Minulost, současnost a budoucnost práce v embryologické laboratoři RNDr. Kateřina Wagnerová, Mgr. Pavlína Motlová, MUDr.

Rozměr: px

Začít zobrazení ze stránky:

Download "Minulost, současnost a budoucnost práce v embryologické laboratoři RNDr. Kateřina Wagnerová, Mgr. Pavlína Motlová, MUDr."

Otakar Kopecký
před 5 lety
Počet zobrazení:

1 Minulost, současnost a budoucnost práce v embryologické laboratoři RNDr. Kateřina Wagnerová, Mgr. Pavlína Motlová, MUDr. Pavel Texl Sanatorium Helios, Brno

2 Úvod Obor asistované reprodukce prodělal od svého vzniku velký rozvoj jak v oblasti diagnostických a medicínských postupů, tak v poslední době především v technickém a přístrojovém vybavení laboratoří provádějících IVF a PGT.

3 Klíčové faktory v embryologické laboratoři ovlivňující výsledek média a roztoky pracovníci konzistence postupů přístrojové vybavení čistota plynů čistota vzduchu dokumentace světlo

4 Kumulativní stres Drobnými událostmi a odchylkami může být u embryí způsobena různá míra stresu. Jde obvykle o kumulativní efekt, který může výrazně ovlivnit výsledek.

5 Podmínky kultivace - inkubátory

6 Podmínky kultivace - inkubátory inkubátory musí pracovat v každé IVF laboratoři spolehlivě za jakýchkoliv podmínek malé změny v koncentraci CO 2 (v inkubátoru) totiž mají velký vliv na změnu ph médií embrya mají omezenou kapacitu regulovat intrac. ph

negativně ovlivňuje metabolismus a další vývoj embrya ph = -log (c H + ) CO 2 + H 2 O H 2 CO 3 H + + HCO 3- záporná

7 Kritický parametr - ph médií intracelulární ph embryí ~ 7,1-7,2 v různých stádiích odlišné hodnoty způsobují zastavení embryonálního vývoje ph medií 7,2 dosáhneme kultivací v prostředí s 6% CO 2 a 37 C i malé zvýšení ph negativně ovlivňuje metabolismus a další vývoj embrya ph = -log (c H + ) CO 2 + H 2 O H 2 CO 3 H + + HCO 3- záporná hodnota dekadického logaritmu koncentrace vodíkových iontů M. Lane et al.: To QC or not to QC: the key to a consistent laboratory?o

8 Velký inkubátor versus miniinkubátor Velký inkubátor pomalé obnovení požadované teploty velký prostor může mít za následek výrazné teplotní rozdíly pomalé obnovení požadované koncentrace CO2 při každém otevření ovlivněna všechna kultivovaná embrya

9 Velký inkubátor versus miniinkubátor Čas (min) potřebný k dosažení 90% původní hodnoty (srovnáno s hodnotou před otevřením na 10 s) MINC teplota vlhkost CO2 velký inkubátor Hodnoty v grafech převzaty z Lee et al.: Incorporation of the Cook K-Minc Incubator and Media System into the IVF Lab: The Future of IVF

10 Velký inkubátor versus miniinkubátor Working Toward IVF Lab Optimization -COOK media Workshop Dubai2015

11 Velký inkubátor versus miniinkubátor Fujiwara et al. 2007: Effect of micro-environment maintenance on embryo culture after in-vitro fertilization: comparison of top-load mini incubator and conventional front-load incubator

12 Velký inkubátor versus miniinkubátor Stolní miniinkubátor rychlý návrat teploty a koncentrace CO 2 do požadovaných hodnot lepší kontrola a konzistence kultivačního prostředí méně kultivačních misek v jednom uzavřeném prostoru používání předem smísených plynů, snížení koncentrace kyslíku lepší vývoj embrya

