ST AIA-PACK PSAII POTŘEBNÉ MATERIÁLY, KTERÉ NEJSOU SOUČÁSTÍ DODÁVKY ÚČEL POUŽITÍ SHRNUTÍ A VYSVĚTLENÍ TESTU PRINCIP STANOVENÍ DODÁVANÝ MATERIÁL

Transkript

1 EU rev. PSA Upozornění: Tento návod k použití je v souladu se směrnicí IVD 98/79/ES a je určen pro zákazníky z členských států Evropské unie. Pro zákazníky z členských států Evropské Unie: Přečtěte si prosím tento návod k použití v kombinaci s listem nazvaným EXTRA INFO PSAII. ÚČEL POUŽITÍ ST AIA-PACK PSAII ST AIA-PACK PSAII je určen pro diagnostické použití in vitro pouze ke kvantitativnímu měření prostatického specifického antigenu (PSA) v lidském séru nebo v heparinizované plazmě na analyzátorech systému Tosoh AIA. Prostředek je určený k měření sérového PSA ve spojení s vyšetřením per rectum (PR), jako pomůcka při zjišťování karcinomu prostaty (CaP) u mužů ve věku 50 let a starších. Pro diagnostiku karcinomu prostaty je vyžadována biopsie z prostaty. Tento prostředek je dále indikován pro sériová měření PSA v lidském séru nebo heparinizované plazmě, jako pomůcka při léčbě pacientů s karcinomem prostaty. SHRNUTÍ A VYSVĚTLENÍ TESTU Prostatický specifický antigen (PSA) byl objeven v roce 1977 Wang a kol. 1. PSA je jednořetězcový glykoprotein o velikosti daltonů, který obsahuje 7 % sacharidů. 2 Funkčně a imunohistochemicky je PSA odlišný od kyselé prostatické fosfatázy (PAP) 3 a uzavřen v cytoplazmě binárních buněk prostaty a epitelu duktů. 4 Přítomnost PSA byla prokázána v normální, benigní hyperplastické a maligní tkáni prostaty, u metastatického karcinomu prostaty a také v prostatické tekutině a v semenné plazmě. 5 Avšak PSA není přítomný v žádné jiné tkáni u mužů a není tvořen karcinomy plic, tlustého střeva, rekta, žaludku, slinivky břišní nebo štítné žlázy. 6 Zvýšené hladiny sérového PSA byly hlášeny u pacientů s karcinomem postaty, benigní hypertrofií prostaty nebo zánětlivými stavy ostatních sousedních močově-pohlavních tkáních. 3,7 Karcinom prostaty nemůže být diagnostikován, dokud výsledky biopsie nepotvrdí přítomnost nádorových buněk. Studie signalizují, že PSA je důležitým nástrojem při hodnocení účinku terapie. 8 Zejména u pacientů léčených hormonální terapií mohou současné sériové stanovení PSA a PAP poskytovat doplňkovou klinickou hodnotu při monitoraci pacientů s karcinomem prostaty. 9 PRINCIP STANOVENÍ Stanovení pomocí ST AIA-PACK PSAII je dvoumístná imunoenzymometrická analýza, která je celá prováděná v testovacích kelímcích ST AIA-PACK PSAII. PSA přítomný v testovaném vzorku je vázaný na monoklonální protilátku imobilizovanou na magnetických zrnech a enzymem označenou monoklonální protilátku v ST AIA-PACK PSAII. Magnetická zrna jsou promytím zbavena nenavázaných, enzymem značených monoklonálních protilátek a jsou pak inkubována s fluorogenním substrátem, 4-methylumbeliferylfosfátem (4MUP). Množství enzymem značených monoklonálních protilátek, které se vážou na zrna, je přímo úměrné koncentraci PSA v testovaném vzorku. Je vynesena standardní křivka a neznámé koncentrace vzorků jsou vypočítány pomocí této křivky. DODÁVANÝ MATERIÁL Katalogové č ST AIA-PACK PSAII 5 zásobníků x 20 testovacích kelímků 1-12 Plastové testovací kelímky obsahující dvanáct lyofilizovaných magnetických zrn potažených myšími monoklonálními protilátkami proti PSA a 100 µl myších monoklonálních protilátek proti PSA, konjugovaných s hovězí alkalickou fosfatázou s azidem sodným jako konzervační látkou. POTŘEBNÉ MATERIÁLY, KTERÉ NEJSOU SOUČÁSTÍ DODÁVKY Následující materiály jsou vyžadovány k provedení analýzy specifického prostatického antigenu pomocí ST AIA-PACK PSAII (kat. č ) na analyzátorech systému Tosoh AIA. Následující materiály společnost Tosoh dodává samostatně. Materiály Kat. č. AIA Nex IA nebo AIA AIA Nex IA nebo AIA-21 LA AIA-1800 ST AIA-1800 LA AIA-2000 ST AIA-2000 LA AIA-600 II AIA-600 II BCR AIA AIA AIA-PACK SUBSTRATE SET II AIA-PACK SUBSTRATE REAGENT II/AIA-PACK SUBSTRATE RECONSTITUENT II ST AIA-PACK PSAII CALIBRATOR SET ST AIA-PACK PSAII CALIBRATOR (1) 0 ng/ml ST AIA-PACK PSAII CALIBRATOR (2) 0,2 ng/ml (přibližně) ST AIA-PACK PSAII CALIBRATOR (3) 2 ng/ml (přibližně) ST AIA-PACK PSAII CALIBRATOR (4) 10 ng/ml (přibližně) ST AIA-PACK PSAII CALIBRATOR (5) 50 ng/ml (přibližně) ST AIA-PACK PSAII CALIBRATOR (6) 110 ng/ml (přibližně) ST AIA-PACK PSAII SAMPLE DILUTING SOLUTION AIA-PACK WASH CONCENTRATE AIA-PACK DILUENT CONCENTRATE KELÍMKY NA VZORKY AIA-PACK DETECTOR STANDARDIZATION TEST CUP AIA-PACK SAMPLE TREATMENT CUP Další požadavky pouze pro AIA Nex IA /AIA-21: PIPETOVACÍ ŠPIČKY PŘEDEM VLOŽENÉ PIPETOVACÍ ŠPIČKY Další požadavky pouze pro AIA-600 II, AIA-900, AIA-1800 a AIA-2000: PIPETOVACÍ ŠPIČKY STOJAN PRO PIPETOVACÍ ŠPIČKY PŘEDEM VLOŽENÉ PIPETOVACÍ ŠPIČKY Používejte pouze materiály dodané společností Tosoh. Nepoužívejte náhradní materiály získané z jiných zdrojů, protože výkonnost testu je charakterizována přísně na základě materiálů společnosti Tosoh. VAROVÁNÍ A BEZPEČNOSTNÍ OPATŘENÍ 1. ST AIA-PACK PSAII je určen pouze pro diagnostické použití in vitro. 2-12

2 2. Před použitím zkontrolujte obal a vnější povrch hliníkového obalu, zda nejsou poškozeny. Pokud jsou patrná jakákoli poškození, kontaktujte vašeho místního obchodního zástupce společnosti Tosoh. 3. V rámci jednoho zásobníku nesmíte míchat testovací kelímky různých šarží nebo různých testů. 4. ST AIA-PACK PSAII obsahuje azid sodný, který může reagovat s olověným nebo měděným potrubím za vzniku potenciálně výbušných azidů kovu. Při likvidaci těchto činidel do kanalizace je vždy spláchněte velkým množstvím vody, aby nedocházelo k hromadění azidu. 5. Při přípravě tohoto výrobku není používáno lidské sérum. Protože však pro přípravu vzorků budou používány lidské vzorky a další výrobky pro kontrolu kvality v laboratoři mohou být deriváty lidského séra, dodržujte prosím při manipulaci se všemi vzorky a kontrolními vzorky standardní laboratorní bezpečnostní opatření. 6. Nepoužívejte po uplynutí data exspirace. 7. ST AIA-PACK PSAII byl navržený tak, aby u převážné většiny vzorků nedocházelo k problémům způsobeným zakřivením kalibrační křivky při vysokých koncentracích, tzv. hook effect. Vzorky s koncentracemi PSA mezi 100 a ng/ml budou hlášeny jako >100 ng/ml. K jevu zahnutí kalibrační křivky ( hook effect ) může dojít při koncentracích PSA vyšších než ng/ml. 8. Pro bezpečnou likvidaci odpadu se doporučuje, aby každá laboratoř dodržovala zavedené laboratorní postupy a místní, národní či federální nařízení. 9. Po otevření musí být lahvička s roztokem pro ředění vzorku těsně uzavřena pomocí čisté zátky. Uzávěr znečistěným materiálem může způsobit znehodnocení činidla. 10. Zbývající roztok na ředění vzorků po použití se nesmí smíchat s další lahvičkou, ale musí být znehodnocen, aby se zabránilo kontaminaci. 11. Sérum, prach, kov nebo kontaminace mikroogranismy mohou způsobovat rozpad rekonstituovaného roztoku substrátu. Uchovávejte v čistém prostředí, mimo přímé sluneční záření a ultrafialové světlo. 