FORENZNÍ TRICHOLOGIE. Změny trichologického materiálu vlivem exogenních faktorů (in vivo, post separatio, post mortem).

Transkript

1 FORENZNÍ TRICHOLOGIE Změny trichologického materiálu vlivem exogenních faktorů (in vivo, post separatio, post mortem).

2 Otázky? Např. Určete druh (typ) poškození. Lze určit prostředí, resp. vnější faktory, které na TM působily a kdy in vivo, post separatio, post mortem? (relevantnost vs. irelevantnost stopy) Lze se vyjádřit k longitudinální posloupnosti vzniku změn na TM, např. v souvislosti s trestným činem, transferem mrtvoly? Lze stanovit, zda byly vlasy vytrženy živé či mrtvé osobě? Poškození zvířecích chlupů dopravní nehoda, úprava a poškození kožešin.

3 Změny struktury TM působení endogenních a exogenních faktorů na kapilicium in vivo poškození běžná, patologická, úrazová, související s trestnou činností (TČ) působení exogenních faktorů na kapilicium post separatio post mortem (časný PMI, tafonomie) ZMĚNY POSTIHUJÍ KOŘÍNEK I STVOL

4 Exogenní faktory životní styl, úrazy, TČ, degradace mechanické a fyzikální faktory stříhání, řezání, střelba, tlak, teplota, hoření, vytržení chemické faktory kosmetické přípravky, kyseliny, zásady biologické faktory = biodegradace plísně, hmyz (potrava, keratinolytický efekt) tafonomie TM dekompozice měkkých tkání, diagenetické faktory Fy, Ch, Bi (hlína, voda ) klimatické faktory slunce, voda, vzduch

5

6 Poškození folikulu biotické a abiotické faktory in vivo patologie (bakterie, plísně, roztoči) změny mechanické vytržení, přetržení, vyčesání, vypadnutí (anagen, katagen, telogen) epilace/ depilace (laser, chemické prostředky, termolýza) nekrotické změny + environmentální faktory

7 Epilace/depilace (in vivo) elektrolýza (depilační elektrická sonda) zničení zárodečné matrix vlivem vysoké teploty (jizvy) (elektrický proud může roztrhnout kořen) elektrolýza

8 Laserová depilace Laserová fotoepilace (fototermolýza vlasových folikulů) působí destrukci peribulbárního tkaniva v bázi vlasového folikulu. Nejcitlivější v anagenní fázi. Cílovým chromoforem laserové paprsku ve folikulu je melanin. Proto u světlých a šedivých vlasů musí být folikuly nejprve vystaveny exogenním chromofórům (např. roztoky obsahujícími uhlík). Paprsky vlnové délky 755 nm (ruby laser system) jsou absorbovány melaninem uvnitř vlasových folikulů a následně dojde k termálnímu poškození folikulu. Laserová fotoepilace vede k dočasné nebo až permanentní ztrátě ochlupení.

9 Aktivní melanizace a v menší hloubce uložený folikul v časném anagenu znamenají vyšší pravděpodobnost zničení distálních částí folikulu. V období pozdního anagenu, kdy je folikul umístěn ve větší hloubce v dermis, je vůči laseru více rezistentní. Melanizace se zastavuje v katagenu, telogenní chlupy obsahují v cibulce málo pigmentu na to, aby absorbovaly laserovou energii. Buňky v dolní části telogenního folikulu jsou v pozdních fázích telogenu již aktivní a velmi snadno podléhají poškození, proto mohou být zničeny, či závažně poškozeny, i v případě nízké melanogeneze. Pokud nedojde k trvalé epilaci, folikuly chlupů jsou poškozeny jen částečně a ozářená místa po určité době zarůstají znovu. Chlupy, které opětovně vyrůstají po zákroku, jsou však tenčí a světlejší. Proces, který je nutno po určité době opakovat, vede nakonec k trvalé depilaci.