13 Velký inkubátor versus miniinkubátor

14 Optimální podmínky pro kultivaci embryí - teplota vědecký konsensus - teplota 36,6-37,0 ⁰C je optimální pro lidská embrya změna teploty mimo toto rozmezí může negativně ovlivnit meiotické vřeténko a metabolismus při poklesu nebo zvýšení teploty mimo rozmezí bylo pozorováno zhoršení vývoje embryí do stádia blastocysty

Optimální podmínky pro kultivaci embryí GERI kontrola koncentrace plynů plyn se vrací co nejrychleji do požadované koncentrace určeno pro směs plynů z předem namíchané TL nebo s externím směšovačem

15 Optimální podmínky pro kultivaci embryí GERI kontrola koncentrace plynů plyn se vrací co nejrychleji do požadované koncentrace určeno pro směs plynů z předem namíchané TL nebo s externím směšovačem regulátor udržuje stálý tlak snímač CO 2 pro detekci abnormálních podmínek O 2 interní reprodukční prostředí nepřesahuje 8% konc. O 2 bylo prokázáno, že snížení koncentrace kyslíku podporuje vývoj embrya in vitro Alarmy!

Optimální podmínky pro kultivaci embryí GERI - světelná expozice Embrya jsou v IVF laboratoři vystavena světlu mikroskop, laboratorní osvětlení, apod.

16 Optimální podmínky pro kultivaci embryí GERI - světelná expozice Embrya jsou v IVF laboratoři vystavena světlu mikroskop, laboratorní osvětlení, apod. Krátká vlnová délka ( nm) může způsobit neletální stres embryí, což vede ke snížení vývoje blastocyst. GERI používá spektrum světla o vlnové délce nm.

17 GERI

18 GERI

19 GERI jeden pacient jedna samostatná a nezávislá komůrka

20 GERI jedna jamka 1 embryo

21 GERI

23 Kultivační média

24 média GEMS Cleavage Medium kultivace od zygoty po rýhující se embrya Blastocyst Medium kultivace od rýhujících se embryí po blastocysty nebo Geri Medium kontinuální kultivace od zygoty do stádia blastocysty

25 GERI klinické výsledky Helios 60% GERI 488 kultivací, MINC 383 kultivací 50% MINC GERI 40% 30% 20% 10% 0% použité blastocysty

26 GERI klinické výsledky Helios Utilizace kultivace (procento kvalitních blastocyst vhodných k použití D5+D6 z 2PN) je v GERI inkubátoru o 23% vyšší než utilizace kultivace v MINC. ASP+ u těhotenství embryí kultivovaných v GERI je o 13% vyšší než u embryí kultivovaných v MINC. Kultivace v GERI dává více kvalitních embryí, navíc s lepší prognózou dalšího vývoje.

27 GAVI v Sanatoriu Helios od roku 2006 používána už 4. metoda vitrifikace

28 GAVI polo-automatizovaný proces ekvilibrace konzistentní časování, objem, teplota jednodušší zapracování není rozdíl mezi pracovníky standardizovaný proces uzavřený systém

29 GAVI klinické výsledky Helios 80% 70% 60% 50% 40% 30% 20% 10% čerstvý transfer 1. KET 0% hcg+ ASP+ porod

30 GAVI klinické výsledky Helios KET GAVI o 14,2% více biochemických těhotenství a o 33,2% více klinických těhotenství s ASP+ ve srovnání s Cryotopem , 911 KET Cryotop, 108 GAVI

31 Děkuji za pozornost

Podobné dokumenty

GERI, GEMS A GAVI ZKUŠENOSTI A KLINICKÉ VÝSLEDKY. RNDr. Kateřina Wagnerová, Mgr. Pavlína Motlová, Mgr. Michaela Žáková, MUDr.

GERI, GEMS A GAVI ZKUŠENOSTI A KLINICKÉ VÝSLEDKY RNDr. Kateřina Wagnerová, Mgr. Pavlína Motlová, Mgr. Michaela Žáková, MUDr. Pavel Texl ÚVOD Obor asistované reprodukce prodělal od svého vzniku velký rozvoj