12. TOSOH doporučuje, aby byl pro kalibraci použit nový obal testovacích kelímků. SKLADOVÁNÍ A STABILITA Veškeré neotevřené materiály jsou stabilní do data exspirace uvedeného na štítku, jsou-li uchovávány při specifikované teplotě. Materiály Kat. č. 2 8 C: ST AIA-PACK PSAII ST AIA-PACK PSAII CALIBRATOR SET ST AIA-PACK PSAII SAMPLE DILUTING SOLUTION AIA-PACK SUBSTRATE SET II AIA-PACK WASH CONCENTRATE AIA-PACK DILUENT CONCENTRATE C: AIA-PACK DETECTOR STANDARDIZATION TEST CUP AIA-PACK SAMPLE TREATMENT CUP Po otevření hliníkového sáčku mohou být testovací kelímky ST AIA-PACK PSAII ponechány v analyzátorech systému TOSOH AIA (18 25 C) po dobu maximálně 10 dnů (10 x 24 hodin). Pokud jsou přes noc uchovávány při teplotě 2 8 C, lze testovací kelímky použít až po dobu 30 dnů (30 cyklů při 8 hodinách v systému a 16 hodinách v chladničce). Jakmile otevřete hliníkový sáček, musí se testovací kelímky spotřebovat do 30 dnů. - Kalibrační sada ST AIA-PACK PSAII musí být vždy těsně uzavřená a skladovaná při teplotě 2 8 C. Po otevření se doporučuje kalibrační roztoky použít do jednoho dne. - Po otevření může být roztok pro ředění vzorku ST AIA-PACK PSAII ponechán v analyzátorech systému TOSOH AIA (18 25 C) po dobu maximálně 3 dny (3 x 24 hodin). Pokud jsou přes noc uchovávány při teplotě 2 8 C, lze roztok pro ředění vzorku použít až po dobu 9 dnů (9 cyklů při 8 hodinách v systému a 16 hodinách v chladničce). Roztok pro ředění vzorku by se neměl používat déle než 90 dnů po otevření, i když je uzavřený a uchovávaný v chladničce. - Rekonstituovaný roztok substrátu je stabilní 3 dny při teplotě C nebo 30 dnů při teplotě 2 8 C. - Pracovní ředidlo a promývací roztoky budou stabilní po dobu 30 dnů při teplotě C. - Činidla nesmí být užívána, když se jeví zakalená či zabarvená. ODBĚR VZORKŮ A MANIPULACE S NIMI Pro stanovení je nutno použít sérum nebo heparinizovanou plazmu. NESMÍ BÝT POUŽITA EDTA nebo citrátová plazma. Používá-li se sérum, vzorek žilní krve se odebírá asepticky bez aditiv. Uchovávejte při teplotě C než se vytvoří sraženina (obvykle minut), pak odstředěním získejte vzorek séra pro test. Používá-li se heparinizovaná plazma, vzorek žilní krve se odebírá asepticky s určeným aditivem. Co nejdříve odstřeďte a oddělte plazmu od sedimentovaných buněk. Neadekvátní centrifugace nebo přítomnost fibrinu nebo částic ve vzorku může způsobit chybný výsledek. Vzorky obsahující inhibitory alkalické fosfatázy mohou způsobovat chybné výsledky. Zkontrolujte všechny vzorky na přítomnost vzduchových bublinek a pěny. Odstraňte všechny bubliny před provedením analýzy. Během sériového sledování jednotlivého pacienta nestřídejte druhy vzorků. U určitých pacientů se mohou koncentrace naměřené v různých druzích vzorků poněkud lišit. Protože existují spory, zda jakákoli manipulace s prostatou ovlivňuje výsledky PSA, musí být vzorky odebrány před provedením jakýchkoli zákroků na prostatě, jako například vyšetření per rectum, masáž prostaty a transrektální ultrazvuk. Před provedením analýzy mohou být vzorky uloženy při teplotě 2 8 C po dobu maximálně 24 hodin. Nelze-li analýzu provést do 24 hodin, musí být vzorek uchováván zmražený při teplotě -20 C nebo nižší po dobu maximálně 60 dnů. Zabraňte opakovanému zmrazování a rozmrazování vzorků. Zakalené vzorky séra nebo vzorky, které obsahují částice hmoty, musí