10 In vivo Akutní noxa anagenní efluvium (rtg záření, cytostatika, jedy ) Chronická noxa difúzní telogenní efluvium (hormonální nerovnováhy; léky, poruchy metabolismu, stres ) Dysplastické vlasy jsou poškozené anagenní vlasy s redukovaným průměrem bulbu, zúženou matrix a vnitřní epiteliální pochvou. Dystrofické vlasy mají vlasové bulby atrofické, keratogenní zóna je zúžena a vlasy se v místě konstrikce snadno ulamují. Matrix folikulu je poškozena a produkuje neplnohodnotný vlas. poškození mitoticky aktivní tkáně

11 Post separatio, post mortem změny na koříncích vlasů,chlupů Dekompoziční změny jsou kombinací environmentálních, mikrobiálních a autolytických procesů; závisí na druhu prostředí, okolní teplotě; dekompozice apoptóza buněk PMI 2 dny normální AM vývojové fáze kořínků PMI 2 dny více typů nekrotických kořínků

12 Telogen telogenní fáze rezistentí vůči dekompozici

13 Post mortem dekompozice kořínků hard keratin DNA! zbytek anagenního folikulu : bulbus, elongační a prekeratinizační zóna apoptóza degradace epiteliálních pochev zkracování folikulu

14 Typy kořínků post mortem (anagen, časný katagen) distální proužek proximální proužek hard keratin brush

15 Anagen/katagen Vývojová fáze anagen/katagen proužek = klasická PM změna vlasových kořínků podélné prostory vyplněné vzduchem; nesnadné rozlišení u velmi tmavých vlasů. začíná mezi prekeratinizační zónou a zónou s plně vytvořeným keratinem (hard keratin) distální proužek (PM vytržený vlas zahrnuje anagenní bulbus, elongační a prekeratinizační zónu) proximální proužek

16 prekeratinizační zóna defektní keratinové fibrily, mezi fibrily proniká zduch Tmavá část vlasu, defektní formace keratinových fibril, vzduchem vyplněné prostory.

17 Post mortem změny anagenního folikulu AM vytržené anagenní vlasy AM nevykazují dekompoziční změny PM Hard keratin souvisí s mokrou dekompozicí ; pokročilá hniloba (bulbus, elongační a prekeratinizační zóna zůstávají v kapiliciu, pouze stvol s hard keratinem se uvolňuje) Kartáčovitý konec spojený se suchou dekompozicí; dehydratace kůže + kořene vlasu dojde k přetržení, vznikají tenká vlákna připomínající kartáč; nezaměnit s trháním, tupým násilím, Trichorrhexis nodosa

18 Typy nekrotických kořínků vlasů

19 vařená tkáň a hniloba Kazuistika

20 Změny vlasového stvolu změna barvy mechanické a fyzikální faktory stříhání, řezání, střelba, tlak, teplota chemické faktory kyseliny, zásady, kosmetické přípravky (Fy-Ch účinek) biofaktory plísně, hmyz, roztoči (potrava, keratinolytický efekt) tafonomické faktory

21 Změny pigmentace vlasového stvolu 1. in vivo patologické faktory exogenní faktory (klimatické UV záření + voda + O) artificiální barvení, odbarvování 2. post separatio, post mortem některé plísně způsobí změnu barvy taphonomický efekt v hlíně rozklad keratinu, změny melaninu UV záření

22 Kosmetické barvení a odbarvování vlasů rostlinná barviva metalická barviva syntetická organická barviva trvalé barvení polotrvalé barvení tónování odbarvování

23 Rostlinná barviva extrakt z květů Anthemis nobilis nebo Matricaria chamomilla; žlutý 1,3,4-trihydroxyflavon pokrývá povrch kutikuly, neproniká do keratinu (tónování vlasů) bukové listí cibulové slupky citrónová šťáva ořechové skořápky divizna černý čaj indigo

24 Indigofera Indigovník Indigovník, česky též modřil, je rozsáhlý rod rostlin z čeledi bobovité, zahrnující asi 750 druhů. Jsou to byliny až keře s růžovými, purpurovými nebo bílými motýlovitými květy, rozšířené v tropech a subtropech celého světa.

25 Lawsonia alba Henna je derivát z práškovaných listů Lawsonia alba. Aktivní součástí je 2-hydroxy-1,4-naftochinon, který v kyselém roztoku penetruje do keratinu (trvalé barvení).

