Transkript

1

2

3 Document number: ; Page: 0 PATENTOVÝ SPIS ( 19) ČESKÁ REPUBLIKA (21) Číslo přihlášky (22) Přihlášeno ( 40) Zveřejněno (Věstník č ) ( 47) Uděleno (24) Oznámení o udělení ve věstníku (Věstník č. 24/2016) ( 11) Číslo dokumentu: (13) Druh dokumentu: B6 (51) Int. Cl.: Cl2N 1120 Cl2N5/02 Cl2N 5104 ( ) ( ) ( ) ÚŘAD PRŮMYSLOVÉHO VLASTNICTVÍ ( 56) Relevantní dokumenty Xiangcan Jin et al.:"effects of lanthanum(iii) and EDTA on the growth and competition of Microcystís aeruginosa and Scenedesmus quadricauda", Limnologica Ecology and Management oflnland Waters, Volume 39, lssue 1, February 2009, Pages 86-93; doi:l0.1016/j.limno CN A; CN A; AU A; CN A; CN A; CN A. (73) Majitel patentu Mikrobiologický ústav AV ČR, v. v. i., Praha 4, CZ Botanický ústav AV ČR, v. v. i Průhonice, CZ Univerzita Karlova v Praze, Přírodovědecká fakulta, Praha 2, CZ (72) Původce RNDr. Tomáš Řezanka, CSc., DSc Praha, CZ RNDr. Milada Vítová, Ph.D., Třeboň, CZ RNDr. Linda Nedbalová, Ph.D Třeboň, CZ RNDr. Jaromír Lukavský, CSc Třeboň, CZ ( 7 4) Zástupce PatentCentrum Sedlák a Partners s.r.o., Husova 5, České Budějovice co m o co o M N (.) (54) Název vynálezu Živný roztok pro kultivaci fotosyntetizujících mikroorganismů, způsob jeho přípravy a použití (57) Anotace: Živný roztok pro kultivaci fotosyntetizujících mikroorganismů, zejména řas nebo sinic, obsahuje NaN0 3, Ca(N0 3 )z.6h 2 0, K 2 HP0 4, MgS0 4.7H 2 0, Na 2 C0 3, a stimulační činidlo. Podstata vynálezu spočívá v tom, že stimulační činidlo obsahuje alespoň jeden prvek ze skupiny prvků vzácných zemin zahrnující skandium, yttrium, lanthan, cer, praseodym, neodym, samarium, europium, gadolinium, terbium, dysprosium, holmium, erbium, thulium, ytterbium, lutecium. Předmětem vynálezu také je způsob přípravy živného roztoku pro kultivaci fotosyntetizujících mikroorganismů obsahujícího alespoň jeden prvek ze skupiny prvků vzácných zemin a použití alespoň jednoho prvku vzácných zemin nebo směsi prvků vzácných zemin jako stimulačního činidla do živného roztoku pro kultivaci fotosyntetizujících mikroorganismů.