být před analýzou odstředěny. Před analýzou pomalu ponechte vzorky dosáhnout teploty C a jemně je promíchejte. Objem vzorku potřebný pro analýzu je 20 µl. POSTUP Podrobné pokyny pro AIA Nex IA / AIA-21, AIA-600 II, AIA-900, AIA-1800, AIA-2000 a AIA-360 naleznete v jejich uživatelském manuálu. I. Příprava činidla A. Substrátový roztok Před přípravou roztoku pracovního substrátu ponechte všechna činidla dosáhnout teploty C. Přidejte jednu lahvičku AIA-PACK SUBSTRATE RECONSTITUENT II k lyofilizovanému AIA-PACK SUBSTRATE REAGENT II a důkladně promíchejte, aby se všechny pevné materiály rozpustily

3 II. B. Promývací roztok Přidejte celý obsah AIA-PACK WASH CONCENTRATE (100 ml) do přibližně 2,0 l vody reagenční čistoty třídy I CAP nebo reagenční vody pro klinické laboratoře definované směrnicí CLSI C3-A4 (dříve známou pod názvem typ 1 NCCLS), důkladně promíchejte a upravte na konečný objem 2,5 l. C. Ředicí roztok Přidejte celý obsah AIA-PACK DILUENT CONCENTRATE (100 ml) do přibližně 4,0 l vody reagenční čistoty třídy I CAP nebo reagenční vody pro klinické laboratoře definované směrnicí CLSI C3-A4 (dříve známou pod názvem typ 1 NCCLS), důkladně promíchejte a upravte na konečný objem 5,0 l. Postup kalibrace A. Kalibrační křivka Kalibrační roztoky pro použití s ST AIA-PACK PSAII jsou připraveny gravimetricky a jsou standardizovány podle WHO IS PSA (90:10), NIBSC kód 96/670 a obsahují semenný PSA z plazmy, z něhož je 90 % vázáno na α1-antichimotrypsin (PSA-ACT) a 10 % je ve volné formě PSA. 14 Kalibrační křivka pro ST AIA-PACK PSAII bude stabilní až 90 dnů. Stabilita kalibrace je sledována prováděním kontroly kvality a závisí na správné manipulaci s činidlem a na řádné údržbě systému Tosoh AIA podle pokynů výrobce. Opětovná kalibrace může být nutná častěji, když jsou kontroly mimo nastavené rozmezí pro tento test nebo když jsou prováděny určité servisní postupy (např. nastavení teploty, změny mechanismu odběru vzorků, údržba promývací sondy nebo nastavení či výměna žárovky detektoru). Kalibrační křivka vzorku z AIA-1800 sleduje a znázorňuje algoritmus použitý při výpočtu výsledků. B. Postup kalibrace 1. Pokyny k postupu viz příslušný uživatelský manuál systému Tosoh AIA. 2. Ověřte, že kalibrační šarže a čísla koncentrací byly správně zadány do softwaru. 3. ST AIA-PACK PSAII CALIBRATOR SET je dodávaný připravený k použití Společnost TOSOH doporučuje, aby všechny kalibrační roztoky byly spuštěny trojmo. C. Kritéria přijatelnosti kalibrace 1. Průměrná rychlost pro ST AIA-PACK PSAII CALIBRATOR (1) má být < 1 nmol/(l s). 2. Vzhledem k tomu, že existuje přímý vztah mezi koncentrací a rychlostí, musí rychlost vzrůstat s narůstající koncentrací. 3. Opakující se hodnoty musí být v rozmezí 10 %. D. Kontrola kalibrace a přijetí 1. Pečlivě zkontrolujte křivku kalibrace a použijte výše uvedená kritéria. 2. Je-li to nutné, editujte kalibraci a potom kalibraci akceptujte. Podrobné informace o kalibraci naleznete v uživatelském manuálu systému Tosoh AIA. III. Postup kontroly kvality A. Komerčně dostupné kontroly IV. Komerčně dostupné kontroly musí být spuštěny nejméně jednou denně. Doporučuje se, aby byly použity nejméně dva stupně kontrol, normální a abnormální. Metoda laboratoře pro tento určitý test specifikuje následující: Kontrolní materiál: Frekvenci: Číslo šarže kontrolního materiálu, přijatelné limity a nápravná opatření v případě, že kontroly nesplní laboratorní