávky tohoto typu jsou archivovány odděleně od objednávek uspokojených ze skladu GB. Všechny požadavky, které pocházejí mimo řešitelská pracoviště NP musí být doplněna Standardní dohodou o poskytování vzorků genetických zdrojů rostlin pro výživu a zemědělství (SMTA, Standard Material Transfer Agreement), v němž se objednatel zavazuje k nekomerčnímu využití získaného rostlinného materiálu. Česká verze dokumentu SMTA je použita pro domácí uživatele (viz příloha č. 2) a anglická verze pro uživatele ze zahraničí (viz Příloha č. 3). Součástí SMTA je seznam vzorků, které je možno distribuovat. Tento seznam je doplněn vedoucím skladu genové banky do formuláře SMTA podle možností a okamžité dostupnosti uskladněného materiálu. Do záhlaví formuláře se vyplňuje příslušné číslo objednávky a dokument se převede do pdf formátu. Specifický dokument SMTA se odesílá poštou, jako příloha emailu nebo faxem uživateli, který doplní údaje o adresátovi, nechá dokument podepsat statutárním zástupcem a potvrzený dokument odešle zpět do genové banky. Teprve po obdržení potvrzeného SMTA lze vybírat vzorky ze skladu GB. Pro urychlení zásilky je doporučeno adresátovi poslat vyplněný a podepsaný dokument elektronicky a originál dodatečně poštou. SMTA je podepisován statutárními zástupci obou stran. V případě VÚRV,v.v.i je statutárním zástupcem ředitel. Vedoucí Výzkumného týmu Genová banka však má pověření ředitele podepisovat SMTA v jeho zastoupení. Pohyb vzorků, které patří do Multilaterálního systému (MLS) a jsou označeny v Annexu I ITPGRFA, je monitorován a v souladu s mezinárodními pravidly o výměně genetických zdrojů rostlin podléhá mechanismu podávání zpráv pověřenému subjektu FAO. Oznamovací proces probíhá elektronicky koncem kalendářního roku prostřednictvím webovské aplikace na serveru FAO (http://mls.planttreaty.org/itt/). Vzorky druhů, které nejsou obsaženy v Annex I ITPGRFA jsou distribuovány rovněž na základě SMTA, jejich pohyb však nepodléhá oznamovacímu procesu FAO.
Strana: 18/ 58 Účinnost od: 01.09.2014 5.5 Výběr vzorků plodinových kolekcí NP z GB Distribuce vzorků probíhá jen z aktivní kolekce, a musí být k dispozici dostatečné množství semen pro distribuci a vzorek je označen v deskriptoru Dostupnost znakem Y označujícím volnou dostupnost. Pouze pro účely regenerace nebo monitoringu klíčivosti lze odebírat i ze základní kolekce. Ze základní kolekce je výjimečně možné odebírat vzorek v případě, že aktivní kolekce není v GB uložena a zároveň řešitel dotčené plodinové kolekce souhlasí nebo požádá o distribuci takového vzorku. Bez souhlasu řešitele není možné vzorek z režimu základní kolekce distribuovat. Pokud je vzorek označen jako podmíněně dostupný s nutným souhlasem řešitele plodinové kolekce, Dostupnost je označena L, potom vedoucí skladu GB požádá emailem nebo telefonicky o schválení distribuce odpovědným řešitelem příslušné plodinové kolekce. V případě dostupnosti označené N, W nebo P může být vzorek odebrán pouze pro regeneraci a na vyžádání odpovědného řešitele příslušné kolekce. O možnosti odebrat vzorek (případně v jakém objemu) rozhoduje vedoucí skladu GB, který zároveň zvolí nejvhodnější semennou dávku pro distribuci (označenou číslem příjmu, rokem sklizně, úrovní originality a potvrdí typ kolekce, z níž se distribuuje). Datový soubor se seznamem vzorků patřících k jedné objednávce slouží k tisku štítků a sestav, které jsou odesílány uživateli. Vedoucí skladu nebo technik skladu GB vytiskne štítky a sestavy podle destinace uživatele buď v češtině, nebo v angličtině. 5.5.1 Štítky k objednávce a) Ukázka štítku na vzorek určený pro domácího uživatele: b) Ukázka štítku na vzorek určený pro zahraničního uživatele: 5.5.2 Sestavy k objednávce a) Sestava sloužící pro výběr vzorků ze skladu GB (1x), která má v záhlaví číslo objednávky, datum a obsahuje následující deskriptory: ECN, název GZ, stát původu, kód skladu, množství v skladovacím obalu, dostupnost a požadované množství. Vedoucí skladu poznamená požadavek na SMTA, případně rostlinolékařský certifikát. Sestava se po odebrání vzorků archivuje spolu s objednávkou, potvrzeným SMTA a dalšími dokumenty.