26 Barvení vlasů syntetická organická barviva Trvalé barvení vlasů Aromatická barviva (aminy) vnikají do vlasů v podobě leukobaze a teprve po její oxidaci dojde ke skutečnému zbarvení vlasu. Barviva jsou smíchána s peroxidem vodíku, tím dojde ke vzniku chinon-diiminu, který proniká do vlasového stvolu a tvoří velké polymery v kůře vlasu. Polotrvalé barvení vlasů Barviva (nitrobarviva, antrachinony) jsou tvořena malými molekulami s 1 až 3 aromatickými jádry. Do keratinu penetrují bez předchozí oxidace a zde jsou drženy Van der Waalsovými silami. Přetrvávají až 10 umytí šampónem. Krátkodobé barvení vlasů Krátkodobá barviva se aplikují většinou jako jednoduché přelivy. Obalují vlasový stvol jemnou vrstvou barviva a barva se odstraňuje z vlasů umytím šampónem. Aby mohla být použita ve formě sprejů, jsou inkorporována do plastických hmot (např. 3% polyvinylpyrrolidin). Tónování vlasů se provádí pomocí barviv v šampónech. Tyto prostředky neimpregnují vlasy, ale zůstávají pouze na jejich povrchu a lze je snadno smýt.

27 Odbarvování chemická oxidace peroxid vodíku, thioglykolová kyselina (k. merkaptooctová), persulfát, permanganát a perchlorát ireverzibilní změny melaninu nejprve rozpuštění melanosomů, pak k vlastní degradaci melaninu (melaninová granula) oxidační činidla vyvolávají chemickou degradaci proteinů; z cystinu vznikají zbytky kyseliny cysteinové, které způsobí velké poruchy v rozložení elektrostatických příčných vazeb; štěpeny vazby S-S

28 Degradace keratinu rozštěpení disulfidických vazeb cystin cystein

29 Fotochemická degradace melaninu Při fotochemické degradaci dochází k rozkladu vlasových pigmentů a proteinů. Eumelanin a feomelanin jsou fotochemicky excitovány, dochází k připojení volného radikálu kyslíku a k otevření eumelaninového, resp. feomelaninového kruhu.

30 Fotochemická degradace proteinů rozklad vlasových proteinů nejcitlivější na fotochemickou depigmentované vlasy degradaci jsou Degradaci vlasových proteinů způsobuje elekromagnetické záření o vlnové délce nm, které vyvolává štěpení vazeb -C-S-, (nejprve degradují aminikyseliny cystin a methionin, potom následuje fenyalanin, tryptofan, histidin, prolin a leucin). Primární změny ve stvolu nastávají v oblastech s vysokou koncentrací cystinu (exokutikula a matrix kůry); největší změny jsou detekovány na apikálních koncích vlasů

31 Poškození vlasů vlivem chemické či fotochemické degradace vlasových barviv a proteinů (vzhledem ke zdravému stejně zbarvenému vlasu) má za následek: vyšší bobtnavost vlasů ztrátu pružnosti snížení prodloužení vlivem vlhkosti ztrátu lesku zvýšenou fragilitu tahové vlastnosti zůstávají nezměněny

32 Posmrtné dyskolorace RUTILNÍ zbarvení původně tmavých vlasů lze vysvětlit oxidací melaninu červenými oxidačními produkty melaninu produkty přeměny keratinu Působení H 2 O 2 na exhumované vlasy rozpad vlasů (čerstvé vlasy se působením H 2 O 2 odbarví)

33 Poškození struktury vlasového stvolu

34 Poškození řezná (nůžky, žiletka, břitva, holicí strojek jednobřitý, dvojbřitý, efilační ořezávač/nůžky)

35 efilační nůžky trimování

36 Poškození ostrým předmětem

37 Poškození střepy

38 Odpověď vlasového stvolu na fyzikální nebo chemické trauma, (horko, odbarvování, tupírování), které se projevuje uzlovitými zduřeninami, v nichž se stvol láme. Trichorrhexis nodosa

39 longitudinální štěpení stvolu, ztráta kutikulárních šupin kadeřnické procedury mají za následek zlomy v místech uzlíků Trichonodosis

40 Plstnaté vlasy Ireverzibilní spleť vlasů nejisté etiopatogeneze. Proces plstnatění je důsledek poškození kutikuly, případně i kůry vlasů.

41 Trichoptilosis podélné štěpení nebo třepení distálního konce vlasového stvolu; výskyt a intenzita poškození je přímo úměrná kumulaci fyzikální a chemické traumatizace