kritéria, můžete nalézt ve zvláštním dokumentu o kontrole kvality, který je v laboratoři. B. Postup kontroly kvality 1. Proveďte analýzu vzorků kontroly kvality dle pokynů specifického uživatelského manuálu pro váš analyzátor. Podrobné pokyny o definici a editaci souborů naleznete v uživatelském manuálu systému Tosoh AIA. 2. Materiál kontroly kvality, který má projít tímto testem, je specifikovaný individuální metodou laboratoře. Zpracování vzorků A. Příprava Podle specifických pokynů v uživatelském manuálu analyzátoru příslušným způsobem umístěte vzorky do přístroje. Primární zkumavky a také kelímky na vzorky jsou kódovány čárovým kódem a mohou být použité v AIA Nex IA / AIA-21, AIA-600 II, AIA-900, AIA-1800, AIA-2000 a AIA-360. B. Postup analýzy 1. Poskytněte dostatečné množství testovacích kelímků ST AIA-PACK PSAII pro počet vzorků, které mají být analyzovány. 2. Vložte vzorky pacienta podle pokynů v uživatelském manuálu a pokračujte v analýze. 3. Poznámka: AIA-PACK SAMPLE TREATMENT CUP bude v případě použití vestavěných ředění vyžadován systémem AIA Nex IA/AIA-21, AIA-600 II, AIA-900, AIA-1800 a AIA POZNÁMKY K POSTUPU 1. Lyofilizovaný substrát musí být zcela rozpuštěn. 2. Analýzy ligand prováděné na analyzátorech systému TOSOH AIA vyžadují, aby laboratoř používala vodu reagenční čistoty třídy I dle CAP nebo reagenční vodu pro klinické laboratoře dle CLSI. Voda musí být testována nejméně jednou měsíčně a nesmí obsahovat částicovou hmotu včetně bakterií. ph vody by mělo být také rutinně testováno. Další informace naleznete v dokumentu CLSI C3-A4, Příprava a testování reagenční vody v klinické laboratoři ; schválené 4. vydání směrnice. 6-12

4 3. Vyskytne-li se vzorek obsahující koncentraci specifického prostatického antigenu vyšší, než je horní hranice rozsahu testu, tedy 100 ng/ml, musíte tento vzorek naředit ST AIA-PACK PSAII SAMPLE DILUTING SOLUTION a opět provést analýzu podle postupu analýzy. Doporučené ředění pro vzorky obsahující koncentraci větší než 100 ng/ml je 1:10 nebo 1:100. Je žádoucí takové ředění, aby byl odečet naředěného vzorku mezi 2 a 100 ng/ml. Poměr ředění je nutné zadat do softwaru. Další informace o ředění vzorků naleznete v uživatelském manuálu systému Tosoh AIA. 4. V analyzátorech systémů Tosoh AIA mohou být současně uloženy dvě různé kalibrační křivky pro každý analyt. Tak mohou být v rámci téhož cyklu použity dvě různé šarže testovacích kelímků ST AIA-PACK PSAII. 5. Nejsou-li pro tento test specifikace analýzy připraveny v softwaru systému, musí být specifikace zadány pod kódem testu 100. VÝPOČET VÝSLEDKŮ Analyzátory systémů Tosoh AIA provádějí všechny operace manipulací se vzorky a činidly automaticky. Analyzátory systémů Tosoh AIA odečítají míru fluorescence generovanou reakcí a automaticky ji převádějí na míru koncentrace prostatického specifického antigenu v ng/ml. U vzorků vyžadujících ředění provedou systémy AIA Nex IA/AIA-21, AIA-600 II, AIA-900, AIA-1800 a AIA-2000 automaticky ředění a vypočtou výsledky, pokud byly faktory ředění zadány do softwaru. Podrobné informace o programování ředění naleznete v příslušném uživatelském manuálu. VYHODNOCENÍ VÝSLEDKŮ Kontrola kvality Za účelem sledování a vyhodnocení přesnosti analytické výkonnosti se doporučuje, že se v souladu s místními nařízeními musí analyzovat komerčně dostupné kontrolní vzorky. Minimální doporučená frekvence zpracování interního kontrolního materiálu je: Po kalibraci