4 Document number: ; Page: 1 cz Živný roztok pro kultivaci fotosyntetizujících mikroorganismů, způsob jeho přípravy a použití 5 Oblast techniky Vynález se týká oblasti biotechnologií a akvakultury, konkrétně živného roztoku pro kultivaci fotosyntetizujících mikroorganismů, způsobu jeho přípravy a použití. IO Dosavadní stav techniky Fotosyntetizující mikroorganismy, konkrétně sinice a řasy, mají velký potenciál použití v biotechnologii, díky své vysoké růstové rychlosti a možnosti průmyslového pěstování v masových 15 suspenzních kulturách, které jsou snadno technicky ovladatelné. Navíc mohou být pěstovány i v lokalitách nevhodných pro klasické plodiny (pouště, slaniska, ploché střechy, atd.). Jejich výhodnou je, že nezabírají kvalitní půdu využitelnou pro pěstování zemědělských plodin. Základem kultivací řas a sinic jsou živné roztoky, které musí obsahovat všechny prvky nezbytné 20 pro jejich růst, jako P, N, Mg, K a další, včetně stopových prvků (Mo, Cu, Zn, atd.). Existují řádově desítky různých předpisů na složení živných roztoků. Základním zdrojem živin fotosyntetizujících mikroorganismů je uhlík, který je dodáván hlavně jako plynný C02 většinou v kombinaci s uhličitany a hydrogenuhličitany. Pro zrychlení růstu mikroorganismů, zvýšení produkce biomasy a biotechnologicky využitelných látek probíhá v současné době výzkum různých stimulan- 25 tů. V současné době jsou testovány např. fytohormony a různé jiné chemické látky včetně metanolu, chloridu železitého, spermidinu či dokonce lokálních anestetik. Další možností stimulace je využití směsn) 1 ch kultur s bakteriemi nebo heterotrofní kultivace. Některé výše zmiňované možnosti 30 jsou účinné, ale i ty s sebou nesou různé nevýhody jako zvýšené riziko bakteriální kontaminace, nutnost výroby stimulantu chemickou syntézou, nepříznivý vliv stimulantu na jiné organismy po uvolnění do prostředí, či vysoké náklady. Úkolem vynálezu je poskytnout vhodný stimulant pro stimulaci růstu fotosyntetizujících mikro- 35 organismů, především řas a sinic pro biotechnologické využití pro produkci biomasy, olejů a jiných metabolitů. Podstata vynálezu 40 Tento úkol je vyřešen vytvořením živného roztoku pro kultivaci fotosyntetizujících mikroorganismů, zejména řas nebo sinic, podle předloženého vynálezu. Živný roztok obsahuje NaN03, Ca(N03)2.6H20, K1HP04, MgS04.7H20, Na2C03, případně další potřebné živiny a stimulační činidlo a jeho podstata spočívá v tom, že stimulační činidlo obsahuje alespoň jeden prvek ze sku- 45 piny prvků vzácných zemin zahrnující skandium, yttrium, lanthan, cer, praseodym, neodym, samarium, europium, gadolinium, terbium, dysprosium, holmium, erbium, thulium, ytterbium a lutecium. Kovy vzácných zemin jsou v příslušné koncentraci schopny zrychlit růst některých řas a sinic. Jejich využitím lze zvýšit produkci biomasy mikroorganismů a v ní obsažených látek, 50 například olejů. Živný roztok je ve výhodném provedení na bázi roztoku Z8, případně směsi roztoku Z8 a Gaffronova roztoku mikroprvků, a obsahuje alespoň jeden prvek ze skupiny prvků vzácných zemin nebo jejich směs v množství od O, 1 µg do 1 g/l. Roztok Z8 a Gaffronův roztok mikroprvků jsou univerzální média pro kultivaci řas a sinic. Přidáním prvků vzácných zemin do roztoku Z8 nebo - I -

