Metodika kontrol uzavřeného prostoru při nakládání s geneticky modifikovanými mikroorganismy Školení pracovníků Miroslav Pátek Mikrobiologický ústav AV ČR, v.v.i. Laboratoř molekulární genetiky bakterií MBÚ AV ČR, v.v.i.
Návrh metodických pokynů k provádění kontrol uzavřeného prostoru, kde se nakládá s GMM 1. Vedení dokumentace 2. Opatření v uzavřeném prostoru 3. Přítomnost GMM Postupy detekce přítomnosti geneticky modifikovaných mikroorganismů Vývojové diagramy: Kontrola přítomnosti GMM při nakládání 1. kategorie Kontrola přítomnosti GMM při nakládání 2. Kategorie
Kontrola dokumentů pro uzavřené nakládání s GMM 1. Oznámení Oznámení o nakládání s GMO Provozní řád Havarijní plán (jen 2. kat rizika a vyšší) Hodnocení rizika (ne starší 5 let) Požadavky na uzavřený prostor 2. Potvrzení o odeslání Havarijního plánu hasičskému záchr. sboru kraje a krajskému úřadu 3. Potvrzení o oprávněnosti nakládat s GMO Vyžadují grantové agentury 4. Školení zaměstnanců 1x ročně: Záznam: prezenční listina, obsah školení 5. Smlouva s firmou likvidující odpady (2. kategorie) 6. Provozní řád a Havarijní plán (2. kat) vyvěšený v každé místnosti, kde se nakládá s GMO (+podpis poradce). Přílohy Provozního řádu: Aktuální seznam proškolených pracovníků. Poradce, kontaktní a odpovědná osoba, plán prostor 7. Provozní deník Plány etap (+podpis poradce) Závěry etap (+podpis poradce) Protokoly Zápisy o kontrolách 8. Oznámení o dovozu GMO (dopis na MŽP) 9. Vyplněný formulář Hodnocení rizik ekologické újmy 10. Roční hlášení (+podpis poradce)
Kontrola opatření v místnostech, kde probíhá uzavřené nakládání s GMO 1. Znak BIOHAZARD na dveřích Povinné od 2. kategorie rizika Do místnosti mají přístup jen pracovníci proškolení pro práci s GMO 2. Lednice a mrazáky obsahující GMO označeny (GMO nebo BIOHAZARD) 3. Provozní řád a Havarijní plán (2. kat) vyvěšený v každé místnosti, kde se nakládá s GMO (+podpis poradce). Přílohy Provozního řádu: Aktuální seznam proškolených pracovníků. Vyznačené osoby: poradce, kontaktní a odpovědná osoba. Příloha: plán prostor s vyznačenými uzávěry vstupních médii (plyn, voda atd.) 4. Zabezpečená okna neotvíratelná nebo se sítí 5. Pláště označené BIOHAZARD k dispozici ochranné rukavice, pytel na použité pláště 6. Dezinfekce (Ajatin, SAVO) na výrazně označeném místě 7. Nádoby na odpad označené GMO 8. Zajištěný systém důsledné inaktivace GMO autoklávování nebo chemická dezinfekce (SAVO, ajatin) 9. Označené uzavřené nerozbitné nádoby (schrány, boxy) na přenášení GMO mimo uzavřený prostor k dispozici 10. Funkční biohazard box a klimatizace 2. kategorie rizika
Kontrola přítomnosti GMM při nakládání 1. kategorie rizika
Kontrola přítomnosti GMM při nakládání 2. kategorie rizika
GMO Kategorie 1 GMO 1. Provozní řád 2. Ochrana: Pláště BIOHAZARD rukavice 3. Okna 4. Lednice a mrazáky označeny: GMO nebo BIOHAZARD 5. Dezinfekce: na označeném místě Základní dokument: Seznam proškolených pracovníků. Kontakt na odpovědnou osobu a poradce Použité pláště do pytle BIOHAZARD Neotevíratelná nebo s neodstranitelnou sítí patřičné hustoty, místnost utěsněna SAVO, ajatin a speciální přípravky pro dezinfekci ploch a pokožky Dezinfekce vzduchu: UV-lampa 6. Odpad: do nádob označených GMO 7. Inaktivace GMO: všechny odpady Autoklávování nebo dezinfekce 8. Odpady Po inaktivaci výlevka nebo směsný odpad 9. Přenášení GMO mimo místnost Uzavřené nerozbitné nádoby, boxy, označení GMO 10. Provozní deník Základní údaje o nakládání GMO Kategorie 1 GMO