je spuštěna třístupňová analýza interních kontrolních vzorků, aby byla akceptována kalibrační křivka. Tři stupně kontrol jsou opakovány, když jsou provedeny určité servisní postupy (např. nastavení teploty, změna mechanismu pro odběr vzorků, údržba promývací sondy nebo nastavení či výměna žárovky detektoru). K ověření celkového výkonnosti analyzátorů systému TOSOH AIA musí být po denní údržbě provedeny nejméně dva stupně kontroly. Je-li jedna nebo více hodnot kontrolního vzorku(ů) mimo přípustné rozmezí, bude před ohlášením výsledků pacientů nutné prošetřit validitu kalibrační křivky. Je nutno dodržovat standardní laboratorní postupy podle přísného zákonného orgánu, který na provoz laboratoře dohlíží. OMEZENÍ Pro diagnostické účely je nutné využívat výsledky tohoto testu společně s dalšími údaji (např. symptomy, výsledky dalších testů, klinickými dojmy, léčbou atd.). Při používání soupravy ST AIA-PACK PSAII je nejvyšší měřitelná koncentrace prostatického specifického antigenu bez ředění 100 ng/ml a nejnižší měřitelná koncentrace je 0,01 ng/ml (citlivost testu). Přestože přibližná hodnota koncentrace nejvyššího kalibračního roztoku je 110 ng/ml, přesná koncentrace se může poněkud lišit. Specifikaci testu ASSAY RANGE HIGH (VYSOKÝ ROZSAH TESTU) je nutno definovat jako horní hranici rozsahu testu, 100 ng/ml. Přestože hemolýza nemá významný vliv na test, mohou hemolyzované vzorky poukazovat na špatné zacházení se vzorkem před analýzou a výsledky je nutno interpretovat opatrně Lipémie má na test nevýznamný vliv, kromě případu silné lipémie, kdy může dojít k prostorové interferenci. Vzorky pacientů, kteří užívají léky a/nebo u kterých probíhá léčba, mohou vykazovat chybné výsledky. Vzorky od pacientů, kterým byly podány přípravky myších monoklonálních protilátek k diagnostice nebo terapii, mohou obsahovat lidské protilátky proti myším (HAMA). Takové vzorky mohou vykazovat falešně zvýšené nebo snížené hodnoty PSA. Pro úplnější pochopení omezení tohoto postupu, si prosím přečtěte oddíly ODBĚR A MANIPULACE SE VZORKY, VAROVÁNÍ A BEZPEČNOSTNÍ OPATŘENÍ, SKLADOVÁNÍ A STABILITA a POZNÁMKY K POSTUPU této příbalové informace. PŘEDPOKLÁDANÉ HODNOTY Každá laboratoř by měla stanovit referenční interval, který odpovídá charakteristikám testované populace. podobně jako u všech diagnostických postupů musí být klinické výsledky interpretovány s ohledem na léky, které jsou současně podávány pacientovi. 10 Výsledky testu ST AIA-PACK PSAII nesmí být interpretovány jako definitivní výsledky na přítomnost nebo nepřítomnost karcinomu prostaty. Pacienti s hladinami PSA v referenčním rozmezí u zjevně zdravých subjektů mohou mít karcinom prostaty; pacienti s hladinami přesahujícími referenční interval nemusí trpět karcinomem prostaty. Výsledky ST AIA-PACK PSAII musí být interpretovány ve světle ostatních klinických nálezů a diagnostických postupů, jako například vyšetření per rectum. Biopsie prostaty je v současnosti lékařský uznávanou normou používanou k potvrzení přítomnosti/ nepřítomnosti karcinomu prostaty I. Referenční rozmezí Zde uvedený interval byl stanoven ve vzorcích heparinizované plazmy od 201 zjevně zdravých Asiatů. Kategorie: Muži Počet vzorků (n): 201 Referenční interval: 0 4,0 ng/ml II. Konverzní faktory Koncentrace PSA v této aplikaci jsou vyjádřeny v jednotkách ng/ml. Konverze na jednotky SI soustavy µg/l může být provedena s použitím následující rovnice: µg PSA/l = ng PSA/ml x 1,0 VÝKONNOSTNÍ CHARAKTERISTIKY Následující výkonnostní charakteristiky byly stanoveny pomocí TOSOH AIA-1800 Automated Immunoassay Analyser. PŘESNOST a. Výtěžnost: Ke třem vzorkům séra a třem vzorkům heparinizované plazmy byla přidána tři různá množství PSA a byla provedena analýza před přídavkem a po něm. 8-12