42 Poškození tupým předmětem lokalizovaná destrukce struktury vlasu polarizované světlo

43 Poškození způsobená tlakem, úderem malé stlačení (spona do vlasů) stlačení pinzetou úder tupou stranou sekery

44 Tlakové působení rozsáhlá destrukce struktury jednotlivých vrstev vlasu/chlupu; trhliny (fisury), vtlačený prach

45 Střelné poškození povýstřelové zplodiny roztřepení, paličkovité rozšíření, vakuoly

46 Žhářství, ublížení na zdraví

47 Tepelné změny 270 ºC účinek tekutého dusíku vlasy jsou křehké, snadnou se lámou, tvar lomné plochý je téměř rovný; žádné patrné mikroskopické změny; do 60 ºC nedochází k žádným markantním viditelným změnám, vlasy zachovávají konstantní délku ºC délka vlasů se zmenšuje, klesá lom světla nad 100 ºC snižuje se váha vlivem ztráty vody; morfologická struktura se výrazně nemění ºC žádné výrazné morfologické změny v optickém mikroskopu ; depigmentované vlasy mírně zežloutnou

48 Tepelné změny 180 ºC vlasy nabývají rutilního odstínu 200 ºC červenání; struktura se jeví homogenní

49 215 ºC ve dřeni a kůře se objevují vzduchové vakuoly ºC dochází ke zvlnění vlasů, zůstávají červené a červenohnědé/černé, dotykem se lámou, obsahují velké množství vzduchových vakuol

50 ºC nastává zuhelnatění vlasů, zůstává pouze anorganický podíl vlasů 650 ºC úplná degradace vlasů (popel pro analýzu prvků)

51 Termická analýza vlasů Termogravimetrie (TG) Diferenciální termická analýza (DTA) Rentgenová fluorescenční spektrometrie (EDXRF)

52 EDXRF spektrum (polarizační target)

53 Chemické faktory voda kyseliny hydroxidy, vápno NH2CL (CHLORAMIN) chlornan sodný (SAVO) chlornan sodný + hydroxid sodný (TIRET)

54 Voda Vlasový vlhkoměr Klasická konstrukce vlhkoměru je založena na hygroskopických (schopnost pohlcovat a udržovat vlhkost) vlastnostech lidských vlasů. Vlasy mění svou délku v závislosti na vlhkosti. Základem přístroje je několik odmaštěných vlasů, které jsou v přístroji napnuty tak, aby k nim měl přístup vzduch, jehož vlhkost měříme. Změna délky vlasů, která činí pro rozsah vlhkosti % asi 2,5 %, je přes pákový převod zobrazována ručičkou přístroje.

55 Voda vlasy ve vodě postupně ztrácejí kutikulární buňky zvyšuje se humidita vlasů

56 Odstranění kutikuly shaking ve vodě enzymatická degradace strojové ztenčení na pravidelný kruhový průměr, lesk dodává silikonový povlak

57 Bobtnání vlasů v závislosti na ph

58 Působení kyselin H 2 SO 4 HCl HNO 3 žloutnou (xantoproteinová reakce)

59 Degradace vlasů H 2 SO 4

60 Allwordenovy váčky vliv chlornanů bobtnání, degradace proteinů pod epikutikulou

61 Vliv alkálií alkálie a pára rozštěpí disulfidické vazby v keratinu destrukce kutikuly a kůry K- S-S -K + M-OH = K-S-OH + K-SM Markscheibe Proteiny dřeně se liší od korových proteinů malým obsahem cystinu. Působením 20% NaOH na zvířecí chlupy zůstanou dřeňové disky disky.

62

63 Redukční činidla štěpící S-S vazby sulfidy M-SH, sulfity M 2 SO 3, K-S-S-K + M-SH = K-S-SH + K-SM K-S-S-K + M 2 SO 3 = K-S-SO 3 + K-SM merkaptany R-SH K-S-S-K + 2 R-SH = 2KSH + R-S-S-R

64 Depilační prostředky (Veet) K-S-S-K + 2 R-SH = 2KSH + R-S-S-R obsahují merkaptany počáteční fáze rozhraní mezi nedegradovanou a degradovanou částí vlasu detail rozhraní

65 Permanentní vlny Formu vlasů lze pozměnit chemickou cestou. trvalá ondulace Poprvé byla použita kolem roku 1900, kdy byly na vlasy aplikovány 5 15% roztoky alkalických sulfitů. Tento proces vyžadoval účinek vyšší teploty po určitou dobu. Po druhé světové válce byla objevena tzv. studená vlna. Používané roztoky obsahují soli thioglykolové kyseliny (K, Li), sulfity nebo bisulfity. Optimálně probíhá reakce při ph 9 9,5.