5 Document number: ; Page: 2 jeho směsi s Gaffronovým roztokem mikroprvků se zvyšuje růstový potenciál pěstovaných mikroorganismů. Živný roztok obsahuje prvky vzácných zemin ve formě čistých sloučenin, např. ve formě chlori- 5 dů, jejichž výhodou je dobrá rozpustnost ve vodě. V případě přidání čistých sloučenin prvků vzácných zemin je jasně definováno složení kultivačního roztoku a může tak být jasně zhodnocen výsledný efekt pro jednotlivé prvky či synergický efekt v případě přidání několika různých prvků. Některé prvky vzácných zemin vykazovaly velmi vysokou stimulaci (Lu % při 0,01 mg/l, Pr % při 1 mg/l, Gd % při 0,3 mg/l, Srn % při 0,03 mg/l), tyto 10 prvky jsou však vzácné a tudíž méně dosažitelné pro praxi. V jiném výhodném provedení živný roztok obsahuje prvky vzácných zemin ve formě extraktu z monazitu. Monazit má desítky nalezišť včetně České Republiky (Údraž, Velká Kraš, středočeský permokarbon) a je možné jej získat i v tunových množstvích. Použitý extrakt z monazitu obsa- 15 huje yttrium, gadolinium, cer, lanthan, neodym, samarium a praseodym. Tato varianta provedení je ekonomicky jednoznačně výhodnější (I g extraktu monazitu - řádově desítky Kč versus řádově tisíce Kč za 1 g čistých solí). Předmětem vynálezu také je způsob přípravy živného roztoku pro kultivaci fotosyntetizujících 20 mikroorganismů. Jeho podstata spočívá v tom, že do živného roztoku se přidá alespoň jeden prvek ze skupiny prvků vzácných zemin zahrnující skandium, yttrium, lanthan, cer, praseodym, neodym, promethium, samarium, europium, gadolinium, terbium, dysprosium, holmium, erbium, thulium, ytterbium, lutecium. Kovy vzácných zemin jsou schopny v příslušné koncentraci zrychlit růst některých řas a sinic a tudíž i zvýšit produkci biomasy i olejů bez větších nákladů, neboť 25 procentické zastoupení olejů v biomase i při zrychlení růstu stimulátorem zůstává konstantní. Koncentrace jednotlivých prvků nebo jejich směsí je nutno dávkovat v příslušné, otestované dávce pro jednotlivé kmeny řas a sinic, protože po jejím překročení je růst naopak inhibován. Při přípravě živného roztoku se postupuje tak, že do živného roztoku na bázi roztoku Z8 nebo 30 jeho směsi s Gaffronovým roztokem mikroprvků se přidá alespoň jeden prvek ze skupiny prvků vzácných zemin nebo jejich směs v množství od O, 1 µg do 1 g/l. Prvky vzácných zemin se do živného roztoku přidávají ve formě čistých sloučenin, s výhodou ve formě chloridů. Velmi vysokou stimulaci vykazují tyto prvky Lu % při 0,01 mg/l, Pr- 260 % při 1 mg/l, Gd- 237 % při 0,3 mg/l, Srn % při 0,03 mg/l. 35 V jiném výhodném provedení se prvky vzácných zemin extrahují z monazitu horkou kyselinou sírovou a získaný extrakt se následně přidává do živného roztoku, přičemž použitý extrakt monazitu obsahuje yttrium, gadolinium, cer, lanthan, neodym, samarium, prasesodym. 40 Předmětem vynálezu také je použití alespoň jednoho prvku vzácných zemin nebo směsi prvků vzácných zemin jako stimulačního činidla do živného roztoku pro kultivaci fotosyntetizujících mikroorganismů. Výhody vynálezu spočívají ve výrazné stimulaci růstu fotosyntetizujících mikroorganismů, ze- 45 jména řas a sinic. Díky zvýšenému růstu mikroorganismů podle vynálezu se zvýší výnosy z produkce biomasy, olejů a jiných metabolitů produkovaných mikroorganismy Objasnění výkresů Vynález bude blíže objasněn pomocí obrázků na výkresech, na nichž znázorňuje obr. 1 graf růstu řas a sinic v živném roztoku Z8 obohaceném extraktem monazitu pomocí H2S04, a obr. 2 vliv koncentrace vybraných prvků vzácných zemin (0,001 až 100 mg/i živného roztoku) na přírůstek sušiny a zásobních olejů u řasy Trachydiscus minutus

6 Document number: ; Page: 3 Příklady uskutečnění vynálezu Rozumí se, že dále popsané konkrétní příklady uskutečnění vynálezu jsou představovány pro ilu- 5 straci, nikoli jako omezení příkladů provedení vynálezu na uvedené případy. Odborníci znalí stavu techniky najdou nebo budou schopni zjistit za použití rutinního experimentování větší či menší počet ekvivalentů ke specifickým uskutečněním vynálezu, která jsou zde speciálně popsána. IO Příklad I I 5 Prvky vzácných zemin byly získány jako chloridy (p.a.) od firmy Sigma-Aldrich (Tab. 2). Příslušné koncentrace jednotlivých sloučenin byly naváženy do živného roztoku Z8 včetně mikroprvků (podle Staub 1961, Tab. 4). Test byl proveden mikrometodou podle Lukavský et al. ( 1995), tj. v jamkách sérologické destičky plněné po 0,2 ml/jamku. Poté byly destičky sterilizovány 30 min otevřené pod UV germicidní zářivkou a naočkovány jednotlivými inokuly příslušné řasy: Trachydiscus minutus, Stichococcus bacillaris, Raphidocelis subcapitata a Parachlorella kessleri (Tab. I). lnokulum, 20 µi/jamku bylo naředěno tak, že počáteční koncentrace v jamce byla buněk/ml. Celý sloupec tj. 6 jamek bylo vždy dávkováno jako opakování, což zaru- 20 čuje chybu stanovení OD 750 nm ± 5 %. Kultivace probíhala při 26 C, v nepřetržitém osvětlení 20 W/m 2 FAR (fotosynteticky aktivní záření, tj nm) zářivkami, denní typ, v zařízení podle Lukavský (1974). C0 2 byl udržován v kultivačním prostoru v koncentraci 2 % objemová. V pravidelných intervalech byl růst měřen přímo v destičkách čtečkou iems (Labscale, SF) při vlnové délce 750 nm. Protože médium s vyšším obsahem prvků vzácných zemin bylo obvykle 25 zakaleno sraženými solemi, destičky byly ihned po naočkování změřeny a tato hodnota byla vždy odčítána jako blank. Obsah lipidů v řasové suspenzi byl stanoven spektrofotometricky pomocí specifické fluorescenční barvy Nile Red of fy. Sigma-Aldrich, Česká republika (Li et al. 2013). Výsledky experimentů prokázaly stimulace řádově i v desítkách procent, které jsou však specific- 30 ké pro jednotlivé druhy i prvky vzácných zemin (Tab. 5). Zelená řasa Parachlorella kessleri vykázala nejmenší odezvu, povětšinou inhibici, největší stimulace byly zjištěny pro řasu Trachydiscus minutus. Jelikož právě tato řasa je perspektivní v biotechnologii jako zdroj EPA (Lukavský et al. 20 I O) je toto zjištění významné. 35 Příklad 2 Příprava extraktu z monazitu, modifikovaná podle Borai et al. (2002), byla provedena následovně: monazit, pocházející z Číny (Česká geologická služba) byl velmi jemně rozetřen v třecí misce 40 a 5 g bylo vařeno 20 min v 25 ml koncentrované H 2 S0 4 Po ochlazení byl centrifugací oddělen extrahovaný roztok od nerozpuštěného zbytku a extrakt byl dávkován v logaritmické škále ředění do živného roztoku Z8 vč. stopových prvků (Tab. 4). Koncentrace prvků vzácných zemin v tomto extraktu jsou v Tab. 3. Příprava, plnění, očkování a kultivace sérologických destiček byla shodná s Příkladem 1. Od naměřených hodnot OD 750 nm nebyly v tomto případě odečítány blanky, 45 protože extrakt byl vždy čirý. Extrakt monazitu byl testován na větším spektru organismů (Tab. 1), největší stimulace vyvolal u kmenů sinic (až 165 %, Obr. 1)