5 Vzorek Původní PSA Předpokládaná Naměřená Procento hodnota přidaný hodnota hodnota výtěžnosti (ng/ml) (ng/ml) (ng/ml) (ng/ml) (%) Sérum A 0,631 82,2 82,8 77,9 94,1 0,631 41,1 41,7 40,3 96,6 0,631 20,6 21,2 22,3 105,5 Sérum B 0,341 82,2 82,5 77,4 93,8 0,341 41,1 41,4 42,0 101,4 0,341 20,6 20,9 21,8 104,3 Sérum C 0,258 82,2 82,4 79,8 96,8 0,258 41,1 41,4 42,0 101,6 0,258 20,6 20,8 22,0 105,9 Plazma A 0,557 67,8 68,4 64,4 94,1 0,557 33,9 34,5 31,6 91,7 0,557 17,0 17,5 16,2 92,0 Plazma B 0,543 67,8 67,3 66,4 97,1 0,543 33,9 34,4 32,2 93,4 0,543 17,0 17,5 15,6 88,6 Plazma C 0,374 67,8 68,2 64,4 94,5 0,374 33,9 34,3 33,3 97,1 0,374 17,0 17,3 15,9 91,8 b. Ředění: Tři vzorky séra a tři vzorky heparinizované plazmy obsahující vysoké koncentrace PSA byly sériově ředěny ST AIA-PACK PSAII SAMPLE DILUTING SOLUTION a byla provedena analýza. Vzorek Faktor Předpokládaná Naměřená Procento ředění hodnota hodnota výtěžnosti (ng/ml) (ng/ml) (%) Sérum A žádný 61,8 7,5/10 46,3 46,7 100,8 5,0/10 30,9 31,8 102,9 2,5/10 15,4 16,3 105,7 1,0/10 6,17 6,53 105,8 Sérum B žádný 52,8 7,5/10 39,6 40,5 102,4 5,0/10 26,4 27,4 103,9 2,5/10 13,2 14,3 108,5 1,0/10 5,28 5,25 99,5 Sérum C žádný 62,2 7,5/10 46,6 46,0 98,7 5,0/10 31,1 32,2 103,6 2,5/10 15,5 15,7 101,2 1,0/10 6,21 5,93 95,5 Plazma A žádný 60,9 7,5/10 45,6 45,8 100,2 5,0/10 30,4 31,0 101,8 2,5/10 15,2 15,9 104,4 1,0/10 6,09 6,29 103, Plazma B žádný 54,9 7,5/10 41,7 41,4 100,6 5,0/10 27,4 28,5 103,9 2,5/10 13,7 14,6 106,4 1,0/10 5,49 5,47 99,7 Plazma C žádný 60,4 7,5/10 45,3 45,4 100,1 5,0/10 30,2 31,1 103,1 2,5/10 15,1 15,3 101,4 1,0/10 6,04 5,93 98,1 PŘESNOST a. Přesnost v rámci jednoho cyklu byla stanovena pomocí tří kontrolních vzorků séra a jednoho kontrolního vzorku heparinizované plazmy v celkem 20 cyklech. V rámci jednoho cyklu byla provedena analýza jedné sady dvou paralelních vzorků na jeden kontrolní vzorek. Průměrná hodnota každých dvou paralelních vzorků byla použita k získání sdružené směrodatné odchylky (SO), která pak byla použita k výpočtu variačního koeficientu (KV). Vzorek Průměr Sdružená směrodatná Variační koeficient (ng/ml) odchylka(ng/ml) (%) Sérum A 1,92 0,057 2,9 Sérum B 9,55 0,216 2,3 Sérum C 59,1 1,55 2,6 Plazma A 1,96 0,042 2,2 b. Celková přesnost byla stanovena paralelním stanovením tří kontrolních vzorků séra a jedno kontrolní vzorku heparinizované plazmy ve 20 samostatných cyklech. Průměrné hodnoty každého cyklu byly použity k výpočtu sdružené směrodatné odchylky (SO) a variačního koeficientu (KV). Vzorek Průměr Sdružená směrodatná Variační koeficient (ng/ml) odchylka (ng/ml) (%) Sérum A 1,92 0,075 3,9 Sérum B 9,55 0,356 3,7 Sérum C 59,1 2,38 4,0 Plazma A 1,96 0,068 3,5 KORELACE Korelace mezi sérem (x) a heparinizovanou plazmou (y) v ST AIA-PACK PSAII byla provedena s použitím 165 pacientských vzorků. Směrnice 1,000 Průsečík s osou y -0,026 Korelační koeficient 0,999 Rozmezí vzorků 0,031-96,9 Počet vzorků