1. Provozní řád a Havarijní plán 2. Ochrana: Pláště BIOHAZARD rukavice, případně obuv, brýle 3. Okna 4. GMO Kategorie 2 GMO Dveře, lednice a mrazáky označeny: GMO nebo BIOHAZARD 5. Dezinfekce: na označeném místě 6. Biohazard box, klimatizace 7. Odpad: do nádob označených GMO Seznam proškolených pracovníků. Kontakt na odpovědnou osobu a poradce Použité pláště do pytle BIOHAZARD Neotevíratelná nebo s neodstranitelnou sítí patřičné hustoty, místnost utěsněna SAVO, ajatin a speciální přípravky pro dezinfekci Dezinfekce vzduchu: UV-lampa Práce jen v boxu s laminárním prouděním, HEPA filtr, opatření pro omezení šíření aerosolu 8. Odpady: Inaktivace všech GMO Autoklávování nebo dezinfekce, po inaktivaci odevzdat odpad pro likvidaci specializovanou firmou 9. Přenášení GMO mimo místnost Uzavřené nerozbitné nádoby, boxy, označení GMO 10. Provozní deník Základní údaje o nakládání GMO Kategorie 2 GMO
Provozní řád a havarijní plán pro pracoviště, která nakládají s biologickými činiteli - NE GMO Provozní řád a havarijní plán pracoviště, které nakládá s biologickými činiteli Upozornění: Nenahrazuje provozní řád a havarijní plán tam, kde je požadován zákonem č. 78/2004 Sb., o nakládání s geneticky modifikovanými organismy a genetickými produkty! Tento dokument je určen pro všechna pracoviště, kde se nakládá s potenciálně škodlivými biologickými činiteli... Vymezení biologických činitelů 1. Biologickými činiteli jsou všechny mikroorganismy, buněčné kultury a endoparaziti, kteří mohou vyvolat infekční onemocnění nebo alergické a toxické projevy v živých organizmech. 2. Biologické činitele se klasifikují podle míry rizika infekce do čtyř skupin. Zde se uvádí pouze skupina 1 a 2.
Klasifikace: Příloha 7 Nařízení vlády č. 361/2007 Sb., kterým se stanoví podmínky ochrany zdraví při práci + nové seznamy 2014 Skupina 1: Biologické činitele, u nichž není pravděpodobné, že by mohly způsobit onemocnění člověka laboratorní kmeny Escherichia coli, Saccharomyces cerevisiae Skupina 2: Biologické činitele, které mohou způsobit onemocnění člověka a mohou tedy být nebezpečím pro zaměstnance. Je však nepravděpodobné, že by se rozšířily do prostředí mimo pracoviště. Účinná profylaxe nebo léčba případného onemocnění jsou obvykle dostupné. Candida albicans, Staphyloccocus aureus, Francisella tularensis Provozní řád a havarijní plán. Dostupné na webu MŽP GMO: http://www.mzp.cz/cz/uzavrene_nakladani_gmo Pokyny k provoznímu řádu a havarijnímu plánu pro všechna pracoviště, kde se nakládá s potenciálně škodlivými biologickými činiteli
Návrh metodiky školení zaměstnanců pracujících s geneticky modifikovanými organismy Návrh koncepčně nové metodiky školení pracovníků, má za cíl zdůraznit klíčová opatření a postupy, které mají být uplatňovány tak, aby byla na každém pracovišti důsledně dodržována "správná praxe nakládání s GMO." Vzhledem k tomu, že na většině pracovišť s GMO dochází k častým obměnám personálu a studentů, je metodika školení zaměřena na jednoduché, přehledné a soustavné i periodické seznamování pracovníků se zásadami práce s GMO
Školení Nakládání s geneticky modifikovanými organismy podle zákona 78/2004 Sb. Miroslav Pátek Odborný poradce pro nakládání s GMO