Strana: 19/ 58 Účinnost od: 01.09.2014 Příklad sestavy pro výběr vzorků ze skladu GB: b) Sestava se seznamem distribuovaných vzorků (2x)), která má v záhlaví číslo objednávky, datum a obsahuje následující deskriptory: ECN, druh, název GZ, stát původu. Sestava je k dispozici opět ve dvou jazykových versích pro domácí nebo zahraniční uživatele. Jedna kopie se archivuje spolu s dalšími dokumenty náležejícími k jedné objednávce. Příklad sestavy se seznamem distribuovaných vzorků - česky: Příklad sestavy se seznamem distribuovaných vzorků - anglicky:
Strana: 20/ 58 Účinnost od: 01.09.2014 Štítky pro odesílané vzorky se lepí na plastové sáčky o velikosti 14 cm x 8 cm uzavíratelné lištou, do nichž technici skladu GB odebírají vzorky určené pro objednávku podle sestavy pro výběr vzorků ze skladu. Sestavy pro výběr vzorků ze skladu jsou řazeny podle kódu skladu a technici do připravené přepravky v každé komoře soustředí nejprve skladovací obaly, z nichž budou odebírány vzorky pro jednu objednávku. Každou přepravku (případně jen jednotlivý skladovací obal) zvlášť přenesou do přípravny semen, kde jsou skladovací obaly se semeny umístěny po nejkratší možnou dobu určenou jen k odběru vzorků. Do připravených plastových sáčků opatřených štítky technici skladu odpočítají požadované množství semen, zváží odebrané množství a údaje o odběru zaznamenají do pracovního sešitu určeného pro záznam odběru ze skladu GB. Doporučená množství distribuovaných semen specifikuje vyhláška č. 458/2003 Sb. v 11. Velikost poskytovaného vzorku genetického zdroje rostlin je závislá na biologických vlastnostech daného druhu a na kvalitě a množství skladovaného materiálu. U cizosprašných druhů množených semeny se velikost poskytovaného vzorku pohybuje v rozmezí 50 až 100 semen, u samosprašných druhů v rozmezí 40 až 60 semen. U specifických cizosprašných druhů je minimální velikost vzorku genetického zdroje rostlin uvedena v příloze č. 4., viz též Metodika. Pokud uživatel uvedl v objednávce nižší než je ve vyhlášce doporučené množství semen, je odebráno jen toto minimální množství. Přepravka/y se vzorky nebo jednotlivé skladovací obaly se po odběru semen ihned vracejí na původní místa v jednotlivých komorách. Po ukončení výběru z jedné komory se postupuje případně do další komory a proces odběru se postupně opakuje i dále. Před navrácením skladovacího obalu je podle potřeby vyměněn plastový sáček s obarveným silikagelem. Sáček se vymění, pokud se jeho obsah odbarví. Pokud barva silikagelu ve skladovacím obalu zůstává nezměněna i po odběru semen, sáček se silikagelem se nemění, jen se pevně uzavře víčko na sklenici a vzorek se navrací zpět na původní místo ve skladu GB. V případě, že skladovací obal nemá sáček se silikagelem (neboť jeho aplikace nezačala od začátku skladování v GB), je sáček s vysušeným obarveným silikagelem do skladovacího obalu doplněn. 5.6 Odesílání vzorků plodinových kolekcí NP z genové banky Semenné vzorky připravené pro odeslání v polyetylenových sáčcích opatřených štítkem se kontrolují na úplnost podle sestavy, která je přiložena k zásilce. Zásilku doprovází dále kopie Standardní dohody o předání materiálu (Standard Material Transfer Agreement) podepsaná oběma stranami v české verzi pro domácí uživatele nebo anglické verzi pro zahraniční adresáty. Pokud se jedná o domácího uživatele nebo uživatele ze zemí EU, vzorky jsou odeslány doporučenou poštou. Jedná-li se o zahraničního uživatele mimo země EU, je nutno přiložit fytokaranténní osvědčení o zdravotním stavu distribuovaných semenných vzorků. To je vystavováno Státní rostlinolékařskou správou na základě žádosti obsahující údaje o instituci distributora a adresáta, seznam druhů a hmotnost vzorků, které jsou obsahem zásilky. V některých případech adresát požaduje garanci za absenci specifických chorob, které fytokaranténní certifikát musí vyjmenovat. Fytokaranténní osvědčení nesmí být starší než 3 měsíce před odesláním. Některé státy (např. USA, Austrálie apod.) vyžadují před dovozem importní povolení, které je specifické pro zásilku a které musí zajistit adresát. Jeho kopii je nutno přiložit k zásilce. Jiné státy vyžadují pro-forma fakturu vyjadřující cenu importovaného osiva a specifikují způsob využití pro výzkumné účely. Pro-forma faktura je volný text prohlašující symbolickou cenu materiálu (s podpisem vedoucího genové banky a razítkem ústavu) vyžadovaný celním úřadem dovozce. Veškerá dokumentace (objednávka, sestavy pro výběr vzorků ze skladu genové banky, kopie SMTA) je archivována technikem skladu genové banky.