6 SPECIFICITA Zkřížená reaktivita byla testována u následujících látek. Zkřížená reaktivita (%) je procento látky, které bude identifikováno jako PSA. Jsou-li ve vzorku přítomny tyto látky ve stejné koncentraci jako PSA, bude konečný výsledek zvýšen o tato procenta. Látka Zkřížená reaktivita (%) PAP < 0,01 SENZITIVITA Minimální detekovatelná koncentrace (MDC) prostatického specifického antigenu byla stanovena jako 0,01 ng/ml. Minimální detekovatelná koncentrace (MDC) je definována jako taková koncentrace PSA, která odpovídá míře fluorescence, jež je dvě směrodatné odchylky od průměrné míry fluorescence pěti opakovaných stanovení pomocí ST AIA-PACK PSAII CALIBRATOR (1). INTERFERENCE Interference je v rámci této studie definována jako výtěžnost přesahující 10 % známé koncentrace vzorku po přidání následujících látek k lidským vzorkům. Hemoglobin (až do 445 mg/dl), volný bilirubin (do 16 mg/dl) a konjugovaný bilirubin (do 17 mg/dl) neinterferují s testem. Lipémie indikovaná koncentrací triglyceridů (do mg/dl) neinterferuje s testem. Kyselina askorbová (do 20 mg/dl) neinterferuje s testem. Bílkoviny, jak ukazuje koncentrace lidského albuminu (až do 50 mg/ml), neinterferují s tímto testem. Heparin (do 100 U/ml) neinterferuje s testem. REFERENCE 1) Wang M. C., et al, 1977, Tissue Specific and Tumor Specific Antigens In Human Prostate, Fed. Proc. 36: ) Wang, M. C., et al, 1979, Purification of a Human Prostate Specific Antigen. Invest. Urol. 17:159. 3) Papsidero, L. D., et al, 1980, A Prostate Antigen in Sera of Prostatic Cancer Patients. Cancer Res. 40: ) Nadji, M., et al, 1981, Prostatic-Specific Antigen: An Immunohistologic Marker for Prostatic Neoplasms. Cancer 48: ) Wang, M. C., et al, 1981, Prostatic Antigen: A New Potential Marker for Prostatic Cancer. Prostate 2:89. 6) Frankel, A. G., et al, 1982, Monoclonal Antibodies to a Human Prostate Antigen. Cancer Res. 42:3714 7) Kuriyama, M., et al, 1980, Quantitation of Prostate-Specific Antigen in Serum by a Sensitive Enzyme Immunoassay. Cancer Res. 40: ) Killian, C. S., 1985, Prognostic Importance of Prostate-Specific Antigen for Monitoring Patients with Stages B2 to D1 Prostate Cancer. Cancer Res. 45:886. 9) Kuriyama, M., et al, 1982, Multiple Marker Evaluation in Human Prostate Cancer with the Use of Tissue-Specific Antigens. J. Nat. Canc. 68:99. 10) Young, D., 1990, Effects of Drugs on Clinical Laboratory Tests. 3rd Edition, Washington, DC, American Association for Clinical Chemistry Press. 11) Catalona, W. et al., Comparison of digital rectal examination and serum Prostate specific antigen in the early detection of prostate cancer: results of a multi-center clinical trial of 6,630 men. J. Urology. 151: ) Lederer, A. et al., Measurement of the proportion of free to total prostate specific antigen improves the diagnostic performance of prostate specific antigen in the diagnostic gray zone of prostate specific antigen Urology. 46: ) Chen, Y., et al., Using proportions of free to total prostate specific antigen, age, and total prostate specific antigen to predict the probability of prostate cancer Urology. 47: ) Rafferty, B., et al., Reference for Prostate-specific antigen (PSA): Establishment of the first International Standards Free PSA and PSA (90:10) Clin. Chem., 46: TOSOH CORPORATION 3-8-2, Shiba, Minato-ku TOKYO (JAPONSKO) Tel.: +81 (0) Fax: +81 (0) TOSOH EUROPE N.V. Transportstraat 4 B-3980 TESSENDERLO BELGIE Tel.: +32 (0) Fax: +32 (0) TOSOH BIOSCIENCE, INC Shoreline Court, Suite 101 South San Francisco, CA 94080, USA Telefon: Objem netto (po rekonstituci pro lyofilizovaný materiál)