7 Document number: ; Page: 4 cz Přehled tabulek s Tab. I: Seznam použitých kmenů řas a sinic ze sbírky Botanického ústavu AV ČR v.v.i. v Třeboni (htt12://ccala.butbn.cas.cz/index.12hq). Druh Arthrospira maxima Setchell et Gardner CCALA kód Kmen Synonymum 027 COMPERE 1968/3786 Spirulina maxima Desmodesmus subspicatus (R. Chodat) E. Hegewald et 688 BRINKMANN 1953 A. Schmidt Microcystis aeruginosa Kiltzing 796 Parachlorella kessleri (Fott & Nováková) Krienitz, E.H.Hegewald, Hepperle, V.Huss, T.Rohr & M.Wolf Raphidocelis subcapitata (Korshikov) Nygaard et al. Stichococcus bacillaris Naegeli ZAPOMĚLOVÁ Scenedesmus subspicatus 253 LARG/l Ch/orel/a kessleri 433 SKULBERG 1959/1 493 HINDÁK 1984/15 Selenastrum capricornutum Trachydiscus minutus LUKAVSKÝet Pseudostaurastru 931 (Bourr.) Ettl PŘIBYL 2005/1. m minutum -4-

8 Document number: ; Page: 5 5 Tab. 2: Chemikálie použité pro laboratorní testy mikrometodou v sérologických destičkách a navážky pro základní koncentrace odpovídající 100 mg kovu/litr. Všechny sloučeniny od fy. Sigma-Aldrich. Atomová Molekulová Navážka hmotnost hmotnost (mg/looml) kovu chloridu ScCh 44,96 151,33 336,611 YCh.6H20 88,91 303,36 341,161 LaCb.6H20 138,90 371,37 267,346 CeCh.6H20 140,12 372,58 265,901 PrCb 140,91 247,27 175,468 NdCl3.6H20 144,24 358,69 248,676 SmCh.6H20 150,36 364,81 242,511 EuCh.6H20 151,97 366,41 241, 107 GdCb.6H20 157,25 371,70 236,902 TbCl3.6H20 158,93 373,38 234,934 DyCb.6H20 162,50 376,95 231,969 H0Cl3.6H20 164,93 379,38 230,011 ErCb.6H20 167,26 381,71 228,214 Trn Ch 168,93 275,29 162,961 YbCb.6H20 173,04 387,49 223,931 LuCh.6H20 174,97 389,42 222,538 IO Tab. 3: Složení extraktu monazitu v H2S0 4, připraveného podle Příkladu 2. Koncentrace prvků byla stanovena metodou hmotnostní spektrometrie s indukčně vázaným plazmatem. Prvek Koncentrace (mg/i) y 276,0 Fe 139,0 Th 26,8 Gd 26,6 Ce 24,5 La 23,4 Nd 15,9 Srn 8,2 Pr 3,8-5 -