66 Postup: K-S-S-K + M 2 SO 3 = K-S-SO 3 + K-SM K-S-S-K + 2 R-SH = 2KSH + R-S-S-R V současné době produkty pro trvalou ondulaci obsahují sulfity. Reakce s vlasy probíhá při ph kolem 6. Aplikace roztoku difúze roztoků do vlasů, redukce bisulfidických vazeb keratinu, klesá obsah cystinu a zvyšuje se obsah cysteinu; změny ve fyzikálních vlastnostech vlasů vlasy bobtnají, tzn. zvětšuje se jejich šířka, dochází ke změnám tažných a torzních vlastností opláchnutí vlasů odstranění redukčního agens, pozastavení štěpení vazeb a bobtnání vlasů natáčky + zabalení do ručníku uvnitř vlasů pokračuje reorientace disulfidicko-merkaptonové výměny neutralizace (resp. reoxidace) minimalizace merkaptonového obsahu ve vlasech, radikální snížení disulfidicko-merkaptonové změn, celková stabilizace

67 Biodegradace in vitro Penetrace vlasů plísněmi in vitro je patrná buď optickým mikroskopem nebo elektronovým mikroskopem. 3 fáze ataku plísněmi: 1. stadium: plísňové mycelium se rozrůstá po povrchu vlasového stvolu 2. stadium: penetrace kutikuly a eroze kortexu. Hyfy plísní pronikají do vlasového stvolu buď pod volnými okraji kutikulárních šupin nebo penetrují povrchem kutikulárních šupin. 3. stadium: tunelování specializovanými hyfami (tvorba chodbiček a kavit). Tvorba tunelů je výsledkem sekrece enzymu keratinázy penetrujícími hyfami. Plísně, které mají nedostatek keratinázy, rozkládají nekeratinové proteiny spojující keratinizované buňky. Hyfy pak mechanicky pronikají do vzniklých mezibuněčných prostor.

68 Plísně hyfy plísní pronikají do vlasového stvolu buď pod volnými okraji kutikulárních šupin nebo penetrují povrchem kutikulárních šupin mycelium plísňové mycelium se rozrůstá po povrchu vlasového stvolu

69 perforace

70 Curvularia ramosa Alternaria species Chrysosporium keratinophilum

71 v v

72 Dermestes

73 Mol šatní Tineola bisselliella larva mola šatního má v trávicím traktu vysokou koncentraci merkaptanů

74 Kožešiny

75 Úprava kožešin Činění: zesíťování kolagenu působením chemických sloučenin (piklování, kvašení, chromité soli, hlinité soli, aldehydy, třísloviny, organická činidla) Bělení: oxidační (H 2 O 2 ) a katalytické bělení (H 2 O 2 + FeS) Barvení, šablony, hřbítkování Tříbení (bukové piliny): odstranění nečistot Fixace srsti: trvalé vyrovnání a lesk (HCOH+C 2 H 5 OH+CH 3 COOH) Mechanická úprava: stříhání, epilování, broušení (velur)

76 Tafonomie

77 Tafonomie Taphonomický efekt souvisí s místem uložení mrtvoly. Dekompozice měkkých tkání a environmetální faktory (kombinace fyzikálního, chemického a biologického účimku v různém stupni zastoupení) způsobují degradaci trichologického materiálu. období časného post mortem intervalu změny v oblasti vlasového folikulu (anagenní a katagenní kořínková forma se mění v nekroticky typ kořínku, telogenní vývojová forma kořínku zůstává nezměněna)

78 Degradační změny stvolu V půdě dochází ke změně zbarvení vlasů rutilní odstín (vliv huminových kyselin, rozklad melaninu, oxidace melaninu).

79 Inkrustovaný vlas

80

81 Tafonomie hrobky, hroby

82 Tafonomie vlasy zachované na lebce z klášterní krypty 12.st. hrob 5. st.

83 Hroby, hrobky Vlasy se spojují ve snopečky (někdy slepené hlínou). Slepené vlasy postrádají lesk, jsou velmi fragilní, zachovány jsou proto jen fragmenty. Vlivem agresivního půdního prostředí dochází k poškození a separaci kutikulárních šupin, posléze k celkové degradaci vlasového stvolu rozvolněním buněk, roztřepením až postupným totálním rozpadem.

84 Destrukce vlasů post mortem hrobka 17.st.

85 v kapiliciu exhumovaného jedince všechny uvedené fáze rozpadu (stupeň rozpadu neposkytuje podklady pro určení PMI!)

86 Archeotrichologie pseudomorfy

87 Archeotrichologie pseudomorfy otisky chlupů v keramice Králík

88