Co je GMO? Organismus kromě člověka, jehož dědičný materiál byl změněn genetickou modifikací provedenou způsoby vyjmenovanými v zákoně (bod 1 přílohy 1), většinou technikami cílené modifikace. Ke vzniku geneticky modifikovaných organismů nevedou: přirozená rekombinace, náhodné mutace, bakteriální konjugace, transformace, transdukce (kde není použita uměle připravena rekombinantní DNA), přirozená fúze buněk a indukce haploidie a polyploidie Geneticky modifikované organismy Mikroorganismy (včetně buněčných linií) Rostliny Živočichové
Legislativa ZÁKON 78/2004 Sb. o nakládání s geneticky modifikovanými organismy a genetickými produkty ve znění pozdějších předpisů VYHLÁŠKA 209/2004 Sb. o bližších podmínkách nakládání s geneticky modifikovanými organismy a genetickými produkty ve znění pozdějších předpisů
Jak vzniká GMO? 1) Techniky rekombinantní DNA kterými se vkládá dědičná informace do vektoru, který ji přenáší organismu příjemce Mikroorganismy (včetně buněčných linií) Nejčastěji konstrukt na základě plazmidu, který se přenese transformací (mikroorganismu) nebo transfekcí (eukarytické buňky) nebo transdukcí (zabalený do pseudovirové částice) do buněk hostitele, kde se množí dále jako plazmid nebo kde se genetická informace začlení do chromosomu. Rostlinné a živočišné buňky (buněčné linie nebo organismy): 2) Techniky zavádějící uměle připravený dědičný materiál přímo do organismu příjemce, (mikroinjekce, makroinjekce, biolistické metody, mikroenkapsulace a umělé chromosomy) 3) Techniky buněčné fúze, při nichž jsou s použitím umělých metod vytvářeny životaschopné buňky s novou kombinací dědičného materiálu
Kategorie rizika Kategorie rizika se vztahují k činnosti První kategorie: činnost bez rizika nebo se zanedbatelným rizikem (např. klonování a kultivace Escherichia coli, Saccharomyces cerevisiae, buněčných linií) Druhá kategorie: činnost s nízkým rizikem škodlivého působení, které může být snadno odstraněno (např. klonování a kultivace patogenních bakterií Staphyloccocus aureus, Pseudomonas aeruginosa, Bordetella pertussis, transdukce buněčných linií pseudovirovými částicemi s použitím retrovirových vektorů) Třetí kategorie: činnost s rizikem, které může být odstraněno jen náročnými zásahy (např. příprava mutantů HIV) Čtvrtá kategorie: činnost s vysokým rizikem (např. ebola)
Dokumenty pro podání Oznámení o nakládání s GMO Průvodní dopis Oznámení o uzavřeném nakládání Hodnocení rizika Provozní řád Havarijní plán (od 2. kategorie rizika) Požadavky na uzavřený prostor Plán prostor a zařízení Poradce pro nakládání s GMO: Vzdělání Praxe Plány budov, podlaží a místností
Oprávnění nakládat s GMO Podáním Oznámení (+Havarijní plán, Provozní řád, Hodnocení rizika) na MŽP vzniká oprávnění nakládat s GMO Oznámení jsou posouzeny oponenty 1. bez opravy 2. oprava, nezastavuje se, nebo 3. zásadní oprava-rozhodnutí, zastavení 1. kategorie: Oprávnění vzniká nakládat dnem podání Oznámení 2. kategorie: Oprávnění zahájit nakládání vzniká 45 dnů po podání Oznámení na MŽP. Kopie Potvrzení o oprávnění nakládat s GMO se přikládá u některých grantových agentur (GAČR) při podání projektu. Č.j. Oznámení (např. 75721/ENV/15) se uvádí při doložení oprávněnosti nakládat s GMO při dovozu nebo vývozu GMO.