9 Document number: ; Page: 6 Tab. 4: Tabulka složení zásobních roztoků pro přípravu média Z8 (Zehnder) podle Staub ( 1961 ): Příprava živného roztoku: Do 700 ml destilované vody přidáme po 1 O ml jednotlivých makroelementů ze zásobních roztoků, 0,2 ml Fe-EDT A roztoku, 0,08 ml Gaffronova roztoku mikroele- 5 mentů a doplníme destilovanou vodou na 1 litr. Makroelementy {g/l} Gaffronův roztok mikroelementů {mg/looml} NaN03 46,7 NiS04(NH4)2S04.6H20 19,8 K Br 11,9 Ca(N03)2.6H20 5,9 V 204(S04)3. l 6H20 3, 1 H3B03 31,0 K2HP04 3, I (Nl!i)6Mo1024.4H20 8,8 MnS04.4H MgS04.7H20 2,5 ZnS04.7H20 28,7 Cr(N03)3.7H20 3,7 Na2C03 2, I Cd(N03)2.4H20 15,4 Co(N03)2.6H20 14,6 Al2(S04)3K2S04.24H20 47,4 KJ 8,3 Na2 W04.2H20 3,3 CuS04.5H20 12,5 Fe-EDTA roztok (do 500 ml): 0,138 mg FeCh.6H 2 0 in 5ml O,lN HCI + 0,186 mg Chelaton III v 5ml O, IN HCI 10 Tab. 5: Stimulace růstu řas Trachydiscus minutus (CCALA 931), Stichococcus bacillaris (CCALA 493), Raphidocelis subcapitata (CCALA 433) a Parachlorella kessleri (CCALA 253). Kovy byly dodány jako chloridy, přídavky kovů do živného roztoku Z8 jsou uvedeny v Tab. 2. Stimulace byly vypočteny jako % maximální hodnoty OD 750 nm oproti kontrole tj. nulovému přídavku. ~ = průměr pro kov nebo pro organismus (ze tří měření), - nestanoveno konc. 493 konc. 433 konc. 253 konc. 1kov O/o mg/i O/o mg/i O/o mg/i % mg/i % Se 196,1 0,30 85,2 0,10 110,0 O, 10 88,3 0,01 119,9 y 157,9 1,00 114,2 0,01 106,7 0,01 89,2 0,01 117,0 La 154,6 0,01 104,7 0,10 104,4 1,00 98,0 1,00 115,4 Ce 167,7 0,3 110,8 0,10 110,8 0,30 51,9 1,00 110,3 Pr 295,9 1,00 97,7 0,01 107,7 0,01 97,5 1,00 149,7 Nd 135,7 0,03 117,5 0,30 134,1 0,10 97,7 0,01 121,2 Srn 184,0 0,03 85,3 0,10 104,9 0,01 97,4 0,01 117,9 Eu 87,5 0,30 136,3 0,30 106,8 0,01 90,9 3,00 105,4 Gd 237,6 0,30 144,6 o, ,6 0,01 95,2 3,00 149,0 Tb 161, 1 0,03 130,2 0,01 112,3 1,00 97,8 0,30 125,3 Dy 111,6 0,30 88,4 3,00 50,0 Ho 111,3 0,30 188,9 0,30 107,1 0,30 91,8 3,00 124,8 Er 154,0 0,03 116,7 0,03 113,6 0,03 93,4 0,10 119,4 Trn 160,4 0,30 157,1 0,30 120,1 1,00 92,9 3,00 132,6 Yb 154,7 0,30 127,9 0,30 107,4 1,00 99,8 0,01 122,5 Lu 324,8 0, ,00 99,2 0,01 104,0 1,00 171,7!Org. O/o 178,9 0,28 125,0 0,20 111,0 0,32 92,1 1,22-6 -

10 Document number: ; Page: 7 cz Průmyslová využitelnost s Živný roztok pro kultivaci fotosyntetizujících mikroorganismů, způsob jeho přípravy a použití podle vynálezu lze využít v biotechnologiích pro zvýšení produkce biomasy, olejů a jiných metabolitů z mikroorganismů. IO PATENTOVÉ NÁROKY 1. Živný roztok pro kultivaci fotosyntetizujících mikroorganismů, zejmena řas nebo sinic, obsahující NaN03, Ca(N03) 2.6H 2 0, K 2 HP0 4, MgS0 4.7H 2 0, Na 2 C03, a stimulační činidlo, I 5 vy z n a č u j í c í s e t í m, že stimulační činidlo obsahuje alespoň jeden prvek ze skupiny prvků vzácných zemin zahrnující skandium, yttrium, lanthan, cer, praseodym, neodym, samarium, europium, gadolinium, terbium, dysprosium, holmium, erbium, thulium, ytterbium, lutecium Živný roztok podle nároku 1, v y z n a č u j í c í s e t í m, že je na bázi roztoku Z8 nebo jeho směsi s Gaffronovým roztokem mikroprvků a obsahuje alespoň jeden prvek ze skupiny prvků vzácných zemin nebo jejich směs v množství od O, I µg do 1 g/l. 3. Živný roztok podle nároku 1 nebo 2, vy z n a č u j í c í s e t í m, že obsahuje prvky 25 vzácných zemin ve formě čistých sloučenin. 4. Živný roztok podle nároku 3, vy zn ač u j í c í se t í m, že obsahuje prvky vzácných zemin ve formě chloridů Živný roztok podle nároku 1 nebo 2, vy z n a č u J 1 c 1 s e t í m, že obsahuje prvky vzácných zemin ve formě extraktu z monazitu Živný roztok podle nároku 5, vy znač u j í c í se tím, že extrakt z monazitu obsahuje yttrium, gadolinium, cer, lanthan, neodym, samarium a praseodym. 7. Způsob přípravy živného roztoku pro kultivaci fotosyntetizujících mikroorganismů podle alespoň jednoho z nároků 1 až 6, v y z n a č u j í c í s e t í m, že do živného roztoku se přidá alespoň jeden prvek ze skupiny prvků vzácných zemin zahrnující skandium, yttrium, lanthan, cer, praseodym, neodym, samarium, europium, gadolinium, terbium, dysprosium, holmium, erbium, 40 thulium, ytterbium, lutecium. 45 so 8. Způsob přípravy podle nároku 7, vy znač ují c í se tím, že do živného roztoku na bázi roztoku Z8 nebo jeho směsi s Gaffronovým roztokem mikroprvků se přidá alespoň jeden prvek ze skupiny prvků vzácných zemin nebo jejich směs v množství od O, 1 µg do I g/1. 9. Způsob přípravy podle nároků 7 a 8, vy z n a č u j í c í s e t í m, že prvky vzácných zemin se do živného roztoku přidávají ve formě čistých sloučenin. 10. Způsob přípravy podle nároku 9, vy zn ač u j í c í se tím, že prvky vzácných zemin se do živného roztoku přidávají ve formě chloridů. 11. Způsob přípravy podle nároků 7 a 8, vy znač u j í c í se tím, že prvky vzácných zemin se extrahují z monazitu horkou kyselinou sírovou a získaný extrakt se následně přidává do živného roztoku

11 Document number: ; Page: Způsob přípravy podle alespoň jednoho z nároků 7 až 11, vy znač u J 1 c 1 se tím, že extrakt monazitu obsahuje gadolinium, cer, lanthan, neodym, samarium, prasesodym. s 13. Použití alespoň jednoho prvku vzácných zemin nebo směsi prvků vzácných zemin jako stimulačního činidla do živného roztoku pro kultivaci fotosyntetizujících mikroorganismů výkresy - 8 -

12 Document number: ; Page: 9 Obr. I: Růst řas a sinic v živném roztoku Z8 (Tab. 4) obohaceném extraktem monazitu pomocí H 2 S0 4 Kultivační podmínky viz Příklad I. ~ o U')... c o ,.._ Trachydiscus mínutus -m Stíchococcus bacillaris -O- Raphidocelis subcapitata..._ Microcystis aerugínosa + Parachlorella kessleri _. Desmodesmus subspicatus -0- Arthrospira maxima - 9 -

13 Document number: ; Page: 10 Obr. 2: Vliv koncentrace vybraných prvků vzácných zemin (0,001 až 100 mg/i živného roztoku) na přírůstek sušiny (šikmo šrafované sloupečky) a zásobních olejů (křížem šrafované sloupečky) u řasy Trachydiscus minutus O, 1 O, 1 0,01 0,01-0,001 0,001 s "Qj' o Gd (mg/i) Ce (mg/i) ců c ;u; :I "' O, 1 O, 1 ::: o 0,01 O, o 0,01 O, o 0,01 0, O 0,01 O, Pr (mg/i) Trn (mg/i) Konec dokumentu