Obsah oznámení a hlášení změn Organizace Odpovědné a kontaktní osoby Organismy Hodnocení rizika Kategorie rizika Místnosti Pracovníci Požadavky na uzavřený prostor (srovnávací tabulka) Dovoz
10 pravidel práce v GMO laboratoři 1. V každé místnosti pro práci s GMO vyvěsit Havarijní plán (2. kat) a Provozní řád podepsaný poradcem 2. Přístup pouze proškoleným pracovníkům, označení na dveřích BIOHAZARD (povinné od 2. kategorie) 3. Pláště označené BIOHAZARD, rukavice, pytel na použité pláště 4. Dezinfekce (Ajatin, SAVO) na označeném místě 5. Důsledná inaktivace GMO autoklávováním nebo dezinfekcí 6. Označené nádoby na odpad a jeho bezpečná likvidace 7. Provozní deník: Plán a závěr etapy, protokoly, kontroly 8. Seznam proškolených osob + potvrzení o školení 1x ročně 9. Zápisy o kontrolách prostoru v provozním deníku 10. Zabezpečená okna (neotvíratelná nebo se sítí)
Při kontrole ČIŽP Předložit: Kopii oprávnění k nakládání s GMO Seznam pracovníků 1x ročně školení pracovníků Provozní deník Havarijní plán (2. kategorie) a Provozní řád v laboratořích Roční hlášení (+ podpis poradce) Formulář o ekologické újmě Potvrzení o odeslání Havarijního plánu hasičům (kraj) a krajskému úřadu Doložit: Zachovávání pravidel práce v laboratoři
Odpady 1. kategorie: Veškeré odpady obsahující GMO (tekuté, pevné misky, plastik) inaktivovat autoklávováním nebo dezinfekcí, pak přesunout do směsného odpadu 2. kategorie: Veškeré odpady obsahující GMO (tekuté, pevné) inaktivovat autoklávováním nebo dezinfekcí a poté předat specializované firmě k likvidaci (odpady na jejichž sběr a odstraňování jsou kladeny zvláštní požadavky s ohledem na prevenci infekce dle zákona o odpadech) Přenášení GMO a odpadů mezi místnostmi: v nerozbitné, uzavřené schráně (např. plastový box)
Kontrola dokumentů 1. Oznámení 2. Potvrzení o odeslání Havarijního plánu hasičskému záchrannému sboru kraje a krajskému úřadu 3. Potvrzení o oprávněnosti nakládat s GMO 4. Školení zaměstnanců 1x ročně: 5. 6. Smlouva s firmou likvidující odpady (2. kategorie) Provozní řád a Havarijní plán (2. kat) vyvěšený v každé místnosti, kde se nakládá s GMO (+podpis poradce). 7. Provozní deník 8. Oznámení o dovozu GMO (dopis na MŽP) 9. Vyplněný formulář Hodnocení rizik ekologické újmy 10. Roční hlášení (+podpis poradce) Oznámení o nakládání s GMO Provozní řád Havarijní plán Hodnocení rizika (ne starší 5 let) Požadavky na uzavřený prostor (srovnávací tabulka) Záznam: prezenční listina s podpisy, obsah školení Přílohy Provozního řádu: Aktuální seznam proškolených pracovníků. Vyznačené osoby: poradce, kontaktní a odpovědná osoba, plán prostor Plány etap (+podpis poradce) Závěry etap (+podpis poradce) Protokoly Zápisy o kontrolách
Kontrola opatření v místnostech 1. Znak BIOHAZARD na dveřích Povinné od 2. kategorie Do místnosti mají přístup jen pracovníci proškolení pro práci s GMO 2. 3. Lednice a mrazáky obsahující GMO označeny (GMO nebo BIOHAZARD) Provozní řád a Havarijní plán (2. kat) vyvěšený v každé místnosti, kde se nakládá s GMO (+podpis poradce). Přílohy Provozního řádu: Aktuální seznam proškolených pracovníků. Vyznačené osoby: poradce, kontaktní a odpovědná osoba. Příloha: plán prostor 4. Zabezpečená okna neotvíratelná nebo se sítí 5. Pláště označené BIOHAZARD k dispozici ochranné rukavice, pytel na použité pláště 6. Dezinfekce (Ajatin, SAVO) na výrazně označeném místě 7. Nádoby na odpad označené GMO 8. Zajištěný systém důsledné inaktivace autoklávování nebo chemická dezinfekce GMO (SAVO, ajatin) Uzavřené nerozbitné nádoby (schrány, 9. boxy) na přenášení GMO mimo uzavřený prostor k dispozici 10. Funkční biohazard box a klimatizace 2. kategorie rizika nakládání
Experimentální detekce GMM 1. a 2. kategorie rizika
Dovoz, vývoz a převážení GMO mimo EU Dovážet, vyvážet a přepravovat GMO může jen uživatel zapsaný v Seznamu uživatelů Převážené GMO musí mít na svém obalu viditelné označení geneticky modifikovaný organismus. Nejméně 5 dní před dovozem informovat MŽP Transport GMM: Go Express & Logistics, World Courier, KRD, PMTrans, Myši: AnLab, SEMED, VELAZ
Seznam účastníků školení, provozní deník Instituce: Školení pracovníků pro nakládání s GMO (mikroorganismy) dne... Níže podepsaní stvrzují, že byli proškoleni pro nakládání s geneticky modifikovanými organismy kategorie rizika:.. Materiály použité pro školení jsou přiloženy. Laboratoř Jméno Podpis Školení vedl odborný poradce pro nakládání s GMO..
Odbor environmentálních rizik a ekologických škod MŽP, odd. geneticky modifikovaných organismů Česká komise pro nakládání s geneticky modifikovanými organismy a genetickými produkty Česká inspekce životního prostředí